CN1957955A - 一种中药软胶囊及其制备方法和质量控制方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种中药软胶囊，尤其是一种用于治疗久病虚弱，记忆减退，咳喘、阳痿、高血脂等症的软胶囊，属中药领域。该软胶囊是由冬虫夏草、淫羊藿、枸杞子、蜂王浆、山楂、甘松等原料药按特殊工艺制备而成，对治疗以上各症有着明显的疗效，且产品稳定性好，生物利用度高。本发明同时还公开了该中药软胶囊的制备方法和质量控制方法。

Description

一种中药软胶囊及其制备方法和质量控制方法

技术领域

本发明公开了一种中药软胶囊及其制备技术，该产品克服了现有产品的不足，增强了效果。属于中药领域。

背景技术

上市品种“复方虫草口服液”，主要由冬虫夏草、淫羊藿、枸杞子、蜂王浆、山楂、甘松制成，功能主治为滋补肝肾，补肺宁心，醒脾开郁。用于久病虚弱，记忆减退，咳喘、阳痿、高血脂等症。已广泛应用于临床，有着较为理想的效果。但由于口服液体制剂的不稳定性，给该产品的存储、运输、服用等方面带来不便，也影响了产品的效果。

软胶囊剂原多用于保健食品类，虽着人们对软胶囊剂认识的加深，它已成为中药制药领域新的发展方向，如将原口服液改制成软胶囊剂，可有以下好处：

1、经服用在体内崩解后，可在肠道直接吸收，吸收快，生物利用度高；

2、稳定性好，用明胶制皮膜，气密性强，胶囊强度和膜遮断性高，内容物可长期保持稳定；

3、软胶囊多是将药物溶解、混悬、乳化在溶剂中，使其成为均匀一致的溶液后作为内容物填充在胶囊中，每粒胶囊所含药物误差小；

4、掩盖了药物的不良气味；服用方便；

5、胶囊皮膜的色、香、味、透明度、光泽性均可自由选择，与其他圆形物制品相比，外观光泽好。

软胶囊剂是解决上述问题的软好的办法，但由于软胶囊剂一直被应用于单体成分为主的化学药品或保健品，应用于中药尚不成熟，查阅文献也未找到有关将“复方虫草”制成软胶囊的技术提示，因而必须针对配方进行研究，解决其成形、稳定性、载药量等相关技术问题。

发明内容

本发明的目的是解决现有软胶囊成型技术上存在的问题，提供一种使用安全、质量稳定、疗效显著、服用方便的复方虫草软胶囊。

本发明的目的通过以下技术方案实施：

一.复方虫草浸膏粉的制备方法：取冬虫夏草加10倍量水煎煮1小时，滤过，滤液另器保存；药渣加入枸杞子等其余四味药材，加10倍量水煎煮二次，每次1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至1500ml，加等量乙醇，搅匀，静置24小时，取上清液，减压回收乙醇，加入上述冬虫夏草煎液，减压浓缩至相对密度为1.20的清膏，喷雾干燥(进风温度180±5℃，出风温度100±5℃)，得干粉，用时加入蜂王浆，即为复方虫草浸膏粉。

二.复方虫草软胶囊，是由囊壳和囊液组成的，囊液由复方虫草浸膏粉有效剂量与稀释剂组成。通过实验筛选复方虫草软胶囊囊液的稀释剂。采用常温留样观察法在室温条件下(T＝20±2℃，RH＝40～80％)进行连续的稳定性试验。

取复方虫草浸膏粉2200g，缓缓加入3800g的花生油中，不断搅拌，混合均匀后过100目筛，投入软胶囊生产灌装机中压制成胶丸，干燥，即得。此方法囊液物料流动性较好，灌装过程较易实现，但成品稳定性较差，压制干燥后即出现囊液分层的现象，不满足药典对软胶囊制剂稳定性的要求。

取3730g的大豆油，加热至60℃～70℃保温，取蜂蜡70g切成小片，加入植物油中，保温搅拌使溶解。另取复方虫草浸膏粉2200g加入植物油溶液中，混合均匀后过100目筛，投入软胶囊生产灌装机中压制成胶丸，干燥，即得。此方法囊液物料流动性较好，灌装过程较易实现，成品稳定性有很大的提高，但部分囊液在1周内有分层现象，1月后大部分软胶囊均出现明显的分层现象，不满足药典对软胶囊制剂稳定性的要求。

