CN1943584B - 一种治疗心脑血管疾病的药物组合物及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种治疗心脑血管疾病的药物组合物，该药物组合物由以下各组分组成：芒柄花素-7-O-葡萄糖苷4.5-5.5份，黄豆苷6.7-8.2份，3′-甲氧基葛根素4.5-5.5份，葛根素44-54份，葛苷B1.8-2.2份，黄豆苷元-8-芹菜基-(1-6)-葡萄糖苷17-21份，葛根素木糖苷2.7-3.3份，黄豆苷元-7，4′-二葡萄糖苷0.9-1.3份，3′-羟基葛根素4.5-5.5份，葛根素-4′-O-葡萄糖苷3-3.7份，美佛辛-4′-葡萄糖苷0.4-0.5份，4′-甲氧基染料木苷0.9-1.1份，葛苷C 0.9-1.3份。本发明药物可按照常规制剂方法制成临床适宜制剂。药理试验和临床应用表明，本发明药物组合物具有活血化瘀，抑制血小板聚集，降低全血粘度，激活纤维蛋白溶解酶，抑制血栓形成等功效，临床上治疗心脑血管疾病疗效显著。

Description

一种治疗心脑血管疾病的药物组合物及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种药物组合物，尤其涉及一种治疗心脑血管疾病的药物组合物及其制备方法，属于中药领域。

背景技术

脑中风是一组以脑部缺血及出血性损伤症状为主要临床表现的疾病，又称脑卒中或脑血管意外，具有极高的病死率和致残率，主要分为出血性脑中风(脑出血或蛛网膜下腔出血)和缺血性脑中风(脑梗塞、脑血栓形成)二大类，以脑梗塞最为常见。高血压、动脉粥样硬化、高脂血症、糖尿病、心脏病、先天性脑血管等病都能引起中风的发生。

脑中风发病急，病死率高，是世界上最重要的致死性疾病之一，  一旦发病，轻则导致偏瘫、失语、神经精神障碍、症状性癫痫等，重则至死亡。中风在我国是主要的病残和死亡原因。一年中，每10万人就有120-180人患中风，并有60-120人因此死亡。

公开号为CN1 176117A的专利申请公开了一种治疗脑中风的新药葛酮素。该药系从中药葛根中提取得到的有效部位(十四种有效成分的混合物，PF-I)，对于脑中风的治疗具有较好的疗效。同时，该药也存在着水溶性差，生物利用度低(利用率10％)等缺点，导致其治疗脑中风的疗效尚需进一步提高。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是克服现有技术的不足，提供一种对于心脑血管疾病(尤其是脑中风)疗效确切、标本兼治的药物组合物。

本发明所要解决的技术问题是通过以下技术途径来实现的：

一种治疗心脑血管疾病的药物组合物，由以下重量份组成：

芒柄花素-7-O-葡萄糖苷4.5-5.5重量份，黄豆苷6.7-8.2，3′-甲氧基葛根素4.5-5.5重量份，葛根素44-54重量份，葛苷B1.8-2.2重量份，黄豆苷元-8-C-芹菜糖基-(1-6)-葡萄糖苷17-21重量份，葛根素木糖苷2.7-3.3重量份，黄豆苷元-7，4′-二葡萄糖苷0.9-1.3重量份，3′-羟基葛根素4.5-5.5份，葛根素-4′-O-葡萄糖苷3-3.7重量份，美佛辛-4′-葡萄糖苷0.4-0.5重量份，4′-甲氧茎染料木苷09-1.1重量份，葛苷C 0.9-1.3重量份。

为了达到更好的治疗效果，上述各组分的重量份优选为：

芒柄花素-7-O-葡萄糖苷5份，黄豆苷7份，3′-甲氧苷葛根素5份，葛根素49份，葛苷B 2份，黄豆苷元-8-C-芹菜糖基-(1-6)-葡萄糖苷19份，葛根素木糖苷3份，黄豆苷元-7，4′-二葡萄糖苷1份，3′-羟基葛根素5份，葛根素-4′-O-葡萄糖苷3.4，美佛辛-4′-葡萄糖苷0.4份，4′-甲氧基染料木苷1份，葛苷C 1份。

本发明药物组合物的各组分均可从葛根中提取得到，为了更好的治疗效果，优选从野葛的块根中提取得到.将野葛用水或稀醇提取后，经滤过浓缩所得到的提取物过大孔吸附树脂(D101等型号)，乙醇或甲醇洗脱得到的浓缩物再以硅胶柱层析，用氯仿-甲醇进行梯度洗脱，即可得到本发明药物组合物的上述各成分.

本发明人通过多年的临床研究，结合现代的研究成果，总结出心脑血管疾病的主要病因病理特点，在此基础上，结合辨证与辨病相结合的原则，以活血化瘀、祛风活络、化瘀醒脑为治则，拟方而定。

本发明组合物的各组分按照上述的比例配伍在一起后，各组分之间具有协同作用，显著提高了在水中的溶解度，更易为人体吸收，生物利用度也显著提高(达到了15.9％)。

药理试验和临床应用表明，本发明药物组合物具有活血化瘀，明显抑制血小板聚集，降低全血粘度，激活纤维蛋白溶解酶，抑制血栓形成等功效，可用于治疗缺血性中风病中经络恢复期瘀血痹阻脉络证、头晕头痛、颈项强痛等症。本发明药物组合物具有活血化瘀、解痉镇痛、增强脑血流量，抗血栓形成，可有效治疗半身不遂、口舌歪斜、偏身麻木、头晕目眩、颈项强痛、语言不利等动脉粥样硬化性血栓性脑梗塞和腔隙性脑梗塞见上述症候症。

