CN1887859A - 硫普罗宁氨基酸盐及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种用于治疗急慢性肝病药物的硫普罗宁氨基酸盐及其制备方法。它具有如下通式：本发明解决了硫普罗宁遇水容易氧化降解，遇热容易挥发和分解的的问题。本发明将硫普罗宁制备成氨基酸盐阻止了硫普罗宁与氧的结合，能够防止它的氧化。同时提高了药用物质的熔点，使它的热稳定性明显提高，因此使作为有效成分的药用物质的药效作用明显提高。本发明所制得的硫普罗宁氨基酸盐还可用于制备药物制剂。

Description

硫普罗宁氨基酸盐及其制备方法

                     技术领域

本发明涉及一种用于制备药物的氨基酸盐及其制备方法，具体地说是一种用于治疗急慢性肝病药物的硫普罗宁氨基酸盐及其制备方法。

                     背景技术

硫普罗宁(英文名Tiopronin，化学名：N-(2-巯基丙酰基)甘氨酸)为一种代谢改善解毒剂，其分子式：C₅H₉NO₃S，分子量：163.20，结构式如下：

它能够激活代谢酶，改善蛋白质代谢，促进肝功能修复，其主要用于治疗急慢性肝病。从20世纪90年代起，我国已成功开发出硫普罗宁原料药，之后陆续有硫普罗宁的多种制剂上市：包括片剂、胶囊、水针及冻干粉针等，现已广泛应用于临床，成为治疗肝病的重要药物。

但硫普罗宁有其重大的缺陷，即十分不稳定，在水的存在下，易氧化降解，影响了其临床治疗的疗效及安全性。而且硫普罗宁的熔点也比较低为96-99℃，因此对热也不稳定。硫普罗宁的物化性质直接限制了它直接用于制备各种药用制剂的用途。因此为了提高硫普罗宁的使用效果，许多研究者将其与其它组分的物质制备成组合物，其使用效果仍然不好。如公开日为2005年2月23日、公开号为CN1582911A的发明专利申请公开了一种新的硫普罗宁冻干粉针，它是将硫普罗宁作为活性成分与药物赋形剂氨基酸组成药物组合物，它对硫普罗宁在水溶液中的稳定性有一定改善，对硫普罗宁的氧化降解有一定抑制作用，但是相当一部分硫普罗宁仍然会氧化降解。尤其是它对硫普罗宁的对热稳定性几乎没有改进。所以长期以来，如何解决硫普罗宁容易氧化降解和热稳定性差的问题一直是本领域的技术人员研究的课题。

                     发明内容

本发明的目的就是针对硫普罗宁容易氧化降解和热稳定性差的缺陷，提供一种硫普罗宁氨基酸盐，它能够克服硫普罗宁的上述缺陷，且具有硫普罗宁相同的药物作用。

本发明的另一目的是提供了一种制备硫普罗宁氨基酸盐的合成方法。

本发明经过研究，发现将硫普罗宁与氨基酸反应生成硫普罗宁氨基酸盐后，可提高硫普罗宁的稳定性，既防止了硫普罗宁遇水容易氧化降解，又防止它遇热容易挥发和分解的的问题。其原因是氨基酸是药物中使用的抗氧剂，将硫普罗宁制备成氨基酸盐阻止了硫普罗宁与氧的结合，能够防止它的氧化。同时提高了药用物质的熔点，使它的热稳定性明显提高。而且氨基酸本身也是药物有效成分，硫普罗宁氨基酸盐的药效作用比单一的硫普罗宁的药效作用还高。