取3660g的大豆油，加热至60℃～70℃保温，取蜂蜡140g切成小片，加入植物油中，保温搅拌使溶解。另取复方虫草浸膏粉2200g加入植物油溶液中，混合均匀后过100目筛，投入软胶囊生产灌装机中压制成胶丸，干燥，即得。此方法囊液物料流动性满足灌装要求，成品稳定性好，经室温留样观察，1年半未出现囊液分层现象，满足药典对软胶囊制剂稳定性的要求。

取3600g的大豆油，加热至60℃～70℃保温，取蜂蜡200g切成小片，加入植物油中，保温搅拌使溶解。另取复方虫草浸膏粉2200g加入植物油溶液中，混合均匀后过100目筛，投入软胶囊生产灌装机中压制制胶丸。此方法囊液物料流动性较差，在室温下很粘稠，软胶囊灌装机出现不同程度的阻塞，无法顺利完成灌装，不满足大生产的需要。

取聚乙二醇3500g和丙二醇300g混合均匀，加热至60℃～70℃保温，另取复方虫草浸膏粉2200g加入，混合均匀后过100目筛，投入软胶囊生产灌装机中压制制胶丸。此方法囊液物料流动性较好，灌装过程较易实现，经室温留样观察，1年后出现囊液分层现象，也不满足药典对软胶囊制剂稳定性的要求，另外以聚乙二醇做稀释剂，由于聚乙二醇不易除去，在薄层定性分析时对薄层行为有很大的干扰，不易控制成品质量。

根据以上大量的实验研究，确定本发明复方虫草软胶囊囊液的重量组成为：复方虫草浸膏粉22，植物油36.6，蜂蜡1.4。经进一步研究，其原料组成在以下重量范围内均可：复方虫草浸膏粉20～30份，植物油28～40份，蜂蜡1～1.8份。制备工艺为：取植物油，加热至60℃～70℃保温，取蜂蜡切成小片，加入植物油中，保温搅拌使溶解；另取复方虫草浸膏粉加入植物油溶液中，混合均匀后过100目筛，投入软胶囊生产灌装机中压制成胶丸，干燥，即得。这里所用植物油可以花生油、大豆油、菜籽油等可食用植物油中任一种或二种以上的组合。

三.复方虫草软胶囊，是由囊壳和囊液组成的，囊壳由甘油明胶组成。通过实验筛选不同成分配比的囊皮对制剂稳定性的影响。采用常温留样观察法在室温条件下(T＝20±2℃，RH＝40～80％)进行连续的稳定性试验。

1)取明胶100重量份，加入搅拌状态下的适量纯挣水中，稳定控制在70℃～80℃不断搅拌。待明胶完全溶解后，加入30重量份甘油、氧化铁红及尼泊金乙酯混合均匀，保温搅拌后减压脱泡，即得。将胶液在保温状态下注入软胶囊生产灌装机中，拉制成胶皮，压制胶囊。此方法制得的软胶囊囊壳较硬，干燥后容易碎裂。

2)取明胶100重量份，加入搅拌状态下的适量纯净水中，稳定控制在70℃～80℃不断搅拌。待明胶完全溶解后，加入40重量份甘油、氧化铁红及尼泊金乙酯混合均匀，保温搅拌后减压脱泡，即得。将胶液在保温状态下注入软胶囊生产灌装机中，拉制成胶皮，压制胶囊。此方法制得的软胶囊囊壳软硬适中，干燥后崩解时间在20分钟～30分钟；制剂6个月后，崩解时间在40分钟～50分钟；制剂1年后崩解时间超出合格界线60分钟。

3)取明胶100重量份，加入搅拌状态下的适量纯净水中，稳定控制在70℃～80℃不断搅拌。待明胶完全溶解后，加入30重量份甘油、12重量份的山梨醇、氧化铁红及尼泊金乙酯混合均匀，保温搅拌后减压脱泡，即得。将胶液在保温状态下注入软胶囊生产灌装机中，拉制成胶皮，压制胶囊。此方法制得的软胶囊囊壳软硬适中，干燥后崩解时间在20分钟～25分钟；制剂6个月后，崩解时间在30分钟～40分钟；制剂1年后崩解时间为55分钟，制剂1年半后崩解时间超出合格界线60分钟。

4)取明胶100重量份，加入搅拌状态下的适量纯净水中，稳定控制在70℃～80℃不断搅拌。待明胶完全溶解后，加入30重量份甘油、6重量份的聚乙二醇400、氧化铁红及尼泊金乙酯混合均匀，保温搅拌后减压脱泡，即得。将胶液在保温状态下注入软胶囊生产灌装机中，拉制成胶皮，压制胶囊。此方法制得的软胶囊囊壳软硬适中，干燥后崩解时间在15分钟～25分钟；制剂6个月后，崩解时间在30分钟～40分钟；制剂1年后崩解时间为55分钟，制剂1年半后崩解时间超出合格界线60分钟。

