CN1969993A - 一种祛风散寒、通络止痛外用药物及其制备方法 - Google Patents

一种祛风散寒、通络止痛外用药物及其制备方法 Download PDF

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CN1969993A CN 200610161841 CN200610161841A CN1969993A CN 1969993 A CN1969993 A CN 1969993A CN 200610161841 CN200610161841 CN 200610161841 CN 200610161841 A CN200610161841 A CN 200610161841A CN 1969993 A CN1969993 A CN 1969993A
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Abstract

本发明提供了一种祛风散寒、通络止痛外用药物及其制备方法。该药物是由制川乌、制草乌、马钱子(制)、淫羊藿、牛膝、羌活、贯众、黄柏、乌梢蛇、鹿茸、续断、乌梅、细辛、麻黄、桂枝、红花、刺五加、金银花、地龙、桑寄生、甘草、骨碎补(烫)、地枫皮、没药(制)、红参二十五味药材，本发明紧扣疾病的病因病机，诸药合理配伍，祛风散寒，通络止痛。做为外用巴布剂经皮肤给药，不仅避免了口服制剂对胃肠道的刺激，相对缓慢的经皮吸收过程对全身的毒副反应必然会大大减轻。也没有出现皮肤过敏、皮肤刺激反应。因此，新剂型经皮给药后，一定程度的提高了用药安全性，为临床安全用药提供了新的选择。

Description

一种祛风散寒、通络止痛外用药物及其制备方法
技术领域
本发明涉及中医药制剂领域，尤其是涉及一种祛风散寒，通络止痛。用于痹症，腰腿痛，肌肉关节疼痛，屈伸不利，以及肩周炎、颈椎病、风湿性关节炎、类风湿性关节炎的外用药物及其制备方法。
背景技术
此外用药物是由川乌、草乌、马钱子等二十五味药组成。具有祛风散寒，通络止痛功效，用于痹症，腰腿痛，肌肉关节疼痛，屈伸不利，以及肩周炎、颈椎病、风湿性关节炎、类风湿性关节炎见以上症候者。上市以来，受到患者的一致认可，具有非常确切的疗效。由于处方中含有马钱子等有毒药，临床使用上受到一定限制。而其做为外用巴布剂，减小了毒副作用，增加了安全性，通过药效学试验证明，外用巴布剂仍能保持口服制剂的药效。而且，中药巴布剂保湿透气耐老化、贴着舒适、使用方便，刺激性、过敏性小，是中药外用药的首选剂型。
痹病是临床常见多发病之一。主要是由于机体感受风寒、湿热等外邪，造成经络壅塞，气血运行失畅。其中寒湿阻络为多发证候。故方中取大辛、大热、大毒之川乌、草乌合而为君[《瑞竹堂方》卷五称二乌膏]，川乌祛风温里散寒，既可发热肌表之寒湿，善疗寒湿阻络之痹病，又可温通脏腑之阴寒。功具温阳通络以开痹，故除内外之寒湿；草乌功用略同川乌，但其长于搜风除寒祛湿，且其止痛除痹功较强，合而用之，温通表里，直中寒湿阻络症机，故为君。今人何懋生氏亦喜用川乌、草乌配合治疗寒湿顽痹，疗效颇显。[浙江中医杂志1986，(3)：132]马钱子苦、寒，功擅通络止痛，散结消肿“能搜筋骨入骱之风湿，祛皮里膜外凝结之痰毒”[《外科全生集》]尤其是“其开通经络，透达关节之力实远胜于他药也。”[《医学忠中参西录》]故与二乌相伍，侧重舒筋止痛亦为君。伍以大队湿补通经之淫羊藿、鹿茸、细辛、桂枝、桑寄生、骨碎补、刺五加、乌梢蛇、羌活、续断、参、贯众、地枫皮以加强三君药温阳祛寒、舒筋通络、消肿止痛之力；寒主收引，湿阻气机均易生瘀，故取地龙、没药、红花活血化瘀以通达痹阻之经络。麻黄、桂枝相互辛温走表，宣肺以化湿，共为臣，君药诸药多为辛、香、燥烈之品，耗气伤津之味，故取乌梅生津敛液，开中寓合，以防止辛散之品伤津燥血，温郁气机，易伴郁热，故取金银花、黄柏清热燥湿，又可防止君药辛温太过之弊，共为佐。甘草调和诸药为使，本方药味虽多，但多而不杂，君臣有序，佐使分明，祛邪为主兼扶止，温通之中佐清透开合又寓收敛。故而诸药合用共奏舒筋活血，祛风镇痛之佳效。
发明内容
为了克服现有技术的不足，本发明提供了一种祛风散寒，通络止痛。用于痹症，腰腿痛，肌肉关节疼痛，屈伸不利，以及肩周炎、颈椎病、风湿性关节炎、类风湿性关节炎的外用药物及其制备方法。该药物疗效确切，作用迅速，无毒副作用，服用方便。
本发明药物系本发明人根据中医理论并经过多年的临床经验总结研制而成的中药复方制剂，商品名为万通筋骨巴布膏。本发明药物是由下述重量份的中药原料和药剂学上可接受的赋形剂制备而成的：
制川乌7-23      制草乌7-23   马钱了(制)7-23
淫羊藿7-23     牛膝7-23      羌活7-23
贯众7-23       黄柏7-23      乌梢蛇7-23
鹿茸4-16       续断7-23      乌梅7-23
细辛2-10       麻黄7-23      桂枝7-23
红花7-23       刺五加9.64g   金银花7-23
地龙7-23       桑寄生7-23    甘草7-23
骨碎补(烫)7-23 地枫皮7-23    没药(制)7-23
红参7-23
本发明的中药原料的重量份配比优选：
制川乌7      制草乌7  马钱子(制)7
淫羊藿7      牛膝7    羌活7
贯众7        黄柏7    乌梢蛇7
鹿茸4        续断7    乌梅7
细辛2        麻黄7    桂枝7
红花7        刺五加7  金银花7
地龙7        桑寄生7  甘草7