本发明的一种硫普罗宁氨基酸盐还可以制成药物制剂，包括固体制剂及液体制剂。

本发明的结构式如下：

其中R代表氨基酸。

本发明中所述的硫普罗宁氨基酸盐为硫普罗宁精氨酸、硫普罗宁鸟氨酸、硫普罗宁赖氨酸、硫普罗宁亮氨酸、硫普罗宁异亮氨酸、硫普罗宁甘氨酸、硫普罗宁胱氨酸、硫普罗宁半胱氨酸、硫普罗宁酪氨酸、硫普罗宁丙氨酸、硫普罗宁苯丙氨酸、硫普罗宁组氨酸、硫普罗宁丝氨酸、硫普罗宁苏氨酸、硫普罗宁蛋氨酸、硫普罗宁色氨酸、硫普罗宁谷氨酸、硫普罗宁门冬氨酸、硫普罗宁缬氨酸、硫普罗宁甲硫氨酸、硫普罗宁脯氨酸、硫普罗宁羟脯氨酸。

优选结构式如下的硫普罗宁精氨酸盐：

结构式如下的硫普罗宁赖氨酸盐：

结构式如下的硫普罗宁鸟氨酸盐：

结构式如下的硫普罗宁门冬氨酸盐：

本发明硫普罗宁氨基酸盐是通过以下方法制备的：

起始原料为硫普罗宁和氨基酸，反应式为：

反应式中R表示氨基酸

本发明硫普罗宁与氨基酸的投料克分子比为硫普罗宁∶氨基酸＝1∶0.8-1.2，优选1∶1.05。

本发明中反应过程中使用的溶剂为甲醇、乙醇和/或水。

                    具体实施方式

以下结合实施例对本发明作进一步描述：

实施例1：硫普罗宁精氨酸盐的制备

投料比：

原料名称	投料量	克分子比
			硫普罗宁L-精氨酸甲醇(95％)	100g112g600ml	11.05

操作：

将硫普罗宁、L-精氨酸、甲醇投入1000ml三口反应瓶中，搅拌，加热至回流，回流反应3小时后，趁热过滤，滤液置冰箱中5-10℃冷却结晶。5小时后，过滤，得白色结晶体，将结晶体置烘箱中80℃干燥6小时，得白色结晶固体196g，收率94.8％，mp197-200℃。

样品的红外吸收光谱数据：

吸收峰(cm^-1)：2957.92，1647.58，1604.88，1525.77，1457.23，1407.90，1386.21，1357.38，1335.77，1313.99，1246.37，1159.37，1012.96，670.43，555.97。

实施例2：硫普罗宁赖氨酸盐的制备

投料比：

原料名称	投料量	克分子比
			硫普罗宁L-赖氨酸乙醇(95％)	100g94g600ml	11.0

操作：

将硫普罗宁、L-赖氨酸、乙醇投入1000ml三口反应瓶中，搅拌，加热至回流，回流反应3小时后，趁热过滤，滤液置冰箱中5-10℃冷却结晶。5小时后，过滤，得白色结晶体，将结晶体置烘箱中80℃干燥6小时，得白色结晶固体177g，收率93.4％，mp172-175℃。

样品的红外吸收光谱数据：

吸收峰(cm^-1)：3328.57，2939.20，1646.85，1593.90，1521.17，1405.00，1357.70，1316.94，1023.31，904.87，701.58，550.03，420.12。

实施例3：硫普罗宁鸟氨酸盐的制备

投料比：

原料名称

投料量

克分子比

硫普罗宁鸟氨酸90％含水甲醇

100g89g500ml

11.1

操作：

将硫普罗宁100g、鸟氨酸89g、90％含水甲醇500ml投入1000ml三口反应瓶中，搅拌，加热至回流，回流反应3小时后，趁热过滤，滤液置冰箱中5-10℃冷却结晶。5小时后，过滤，得白色结晶体，将结晶体置烘箱中80℃干燥6小时，得白色结晶固体，mp238-240℃。

实施例4：硫普罗宁门冬氨酸盐的制备

投料比：

原料名称	投料量	克分子比
			硫普罗宁门冬氨酸90％含水甲醇	100g82g600ml	11.1

操作：

将硫普罗宁100g、门冬氨酸82g、90％含水甲醇600ml投入1000ml三口反应瓶中，搅拌，加热至回流，回流反应3小时后，趁热过滤，滤液置冰箱中5-10℃冷却结晶。5小时后，过滤，得白色结晶体，将结晶体置烘箱中80℃干燥6小时，得白色结晶固体，mp228-230℃。

