CN1977914A - 治疗咳喘病的参蛤平喘制剂及其制法和质控方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种用于治疗咳喘病的参蛤平喘制剂及其制法和质控方法，属于中药的技术领域。它主要是由异叶青兰，西洋参，蛤蚧，陈皮或相应重量份它们的提取物制作而成的微丸、片剂、分散片、滴丸、颗粒剂等口服制剂；同时提供了本制剂的含量测定和鉴别方法，主要用于治疗肺肾不足，气喘，咳嗽，痰多；动辄喘乏，腰膝酸软等病症，工艺合理，质量可控，可直接指导生产；服用方便，外观美洁，易于患者接受。

Description

治疗咳喘病的参蛤平喘制剂及其制法和质控方法

技术领域

本发明涉及一种治疗咳喘病的参蛤平喘制剂及其制备方法和质控方法，属于中药的技术领域。

技术背景

肺肾不足，气喘，咳嗽，痰多；动辄喘乏，腰膝酸软等症是当今世界上威胁人民群众身心健康的常见疾病，给广大患者带来了极大的痛苦。为了达到防治目的，许多发明人及药品企业做了大量的研究，也提供了一些治疗的产品；如：参蛤平喘胶囊就是为治疗此类疾病而开发。但是，这种产品的剂型落后，产品质量不够理想，例如胶囊剂久贮益粘结；现有产品的剂型品种不够丰富，适用人群范围窄，产品生物利用度低、药物稳定性不理想；鉴于这些情况，寻找一种治疗效果理想，质量稳定可控的有效治疗药物制剂就成了人们急需解决的事情。

发明内容

本发明的目的在于：提供一种治疗咳喘病的参蛤平喘制剂及其制备方法和质控方法；本发明针对现有技术存在的问题，提供了一种疗效好、适应面广、制备方法科学合理的中药制剂；本申请人对现有制剂进行了深入的研究；本发明提供的的微丸、分散片制剂，生物利用度高，特别适合于老年人及吞服药片或胶囊有困难的患者服用；本发明提供的滴丸制剂，解决了药物遇湿热不稳定的问题，还可以掩盖不良口味、气味的，可以起到增加稳定性、改善生物利用度的作用。

本发明是这样构成的：按照重量组分计算，它主要是由异叶青兰333.3g，西洋参666.6g，蛤蚧416.6g，陈皮999.9g或相应重量份它们的提取物制作而成的口服制剂，包括：片剂、分散片、泡腾片、胶囊剂、软胶囊剂、微囊剂、颗粒剂、丸剂、微丸、散剂、滴丸剂、缓释制剂、控释制剂、凝胶剂、栓剂、口服液体制剂、煎膏剂、浸膏剂和膜剂药剂学上所有可以接受的剂型。准确的说：所述的制剂是微丸、片剂、颗粒剂、分散片、滴丸。所述制剂的制备方法：取陈皮、异叶青兰，加水浸泡1小时后，加水煎煮三次，第一次加8倍量水煎煮2小时，第二、三次都加6倍量水各煎煮1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度60℃为1.10～1.20的清膏，喷雾干燥；取去头、足的蛤蚧、西洋参，粉碎成细粉，与上述细粉混匀，再制成制剂。

所述制剂中的微丸剂这样制备：取陈皮、异叶青兰，加水浸泡1小时后，加水煎煮三次，第一次加8倍量水煎煮2小时，第二、三次都加6倍量水各煎煮1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度60℃为1.10～1.20的清膏，喷雾干燥；取去头、足的蛤蚧、西洋参，粉碎成细粉，与上述细粉混匀，挤压-滚圆法制丸或者泛制法制丸，干燥，即得微丸剂。挤压-滚圆法是这样的：采用85％的乙醇、3％大豆油、适量淀粉与药粉混匀后制软材，制好的软材用微丸机制丸，湿料挤压过0.8mm筛孔，条状湿粒切断滚圆，在50～60℃干燥成型，过16～20目筛选丸，即得。所述的泛制法是这样的：取药粉，过100目筛，80％乙醇泛为微丸，包衣，即得。

鉴别方法包括以下全部或部分内容：

a.制剂中西洋参药材、人参皂苷F₁₁、人参皂苷Rb₁、人参皂苷Re、人参皂苷Rg₁中一种或几种的薄层色谱法鉴别

取本品或本品粉末，加乙醚或石油醚提取，弃去提取液，药渣加甲醇或乙醇提取，提取液蒸干，残渣加水使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取，正丁醇液先后用氨试液、正丁醇饱和的水洗涤，弃去洗液，正丁醇液蒸干，残渣加溶剂使溶解，作为供试品溶液；另取西洋参对照药材，同法制成对照药材溶液；再取人参皂苷F₁₁、人参皂苷Rb₁、人参皂苷Re、人参皂苷Rg₁对照品中的一种或几种，制成对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取对照品溶液、对照药材溶液中的一种或几种及供试品溶液适量，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水＝60～70∶30～40∶8～12在10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以硫酸乙醇溶液，加热数分钟，分别置日光及紫外光灯365nm下检视；供试品色谱中，在与对照色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点及荧光斑点；

b.制剂中陈皮药材、橙皮苷一种或两种的薄层色谱法鉴别

取本品或本品粉末，加水提取，水溶液用乙酸乙酯或三氯甲烷振摇提取，乙酸乙酯或三氯甲烷液蒸干，残渣加溶剂使溶解，作为供试品溶液；再取陈皮对照药材，加甲醇提取，制成对照药材溶液，或取陈皮药材，参照供试品溶液制法制成对照药材溶液；取橙皮苷对照品，制成对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取对照品溶液、对照药材溶液中的一种或两种及供试品溶液适量，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-甲醇-水＝90～110∶15～19∶11～15为展开剂，展开，取出，晾干，再以三氯甲烷-甲醇-丁酮-冰醋酸＝11～15∶3～5∶3～5∶0.5～1.5为展开剂，展开，取出，晾干；喷以含三氯化铝的溶液，置紫外灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