本发明药物组合物加入不同赋形剂后，可加工成任何一种药剂学上应用剂型，如片剂、胶囊剂、颗粒剂、口服液、滴丸剂、酊剂、膏剂、注射剂等。这些赋型剂可以配合使用制药上常用的稀释剂、崩解剂、润滑剂、粘合剂、抗氧剂等。

本发明药物组合物安全有效剂量为250-500mg/次，2次/日。

具体实施方式

以下通过实施例来进一步描述本发明，应该理解的是，这些实施例仅用于例证的目的，决不限制本发明的保护范围。

单体的制备：

将野葛以水或稀醇提取，浓缩得到的提取物，经硅胶柱层析，氯仿-甲醇梯度洗脱，依TLC色谱合并的各流份，再以凝胶Sephadex LH-20柱纯化，得到以下各成分，其理化性质如下：

1、芒柄花素-7-O-葡萄糖苷：分子式C₂₂H₂₂O₉，白色结晶，mp.210-2℃。

UVλ_max(nm)256,300(肩)。

¹HNMRδppm(500MHz，DMSO-d₆中，下同)，8.38(1H，s，H-2)，8.04(1H，d，J＝9.0Hz；H-5)，7.14(1H，d，J＝9.0Hz，H-6)，7.21(1H，s，H-8)，7.50(2H，d，J＝9.0Hz，H-2′，6′)，6.97(2H，d，J＝9.0Hz，H-3′，5′)，5.12(1H，d，J＝7.0Hz，糖端基质子)，3.78(3H，s，OCH₃)。

¹³CNMRδppm(125MHz，DMSO-d₆中，下同)，153.5(C-2)，123.9(C-3)，174.5(C-4)，126.8(C-5)，115.5(C-6)，161.4(C-7)，103.4(C-8)，157.0(C-8a)，118.4(C-4a)，123.1(C-1′)，130.0(C-2′)，113.5(C-3′)，159.0(C-4′)，113.5(C-5′)，130.0(C′-6′)，55.1(OCH₃)，100.0(glu-1)，73.1(glu-2)，76.4(glu-3)，69.6(glu-4)，77.1(glu-5)，60.4(glu-6)。

2、黄豆苷：分子式C₂₁H₂₀O₉，白色结晶，mp.231-3C，Molish反应阳性。

UVλ_max(nm)：256,300(肩)。

¹HNMRδppm：8.39(1H，s，H-2)，8.03(1H，d，J＝8.8Hz；H-5)，7.14(1H，d，J＝8.9，2.3Hz，H-6)，7.22(1H，d，J＝2.3，H-8)，7.39(2H，d，J＝8.5Hz，H-2′，6′)，6.80(2H，d，J＝8.5Hz，H-3′，5′)，5.10(1H，d，J＝7.9Hz，糖端基质子).

¹³CNMRδppm：153.2(C-2)，123.7(C-3)，174.7(C-4)，126.9(C-5)，115.5(C-6)，161.3(C-7)，103.4(C-8)，157.0(C-8a)，118.4(C-4a)，122.3(C-1′)，130.0(C-2′)，114.9(C-3′)，157.0(C-4′)，114.9(C-5′)，130.0(C-6′)，100.0(glu-1)，73.0(glu-2)，76.3(glu-3)，69.6(glu-4)，77.1(glu-5)，60.6(glu-6)。

3、3′-甲氧基葛根素：分子式C₂₂H₂₂O₁₀，无定形粉末。

UVλ_max(nm)：220(肩)，249,290(肩)。

¹HNMRδppm：8.40(1H，s，H-2)，7.93(1H，d，J＝8.0Hz，H-5)，6.98(1H，d，J＝8.0Hz)，7.15(1H，s，H-8)，7.02(1H，d，J＝8.0Hz，H-6′)，6.97(1H，d，J＝8.0Hz，H-5′)，5.00(1H，d，s，糖端基质子)，3.78(3H，s，OCH₃)。

¹³CNMRδppm：152.7(C-2)，123.0(C-3)，174.8(C-4)，126.1(C-5)，115.1(C-6)，160.9(C-7)，112.8(C-8)，156.0(C-8a)，116.6(C-4a)，123.0(C-1′)，113.1(C-2′)，147.1(C-3′)，146.4(C-4′)，115.5(C-5′)，121.4(C′-6′)，55.7(OCH₃)，73.4(glu-1)，70.8(glu-2)，78.7(glu-3)，70.4(glu-4)，81.7(glu-5)，61.3(glu-6)。

4、葛根素：分子式C₂₁H₂₀O₉，白色结晶，m.p.204-5℃，与标准对照品葛根素，具有相同的薄层色谱比移值，红外光谱重合，混合熔点(203-5℃)不下降。

5、葛苷B：分子式C₃₀H₃₆O₁₆、无定形粉末、Molish反应呈阳性。

UVλ_max(nm)：212(肩)，232(肩)，284,308。

¹HNMR δppm：6.90(1H，s，H-3)，6.01(1H，m，H-5)，2.60(1H，dd，J＝8.0，1.5Hz，H-6)^*，7.57(1H，d，J＝8.7Hz，H-7)，6.81(1H，d，J＝8.7Hz，H-8)，6.34(1H，s，H-10)，7.05(2H，d，J＝8.5Hz，H-2′，6′)，6.92(2H，d，J＝8.5Hz，H-3′，5′)，5.10(1H，d，J＝8.5Hz，糖端基质子)，4.80(1H，d，J＝2.1Hz，糖端基H)(*，ABX系统AB部分的另一质子被埋没在糖基质子信号中)。

