CN1964718A - 来普霉素化合物 - Google Patents
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Abstract
结构式I的来普霉素化合物具有抗肿瘤活性,结构式I中,R0,R1,R2,R10,R11,R12,R13,R14和m按照说明书中定义。
Description
技术领域
本发明涉及来普霉素(leptomycin)化合物及其制备方法和使用方法。
背景技术
来普霉素B(“LMB”)是可以从链霉菌(Steptomyces spp.)分离的抗肿瘤和抗微生物的天然产物,如在Hokanson等的US 4,771,070(1988)和Nettleton等的US 4,792,522(1988)中报道的。
来普霉素B
LMB是称作来普霉素来普霉素家族的天然产物的原型,可由在分子(C1-C5)的一端的2,3-脱氢-δ-戊内酯环以及具有离开C5的6E,8Z和12E,14E二烯体系的延伸链表征。已发现硝基甲基戊内酯LMB同型物无活性,而生物素LMB是活性的,提出2,3-脱氢-δ-戊内酯结构是一种重要的药效基团。Kudo等,Exp.Cell Res.1998,242,540-547。
硝基甲基戊内酯来普霉素B同型物
生物素来普霉素B
来普霉素来普霉素家族的其它成员包括来普霉素A,拉塔酮(ratjadone),似蛇霉素(anguinomycin)A-D,卡利他汀(callystatin)A,上总霉素(kazusamycin)A(也称作CL-1957B),上总霉素B(也称作CL-1957E),来普他汀(leptolstatin)和来普福宁A-D(leptofuranins A-D)。结构非常类似于来普霉素B的其它族成员的结构式如下:
来普霉素A: Ra=CH3 Rb=CH3 Rc=H
似蛇霉素A: Ra=CH3 Rb=H Rc=H
似蛇霉素B: Ra = Rb=H Rc=H
CH2CH2CH3
上总霉素 Ra = Rb=CH3 Rc=OH
(kasuzamycin)A: CH2CH2CH3
上总霉素B: Ra=CH3 Rb=CH3 Rc=OH
虽然,最初按抗微生物活性筛选的结果确定类别,目前对LMB的兴趣主要针对其作为抗肿瘤剂的可能性。例如,参见Komiyama等,J.Antibiotics 1985,38(3),427-429;Wang等,US 2003/0162740 A1(2003)。在细胞水平,LMB通过将细胞停滞在细胞周期的G1和G2相末起作用。在分子水平,LMB作用是核输出受体CRM1的抑制剂,它能束缚并影响“货物蛋白质”如P53,P73,STAT1的核迁移,(i)ADAR1,Rev,actin,and Bcr-ab1.Nishi等,J.Biol.Chem.1994,269(9),6320-6324;Fukuda等,Nature 1997,390,308-311;Kudo等,如上引用。
然而,LMB对哺乳动物细胞显示明显的细胞毒性(Hamamoto等,J.Antibiotics 1983,36(6),639-645),减弱了其作为抗癌剂的吸引性。因此,LMB的1期试验由于极高毒性而在1994年停止。在努力鉴别具有与LMB类似的活性但毒性较低的更有希望的抗癌剂中,用许多种细菌和真菌对LMB进行生物转化筛选,从该筛选中分离许多衍生物(Kuhnt等,Applied Environ.Microbiol.1998,64(2),714-720):26-羟基来普霉素B,4,11-二羟基来普霉素B,2,3-脱氢来普霉素B和来普霉素B谷氨酰胺(glutaminamide)。
来普霉素B谷氨酰胺
这种方法存在一些缺陷。所得产物的结构在多变性方面较差:引入的官能团的类型受到限制,并且引入的位置是随机的,排除了结构-活性间关系的系统演变。而努力获得的化合物数量较小(从涉及总数101种细菌和真菌菌株的筛选中获得四种化合物)。生物转化产率常较低。因此,需要另一种能获得可用作抗癌剂的来普霉素化合物的方法。
发明概述
本发明第一方面,提供具有以下结构式I的化合物,和其药学上可接受的酯,盐,溶剂化物,水合物和前药形式:
式中,m是0、1、2、3、4或5;
R0是H、C1-C5烷基、C2-C5链烯基或C2-C5炔基;
各R1独立地是H、C1-C5烷基、C2-C5链烯基或C2-C5炔基;
R2是H、芳基、环烷基、杂环部分,
其中,R3是H、C1-C5烷基、C2-C5烯基或C2-C5炔基,前提是,当m为0时,R3不是H;
R4是H、C1-C5烷基、C2-C5烯基、C2-C5炔基、芳基、环烷基或杂环部分;
R5是H、C1-C5烷基、C2-C5烯基、C2-C5炔基、芳基、环烷基、杂环部分或C(=O)O(C1-C5烷基);和
R6是H、C1-C5烷基、C2-C5烯基、C2-C5炔基、环烷基或荧光部分;或者,R5和R6与它们共同连接的氮结合,形成含氮的4元、5元、6元或7元杂环结构;
R10是CH3或CH2CH2OH;
R11是H或OH;
R12是CH3、CH2CH3或CH(OH)CH3;和
R13和R14中一个是H或CH3,另一个是H或OH。
第二实施方式中,提供一种抑制靶细胞增殖的方法,该方法包括使靶细胞与有效量的本发明的化合物接触。靶细胞可以是癌细胞,尤其是人乳癌、肺癌、卵巢癌、前列腺癌或白血病细胞。靶细胞还可以是人乳头瘤病毒(HPV)-相关的宫颈癌细胞或膀胱癌细胞。
第三实施方式中,提供治疗高增生(hyperproliferative)疾病的方法,该方法包括给予患有这种高增生疾病的患者治疗有效量的本发明化合物。这样治疗的高增生疾病可以是癌症,尤其是乳癌、肺癌、卵巢癌、前列腺癌或白血病。高增生疾病还可以是HPV-相关的宫颈癌或膀胱癌。患者优选是哺乳动物,尤其是人类。
第四实施方式中,提供了本发明化合物在制备用于治疗高增生疾病的药剂中的用途,所述疾病可以是癌症,尤其是乳癌、肺癌、卵巢癌、前列腺癌或白血病。癌症也可以是HPV-相关的宫颈癌或膀胱癌。
第五实施方式中,提供一种包含本发明化合物和一种赋形剂的药物制剂。
第六实施方式中,提供一种抑制通过CRM1-介导的过程从细胞核输出蛋白质的方法,该方法包括使所述细胞与抑制量的本发明化合物接触。
第七实施方式中,提供一种治疗膀胱癌的方法,该方法包括给予膀胱癌患者治疗有效量的来普霉素B。
发明详述
定义
“烷基”表示在其最长链部分具有特定数量碳原子的任选取代的直链或支链烃部分(如,在“C3烷基”,“C1-C5烷基”,或“C1-C5烷基”中,后两个词语指在最长链部分有1-5个碳原子的烷基),或没有指定碳原子数量时,最长链部分有1-4个碳原子。
“链烯基”表示有至少一个碳-碳双键和在其最长链部分具有特定数量碳原子的任选取代的直链或支链烃部分(如,在“C3链烯基”,“C2-C5链烯基”或“C2-C5链烯基”,后两个词语指在最长链部分有2-5个碳原子的链烯基),或没有指定碳原子数量时,最长链部分有2-4个碳原子。
