CN204495838U - 一种检测禽呼肠孤病毒的试纸条 - Google Patents

Abstract

本实用新型公开了一种检测禽呼肠孤病毒的试纸条，其包括：检测层，其包括依次连接的样品吸附层、结合层、纤维素膜层和吸水层，所述样品吸附层限定了用于接触待检测样品的第一端，所述吸水层限定了远离待检测样品的第二端，所述结合层包含有胶体金标记的抗禽呼肠孤病毒的第一抗体；检测线，其设置在所述纤维素膜层上，所述检测线包含包被的抗禽呼肠孤病毒的第二抗体，所述第一抗体和所述第二抗体与所述禽呼肠孤病毒结合的位点不同；对照线，其也设置在所述纤维素膜层上且比所述检测线远离所述第一端，所述对照线包含包被的羊/兔抗小鼠免疫球蛋白G。本实用新型特异性强、灵敏度高、操作简便、结果显示快速，检测成本低廉的。

Description

一种检测禽呼肠孤病毒的试纸条

技术领域

本实用新型涉及病毒检测技术领域。更具体地说，本实用新型涉及一种检测禽呼肠孤病毒的试纸条。

背景技术

禽呼肠孤病毒(Avian reovirus，ARV)可引起禽的多种疾病，常见的有病毒性关节炎/腿鞘炎、吸收障碍综合征(MAS)、免疫抑制等，同时ARV可以增加其它病原的易感性和致病性。ARV在世界范围内广泛存在，流行于鸡、火鸡、鸭和其它禽类。自王锡坤(1985)首次证实我国存在本病以来，研究人员已经从不同地方分离到多株ARV。目前，国内各鸡场中ARV的感染已经相当普遍，给养鸡业造成重要经济损失。由于本病以水平和垂直方式传播，病毒广泛分布及有较强的抵抗力，因此，ARV感染的防制具有一定的难度。

ARV广泛存在于世界各地，对养禽业的危害日趋严重。1954年，ARV首先从患病鸡的消化道和呼吸道中分离到，随后世界各地从多种禽类分离到ARV。1985年，王锡坤首次证明国内存在ARV，此后，多个研究者研究表明ARV广泛存在于国内鸡场。关于ARV的研究，大部分都和键鞘炎有关，本病因运动障碍、生长停滞、淘汰率高、屠宰率下降、饲料转化率低以及产蛋下降等造成的严重经济损失，极大影响了我国养鸡业的健康发展。近年来，随着ARV感染的增加、流行趋势和临床疾病表现形式的多样化，ARV的防制难度不断增大。由于本病主要是早期感染，而且多数情况感染症状不明显，因此对本病的早期确诊就显得尤为重要。

及时、准确、快速检测ARV，是有效控制ARV感染的前提。目前ARV感染的诊断主要有常规实验室检测和分子生物学两大类方法。常规方法主要有病毒分离鉴定和ARV抗体的血清学检测，包括琼脂免疫扩散试验(AGP)、间接免疫荧光抗体试验(IFA)、ELISA等方法。分子生物学方法主要有PCR、荧光定量PCR和核酸探针技术等。但ARV的病毒分离培养、AGP、IFA、ELISA、PCR和核酸探针等检测技术操作复杂，需要昂贵的仪器设备、过程较长、耗时费力，需要特定仪器设备和专业技术人员操作，很难在基层普及，不能满足生产一线或疫病现场的快速诊断需要。因此，研究一种快速检测禽呼肠孤病毒感染的检测技术非常重要而迫切。

实用新型内容

本实用新型的一个目的是实现对禽呼肠孤病毒快速检测，提供一种结果显示直观、准确、快速检测禽呼肠孤病毒的试纸条，与其他检测方法相比，该试纸条特异性强、灵敏度高、操作简便、结果显示快速，检测成本低廉。

本实用新型提供了一种检测禽呼肠孤病毒的试纸条，包括：

检测层，其包括依次连接的样品吸附层、结合层、纤维素膜层和吸水层，所述样品吸附层限定了用于接触待检测样品的第一端，所述吸水层限定了远离待检测样品的第二端，所述结合层包含有胶体金标记的抗禽呼肠孤病毒的第一抗体；