骨碎补(烫)7  地枫皮7  没药(制)7
红参7
上述原料药的重量份配比还优选：
制川乌9.64g     制草乌9.64g    马钱子(制)9.64g
淫羊藿9.64g     牛膝9.64g      羌活9.64g
贯众9.64g       黄柏9.64g      乌梢蛇9.64g
鹿茸6.43g       续断9.64g      乌梅9.64g
细辛4.82g       麻黄9.64g      桂枝9.64g
红花9.64g       刺五加9.64g    金银花9.64g
地龙9.64g       桑寄生9.64g    甘草9.64g
骨碎补(烫)9.64g 地枫皮9.64g    没药(制)9.64g
红参9.64g
上述原料药的重量份配比还优选：
制川乌15    制草乌15    马钱子(制)15
淫羊藿15    牛膝15      羌活15
贯众15      黄柏15      乌梢蛇15
鹿茸12      续断15      乌梅15
细辛6       麻黄15      桂枝15
红花15      刺五加15    金银花15
地龙15       桑寄生15    甘草15
骨碎补(烫)15 地枫皮15    没药(制)15
红参15
上述原料药的重量份配比还优选：
制川乌20     制草乌20    马钱子(制)20
淫羊藿20     牛膝20      羌活20
贯众20       黄柏20      乌梢蛇20
鹿茸14       续断20      乌梅20
细辛8        麻黄20      桂枝20
红花20       刺五加20    金银花20
地龙20       桑寄生20    甘草20
骨碎补(烫)20 地枫皮20    没药(制)20
红参20
上述原料药的重量份配比还优选：
制川乌23     制草乌23    马钱子(制)23
淫羊藿23     牛膝23      羌活23
贯众23       黄柏23      乌梢蛇23
鹿茸16       续断23      乌梅23
细辛10       麻黄23      桂枝23
红花23       刺五加23    金银花23
地龙23       桑寄生23    甘草23
骨碎补(烫)23 地枫皮23    没药(制)23
红参23
本发明药物可以按照本领域的常规方法如水提、醇提等制备成任何约剂学上可接受的胶囊、巴布制剂、片剂、喷剂、或擦剂。其中优选外用的巴布制剂剂型
本发明药物还可按如下制备方法制成：
以上二十五味药材，羌活、细辛、没药、桂枝、人参、刺五加、鹿茸七味先浸泡2小时，再用水蒸气蒸馏提取挥发油，挥发油、药液另器保存；药渣与续断，骨碎补，制川乌，草制乌，制马钱子，黄柏，贯众，地枫皮，地龙，桑寄生等10味药材一起用70％乙醇提取3次，加醇量为6倍/次，提取时间1.5小时/次。滤出醇提液，减压回收乙醇至相对密度1.28-1.30(50℃)浸膏另器保存。淫羊藿，甘草，牛膝，金银花，乌梅，麻黄，红花，乌梢蛇，加8倍水，提取3次，每次提取1.5小时。药液与提挥发油药材的药液合并，减压浓缩至相对密度为1.045～1.065(50℃)，离心除杂质，上清液减压浓缩至相对密度1.28-1.30(50℃)与醇提浸膏合并。然后按常规工艺制成药剂学上可接受的胶囊、巴布制剂、片剂、喷剂、或擦剂。
本发明药物的制备方法优选：
以上二十五味药材，羌活、细辛、没药、桂枝、人参、刺五加、鹿茸七味先浸泡2小时，再用水蒸气蒸馏提取挥发油，挥发油、药液另器保存；药渣与续断，骨碎补，制川乌，草制乌，制马钱子，黄柏，贯众，地枫皮，地龙，桑寄生等10味药材一起用70％乙醇提取3次，加醇量为6倍/次，提取时间1.5小时/次。滤出醇提液，减压回收乙醇至相对密度1.28-1.30(50℃)浸膏另器保存。淫羊藿，甘草，牛膝，金银花，乌梅，麻黄，红花，乌梢蛇，加8倍水，提取3次，每次提取1.5小时。药液与提挥发油药材的药液合并，减压浓缩至相对密度为1.045～1.065(50℃)，离心除杂质，上清液减压浓缩至相对密度1.28-1.30(50℃)与醇提浸膏合并。称取聚丙烯酸钠、卡波姆、明胶、桃胶、甘油、氢氧化钠、蒸馏水(3.6∶4.2∶6.0∶9.0∶30∶1.5∶45)，制成基质，加入挥发油，氮酮、丙二醇各1％，泥泊金乙酯、丙酯各0.05％，EDTA-Na0.01％，中药浸膏，搅拌混合成胶，涂布、切割、包装。即得本发明。
本发明药物的主要药效学资料
研究万通筋骨巴布剂在抗软组织损伤、抗炎、镇痛及活血化瘀方面的药效作用。
试验用药品：万通筋骨巴布剂(万通筋骨巴布膏为不含赋型剂的万通筋骨巴布剂)，中试产品，由中国中医研究院中药研究所制剂室提供，批号20050615，；万通筋骨片，由通化万通药业股份有限公司提供，批号041002。
抗软组织损伤作用：①对钳夹致大鼠皮肤瘀斑的实验治疗中，万通筋骨巴布剂高、中剂量(2.4g生药/kg、1.2g生药/kg)和万通筋骨片剂(1.2g生药/kg)在给药后第2天～第5天对大鼠皮肤瘀斑的治疗有明显效果(与模型组比较，P＜0.05，P＜0.01)；万通筋骨巴布剂低剂量(0.6g生药/kg)在给药后第3天时，皮肤瘀斑与模型组相比也有显著改善(P＜0.05)。②用击伤器致大鼠软组织损伤的实验治疗中，万通筋骨巴布剂高剂量组(2.4g生药/kg)及片剂组(1.2g生药/kg)的伤肢损伤程度在伤后第4天比模型组有明显好转(P＜0.05)。伤后第5天万通筋骨巴布剂高、中剂量组(2.4g生药/kg、1.2g生药/kg)及片剂组(1.2g生药/kg)的伤肢损伤程度均比模型组有明显好转(P＜0.05，P＜0.01)。病理检查结果显示：万通筋骨巴布剂高、中、低剂量组(2.4g生约/kg、1.2g生药/kg、0.6g生药/kg)和片剂组(1.2g生药/kg)能显著缓解肌肉组织瘀血、肿胀(与模型组比较，P＜0.05)。镜下显示：万通筋骨巴布剂各剂量及万通筋骨片均能显著降低损伤肌细胞的肿胀程度(与模型组相比，P＜0.01)。