¹³CNMRδppm：172.3(C-2)，113.4(C-3)，156.4(C-4)，83.2(C-5)，38.1(C-6)，131.2(C-7)，108.6(C-8)，165.7(C-9)，101.3(C-10)，162.9(C-11)，112.0(C-12)，129.9(C-1′)，130.4(C-2′)，115.8(C-3′)，156.2(C-4′)，100.4，100.4(glu-1)，73.1，73.2(glu-2)，76.6，76.6(glu-3)，69.7，69.9(glu-4)，76.9，77.4(glu-5)，60.7，60.7(glu-6)，55.4(OCH₃)。

6、黄豆苷元-8-C-芹菜糖基(1-6)-葡萄糖苷：分子式C₂₆H₂₆O₁₃，白色结晶，mp.184-5℃。

UVλ_max(nm)：245,260(肩)，304(肩)。

¹HNMRδppm：8.30(1H，s，H-2)，7.92(1H，d，J＝8.8Hz，H-5)，6.97(1H，d，J＝8.8Hz，H-6)，7.37(2H，d，J＝8.6Hz，H-2′，6′)，6.79(2H，d，J＝8.6Hz，H-3′5′)，4.75(2H.m，糖端基H)。

¹³CNMRδppm：152.7(C-2)，123.2(C-3)，175.1(C-4)，126.4(C-5)，115.1(C-6)，161.1(C-7)，112.6(C-8)，157.2(C-8a)，115.2(C-4a)，122.6(C-1′)，130.3(C-2′)，115.2(C-3′)，157.2(C-4′)，115.0(C-5′)，130.1(C-6′)，73.4(glu-1)，70.6(glu-2)，78.7(glu-3)，70.6(glu-4)，80.1(glu-5)，68.4(glu-6)，109.1(api-1)，75.8(api-2)，78.8(api-3)，73.3(api-4)，63.0(api-5)。

7、葛根素木糖苷：分子式C₂₆H₂₆O₁₃，白色无定形粉末，Mdish反应呈阳性。

UVλ_max(nm)246,300(肩)，(IR谱与葛根素相近，但其碳谱在葛根素糖基C₆上多一个木糖基)。

¹³CNMRδppm：152.5(C-2)，123.0(C-3)，174.8(C-4)，126.2(C-5)，114.9(C-6)，160.9(C-7)，112.5(C-8)，156.0(C-8a)，116.8(C-4a)，122.5(C-1′)，129.9(C-2′)，114.9(C-3′)，157.1(C-4′)，114.9(C-5′)，129.9(C-6′)，73.4(glu-1)，70.6(glu-2)，78.5(glu-3)，70.3(glu-4)，80.0(glu-5)，69.1(glu-6)，103.8(xyl-1)，73.0(xyl-2)，76.4(xyl-3)，69.4(xyl-4)，65.5(xyl-5)。

8、黄豆苷元-7，4′--O-二葡萄糖苷：分子式C₂₇H₃₀O₁₄，白色结晶，mp.254-7℃，Molish反应呈阳性。

UVλ_max(nm)：250,300(肩)。

¹³CNMRδppm：153.7(C-2)，123.3(C-3)，174.6(C-4)，126.9(C-5)，115.6(C-6)，161.4(C-7)，103.5(C-8)，157.0(C-8a)，118.5(C-4a)，125.3(C-1′)，129.9(C-2′)，116.0(C-3′)，157.1(C-4′)，116.0(C-5′)，129.9(C-6′)，100.4、100.1(glu-1)，73.2、73.2(glu-2)，76.4、76.5(glu-3)，69.7、69.7(glu-4)，76.9、77.1(glu-5)，60.6、60.6(glu-6)。

9、葛根素-4′-O-葡萄糖苷：分子式C₂₇H₃₀O₁₄，白色无定形粉末。

UVλ_max(nm)：248,300(肩)(与葛根素的UV相似)。

¹HNMRδppm：8.42(1H，s，H-2)，7.94(1H，d，J＝8.8Hz，H-5)，6.99(1H，d，J＝8.8Hz，H-6)，7.03(2H，d，J＝8.6Hz，H-2′，6′)，7.50(2H，d，J＝8.6Hz，H-3′5′)，4.90(1H，d，J＝7.3Hz，糖端基H)，4.80(1H，d，J＝8.8Hz，糖端基H)。

¹³CNMRδppm：153.0(C-2)，122.7(C-3)，174.7(C-4)，126.2(C-5)，115.0(C-6)，161.1(C-7)，112.6(C-8)，156.5(C-8a)，117.0(C-4a)，125.5(C-1′)，129.9(C-2′)，116.0(C-3′)，157.1(C-4′)，116.0(C-5′)，129.9(C-6′)，100.4、100.4(glu-1)，73.4、73.2(glu-2)，77.0、76.5(glu-3)，70.7、69.6(glu-4)，81.7、81.7(glu-5)，60.7、60.6(glu-6)。

