CN206470201U

CN206470201U - 一种测定抗氧化能力的试剂盒

Info

Publication number: CN206470201U
Application number: CN201621084119.2U
Authority: CN
Inventors: 屈长青; 宁伟; 刘佩冉; 姬云涛
Original assignee: Fuyang Normal University
Current assignee: Fuyang Normal University
Priority date: 2016-09-27
Filing date: 2016-09-27
Publication date: 2017-09-05
Anticipated expiration: 2026-09-27

Abstract

本实用新型提供了一种测定抗氧化能力的试剂盒，包括碘液、淀粉溶液和凝固剂溶液。本实用新型提供的试剂盒，操作步骤简单便捷、快速，可在1h内得到测定结果。而且通过用肉眼可直接判断样品溶液抗氧化能力的强弱，并能定量分析样品溶液中的抗氧化能力，本实用新型提供的试剂盒的检测试剂安全无毒，成本低，效果明显。

Description

一种测定抗氧化能力的试剂盒

技术领域

本发明涉及抗氧化能力测定的技术领域，尤其涉及一种测定抗氧化能力的试剂盒。

背景技术

氧化自由基学说认为，活性氧(ROS)和活性氮(RNS)可以生成自由基，从而引起细胞脂质、细胞膜、蛋白和DNA出现氧化性损伤。随着时间的推移，氧自由基产生增多，而机体清除能力下降，同时SOD、GSH-PX、CAT酶等活性降低。而且过剩的自由基能与机体细胞中不饱和脂肪酸结合产生MDA等有害化合物。

机体内所有抗氧化基的抗氧化能力的总和称之为“总抗氧化能力”，总抗氧化能力常常用来评价机体抗氧化系统的总体能力，同时也被用来评价一些保健食品和天然植物的抗氧化性能，揭示出生物抵抗细胞内的氧化应激诱导损伤的能力的强弱。目前对抗氧化能力检测的基本上是通过购买试剂盒对机体样品加以检测的。但是现有技术公开的试剂盒，操作步骤繁琐、复杂。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于针对现有技术的不足，而提供一种测定抗氧化能力的试剂盒。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一种测定抗氧化能力的试剂盒，包括以下试剂：碘液、淀粉溶液和凝固剂溶液。

优选的，所述碘液盛放于棕色玻璃瓶中，所述棕色玻璃瓶的容量为 10～100ml。

优选的，所述淀粉溶液盛放于玻璃瓶或塑料瓶中，所述盛放淀粉溶液的玻璃瓶或塑料瓶的容量为1～10ml。

优选的，所述凝固剂溶液盛放于玻璃瓶或塑料瓶中，所述盛放凝固剂溶液的玻璃瓶或塑料瓶的容量为10～100ml。

优选的，所述试剂盒的形状为长方体，所述试剂盒的底部有3个凹槽。

优选的，所述试剂盒还包括毛细管、硅胶管和注射器。

优选的，所述毛细管的容量为5～10μl。

优选的，所述毛细管的长度为5～15cm。

优选的，所述试剂盒的形状为长方体，所述试剂盒有6个凹槽。

本发明提供的测定抗氧化能力的试剂盒，包括碘液、淀粉溶液和凝固剂溶液。在本发明中，碘液、淀粉溶液和凝固剂混合后，得到蓝色的混合溶液，原理是淀粉溶液中的淀粉遇到碘液中的碘单质后变成蓝色，待蓝色的混合溶液冷却后，得到凝固态的碘淀粉，而样品中的还原物质将与淀粉结合的碘单质还原为碘离子，使蓝色变为白色，根据颜色的变化快速分辨抗氧化能力的强弱。本发明提供的试剂盒，操作步骤简单便捷、快速，可在1h内得到测定结果。而且通过用肉眼可直接判断样品溶液抗氧化能力的强弱，并能定量分析样品溶液中的抗氧化能力，本发明提供的试剂盒的检测试剂安全无毒，成本低，效果明显。