准确的说，鉴别方法包括以下全部或部分内容：

a.制剂中西洋参药材、人参皂苷F₁₁人参皂苷Rb₁、人参皂苷Re、人参皂苷Rg₁中一种或几种的薄层色谱法鉴别

取本品粉末，加乙醚提取，弃去乙醚液，药渣加甲醇提取，提取液蒸干，残渣加水使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取，正丁醇液先后用氨试液、正丁醇饱和的水洗涤，弃去洗液，正丁醇液蒸干，残渣加溶剂使溶解，作为供试品溶液；另取西洋参对照药材，同法制成对照药材溶液；再取人参皂苷F₁₁人参皂苷Rb₁、人参皂苷Re、人参皂苷Rg₁对照品中一种或几种，制成对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取对照品溶液、对照药材溶液中的一种或几种及供试品溶液适量，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水＝65∶35∶10在10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以硫酸乙醇溶液，加热数分钟，分别置日光及紫外光灯365nm下检视；供试品色谱中，在与对照色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点及荧光斑点；

b.制剂中陈皮药材、橙皮苷一种或两种的薄层色谱法鉴别

取本品粉末，加水提取，提取液用乙酸乙酯振摇提取，乙酸乙酯液蒸干，残渣加溶剂使溶解，作为供试品溶液；再取陈皮对照药材，加甲醇提取，制成对照药材溶液；取橙皮苷对照品，制成对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取对照品溶液、对照药材溶液中的一种或两种及供试品溶液适量，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-甲醇-水＝100∶17∶13为展开剂，展开，取出，晾干，再以三氯甲烷-甲醇-丁酮-冰醋酸＝13∶4∶4∶1为展开剂，展开，取出，晾干；喷以三氯化铝试液，置紫外灯365nm下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

含量测定方法包括以下全部或部分内容：

取本品，研细，取约粉末适量，精密称定，加甲醇或乙醇提取，提取液定容，滤过，取续滤液，作为供试品溶液；取橙皮苷对照品适量，精密称定，加甲醇或乙醇制成对照品溶液；采用高效液相色谱法试验，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-0.05～0.5％磷酸溶液＝30～50∶70～50为流动相；检测波长为280～286nm；理论板数按橙皮苷峰计算应不低于1000；分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液适量，注入液相色谱仪，测定，即得；本品每日用剂量含橙皮苷不得少于6mg。

准确的说，含量测定方法包括以下全部或部分内容：

取本品，研细，取约粉末适量，精密称定，加甲醇提取，提取液定容，滤过，取续滤液，作为供试品溶液；取橙皮苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成对照品溶液；采用高效液相色谱法试验，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-0.1％磷酸溶液＝40∶60为流动相；检测波长为283nm；理论板数按橙皮苷峰计算应不低于2000；分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；本品每日用剂量含橙皮苷不得少于12mg。

与现有技术相比，本发明制备的微丸、分散片制剂、崩解性好，生物利用度高，特别适合于老年人及吞服药片或胶囊有困难的患者服用，分散片遇水可迅速崩解形成均匀的粘性悬液的水分散片，解决了有效成分生物利用度不高的问题；本发明提供的滴丸制剂，解决了药物遇湿热不稳定的问题，还可以掩盖不良口味、气味，可以起到增加稳定性、改善生物利用度的作用。

申请人进行了一系列实验，对提取工艺进行了实验研究，优选了提取溶剂的用量，从而保证有效成分提取充分的前提下，又节约成本；在微丸制备工艺中对微丸剂的辅料和具体工艺参数进行了优化，本申请人在研究过程中发现起模和泛制时锅体的转速对成模的丸粒数量和丸粒大小以及成丸数量都有一定的影响。转速过快，容易使成模的丸粒较小，丸重偏小；转速过慢，容易使膏粉粘连结块，我们经过多次试验，通过控制转速，使制得丸圆整，丸重适中，粒径均匀。烘干时，如果温度过低，影响水分挥发速度，延长干燥时间；温度过高，容易导致药膏软化，丸型改变，影响外观，通过对烘干温度的筛选，我们在确保微丸有效成分不流失、水分含量达标、保持微丸圆整的情况下，最大程度缩短了干燥时间，提高了干燥效率。并且经过药效学实验检验，本发明制剂具有有益的治疗效果，本发明制剂的质量控制方法合理可控，使本发明工业大生产切实可行。

实验例1：提取等工艺研究

1.1加水量考察

影响采用煎煮法提取中药中有效成分提取的主要因素有提取次数、提取时间、加水量。现有技术对加水量没有研究，我们采用单因素试验方法，以橙皮苷的含量为考察指标进行优选，试验方法及结果如下：

称取陈皮300g、异叶青蓝100g，共5份，分别加水煎煮三次，第一次2小时，第二、三次各1小时，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩，干燥，称定膏重，并测定浸膏中橙皮苷的含量，试验结果见下表。

加水量的考察

试验号	加醇量(倍)			浸膏收得率(％)	橙皮苷含量(％)
						第一次	第二次	第三次
	12345	66888	66668						46466	1.912.462.983.743.76	11.3913.4715.6116.6516.66

由上表可知，加水量为8、6、6倍与加水量为8、8、6倍的浸膏收得率与橙皮苷含量差别不大，从节约能源和成本来考虑，加水量的最佳工艺为加水提取三次，加水量为8、6、6倍。

1.2提取工艺验证

为了验证所确定的制备工艺条件的稳定性和可行性，我们对此工艺条件进行了三次验证实验。

试验方法：称取陈皮600g、异叶青蓝200g，共3份，加水浸泡1小时后，煎煮三次，第一次加8倍量水煎煮2小时，第二、三次都加6倍量水各煎煮1小时，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩，干燥，称定膏重，并测定浸膏中橙皮苷的含量，试验结果见下表。

提取工艺验证实验

试验号	药材量(g)	膏重(g)	浸膏收得率(％)	橙皮苷含量(％)
					123	800800800	30.2429.7630.00	3.783.723.75	16.7016.6516.66

1.3粉碎工艺的考察

药料流动性与原、辅料的粉碎度有关。而流动性对微丸的成型性有一定的影响。但粉碎过细，既增加了粉碎难度及损耗，又造成粉尘污染，根据预试验结果，粉碎过100目即可，因此试验对本工艺原料的粉碎出粉率进行了测定。