“炔基”表示有至少一个碳-碳三键和在其最长链部分具有特定数量碳原子的任选取代的直链或支链烃部分(如,在“C3炔基”,“C2-C5炔基”或“C2-C5炔基”,后两个词语指指在最长链部分有2-5个碳原子的炔基),或没有指定碳原子数量时,最长链部分有2-4个碳原子。
“芳基”表示在环部分有1-20个碳原子的任选取代的芳族单环、稠合双环或稠合多环烃基或杂环基,如苯基、萘基、吡咯基、吲哚基、吡唑基、吡唑啉基、咪唑基、唑基、唑啉基、异唑基、噻唑基、噻二唑基(thiadazolyl)、异噻唑基、呋喃基、噻吩基、二唑基、吡啶基、N-氧代-吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、哒嗪基、四嗪基、三嗪基、三唑基、苯并噻唑基、苯并唑基、苯并噻吩基、喹啉基、喹啉基-N-氧化物、异喹啉基、苯并咪唑基、苯并呋喃基、色酮基(chromonyl)、香豆素基(coumarinyl)、噌啉基、喹啉基、吲唑基、苯并异噻唑基、苯并异唑基、苯并二嗪基、四唑基、苯并呋咱基(benzofurazanyl)、苯并噻喃基、苯并吡唑基、二氢吲哚基、异色酮基(isochromanyl)、异二氢吲哚基、1,5-二氮杂萘基、2,3-二氮杂萘基、嘌呤基、喹唑啉基等。
“环烷基”表示任选取代的饱和或不饱和的非芳族环的烃环体系,优选含有1-3个环,每个环上有3-7碳,它还可以和饱和或不饱和的C3-C7碳环稠合。环烷基环体系的例子包括:环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、环辛基、环癸基、环十二烷基和金刚烷基。
“芳烷基”表示被芳基部分取代的烷基部分,在烷基部分有开放(open)(未满足的)价数,例如,苄基、苯乙基、N-咪唑基乙基(imidazoylethyl)、N-吗啉基乙基、乙基吡啶基等。
“杂环”或“杂环的”表示任选取代的完全饱和或不饱和的芳族或非芳族环体系,例如,是4元至7元的单环,7元至11元的双环或10元至15元三环体系,所述环体系有至少一个在含碳原子环中的杂原子。“杂芳基”表示其中的环体系是芳基的杂环。含有杂原子的杂环基中的各环可以有1个、2个或3个选自N、O和S的杂原子,其中N和S可任选被氧化,并且N可任选季铵化。单环杂环的环体系例子包括:吡咯烷基、吡咯基、生物素基(biotinyl)、吲哚基、吡唑基、氧杂环丁基、吡唑啉基、咪唑基、吡唑啉基、咪唑啉烷基、唑基、唑烷基、唑啉基、异唑基、噻唑基、噻二唑基、噻唑烷基、异噻唑基、异噻唑烷基、呋喃基、四氢呋喃基、噻吩基、二唑基、哌啶基、哌嗪基、2-氧代哌嗪基、2-氧代哌啶基、2-氧代吡咯烷基、2-氧代氮杂基、氮杂基、4-哌啶酮基、吡啶基、N-氧代-吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、哒嗪基、四氢吡喃基、四氢噻喃基、四氢噻喃基砜、吗啉基、硫代吗啉基、硫代吗啉基亚砜、硫代吗啉基砜、1,3-二氧戊环和四氢-1,1-二氧噻吩基、二烷基、异噻唑烷基、硫化三亚甲基(thietanyl),硫杂丙烷基、四唑基、三嗪基和三唑基等。优选的杂环基团包括:吡啶基、吗啉基、吡嗪基、嘧啶基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、噻唑基、唑基、异唑基、噻二唑基、二唑基、噻吩基、呋喃基、喹啉基、异喹啉基、哌嗪基和哌啶基。
例如,用“取代或未取代的”或“任选取代的”词语表示基团可以被取代时,这种基团可以具有一个或多个独立选择的取代基,优选有1-5取代基,更优选有2-5取代基。应理解,本领域的技术人员可以选择取代基和取代方式,以提供化学稳定,并能采用本领域已知的技术以及本文提出的方法合成的化合物。除了本文列出的那些取代基外,合适的取代基例子包括:烷基、链烯基、炔基、芳基、卤素、三氟甲氧基、三氟甲基、羟基、烷氧基、环烷氧基、杂环氧基、烷酰基、烷酰氧基、氨基、烷基氨基季铵、芳烷基氨基、杂环烷基、环烷基氨基、杂环氨基、二烷基氨基、烷酰基氨基、硫、烷硫基、环烷硫基、杂环硫基(heterocyclothio)、脲基、硝基、氰基、羧基、羧烷基、氨基甲酰基、烷氧基羰基、烷基硫羰基、芳基硫羰基、烷基磺酰基、磺酰氨基、芳氧基等。对烷基、链烯基和炔基部分的取代基数量优选为1-3个,可独立地选自:N-吡咯烷基、N-吗啉基、N-氮杂环丁基、羟基、卤素、烷氧基、氰基、氨基、烷基氨基和二烷基氨基。对芳基、环烷基和杂环烷基部分的取代基数量优选为1-3个,并独立地选自:烷基、链烯基、炔基、羟烷基、卤代烷基、羟基、卤素、烷氧基、氰基、氨基烷基、烷基氨基烷基、二烷基氨基烷基、氨基、烷基氨基和二烷基氨基。
除非明确指定具体的立体异构体(如,由在结构式中相关立体中心的粗线或虚线键标出,或结构式中用E或Z构形表示双键,或使用立体化学命名法),所有的立体异构体的纯化合物或混合物形式都包含在本发明范围之内。除非另外指出,单独的对映异构体,非对映体,几何异构体以及它们的组合和混合物都包含在本发明内。多晶态形式和溶剂化物也包含在本发明范围之内。
“药学上可接受的酯”表示能在体内(例如人体内)水解,产生母体化合物或其盐,或本身具有类似于母体化合物的活性的酯类。合适的酯基团包括但不限于:源自药学上可接受的脂族羧酸的那些酯,特别是链烷酸、链烯酸、环烷酸和链烷双酸,其中的烷基或链烯基部分各自优选具有不超过6个的碳原子。说明性的酯包括:甲酸酯、乙酸酯、丙酸酯、丁酸酯、丙烯酸酯、柠檬酸酯、琥珀酸酯和乙基琥珀酸酯。
“药学上可接受的盐”表示,根据在此所述的化合物上的具体取代基,可用相对无毒性的酸或碱制备的该活性化合物的盐。当化合物含有相对酸性的官能度时,通过使这种化合物的中性形式与足量的所需碱接触或在合适的惰性溶剂中接触,可获得碱加成盐。药学上可接受的碱加成盐例子包括:钠、钾、钙、铵、有机氨基的盐,或镁盐,或类似的盐。当化合物含有相对碱性官能度时,通过使这种化合物的中性形式与足量的所需酸接触或在合适的惰性溶剂中接触,可获得酸加成盐。药学上可接受的酸加成盐的例子包括:由无机酸如盐酸、氢溴酸、硝酸、碳酸、单氢碳酸(monohydrogen-carbonic)、磷酸、单氢磷酸、二氢磷酸、硫酸、单氢硫酸、氢碘酸或含磷酸(phosphorous acids)等形成的加成盐,以及由相对无毒性的有机酸,如乙酸、抗坏血酸、丙酸、异丁酸、马来酸、丙二酸、乳酸、苹果酸、谷氨酸、苯甲酸、琥珀酸、辛二酸、富马酸、扁桃酸、邻苯二甲酸、苯磺酸、对甲苯磺酸、柠檬酸、酒石酸、甲磺酸、乳糖酸等形成的加成盐。还包括氨基酸如精氨酸等的盐,以及如葡糖醛酸或半乳糖醛酸等的有机酸的盐。当一种化合物同时含有碱性官能度和酸性官能度时,可转化为碱加成盐或酸加成盐。