5)取明胶100重量份，加入搅拌状态下的适量纯净水中，稳定控制在70℃～80℃不断搅拌。待明胶完全溶解后，加入30重量份甘油、12重量份的山梨醇、2.5数量份的焦亚硫酸钠、氧化铁红及尼泊金乙酯混合均匀，保温搅拌后减压脱泡，即得。将胶液在保温状态下注入软胶囊生产灌装机中，拉制成胶皮，压制胶囊。此方法制得的软胶囊囊壳软硬适中，干燥后崩解时间在20分钟～25分钟；制剂6个月后，崩解时间在25分钟～30分钟；制剂1年后崩解时间为30分钟，制剂1年半后崩解时间为35分钟。

6)取明胶100重量份，加入搅拌状态下的适量纯净水中，稳定控制在70℃～80℃不断搅拌。待明胶完全溶解后，加入30重量份甘油、10重量份的聚乙二醇400、2.5数量份的焦亚硫酸钠、氧化铁红及尼泊金乙酯混合均匀，保温搅拌后减压脱泡，即得。将胶液在保温状态下注入软胶囊生产灌装机中，拉制成胶皮，压制胶囊。此方法制得的软胶囊囊壳软硬适中，干燥后崩解时间在15分钟～25分钟；制剂6个月后，崩解时间在25分钟～30分钟；制剂1年后崩解时间为30分钟，制剂1年半后崩解时间为35分钟。

根据以上大量的实验研究，确定本发明复方虫草软胶囊囊皮的原料重量组成为：明胶100份，甘油30份，水90份，山梨醇12份或聚乙二醇10份，氧化铁红或氧化铁黑2.5份，焦亚硫酸钠2.5份，尼泊金乙酯0.2份。胶囊壳胶皮中以部分山梨醇或聚乙二醇400代替甘油，能很好的保持胶皮中的水分平衡，使软胶囊的崩解时间缩短，利于本品吸收；胶囊壳胶皮中加入的焦亚硫酸钠为抗氧化剂，能很好的保持着软胶囊囊壳不被空气中的氧所氧化，使制剂的稳定性大大的提高了。经进一步研究证明各原料药在以下投料范围内都能有较好的效果：

明胶                            80～120份，

甘油                            25～35份，

水                              80～110份，

多元醇或聚乙二醇-400            8～16份，

氧化铁红或氧化铁黑              0.5～5份，

焦亚硫酸钠                      1～10份，

尼泊金乙酯                      0.1～0.5份。

制备过程为：取明胶，加入搅拌状态下的适量纯净水中，稳定控制在70℃～80℃不断搅拌；待明胶完全溶解后，加入甘油、山梨醇、聚乙二醇-400、氧化铁红或氧化铁黑、焦亚硫酸钠及尼泊金乙酯混合均匀，保温搅拌；将保温搅拌后的胶液减压脱泡，即得。

复方虫草软胶囊工艺成熟后，使制剂的稳定性大大增强，保证了该药的质量，使用安全，疗效显著，便于患者口服，切携带方便。

为了更好地控制产品质量，发明人还制定了质量控制方法，包括定性鉴别和含量测定两部分。

定性鉴别部分：

a、取本品内容物6g，加入硅藻土4g，拌匀，加甲醇超声处理，滤过，滤液水浴蒸干，残渣加水使溶解，以乙醚提取三次，合并乙醚液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取熊果酸对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以8∶2比例的三氯甲烷-丙酮为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；置365nm紫外光灯下检视，显相同颜色的荧光斑点。

b.取a项下乙醚提取后的水液，以乙酸乙酯振摇提取三次，每次20ml，合并乙酸乙酯液，水浴蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取枸杞子对照药材1g，加水50ml，煎煮20分钟，滤过，滤液浓缩至约为20ml，以乙醚提取三次，合并乙醚液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，制成对照药材溶液：照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以6∶4∶1比例的环己烷-乙酸乙酯-甲醇为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

含量测定部分：

色谱条件与系统适用性试验  以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以27∶73比例的乙腈-水为流动相；检测波长为270nm。理论板数按淫羊藿苷峰计算应不低于1500。