试验方法：称取西洋参200g，蛤蚧125g(去头、足后重85g)粉碎成细粉，过100目筛，测定出粉量、出粉率。重复进行三次试验，计算平均出粉率。结果见下表。

出粉率的考察

试验号	药材量(g)	出粉量(g)	出粉率(％)	平均出粉率(％)
					123	285285285	281.01280.75280.64	98.6098.5198.47	98.53

由上表试验结果可见：三份样品的出粉率均在95％以上，表明粉碎方法稳定、可行。

实验例2：微丸剂成型工艺研究

2.1.挤出-滚圆法

2.1.1制软材取浸膏细粉及淀粉、大豆油及乙醇适量制成软材，使之达到手握成团，捏之能散，备用。研究重点乙醇浓度和大豆油用量对制丸影响，实验结果见表。

乙醇浓度考察

试验号	乙醇浓度	制软材情况
			123	75％乙醇80％乙醇85％乙醇	软材粘度不够软材粘度不够软材适中

大豆油用量考察

试验号	大豆油用量	制丸情况
			123	85％乙醇、1％大豆油85％乙醇、3％大豆油85％乙醇、5％大豆油	软材粘度不够，无法制丸软材适中，适宜制丸软材易粘结，制丸困难

由表考查结果可见，采用85％的乙醇、3％大豆油为黏合剂，是制粒的理想条件。

2.1.2制丸

制好的软材用微丸机制丸，湿料挤压过0.8mm筛孔，条状湿粒切断滚圆，在50～60℃干燥成型，过16～20目筛选丸。

2.2泛制法

2.2.1物料性质的研究

吸湿率的测定：取干粉约2g，分别置干燥恒重的称量瓶中，厚度不超过5mm，然后分别置于不同相对湿度的密闭干燥器中。在隔水式电热恒温箱25℃放置96小时后，精确称重，根据公式：

计算吸湿率，并观察外观性状的变化。实验结果见下表。

吸湿性测定结果

溶液种类	相对湿度(％)	吸湿率(％)			平均吸湿率(％)
						1	2	3
		NaCl饱和溶液NaBr饱和溶液44％H2SO454％H2SO4	75.2857.7048.5229.50	6.829.656.444.10					16.729.676.404.11	16.869.606.454.15	16.809.646.434.12

由表可知，混合物料吸湿性较小。

2.2.2粘合剂的优选：

由于物料中有药膏粉，有一定粘性，采用水作为粘合剂来制备微丸，微丸极易粘连，因此我们考虑选用乙醇溶液作为粘合剂，为此我们用不同浓度的乙醇溶液作为粘合剂来制备微丸，以微丸的圆整性为考察指标。实验结果见下表。

粘合剂的优选

粘合剂的种类	微丸外观
		60％乙醇80％乙醇95％已醇	丸形不圆，部分粘连丸形圆整，不粘连丸形不圆，不粘连

由上表结果可见，采用80％的乙醇为粘合剂比其他两个醇度为粘合剂制备的微丸外观要好些，因此我们考虑采用80％乙醇为粘合剂。

2.2.3制丸：

用80％乙醇作粘合剂所得微丸丸形圆整，外观比较好，因此考虑不再加入辅料。称取陈皮600g，异叶青兰200，加水浸泡1小时后，煎煮三次，第一次加8倍量水煎煮2小时，第二、三次都加6倍量水各煎煮1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.10～1.20(60℃)的清膏，喷雾干燥。称取西洋参400g、蛤蚧250g(去头、足)粉碎成细粉，与上述细粉混匀，过100目筛，80％乙醇泛为微丸，干燥后，即得。所得微丸圆整均匀，说明经过筛选的处方是可行的

2.2.4包衣：

为了提高药物的稳定性，减少药物的刺激性，改善外观，对微丸进行了包衣。称取陈皮600g，异叶青兰200，加水浸泡1小时后，煎煮三次，第一次加8倍量水煎煮2小时，第二、三次都加6倍量水各煎煮1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.10～1.20(60℃)的清膏，喷雾干燥。取西洋参400g、蛤蚧250g(去头、足)粉碎成细粉，与上述细粉混匀，过100目筛，80％乙醇泛为微丸，包衣，干燥后，即得。所得微丸颜色为黑色，圆整均匀，色泽一致，由此结果可知，包衣是可行的。

实验例3对实验性咳嗽的镇咳作用

对小鼠氨水引咳法的镇咳作用：取小鼠60只，雌雄各半，随机分为4组，即对照组(H₂O)、阳性药对照组(可待因)、治疗1组(胶囊组)、治疗2组(本发明微丸组)、治疗3组(本发明分散片组)、治疗4组(本发明滴丸组)。每组15只。灌胃给药，给药后1h，将1只小鼠置于容积为1L的玻璃钟罩内，其内放一棉球，用1ml注射器每次吸25％～28％氨水0.2ml注入棉球上，各组动物随机交替进行实验，观察并记录小鼠咳嗽的潜伏期及3min内的咳嗽次数。

对小鼠氨水引咳的镇咳作用

药物	剂量(mg/kg)	n	潜伏期(s)	3min内咳嗽次数
					空白对照组阳性对照组治疗1组治疗2组治疗3组治疗4组	-1010101010	151515151515	22.5±10.732.7±12.530.4±11.531.8±10.931.4±9.231.6±8.6	120.3±15.689.1±13.290.2±16.189.8±11.289.5±14.389.7±10.8

结果表明：本发明制剂对小鼠氨水引咳法的具有明显的镇咳作用，优于市售胶囊。

实验例4微丸剂中西洋参药材、人参皂苷F₁₁人参皂苷Rb₁、人参皂苷Re、人参皂苷Rg₁的薄层色谱鉴别方法研究：

为了突出西洋参的特征，选择了以人参皂苷F₁₁、人参皂苷Rb₁、人参皂苷Re、人参皂苷Rg₁作为特征成分斑点，但是由于制剂其它药材中存在较多与人参皂苷F₁₁、人参皂苷Rb₁、人参皂苷Re、人参皂苷Rg₁结构相近或极性相似的成分，例如陈皮中的橙皮苷、蛤蚧中的氨基酸与多肽类。只有排除这些成分的干扰，才能获得理想的色谱效果。薄层色谱法效果优劣的关键因素为展开条件，因此，试验以硅胶G薄层板为固定相，筛选了多种展开剂，部分展开条件与结果如下：

