CN1919044B - 一种动物饲料添加剂及其制备方法 - Google Patents

一种动物饲料添加剂及其制备方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种动物饲料添加剂及其制备方法。本发明以银杏叶为主要原料，运用优良菌种，通过酶工程和微生物发酵工程，将银杏叶中动物难以消化的大分子营养源降解为易消化吸收的小分子物质，使银杏叶中固有的活性成分游离、暴露出来，更易被动物吸收。本发明饲料添加剂除含有黄酮类化合物、银杏内脂等活性物质外，还含有大量的有益菌和高活力的复合酶。实验表明，本发明饲料添加剂具有提高动物免疫力、促进动物生长、提高其肉质等优点。

Description

一种动物饲料添加剂及其制备方法
技术领域
本发明涉及一种饲料添加剂及其制备方法，尤其涉及一种以银杏叶为主要原料发酵而成的动物饲料添加剂及其制备方法，属于饲料领域。
背景技术
发展中国家集约化和专业化的畜牧业才刚刚起步，配合饲料工业还在雨后春笋般地建立起来，对饲料添加剂的需求量与日俱增，加之发展中国家面临粮食供应紧张和饲料不足的困难，更有必要大力发展饲料添加剂。我国目前的饲料添加剂的应用过于单一化，需要发展复合多维饲料添加剂，使其效益得到充分的发挥。
银杏叶为古老的孑遗植物银杏(Ginkgo biloba)的干叶，银杏叶除具有一般树叶的营养外，最重要的是含有黄酮类、萜内脂类、聚戊烯醇类化合物、酚类、生物碱和多糖等多种药用成份。动物试验表明，黄酮类化合物具有免疫调节功能，黄酮不仅能增强机体的免疫细胞体液及非特异性免疫功能，而且能促进机体的免疫器官的发育，对巨嗜细胞有诱导增加，增强活性，进而促进细胞的吞噬机能并能促进淋巴细胞的转化率。所以，银杏叶提取物是一种天然的畜禽免疫调节剂，生长促进剂。目前国内外对银杏叶的研究利用主要集中在医药保健方面，尚没有以银杏叶为主要原料用于制备饲料添加剂的相关应用。现有的饲料添加剂都不同程度的具有促进动物生长的作用，但在提高动物的免疫力方面都差强人意。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是克服现有技术的不足，提供一种新的动物饲料添加剂，该饲料添加剂除能有效促进动物生长和提高其肉质的作用外，尚能够明显提高动物的免疫力。
本发明所要解决的技术问题是通过以下技术途径来实现的：
一种动物饲料添加剂，包括以下步骤制备而成：
(1)、发酵培养基的制备：
将固体培养基与营养盐溶液混合均匀，灭菌，得发酵培养基；其中，所述的固体培养基由银杏叶粉末(说明：将银杏叶粉碎后得到所述的银杏叶粉末，至于粉碎到何种程度，本领域技术人员可视实际情况和设备而定，这些均不构成对本发明的实施和效果的影响)、数皮和玉米芯组成；所述营养盐溶液主要葡萄糖、尿素、硫酸钱、蛋白脉、磷酸二氢钾和硫酸镁组成；
(2)、将步骤(1)所制备的发酵培养基首先接种产朊假丝酵母(Candida utilis)，28℃±1℃下培养12±1小时，接着接种黑曲霉(AsPergillus niger)，在28℃±1℃下培养36±1小时，按照常规发酵方法和设备进行发酵；
(3)、在低于40℃条件下将完成发酵的物料干燥，粉碎，即得。
上述制备方法中，步骤(1)中，优选将固体培养基与营养盐溶液按照1g∶1.4-2.0ml(更优选为1g∶1.6ml的配比比例)的配比比例混合均匀，灭菌，得发酵培养基；所述的固体培养基优选按照以下方法配制而成：将银杏叶粉末、数皮和玉米芯按照银杏叶粉术∶麸皮∶玉米芯＝7-8.5∶1.0-2.0∶0.2-0.7(更优选为8∶1.5∶0.5的重量配比比例)的重量配比混合均匀；