对照品溶液的制备  精密称取淫羊藿苷对照品适量，加流动相溶解制成每1ml含30μg的对照品溶液，即得。

供试品溶液的制备  取本品内容物，研匀，称取2g，精密称定，加入硅藻土2g，拌匀，置索氏提取器中，加石油醚适量，加热回流1小时，弃去石油醚液，药渣挥去石油醚，继续以甲醇索氏提取2小时，甲醇液水浴蒸干，残渣加稀乙醇溶解并定量转移至100ml量瓶中，加稀乙醇至刻度，摇匀，精密量取5ml，置10ml量瓶中，加稀乙醇至刻度，摇匀，以0.45μm的微孔滤膜滤过，即得。

测定法  分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

应用以上技术方案，结合现行中国药典相关方法和规定，发明人对制得产品进行了18个月的稳定性质量考察，结果均匀达到标准。所以本发明技术方案是可行的，达到了其发明目的。

以下以具体实施例来进一步阐述本发明的技术方案。

具体实施方式

实施例1：

配方：明胶                            12kg

      甘油                            3.5kg

      水                              9kg

      山梨醇                          1.2kg

      氧化铁红                        250g，

      焦亚硫酸钠                      1kg，

      尼泊金乙酯                      15g；

      复方虫草浸膏粉                  3kg，

      大豆油                          4kg，

      蜂蜡                            180g。

制法：取大豆油，加热至60℃～70℃保温，取蜂蜡切成小片，加入植物油中，搅拌使溶解，取浸膏粉加入植物油溶液中，混合均匀后过100目筛，制成药液。取明胶，加入搅拌状态下的纯净水中，稳定控制在40℃～50℃不断搅拌。待明胶完全溶解后，加入甘油、山梨醇、聚乙二醇、氧化铁红、焦亚硫酸钠及尼泊金乙酯混合均匀，保温搅拌，制成囊材。将上述药液和囊材在软胶囊压制机上压制成软胶囊10000粒。

实施例2：

配方：明胶                                    8kg

      甘油                                    2.5kg

      水                                      11kg

      聚乙二醇-400                            1.6kg

      氧化铁黑                                0.5kg

      焦亚硫酸钠                              0.1kg

      尼泊金乙酯                              0.05kg

      复方虫草浸膏粉                        2kg

      花生油                                2.8kg

      丙二醇                                0.1kg

制法：过程同实施例1。

实施例3：

配方：明胶                                  10kg

      甘油                                  3kg

      水                                    10kg

      聚乙二醇-400                          0.8kg

      氧化铁红                              0.05kg

      焦亚硫酸钠                            0.5kg

      尼泊金乙酯                            0.025kg

      复方虫草浸膏粉                        2.4kg

      菜籽油                                3.5kg

      蜂蜡                                  0.15kg

制法：过程同实施例1。

实施例4：对实施例1制得产品进行质量检验

定性鉴别

(1)取本品内容物6g，加入硅藻土4g，拌匀，加甲醇30ml，超声处理30分钟，滤过，滤液水浴蒸干，残渣加水20ml使溶解，以乙醚提取三次，每次20ml，合并乙醚液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取熊果酸对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-丙酮(8∶2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；置紫外光灯(365nm)下检视，显相同颜色的荧光斑点。

(2)取[鉴别](1)项下乙醚提取后的水液，以乙酸乙酯振摇提取三次，每次20ml，合并乙酸乙酯液，水浴蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取枸杞子对照药材1g，加水50ml，煎煮20分钟，滤过，滤液浓缩至约为20ml，以乙醚提取三次，合并乙醚液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，制成对照药材溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以环己烷-乙酸乙酯-甲醇(6∶4∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

【含量测定】照高效液相色谱法测定。

色谱条件与系统适用性试验  以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-水(27∶73)为流动相；检测波长为270nm。理论板数按淫羊藿苷峰计算应不低于1500。

对照品溶液的制备  精密称取淫羊藿苷对照品适量，加流动相溶解制成每1ml含30μg的对照品溶液，即得。

供试品溶液的制备  取装量差异项下的本品内容物，研匀，称取2g，精密称定，加入硅藻土2g，拌匀，置索氏提取器中，加石油醚适量，加热回流1小时，弃去石油醚液，药渣挥去石油醚，继续以甲醇索氏提取2小时，甲醇液水浴蒸干，残渣加稀乙醇溶解并定量转移至100ml量瓶中，加稀乙醇至刻度，摇匀，精密量取5ml，置10ml量瓶中，加稀乙醇至刻度，摇匀，以微孔滤膜(0.45μm)滤过，即得。