微丸剂西洋参药材、人参皂苷F₁₁、人参皂苷Rb₁、人参皂苷Re、

人参皂苷Rg₁的薄层色谱鉴别方法研究

展开剂                                        结果

正己烷-三氯甲烷＝9∶2                         Rf值过低

三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水＝15∶40∶22∶4      分离不清晰

乙酸乙酯-甲醇-水＝10∶7∶1                    分离不清晰

正丁醇-乙酸乙酯-水＝12∶7∶1                  阴性有干扰

三氯甲烷-甲醇-水＝90∶31∶10在10℃以下放置的

下层溶液                                      分离不清晰

三氯甲烷-甲醇-水＝70∶30∶8在10℃以下放置的

下层溶液                                      分离较清晰，阴性无干扰

三氯甲烷-甲醇-水＝60∶40∶12在10℃以下放置的

下层溶液                                      分离较清晰，阴性无干扰

三氯甲烷-甲醇-水＝65∶35∶10在10℃以下放置的  分离最清晰，Rf值适中，

下层溶液                                      阴性无干扰

经过筛选，确定了最佳薄层条件：以硅胶G薄层板为固定相，以三氯甲烷-甲醇-水＝65∶35∶10在10℃以下放置的下层溶液为展开剂，在此条件下，人参皂苷F₁₁、人参皂苷Rb₁、人参皂苷Re、人参皂苷Rg₁特征斑点的Rf值适中，分离最清晰，阴性无干扰。

实验例5微丸剂中陈皮药材、橙皮苷的薄层色谱鉴别方法研究：

为了突出陈皮的特征，选择了以橙皮苷作为特征成分斑点，但是由于制剂其它药材中存在较多与橙皮苷结构相近或极性相似的成分，例如人参中的人参皂苷Rb₁、人参皂苷Re，蛤蚧中的氨基酸与多肽等成分。只有排除这些成分的干扰，才能获得理想的色谱效果。

供试品溶液的制法对薄层效果有较大影响，试验比较了不同供试品溶液的制备方法。结果以甲醇提取样品制备的供试品溶液杂质成分干扰较多；而用水提取样品，提取液再用乙酸乙酯振摇提取制备的供试品溶液杂质成分干扰较少，因此采用后者作为供试品溶液的制备方法。

薄层色谱法效果优劣的关键因素为展开条件，因此，试验以硅胶G薄层板为固定相，筛选了多种展开剂，部分展开条件与结果如下：

微丸剂中陈皮药材、橙皮苷的薄层色谱鉴别方法研究

展开剂                                            结果

苯-乙酸乙酯＝7∶1                                 Rf值过低

甲醇-丙酮＝1∶1                                   分离不清晰

乙酸乙酯-甲醇-水＝10∶9∶1                        分离不清晰

正丁醇-乙酸乙酯-水＝12∶7∶1                      阴性有干扰

三氯甲烷-甲醇-丁酮-冰醋酸＝13∶4∶4∶1            阴性有干扰

乙酸乙酯-甲醇-水＝100∶17∶13                     分离不清晰

以乙酸乙酯-甲醇-水＝60∶13∶15为初次展开剂；三

氯甲烷-甲醇-丁酮-冰醋酸＝11∶5∶3∶1.5为二次展    阴性有干扰

开剂

以乙酸乙酯-甲醇-水＝85∶13∶15为初次展开剂；三

氯甲烷-甲醇-丁酮-冰醋酸＝16∶5∶3∶1为二次展开    分离不清晰

剂

以乙酸乙酯-甲醇-水＝110∶15∶15为初次展开剂；三

氯甲烷-甲醇-丁酮-冰醋酸＝11∶5∶3∶1.5为二次展    分离较清晰，阴性无干扰

开剂

以乙酸乙酯-甲醇-水＝90∶19∶11为初次展开剂；三

氯甲烷-甲醇-丁酮-冰醋酸＝15∶3∶5∶0.5为二次展    分离较清晰，阴性无干扰

开剂

以乙酸乙酯-甲醇-水＝100∶17∶13为初次展开剂；三   分离最清晰，Rf值适中，

氯甲烷-甲醇-丁酮-冰醋酸＝13∶4∶4∶1为二次展开    阴性无干扰

剂

经过筛选，确定了最佳薄层条件：以硅胶G薄层板为固定相，以乙酸乙酯-甲醇-水＝100∶17∶13为初次展开剂，以三氯甲烷-甲醇-丁酮-冰醋酸＝13∶4∶4∶1为二次展开剂，在此条件下，橙皮苷特征斑点的Rf值适中，分离最清晰，阴性无干扰。

实验例6微丸中橙皮苷的高效液相色谱法含量测定

1仪器与试药

1.1主要仪器

高效液相色谱仪    1100Series  Agilent

紫外分光光度计    TU-1800SPC  北京普析通用仪器有限公司

电子分析天平      BP211D      SARTORIUS

超声波清洗机    KQ250B    昆山市超声仪器有限公司

1.2试药

甲醇    分析纯   北京化工厂

乙腈    色谱纯   CALEDON

纯净水  娃哈哈

2检测波长的选择取橙皮苷对照品适量，加甲醇溶解，在200～300nm波长范围内扫描。结果表明，橙皮苷在283nm处有最大吸收，因此选择283nm作为测定参蛤平喘丸(微丸)中橙皮苷含量的检测波长。

3色谱条件

色谱柱：Diamonsil ODS 250mm×4.6mm 5μm

流动相：甲醇-0.1％磷酸(40∶60)

流速：1.0ml/min

柱温：30℃

进样量：10μl

检测波长：283nm

试验选择了橙皮苷作为其指标成分，但是由于制剂中存在较多与橙皮苷结构相近或极性相似的成分，例如人参中的人参皂苷Rb₁、人参皂苷Re，蛤蚧中的氨基酸与多肽等成分。只有排除这些成分的干扰，才能获得理想的色谱效果。高效液相色谱法效果优劣的关键因素为洗脱条件，特别是流动相的组成。因此，试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，筛选了多种流动相，部分流动相与结果如下：

