CN1919052A - 一种纳豆胶囊的制备方法 - Google Patents

Abstract

一种纳豆胶囊的制备方法：原料大豆经过除石、除杂、精选后，清洗，浸泡15－20小时；浸泡后的大豆在0.13Mpa的压力下蒸煮30－40分钟，80－90℃无菌条件下按原料重量2％接种枯草芽孢杆菌(纳豆芽孢杆菌)；于37－40℃下发酵20－24小时，纳豆发酵用种子是由斜面菌种经过摇瓶培养、一级种子培养、制备；发酵后的新鲜纳豆，经送入预冻室冷冻至－35－40℃，转至冻干室，冻干、筛分、粉碎、定比例混合、填装，制成纳豆胶囊。

Description

一种纳豆胶囊的制备方法

技术领域

本发明涉及一种保健品的制备方法，具体地说涉及一种用大豆为原料制备纳豆胶囊的方法。

背景技术

纳豆是一各种起源于中国的传统食品，后来传至日本，成为深受欢迎的食品。纳豆是用枯草芽孢杆菌(纳豆芽孢杆菌)发酵大豆生产的食品，富含许多具有生理活性的营养成份，如多糖、皂苷、多种氨基酸、大豆异黄酮等。据文献记载，多糖、皂苷具有免疫调节作用。因此，在一千多年的食用历史中，人们受益于纳豆，健康水平得到提高，特别是每天坚持食用100克左右的纳豆对人体免疫功能、增加骨密度、调节血脂、心血管疾病的预防等都能起到很好的保健作用。

目前人们食用的纳豆为盒或袋的散装形式，食用时取出，然后再封口贮存，使用和携带均不方便。

发明内容

本发明的目的在于提供一种纳豆胶囊的制备方法。用本发明制备的纳豆胶囊即能保持纳豆的主要成份，又便于食用者的携带和保存。

为实现上述目的，本发明提供的纳豆胶囊的制备方法，采用冷冻干燥技术将新鲜的纳豆冻干，经筛分、粉碎、定比例混合、充填成胶囊而制成。

具体地说，本发明是以大豆发酵制成的纳豆为原料制备而成。原料大豆经精选、清洗，浸泡后进行灭菌，蒸煮灭菌后的原料进行枯草芽孢杆菌(纳豆芽孢杆菌)接种、发酵，发酵好的鲜纳豆经过冻干、筛分、粉碎、定比例混合、充塡成胶囊内制成纳豆胶囊。其步骤如下：

a)原料预处理：原料大豆经过除石、除杂、精选后，清洗，浸泡15-20小时；

b)蒸煮：浸泡后的大豆在0.13Mpa的压力下蒸煮30-40分钟，80-90℃无菌条件下按原料重量2％接种枯草芽孢杆菌(纳豆芽孢杆菌)；

c)发酵：37-40℃下发酵20-24小时，纳豆发酵用种子是由斜面菌种经过摇瓶培养、一级种子培养、制备；

d)冻干：发酵后的新鲜纳豆，经送入预冻室冷冻至-35-40℃，转至冻干室，冻干筛分、粉碎、定比例混合、填装，制成纳豆胶囊。

附图说明

图1为本发明的工艺流程示意图。

具体实施方式

请参阅图1，为本发明的制备流程示意图。

以大豆为原料，经过除石、除杂、精选后，清洗，浸泡15小时(无严格限定，15-20小时均可)；浸泡后的大豆在0.13Mpa的压力下蒸煮30分钟(无严格限定，控制在30-40分钟均可，80℃(无严格限定，控制在80-90℃均可)无菌条件下按原料重量2％接种枯草芽孢杆菌(纳豆芽孢杆菌)，于37℃下发酵20小时(无严格限定，温度控制在37-40℃，发酵时间控制在20-24小时均可)。纳豆发酵用种子是由斜面菌种经过摇瓶培养、一级种子培养、制备(有关发酵技术属于公知技术，不作详细介绍)；发酵后的新鲜纳豆，经送入预冻室冷冻至-35-40℃，转至冻干室，通过温度控制，调节冻干速度，冻干、筛分、粉碎、定比例混合、充填成纳豆胶囊(关于通过温度控制来调节冻干速度为公知技术)，制成规格为0.5克/粒的纳豆胶囊，60粒/瓶。