抗炎作用：①对巴豆油致小鼠耳肿胀的抗炎实验中，万通筋骨巴布剂高(2.88g生药/kg)、中剂量(1.44g生药/kg)和万通筋骨片(1.44g生药/kg)对耳肿胀均有显著的抑制作用(与模型组比较，P＜0.05)。②对角叉菜胶致大鼠足肿胀的抗炎实验中，万通筋骨巴布剂高、中、低剂量(2.4g生药/kg、1.2g生药/kg、0.6g生药/kg)和片剂(1.2g生药/kg)均能显著降低注射后1h，2h，4h，6h的足肿胀率(与模型组比较P＜0.01)。③对大鼠佐剂关节炎的实验治疗中，对于注射足，福氏佐剂致敏后1～10天，万通筋骨巴布剂高剂量(2.4 g生药/kg)显著抑制足肿胀(与模型组比较，P＜0.05，P＜0.01)，致敏后1～7天，万通筋骨巴布剂中剂量(1.2g生药/kg)和片剂(1.2g生药/kg)显著抑制足肿胀(与模型组比较，P＜0.05，P＜0.01)，致敏后期，各组均有抑制足肿胀的趋势，其中万通筋骨巴布剂中剂量组第13天与模型组比较，明显抑制足肿胀(P＜0.05)，低剂量组第13天、第19天与模型组比较，明显抑制足肿胀(P＜0.05，P＜0.01)，万通筋骨片剂组第13～22天与模型组比较，明显抑制足肿胀(P＜0.05，P＜0.01)。对于非注射足，万通筋骨巴布剂高剂量组于致敏后期(10天～25天)显著抑制足肿胀(与模型组比较，P＜0.05，P＜0.01)，万通筋骨巴布剂中剂量组第19天～25天显著抑制足肿胀(与模型组比较，P＜0.05)，万通筋骨巴布剂低剂量组第25天显著抑制足肿胀(与模型组比较，P＜0.05)，万通筋骨片剂组第16～25天显著抑制足肿胀(与模型组比较，P＜0.05，P＜0.01)。各剂量组的胸腺、肾上腺、脾指数与模型组比较无显著差别，万通筋骨巴布剂高、中剂量组在致敏后第16-24天的体重与模犁组比较无明显差别。万通筋骨巴布剂高、中剂量组对第19、22、25天大鼠全身炎症反应及血管周围炎症程度的关节炎指数有明显的抑制作用(与模型组相比，P＜0.05，P＜0.01)。
镇痛作用：①在小鼠温水浴热甩尾镇痛实验中，高剂量万通筋骨巴布剂(2.88g生药/kg)给药后1h～6h，甩尾时间延长(与对照组比较，P＜0.05，P＜0.01)，镇痛效果显著，中剂量万通筋骨巴布剂(1.44g生药/kg)给药后2h～6h，镇痛效果显著(与对照组比较，P＜0.01)，万通筋骨巴布剂低剂量(0.72g生药/kg)与片剂(1.44g生药/kg)给药后1h～4h镇痛效果显著(与对照组比较，P＜0.05)。②在小鼠醋酸扭体镇痛实验中，万通筋骨巴布剂高、中剂量(2.88g生药/kg、1.44g生药/kg)及片剂(1.44g生药/kg)均能明显减少小鼠扭体次数(与对照组比较，P＜0.05)，有镇痛作用。
活血化瘀作用：①在血液流变学实验中，万通筋骨巴布剂高、中剂量(2.4g生药/kg，1.2g生药/kg)显著降低血小板聚集率(与模型组相比，P＜0.01)和血浆粘度(与模型组相比，P＜0.05)。万通筋骨巴布剂高剂量能显著降低切变率为10/s、50/s和200/s时的全血粘度(与模型组相比，P＜0.01)，万通筋骨巴布剂中剂量(1.2g生药/kg)能显著降低切变率为10/s、50/s时的全血粘度(与模型组相比，P＜0.05)，万通筋骨巴布剂三个剂量与片剂能降低热沉蛋白的含量(与模型组相比，P＜0.05，P＜0.01)。②对醋酸致腹腔毛细血管通透性升高的实验治疗中，万通筋骨巴布剂高、中剂量(2.88 g生药/kg、1.44g生药/kg)显著降低毛细血管通透性(与模型组相比，P＜0.01)。
试验目的：
万通筋骨巴布剂的功能、主治进行主要药效学研究，选用软组织损伤、炎症、疼痛、血瘀等多种动物模型，证实其抗软组织损伤、抗炎、镇痛、活血化瘀等作用，对该剂型的有效性做出科学评价，指导临床用药。
试验内容：
一、万通筋骨巴布剂抗软组织损伤的作用
1.万通筋骨巴布剂对钳夹致大鼠皮肤瘀斑的治疗作用
大鼠背部脱毛，面积约5cm×6cm，24h后用老虎钳夹大鼠脱毛区皮肤，以造成皮下出血为度，面积为4cm×3cm。60只大鼠造模后，随机分为模型对照组(给基质)，阳性药物扶他林组(12mg/kg)，万通筋骨片组(1.2g生药/kg)，万通筋骨巴布剂高(2.4g生药/kg)、中(1.2g生药/kg)、低剂量组(0.6g生药/kg)，12h后开始给药，除万通筋骨片为灌胃给药外，其余均为经皮给药，连续给药5天，每天1次。每天给药时通过触摸和肉眼观察评价肿胀和瘀斑消退情况，并测量剩余瘀斑面积，按下表进行记分，以总分为其瘀斑严重程度指标，结果进行组间t检验。
1.1结果
万通筋骨巴布剂高、中剂量(2.4g生药/kg、1.2g生药/kg)和万通筋骨片剂(1.2g生药/kg)在给药后第2天～第5天对大鼠皮肤瘀斑的治疗有明显效果(与模型组比较，P＜0.05，P＜0.01)；万通筋骨巴布剂低剂量(0.6g生药/kg)在给药后第3天时，皮肤瘀斑与模型组相比也有显著改善(P＜0.05)。
2、万通筋骨巴布剂对击伤器致大鼠软组织损伤的治疗作用
2.1材料