色谱条件的考察

流动相条件                           结果

乙腈-水＝90∶10                      分离不完全

乙腈-0.02mol/L磷酸二氢钠＝10∶90     出峰时间过长

甲醇-0.1％磷酸溶液＝60∶40           分离不完全

甲醇-水＝30∶70                      峰形不对称

甲醇-0.1％磷酸溶液＝50∶50           出峰时间过长

甲醇-0.5％磷酸溶液＝50∶50           分离较清晰，阴性无干扰

甲醇-0.05％磷酸溶液＝30∶70          保留时间稍长，分离清晰，阴性无干扰

甲醇-0.1％磷酸溶液＝40∶60           保留时间适中，分离最清晰，阴性无干扰

经过筛选，确定了以十八烷基硅烷键合硅胶为固定相，以甲醇-0.1％磷酸溶液＝40∶60为流动相，在此条件下，橙皮苷保留时间适中，峰行尖锐，对称，与相邻峰分离最清晰，阴性无干扰。

4测定法

对照品溶液的制备取橙皮苷对照品适量，精密称定，加甲醇定容，制成0.06576mg/ml的溶液，即得。

供试品溶液的制备  取装量差异项下本品，研细，取约0.5g，精密称定，置索氏提取器中，加甲醇40ml，加热回流至提取液无色，提取液转移至50ml量瓶中，用甲醇适量数次洗涤容器，洗液并入量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜(0.45μm)滤过，取续滤液，即得。

分别精密吸取上述两种溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

5线性关系的考察精密量取橙皮苷对照品溶液(0.2438mg/ml)1.0ml、2.0ml、3ml、4.0ml、5ml，分置10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，配制成0.02438mg/ml、0.04876mg/ml、0.07314mg/ml、0.09572mg/ml、0.1219mg/ml的对照品溶液，分别从中精密吸取10μl，注入液相色谱仪，照高效液相色谱法测定。以峰面积为横坐标，橙皮苷进样浓度(mg/ml)为纵坐标做图，绘制标准曲线。结果如下：

橙皮苷线性关系

编号	峰面积	橙皮苷浓度(mg/ml)
			12345	2195384352196381248513571040517	0.024380.048760.073140.097520.1219

回归方程：Y＝1.184E-07X-0.002279

相关系数：γ＝0.9996

结果表明，橙皮苷在0.2438μg～1.219μg之间线性关系良好。

经过计算，橙皮苷标准曲线为一过原点的直线，因此选择外标一点法测定参蛤平喘丸(微丸)中橙皮苷的含量。

6精密度试验精密吸取同一份橙皮苷对照品溶液10μl，注入液相色谱仪，重复测定5次，考察对照品溶液精密度，测定结果如下：

精密度试验

试验次数	1	2	3	4	5	平均值	RSD(％)
								峰面积	601172	590138	592004	591011	590201	592905	0.79

结果表明，对照品溶液精密度良好。

7稳定性试验

7.1对照品稳定性试验精密吸取同一份橙皮苷对照品溶液10μl，注入液相色谱仪，分别在0、2、6、8、24小时进样测定，测定结果如下：

对照品稳定性试验结果

时间(h)	0	2	6	8	24	平均值	RSD(％)
								峰面积	591736	596714	596981	600415	596017	596373	0.52

结果表明，对照品溶液在24小时内稳定性良好。

7.2供试品溶液稳定性试验精密吸取同一份供试品溶液10μl，注入液相色谱仪，分别在0、2、4、8、24小时进样测定，测定结果如下：

供试品溶液稳定性试验结果

测试时间(h)	0	2	4	8	24	平均值	RSD(％)
								含量(mg/袋)	4.3952	4.4016	4.3951	4.3842	4.3962	4.3945	0.14

结果表明，供试品溶液在24小时内稳定性良好。

8重复性试验取同一批号的本品，研细，取约0.5g(共5份)，精密称定，按色谱条件和测定法项下操作。结果如下：

重复性试验

编号	1	2	3	4	5	平均值	RSD(％)
								含量(mg/袋)	4.3871	4.4062	4.4082	4.3870	4.3951	4.3967	0.23

结果表明，重复性良好。

9加样回收率试验取同一批号怕本品，研细，取约0.25g(共6份)，精密称定，分置索氏提取器中；精密量取橙皮苷对照品溶液(0.06576mg/ml)2.5ml、3.0ml、3.5ml(各2份)，分置上述索氏提取器中，精密加入甲醇使每瓶中累计加入甲醇量为40ml，加热回流至提取液无色，提取液转移至50ml量瓶中，用甲醇适量数次洗涤容器，洗液并入量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜(0.45μm)滤过，取续滤液，即得。测定结果如下：

橙皮苷加样回收率试验

编号	称量(g)	供试品中橙皮苷量(mg)	橙皮苷加入量(mg)	测得值(mg)	回收率(％)
						123456	0.25960.26480.26170.25840.25070.2611	0.18890.19270.19040.18800.18240.1900	0.16440.16440.19730.19730.23020.2302	0.35780.35940.38790.38450.40750.4192	102.74101.41100.0999.5897.7899.57

平均回收率＝100.2％，RSD＝1.68％。

10样品含量测定按色谱条件和测定法项下操作，测定十批样品，结果如下：

参蛤平喘丸(微丸)中橙皮苷的含量

批号         橙皮苷平均含量(mg/袋)

1            4.3967

2            4.4037

3            4.3074

4            5.2138

5            5.4928

6            5.2465

7            4.9251

8            5.2732

9            5.2419

10            4.9571

具体的实施方式

本发明的实施例1：异叶青兰333.3g，西洋参666.6g，蛤蚧416.6g，陈皮999.9g

取陈皮、异叶青兰，加水浸泡1小时后，加水煎煮三次，第一次加8倍量水煎煮2小时，第二、三次都加6倍量水各煎煮1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度60℃为1.10～1.20的清膏，喷雾干燥；取去头、足的蛤蚧、西洋参，粉碎成细粉，与上述细粉混匀，加入350g淀粉，用85％乙醇和3％大豆油制软材，挤压-滚圆制丸：制好的软材用微丸机制丸，湿料挤压过0.8mm筛孔，条状湿粒切断滚圆，在50～60℃干燥成型，过16～20目筛选丸，干燥，即得微丸剂，口服，口服，一次0.6g～1.2g，一日3次。

