CN1915001A

CN1915001A - 白花除虫菊繁殖技术

Info

Publication number: CN1915001A
Application number: CNA2006100861203A
Authority: CN
Inventors: 刘蓁; 高山林; 岳磊; 曾杨
Original assignee: China Pharmaceutical University
Current assignee: China Pharmaceutical University
Priority date: 2006-08-31
Filing date: 2006-08-31
Publication date: 2007-02-21

Abstract

本发明涉及一种药用植物白花除虫菊优良品种的快速繁殖技术。本发明提供了一种组织培养技术，包括从选择外植体到大田移栽试管苗要经过四个步骤：外植体选择及消毒灭菌、快速繁殖丛生芽、丛生芽生根培养、练苗与移栽。本发明提供了三种进行消毒处理的方法，提供了最佳的快速繁殖丛生芽的和丛生芽生根培养培养基的成分，最佳的移栽条件。

Description

白花除虫菊繁殖技术

技术领域

本发明涉及能保持一种药用植物白花除虫菊优良品种的快速繁殖技术。

背景技术

白花除虫菊(Pyrethrum cinerariifolium Trev.)为菊科小黄菊属多年生宿根草本植物，以花或全草入药。其花中提取的总除虫菊酯含除虫菊酯I、II，瓜菊酯I、II，茉莉菊酯I、II共6种有效杀虫成分。这是迄今发现的不污染环境，对哺乳动物及植物无毒无害，对昆虫和蚊蝇等迅速击倒，不易产生抗药性的高效天然杀虫剂。由于拟菊酯类农药在生产合成中造成污染，以及使用后有残毒，易产生抗药性等缺点，天然的除虫菊就越来越受到重视。20世纪90年代，国际除虫菊市场仍呈现上升趋势。近几年，我国政府和社会大力倡导发展“绿色农业”，除虫菊已经在我国云南省迅速发展。作为绿色农药，除虫菊杀虫产品已在我国问世，这必然会对我国绿色农业的发展起积极的作用。

采用传统的种子繁殖技术不能保持白花除虫菊优良品种的遗传稳定性。一个白花除虫菊的优良品种经过几代的繁殖，其产量、有效成份的含量都出现明显的下降，不能保持其优良的品质，很快退化。采用组织培养技术，可以有效地保存除虫菊的优良品种。但是，由于培养技术不成熟，效率低，实用性差。

发明内容

本发明的目的是提供一种组织培养技术，既能保持白花除虫菊优良品种的遗传稳定性又可快速繁殖出大量有母体优良性状的幼株，进行优良品种的快速繁殖，在短时间内培育出大量可供大田栽培的白花除虫菊幼苗，以满足生产上的需要。

本发明提供的白花除虫菊繁殖技术包括从选择外植体到大田移栽试管苗要经过四个步骤：外植体选择及消毒灭菌、快速繁殖丛生芽、丛生芽生根培养、练苗与移栽。

(1)、外植体选择及消毒灭菌

选择白花除虫菊优良品种的饱满种子或者种子萌发后生长8-12天左右的幼芽作为外植体。选择好的外植体可以用以下三种方法进行消毒处理：

A.用次氯酸钠溶液消毒：将外植体用蒸馏水冲洗几次，然后置于2％次氯酸钠溶液中振摇20(10-30min)分钟，取出，用无菌水冲洗3-5次。

B.用0.1％升汞溶液消毒：将外植体用蒸馏水冲洗几次，然后置于0.1％升汞溶液中振摇10(5-20min)分钟，取出，用无菌水冲洗数次。

C.复合消毒法：将外植体用蒸馏水冲洗几次，先用2％次氯酸钠溶液(加3-5滴吐温-20)消毒8min(5-15min)，再用0.1％升汞溶液(加3-5滴吐温-20)消毒5min(5-15min)，无菌水冲洗5次。

方法C对外植体伤害最小，消毒效果好。于无菌条件下，用单一消毒液消毒一定时间，并将消毒液冲洗干净。或者用一种以上不同的消毒液对外植体进行消毒。

将已消毒的除虫菊外植体脱病毒，除虫菊脱病毒方法：将消毒后的外植体在解剖镜下分离出包含生长点的细胞团块，大小约为0.2mm~0.5mm。是否脱毒，还要在材料建立以后进行病毒检测。

(2)、快速繁殖丛生芽

在MS培养基中适当添加植物分裂激素6-卞基腺嘌呤(6-BA)，它可以促进丛生芽的分化。添加植物生长激素吲哚乙酸(IAA)，它可以促进植物的生长。多效唑(PP₃₃₃)也是一种植物激素，它可以缩短植物节间长度，使植物矮壮，利于植物的生根繁殖和移栽。在MS培养基中添加不同种类和浓度激素，直接诱导外植体生长丛生芽，可使丛生芽生长数量和质量极大提高。最佳的白花除虫菊快速繁殖丛生芽培养基为：

MS+6-BA(0.1-2.0mg/L)+IAA(0-0.5mg/L)+PP₃₃₃(0.1-2.0mg/L)+糖(30g/L)+琼脂(3.0-4.0g/L)。pH值调整为5.8。