万通筋骨巴布剂(4.797g生药/g浸膏)，由中国中医研究院中药研究所制剂室提供，批号20050615；万通筋骨片(0.5588g生药/片)，由通化万通药业股份有限公司提供，批号041002；扶他林，北京诺华制药有限公司，批号05103；甲醛：北京市旭东化工厂生产，批号：20051125，配成10％的浓度备用；乙醇：北京化工厂生产，(无水乙醇批号：20051129，95％乙醇批号：20050827)配成60％、70％、80％、95％、100％的浓度备用；二甲苯：北京化工厂生产，批号：20050925；苏木精：北京化学试剂公司生产，批号：20040727；伊红(曙红)：北京化工厂生产，批号：20040915；两者各配成染液作HE染色；切片石蜡56℃-58℃：上海华灵康复器械厂生产，批号：20051029；中性树脂胶：上海标本模型厂生产，批号：20050802。
2.2方法
动物先用10％硫化钡脱去一侧小腿部鼠毛，24h后用击伤器[以重物自由落下击伤大鼠腿部肌肉，高度可调节，势能调至0.18kg/m(势能＝重物的质量×重物至肢体的高度)]在小腿中部外侧击打一次，造成局部软组织损伤，以“皮未破而内损”为度，若合并皮肤破损或骨折者予以剔除。选择造模成功的大鼠60只，随机分为六组，即模型对照组(给基质)，万通筋骨巴布剂高(2.4g生药/kg)，中(1.2g生约/kg)，低剂量(0.6g生药/kg)组，万通筋骨片(1.2g生药/kg)组，阳性药扶他林(12mg/kg)组，除万通筋骨片为灌胃给药外，其余均为经皮给药，连续给药5天，每天1次。给药期间，每天观察伤肢肿胀和瘀斑等症候表现，并分级评分记录损伤指数。
各组动物处死后解剖，取挫伤部位肌肉组织1块，固定于10％福尔马林溶液中，72小时后取出流水冲洗，梯度乙醇脱水，二甲苯透明，浸蜡包埋，切片，HE染色，中性树脂胶封片，光学显微镜观察创伤局部组织的创伤性无菌性炎症反应等病理表现。对病理损伤程度作出评价，作Ridit分析、照相。各组肌肉组织均附彩色显微照片。
2.3结果
万通筋骨巴布剂高剂量(2.4g生药/kg)及片剂组(1.2g生药/kg)伤肢肿胀程度在伤后第4天有明显好转(与模型组相比，P＜0.05)。在伤后第5天万通筋骨巴布剂高、中剂量(2.4g生药/kg、1.2g生药/kg)及片剂组的伤肢肿胀程度均比模型组有明显好转(P＜0.05，P＜0.01)。
创伤局部组织病理检查，肉眼观察结果：模型组大鼠肌肉组织有明显充血、淤血。阳性药组、万通筋骨巴布剂高、中、低剂量组和片剂组大鼠肌肉组织充血、淤血均有所减轻(与模型组相比，P＜0.05)。
镜下观察结果：模型组大部分肌肉组织大面积肿胀，肌肉组织明显增粗，润盘消失，失去正常的肌肉排列，间质有部分区域肌纤维颜色变浅，间质炎症细胞浸润以小淋巴细胞为主，肌组织细胞有反应性增生。万通筋骨巴布剂高、中、低剂量组，万通筋骨片组均显著改善细胞肿胀程度(与模型组相比，P＜0.01)。
对肌肉肿胀程度统计，作t检验分析。
二、万通筋骨巴布剂抗炎的作用
1、万通筋骨巴布剂对巴豆油致小鼠耳肿胀的抗炎作用
1.1材料：
小鼠，昆明种，雄性，体重18～22g，由中国科学院遗传与发育生物学研究所动物中心提供，合格证号SCXK(京)2002-0006。
1.2药物、试剂与仪器
万通筋骨巴布剂(4.797g生药/g浸膏)，由中国中医研究院中药研究所制剂室提供，批号20050615；万通筋骨片(0.5588g生药/片)，由通化万通药业股份有限公司提供，批号041002；醋酸可的松，上海第九制药厂，批号981002；无水乙醇，分析纯，北京化工厂，批号20010209；乙醚，分析纯，北京市红星化工厂，批号990402。
电子天平，LIBROR EB-280M-22，日本岛津仪器公司。
1.3方法。
小鼠60只，分层随机分为模型对照组(给基质)、万通筋骨巴布剂高、中、低剂量组(2.88g生药/kg，1.44g生药/kg，0.72g生药/kg)、万通筋骨片组(1.44g生药/kg)和阳性药醋酸可的松组(25mg/kg)，其中除阳性药为腹腔注射，万通筋骨片灌胃给药外，其余均为经皮给药，连续给药3天，每天1次，末次给药1h后，在左侧耳廓涂抹2％巴豆油(巴豆油∶乙醇∶乙醚＝0.2∶2∶7.8)50μl/只，4h后处死，用直径8mm的不锈钢铳铳下左右耳廓，称重，计算耳肿胀率，进行组间t检验。耳肿胀率计算公式如下：
耳肿胀率＝(左耳重-右耳重)/右耳重×100％
1.4结果
万通筋骨巴布剂高(2.88g生药/kg)、中剂量(1.44g生药/kg)和万通筋骨片(1.44g生药/kg)对耳肿胀均有显著的抑制作用(与模型组比较，P＜0.05)。
2、万通筋骨巴布剂对角叉菜胶致大鼠足肿胀的治疗作用
2.1材料
动物：SD大鼠，雄性，体重190～210g，由北京大学医学部实验动物科学部提供。合格证号：SCXK(京)2002-0001。
2.2药物与试剂
万通筋骨巴布剂(4.797g生药/g浸膏)，由中国中医研究院中药研究所制剂室提供，批号20050615；万通筋骨片(0.5588g生药/片)，由通化万通药业股份有限公司提供，批号041002；扶他林，北京诺华制药有限公司，批号05103；角叉菜胶，Sigma公司，批号121K1653。
2.3方法
大鼠60只，分层随机分为模型对照组(给基质)、万通筋骨巴布剂高、中、低剂量组(2.4g生药/kg，1.2g生药/kg，0.6g生药/kg)、万通筋骨片组(1.2g生药/kg)和阳性药扶他林组(1.2g膏/kg相当12mg双氯芬酸钠/kg)，除万通筋骨片组为灌胃给药外，其余均为经皮给约，连续给药3天，每天1次，末次给药1h后，在其右后肢足跖部皮下注射1％的角叉菜胶100μl，分别于注射后1h，2h，4h，6h用自制皮尺测量肿胀足跖部周长，计算足肿胀率，进行组间t检验。计算公式如下：足肿胀率＝(注射后足跖周长-注射前足跖周长)/注射前足跖周长×100％