10、美佛辛-4′-O葡萄糖苷：分子式C₃₂H₃₈O₁₈，白色无定形粉末，酸水解产物中，经TLC检测表明有葛根素，水液中含葡萄糖和芹菜糖；FABMS m/z711(M+H)⁺。

UVλ_max(nm)：244,300。

¹HNMRδppm：8.36(1H，s，H-2)，7.93(1H，d，J＝8.8Hz，H-5)，6.99(1H，d，J＝8.8Hz，H-6)，7.48(2H，d，J＝8.6Hz，H-2′，6′)，7.06(2H，d，J＝8.6Hz，H-3′5′)，4.88(1H，d，J＝7.3Hz，糖端基H)，4.78(1H，d，J＝9.5Hz，糖端基H)，4.76(1H，d，J＝3.2Hz，糖端基H)。

¹³CNMRδppm：152.9(C-2)，122.7(C-3)，174.7(C-4)，126.2(C-5)，115.2(C-6)，161.1(C-7)，112.7(C-8)，156.2(C-8a)，116.0(C-4a)，125.5(C-1′)，129.8(C-2′)，115.9(C-3′)，157.0(C-4′)，115.9(C-5′)，129.8(C-6′)，73.4、100.4(glu-1)，70.6、73.2(glu-2)，78.6、76.6(glu-3)，70.4、69.7(glu-4)，80.0、77.0(glu-5)，68.2、60.7(glu-6)，109.0(api-1)，75.6(api-2)，78.6(api-3)，73.2(api-4)，63.0(api-5)。

经¹³C-¹HCOSY，¹H-¹HCOSY、DEPT及NOE差谱分析，归属了碳、氢信号，确定了糖基连接的位置；苷键构型由¹HNMR中端基质子的偶合常数确定。

11、4′-甲氧基染料木苷：分子式C₂₂H₂₂O₁₀，白色粉末，Molish反应呈阳性。

UVλ_max(nm)：258,300(肩)。

¹HNMRδppm：8.46(1H，s，H-2)，6.72(1H，d，J＝2.0H，H-6)，6.47(1H，d，J＝2.0H，H-8)，7.51(2H，d，J＝8.7H，H-2′，6′)，7.00(2H，d，J＝8.7H，H-3′5′)，5.05(1H，d，J＝7.4Hz，糖端基H)，3.78(3H，s，OCH₃)。

¹³CNMRδppm：154.7(C-2)，122.6(C-3)，180.3(C-4)，161.5(C-5)，99.6(C-6)，163.0(C-7)，94.5(C-8)，157.1(C-8a)，106.0(C-4a)，122.2(C-1′)，130.0(C-2′)，113.6(C-3′)，159.2(C-4′)，113.6(C-5′)，130.0(C-6′)，55.1(OCH₃)，99.9(glu-1)，73.0(glu-2)，76.3(glu-3)，69.6(glu-4)，77.1(glu-5)，60.6(glu-6)。

12、葛苷C：分子式C₂₄H₂₈O₁₀，白色无定形粉末。

FABMS m/z 475[M-H]⁺，313(M-glu)。

UVλ_max(nm)：210，280，308。

¹HNMRδppm：6.28(1H，s，H-3)，6.0(1H，d，J＝8.0，1,3Hz)，2.56(1H，dd，J＝8.0，14.5Hz，H-6)，3.0(1H，dd，J＝2.8，14.5Hz，H-6)，7.53(1H，d，J＝8.6Hz，H-7)，6.7(1H，dd，J＝1.7，8.6Hz，H-8)，6.85(1H，d，J＝1.7Hz，H-10)，6.90(2H，d，J＝8.2Hz，H-2′，6′)，6.61(2H，d，J＝8.2Hz，H-3′，5′)，5.02(1H，d，J＝7.0Hz，糖端基质子)，3.80(3H，s，OCH₃)。

¹³CNMR δppm：172.4(C-2)，113.4(C-3)，156.3(C-4)，83.5(C-5)，38.6(C-6)，131.2(C-7)，108.6(C-8)，167.4(C-9)，101.2(C-10)，162.9(C-11)，112.0(C-12)，126.6(C-1′)，130.3(C-2′)，114.7(C-3′)，155.0(C-4′)，100.3(glu-1)，72.9(glu-2)，76.4(glu-3)，69.8(glu-4)，77.3(glu-5)，60.7(glu-6)，55.4(OCH₃)。

13.3’-羟基葛根素：分子式：C₂₁H₂₀O₁₀；白色无定形粉末。

UV_maxλnm：220，(肩)，249,290(肩)。

¹³CNMR δppm：(125MHz，在重水中测定)154.4(C-2)，125.8(C-3)，178.3(C-4)，128.1(C-5)，116.7(C-6)，163.2(C-7)，113.2(C-8)，158.0(C-8a)，116.7(C-4a)124.8(C-1’)，117.5(C-2’)，146.2(C-3’)，146.7(C-4’)117.5(C-5’)，121.8(C-6’)，75.8(glu-1)，73.1(glu-2)，80.1(glu-3)，71.8(glu-4)，82.8(glu-5)，62.8(glu-6)。

¹HNMRδppm：(500MHz，在重水中测定)：8.17(1H.s，H-2)，8.05(1H，d，J＝9.0Hz，H-5)，6.98(1H，d，J＝9.0Hz，H-6)，7.02(2H，d，J＝2.0Hz，H-2’，6’)，6.83-6.86(2H.m，H-3’，5’)，5.09(1H，d，J＝10.0Hz，糖端基质子)。