关于纳豆芽孢杆菌(Bacillus natto)是Sawamura 1960年定的，1964年Smith等人发现纳豆芽孢杆菌的原始菌株与枯草杆菌相同，因而现在已归入芽孢杆菌科、芽孢杆菌属中的枯草芽孢杆菌。此菌属于革兰氏阳性、杆状、无害无毒，在煮熟的大豆上经发酵制成纳豆。这种食品不仅营养丰富，而且具有溶血栓、防骨质疏松、抗菌等预防和治疗疾病的效果。本发明使用的纳豆菌是日本小杉食品株式会社市场销售产品。经中科院微生物研究所鉴定其形态及特征都符合枯草芽孢杆菌，并且有很多文献报导枯草芽孢杆菌在食品中应用，此外国内工业生产用酶的大酶种如α-淀粉酶、蛋白酶也用枯草芽孢杆菌制备。

本发明制备的纳豆中主要成份为粗多糖和总皂苷，其中：粗多糖的含量每100g含量≥100mg，总皂苷每100g含量≥200mg。对制备的纳豆胶囊用如下方法进行粗多糖和总皂苷的测定：

粗多糖的测定方法

1.试剂：

本方法所用试剂除特殊注明外，均为分析纯，所用水为去离子水或同等纯度蒸馏水。

1.1乙醇溶液(80％)：20ml水中加入无水乙醇80ml，混匀。

1.2氢氧化钠溶液(100g/L)：称取100g氢氧化钠，加水溶解并稀释至1L，加入固体无水硫酸钠至饱和，备用。

1.3铜储备液：称取3.0g CuSO₄·H₂O，30.0g柠檬酸钠，加水溶解并衡释至1L，混匀，备用。

1.4铜试剂溶液：取铜储备液ml，加水50ml，混匀后加入固体无水硫酸钠12.5g并使其溶解。临用新配。

1.5洗涤剂：取水50ml，加入10ml铜试剂溶液，10ml氢氧化钠溶液，混匀。

1.6硫酸溶液(10％)：取100ml浓硫酸加入到800左右水中，混匀，冷却后稀释至1L。

1.7苯酚溶液(50g/L)：称取精制苯酚5.0g，加水溶解并稀释至100ml，混匀。溶液置冰箱中可保存一个月。

1.8葡聚糖标准储备溶液：精密取分子量500000、干燥至恒重的葡聚糖标准0.5000g，加水溶解，并定容至50ml，混匀，置冰箱中保存。此溶液每ml含10.0mg葡聚糖。

1.9葡聚糖标准使用液：吸取葡聚糖标准储备液1.00ml，置于100ml容量瓶中加水至刻度，混匀，置冰箱中保存。此溶液每ml含葡聚糖0.10mg。

2.仪器：

2.1分光光度计

2.2离心机

2.3旋转混匀器

3.分析步骤：

3.1标准曲线绘制：

精密吸取葡聚糖标准使用液0.00、0.10、0.20、0.40、0.60、0.80、1.00ml(相当于葡聚糖0.、0.010、0.020、0.040、0.060、0.080、0.10mg)分别置于25ml比色管中，准确补充水至2.0ml，加入50g/L苯酚溶液1.0ml，在旋转混匀器上混匀，小心加入浓硫酸10.0ml，于旋转混匀器上小心混匀，置沸水浴中煮沸2min，冷却后用分光光度计在485nm波长处以试剂空白溶液为参比，1cm比色皿测定吸光度值。以葡聚糖浓度为横坐标，吸光度值为纵坐标，绘制标准曲线。

3.2试样处理：

3.2.1试样提取：称取混合均匀的固体试样2.0g，置于100ml容量瓶中，加水80ml左右，于沸水浴上加热2h，冷却至室温后补加水至刻度，混匀后，过滤，弃去初滤液，收集余下滤液供沉淀多糖。

3.2.2沉淀粗多糖：精密取3.2.1项下滤液5.0ml或液体试样5.0ml，置于50ml离心管中，加入无水乙醇20ml，混匀后5min，以3000rpm离心5min，弃去上清液。残渣用水溶解并定容至5.0ml，混匀后，供沉淀葡聚糖。