2.4结果
万通筋骨巴布剂高、中、低剂量(2.4g生药/kg、1.2g生药/kg、0.6g生药/kg)和片剂(1.2g生药/kg)均能显著降低注射后1h，2h，4h，6h的足肿胀率(与模型组比较，P＜0.01)。
3、万通筋骨巴布剂对大鼠佐剂性关节炎的影响
3.1方法
大鼠60只，分层随机分为模型对照组(给基质)、万通筋骨巴布剂高、中、低剂量组(2.4g生药/kg、1.2g生药/kg、0.6g生药/kg)、万通筋骨片组(1.2g生药/kg)和阳性药扶他林组(12mg/kg)。其中万通筋骨片组为口服给药，其余均为经皮给药，共给药24天，每天1次，在第一天给药1h后，测定各大鼠双后肢足跖部周长，然后在其右后肢足跖部皮下注射福氏完全佐剂100μl/只，分别于注射后不同天数称量大鼠体重，测量双侧足跖部周长，同时观察大鼠全身炎症反应及血管周围炎症程度，计算关节炎指数，由上述指标综合判断药物作用，进行组间t检验。
给药第24天测定完大鼠体重、关节周长和关节炎指数后，处死大鼠，取胸腺、脾和肾上腺称重，计算脏器系数(mg脏器重/g体重)。
3.2结果
在对大鼠佐剂关节炎的实验治疗中，对于注射足，福氏佐剂致敏后1～10天，万通筋骨巴布剂高剂量(2.4g生药/kg)显著抑制足肿胀(与模型组比较，P＜0.05，P＜0.01)，致敏后1～7天，万通筋骨巴布剂中剂量(1.2g生药/kg)和万通筋骨片(1.2g生药/kg)显著抑制足肿胀(与模型组比较，P＜0.05，P＜0.01)，致敏后期，各组均有抑制足肿胀的趋势，其中万通筋骨巴布剂中剂量组第13天与模型组比较，明显抑制足肿胀(P＜0.05)，低剂量组第13天、第19天与模型组比较，明显抑制足肿胀(P＜0.05，P＜0.01)，万通筋骨片组第13～22天与模犁组比较，明显抑制足肿胀(P＜0.05，P＜0.01)。对于非注射足，万通筋骨巴布剂高剂量组于致敏后期(10天～25天)显著抑制足肿胀(与模型组比较，P＜0.05，P＜0.01)，万通筋骨巴布剂中剂量组第19天～25天显著抑制足肿胀(与模型组比较，P＜0.05)，万通筋骨巴布剂低剂量组第25天显著抑制足肿胀(与模型组比较，P＜0.05)，万通筋骨片剂组第16～25天显著抑制足肿胀(与模型组比较，P＜0.05，P＜0.01)。
各剂量组的胸腺、肾上腺、脾指数与模犁组比较无显著差别，万通筋骨巴布剂高(2.4g生药/kg)、中(1.2g生药/kg)、低(0.6g生药/kg)剂量组体重致敏后与模型组比较无明显差别。万通筋骨巴布剂高剂量(2.4g生药/kg)组在致敏后第19、22、25天显著降低模型大鼠的关节炎指数(与模型组相比，P＜0.05，P＜0.01)，中剂量(1.2g生药/kg)组在致敏后第22、25天显著降低模犁大鼠的关节炎指数(与模型组相比，P＜0.05)。万通筋骨片(1.2g生药/kg)在致敏后第19，25天显著降低模型大鼠的关节炎指数(与模型组相比，P＜0.05)。
三、万通筋骨巴布剂的镇痛作用
1、万通筋骨巴布剂对小鼠热甩尾的镇痛作用
1.1方法
小鼠60只，分层随机分为正常对照组(给基质)、万通筋骨巴布剂高、中、低剂量组(2.88g生药/kg，1.44g生药/kg，0.72g生药/kg)，万通筋骨片组(1.44g生药/kg)，阳性药扶他林组(1.2g膏/kg相当于12mg双氯芬酸钠/kg)。除万通筋骨片组为灌胃给药，其余均为经皮给药。给药前先用秒表测定各小鼠的痛阈(小鼠自尾尖浸入50℃温水中至尾部甩起的时间，以下称甩尾潜伏期)，单次给药后1h，2h，4h，6h分别测定甩尾潜伏期，计算镇痛率，进行组间t检验。
镇痛率＝(甩尾潜伏期-痛阈)/痛阈×100％
1.2结果
高剂量万通筋骨巴布剂(2.88g生药/kg)给药后1h～6h，甩尾时间延长(与对照组比较，P＜0.05，P＜0.01)，镇痛效果显著，中剂量万通筋骨巴布剂(1.44g生药/kg)给药后2h～6h，镇痛效果显著(与对照组比较，P＜0.01)，万通筋骨巴布剂低剂量(0.72g生药/kg)与片剂(1.44g生药/kg)给药后1h～4h镇痛效果显著(与对照组比较，P＜0.05)。
2、通筋骨巴布剂对小鼠醋酸扭体的影响
2.1材料
小鼠，昆明种，雄性，体重18～22g，由北京大学医学部实验动物科学部提供，合格证号：SCXK(京)2002-0001。
2.2药物与试剂
万通筋骨巴布剂(4.797g生药/g浸膏)，由中国中医研究院中药研究所制剂室提供，批号20050615；万通筋骨片(0.5588g生药/片)，由通化万通药业股份有限公司提供，批号041002；扶他林，北京诺华制药有限公司，批号05103。醋酸，分析纯，北京化工厂，批号20010809。
2.3方法
小鼠60只，分层随机分为模型对照组(给基质)、万通筋骨巴布剂高、中、低剂量组(2.88g生药/kg，1.44g生药/kg，0.72g生药/kg)，万通筋骨片组(1.44g生药/kg)，阳性药扶他林组(12mg/kg)，除万通筋骨片为灌胃给药外，其余均为经皮给药。单次给药1h后，腹腔注射0.7％醋酸溶液0.1ml/10g，记录给醋酸后15min内的扭体次数。进行组间t检验。
2.4结果
万通筋骨巴布剂高、中剂量(2.88g生药/kg、1.44g生药/kg)及片剂(1.44g生药/kg)均能明显减少小鼠扭体次数(与模型组比较，P＜0.05)，有镇痛作用。
四、万通筋骨巴布剂的活血化瘀作用
1.万通筋骨巴布剂对血液流变学的影响
1.1材料