附图说明

图1为本发明试剂盒的结构示意图；

图2为本发明试剂盒优选方案的结构示意图；

图3为本发明实施例提供的测定抗氧化能力仪器的连接示意图。

具体实施方式

本发明提供了一种测定抗氧化能力的试剂盒，包括碘液、淀粉溶液和凝固剂溶液。

本发明提供的试剂盒包括碘液。在本发明中，所述碘液优选由碘单质、碘化物和水配制而成。所述碘化物优选为碘化钾、碘化钠、碘化银、四碘化碳和三碘化氮中的一种或几种。本发明对所述碘化物的来源没有特殊的限定，采用本领域技术人员常规选用的药品即可。在本发明中，所述碘化物具体的可优选为上述药品中的任意几种，更优选为两种。当所述碘化物优选为碘化钾和碘化钠，所述碘化钾和碘化钠的质量比优选为(0.5～2):(0.5～2)，更优选为(0.8～1.5)：(0.8～1.5)，最优选为1：1。在本发明中，所述碘化物具体的最优选为上述药品中的碘化钾。

本发明的试剂盒的结构示意图具体参见图1：4、5和6为盛放碘液的棕色玻璃瓶、盛放淀粉溶液的玻璃瓶和盛放凝固剂溶液的玻璃瓶，对上述玻璃瓶的摆放顺序没有特殊限定。

在本发明中，所述碘液中碘单质的浓度优选为(6.9～8.5)×10^-7mol/ml，更优选为(7.4～8.2)×10^-7mol/ml，最优选为7.9×10^-7mol/ml。在本发明中，所述试剂盒中的碘液优选采用棕色的玻璃瓶盛放，所述棕色玻璃瓶的容量优选为10～100ml，更优选为30～70ml，最优选为50ml。

所述淀粉溶液优选采用玻璃瓶或塑料瓶盛放，所述玻璃瓶或塑料瓶的容量优选为1～10ml，更优选为3～7ml，最优选为5ml。

本发明提供的试剂盒包括淀粉溶液。在本发明中，所述淀粉溶液中淀粉的浓度优选为(3.0～4.5)g/ml，更优选为(3.5～4.0)g/ml，最优选为3.75g/ml。本发明对所述淀粉的来源没有特殊限定，采用本领域技术人员常规选用的市售商品即可。在本发明中，所述淀粉具体的可优选为可溶性淀粉。在本发明中，所述淀粉溶液优选采用玻璃瓶或塑料瓶盛放，所述淀粉溶液的容量优选为1～10ml，更优选为3～7ml，最优选为5ml。

本发明提供的试剂盒包括凝固剂溶液。在本发明中，所述凝固剂溶液中凝固剂的浓度优选为(1.0～1.4)g/ml，更优选为(1.1～1.3)g/ml，最优选为 1.2g/ml。在本发明中，所述凝固剂优选为琼脂、明胶和果胶中的一种或几种，更优选为两种。当所述凝固剂更优选为上述药品中的两种时，所述凝固剂的质量比优选为(0.5～2)：(0.5～2)，更优选为(0.8～1.5)：(0.8～1.5)，最优为1：1。在本发明中，所述凝固剂具体的最优选为琼脂。本发明对所述凝固剂的来源没有特殊限定，采用本领域技术人员熟知的市售商品即可。

在本发明中，上述各个试剂中的溶剂为水，本发明对所述水的种类没有特殊的限定，采用本领域技术人员熟知的配制溶液所需的水即可；在本发明中，所述水优选为蒸馏水，更优选为超纯水。

在本发明中，所述凝固剂溶液优选由所述凝固剂与水加热溶解得到。在本发明中，所述加热溶解的温度优选为90～110℃，更优选为95～105℃，最优选为100℃；所述加热溶解的时间优选为3～8min，更优选为4～6min，最优选为5min。本发明对所述加热溶解的仪器没有特殊限定，采用本领域技术人员常规加热溶解的仪器即可，如微波炉。

