CN203929780U - 一种克伦特罗的磁微粒化学发光免疫检测试剂盒 - Google Patents

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金伟
李娟娟
陈建军
计梦琴
吴曼丽
杨海
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Guangna Dakang (Guangzhou) Biotechnology Co.,Ltd.
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Abstract

本实用新型涉及一种检测克伦特罗残留量的磁微粒化学发光检测试剂盒。该试剂盒组成包括：克伦特罗标准品、磁分离试剂、酶标记克伦特罗使用液、浓缩样品稀释液。浓缩清洗液和发光底物溶液随试剂盒另外配置。本试剂盒采用直接竞争法，在磁性微球上偶联有克伦特罗抗原，样本中残留的克伦特罗和磁性微球上固定的克伦特罗竞争结合碱性磷酸酶标记的克伦特罗抗体，加入发光底物，测量各管发光值，样本中发光值与标准曲线比较计算对应的浓度值再乘以样本前处理的稀释倍数即可得到样本中克伦特罗的残留量。本试剂盒可与全自动化学发光免疫检测仪配套使用从而实现动物组织中克伦特罗残留检测的自动化。

Description

一种克伦特罗的磁微粒化学发光免疫检测试剂盒
技术领域
本实用新型属于免疫检测分析技术领域，涉及检测动物组织、尿液、饲料等样本中克伦特罗含量的磁微粒化学发光免疫检测试剂盒。
背景技术
克伦特罗(Clenbuterol,CLE)是一种β2-肾上腺素激动剂，其化学性质稳定，易被机体吸收，能持久引起交感神经兴奋，并使脂肪激酶活化，减缓或减少脂肪沉积，增加肌肉组织沉积，使营养重新分配，从而改善肉畜胴体品质，提高瘦肉率，但该药物在体内排泄速率慢，易蓄积在动物内脏、脂肪等组织中，人食用含有该药物残留的动物产品后易引起中毒，对肝、肾等内脏器官产生毒害，同时出现心悸、头痛、目眩、恶心、呕吐、心率加快、肌肉振颤等症状，严重者甚至死亡，研究表明如果长期食用，还可导致染色体畸变，诱发恶性肿瘤。因此，发明一种灵敏度高，操作简便，费用较低且实用的分析方法和国产试剂，对于国内食品安全快速检测的推广和普及都是很有意义的。
化学发光免疫检测技术兴起于上世纪80年代，是继酶联免疫技术和放免技术之后发展起来的新兴技术，相对于后两者化学发光免疫技术具有高灵敏度、高特异性、操作简便、快速、标记结合物稳定，同时无放射性同位素损伤和污染等特点，因此近年来在免疫检测分析中被广泛推广使用。
实用新型内容
本实用新型需要解决的技术问题在于提供一种简便的克伦特罗定量测定试剂盒，采用该试剂盒进行克伦特罗检测具有较高的灵敏度和特异性，操作简便、检测时间更短。
本实用新型的技术方案为：一种检测克伦特罗残留量的磁微粒化学发光免疫试剂盒，采用直接竞争法，在磁性微球上偶联有克伦特罗抗原，样本中残留的克伦特罗和磁性微球上固定的克伦特罗竞争结合碱性磷酸酶标记的的克伦特罗抗体，加入发光底物，测量各管发光值，样本中发光值与标准曲线比较计算对应的浓度值再乘以样本前处理的稀释倍数即可得到样本中克伦特罗的残留量。
本实用新型涉及的磁微粒化学发光免疫试剂盒包括盒体和盒内的10瓶试剂、放置试剂的下凹瓶位。10瓶试剂分别为7瓶克伦特罗标准品溶液、1瓶酶标克伦特罗抗体溶液、1瓶磁分离试剂、1瓶浓缩样品稀释液。盒体是硬纸盒，标准品溶液、浓缩样品稀释液、酶标克伦特罗抗体溶液均使用塑料瓶盛放，磁分离试剂用棕色玻璃瓶盛放，下凹瓶位共10个，由塑料泡沫制成。浓缩清洗液、发光底物由塑料瓶盛放，随试剂盒另外配置。
克伦特罗标准品溶液7瓶，1mL/瓶；酶标克伦特罗抗体溶液1瓶，6mL；磁分离试剂1瓶，4mL；浓缩样品稀释液1瓶，10mL；随试剂盒另外配置的发光底物1瓶，100mL；浓缩清洗液1瓶，100mL。
本实用新型通过将磁性微球替代酶标板作为固相，反应更快速，清洗更彻底，有效避免干扰，与全自动/半自动化学发光免疫分析仪均可配套使用从而实现克伦特罗残留的全自动/半自动检测。
附图说明
图1为本实用新型盒体和泡沫模具的俯视图。
图2为本实用新型泡沫模具的俯视图。
图3为本实用新型试剂瓶纵剖面图。
参见附图：白色半透明塑料试剂瓶(12)用于封装1mL克伦特罗标准品；棕色玻璃瓶(13)分别用于封装4mL磁分离试剂和6mL酶标记抗体；白色半透明塑料瓶(11)用于封装10mL浓缩样品稀释液；棕色不透明塑料瓶(14)用于封装100mL发光底物；白色透明塑料瓶用于封装100mL浓缩清洗液。泡沫模具(16)有10个瓶位，放置位置依次为1mL克伦特罗标准品瓶位(1-7)，4mL磁分离试剂瓶位(8)，6mL酶标记抗体瓶位(9)，10mL浓缩样品稀释液瓶位(10)。盒体(17)为硬纸盒。
具体实施方式
具体实施例一：本实用新型提供的检测克伦特罗的样品前处理步骤如下：
尿样： 取待测尿样离心，5000rpm，10分钟，取50μl上清液体待测。
最终检测结果乘以稀释倍数1。
组织样品：取1.0g粉碎的样品与4.0ml乙腈和1.0ml乙酸乙酯混合均匀；
强力振荡3分钟；5000rpm离心10分钟；取1ml上清液，60℃氮气吹干；加入1ml样品稀释液，混匀，再加入1ml正己烷，混匀；5000rpm离心10分钟；取50μl下层液体待测。最终检测结果乘以稀释倍数5。
饲料样本：取1.0g粉碎的样品与5.0mL乙腈混合均匀；强力振荡3分钟；
5000rpm离心10分钟；取1.0mL上清液，60℃氮气吹干；加入1ml样品稀释液，混匀，再加入1ml正己烷，混匀；5000rpm离心10分钟；取50ul下层液体待测。
最终检测结果乘以稀释倍数5。
具体实施例二。
实验前准备：
实验前需将所有试剂放置至室温；准备好一次性平底试管和磁分离器及温育时用于覆盖磁分离器的塑料膜；调节水浴箱温度为37℃；准备化学发光测定仪，并仔细阅读仪器使用说明书。
实验前将试剂盒中各试剂置混匀仪上充分混匀；磁微粒试剂混匀后应为均匀悬浊液，无明显凝集。
具体实施例三：本实用新型的操作步骤如下：
在每一平底试管中加入50μL克伦特罗标准品、30μL磁微粒试剂、50μL克伦特罗抗体，充分混匀，37℃温育15分钟；
将平底试管在磁分离器上静置2分钟，然后倾倒上清液，将试管及磁分离器一同倒置在吸水纸上拍干；每管中加入300μL清洗液，混匀后，将平底试管在磁分离器上静置2分钟，然后倾倒上清液，将试管和磁分离器一同倒置在吸水纸上拍干；重复2次；
每个试管中加入100μL发光底物；
在化学发光仪上测定每管的发光值。
具体实施例四：结果分析
所获得的每个标准溶液和样品的测量发光值（复孔为平均值）除以第一个标准(0标准)的发光光度值再乘以100%，即为百分发光值。
以克伦特罗标准品浓度的对数为横坐标，百分发光度为纵坐标绘制标准曲线，相对应每一个样品的浓度(ng/g或ng/ml)可以从标准曲线上读出，再乘以相应的稀释倍数即为样品中实际的克伦特罗的含量。