本发明的实施例2：异叶青兰333.3g，西洋参666.6g，蛤蚧416.6g，陈皮999.9g

取陈皮、异叶青兰，加水浸泡1小时后，加水煎煮三次，第一次2小时，第二、三次各1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度60℃时为1.10～1.20的清膏，减压干燥；取西洋参、去头、足的蛤蚧粉碎成细粉，与上述细粉混匀，加入100g淀粉，用50％乙醇和1％大豆油制软材，挤压-滚圆制丸：制好的软材用微丸机制丸，湿料挤压过0.8mm筛孔，条状湿粒切断滚圆，在50～60℃干燥成型，过16～20目筛选丸，干燥，即得微丸剂。

本发明的实施例3：异叶青兰333.3g，西洋参666.6g，蛤蚧416.6g，陈皮999.9g

取陈皮、异叶青兰，加水浸泡1小时后，加水煎煮三次，第一次加8倍量水煎煮2小时，第二、三次都加6倍量水各煎煮1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度60℃为1.10～1.20的清膏，喷雾干燥；取去头、足的蛤蚧、西洋参，粉碎成细粉，与上述细粉混匀，过100目筛，80％乙醇泛为微丸，包衣，即得微丸剂。

本发明的实施例4：异叶青兰333.3g，西洋参666.6g，蛤蚧416.6g，陈皮999.9g

取陈皮、异叶青兰，加水浸泡1小时后，加水煎煮三次，第一次2小时，第二、三次各1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度60℃时为1.10～1.20的清膏，减压干燥；取西洋参、去头、足的蛤蚧粉碎成细粉，与上述细粉混匀，加入3％CMS-Na，以浓度为8％淀粉浆为粘合剂，制软材，过20目筛制粒，60℃烘干，20目整粒，加入3％CMS-Na、3％滑石粉、3％微粉硅胶，混合均匀，压片，即得分散片剂。

本发明的实施例5：异叶青兰333.3g，西洋参666.6g，蛤蚧416.6g，陈皮999.9g

取陈皮、异叶青兰，加水浸泡1小时后，加水煎煮三次，第一次2小时，第二、三次各1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度60℃时为1.10～1.20的清膏，喷雾干燥；取西洋参、去头、足的蛤蚧粉碎成细粉，与上述细粉混匀，以PEG6000为基质，加入药粉，药物质量∶基质体积＝1∶2，搅拌均匀，密闭，保温，用内径4.5mm、外径5.5mm滴管，以每分钟30～35滴的速度滴入甲基硅油∶液体石蜡＝1∶1的混合冷却液中，冷却柱高100cm，转速15r·min^-1，即得滴丸剂。

本发明的实施例6：异叶青兰333.3g，西洋参666.6g，蛤蚧416.6g，陈皮999.9g

取陈皮、异叶青兰，加水浸泡1小时后，加水煎煮三次，第一次2小时，第二、三次各1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度60℃时为1.10～1.20的清膏，减压干燥；取西洋参、去头、足的蛤蚧粉碎成细粉，与上述细粉混匀，加入适量淀粉，过筛制粒后加入包衣锅中滚制成小球，再喷润湿剂润湿母丸，然后加浸膏粉滚动包敷，反复操作，包衣锅转速为30r/min，制备时间10～12h，出锅，选丸，即得微丸。

本发明的实施例7：异叶青兰333.3g，西洋参666.6g，蛤蚧416.6g，陈皮999.9g

取陈皮、异叶青兰，加水浸泡1小时后，加水煎煮三次，第一次2小时，第二、三次各1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度60℃时为1.10～1.20的清膏，干燥；取西洋参、去头、足的蛤蚧粉碎成细粉，与上述细粉混匀，加入乙醇，制软材，过20目筛制粒，60℃烘干，20目整粒，加入3％滑石粉，混合均匀，压片，即得片剂。

本发明的实施例8：异叶青兰333.3g，西洋参666.6g，蛤蚧416.6g，陈皮999.9g

取陈皮、异叶青兰，加水浸泡1小时后，加水煎煮三次，第一次2小时，第二、三次各1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度60℃时为1.10～1.20的清膏，干燥；取西洋参、去头、足的蛤蚧粉碎成细粉，与上述细粉混匀，加入80％乙醇，制软材，过20目筛制粒，即得颗粒剂。

实施例9微丸剂中西洋参药材、人参皂苷Rb₁、人参皂苷Re、人参皂苷Rg₁的薄层色谱法鉴别

取本品粉末约3g，加乙醚30ml，加热回流15分钟，放冷，滤过，弃去乙醚液，药渣挥去乙醚，加甲醇30ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水25ml使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次20ml合并正丁醇液，用氨试液洗涤2次，每次30ml，弃去氨洗液，再用正丁醇饱和的水30ml洗涤，取正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇3ml使溶解，作为供试品溶液。另按处方比例取缺西洋参的阴性样品，同法制成阴性样品溶液。另取西洋参对照药材1g，同法制成对照药材溶液。再取人参皂苷Rb₁、人参皂苷Re、人参皂苷Rg₁对照品，加甲醇制成每1ml各含2mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述四种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水(65∶35∶10)10℃以下放置过夜的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热数分钟，分别置日光及紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品及对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点及荧光斑点，阴性无干扰。

实施例10微囊剂中西洋参药材、人参皂苷F₁₁、人参皂苷Rb₁、人参皂苷Re、人参皂苷Rg₁的薄层色谱法鉴别

取本品粉末约2g，加乙醚20ml，超声处理20分钟，放冷，滤过，弃去乙醚液，药渣挥去乙醚，加甲醇30ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次30ml，合并正丁醇液，用氨试液30ml洗涤，弃去氨洗液，再用正丁醇饱和的水30ml洗涤，取正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取西洋参对照药材0.5g，同法制成对照药材溶液。再取人参皂苷F₁₁、人参皂苷Rb₁、人参皂苷Re、人参皂苷Rg₁对照品，加甲醇制成每1ml各含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各1～10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水(60∶40∶12)10℃以下放置过夜的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热数分钟，分别置日光及紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品及对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点及荧光斑点。