在本发明中，所述凝固剂溶液优选采用玻璃瓶或塑料瓶盛放，所述玻璃瓶或塑料瓶的容量为10～100ml，更优选为30～70ml，最优选为50ml。

本发明对所述的盛放试剂的玻璃瓶或塑料瓶的来源没有特殊限定，采用市售商品即可。

在本发明中，所述试剂盒的形状优选为长方体，上端开口，在试剂盒内层的底部优选有三个凹槽，用来固定盛放试剂的试剂瓶，对所述盛放试剂的试剂瓶的摆放顺序没有特殊限定。

在本发明中，所述碘液、淀粉溶液和凝固剂溶液的混合优选为：将碘液与淀粉溶液混合后，得到碘淀粉溶液，再与凝固剂溶液混合。在本发明中，所述凝固剂溶液与碘淀粉溶液混合更优选为将凝固剂与水混合后加热溶解，当凝固剂溶液冷却至45～60℃时，再与碘淀粉溶液混合。在本发明中，所述凝固剂溶液更优选冷却至47～55℃，最优选为50℃。本发明对所述凝固剂溶液加热的仪器没有特殊的限定，采用本领域技术人员常规选用的仪器即可，如微波炉。

在本发明中，用于混合的所述碘液、淀粉溶液和凝固剂溶液的体积比优选为(1～3)：(0.1～0.3)：(5～15)，更优选为(1.5～2.5)：(0.15：0.25)： (7～10)，最优选为2：0.2：8。在本发明中，混合后，淀粉遇到碘单质后变成蓝色，从而使得到的预处理碘淀粉混合液为蓝色。

得到预处理碘淀粉混合液后，本发明将所述预处理碘淀粉混合液冷却，得到凝固态碘淀粉。在本发明中，对所述预处理碘淀粉混合液的冷却方式没有特殊限定，采用本领域技术人员常规选用的冷却溶液的方式即可，如将溶液置于冰上。

得到凝固态碘淀粉以后，本发明将待测样品溶液浸入所述凝固态的碘淀粉内，根据颜色的变化得到氧化能力的测定结果。在本发明中，所述样品的种类包括食品、植物和血清。在本发明中，所述血清的待测样品的处理步骤优选包括将未抗凝处理全血置于离心管中，凝固后3000rpm离心10min，将上清液置于另一离心管中，再次3000rpm离心10min，将上清液置于另一离心管即得。

在本发明中，所述植物的待测样品的处理步骤优选包括用超纯水反复冲洗幼嫩叶片、茎段或果肉，称取1-5g叶片、茎段或果肉，在研钵内按料液比1:9的比例加入超纯水，研磨成匀浆，将研钵内的物质全部装入离心管， 10000r/min离心10min，吸取上清液，上清液即为植物的待测样品。

在本发明中，所述食品的待测样品的处理步骤优选包括称取1-5g的待测食品，先用液氮将研钵预冷，加入待测食品用液氮研磨成粉末，在研钵内按料液比1:9的比例加入超纯水，混匀制成匀浆，将研钵内的物质全部装入离心管，10000r/min离心10min，吸取上清液，上清液即为食品的待测样品。

本发明对所述待测样品溶液置于凝固态的碘淀粉上的仪器没有特殊限定，采用本领域技术人员常规选用的仪器即可，如注射器。在本发明中，所述颜色的变化得到抗氧化能力的测定结果具体为颜色由蓝色变为白色。在本发明中，所述颜色变为白色的原理是淀粉溶液中的淀粉遇到碘液中的碘单质后变成蓝色，样品中的还原物质将与淀粉结合的碘单质还原为碘离子，使蓝色变为白色，进而根据颜色的变化快速分辨抗氧化能力的强弱。

在本发明中，所述预处理碘淀粉混合液用毛细管吸满，快速冷却后，得到凝固态碘淀粉，再将毛细管的一端进行封口。在本发明在本发明中，对毛细管的种类和来源没有特殊限定，采用市售商品即可。在本发明中，所述毛细管的规格优选为容量为5～10μl，更优选为6～9μl，最优选为8μl；所述毛细管的长度优选为5～15cm；更优选为8～12cm，最优选为10cm。

在本发明中，所述毛细管的连接方式具体的可优选为硅胶管的一端连接注射器，硅胶管的另一端连接没有封口的毛细管。本发明对硅胶管和注射器的种类和来源没有特殊限定，采用市售商品即可。