本发明范围内包括本发明化合物的前药。这种前药一般是容易在体内转变为所需化合物的功能衍生物。因此,本发明的治疗方法中,术语“给药”可包括用明确揭示的化合物治疗所描述的各种疾病或以未明确揭示,但在给予需要的对象后能在体内转化为特定化合物的化合物治疗。例如在Wermuth,″Designing Prodrugs and Bioprecursors,″于Wermuth编.,The Practice ofMedicinal Chemistry,第2版,第561-586页(Academic Press 2003)(其内容参考结合于本文)中描述了选择和制备合适的前药衍生物的常用方法。前药包括能在体内(例如,在人体内)水解生成本发明的化合物或其盐的酯类。合适的酯基包括但不限于:源自药学上可接受的脂族羧酸的那些酯,特别是烷酸、链烯酸、环烷酸和烷双酸,其中的烷基或烯基部分各自优选具有不超过6个的碳原子。说明性的酯包括:甲酸酯、乙酸酯、丙酸酯、丁酸酯、丙烯酸酯、柠檬酸酯、琥珀酸酯和乙基琥珀酸酯。
“治疗有效量”表示能在研究人员、兽医、医生或其它临床医生研究的组织体系、动物或人中引起生物或药物反应的活性化合物或药剂的量,所述反应包括缓解治疗的疾病或紊乱的症状。
当陈述一个范围,如“C1-C5烷基”或“5-10%”时,这些范围包括范围的两个端点。
化合物和方法
再参见结构式I,在优选的实施方式中,R0是H,R10是CH3,R11是H,R12是CH3,R13是CH3,R14是H,而R1、R2和m保持在上面发明概述中指定的含义。
在另一个优选实施方式中,R0是H,R10是CH3,R11是H,R12是CH3或CH2CH3,R13是H,R14是H,而R1,R2和m保持在上面发明概述中指定的含义。
在又一个优选的实施方式中,R0是H,R10是CH2OH,R11是H,R12是CH3或CH2CH3,R13是CH3,R14是H,而R1,R2和m保持在上面发明概述中指定的含义。
在本发明特别优选的实施方式,R0是H,R10是CH3,R11是H,R12是CH2CH3,R13是CH3,R14是H,对应于结构式Ia的化合物。(R1,R2和m保持在上面发明概述中指定的含义。)
式中,R2是杂环部分,优选是
其中n是2,3或4。
在一个优选实施方式中,R3不是H。
R6荧光部分的例子包括:
将这些荧光部分和其它荧光与LMB连接的合成子可从Molecular Probes,Eugene,Oregon,USA获得。除了未预料到的细胞毒性外,带有荧光探针的LMB化合物在对LMB化合物的作用机理和细胞内分布的研究中可用作生物标记物。但是,在某些实施方式中,R6优选不是荧光部分。
式Ia的化合物的说明性例子示于表1。
本发明化合物能用于治疗疾病,例如但不限于高增生疾病,包括:头部和颈部癌症,包括头,颈,鼻腔,鼻旁窦,鼻咽,口腔,口咽,喉,下咽部,唾液腺的肿瘤和副神经节瘤;肝脏和胆道癌,特别是肝细胞癌;肠癌,特别是结肠直肠癌;治疗卵巢癌;小细胞和非小细胞肺癌;乳癌;肉瘤,如纤维肉瘤,恶性纤维组织细胞瘤,胚胎性横纹肌肉瘤,平滑肌肉瘤,神经纤维肉瘤,骨肉瘤,滑膜肉瘤,脂肉瘤和蜂窝状软部肉瘤;中枢神经系统的瘤,特别是脑瘤;淋巴瘤,如Hodgkin氏淋巴瘤,淋巴浆细胞增多性(lymphoplasmacytoid)淋巴瘤,滤泡性淋巴瘤,粘膜相关的淋巴组织淋巴瘤,套细胞淋巴瘤,B-品系大细胞淋巴瘤,Burkitt淋巴瘤和T-细胞恶性大细胞淋巴瘤。临床上,实施在此所述的方法和使用所述的组合物会导致癌生长的尺寸变小、数量减少和/或相关症状减轻(当可适用时)。病理上,实施在此所述的方法和使用所述的组合物会产生病理上的相应反应,如:抑制癌细胞增殖,减小癌或肿瘤的大小,防止进一步的扩散以及抑制肿瘤血管发生。治疗这类疾病的方法包括给予对象治疗有效量的本发明的组合物。必要时可重复该方法。特别是,所述癌症可以是前列腺癌、人乳头瘤病毒(HPV)相关的宫颈癌、白血病(尤其是慢性骨髓性白血病或CML)和膀胱癌。
本发明的化合物还能治疗以细胞高增殖为特征的非癌症紊乱。这种紊乱的说明性例子包括但不限于:萎缩性胃炎,炎性溶血性贫血(inflammatoryhemolytic anemia),移植排斥,炎性中性粒细胞减少(inflammatory neutropenia),大疱性类天疱疮,乳糜泻,脱髓鞘神经病(demyelinating neuropathies),皮肌炎,炎性肠疾病(inflammatory bowel disease)(溃疡性结肠炎和Crohn疾病),多发性硬化,心肌炎,肌炎,鼻息肉,慢性鼻旁窦炎,慢性天疱疮,原发性肾小球肾炎,牛皮癣,外科手术粘连(surgical adhesions),狭窄或再狭窄,巩膜炎,硬皮症,湿疹(包括特异反应性皮炎,刺激性皮炎,过敏性皮炎),牙周病(即,牙周炎),多囊肾病和I型糖尿病。其它例子包括:脉管炎(如,Giant细胞动脉炎(暂时性动脉炎,Takayasu动脉炎),结节性多动脉炎,变应性脉管炎和肉芽肿瘤(Churg-Strauss病),多脉管重叠综合征,过敏性脉管炎(Henoch-Schonlein紫癜),血清病,药物诱发的脉管炎,感染性脉管炎,肿瘤性脉管炎,结缔组织病相关的脉管炎,补体系统先天性缺陷相关的脉管炎,Wegener肉芽肿病,Kawasaki病,中枢神经系统脉管炎,Buerger病和系统性硬化);胃肠道疾病(如,胰腺炎,Crohn病,溃疡性结肠炎,溃疡性直肠炎,原发硬化型胆管炎,包括自发的任何原因的良性狭窄(如,胆管、食管、十二指肠、小肠或结肠狭窄);呼吸道疾病(如,哮喘,过敏性肺炎,石棉肺,矽肺和其它形式硅肺,慢性支气管炎和慢性阻塞性气道疾病);鼻泪管病(如,包括自发的任何原因的狭窄);和咽鼓管疾病(eustachean tube diseases)(如,包括自发的任何原因的狭窄)。尤其是非癌的病症可以是足底疣,心肥大(cardiac hypertrophy)或癌性恶病质。
本发明的化合物可以与其它抗癌剂或细胞毒剂组合给药,所述抗癌剂或细胞毒剂包括:烷基化剂,血管发生抑制剂,抗代谢剂,DNA清除剂,DNA交联剂,DNA插入剂,DNA小沟粘合剂,烯二炔,热休克蛋白质90抑制剂,组蛋白脱乙酰酶抑制剂(histone deacetylase inhibitor),微管稳定剂,核苷(嘌呤或嘧啶)同型物,核输出抑制剂(nuclear export inhibitor),蛋白酶抑制剂,拓扑异构酶(I或II)抑制剂,酪氨酸激酶抑制剂。特异性的抗癌剂或抗细胞毒素剂包括:β-拉帕醌,柄型菌素P3,金他汀(auristatin),比卡鲁胺,博来霉素,波特唑米(bortezomib),白消安,刺孢霉素,卡利他汀(callistatin)A,喜树碱,卡培他滨,CC-1065,顺铂,克利素(cryptophycin),红比霉素,盘批海绵内酯(discodermolide),地索唑(disorazole),多西他赛,阿霉素,倍癌霉素,代纳霉素A(dynemycin A)大环内酯类抗肿瘤药(epothilone),依托泊苷,氟尿苷,氟达拉滨,氟尿嘧啶,杰菲替尼(gefitinib),格尔德霉素,17-烯丙基氨基-17-脱甲氧基格尔德霉素(17-AAG),17-(2-二甲基氨基乙基)氨基17-脱甲氧基格尔德霉素(17-DMAG),吉西他滨,羟基脲,伊马替尼(imatinib),干扰素,白介素,伊立替康,来普霉素B,美登素,氨甲喋呤,丝裂霉素C,奥沙利铂,紫杉醇,海绵他汀(spongistatin),辛二酰苯胺异羟肟酸(suberoylanilide hydroxamic acid)(SAHA),硫替派,托泊替康,曲古抑菌素A,长春花碱,长春新碱和长春碱酰胺。