动物：SD大鼠，雄性，体重190～210g，由北京大学医学部实验动物科学部提供。合格证号：SCXK(京)2002-0001，
1.2药物、试剂与仪器
万通筋骨巴布剂(4.797g生药/g浸膏)，由中国中医研究院中药研究所制剂室提供，批号20050615；万通筋骨片(0.5588g生药/g片)，由通化万通药业股份有限公司提供，批号041002；扶他林，北京诺华制药有限公司，批号05103；角叉菜胶，Sigma公司，批号121K1653。
全血粘度计，LBY-N6A，北京普力生仪器公司生产；血小板聚集仪，DIC-PA3210，日本产；高速毛细管离心机，KH-120A，日本产；离心机，LXZ-II，上海医用分析仪器厂生产；
1.3方法
大鼠60只，分层随机分为模型对照组(给基质)，万通筋骨巴布剂高、中、低剂量组(2.4g生药/kg，1.2g生药/kg，0.6g生药/kg)、万通筋骨片组(1.2g生药/kg)和阳性药扶他林组(1.2g膏/kg相当于12mg双氯芬酸钠/kg)，另设正常对照组10只。除万通筋骨片为灌胃外，其余均为经皮给药，连续给药3天，每天1次，末次给药1h后，在其右后肢足跖部皮下注射1％角叉菜胶100μl。
动物末次给药1h后，进行血小板聚集及血液流变学测定，大鼠麻醉后，经腹主动脉取血，用3.8％枸橼酸钠(1∶9)抗凝，用离心机制成富血小板血浆和贫血小板血浆后，按比例用血小板聚集仪测定血小板聚集百分率；另取血液置旋转粘度计的测定杯中，测定不同切变率下的全血粘度；用上述贫血小板血浆吸入全血粘度计的毛细管中，测定37℃时的血浆粘度；用毛细管吸取血液后高速离心5分钟，用红细胞压积计数板读取压积值；用读完压积值的毛细管经处理后，用计数尺量出热沉蛋白的含量。
1.4结果
万通筋骨巴布剂高、中剂量(2.4g生药/kg，1.2g生药/kg)显著降低血小板聚集率(与模型组相比，P＜0.01)和血浆粘度(与模犁组相比，P＜0.05)。万通筋骨巴布剂高剂量能显著降低切变率为10/s、50/s和200/s时的全血粘度(与模型组相比，P＜0.01)，万通筋骨巴布剂中剂量(1.2g生药/kg)能显著降低切变率为10/s、50/s时的全血粘度(与模型组相比，P＜0.05)，万通筋骨巴布剂三个剂量与片剂能降低热沉蛋白的含量(与模型组相比，P＜0.05，P＜0.01)。
2.万通筋骨巴布剂对小鼠腹腔注射醋酸致腹腔毛细管通透性升高的影响。
2.1材料
动物：小鼠，昆明种，雄性，体重18～22g，由北京大学医学部实验动物科学部提供，合格证号：SCXK(京)2002-0001。
2.2药物与试剂
万通筋骨巴布剂(4.797g生药/g浸膏)，由中国中医研究院中药研究所制剂室提供，批号20050615；万通筋骨片(0.5588g生药/片)，由通化万通药业股份有限公司提供，批号041002；扶他林，北京诺华制药有限公司，批号05103；醋酸，分析纯，北京化工厂，批号20010809；伊文思兰，国药集团化学试剂有限公司(进口分装)，批号F20040709。
2.3方法
小鼠60只，分层随机分为模型对照组(给基质)、万通筋骨巴布剂高、中、低剂量组(2.88g生药/kg、1.44g生药/kg、0.72g生药/kg)，万通筋骨片(1.44g生药/kg)和阳性药扶他林组(12mg/kg)，其中万通筋骨片为灌胃给药，其余均为经皮给药。单次给药1h后，腹腔注射0.7％醋酸溶液0.2ml/只，30min后尾静脉注射0.5％伊文思兰生理盐水溶液0.1ml/10g体重，再过20min将小鼠脱椎处死，腹腔内注射生理盐水6ml，轻揉小鼠腹部，以使腹腔内染料充分溶解于生理盐水中并混合均匀，然后用6号针头穿刺入腹腔，仔细吸取4ml液体，每管液体离心3000rpm，10min后，取上清液测定590nm处的光密度值，根据标准曲线换算成染料含量。
2.4结果
结果见表15，对醋酸致腹腔毛细血管通透性升高的实验治疗中，万通筋骨巴布剂高、中剂量(2.88g生药/kg、1.44g生药/kg)显著降低毛细血管通透性(与模型组相比，P＜0.01)。
表15万通筋骨巴布剂对小鼠腹腔渗出染料含量的影响
Figure A20061016184100221
组别     动物数(只)     剂量(g生药/kg)     腹腔渗出液染料含量(μg/ml)
模型对照组万通筋骨巴布剂万通筋骨巴布剂万通筋骨巴布剂万通筋骨片扶他林     101010101010     --2.881.440.721.4412mg/kg     8.76±2.143.15±0.74**3.70±2.47**6.93±3.606.69±1.704.54±2.09**
注：与模型对照组相比，**P＜0.01。
小结与讨论：
万通筋骨巴布剂有抗软组织损伤，抗炎，镇痛，及活血化瘀的作用
万通筋骨巴布剂均有拮抗软组织损伤的作用，对大鼠皮肤瘀斑治疗中，可显著加快皮肤瘀斑的消散与好转；对大鼠外伤性软组织损伤的治疗中，可明显改善伤肢损伤程度，减轻创伤局部组织瘀血、肿胀及炎细胞浸润等病理改变。
万通筋骨巴布剂有明显的抗炎作用，对巴豆油致小鼠耳肿胀、角叉菜胶致大鼠足肿胀、弗氏完全佐剂致大鼠免疫性关节炎引起的关节肿胀有显著的抑制作用。
万通筋骨巴布剂还有较好的镇痛作用，对小鼠热刺激甩尾法和醋酸扭体法引起的疼痛反应有显著的抑制作用。
万通筋骨巴布剂还有活血化瘀的作用，能够降低全血粘度，抑制血小板聚集，对醋酸所致腹腔毛细管通透性升高均有抑制作用。
万通筋骨巴布剂含制川乌、制草乌、马钱子等有毒中药，做为外用巴布剂经皮肤给药，不仅避免了口服制剂对胃肠道的刺激，相对缓慢的经皮吸收过程对全身的毒副反应必然会大大减轻。也没有出现皮肤过敏、皮肤刺激反应。因此，新剂型经皮给药后，一定程度的提高了用药安全性，为临床安全用药提供了新的选择。