在本发明中，所述待测样品的检测步骤包括取一端已封口的毛细管，注射器取待测样品并将待测样品置于毛细管未封口的一端，注射完毕后将毛细管竖直放置，然后未封口一端连接硅胶管的一端，硅胶管的另一端连接注射器，连接完毕后，注射器注射空气施加压力，1h内得到测定结果。

本发明的测定抗氧化能力仪器的连接示意图如图3所示：1为注射器，2 为硅胶管，3为毛细管。

在本发明中，所述试剂盒优选还包括上述毛细管、注射器和硅胶管，所述试剂盒优选还包括三个凹槽，用来放置上述毛细管、注射器和硅胶管，对所述毛细管、注射器和硅胶管的摆放顺序没有特殊的限定。

本发明试剂盒优选方案的结构示意图如图2所示：4、5和6为盛放碘液的棕色玻璃瓶、盛放淀粉溶液的玻璃瓶和盛放凝固剂溶液的玻璃瓶，对上述玻璃瓶的摆放顺序没有特殊限定；1为注射器，2为硅胶管，3为毛细管。

下面将结合本发明中的实施例，对本发明中的技术方案进行清楚、完整地描述。显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

实施例1

取未抗凝处理的小鼠全血2ml于离心管中，凝固后3000rpm离心10min，取上清液于另一离心管中，再3000rpm离心10min，取上清液置于干净的离心管中，即得到待测样品溶液。取2ml碘液与0.2ml可溶性淀粉溶液混合，得到碘淀粉溶液，碘液中碘单质的浓度为7.9×10^-7mol/ml，淀粉溶液中淀粉的浓度为3.75g/ml。取8ml琼脂溶液，100℃加热5min，待冷却至50℃时与碘淀粉溶液混合，得到预处理碘淀粉混合液，琼脂溶液中琼脂的浓度为1.2g/ml。取规格为8μl，长度为10cm的毛细管吸满预处理碘淀粉溶液，快速冷却毛细管中的溶液直至凝固，然后将毛细管的一端封口，取注射器将待测样品溶液置于毛细管上方无凝固物处，并竖直放置，然后注射器与毛细管通过硅胶管连接，通过注射器空气施加压力使其快速反应，1h测量结果。测量结果为变白部分长度为1.4cm，抗氧化能力相当于消耗3.36×10^- ¹⁰mol碘离子的量。

实施例2

取未抗凝处理的小鼠全血2ml于离心管中，凝固后3000rpm离心10min，取上清液于另一离心管中，再3000rpm离心10min，取上清液置于干净的离心管中，即得到待测样品溶液。取1ml碘液与0.1ml淀粉溶液混合，得到碘淀粉溶液，碘液中碘离子的浓度为6.9×10^- ⁷mol/ml，淀粉溶液中淀粉的浓度为 3.0g/ml。取5ml琼脂溶液，100℃加热5min，待冷却至60℃时与碘淀粉溶液混合，得到预处理碘淀粉混合液，琼脂溶液中琼脂的浓度为1.0g/ml。取规格为5μl，长度为5cm的毛细管吸满预处理碘淀粉溶液，快速冷却毛细管中的溶液直至凝固，然后将毛细管的一端封口，取注射器将待测样品溶液置于毛细管上方无凝固物处，并竖直放置，然后注射器与毛细管通过硅胶管连接，通过注射器空气施加压力使其快速反应，45min测量结果。测量结果为变白部分长度为2.0cm，抗氧化能力相当于消耗4.4×10^-10mol碘离子的量。

实施例3

取未抗凝处理的小鼠全血2ml于离心管中，凝固后3000rpm离心10min，取上清液于另一离心管中，再3000rpm离心10min，取上清液置于干净的离心管中，即得到待测样品溶液。取3ml碘液与0.3ml淀粉溶液混合，得到碘淀粉溶液，碘液中碘离子的浓度为8.5×10^- ⁷mol/ml，淀粉溶液中淀粉的浓度为 4.5g/ml。取15ml琼脂溶液，90℃加热6min，待冷却至45℃时与碘淀粉溶液混合，得到预处理碘淀粉混合液，琼脂溶液中琼脂的浓度为1.4g/ml。取规格为10μl，长度为15cm的毛细管吸满预处理碘淀粉溶液，快速冷却毛细管中的溶液直至凝固，然后将毛细管的一端封口，取注射器将待测样品溶液置于毛细管上方无凝固物处，并竖直放置，然后注射器与毛细管通过硅胶管连接，通过注射器空气施加压力使其快速反应，50min测量结果。测量结果为变白部分长度为2.6cm，抗氧化能力相当于消耗4.68×10^-10mol碘离子的量。