本发明化合物优选经过例如柱层析、高压液相色谱、重结晶或其它纯化技术,以纯化和分离的形式提供。本发明的化合物表示为特定的立体异构体时,这种立体异构体优选基本上不含其它立体异构体。
本发明化合物可以以药物制剂施用,所述制剂包含本发明的化合物和赋形剂。可使用的赋形剂包括载体、表面活性剂、增稠剂或乳化剂、固体粘合剂、分散助剂或悬浮助剂、增溶剂、着色剂、调味剂、包衣、崩解剂、润滑剂、甜味剂、防腐剂、等渗剂以及它们的组合。在Gennaro,编,Remington:The Scienceand Practice of Pharmacy,第20版(Lippincott Williams&Wilkins 2003)中揭示了合适赋形剂的选择和使用,该文献内容参考结合于本文。
组合物可以是任何适当形式,如固体、半固体或液体形式。一般而言,药物制剂可含有与适用于外部、肠内或肠胃外施用的有机或无机载体或赋形剂混合的一种或多种本发明的化合物作为活性组分。活性组分可以与例如常用的无毒性的药学上可接受的载体掺混,所述载体适用于片剂、颗粒剂、胶囊剂、栓剂、子宫帽、溶液、乳液、悬浮液和其它任何适用的形式。可使用的载体包括水、葡萄糖、乳糖、阿拉伯胶、明胶、甘露醇、淀粉糊料、三硅酸镁、滑石、玉米淀粉、角蛋白、胶体二氧化硅、马铃薯淀粉、尿素和其它适合制备固体、半固体或液体形式的载体。此外,可使用辅助的稳定剂、增稠剂、着色剂和香料。优选的给药方式包括静脉内给药,在某些适应症如子宫颈癌、膀胱癌或足底疣情况下局部用药。
可以将本发明的化合物配制成微胶囊和纳米微粒。例如在Bosch等,US5,510,118(1996);De Castro,US 5,534,270(1996);和Bagchi等,US 5,662,883(1997)中描述了常用的制备方法,这些专利文献参考结合于本文。通过提高表面积与体积的比值,这些制剂实现了用其它方法不能口腔递送的化合物的口腔递送。
本发明化合物的剂量按体重在约0.1-100mg/kg/天的数量级范围,优选约1-50mmg/kg/天。更优选剂量为5-20mg/kg/天,相应于假定一个70kg的病人350-1400mg/病人/天。本发明化合物可基于一定间隔,即半周一次、每周一次或每月一次给药。
与载体混合制备单一剂型的活性组分的量可依据治疗的主体以及给药的特定方式进行变化。例如,用于给人类口服的制剂可含有载体材料,其量占总组合物的约5-95%。单位剂型一般含有约5-500mg活性组分。
但是,应理解,对任意特定的患者的具体剂量应取决于许多因素。这些因素包括:所用特定化合物的活性;对象的年龄、体重、健康状况、性别和饮食;给药的时间和途径以及药物的排泄速率;治疗时是否采用药物组合;以及具体疾病的严重性或治疗的病况。
本领域的技术人员应理解,本发明具有伯胺或仲胺基团的化合物,如化合物15-17可用于治疗结合物,所述结合物包含寻靶部分、联接子部分和活性剂。这种结合物中,来普霉素化合物是活性剂或者是弹头,通过寻靶部分的作用传递到靶细胞。寻靶部分可以是一种显示对靶细胞上的特征分子亲合力的抗体(尤其是单克隆抗体)。为了具体说明,在癌症化疗中,特征分子可以是被单克隆抗体识别的与肿瘤相关的抗原。联接子部分设计为在结合物被癌细胞接纳到其内部或在癌细胞附近时切割,释放来普霉素作为抗癌药物的来普霉素化合物。伯胺或仲胺用作将来普霉素化合物与联接子部分相连的方便结合点,特别是“自贡献”基团,如对氨基苄氧基羰基(PABC)基团。例如,可参见Carl等,J. Med.Chem.1981,24(3),479-480;和Carl等,WO 81/01145(1981);其内容参考结合于本文。
不受理论的束缚,我们相信本发明的化合物的作用是通过类似于LMB的机制来抑制CRM-I介导的目标癌细胞中的核输出过程,因此诱发凋亡。LMB中的2,3-脱氢-δ-戊内酯部分是Michael反应的受体。已表明LMB能通过在该位置与CRM1的半胱氨酸529形成Michael加成物来抑制CRM1(Kudo等,Proc.Nat′lAcad.Sci(USA)1999,96(3),9112-9117)。本发明化合物保留了这种重要的2,3-脱氢-δ-戊内酯药效基团,因此可以预期有同样抑制机制的功能。
许多癌细胞具有突变,导致凋亡诱导性肿瘤抑制蛋白质p53丧失功能。Vousden等,Nat.Rev.Cancer 2002,2,594-504。这类癌症的例子包括前列腺癌和人乳头瘤病毒(HPV)相关的宫颈癌。LMB显示能使p53蛋白在宫颈癌细胞的细胞核内累积。Lane等,Proc.Nat′lAcad.Sci(USA)2000,97,8501-8506。在以由于DNA受损的p53缺陷性正向调节为特征的前列腺癌中,细胞核缺乏p53。LMB显示能将p53限制在细胞核中并诱发凋亡。因此,前列腺癌细胞对LMB非常敏感。Peehl等,Prostate 2003,54,258-267。
本发明化合物可与其它抗癌剂,特别是酪氨酸激酶抑制剂如伊马替尼(imatinib)(其甲磺酸盐具有商品名GleevecTM)协同治疗适当类型的癌症。某些癌症如慢性粒细胞性白血病(CML)的特征是融合蛋白质Bcr-Abl的表达。虽然正常的Bcr-Abl并不输入细胞核,但是Bcr-Abl/伊马替尼络合物输入到细胞核。如果LMB也存在,它能防止Bcr-Abl从细胞核输出。此外,受核限制的Bcr-Abl诱发凋亡,导致Bcr-Abl阳性细胞死亡。参见如Vigneri等,Nature Medicine 2001,7,228-234;Wang等,US 2003/0162740 A1(2003)。因此,伊马替尼与本发明LMB化合物的组合能提供协同攻击Bcr-Abl阳性癌细胞的机制。
因此,本发明化合物通过与CRM1形成共价加成物,并干扰CRM1介导的蛋白质(诸如p53、p73、Bcr-Abl、STAT1、(i)ADAR1、Rev和肌动蛋白)的输出过程,可用于抑制如上所述的蛋白质从细胞核输出。一个实施方式中,被抑制的蛋白质是p53。在另一个实施方式中,被抑制的蛋白质是Bcr-Abl。虽然预期视细胞类型和目标蛋白质可变化,所用的抑制物量一般在0.3-740nM,优选0.3-20nM,更优选0.3-2.0nM范围。