本发明是一种祛风散寒，通络止痛。用于痹症，腰腿痛，肌肉关节疼痛，屈伸不利，以及肩周炎、颈椎病、风湿性关节炎、类风湿性关节炎的外用药物，万通筋骨巴布剂含制川乌、制草乌、马钱子等有毒中药，做为外用巴布剂经皮肤给药，不仅避免了口服制剂对胃肠道的刺激，相对缓慢的经皮吸收过程对全身的毒副反应必然会大大减轻。也没有出现皮肤过敏、皮肤刺激反应。因此，新剂型经皮给药后，一定程度的提高了用药安全性，为临床安全用药提供了新的选择。
未见明显不良反应。
具体实施方式
实施例1
制川乌7     制草乌7  马钱子(制)7
淫羊藿7     牛膝7    羌活7
贯众7       黄柏7    乌梢蛇7
鹿茸4       续断7    乌梅7
细辛2       麻黄7    桂枝7
红花7       刺五加7  金银花7
地龙7       桑寄生7  甘草7
骨碎补(烫)7 地枫皮7  没药(制)7
红参7
按常规制剂方法制成本发明喷剂。
实施例2
制川乌15     制草乌15    马钱子(制)15
淫羊藿15     牛膝15      羌活15
贯众15       黄柏15      乌梢蛇15
鹿茸12       续断15      乌梅15
细辛6        麻黄15      桂枝15
红花15       刺五加15    金银花15
地龙15       桑寄生15    甘草15
骨碎补(烫)15 地枫皮15    没药(制)15
红参15
按常规方法制成本发明擦剂
实施例3
制川乌20       制草乌20  马钱子(制)20
淫羊藿20       牛膝20    羌活20
贯众20         黄柏20    乌梢蛇20
鹿茸14       续断20     乌梅20
细辛8        麻黄20     桂枝20
红花20       刺五加20   金银花20
地龙20       桑寄生20   甘草20
骨碎补(烫)20 地枫皮20   没药(制)20
红参20
按常规方法制成本发明胶囊剂。
实施例4
制川乌23     制草乌23   马钱子(制)23
淫羊藿23     牛膝23     羌活23
贯众23       黄柏23     乌梢蛇23
鹿茸16       续断23     乌梅23
细辛10       麻黄23     桂枝23
红花23       刺五加23   金银花23
地龙23       桑寄生23   甘草23
骨碎补(烫)23 地枫皮23   没药(制)23
红参23
按常规方法制成本发明片剂。
实施例5
制川乌9.64g      制草乌9.64g    马钱子(制)9.64g
淫羊藿9.64g      牛膝9.64g      羌活9.64g
贯众9.64g        黄柏9.64g      乌梢蛇9.64g
鹿茸6.43g        续断9.64g      乌梅9.64g
细辛4.82g        麻黄9.64g      桂枝9.64g
红花9.64g        刺五加9.64g    金银花9.64g
地龙9.64g        桑寄生9.64g    甘草9.64g
骨碎补(烫)9.64g 地枫皮9.64g  没药(制)9.64g
红参9.64g
以上二十五味药材，羌活、细辛、没药、桂枝、人参、刺五加、鹿茸七味先浸泡2小时，再用水蒸气蒸馏提取挥发油，挥发油、药液另器保存；药渣与续断，骨碎补，制川乌，草制乌，制马钱子，黄柏，贯众，地枫皮，地龙，桑寄生等10味药材一起用70％乙醇提取3次，加醇量为6倍/次，提取时间1.5小时/次。滤出醇提液，减压回收乙醇至相对密度1.28-1.30(50℃)浸膏另器保存。淫羊藿，甘草，牛膝，金银花，乌梅，麻黄，红花，乌梢蛇，加8倍水，提取3次，每次提取1.5小时。药液与提挥发油药材的药液合并，减压浓缩至相对密度为1.045～1.065(50℃)，离心除杂质，上清液减压浓缩至相对密度1.28-1.30(50℃)与醇提浸膏合并。称取聚丙烯酸钠、卡波姆、明胶、桃胶、甘油、氢氧化钠、蒸馏水(3.6∶4.2∶6.0∶9.0∶30∶1.5∶45)，制成基质，加入挥发油，氮酮、丙二醇各1％，泥泊金乙酯、丙酯各0.05％，EDTA-Na0.01％，中药浸膏，搅拌混合成胶，涂布、切割、包装。

Claims (10)

1.一种祛风散寒、通络止痛外用药物，其特征在于，它是由下述重量份配比的中药：
制川乌7-23       制草乌7-23        马钱子7-23
淫羊藿7-23       牛膝7-23          羌活7-23
贯众7-23         黄柏7-23          乌梢蛇7-23
鹿茸4-16         续断7-23          乌梅7-23
细辛2-10         麻黄7-23          桂枝7-23
红花7-23         刺五加9.64g       金银花7-23
地龙7-23         桑寄生7-23        甘草7-23
骨碎补7-23       地枫皮7-23        没药7-23
红参7-23。
2.根据权利要求1所述的一种祛风散寒、通络止痛外用药物，其特征在于，中药原料的重量份配比为：
制川乌7          制草乌7          马钱子7
淫羊藿7          牛膝7            羌活7
贯众7            黄柏7            乌梢蛇7