所述的营养盐溶液的配制优选如下：每100毫升营养盐溶液中含有以下重量的组分：葡萄糖1.5-2.5g、尿素0.75-1.25g、硫酸铵2.25-3.75g、蛋白胨0.375-0.625g、磷酸二氢钾1.5-2.5g、硫酸镁0.375-0.625g、余量为蒸馏水；更优选为每100毫升营养盐溶液中含有以下重量的各组分：葡萄糖2g、尿素1g、硫酸铵3g、蛋白胨0.5g、磷酸二氢钾2g、硫酸镁0.5g、余量为蒸馏水。
步骤(2)中，优选将步骤1所制备的发酵培养基分别按照10g发酵培养基接种1ml菌种的比例依次接种产朊假丝酵母和黑曲霉。
本发明中所用到的产朊假丝酵母和黑曲霉，均可从商业途径购买得到(例如可以购自于中国普通微生物菌种保藏管理中心菌种库，网址：http://www.ctcccas.ac.cn/)。
本发明以银杏叶为原料，运用优良菌种，通过酶工程和微生物发酵工程，将银杏叶中动物难以消化的大分子营养源降解为易消化吸收的小分子物质，使银杏叶中固有的活性成分能够游离、暴露出来，更易被动物吸收。除含有黄酮类化合物、银杏内脂等活性物质外，还含有大量的有益菌和高活力的复合酶同时，含有多种有益菌种，经测定，本发明添加剂中的纤维素酶、半纤维素酶和β-葡萄糖昔酶的活性较高，能显著提高饲料的转化率，促进动物的吸收进而促进其生长，具有替代或部分替代抗生素的作用。实验表明，本发明饲料添加剂能明显提高动物的免疫能力，促进生长，提高其肉质。
此外，本发明饲料添加剂还是一种无毒，无激素，无药物残留，无污染的高效天然添加剂，它还有以下优点：破坏植物原料的细胞壁，提高饲料的利用率；消除饲料中抗营养因子，减少此类物质对动物消化利用的障碍作用；补充动物内源酶的不足，提高饲料消化率；扩大饲料资源范围，如能利用小麦，大麦部分农林废弃物等。
本发明饲料添加剂既含有生物活性成分，又富含益生菌或饲料复合酶，能作为促生长剂和抗生素的替代品广泛用于猪、鸡、马、牛、鱼、虾等多种禽畜、水产动物中。
本发明饲料添加剂的应用方法：在基础日粮中添加0.5％-2％的本发明饲料添加剂，混合均匀，按常规饲喂方法投喂。
具体实施方式
下面通过实施例对本发明作进一步说明。应当指出，这些实施例仅仅是本发明的例证，不应理解为对本发明的限制。
实施例1
1、营养盐溶液的配制：按葡萄糖2％(即每100ml营养盐溶液中含葡萄糖2g，下同)，尿素1％，蛋白胨0.5％，磷酸二氢钾2％，硫酸镁0.5％，硫酸铵3％的量依次称取并溶解于水中，配成营养盐溶液；
2、固体培养基的制备：按银杏叶粉末∶麸皮∶玉米芯＝8∶1.5∶0.5的比例称取三者，混匀；
3、按每10g固体培养基加16ml营养盐溶液的比例将上述两者混合，搅拌均匀，配制成发酵培养基；将配制好的发酵培养基在121℃温度下灭菌50min，取出，冷却；
4、在接种室进行常规的无菌操作，每10g发酵培养基接种产朊假丝酵母1ml(Candida utilis)(产朊假丝酵母菌种购自中国普通微生物菌种保藏管理中心菌种库，商品代号是Accc 2060；菌母的培养采用液体法，常规的种子液体培养法，28℃、150r/min下震荡培养)(陈金春，陈国强主编.微生物学实验指导，北京：清华大学出版社，2005；涔沛霖，蔡谨编著.工业微生物学，北京：化学工业出版社，2000.139-151)，28℃下培养12小时，再按同样的比例接黑曲霉(Aspergillus nigerNL-1)(黑曲霉菌种购自中国普通微生物菌种保藏管理中心菌种库，商品代号是ACCC30005)，再在28℃下培养36小时左右，发酵结束；
5、在不高于40℃的条件下干燥，粉碎，即得。
实施例2