实施例5：硫普罗宁谷氨酸盐的制备

投料比：

原料名称	投料量	克分子比
			硫普罗宁谷氨酸80％含水甲醇	100g81g600ml	10.8

操作：

将硫普罗宁100g、谷氨酸81g，80％含水甲醇600ml投入1000ml三口反应瓶中，搅拌，加热至回流，回流反应3小时后，趁热过滤，滤液置冰箱中5-10℃冷却结晶。5小时后，过滤，得白色结晶体，将结晶体置烘箱中80℃干燥6小时，得白色结晶固体，mp201-203℃。

实施例6：硫普罗宁谷氨酸盐的制备

投料比：

原料名称	投料量	克分子比
			硫普罗宁谷氨酸水	100g81g800ml	10.8

操作：将硫普罗宁100g、谷氨酸81g，水600ml投入1000ml三口反应瓶中，搅拌，加热至100℃反应3小时后，趁热过滤，将滤液减压蒸干，浓干物中加入400ml乙醇置冰箱中5-10℃冷却结晶。5小时后，过滤，得白色结晶体，将结晶体置烘箱中80℃干燥6小时，得白色结晶固体，mp201-203℃。

实施例7：

比较A：硫普罗宁，B：硫普罗宁精氨酸盐，C：硫普罗宁赖氨酸盐在水中的稳定性。

将A、B、C分别溶于蒸馏水中，配制成含量5％的水溶液，灌入2ml安瓿中，熔封，置恒温烘箱中，40℃，60℃条件下考察10天。于0，5，10天分别取样，按下述方法检查有关物质及含量：

有关物质照高效液相色谱法(HPLC法)测定。

色谱条件与系统适应性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以0.07mol/L磷酸二氢钾溶液为流动相，流速约为每分钟1.0ml，检测波长为210nm。理论板数按硫普罗宁计算应不低于2000。

测定法：精密称取本品适量，加流动相制成每1ml中含0.5mg的溶液作为供试品溶液；量取供试品溶液适量，加流动相制成每1ml中含5μg的溶液作为预试溶液。取预试溶液20μl注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分色谱峰的峰高为满量程的5％-10％；再取供试品溶液20μl，注入液相色谱仪，记录色谱图至主成分峰保留时间的3.5倍。

含量测定照高效液相色谱法测定。

色谱条件与系统适应性试验同有关物质测定项下。

测定法：精密称取本品1ml置100ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。另取硫普罗宁对照品，精密称定，用流动相制成每1ml中含0.5mg的溶液，作为对照溶液。取供试品溶液与对照品溶液各20μl注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算，即得。

测定结果见表1：

时间(天)		0			5			10
											试验          样品		A	B	C	A	B	C	A	B	C
含量(％)	40℃	99.2	99.6	99.5	92.3	96.7	95.5	89.4	93.4	92.2
											60℃	99.2	99.6	99.5	89.8	94.5	93.2	81.5	90.8	88.6
	有关物质(％)	40℃	0.78	0.47	0.48	7.72	3.32	4.48	10.63	6.57											7.98
60℃											0.78	0.47	0.48	11.01	5.51	6.72	18.42	9.23	11.20

可以看出，在40℃，60℃影响因素条件下，硫普罗宁精氨酸盐、硫普罗宁赖氨酸盐在水中均比硫普罗宁稳定。其中硫普罗宁精氨酸盐比硫普罗宁赖氨酸盐稳定性更好。

实施例8：

比较A：硫普罗宁，B：硫普罗宁精氨酸盐，C：硫普罗宁赖氨酸盐在强光照射条件下的稳定性。

分别取A、B、C适量，放入干燥器中，置于注射剂澄明度测定仪下，以3000Lx光照度照射10天，于0，5，10天分别取样，测定有关物质及含量。

检测方法同实施例3。

测定结果见表2：

时间(天)	0			5			10
										试验样品	A	B	C	A	B	C	A	B	C
含量(％)	99.4	99.5	99.5	97.1	98.8	98.2	94.0	97.9	96.3
										有关物质(％)	0.61	0.51	0.52	3.01	2.19	2.69	6.02	2.11	3.70