鹿茸4            续断7            乌梅7
细辛2            麻黄7            桂枝7
红花7            刺五加7          金银花7
地龙7            桑寄生7          甘草7
骨碎补7          地枫皮7          没药7
红参7。
3.根据权利要求1所述的一种祛风散寒、通络止痛外用药物，其特征在于，中药原料的重量份配比为：
制川乌15         制草乌15         马钱子15
淫羊藿15      牛膝15        羌活15
贯众15        黄柏15        乌梢蛇15
鹿茸12        续断15        乌梅15
细辛6         麻黄15        桂枝15
红花15        刺五加15      金银花15
地龙15        桑寄生15      甘草15
骨碎补15      地枫皮15      没药15
红参15。
4.根据权利要求1所述的一种祛风散寒、通络止痛外用药物，其特征在于中药原料的重量份配比为：
制川乌20      制草乌20      马钱子20
淫羊藿20      牛膝20        羌活20
贯众20        黄柏20        乌梢蛇20
鹿茸14        续断20        乌梅20
细辛8         麻黄20        桂枝20
红花20        刺五加20      金银花20
地龙20        桑寄生20      甘草20
骨碎补20      地枫皮20      没药20
红参20。
5.根据权利要求1所述的一种祛风散寒、通络止痛外用药物，其特征在于，中药原料的重量份配比为：
制川乌23      制草乌23     马钱子23
淫羊藿23      牛膝23       羌活23
贯众23        黄柏23       乌梢蛇23
鹿茸16        续断23       乌梅23
细辛10        麻黄23       桂枝23
红花23        刺五加23     金银花23
地龙23        桑寄生23      甘草23
骨碎补23      地枫皮23      没药23
红参23。
6.根据权利要求1所述的一种祛风散寒、通络止痛外用药物，其特征在于，中药原料的重量份配比为：
制川乌9.64g         制草乌9.64g        马钱子9.64g
淫羊藿9.64g         牛膝9.64g          羌活9.64g
贯众9.64g           黄柏9.64g          乌梢蛇9.64g
鹿茸6.43g           续断9.64g          乌梅9.64g
细辛4.82g           麻黄9.64g          桂枝9.64g
红花9.64g           刺五加9.64g        金银花9.64g
地龙9.64g           桑寄生9.64g        甘草9.64g
骨碎补9.64g         地枫皮9.64g        没药9.64g
红参9.64g。
7.根据权利要求1-6任一项所述的一种祛风散寒、通络止痛外用药物，其特征在于，该药物为胶囊、巴布制剂、片剂、喷剂、或擦剂。
8.根据权利要求1-6任一项所述的一种祛风散寒、通络止痛外用药物，其特征在于：该药物为巴布剂。
9.根据权利要求1-6任一项所述的一种祛风散寒、通络止痛外用药物的制备方法，其特征在于包括下列步骤：
以上二十五味药材，羌活、细辛、没药、桂枝、人参、刺五加、鹿茸七味先浸泡2小时，再用水蒸气蒸馏提取挥发油，挥发油、药液另器保存；药渣与续断，骨碎补，制川乌，草制乌，制马钱子，黄柏，贯众，地枫皮，地龙，桑寄生等10味药材一起用70％乙醇提取3次，加醇量为6倍/次，提取时间1.5小时/次，滤出醇提液，减压回收乙醇至相对密度1.28-1.30浸膏另器保存，淫羊藿，甘草，牛膝，金银花，乌梅，麻黄，红花，乌梢蛇，加8倍水，提取3次，每次提取1.5小时，药液与提挥发油药材的药液合并，减压浓缩至相对密度为1.045～1.065，离心除杂质，上清液减压浓缩至相对密度1.28-1.30与醇提浸膏合并，然后按常规工艺制成药剂学上可接受的制剂剂型。
10.根据权利要求9所述的一种祛风散寒、通络止痛外用药物的制备方法，其特征在于包括下列步骤：
以上二十五味药材，羌活、细辛、没药、桂枝、人参、刺五加、鹿茸七味先浸泡2小时，再用水蒸气蒸馏提取挥发油，挥发油、药液另器保存；药渣与续断，骨碎补，制川乌，草制乌，制马钱子，黄柏，贯众，地枫皮，地龙，桑寄生等10味药材一起用70％乙醇提取3次，加醇量为6倍/次，提取时间1.5小时/次，滤出醇提液，减压回收乙醇至相对密度1.28-1.30浸膏另器保存，淫羊藿，甘草，牛膝，金银花，乌梅，麻黄，红花，乌梢蛇，加8倍水，提取3次，每次提取1.5小时，药液与提挥发油药材的药液合并，减压浓缩至相对密度为1.045～1.065，离心除杂质，上清液减压浓缩至相对密度1.28-1.30与醇提浸膏合并，称取聚丙烯酸钠、卡波姆、明胶、桃胶、甘油、氢氧化钠、蒸馏水，制成基质，加入挥发油，氮酮、丙二醇各1％，泥泊金乙酯、丙酯各0.05％，EDTA-Na0.01％，中药浸膏，搅拌混合成胶，涂布、切割、包装。
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