检测线，其设置在所述纤维素膜层上，所述检测线包含包被的抗禽呼肠孤病毒的第二抗体，所述第一抗体和所述第二抗体与所述禽呼肠孤病毒结合的位点不同，并且所述禽呼肠孤病毒与第一抗体结合，不影响所述禽呼肠孤病毒与第二抗体结合；

对照线，其也设置在所述纤维素膜层上且比所述检测线远离所述第一端，所述对照线包含包被的羊/兔抗小鼠免疫球蛋白G。

优选的是，所述的检测禽呼肠孤病毒的试纸条中，所述第一抗体为抗禽呼肠孤病毒的单克隆抗体或多克隆抗体，所述第二抗体为抗禽呼肠孤病毒的多克隆抗体或单克隆抗体。

优选的是，所述的检测禽呼肠孤病毒的试纸条中，还包括：

支撑层，所述检测层固定在所述支撑层的上表面。

优选的是，所述的检测禽呼肠孤病毒的试纸条中，还包括：

第一保护膜，其设置在所述检测层的上方，且一端向下弯折包覆住所述第一端，而另一端延伸到所述纤维素膜层一端的上方；

第二保护膜，其设置在所述检测层的上方，且一端向下弯折包覆住所述第二端，而另一端延伸到所述纤维素膜层另一端的上方；

其中，所述第一保护膜为白色，所述第二保护膜的颜色与所述第一保护膜的颜色不相同；例如，所述第一保护膜为白色，所述第二保护膜为黄色；

所述第一保护膜设置有样品标记线，所述样品标记线与远离所述第一端的所述样品吸附层的一侧的距离为0.3～0.7cm处。

优选的是，所述的检测禽呼肠孤病毒的试纸条中，所述支撑层由不吸水的硬质塑胶片或硬纸条制成；所述吸水层用吸水纸制成。

优选的是，所述的检测禽呼肠孤病毒的试纸条中，所述纤维素膜层为硝酸纤维素膜、纤维素膜、羧化纤维素膜和聚偏二氟乙烯膜中的任意一种制成。

优选的是，所述的检测禽呼肠孤病毒的试纸条中，所述样品吸附层由玻璃棉、尼龙纤维和聚酯纤维中的任意一种制成。

优选的是，所述的检测禽呼肠孤病毒的试纸条中，所述结合层由玻璃棉、尼龙纤维和聚酯纤维中的任意一种制成。

优选的是，所述的检测禽呼肠孤病毒的试纸条中，所述检测线和所述对照线的排列形式为“||”、“++”、“┻ ┻”、“┳ ┳”、和“┣ ┣”中的任意一种。

本实用新型的有益效果在于：

(1)本实用新型根据ELISA的基本原理，用免疫层析试纸检测病毒，利用微孔滤膜的渗滤浓缩和毛细管作用，将抗原-抗体反应由ELISA的传统液相环境转到固相滤膜上快速进行，并采用胶体金印迹代替酶印迹，凭肉眼直接观察胶体金的显色状况，即时获得检测结果，因此该方法比ELISA等血清学方法更为简便、快速。

(2)检测特异性强，敏感性高。该试纸条以胶体金印迹高亲和力的特异性单抗/多抗为基础制备而成，金标抗体中金颗粒与抗体分子之间无共价键形成，二者通过异性电荷间的范德华力相结合，胶体金标对单抗/多抗的特异性和亲和力(结合力)影响很小，且具有较高的印迹率。因此，该试纸条具有较高的特异性和敏感性，可检测到2纳克的相应病毒的蛋白。

(3)操作简便，快速。使用本实用新型试纸条时无需附加任何其它仪器和试剂，只要将其测试端插入待检样品液中30秒左右，然后在过5分钟左右即可判定检测结果。

(4)结果显示直观、准确。该试纸条以显示棕红色的检测印迹和对照线作为检测的阳性和阴性印迹，即在纤维素膜上显示两条棕红色印迹，表示在被检测样品中有病毒检出，结果为阳性；在纤维素膜上只显示一条棕红色对照印迹C，表示在被检测样品液中未检出病毒，结果为阴性。结果判定直观、准确，简单明了，不易出现假阴性和假阳性误判。

(5)减少投资和检测成本。使用该试纸条，不需另配其它仪器、设备和试剂，节省大量仪器、设备和附加试剂费用；专业和非专业人士均可随时随地进行现场检测，无需支付专家诊断检查费或送样品去诊断室的路费，节省检测成本，检测费用低。