实施例1胶囊剂的制备

按以下重量份称取各组分：芒柄花素-7-O-葡萄糖苷5份，黄豆苷7份，3′-甲氧苷葛根素5份，葛根素49份，葛苷B 2份，黄豆苷元-8-C-芹菜糖基-(1-6)-葡萄糖苷19份，葛根木糖苷3份，黄豆苷元-7，4′-二葡萄糖苷1份，葛根素-4′-0-葡萄糖苷3.4份，美佛辛-4′-葡萄糖苷0.4份，4′-甲氧基染料木苷1份，3′-羟基葛根素5份，葛苷C 1份；将上述各组分混合均匀后，加入(或不加)赋形剂，如糊精、淀粉、蔗糖等，通过制粒、干燥、混匀，灌装胶囊即得。

实施例2口服液的制备

按以下重量份称取各组分：芒柄花素-7-O-葡萄糖苷4.5份，黄豆苷6.7，3′-甲氧基葛根素4.5份，葛根素44份，葛苷B1.8份，黄豆苷元-8-芹菜基-(1-6)-葡萄糖苷17份，葛根素木糖芽2.7份，黄豆苷元-7，4′-二葡萄糖苷0.9份，3′-羟基葛根素4.5份，葛根素-4′-O-葡萄糖苷3份，美佛辛-4′-葡萄糖苷0.4份，4′-甲氧茎染料木苷0.9份，葛苷C 0.9份；将上述各组分混合均匀后溶于灭菌蒸馏水中，加入糖浆、防腐剂等辅料，定容，滤过，灌装，灭菌，即得。

实施例3注射剂(含冻干粉剂)的制备

按以下重量份称取各组分：芒柄花素-7-O-葡萄糖苷5.5份，黄豆苷8.2份，3′-甲氧基葛根素5.5份，葛根素54份，葛苷B 2.2份，黄豆苷元-8-芹菜基-(1-6)-葡萄糖苷21份，葛根素木糖苷3.3份，黄豆苷元-7，4′-二葡萄糖苷1.3份，3′-羟基葛根素5.5份，葛根素-4′-O-葡萄糖苷3.7份，美佛辛-4′-葡萄糖苷0.5份，4′-甲氧茎染料木苷1.1份，葛苷C 1.3份；将上述各组分混合均匀后溶于注射用水，混匀，用微孔滤膜过滤后加热浓缩，加压过微孔滤膜，补足注射用水，灌装、熔封、热压灭菌，得注射剂。也可用冷冻干燥法获得冻干粉剂。

试验例1本发明药物组合物对小鼠镇痛作用研究。

一、试验材料

1、受试药物：本发明药物组合物(以蒸馏水为溶剂，配制成所需浓度)。

2、阳性对照药，去痛片，剂量为511mg/kg，上海罗氏制药公司药品，批号940312。

3、实验动物：二级昆明种雌性小鼠远交封闭系，购自中国医学科学院实验动物所，体重20±2g，每组12-14只，共分为5组，空白对照组，阳性对照组，受试药物组(大、中、小剂量)。

二、试验方法：1.热板法；2.扭体法。

三、剂量设置：1、受试药物：50mg/kg(小剂量)，100mg/kg(中剂量)和200mg/kg(大剂量)。2、阳性对照药：511mg/kg。

四、给药方法：经口给药，受试药0.2ml/10g鼠，连续给药5天，每天1次。空白对照组给予等体积蒸馏水。

五、试验结果：见表1和2。

表1本药物组合物对小鼠的镇痛作用(热板法)(X±S)

药物	动物数	剂量(mg/kg)	给药前痛阈(秒)	给药3天痛阈(秒)	镇痛百分率(％)
						空白对照	13	等体积水	22.74±8.15	22.23±5.60	2.24
阳性对照	14	511	18.50±6.45	27.50±9.70<sup>*</sup>	48.65
						高剂量组	12	200	22.93±4.90	23.67±7.19	3.23

药物	动物数	剂量(mg/kg)	给药前痛阈(秒)	给药3天痛阈(秒)	镇痛百分率(％)
						中剂量组	14	100	22.73±10.8	23.63±7.75	3.96
低剂量组	13	50	24.31±8.27	23.95±7.7	-1.48

*与给药前比较，P＜0.05。镇痛百分率(％)＝(给药后痛阈给药前痛阈/给药前痛阈)×100％

表2本药物组合物对小鼠的镇痛作用(扭体法)(X±S)

药物	动物数	剂量(mg/kg)	出现扭体鼠(百分率)	镇痛(％)	潜伏期(秒)	每只扭体(次数)
							空白对照	14	等体积	92.85		349.7±86.5	10.21±5.76
阳性对照	14	511	42.85	53.85	480.1±160.8	3.14±6.66<sup>**</sup>
							高剂量组	12	200	91.67	1.27	393.3±103.6	6.58±3.52
中剂量组	14	100	100	0	374.4±79.1	9.36±5.84
							低剂量组	13	50	69.23	25.44	477.9±104.1<sup>**</sup>	4.69±5.63<sup>*</sup>

*与蒸馏水组相比，P＜0.05  **P＜0.01。

镇痛百分率(％)＝(对照组扭体鼠数-给药组扭体鼠数/对照组扭体鼠数)×100％。

六、试验结论

本发明药物组合物给小鼠口服，对于热板法所致小鼠疼痛无明显镇痛作用。但是对于化学刺激(0.5％乙酸)所致疼痛有明显的作用。小剂量(50mg/kg)药效突出，接近阳性药去痛片。

试验例2本发明药物组合物对脑血流量的影响

一、试验材料

1、受试药物：本发明药物组合物。

2、阳性对照药，愈风宁心片，400mg/kg，北京同心堂中药提炼厂生产，批号3-9412-5008(愈风宁心片，主要成分为葛根，具有解经镇痛，增强脑及冠脉流量作用).