参考下面的实施例能进一步理解本发明的实施情况,这些实施例只是达到说明目的,不构成限制。
实施例1-溶液相合成的通用方法
本发明化合物可采用溶液相方法合成,即由下面反应式,用LMB作为原型合成。
通过发酵来自美国典型培养物保藏中心(Manassas,Virginia)的链霉菌(Streptomyces sp.)ATCC 39366,获得LMB。由从ATCC接受的试样筛选单个分离物,产生高产分离物,可用于发酵。LMB也可以从Sigma-Aldrich(St.Louis,Missouri)购得。
将LMB(12.2mg,0.027mmol,1当量)、N-羟基苯并三唑(“HOBt”,3.4mg,0.025mmol,1.1当量)和六氟-磷酸(苯并三唑-1-氧基)三吡咯烷基(“PyBOP”,13mg,0.025mmol,1.1当量)溶于无水N,N-二甲基甲酰胺(“DMF5”400μL)。顺序加入胺A(0.025mmol,1.1当量)和二异丙基乙胺(“DIEA”,也称作Hünig碱,16μL,0.09mmol,4当量)。氮气下室温搅拌反应物20小时。将反应物分配在水和二氯甲烷(“DCM”)之间。有机层用水(2×)、饱和碳酸氢钠(1×)和盐水(1×)洗涤。用硫酸钠干燥该有机层,过滤并真空浓缩。将粗制产物(油状物)加到二氧化硅闪蒸柱(0.5×5cm)上,用0-60%丙酮/己烷或0-10%甲醇/DCM进行洗脱。收集含产物Ia的馏份并真空浓缩。
实施例2-固相合成的常用方法
或者,采用固相合成,制备本发明的化合物,如以下化学式所示:
在一个10mL固相反应器中加入PS-HOBT(HL)树脂(B,267mg,~0.24mmol,1.0当量,0.9mmol/g,Argonaut;该树脂基质在上面化学式中用黑色小球标注)和4-二甲基氨基吡啶(“DMAP”,18mg,0.144mmol.0.6当量)在DCM(3.2mL)中的溶液。在该反应混合物中加入LMB(200mg,0.37mmol,1.53当量)在无水DMF(960μL)溶液中,氮气中搅拌1分钟。在反应物中加入二异丙基碳二亚胺(“DIC”,170μL,1.06mmol,4.4当量)的DCM溶液,室温下反应混合物在一个振动台上搅拌3小时。真空过滤除去溶剂。树脂用DMF(3×)、DCM(3×)、DMF(3×)和四氢呋喃(3×)洗涤,获得加入了LMB的树脂C,回收并于-20℃储存。
将胺A(0.036mmol,0.6当量)和二异丙基乙胺(7μL,0.04mmol,0.67当量)溶解在无水DCM(1mL)中。将加入了LMB的树脂C(110mg,约0.06mmol,1当量)悬浮于该溶液中,室温搅拌3小时。过滤该溶液,树脂用DCM(3×)漂洗。合并的滤液真空浓缩,产生黄色油状物。将该粗制油状物应用于二氧化硅闪蒸柱(0.5×5cm),并用0-60%丙酮/己烷或0-10%甲醇/DCM进行洗脱。收集含产物Ia的馏份并真空浓缩。
实施例3-化合物1
按照实施例1的方法,用甲胺(Sigma-Aldrich)制备化合物1。对C34H51NO5计算的LRMS:553.4;基准554.4(M+H)。
实施例4-化合物2
按照实施例1的方法,用2-氨基乙醇(Sigma-Aldrich)制备化合物2。13C NMR(100MHz,CDCl3)δ12.27,13.02,13.25,13.52,16.06,17.94,20.91,26.45,30.90,32.22,33.27,33.48,40.76,42.27,45.11,45.59,547.25,62.47,73.41,81.59,119.50,119.85,122.50,128.06,130.20,135.04,135.42,136.37,136.96,151.83,152.69,164.58,168.37,215.39;对C35H53NO6计算的HRMS:583.39729;基准584.39423(M+H)。
实施例5-化合物3
按照实施例1的方法,用4-苯基苄胺(Sigma-Aldrich)制备化合物3。13CNMR(100MHz,CDCl3)δ12.27,12.65,13.00,13.35,13.67,16.09,18.04,20.92,26.49,32.23,33.30,33.48,40.77,42.91,45.00,545.49,46.92,73.98,81.48,119.60,119.92,122.59,126.99,127.23,127.31,128.02,128.23,128.72,130.16,135.07,135.46,136.30,136.91,137.69,151.56,152.58,164.35,166.69,215.25;对C46H59NO5计算的LRMS:705.4;基准707.0(M+H)。
实施例6-化合物4
按照实施例1的方法,用3-(2-氨基乙基)吡啶(从Lancaster Synthesis购得)制备化合物4。13C NMR(100MHz,CDCl3)δ12.27,12.99,13.09,13.52,16.11,17.96,20.87,26.46,30.87,32.19,32.95,33.30,33.48,40.06,40.76,44.96,45.55,47.20,73.59,81.48,119.57,119.90,122.58,123.54,127.96,l28.15,130.11,134.78,135.09,135.42,136.28,136.54,136.91,147.52,149.86,151.64,152.33,164.37,167.05,215.20;对C40H56N2O5计算的LRMS:644.9;基准646.0(M+H)。
实施例7-化合物5
按照实施例1的方法,用6-氨基吲唑(Sigma-Aldrich)制备化合物5。对C40H53N3O5计算的LRMS:655.9;基准657.0(M+H)。
实施例8-化合物6
按照实施例1的方法,用N-Boc-乙二胺(Sigma-Aldrich)制备化合物6。13CNMR(100MHz,CDCl3)δ12.26;12.87,12.97,13.51,16.11,17.84,20.84,26.30,26.38,26.45,28.30,32.15,33.28,33.48,39.94,40.50,40.74,45.05,45.51,45.60,46.19,46.23,47.03,73.82,79.29,81.46,119.80,119.91,5122.60,127.91,128.16,130.08,135.10,135.40,136.23,136.89,151.60,151.96,156.62,164.34,167.53,215.24;对C40H62N2O7计算的LRMS:682.5;基准683.6(M+H)。