1、营养盐溶液的配制：按葡萄糖1.5％(即每100ml营养盐溶液中含葡萄糖2g，下同)，尿素0.75％，蛋白胨0.375％，磷酸二氢钾1.5％，硫酸镁0.375％，硫酸铵2.25％的量依次称取并溶解于水中，配成营养盐溶液；
2、固体培养基的制备：按银杏叶粉末∶麸皮∶玉米芯＝7∶1.0∶0.2的比例称取三者，混匀；
3、按每10g固体培养基加14ml营养盐溶液的比例将上述两者混合，搅拌均匀，配制成发酵培养基；将配制好的发酵培养基在121℃温度下灭菌50min，取出，冷却；
4、在接种室进行常规的无菌操作，每10g发酵培养基接种产朊假丝酵母(Candida utilis)(产朊假丝酵母菌种购自中国普通微生物菌种保藏管理中心菌种库，商品代号是ACCC 2060)1ml，28℃下培养12小时，再按同样的比例接黑曲霉(黑曲霉菌种购自中国科学院典型培养物保藏委员会菌种库，商品代号是ACCC 30005)(Aspergillus niger NL-1)，再在28℃下培养36小时左右；
5、在不高于40℃的条件下干燥，粉碎，即得。
实施例3
1、营养盐溶液的配制：按葡萄糖2.5％(即每100ml营养盐溶液中含葡萄糖2g，下同)，尿素1.25％，蛋白胨0.625％，磷酸二氢钾2.5％，硫酸镁0.625％，硫酸铵3.75％的量依次称取并溶解于水中，配成营养盐溶液；
2、固体培养基的制备：按银杏叶粉末∶麸皮∶玉米芯＝8.5∶2.0∶0.7的比例称取三者，混匀；
3、按每10g固体培养基加20ml营养盐溶液的比例将上述两者混合，搅拌均匀，配制成发酵培养基；将配制好的发酵培养基在121℃温度下灭菌50min，取出，冷却；
4、在接种室进行常规的无菌操作，每10g发酵培养基接种产朊假丝酵母(Candida utilis)(产朊假丝酵母菌种购自中国普通微生物菌种保藏管理中心菌种库，商品代号是ACCC 2060)1ml，28℃下培养12小时，再按同样的比例接黑曲霉(Aspergillus niger NL-1)(黑曲霉菌种购自中国科学院典型培养物保藏委员会菌种库，商品代号是ACCC30005)，再在28℃下培养36小时左右；
5、在不高于40℃的条件下干燥，粉碎，即得。
试验例1  本发明动物饲料添加剂中酶活性的测定
1、检测对象：本发明实施例1、2和3所制备的动物饲料添加剂，分别编号为产品1、2和3。
2、检测方法：
纤维素酶和半纤维素酶的测定方法。
酶的提取：准确称取固体酶制剂1g，加入一定体积的pH值为4.8的缓冲液，置于40℃水浴中浸提60min，过滤后备用；
酶活的测定：取0.05M柠檬酸缓冲液1.0ml、1％羧甲基纤维素(测定纤维素酶)或1％木聚糖(测定半纤维素酶)0.5ml，经适当稀释后的酶液0.5ml于25ml的刻度试管中，50℃下保温30min。冷却后分别加入3.0mlDNS，并用蒸馏水定容至25ml，混匀，在540nm条件下比色；
酶活的表示方法：1g固体酶制剂在50℃、pH值4.8条件下，每分钟水解羧甲基纤维素或木聚糖产生1μmol葡萄糖或木糖所需的酶量定义为一个酶活单位。酶活力单位为μg/g。
3、检测结果：见表1。
表1检测结果
Figure B2006101522305D00051
检测结果表明，本发明添加剂中纤维素酶、半纤维素酶的活性较高，能显著提高饲料的转化率，促进动物吸收各种营养，有利于其生长。
试验例2  本发明动物饲料添加剂促进动物生长试验
1、供试样品：本发明实施例1、2和3所制备的动物饲料添加剂，分别编号为产品1、2和3。
2、试验方法：选择健康、体重接近的1日龄商品代号A×(1×L1)黄羽肉仔鸡480只，采用完全随机区组试验设计方法，随机分成4个处理组，每组3个重复，每个重复40只，公母各半。1组饲喂基础日粮，2、3、4组分别饲喂基础日粮加0.5％、1.0％、1.5％银杏叶饲料添加剂，试验期49天。所用实验料均粉碎，记录每天投料量、死亡数量，7周龄全群称重，试验结束抽样屠宰，称量胸腺、脾脏和法氏囊等免役器官的质量。数据采用SPSS12.0软件系统进行统计分析，均数间多重比较采用Duncan法。