(6)应用范围广，便于普遍推广应用。本实用新型操作简单，成“一步式”或“傻瓜式”，而且方便携带和保存，能满足不同层次人员的需要，包括专业化验、海关检疫、卫生防疫、质量监测、畜产品加工、集约化养殖到个体养殖等，具有广阔的市场前景和较好的经济、社会效益。

附图说明

图1为本实用新型其中一个实施例所述的检测禽呼肠孤病毒试纸条的结构示意图；

图2为本实用新型其中一个实施例所述的检测禽呼肠孤病毒试纸条的结构示意图。

具体实施方式

下面结合附图对本实用新型做进一步的详细说明，以令本领域技术人员参照说明书文字能够据以实施。

如图1所示，本实用新型所述的检测禽呼肠孤病毒的试纸条，包括：

检测层，其包括依次连接的样品吸附层2、结合层3、纤维素膜层4和吸水层5；所述样品吸附层2、所述结合层3、所述纤维素膜层4和所述吸水层5彼此拼接的交界处纤维互相交叉渗透，所述样品吸附层2限定了用于接触待检测样品的第一端，所述吸水层5限定了远离待检测样品的第二端，所述结合层3包含有胶体金标记的抗禽呼肠孤病毒的第一抗体；

支撑层1，所述检测层固定在所述支撑层的上表面。

检测线6，其设置在所述纤维素膜层4上，所述检测线6包含包被的抗禽呼肠孤病毒的第二抗体，所述第一抗体和所述第二抗体与所述禽呼肠孤病毒结合的位点不同，并且所述禽呼肠孤病毒与所述第一抗体结合不干扰其与所述第二抗体结合；所述第一抗体为抗禽呼肠孤病毒的单克隆抗体或多克隆抗体，所述第二抗体为抗禽呼肠孤病毒的多克隆抗体或单克隆抗体。

对照线7，其也设置在所述纤维素膜层4上且比所述检测线6远离所述第一端，所述对照线包含包被的羊/兔抗小鼠免疫球蛋白G。

所述的检测禽呼肠孤病毒的试纸条中，还包括：

第一保护膜8-1，其设置在所述检测层的上方，且一端向下弯折包覆住所述第一端，而另一端延伸到所述纤维素膜层4一端的上方；

第二保护膜8-2，其设置在所述检测层的上方，且一端向下弯折包覆住所述第二端，而另一端延伸到所述纤维素膜层4另一端的上方；

其中，所述第一保护膜8-1为白色，所述第二保护膜8-2的颜色与所述第一保护膜的颜色不相同；例如，所述第一保护膜8-1为白色，所述第二保护膜8-2为黄色；

所述第一保护膜8-1设置有样品标记线9，所述样品标记线9与远离所述第一端的所述样品吸附层的一侧的距离为0.3～0.7cm处。

所述的检测禽呼肠孤病毒的试纸条中，所述支撑层1由不吸水的硬质塑胶片或硬纸条制成；所述吸水层5用吸水纸制成。

所述的检测禽呼肠孤病毒的试纸条中，所述纤维素膜层4为硝酸纤维素膜、纤维素膜、羧化纤维素膜和聚偏二氟乙烯膜中的任意一种制成。

所述的检测禽呼肠孤病毒的试纸条中，所述样品吸附层2由玻璃棉、尼龙纤维和聚酯纤维中的任意一种制成。

所述的检测禽呼肠孤病毒的试纸条中，其特征在于，所述结合层3由玻璃棉、尼龙纤维和聚酯纤维中的任意一种制成。

所述的检测禽呼肠孤病毒的试纸条中，所述检测线6和所述对照线7的排列形式为“||”、“++”、“┻ ┻”、“┳ ┳”、和“┣ ┣”中的任意一种。

当试纸条测试端(样品吸附纤维层)插入待检测样品溶液后，待检溶液通过层析作用带动待检病鸡病毒及金标抗体纤维膜中的金标抗体一起向纤维素膜层4扩散，并最终渗入手柄端的吸水层5中，扩散过程中待检病毒可与该病毒相对应的金标单抗相结合，进而与纤维素膜层4上检测线6中的抗该病毒的多抗IgG结合，从而显示出棕红色的检测线6；而对照线7中的羊抗或兔抗小鼠IgG则可与金标单抗结合，形成棕红色对照线7。如果待检样品液中没有ARV，试纸条只显示出一条棕红色对照线7；如果纤维素膜层4上没有任何棕红色印迹显示，则表明试纸条已失效或操作失误。