实施例9-化合物7
按照实施例1的方法,用N,N-二甲基乙二胺(Sigma-Aldrich)制备化合物7。13C NMR(100MHz,CDCl3)δ12.29,12.68,12.99,13.53,13.61,16.09,17.77,20.81,26.48,32.13,33.25,33.49,36.28,40.75,45.02,45.52,46.82,57.90,73.93,81.43,119.97,122.66,127.90,128.17,130.05,135.15,135.39,136.27,136.90,151.49,164.25,166.92,215.25;对C37H58N2O5计算的LRMS:610.4;基准612.0(M+H)。
实施例10-化合物8
按照实施例1的方法,用4-(3-氨基丙基)吗啉(Sigma-Aldrich)制备化合物8。13C NMR(100MHz,CDCl3)δ8.61,12.28,12.84,12.99,13.56,16.11,17.86,20.84,25.16,26.47,32.17,33.22,33.49,38.17,40.76,45.03,45.52,46.01,46.95,53.43,57.15,66.61,73.72,81.46,119.94,120.03,122.62,127.94,128.14,130.09,135.12,135.42,136.31,136.90,151.57,215.27;对C40H62N2O6计算的LRMS:666.5;基准667.5(M+H)。
实施例11-化合物9
按照实施例1的方法,用2-苯氧基乙胺(Sigma-Aldrich)制备化合物9。13CNMR(100MHz,CDCl3)δ12.28,12.65,13.00,13.54,13.63,16.08,17.95,20.87,26.48,32.19,33.26,33.48,38.57,40.76,44.99,45.51,46.85,66.75,74.00,81.45,114.39,119.60,119.96,121.00,122.62,127.98,128.17,129.47,130.10,135.09,135.43,136.30,136.89,151.53,152.58,158.46,166.87,215.20;对C41H57NO6计算的LRMS:659.4;基准661.0(M+H)。
实施例12-化合物10
按照实施例1的方法,用甘氨酸甲酯(从Novabiochem购得)制备化合物10。13C NMR(100MHz,CDCl3)δ12.27,12.77,12.99,13.52,16.06,18.00,20.84,26.47,31.36,32.16,33.25,33.47,36.43,40.74,40.94,45.06,45.52,46.90,52.22,73.91,81.45,118.95,119.94,122.62,127.95,128.14,130.10,135.09,135.41,136.30,136.89,151.56,153.58,162.49,164.32,166.74,170.67,215.16;对C36H53NO7计算的LRMS:611.4;基准613.0(M+H)。
实施例13-化合物11
按照实施例1的方法,用2-(2-氨基乙基)-1,3-二氧戊环(从TCI-America购得)制备化合物11。13C NMR(100MHz,CDCl3)δ12.28,12.65,12.98,13.52,13.58,16.07,17.84,20.82,26.47,32.14,32.75,33.24,33.48,34.27,40.74,44.95,45.51,46.81,64.85,74.02,81.43,103.67,119.95,120.08,122.64,127.93,128.14,130.06,135.11,135.41,136.29,136.88,151.40,151.52,164.27,166.68,215.20;对C38H57NO7计算的LRMS:639.4;基准641.0(M+H)。
实施例14-化合物12
按照实施例1的方法,用(R)-2-氨基-3-苄氧基-1-丙醇(Sigma-Aldrich)制备化合物12。13C NMR(100MHz,CDCl3)δ12.28,12.84,13.00,13.57,16.08,17.88,20.84,26.48,32.16,33.25,33.48,40.76,45.16,45.52,46.93,50.56,63.87,70.30,73.39,73.81,81.45,119.62,119.94,122.63,127.66,127.84,127.95,128.16,128.45,130.08,135.12,135.41,136.30,136.90,137.59,151.56,152.94,164.34,167.26,215.21;对C43H61NO7计算的LRMS:703.4;基准705.0(M+H)。
实施例15-化合物13
按照实施例1的方法,用D-丙胺酸叔丁酯(Novabiochem)制备化合物13。13C NMR(100MHz,CDCl3)δ12.28,12.60,13.00,13.56,16.07,17.85,18.79,20.85,26.48,27.90,32.18,33.26,33.48,40.74,45.08,45.46,46.80,48.25,74.13,81.50,81.77,119.61,119.97,122.61,127.97,128.18,130.18,135.08,135.42,136.29,136.91,151.52,152.68,165.97,172.53,215.18;对C40H61NO7计算的LRMS:667.4;基准669.0(M+H)。
实施例16-化合物14
按照实施例1的方法,用N-Boc-1,4-丁二胺(从Fluka获得)制备化合物14。13C NMR(100MHz,CDCl3)δ12.25,12.96,13.05,13.51,16.09,17.84,20.83,26.29,26.37,26.45,26.75,27.52,28.33,32.14,33.28,33.46,38.70,40.73,45.00,45.52,46.07,46.17,46.21,47.14,73.67,81.43,119.88,119.96,122.60,127.88,128.16,130.04,135.10,135.38,136.22,136.87,151.43,151.61,156.04,164.32,167.05,215.18;对C42H66N2O7计算的LRMS:710.5;基准711.6(M+H)。