3、实验动物：杂种犬远交系，雌雄各半(体重12.2±0.68kg)，每组6只，均购自中国医学科学院实验动物研究所

二、试验方法

对正常犬脑循环作用。

三、剂量设置：犬17.5，35,70mg/kg。

四、给药方法：1.口服(十二指肠给药)，1次给药，做给药前后自身对照；2.空白对照：蒸馏水；3.阳性对照药，愈风宁心片^*，400mg/kg，北京同心堂中药提炼厂生产，批号3-9412-5008(愈风宁心片，主要成分为葛根，具有解经镇痛，增强脑及冠脉流量作用)。

五、试验结果：给药的本发明药物组合物的高、中、低三个剂量组均表现出不同程度增加颈内动脉血流量作用，且降低血管阻力。见表3-9

表3本药物组合物对正常犬脑血流量的影响(X±S)

各组间相比，P＞0.05。n＝6。

表4本发明药物组合物对正常犬脑每博血流量的影响(X±S)

各组间相比，P＞0.05。n＝6。

表5本发明药物组合物对正常犬脑血管阻力的影响(X±S)

各组间相比，P＞0.05。n＝6。

表6本发明药物组合物对正常犬脑相对血流量的影响(X±S)

各组间相比，P＞0.05。n＝6。

表7本发明药物组合物对正常犬脑相对血流增加百分比值的影响(X±S)

*，**与蒸馏水组相比，P＜0.05，0.01，n＝6。

表8本发明药物组合物对正常犬血压的影响(X±S)

各组间相比，P＞0.05；n＝6。

表9本发明药物组合物对正常犬心率的影响(X±S)

各组间相比，P＞0.05；n＝6。

六、试验结论

本发明药物组合物对犬脑血流有升高的趋势，对血管阻力有降低的趋势。可以增加脑相对血流量，其血流量增加比值较对照组有明显差异，且呈量效关系。

试验例3本发明药物组合物对血压的影响

一、试验材料

1、受试药物：本发明药物组合物，口服用蒸馏水溶解，配制成所需浓度.静脉注射用生理盐水溶解，并以直径为0.45mm微孔滤膜过滤.

2、实验动物：二级雄性Wistar种大鼠，远交封闭系，体重15g±7.2g，每组100，共6组。

二、试验方法

(1)、对慢性肾性高血压动物模型的影响。

(2)、对急性肾性高血压动物模型的影响。

(3)、对正常大鼠血压的影响。

三、受试药物剂量设置

(1)口服给药：50，100，200mg/kg；

(2)静脉给药：69，138，276mg/kg；

四、试验对照

(1)空白对照：口服给予等体积蒸馏水，静脉注射给等体积生理盐水。

(2)阳性对照药：愈风宁心片，口服给药200mg/kg，静脉注射276mg/kg；用生理盐水溶解后以加45mm微孔滤膜过滤。

五、试验结果：本发明药物组合物对肾性高血压大鼠具有较明显的降低作用。长期口服较一次性静脉注射效果明显，对正常大鼠血压无明显影响(见表10-12)

表10本发明药物组合物对高血压大鼠血压的作用(X±S)

分组	剂量(mg/kg)	平均动脉压(kPa)	血压抑制率(％)
				正常组	蒸馏水	14.69±2.17
模型组	蒸馏水	23.78±4.24
				低剂量组	50	18.67±3.56<sup>*</sup>	21.49
中剂量组	100	15.73±4.21<sup>**</sup>	33.85
				高剂量组	200	14.73±4.64<sup>**</sup>	38.06
阳性药对照组	200	19.67±4.31<sup>*</sup>	17.28

*与模型组相比，P＜0.05，**与模型组相比，P＜0.01。n＝10。

表11本发明药物组合物对肾性高血压大鼠血压的作用(X±S)

分组	剂量mg/kg	平均动脉压(kPa)	脉压差(kPa)	血压抑制率(％)
					正常组	生理盐水	16.1±1.6	3±1.7

分组	剂量mg/kg	平均动脉压(kPa)	脉压差(kPa)	血压抑制率(％)
					模型组	生理盐水	20.6±0.6	6±1.7
低剂量组	69	20.6±0.6	5.1±1.2	0
					中剂量组	138	20.3±0.1	4.5±0.4	1.46
高剂量组	276	16.5±1.1<sup>**</sup>	5.9±0.8	19.9
					阳性对照组	276	19.6±0.5<sup>*</sup>	5.4±0.8	4.85

*与模型组相比，P＜0.05。**与模型组相比，P＜0.01。n＝10

表12本发明药物组合物对正常大鼠血压的作用(X±S)