(3)、丛生芽生根培养

在1/2MS培养基中适当添加吲哚乙酸(IAA)，浓度为0.1-0.5mg/L和生根粉(ABT)，浓度为0.05-0.5mg/L能促进试管苗生根，并且有利于初生根的生长。在1/2MS培养基中单独添加ABT，效果不佳。两种生长激素配合使用，生根效果优于两种激素单独使用。最佳的丛生芽生根培养培养基为：

1/2MS+IAA(0.1-0.5mg/L)+ABT(0.05-0.5mg/L)+糖(30g/L)+琼脂(3.0-4.0g/L)，pH值调整为5.8。

培养条件：室温18-28℃，光照强度：1800-2000Lux，光照时间：12-20h/d。培养10天的试管苗生根率在98％以上，初生根健壮，生长1周左右根长可达3-5cm。20天左右即可开瓶练苗。

(4)、练苗与移栽

获得生长健壮的完整除虫菊试管苗以后，在室温为18-28℃的室内打开瓶盖，在瓶中加入少量自来水，练苗2-4天，待叶片颜色加深，表面角质形成后将苗取出，洗净根部的培养基。立即移栽到苗床中(苗床的营养土配比为：珍珠岩∶碱性营养土∶酸性营养土1∶1∶1)，于5-10月移栽，应每2小时喷雾15min，并搭遮阳布。于1-4月移栽，应每天(早6点到晚6点)喷雾1-3次，每次10min，早晚覆盖塑料薄膜。试管苗于苗床生长1-3个月后即可移栽大田。最佳的移栽时间是每年的3-5月和9-11月，移栽天气最好为阴天。移栽后的1-2个星期，需要早晚浇水。

本发明的积极效果：使用本发明提供的技术可使白花除虫菊快速繁殖，同时有效地保存除虫菊的优良品种。于扩大繁殖培养基上培养25天，单芽的增殖系数约为10-20倍。在无菌条件下，将生长的丛生芽分离成单芽，接种于生根培养基中8天左右根即生长，生根率可达95％以上。20天左右即可开瓶练苗，练苗2天即可移栽苗床，如果气候适宜，移栽成活率可高达98％以上。

具体实施方式

实施例1：

选择白花除虫菊优良品种种子萌发后生长10天左右的幼芽作为外植体。外植体消毒灭菌用复合消毒法：将外植体用蒸馏水冲洗五次，先用2％次氯酸钠溶液(加4滴吐温-20)消毒8分钟，再用0.1％升汞溶液(加4滴吐温-20)消毒5分钟，无菌水冲洗5次。

选择快速繁殖丛生芽培养基为：

MS+6-BA(0.2mg/L)+IAA(0.05mg/L)+PP₃₃₃(0.2mg/L)+糖(30g/L)+琼脂(3.5g/L)。

丛生芽生根培养培养基为：

1/2MS+IAA(0.2mg/L)+ABT(0.05mg/L)+糖(30g/L)+琼脂(3.5g/L)

培养条件：室温20℃，光照强度：1800Lux，光照时间：15h/天。20天左右开瓶练苗。

获得生长健壮的完整除虫菊试管苗以后，在室温为20℃的室内打开瓶盖，在瓶中加入少量自来水，练苗4天后将苗取出，洗净根部的培养基。立即移栽到苗床中，于5月移栽，每2小时喷雾15min，并搭遮阳布。试管苗于苗床生长2个月后即可移栽大田。

Claims

1.一种白花除虫菊繁殖技术，其特征在于从选择外植体到大田移栽试管苗要经过外植体选择及消毒灭菌、快速繁殖丛生芽、丛生芽生根培养、练苗与移栽四个步骤：

(1)、外植体选择及消毒灭菌：

用白花除虫菊优良品种的饱满种子或者种子萌发后生长8-12天左右的幼芽作为外植体。选择好的外植体用以下三种方法之一进行消毒灭菌处理：

a.用次氯酸钠溶液消毒：将外植体用蒸馏水冲洗几次，然后置于2％次氯酸钠溶液中振摇10-30分钟，取出，用无菌水冲洗3-5次；

b.用0.1％升汞溶液消毒：将外植体用蒸馏水冲洗数次，然后置于0.1％升汞溶液中振摇5-20分钟，取出，用无菌水冲洗数次；

c.复合消毒法：将外植体用蒸馏水冲洗几次，先用2％次氯酸钠溶液(加3-5滴吐温-20)消毒5-15分钟，再用0.1％升汞溶液(加3-5滴吐温-20)消毒5-15分钟，无菌水冲洗3-5次；

(2)、快速繁殖丛生芽的培养基为：

MS+6-BA(0.1-2.0mg/L)+IAA(0-0.5mg/L)+PP₃₃₃(0.1-2.0mg/L)+糖(30g/L)+琼脂(3.0-4.0g/L)，pH值为5.8；

(3)、丛生芽生根培养的培养基为：

1/2MS+IAA(0.1-0.5mg/L)+ABT(0.05-0.5mg/L)+糖(30g/L)+琼脂(3.0-4.0g/L)，pH值为5.8；

(4)、练苗与移栽：

获得生长健壮的完整除虫菊试管苗以后，在室温为18-28℃的室内打开瓶盖，在瓶中加入少量自来水，练苗2-4天，待叶片颜色加深，表面角质形成后将苗取出，洗净根部的培养基，立即移栽到苗床中，苗床的营养土配比为：珍珠岩∶碱性营养土∶酸性营养土1∶1∶1，试管苗于苗床生长1-3个月后移栽大田。