实施例17-化合物15
按照实施例1的方法,用乙二胺(Sigma-Aldrich)制备化合物15,但变化是省略二异丙基乙胺。1H NMR,部分数据,(400MHz,CD3OD)57.13(dd,1H),6.71(d,1H),6.01(d,1H),55.96(dd,1H),5.78(dd,1H),5.69-5.61(m,2H),5.24(d,1H),5.10(ddd,1H),5.03(d,1H),3.77(m,1H),3.56(dd,1H),3.42(app t,2H),3.07(app t,2H),2.84(m,1H),2.73(m,1H),2.63(m,1H),2.26-1.82(m),1.59(m,1H),1.14(d,3H),1.08-1.02(m,9H),0.97(d,3H),0.69(d,3H)。
实施例18-化合物16
按照实施例1的方法,用N-甲基乙二胺制备化合物16,但变化是省略二异丙基乙胺。对C36H57N2O5计算的HRMS:597.4262;基准597.4278(M+H)。
实施例19-化合物17
按照实施例1的方法,用N-异丙基乙二胺(Sigma-Aldrich)制备化合物17,但变化是省略二异丙基乙胺。1H NMR,部分数据,(400MHz,CD3OD)δ7.13(dd,1H),6.71(d,1H),6.03-5.96(m,2H),5.78(dd,1H),5.68-5.61(m,2H),5.24(d,1H),5.10(dd,1H),5.03(d,1H),3.77(m,1H),3.55(dd,1H),3.46(app t,2H),3.26(m,1H),0 3.04(app t,2H),2.84(m 1H),2.71(m,1H),2.63(m,1H),2.27-1.83(m),1.59(m,1H),1.26(d,6H),1.14(d,3H),1.10-1.02(m,9H),0.98(d,3H),0.69(d,3H).
实施例20-化合物18
按照实施例1的方法制备化合物18,但室温下反应时间为12小时。从Molecular Probes,Eugene,Oregon获得胺。
13C NMR(100MHz,CDCl3)δ6.58,11.04,12.28,13.00,13.41,13.51,14.43,16.12,17.59,20.73,26.31,26.39,32.05,33.10,33.50,40.75,45.71,46.18,43.23,47.56,71.96,81.40,111.30,114.39,119.13,119.91,122.68,127.73,128.24,129.90,135.27,136.17,136.89,146.03,147.84,151.55,154.62,160.33,160.89,164.28,166.86,214.74;对C43H59N3O7计算的LRMS:729.4;基准731.0(M+H)。
实施例21-化合物19
按照实施例1的方法制备化合物19。从Molecular Probes获得胺。
13C NMR(100MHz,CDCl3)δ11.25,12.27,12.82,12.97,13.53,14.88,16.12,17.78,20.85,24.73,26.30,26.38,26.47,29.62,32.16,33.25,33.49,35.53,39.72,40.75,45.08,45.51,46.26,47.00,73.77,81.47,117.24,119.73,119.92,120.42,122.63,123.79,127.93,128.16,130.10,133.25,135.11,135.43,136.26,136.90,143.95,151.58,152.26,160.29,164.34,167.56,172.80,215.25;对C49H68BF2N4O6计算的HRMS:857.51945;基准857.52108(M+H)。
实施例22-化合物20
按照实施例1的方法制备化合物20。从Molecular Probes获得胺。
对C60H73BF2N4O7SNa计算的HRMS:1053.51457;基准1053.51533(M+Na)。
实施例24-化合物21
将LMB(20mg,0.037mmol,1当量)溶于无水Et2O(150μL)和THF(100μL)中。在该清澈溶液中加入三乙胺(6.1μL,0.044mmol,1.2当量)和氯甲酸乙酯(4.2μL,0.044mmol,1.2当量),N2中,室温搅拌反应物45分钟。2分钟后反应混合物变混浊。
将粗制活化的LMB滴加到甘氨酸(3.2mg,0.042mmol,1.1当量)在50mMNa2HPO4(100μL),EtOH(50μL)和EtOAc(50μL)的溶液中。室温搅拌该反应混合物1.5小时,不时添加浓的含水KOH,以保持pH约为9。
用2N HCl将反应混合物酸化至pH2,然后分配在EtOAc(2mL)和饱和NH4Cl(2mL)之间。含水层用EtOAc(2mL,2×)萃取。合并的有机部分用盐水(5mL,1×)洗涤,用Na2SO4干燥,过滤和真空浓缩,获得淡黄色油状物。将该粗制产物施用于二氧化硅闪蒸柱(0.5×3cm),用0,5和10%(+0.1%AcOH)MeOH/CH2Cl2洗脱。收集洗脱在5%MeOHZCH2Cl2中的馏份,并真空浓缩,获得化合物21(8.3mg,0.014mmol,37%)。13C NMR(100MHz,CDCl3)δ12.23,12.95,13.27,13.51,13.71,16.06,17.88,20.78,26.47,29.07,32.13,33.15,33.45,40.73,41.47,45.32,45.61,47.40,53.73,73.30,81.49,119.16,0 119.82,122.59,127.86,128.09,128.22,130.10,135.15,135.41,136.31,136.88,151.79,153.65,164.59,167.86,173.35,175.76,215.05;对C35H51N4O7Na计算的HRMS:620.65511;基准:620.35577(M+Na)。
本领域的技术人员应理解,采用上述方法,用其它起始物质或试剂作必要修正,能制备本发明的其它化合物。
生物活性
本发明化合物的活性可通过测定所述化合物抑制各种肿瘤细胞系的增殖的作用来评价。表2列出了包括对LMB的比较例的结果。MCF-7,A549和SKOV-3分别是人乳房、肺和卵巢癌细胞系。NCI/ADR是耐受多种药物的乳房癌细胞系。CCRF-CEM和CCRF-CEM/PTX是人白血病细胞系,后者是耐受紫杉醇的子系。LNCaP是前列腺癌细胞系。