其中，制备抗禽呼肠孤病毒单克隆抗体、羊(兔)抗小鼠免疫球蛋白G、抗禽呼肠孤病毒金标单克隆抗体和金标单克隆抗体纤维膜和抗禽呼肠孤病毒多克隆抗体的过程如下：

(1)抗禽呼肠孤病毒单克隆抗体的制备方法如下：

差速离心、蔗糖密度梯度离心对ARV CEF细胞毒进行浓缩、纯化，甲醛灭活后用福氏佐剂乳化制备免疫原。

以50-100μg/只剂量的免疫原免疫Balb/c系小鼠三次，每次间隔15-30天；第三次加强免疫后3-4天，将免疫小鼠眼球放血，拉颈致死，于75％酒精浸泡5-10min，无菌取其脾细胞；剪碎并经100目尼龙网过滤，用GNK洗液混悬脾细胞，1000r/min离心10min，收集脾细胞；将1×108个的脾细胞与2×107-5×107个的NS0骨髓瘤细胞混合，再用GNK洗液混悬后，1000r/min离心10min弃上清，细胞沉淀于37℃的水浴中在1min内缓缓加入0.7-1.0mL的PEG-1500(pH8.5-pH 9.0)边加边摇，然后缓慢加入GNK洗液15ml，以终止PEG的作用；37℃水浴5min，1000r/min离心10min弃上清，将细胞沉淀重悬于1640/HAT选择培养基中，并加入96孔培养板(200μL/孔)，置于37℃、5％CO2培养箱中培养7-10天后，以5-10μg/mL的纯化ARVσC蛋白包被96孔酶标板，以酶联免疫吸附试验(ELISA)检测杂交瘤的培养上清，挑取强阳性细胞克隆(OD450≥0.5)，连续三次的有限稀释法进行亚克隆，最后筛选得到特异性抗ARV的单克隆细胞。

该杂交瘤细胞染色体数为92-98，其分泌的抗ARV的单克隆抗体特异地与ARV反应，亲和力常数达109-10，轻链亚型为κ或λ，重链亚型为IgG1、IgG2a、IgG2b、IgG3，用于制备金标单克隆抗体。

(2)所述羊(兔)抗IgG和羊(兔)抗兔(羊)IgG的制备如下：

以饱和硫酸铵法提取小鼠血清中的IgG：取1份血清加2份PBS液(pH7.2)混匀，加等体积饱和硫酸铵液混匀，置4℃冰箱内2小时，在4℃、10000r/min离心15min，弃上清液；以适量PBS液(pH7.2)溶解沉淀，加饱和硫酸铵液至其最终浓度为33％，置4℃冰箱内2小时，在4℃、10000r/min条件下离心15min，弃上清液，以少量PBS液(pH7.2)溶解沉淀，置4℃冰箱内用PBS液(pH7.2)过夜透析，换液2-3次，在4℃、10000r/min条件下离心15min，收集上清液，以紫外分光光度计测定其蛋白浓度。以50μg～100μg(IgG)/kg体重经皮下或肌肉注射抗体阴性健康羊或家兔3-4次，末次免疫20天后，静脉采血，以ELISA测定其血清抗体效价在1∶2000以上，心脏采血或颈动脉放血，收集其高免血清，以饱和硫酸铵法提取羊(兔)抗小鼠/鸡的IgG(其提取方法与上述提取小鼠血清IgG相同，不再重述)，同理制备羊(兔)抗兔(羊)IgG，用于标记本发明试纸条的对照印迹。

(3)抗禽呼肠孤病毒金标单克隆抗体和金标单克隆抗体纤维膜的制备

将筛选到的特异性抗ARV的单克隆细胞扩大培养，PBS洗后1000r/min离心10min，收集细胞，以1×106-2×106个/只对经产母鼠进行腹腔注射，10-20天后采集小鼠腹水，4000r/min离心10min后的上清即为所需的单克隆抗体腹水。