3.2.3沉淀葡聚糖：精密取3.2.2项下溶液2ml置于20ml离心管中，加入100g/L氢氧化钠溶液2.0ml，铜试剂溶液2.0ml，沸水浴中煮沸2min，冷却后以3000rpm离心5min，弃去上清液。残渣用洗涤液数毫升洗涤，离心后弃去上清液，反复3次操作后，残渣用100ml/L硫酸溶液2.0ml溶解并转移至50ml容量瓶中，加水稀释至刻度，混匀。此溶液为试样测定液。

3.3试样测定：精密吸取试样测定液2.0ml置于25ml比色管中，加入50g/L苯酚1.0ml，在旋转混匀器上混匀，小心加入浓硫酸10.0ml后于旋转混匀器上小心混匀，置沸水浴中煮沸2min，冷却至室温后用分光乐度计在485nm波长处，以试剂空白为参比，1cm比色皿测定吸光度值。从标准曲线上查出葡聚糖含量，计算试样中水溶性精多糖含量。同时作试样空白实验。

3.4分析结果表述：

试样中水溶性粗多糖的含量按3.4.1计算。

3.4.1计算：

$X=\frac{w_1-w_2}{M\×\frac{V_2}{V_1}\×\frac{V_4}{V_3}\×\frac{V_6}{V_5}}$

式中：X—试样中水溶性粗多糖含量(以葡聚糖计)，(mg/g)；

w₁—试样测定液中葡聚糖的质量，mg；

w₂—试样空白液中葡聚糖的质量，mg；

M—试样质量，g；

V₁—试样提取液总体积，ml；

V₂—沉淀粗多糖所用试样提取液体积，ml；

V₃—粗多糖溶液体积，ml；

V₄—沉淀葡聚糖所用粗多糖溶液体积，ml；

V₅—试样测定液总体积，ml；

V₆—测定用试样测定溶液体积，ml。

3.4.2结果表示：

计算结果保留两位有效数字。

4技术参数：

回收率：不同食品中不同浓度加标回收的回收率为87.8～110.8％。

精密度：同一试样10次测定结果的RSD为5.8％。

干扰因素：测定过程中避免碳水化合物的玷污干扰。

总皂甙的测定方法

1.试剂：

D-101大孔树脂小柱(以10cm注射器为柱，内装D-101树脂3cm高，上层装1cm高的中性氧化铝)；

80％乙醇；

5％香草醛冰醋酸溶液；

高氯酸；

冰醋酸；

标准溶液：用甲醇配制含人参皂甙2.0mg/ml的标准溶液。

2.样品测定：

取本品约1.0g，加入约40ml水，60℃水浴提取40min，取出，放冷，用水定容至50ml，过滤，取1.0ml滤液过大孔树脂柱(先用40ml 80％乙醇活化)，用30ml水洗涤，用80％乙醇25ml，洗脱皂甙，收集洗脱液，80℃水浴蒸干，加入0.2ml 5％香草醛冰醋酸溶液，0.8ml高氯酸，混匀，60℃水浴加热10min，加入5ml冰醋酸，混匀，于1cm比色杯、波长560nm处测定吸光度。

3.标准曲线：

取人参皂甙标准溶液(2.0mg/ml)0.0，20.0，40.0，60.0，80.0，100，.0μl，水浴蒸干溶剂，加入0.2ml香草醛冰醋酸溶液，以下同样品测定，测定吸光度绘制标准曲线。

4.计算：

$X=\frac{C\×50}{M\×1000}$

式中：X：为样品中总皂甙的含量(mg/g)

C：为从标准曲线上查得的含量(μg)

M：为取样量(g)

Claims (3)

1、一种纳豆胶囊的制备方法，其步骤如下：

a)以大豆为原料，浸泡15-20小时；

b)浸泡后的大豆在0.13Mpa的压力下蒸煮30-40分钟，80-90℃无菌条件下按原料重量2％接种枯草芽孢杆菌；

c)于37-40℃下发酵20-24小时；

d)发酵后的纳豆送入预冻室冷冻至-35-40℃，转至冻干室冻干、筛分、粉碎、定比例混合、充填，制成纳豆胶囊。

2.权利要求1的制备方法，其中纳豆发酵用种子是由斜面菌种经过摇瓶培养、制备。

3、权利要求1的制备方法，其中纳豆胶囊为0.5克/粒。