实施例11片剂中西洋参药材的薄层色谱法鉴别

取本品粉末约2g，加石油醚20ml，超声处理20分钟，放冷，滤过，弃去乙醚液，药渣挥去石油醚，加乙醇30ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次30ml，合并正丁醇液，用氨试液30ml洗涤，弃去氨洗液，再用正丁醇饱和的水30ml洗涤，取正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取西洋参对照药材0.5g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水(70∶30∶8)10℃以下放置过夜的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以20％硫酸乙醇溶液，在100～110℃加热数分钟，分别置日光及紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点及荧光斑点。

实施例12微丸剂中橙皮苷的薄层色谱法鉴别

取本品粉末约3g，加水50ml，加热回流20分钟，滤过，滤液用乙酸乙酯振摇提取2次，每次30ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另按处方比例取缺陈皮的阴性样品，同法制成阴性样品溶液。再取橙皮苷对照品，加甲醇制成饱和溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各10μl，分别点于同一用0.5％氢氧化钠制备的硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-甲醇-水(100∶17∶13)为展开剂，展距约3cm，取出，晾干，再以三氯甲烷-甲醇-丁酮-冰醋酸(13∶4∶4∶1)为展开剂，展开，展距约8cm，取出，晾干。喷以三氯化铝试液，置紫外灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，阴性无干。

实施例13片剂中陈皮药材、橙皮苷的薄层色谱法鉴别

取本品粉末约3g，加水50ml，加热回流20分钟，滤过，滤液用乙酸乙酯振摇提取2次，每次30ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。再取陈皮对照药材0.5g，加甲醇20ml回流提取，提取液浓缩成1ml，作为对照药材溶液。取橙皮苷对照品，加乙醇制成每ml含0.5mg的对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各5μl，分别点于同一用0.3％氢氧化钠制备的硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-甲醇-水(90∶15∶15)为展开剂，展距约5cm，取出，晾干，再以三氯甲烷-甲醇-丁酮-冰醋酸(15∶5∶3∶1.5)为展开剂，展开，展距约6cm，取出，晾干。喷以三氯化铝试液，置紫外灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

实施例14软胶囊剂中陈皮药材、橙皮苷的薄层色谱法鉴别

取本品内容物约2g，加水30ml超声20分钟，滤过，滤液用三氯甲烷30ml振摇提取，三氯甲烷液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。再取陈皮对照药材0.5g，同法制成对照药材溶液。取橙皮苷对照品，加乙醇制成每ml含0.5mg的对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各2～5μl，分别点于同一用0.3％氢氧化钠制备的硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-甲醇-水(110∶19∶11)为展开剂，展距约5cm，取出，晾干，再以三氯甲烷-甲醇-丁酮-冰醋酸(11∶3∶5∶0.5)为展开剂，展开，展距约6cm，取出，晾干。喷以三氯化铝试液，置紫外灯(254nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

实施例15微丸剂中橙皮苷的高效液相色谱法含量测定

取装量本品，研细，取约0.5g，精密称定，置索氏提取器中，加甲醇40ml，加热回流至提取液无色，提取液转移至50ml量瓶中，用甲醇适量数次洗涤容器，洗液并入量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜(0.45μm)滤过，取续滤液，作为供试品溶液。取橙皮苷对照品适量，精密称定，加甲醇定容，制成0.060mg/ml的溶液，作为对照品溶液。采用高效液相色谱法试验，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-0.1％磷酸溶液＝40∶60为流动相；检测波长为283nm；理论板数按橙皮苷峰计算应不低于2000；分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；本品每日用剂量含橙皮苷不得少于12mg。

实施例16分散片剂中橙皮苷的高效液相色谱法含量测定

取装量本品，研细，取约1.0g，精密称定，置索氏提取器中，加乙醇50ml，加热回流至提取液无色，提取液转移至50ml量瓶中，用乙醇适量数次洗涤容器，洗液并入量瓶中，加乙醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，作为供试品溶液。取橙皮苷对照品适量，精密称定，加乙醇定容，制成0.050mg/ml的溶液，作为对照品溶液。采用高效液相色谱法试验，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-0.5％磷酸溶液＝50∶50为流动相；检测波长为280nm；理论板数按橙皮苷峰计算应不低于1000；分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl，注入液相色谱仪，测定，即得；本品每日用剂量含橙皮苷不得少于6mg。

实施例17滴丸剂中橙皮苷的高效液相色谱法含量测定

取装量本品，研细，取约0.3g，精密称定，加甲醇30ml超声15分钟，放冷，补足损失的溶剂，摇匀，滤过，取续滤液，作为供试品溶液。取橙皮苷对照品适量，精密称定，加甲醇定容，制成0.030mg/ml的溶液，作为对照品溶液。采用高效液相色谱法试验，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-0.05％磷酸溶液＝30∶70为流动相；检测波长为286nm；理论板数按橙皮苷峰计算应不低于2000；分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各15μl，注入液相色谱仪，测定，即得；本品每日用剂量含橙皮苷不得少于10mg。

Claims (10)

1、一种治疗咳喘病的参蛤平喘制剂，其特征在于：按照重量组分计算，它主要是由异叶青兰333.3g，西洋参666.6g，蛤蚧416.6g，陈皮999.9g或相应重量份它们的提取物制作而成的口服制剂，包括：片剂、分散片、泡腾片、胶囊剂、软胶囊剂、微囊剂、颗粒剂、丸剂、微丸、散剂、滴丸剂、缓释制剂、控释制剂、凝胶剂、栓剂、口服液体制剂、煎膏剂、浸膏剂和膜剂药剂学上所有可以接受的剂型。

2、按照权利要求1所述的治疗咳喘病的参蛤平喘制剂，其特征在于：所述的制剂是微丸、片剂、颗粒剂、分散片、滴丸。

3、按照权利要求1或2所述的治疗咳喘病的参蛤平喘制剂的制法，其特征在于：取陈皮、异叶青兰，加水浸泡1小时后，加水煎煮三次，第一次加8倍量水煎煮2小时，第二、三次都加6倍量水各煎煮1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度60℃为1.10～1.20的清膏，喷雾干燥；取去头、足的蛤蚧、西洋参，粉碎成细粉，与上述细粉混匀，再制成制剂。