以柠檬酸钠还原法制备金溶胶：在50-100mL沸腾的0.01-0.05％氯金酸水溶液中加入2-4mL的0.5-2％柠檬酸三钠溶液，反应后获得直径15nm左右的胶体金。以0.1mol/L的K2CO3调胶体金pH值至8.5-9.5，以1∶1000-1300的印迹比将待印迹的抗ARV单克隆抗体腹水加入pH8.5-9.5的金溶胶中，印迹10min后，加20wt％的PEG-10000至PEG-10000终浓度达到0.05％，4℃下、1500-3000r/min离心20min，除去未结合的胶体金颗粒，4℃下、15000r/min离心1小时，弃上清液，获得初步纯化的金标抗体蛋白混合物后，用丙烯葡聚糖S-400柱层析，分离纯化金标蛋白，获得胶体金印迹的抗ARV单克隆抗体。

将1∶100-1∶500稀释的胶体金印迹的上述单克隆抗体吸附于精制玻璃棉(尼龙纤维或聚酯纤维)中，4℃下低温真空干燥，即制得抗ARV金标单克隆抗体纤维膜。

(4)抗禽呼肠孤病毒多克隆抗体的制备

同上使用灭活的ARV，单独多次免疫接种抗体阴性健康羊或兔。末次免疫20天后静脉采血，以ELISA测定其血清抗体效价在1∶1024以上，心脏采血或颈动脉放血，收集其高免血清，以饱和硫酸铵法提取血清中的IgG抗体。

实施例一

a检测样品液的制备，病鸡的组织如关节囊内液体及组织、脊髓等，则将其剪碎、研磨，以生理盐水制成1∶2-1∶5倍的待检测样品悬液，置4℃室温澄清或离心；

b检测操作，将该试纸条测试端插入待检测样品中，插入深度不超过标记线30秒后取出试纸条，水平放置约1-5分钟，同时观察结果。

c结果判断，如果在试纸条的纤维素膜上只显示出一条棕红色对照线C，表示测检结果呈阴性，说明在被检样品液中未检测出ARV；如果试纸条上的纤维素膜出现棕红色的对照线7和检测线6，表示检测结果呈阳性，即在待检样品中检出ARV；如果纤维素膜上没有任何棕红色印迹显示，则表明试纸条已失效或操作有误。

实施例二、所述检测禽脑脊髓病毒的试纸条中，如图1和图2所示，为所述支撑层1为塑胶薄片，所述样品吸附纤维层2为玻璃棉，所述结合层3为附着有胶体金标记的抗ARV单克隆抗体的玻璃棉，所述纤维素膜层4为硝酸纤维素膜，所述吸水层5为由吸水滤纸；所述样品吸附纤维层2、所述结合层3、所述纤维素膜层4为硝酸纤维素膜和所述吸水层5，彼此拼接的交界处纤维互相交叉渗透。在纤维素膜层4上，以抗ARV多克隆抗体IgG溶液标记检测线6(代号T)，以羊(兔)抗小鼠IgG溶液标记对照线7(代号C)；检测线6与对照线7的排列形式为“||”；第一保护膜8-1为白色膜层，其覆盖在样品吸附纤维层2和金标抗体纤维层3上面的测试端；所述标记线9，设置在第一保护膜上所述样品吸附层2对应的位置，且其距离所述样品吸附层2和所述结合3交界处0.5cm，所述标记线9的右端印有箭头及MAX字样，吸水层5(手柄端)上覆盖有其它颜色(如黄色)第二保护膜8-2。

实施例三、所述快速检测禽呼肠孤病毒的试纸条中，其结构、制备方法与实施例1基本相同，不同之处在于：所述结合层3为附着以胶体金标记的抗ARV金标多克隆抗体的尼龙纤维层；所述纤维素膜层4为硝酸纤维层；所述检测线6包含包被的抗禽呼肠孤病毒的单克隆抗体IgG溶液，所述对照线7包含包被羊(兔)抗兔(羊)IgG溶液喷涂，其它包括检测样品制备、操作方法和结果判定等均与实施例1相同。

实施例三、所述检测禽呼肠孤病毒试纸条中，其结构、制备方法与实施例1基本相同，不同之处在于：所述结合层3为包含有胶体金标记的抗禽呼肠孤病毒单克隆抗体的聚酯纤维制成层；所述纤维素膜层4为聚偏二氟乙烯层，所述检测线6包含包被抗禽呼肠孤病毒ARV多克隆抗体IgG溶液，所述对照线7包含包被羊(兔)抗小鼠IgG溶液。其它包括检测样品制备、操作方法和结果判定等均与实施例1相同。