3、试验结果：实验所得数据表明，本发明饲料添加剂对肉仔增中有明显的促进作用，添加1％和0.5％本发明饲料添加剂组的末重分别比对照组提高5.56％(P＜0.05和5.02％(P＜0.05＝，平均日增重为5.74％(P＜0.05＝和5.19％(P＜0.05＝；对肉仔鸡的屠宰实验表明，添加了本发明饲料添加剂的各组肉仔鸡的免疫器官如胸腺、脾脏和法氏囊的相对质量均在不同程度上高于对照，另外，饲喂本发明饲料添加剂的鸡的屠宰性能及肉的品质、营养均在一定程度上优于对照(表2、表3、表4、表5、表6)。
表2  本发明银杏叶饲料添加剂对肉仔鸡生产性能的影响
Figure B2006101522305D00061
表3  本发明银杏叶饲料添加剂对肉仔鸡免疫器官相对质量的影响
Figure B2006101522305D00062
表4  本发明银杏叶饲料添加剂对肉仔鸡屠宰性能的影响
Figure B2006101522305D00071
表5  本发明银杏叶饲料添加剂对肉仔鸡肉品质的影响
表6  本发明银杏叶饲料添加剂对肉仔鸡肉营养成分的影响
Figure B2006101522305D00073

Claims (5)

1.一种动物饲料添加剂的制备方法，包括以下步骤：
(1).发酵培养基的制备：将固体培养基与营养盐溶液混合均匀，灭菌，得发酵培养基；其中，所述固体培养基和营养盐溶液按照1g∶1.4-2.0ml的比例混合；所述的固体培养基由银杏叶粉末、麸皮和玉米芯组成，银杏叶粉末、麸皮和玉米芯的重量比例为7-8.5∶1.0-2.0∶0.2-0.7；所述营养盐溶液的各组分的配比为：每100毫升营养盐溶液中含有以下重量的各组分：葡萄糖1.5-2.5g、尿素0.75-1.25g、硫酸铵2.25-3.75g、蛋白胨0.375-0.625g、磷酸二氢钾1.5-2.5g、硫酸镁0.375-0.625g、余量为蒸馏水；
(2).将步骤(1)所制备的发酵培养基首先按照10g发酵培养基接种1ml菌种的比例接种产朊假丝酵母(Candida utilis)菌种，28℃士1℃下培养12士1小时；接着按照10g发酵培养基接种1ml菌种的比例接种黑曲霉(Aspergillus niger)菌种，28℃士1℃下培养36士1小时；此过程按照常规发酵方法和设备进行发酵；
(3).在低于40℃条件下将完成发酵的物料干燥，粉碎，即得。
2.按照权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤(1)中固体培养基与营养盐溶液的配比比例为1g∶1.6ml。
3.按照权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤(1)中所述的固体培养基各组分的重量配比为：银杏叶粉末∶麸皮∶玉米芯＝8∶1.5∶0.5。
4.按照权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤(1)中所述的营养盐溶液的各组分的配比为：每100毫升营养盐溶液中含有以下重量的组分：葡萄糖2g、尿素1g、硫酸铵3g、蛋白胨0.5g、磷酸二氢钾2g、硫酸镁0.5g、余量为蒸馏水。
5.一种动物饲料添加剂，其特征在于：由权利要求1-4任何一项制备方法所制备得到的产品。
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