表2对各种细胞系的细胞毒性 | |||||||
化合物 | 肿瘤细胞系(IC50,nM) | ||||||
MCF-7 | NCI/ADR | A549 | SKOV-3 | CCRF-CEM | CCRF-CEM/PTX | LNCaP | |
LMB123456789101112131415161718192021 | 0.290.270.783.70.322.00.320.610.300.640.300.300.350.450.304.63.23.53.43.421031 | 1.02.12715019343411039374.65.83915336304607403803001000260 | 0.300.362.2130.843.31.32.20.842.81.40.671.61.81.6153.54.74.34.625037 | 1.51.72.6132.85.91.22.82.54.32.71.52.52.52.5419.744152057057 | 0.650.692.43.51.03.11.11.40.981.90.630.431.03.01.7171.8----- | 0.410.462.8171.49.02.33.12.12.50.50.473.21.42.411029----- | 0.30.8--0.5--0.70.5-0.8-1.0--4.227.2--1.687.428.6 |
表2中数据表明,本发明化合物作为抗增殖剂具有和LMB类似的活性。
还获得本发明的几种化合物对K562,一种Bcr-Abl阳性CML细胞系的细胞毒性的数据,列于表3,表3中还有对LMB的比较数据。
表3对Bcr-Abl阳性K562细胞的细胞毒性 | |
化合物 | K562细胞(IC50,nM) |
LMB | 0.6 |
4 | 1.7 |
8 | 1.0 |
对选择的代表性化合物,确定静脉给予小鼠的基于单剂量的最大耐受剂量(MTD)。数据列于表4,表4中还列出对LMB的比较数据。
表4小鼠的最大耐受剂量 | |
化合物 | 小鼠MTD(mg/kg) |
LMB | 2.5 |
1 | 5 |
4 | 40 |
7 | 15 |
8 | 20 |
表5列出LMB和选择的本发明化合物对MB 49细胞(鼠类膀胱癌细胞系)的细胞毒性。
表5对MB 49鼠类膀胱癌细胞的细胞毒性 | |
化合物 | IC50(μM) |
LMB | 0.0018 |
4 | 0.0059 |
8 | 0.0068 |
此外,确定了LMB对人膀胱癌细胞两个品系(UMUC-3和T24)的细胞毒性。EC50值分别为0.00033μM和0.0012μM。
前面对本发明的详细描述包括主要或专门涉及到本发明特定部分和方面的段落。应理解,这些描述是为了清楚和方便理解,具体特征可能与揭示该特征的段落更相关,在此揭示的内容包括在不同段落中的信息的适当组合。类似地,虽然在此的各种图和说明都于本发明的具体实施方式相关,但应理解,特定的图或实施方式的内容中揭示的具体特征也可以在适当范围用于另一个图或实施方式中的内容,与另一个特征组合,或者大体在本发明中。
此外,虽然按照特定的优选实施方式具体描述了本发明,但本发明不限于这些优选的实施方式。而本发明的范围由权利要求书限定。
Claims (25)
1.具有以下结构式I的化合物,和其药学上可接受的盐,酯,溶剂化物,水合物和前药形式:
式中,
m是0,1,2,3,4或5;
R0是H,C1-C5烷基,C2-C5链烯基或C2-C5炔基;
各R1独立地是H,C1-C5烷基,C2-C5链烯基或C2-C5炔基;
R2是H,芳基,环烷基,杂环部分,
其中,
R3是H,C1-C5烷基,C2-C5链烯基或C2-C5炔基,前提是,当m为0时R3不是H;
R4是H,C1-C5烷基,C2-C5链烯基,C2-C5炔基,芳基,环烷基或杂环部分;
R5是H,C1-C5烷基,C2-C5链烯基,C2-C5炔基,芳基,环烷基,杂环部分,或C(=O)O(C1-C5烷基);
R6是H,C1-C5烷基,C2-C5链烯基,C2-C5炔基,环烷基或荧光部分;或者R5和R6与它们共同连接的氮结合形成4元,5元,6元或7元含氮杂环结构;
R10是CH3或CH2OH;
R11是H或OH;
R12是CH3,CH2CH3或CH(OH)CH3;
R13和R14中的一个是H或CH3,另一个是H或OH.
4.如权利要求1所述的化合物,其特征在于,R0是H,R10是CH3,R11是H,R12是CH3,R13是CH3,R14是H。
5.如权利要求1所述的化合物,其特征在于,R0是H,R10是CH3,R11是H,R12是CH3或CH2CH3,R13是H和R14是H。
6.如权利要求1所述的化合物,R0是H,R10是CH2OH,R11是H,R12是CH3或CH2CH3,R13是CH3和R14是H。
7.一种抑制目标细胞增殖的方法,该方法包括使目标细胞与有效量的权利要求1或2所述的化合物接触的步骤。
8.如权利要求7所述的方法,其特征在于,目标细胞是人乳癌,肺癌,卵巢癌,前列腺癌或白血病细胞。
9.如权利要求7所述的方法,其特征在于,目标细胞是HPV相关的子宫颈癌或膀胱癌细胞。
10.一种治疗高增生疾病的方法,该方法包括给予患这种高增生疾病的患者治疗有效量的权利要求1或2所述的化合物。
11.如权利要求10所述的方法,其特征在于,高增生疾病是乳癌,肺癌,卵巢癌,前列腺癌或白血病,所述患者是人。
12.如权利要求10所述的方法,其特征在于,高增生疾病是HPV相关的宫颈癌或膀胱癌。
13.如权利要求12所述的方法,其特征在于,所述化合物局部给药。
14.如权利要求10所述的方法,其特征在于,所述化合物与另一种治疗剂组合给药。
15.如权利要求14所述的方法,其特征在于,另一种治疗剂是酪氨酸激酶抑制剂。
16.如权利要求15所述的方法,其特征在于,酪氨酸激酶抑制剂是伊马替尼。
17.一种药物组合物,包含权利要求1或2所述的化合物,以及赋形剂。
18.一种抑制蛋白质通过CRM1介导过程从细胞核输出的方法,该方法包括使所述细胞与抑制量的权利要求1或2所述的化合物接触。
19.如权利要求18所述的方法,其特征在于,蛋白质是p53。
20.如权利要求18所述的方法,其特征在于,蛋白质是Bcr-Ab1。
21.如权利要求18所述的方法,其特征在于,抑制量为0.3-20nM。
22.如权利要求1或2所述的化合物在制备用于治疗高增生局部的药剂中的用途。
23.一种治疗膀胱癌的方法,该方法包括给予膀胱癌的患者治疗有效量的来普霉素B。
24.如权利要求23所述的方法,其特征在于,来普霉素B局部给药。
25.来普霉素在制备用于治疗膀胱癌的药剂中的用途。
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