实施例四、所述快速检测禽呼肠孤病毒试纸条中，其结构、制备方法与实施例3基本相同，不同之处在于：所述结合成3为包含有胶体金标记抗ARV多克隆抗体的尼龙纤维层；所述纤维素膜层4为聚偏二氟乙烯层；所述检测线6包含包被抗禽呼肠孤病毒的单克隆抗体IgG溶液；所述对照线7为包含包被羊(兔)抗兔(羊)IgG溶液。

实施例5：所述快速检测禽呼肠孤病毒试纸条中，其结构、制备方法与实施例3基本相同，不同之处在于：所述结合层3为包含有胶体金标记抗ARV单克隆抗体的尼龙纤维层；所述纤维素膜层4为聚偏二氟乙烯层；所述检测线6包含包被有以识别另一表位的抗ARV单克隆抗体IgG溶液；所述对照线7包含包被羊(兔)抗鼠IgG溶液；所述检测线6与所述对照线7的排列组合为“//”、“++”、“┻ ┻”、“┳ ┳”、“┣ ┣”中的任意一种。

尽管本实用新型的实施方案已公开如上，但其并不仅仅限于说明书和实施方式中所列运用，它完全可以被适用于各种适合本实用新型的领域，对于熟悉本领域的人员而言，可容易地实现另外的修改，因此在不背离权利要求及等同范围所限定的一般概念下，本实用新型并不限于特定的细节和这里示出与描述的图例。

Claims (9)

1.一种检测禽呼肠孤病毒的试纸条，其特征在于，包括：

检测层，其包括依次连接的样品吸附层、结合层、纤维素膜层和吸水层，所述样品吸附层限定了用于接触待检测样品的第一端，所述吸水层限定了远离待检测样品的第二端，所述结合层包含有胶体金标记的抗禽呼肠孤病毒的第一抗体；

检测线，其设置在所述纤维素膜层上，所述检测线包含包被的抗禽呼肠孤病毒的第二抗体，所述第一抗体和所述第二抗体与所述禽呼肠孤病毒结合的位点不同；

对照线，其也设置在所述纤维素膜层上且比所述检测线远离所述第一端，所述对照线包含包被的羊/兔抗小鼠免疫球蛋白G。

2.如权利要求1所述的检测禽呼肠孤病毒的试纸条，其特征在于，所述第一抗体为抗禽呼肠孤病毒的单克隆抗体或多克隆抗体，所述第二抗体为抗禽呼肠孤病毒的多克隆抗体或单克隆抗体。

3.如权利要求1至2任一项所述的检测禽呼肠孤病毒的试纸条，其特征在于，还包括：

支撑层，所述检测层固定在所述支撑层的上表面。

4.如权利要求3所述的检测禽呼肠孤病毒的试纸条，其特征在于，还包括：

第一保护膜，其设置在所述检测层的上方，且一端向下弯折包覆住所述第一端，而另一端延伸到所述纤维素膜层一端的上方；

第二保护膜，其设置在所述检测层的上方，且一端向下弯折包覆住所述第二端，而另一端延伸到所述纤维素膜层另一端的上方；

其中，所述第一保护膜为白色，所述第二保护膜的颜色与所述第一保护膜的颜色不相同；

所述第一保护膜设置有样品标记线，所述样品标记线与远离所述第一端的所述样品吸附层的一侧的距离为0.3～0.7cm处。

5.如权利要求4所述的检测禽呼肠孤病毒的试纸条，其特征在于，所述支撑层由不吸水的硬质塑胶片或硬纸条制成；所述吸水层用吸水纸制成。

6.如权利要求1所述的检测禽呼肠孤病毒的试纸条，其特征在于，所述纤维素膜层为硝酸纤维素膜、纤维素膜、羧化纤维素膜和聚偏二氟乙烯膜中的任意一种制成。

7.如权利要求1所述的检测禽呼肠孤病毒的试纸条，其特征在于，所述样品吸附层由玻璃棉、尼龙纤维和聚酯纤维中的任意一种制成。

8.如权利要求1所述的检测禽呼肠孤病毒的试纸条，其特征在于，所述结合层由玻璃棉、尼龙纤维和聚酯纤维中的任意一种制成。

9.如权利要求1所述的检测禽呼肠孤病毒的试纸条，其特征在于，所述检测线和所述对照线的排列形式为“||”、“++”、和中的任意一种。