4、按照权利要求3所述的治疗咳喘病的参蛤平喘制剂的制法，其特征在于：所述制剂中的微丸剂这样制备：取陈皮、异叶青兰，加水浸泡1小时后，加水煎煮三次，第一次加8倍量水煎煮2小时，第二、三次都加6倍量水各煎煮1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度60℃为1.10～1.20的清膏，喷雾干燥；取去头、足的蛤蚧、西洋参，粉碎成细粉，与上述细粉混匀，挤压-滚圆法制丸或者泛制法制丸，干燥，即得微丸剂。

5、按照权利要求4所述的治疗咳喘病的参蛤平喘制剂的制法，其特征在于：挤压-滚圆法是这样的：采用85％的乙醇、3％大豆油、适量淀粉与药粉混匀后制软材，制好的软材用微丸机制丸，湿料挤压过0.8mm筛孔，条状湿粒切断滚圆，在50～60℃干燥成型，过16～20目筛选丸，即得。

6、按照权利要求4所述的治疗咳喘病的参蛤平喘制剂的制法，其特征在于：所述的泛制法是这样的：取药粉，过100目筛，80％乙醇泛为微丸，包衣，即得。

7、按照权利要求1～6中任意一项所述的治疗咳喘病的参蛤平喘制剂的质控方法，其特征在于：鉴别方法包括以下全部或部分内容：

a.制剂中西洋参药材、人参皂苷F₁₁、人参皂苷Rb₁、人参皂苷Re、人参皂苷Rg₁中一种或几种的薄层色谱法鉴别

取本品或本品粉末，加乙醚或石油醚提取，弃去提取液，药渣加甲醇或乙醇提取，提取液蒸干，残渣加水使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取，正丁醇液先后用氨试液、正丁醇饱和的水洗涤，弃去洗液，正丁醇液蒸干，残渣加溶剂使溶解，作为供试品溶液；另取西洋参对照药材，同法制成对照药材溶液；再取人参皂苷F₁₁、人参皂苷Rb₁、人参皂苷Re、人参皂苷Rg₁对照品中的一种或几种，制成对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取对照品溶液、对照药材溶液中的一种或几种及供试品溶液适量，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水＝60～70∶30～40∶8～12在10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以硫酸乙醇溶液，加热数分钟，分别置日光及紫外光灯365nm下检视；供试品色谱中，在与对照色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点及荧光斑点；

b.制剂中陈皮药材、橙皮苷一种或两种的薄层色谱法鉴别

取本品或本品粉末，加水提取，水溶液用乙酸乙酯或三氯甲烷振摇提取，乙酸乙酯或三氯甲烷液蒸干，残渣加溶剂使溶解，作为供试品溶液；再取陈皮对照药材，加甲醇提取，制成对照药材溶液，或取陈皮药材，参照供试品溶液制法制成对照药材溶液；取橙皮苷对照品，制成对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取对照品溶液、对照药材溶液中的一种或两种及供试品溶液适量，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-甲醇-水＝90～110∶15～19∶11～15为展开剂，展开，取出，晾干，再以三氯甲烷-甲醇-丁酮-冰醋酸＝11～15∶3～5∶3～5∶0.5～1.5为展开剂，展开，取出，晾干；喷以含三氯化铝的溶液，置紫外灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

8、按照权利要求7所述的治疗咳喘病的参蛤平喘制剂的质控方法，其特征在于：鉴别方法包括以下全部或部分内容：

a.制剂中西洋参药材、人参皂苷F₁₁、人参皂苷Rb₁、人参皂苷Re、人参皂苷Rg₁中一种或几种的薄层色谱法鉴别

取本品粉末，加乙醚提取，弃去乙醚液，药渣加甲醇提取，提取液蒸干，残渣加水使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取，正丁醇液先后用氨试液、正丁醇饱和的水洗涤，弃去洗液，正丁醇液蒸干，残渣加溶剂使溶解，作为供试品溶液；另取西洋参对照药材，同法制成对照药材溶液；再取人参皂苷F₁₁、人参皂苷Rb₁、人参皂苷Re、人参皂苷Rg₁对照品中一种或几种，制成对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取对照品溶液、对照药材溶液中的一种或几种及供试品溶液适量，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水＝65∶35∶10在10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以硫酸乙醇溶液，加热数分钟，分别置目光及紫外光灯365nm下检视；供试品色谱中，在与对照色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点及荧光斑点；

b.制剂中陈皮药材、橙皮苷一种或两种的薄层色谱法鉴别

取本品粉末，加水提取，提取液用乙酸乙酯振摇提取，乙酸乙酯液蒸干，残渣加溶剂使溶解，作为供试品溶液；再取陈皮对照药材，加甲醇提取，制成对照药材溶液；取橙皮苷对照品，制成对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取对照品溶液、对照药材溶液中的一种或两种及供试品溶液适量，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-甲醇-水＝100∶17∶13为展开剂，展开，取出，晾干，再以三氯甲烷-甲醇-丁酮-冰醋酸＝13∶4∶4∶1为展开剂，展开，取出，晾干；喷以三氯化铝试液，置紫外灯365nm下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

9、按照权利要求1～6中任意一项所述的治疗咳喘病的参蛤平喘制剂的质控方法，其特征在于：含量测定方法包括以下内容：

取本品，研细，取约粉末适量，精密称定，加甲醇或乙醇提取，提取液定容，滤过，取续滤液，作为供试品溶液；取橙皮苷对照品适量，精密称定，加甲醇或乙醇制成对照品溶液；采用高效液相色谱法试验，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-0.05～0.5％磷酸溶液＝30～50∶70～50为流动相；检测波长为280～286nm；理论板数按橙皮苷峰计算应不低于1000；分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液适量，注入液相色谱仪，测定，即得；本品每日用剂量含橙皮苷不得少于6mg。

10、按照权利要求9所述的治疗咳喘病的参蛤平喘制剂的质控方法，其特征在于：含量测定方法包括以下内容：

取本品，研细，取约粉末适量，精密称定，加甲醇提取，提取液定容，滤过，取续滤液，作为供试品溶液；取橙皮苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成对照品溶液；采用高效液相色谱法试验，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-0.1％磷酸溶液＝40∶60为流动相；检测波长为283nm；理论板数按橙皮苷峰计算应不低于2000；分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；本品每日用剂量含橙皮苷不得少于12mg。