Claims (3)

1.一种克伦特罗的磁微粒化学发光免疫检测试剂盒，包括盒体和盒内的10瓶试剂及随试剂盒另外配置的2瓶试剂，其特征在于：10瓶试剂分别为7瓶克伦特罗标准品、1瓶磁分离试剂、1瓶酶标记克伦特罗抗体使用液、1瓶浓缩样品稀释液；随试剂盒另外配置的2瓶试剂分别为浓缩清洗液、发光底物溶液。
2.如权利要求1所述的克伦特罗磁微粒化学发光免疫检测试剂盒，其特征在于，该试剂盒包括：盒体是硬纸盒，盒内还包括放置试剂瓶的下凹瓶位；克伦特罗标准品、浓缩样品稀释液由塑料瓶封装，磁分离试剂、酶标克伦特罗抗体由玻璃瓶封装，随试剂盒另外配置的浓缩清洗液、发光底物溶液由塑料瓶封装，下凹瓶位共10个，由塑料泡沫制成。
3.如权利要求1所述的克伦特罗磁微粒化学发光免疫检测试剂盒，其特征在于，克伦特罗标准品7瓶，1mL/瓶、磁分离试剂1瓶，4mL/瓶、酶标克伦特罗抗体使用液1瓶，6mL/瓶、浓缩样品稀释液1瓶，10mL/瓶、随试剂盒另外配置的浓缩清洗液1瓶，100mL/瓶、发光底物溶液1瓶，100mL/瓶。
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Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107356745A (zh) * 2017-08-23 2017-11-17 太原瑞盛生物科技有限公司 一种克伦特罗的磁微粒化学发光检测试剂盒及制备方法
CN108845125A (zh) * 2018-06-24 2018-11-20 沭阳康源泰博生物科技有限公司 一种基于免疫磁珠的盐酸克伦特罗样本前处理试剂盒
CN110672844A (zh) * 2019-10-29 2020-01-10 华中科技大学 一种新城疫病毒抗体磁免疫化学发光检测试剂盒及其应用

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