△n＝10；*与对照组相比，P＜0.05。

试验例4本发明药物组合物抗血栓形成试验

一、试验材料

1、受试药物：本发明药物组合物，体内给药以蒸馏水溶解，体外给药以生理盐水溶解，并配制成所需浓度。

2、实验动物：二组Wistar一种雄性大鼠远交封闭系，购自中国医学科学院动物所，体重242±11.2g，每组10只，共分5组

二、试验方法：1.大鼠体外总动脉-颈外静脉血流旁路法；2.体外血栓形成仪法。

三、剂量设置：1.整体试验，剂量为50，100，200mg/kg，灌胃每日1次，1ml/100g鼠连续3天。2.体外试验：剂量为1.56，3.12，6.25/ml(终浓度)直接给药1次。

四、试验对照：1.空白对照：整体试验等体积蒸馏水；体外试验给等体积生理盐水。2.阳性对照，整体试验以乙酰水物酸45mg/kg(西北第二合成药厂出品)；体外试验以川芎嗪2.5mg/ml(终浓度)(北京市永康制药厂出品)。

五、试验结果：本发明药物组合物具有抗血栓形成作用见表13-15。

表13大鼠口服本发明药物组合物后对体外血栓形成的影响(X±S)

分组	剂量mg/kg	血栓湿重(mg)	血栓抑制率(％)
				生理盐水组		20.05±3.82
高剂量组	200	14.15±3.23<sup>**</sup>	29.43
				中剂量组	100	15.9±3.57<sup>*</sup>	20.7
低剂量组	50	17.6±3.1	12.2
				乙酰水杨酸	90	13.15±2.45<sup>**</sup>	34.41

*与生理盐水相比，P＜0.05。**与生理盐水相比，P＜0.01。n＝10

表14本发明药物组合物经大鼠口服后对体外血栓形成的影响(X±S)

分组	剂量mg/kg	血栓湿重(mg)	血栓抑制率％
				生理盐水组		28.91±2.22
高剂量组	200	12.82±4.33<sup>**</sup>	55.66
				中剂量组	100	18.4±3.11<sup>*</sup>	36.35
低剂量组	50	22.82±4.02<sup>*</sup>	21.07
				乙酰水杨酸	90	11.48±2.62<sup>**</sup>	60.29

*与生理盐水相比，P＜0.05。

**与生理盐水相比，P＜0.01。n＝10

表15本发明药物组合物体外给药对正常大鼠全血体外血栓形成的影响(X±S)

分组	剂量mg/kg	血栓湿重(mg)	血栓抑制率％
				生理盐水组		37.3±3.83

分组	剂量mg/kg	血栓湿重(mg)	血栓抑制率％
				高剂量组	6.25	10.8±3.46<sup>**</sup>	71.05
中剂量组	3.125	17.5±4.67<sup>**</sup>	53.08
				低剂量组	1.56	26.2±4.82<sup>**</sup>	29.76
乙酰水杨酸	90	25.7±7.34<sup>**</sup>	31.1

试验例5本发明药物组合物对血栓及纤维蛋白的溶解作用试验

一、试验材料

1、受试药物：本发明药物组合物，体内给药以蒸馏水溶解，体外给药以生理盐水溶解，配制成所需浓度。

2、实验动物：二级Wistar种雄性大鼠，远交封闭系，体重242±11.2g，购自中国医学科学院动物所，每组10只，共分5组。

二、试验方法

1、花生四烯酸诱导大鼠急性脑血栓形成法；

2、体外纤维蛋白溶解活性试验(纤维蛋白平皿法)；

3、体外用药对纤维蛋白溶解活性作用(优球蛋白溶解法)；

三、剂量设置：1.整体试验：100，200，400mg/kg；2.体外试验：1，2，4mg/样品；

四、给药方法：1.十二指肠给药，给药体积：1ml/100g鼠；2.给药次数为1次，做自身对照。

五、试验对照：1.空白对照：整体动物给予等体积蒸馏水，体外试验给等体积生理盐水。2.阳性对照药，乙酰水扬酸(45mg/kg)，由北京二合成药厂出品，尿激酶(0.1mg/样本)，南京大学制药厂出品。

六、试验结果：本发明药物组合物具有溶栓作用，与阳性对照药尿激酶比较，其特点是作用缓慢，但持久。体内溶栓作用较好，见表16-19

表16本发明药物组合物对大鼠急性脑栓塞时脑血流的影响(X±S)

*与给药前相比P＜0.05。n＝10

表17本药物组合物对乳酸脱氢酶(LDH)肌酸激酶(CK)的影响(X±S)

*与生理盐水组相比，P＜0.05。**与生理盐水组相比，P＜0.01。n＝10。

表18本发明药物组合物对体外纤维蛋白溶解的作用(X±S)

**与尿激酶相比，P＜0.01。n＝10

表19本发明药物组合物对体外纤维蛋白溶解试验(优球蛋白法)(X±S)

分组	浓度mg/管	溶解活性单位(u)
			生理盐水		51.3±14.4
本发明组合物	2	123.1±22.6<sup>**</sup>
			本发明组合物	1	103.2±19.1<sup>**</sup>
本发明组合物	0.5	77.7±16.5<sup>*</sup>
			尿激酶	0.1	126±30.7<sup>**</sup>

*与生理盐水相比P＜0.05，**与生理盐水相比，P＜0.01，n＝10。

试验例5本发明药物组合物治疗中风病恢复期瘀血痹阻脉络证(西医诊断：动脉粥样硬化性血栓性脑梗死、腔隙性脑梗死)临床观察试验(III期临床)