实施例4

取超纯水反复冲洗幼嫩叶片或茎段或果肉，称取1-5g叶片或果肉，在研钵内按料液比1:9的比例加入超纯水，研磨成匀浆，将研钵内的物质全部装入离心管，10000r/min离心10min，吸取上清液，即得待测样品溶液。取1ml 碘液与0.1ml淀粉溶液混合，得到碘淀粉溶液，碘液中碘离子的浓度为6.9× 10^-7mol/ml，淀粉溶液中淀粉的浓度为3.0g/ml。取5ml琼脂溶液，100℃加热 4min，待冷却至55℃时与碘淀粉溶液混合，得到预处理碘淀粉混合液，琼脂溶液中琼脂的浓度为1.0g/ml。取规格为5μl，长度为5cm的毛细管吸满预处理碘淀粉溶液，快速冷却毛细管中的溶液直至凝固，然后将毛细管的一端封口，取注射器将待测样品溶液置于毛细管上方无凝固物处，并竖直放置，然后注射器与毛细管通过硅胶管连接，通过注射器空气施加压力使其快速反应， 55min测量结果。测量结果为变白部分长度为2.0cm，抗氧化能力相当于消耗 4.4×10^-10mol碘离子的量。

实施例5

称取1-5g的待测食品，先用液氮将研钵预冷，加入待测食品用液氮研磨成粉末，在研钵内按料液比1:9的比例加入超纯水，混匀制成匀浆，将研钵内的物质全部装入离心管，10000r/min离心10min，吸取上清液，即得待测样品溶液。取2ml碘液与0.2ml可溶性淀粉溶液混合，得到碘淀粉溶液，碘液中碘单质的浓度为7.9×10^-7mol/ml，淀粉溶液中淀粉的浓度为3.75g/ml。取8ml 琼脂溶液，110℃加热6min，待冷却至50℃时与碘淀粉溶液混合，得到预处理碘淀粉混合液，琼脂溶液中琼脂的浓度为1.2g/ml。取规格为8μl，长度为 10cm的毛细管吸满预处理碘淀粉溶液，快速冷却毛细管中的溶液直至凝固，然后将毛细管的一端封口，取注射器将待测样品溶液置于毛细管上方无凝固物处，并竖直放置，然后注射器与毛细管通过硅胶管连接，通过注射器空气施加压力使其快速反应，1h测量结果。测量结果为变白部分长度为1.4cm，抗氧化能力相当于消耗3.36×10^-10mol碘离子的量。

由以上实施例可知，本发明提供的试剂盒，操作步骤简单便捷、快速，可在1h内得到测定结果。而且通过用肉眼可直接判断样品溶液抗氧化能力的强弱，并能定量分析样品溶液中的抗氧化能力，本发明提供的试剂盒的检测试剂安全无毒，成本低，效果明显。

以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims

1.一种测定抗氧化能力的试剂盒，其特征在于，包括碘液、淀粉溶液和凝固剂溶液；

所述碘液盛放于棕色玻璃瓶中，所述棕色玻璃瓶的容量为10～100ml；

所述淀粉溶液盛放于玻璃瓶或塑料瓶中，所述盛放淀粉溶液的玻璃瓶或塑料瓶的容量为1～10ml；

所述凝固剂溶液盛放于玻璃瓶或塑料瓶中，所述盛放凝固剂溶液的玻璃瓶或塑料瓶的容量为10～100ml；

所述试剂盒还包括毛细管、硅胶管和注射器；

所述试剂盒的形状为长方体，所述试剂盒有6个凹槽。

2.根据权利要求1任意一项所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒的底部有3个凹槽。

3.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述毛细管的容量为5～10μl。

4.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述毛细管的长度为5～15cm。