测定法  分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

本品每粒含淫羊藿以淫羊藿苷(C₃₃H₄₀O₁₅)计，不得少于1.0mg。

Claims (9)

1.一种复方虫草软胶囊，是由囊壳和囊液组成的，囊液由复方虫草浸膏粉有效剂量与辅料组成，其特征在于囊壳中原料的重量比为：

明胶                            80～120份，

甘油                            25～35份，

水                              80～110份，

多元醇或聚乙二醇-400            8～16份，

氧化铁红或氧化铁黑              0.5～5份，

焦亚硫酸钠                      1～10份，

尼泊金乙酯                      0.1～0.5份；

囊液中原料的重量比为：

复方虫草浸膏粉                  20～30份，

植物油                          28～40份，

蜂蜡                            1～1.8份。

2.如权利要求1所述的复方虫草软胶囊，其特征在于囊壳中原料的重量比为：

明胶                            100份，

甘油                            30份，

水                              90份，

山梨醇                          12份，

氧化铁红                        2.5份，

焦亚硫酸钠                      2.5份，

尼泊金乙酯                      0.2份。

3.如权利要求2所述的复方虫草软胶囊，其特征在于囊壳原料中的山梨醇也可以10份聚乙二醇-400代替；氧化铁红也可以2.5份氧化铁黑代替。

4.如权利要求1、2或3所述的复方虫草软胶囊，其特征在于囊液中原料药的重量比为：

复方虫草浸膏粉                22份，

植物油                        36.6份，

蜂蜡                          1.4份。

5.如权利要求1至4中任一所述的复方虫草软胶囊，其特征在于原料中所用植物油可以花生油、大豆油、菜籽油等可食用植物油中任一种或二种以上的组合。

6.如权利要求5所述的复方虫草软胶囊的制备方法，其过程包括囊壳的制备、囊液的制备及压制成软胶囊三个步骤，其特征在于囊壳按以下步骤制得：

取明胶，加入搅拌状态下的适量纯净水中，稳定控制在70℃～80℃不断搅拌；待明胶完全溶解后，加入甘油、山梨醇、聚乙二醇-400、氧化铁红或氧化铁黑、焦亚硫酸钠及尼泊金乙酯混合均匀，保温搅拌；将保温搅拌后的胶液减压脱泡，即得。

7.如权利要求6所述的复方虫草软胶囊的制备方法，其特征在于囊液按以下方法制得：取植物油加热至60℃～70℃保温；取蜂蜡切成小片，加入植物油中，搅拌使溶解；另取浸膏粉加入植物油溶液中，混合均匀后过100目筛，即得。

8.如权利要求5所述的复方虫草软胶囊的质量控制方法，包含定性鉴别和含量测定两部分，其特征在于定性鉴别可以是如下的一种或二种：

a.取软胶囊内容物6g，加入硅藻土4g，拌匀，加甲醇超声处理，滤过，滤液水浴蒸干，残渣加水使溶解，以乙醚提取三次，合并乙醚液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取熊果酸对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以8∶2比例的三氯甲烷-丙酮为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；置365nm紫外光灯下检视，显相同颜色的荧光斑点；

b.取a项下乙醚提取后的水液，以乙酸乙酯振摇提取三次，每次20ml，合并乙酸乙酯液，水浴蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取枸杞子对照药材1g，加水50ml，煎煮20分钟，滤过，滤液浓缩至约为20ml，以乙醚提取三次，合并乙醚液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以6∶4∶1比例的环己烷-乙酸乙酯-甲醇为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

9.如权利要求8所述的复方虫草软胶囊的质量控制方法，其特征在于采用以下的方法进行含量测定：

色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以27∶73比例的乙腈-水为流动相；检测波长为270nm；理论板数按淫羊藿苷峰计算应不低于1500；

对照品溶液的制备精密称取淫羊藿苷对照品适量，加流动相溶解制成每1ml含30μg的对照品溶液，即得；

供试品溶液的制备取装量差异项下的本品内容物，研匀，称取2g，精密称定，加入硅藻土2g，拌匀，置索氏提取器中，加石油醚适量，加热回流1小时，弃去石油醚液，药渣挥去石油醚，继续以甲醇索氏提取2小时，甲醇液水浴蒸干，残渣加稀乙醇溶解并定量转移至100ml量瓶中，加稀乙醇至刻度，摇匀，精密量取5ml，置10ml量瓶中，加稀乙醇至刻度，摇匀，以0.45μm的微孔滤膜滤过，即得；

测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。