一、试验方法：采用分层区组随机、双盲、双模拟、试验药与阳性对照药(血塞通)平行对照、多中心法。

试验组：303例，口服本发明药物组合物(胶囊剂)，0.5g/次，2次/日，疗程四周。

对照组：100例，口服“血塞通”(依说明书剂量服用)，疗程四周。

二、试验结果：

表20本发明药物组合物临床疗效观察试验结果

试验例数	基本痊愈	显效	有效	无效	总显效率★
						试验组303	29	86	145	43	37.95％
对照组100	6	27	44	23	33％

★总显效率＝基本痊愈+显效

组间比较上述两组数据，总显效率之间无统计学意义(CMH x²检验，P＞0.05)，说明本药物组合物对中风病总体疗效良好，与对照药“血塞通片”相比无统计学意义(p＞0.05)。

西医疾病分层与中风病疗效分析，ITT数据集中两组动脉粥样硬化性血栓性脑梗死总有效率(基本痊愈+显效)分别为27.33％、28％，计学意义(p＞0.05)。两组腔隙性脑梗死总显效率(基本痊愈+显效)分别为48.36％、38％，组间比较有统计学意义(p＜0.05)。试验组内的动脉粥样硬化性血栓性脑梗死与腔隙性脑梗死总显效率(基本痊愈+显效)分别为27.33％、48.36％，组间比较有统计学意义(p＜0.01)。对照组分别为28％、38％，组间比较无统计学意(p＞0.05)。

临床观察结果说明本药物组合物对动脉粥样硬化性血栓性脑梗死与腔隙性脑梗死有显著疗效，本药物组合物治疗动脉粥样硬化性血栓性脑梗死的疗效与阳性对照药“血塞通片”相当，其中治疗腔隙性脑梗死的疗效要明显优于对照药“血塞通片”。

三、典型病例

病例1

试验编号：150。患者刘某，男性，46岁。住院号：082829。CT号：51724。2002年12月16日纳入试验。

主诉：左侧半身不遂16天。

西医诊断：腔隙性脑梗死(右侧颞、顶、枕叶)。

中医诊断：中风病恢复期(瘀血痹阻脉络证)。

治疗经过：患者自愿参加本药物治疗本病的临床研究，签署知情同意书后入组。采用分层区组随机、双盲双模拟对照法，按该患者就诊号服用相对应随机号码(150号)所规定的药物(试验研究结束后解盲为试验组)。用药方式：每次口服本药物胶囊剂2粒及安慰剂2片，每日2次。分别于治疗前后进行血、尿、粪、肝功能、肾功能、血液流变学、心电图、CT等检查。共服药4周。根据检查结果和疗效判定标准，该中风病患者为基本痊愈出院。

病例2

试验编号：357。患者凌某，男性，64岁。住院号：60831。CT号：12583。2004年1月9日纳入试验。

主诉：左侧半身不遂20天。

西医诊断：腔隙性脑梗死(右侧侧脑室旁)。

中医诊断：中风病恢复期(瘀血痹阻脉络证)。

治疗经过：患者自愿参加本药物治疗本病的临床研究，签署知情同意书后入组.采用分层区组随机、双盲双模拟对照法，按该患者就诊号服用相对应随机号码(357号)所规定的药物(试验研究结束后解盲为试验组).用药方式：每次口服本药物胶囊剂2粒及安慰剂2片，每日2次.共服药4周.根据检查结果和疗效判定标准，该中风病患者为基本痊愈出院.

Claims (5)

1.一种治疗心脑血管疾病的药物组合物，其特征是由以下重量份的各组分组成：芒柄花素-7-O-葡萄糖苷4.5-5.5份，黄豆苷6.7-8.2份，3′-甲氧基葛根素4.5-5.5份，葛根素44-54份，葛苷B 1.8-2.2份，黄豆苷元-8-C-芹菜糖基-(1-6)-葡萄糖苷17-21份，葛根素木糖苷2.7-3.3份，黄豆苷元-7，4′-葡萄糖苷0.9-1.3份，3′-羟基葛根素4.5-5.5份，葛根素-4′-O-葡萄糖苷3-3.7份，美佛辛-4′-葡萄糖苷0.4-0.5份，4′-甲氧基染料木苷0.9-1.1份，葛苷C 0.9-1.3份。

2.按照权利要求1的药物组合物，其特征是各组分的重量份是：

芒柄花素-7-O-葡萄糖苷5份，黄豆苷7份，3′-甲氧苷葛根素5份，葛根素49份，葛苷B2份，黄豆苷元-8-C-芹菜糖基-(1-6)-葡萄糖苷19份，葛根素木糖苷3份，黄豆苷元-7，4′-二葡萄糖苷1份，葛根素-4′-O-葡萄糖苷3.4，美佛辛-4′-葡萄糖苷0.4份，4′-甲氧基染料木苷1份，3′-羟基葛根素5份，葛苷C 1份。

3.按照权利要求1的药物组合物，其特征在于：按照常规制剂方法加入辅料后制备成片剂、胶囊剂、颗粒剂、口服液、滴丸剂、酊剂、膏剂或注射剂。

4.权利要求1-3任何一项药物组合物在制备治疗心脑血管疾病药物中的用途。

5.按照权利要求4的用途，其特征是所述的心脑血管疾病是动脉粥样硬化性血栓性脑梗死、腔隙性脑梗死、高血压或冠心病。