可以看出，在10天强光照射下A、B、C的稳定性排序为：硫普罗宁精氨酸盐＞硫普罗宁赖氨酸盐＞硫普罗宁。

从实例7、8可以看出，硫普罗宁的氨基酸盐比硫普罗宁稳定。这为改善硫普罗宁的稳定性提供了一种很好的途径。

实施例9：硫普罗宁鸟氨酸盐注射液的制备

处方：

原料                                    投料量

硫普罗宁鸟氨酸盐                        362g(含硫普罗宁200g)

氯化钠                                  880g

注射用水至                              100000ml

共制成注射液                            1000瓶

制备工艺：

(1)配料、滤过：在配料锅内加入30L 50-60℃的注射用水，然后加入处方量的硫普罗宁鸟氨酸和氯化钠，搅拌，全溶，加入30g针用活性炭，加热煮沸30min，抽滤至稀配锅，加水至全量。测含量，含量应为标示量的93％-107％。合格后，用0.45μ微孔滤膜滤过，滤液交灌封组。

(2)灌装：灌装用的I类材质A型瓶用注射水洗净，烘干。同时镀膜丁基胶塞用注射水漂洗干净。药液进入注射液灌封机，灌装于输液瓶中，盖塞后，压制复合铝盖。

(3)灭菌：灭菌在灭菌柜中进行，灭菌温度115℃，灭菌时间35min，出柜后，灯检，浅见合格得成品。

实施例10：硫普罗宁门冬氨酸盐片剂的制备

处方：

硫普罗宁门冬氨酸盐                    363g(含硫普罗宁200g)

羟丙纤维素                            15g

微晶纤维素                            15g

淀粉                                  30g

乳糖                             206g

3％羟丙甲纤维素水溶液            适量

十二烷基硫酸钠                   0.4g

硬脂酸镁                         3g

制成                             1000片

制备方法：

称取80-100目的硫普罗宁门冬氨酸盐、羟丙纤维素、微晶纤维素、淀粉和乳糖，混合均匀，加入3％羟丙甲纤维素水溶液适量，制成适宜软才，用16目尼龙网制粒，湿颗粒均匀摊于干燥盘中，于60℃下快速通风干燥，控制水分1-2％。往干颗粒中加入十二烷基硫酸钠和硬脂酸镁，混匀，用14目尼龙网整粒，混匀后控制压力4-5kg/cm²压片即得。

Claims (8)

1.一种硫普罗宁氨基酸盐，具有如下通式：

通式中R代表氨基酸，具体是指精氨酸、鸟氨酸、赖氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、甘氨酸、胱氨酸、半胱氨酸、酪氨酸、丙氨酸、苯丙氨酸、组氨酸、丝氨酸、苏氨酸、蛋氨酸、色氨酸、谷氨酸、门冬氨酸、缬氨酸、甲硫氨酸、脯氨酸、羟脯氨酸。

2.根据权利要求1的一种硫普罗宁氨基酸盐，其中所述硫普罗宁氨基酸盐为结构式如下的硫普罗宁精氨酸盐：

3.根据权利要求1的一种硫普罗宁氨基酸盐，其中所述硫普罗宁氨基酸盐为结构式如下的硫普罗宁赖氨酸盐：

4.根据权利要求1的一种硫普罗宁氨基酸盐，其中所述硫普罗宁氨基酸盐为结构式如下的硫普罗宁鸟氨酸盐：

5.根据权利要求1的一种硫普罗宁氨基酸盐，其中所述硫普罗宁氨基酸盐为结构式如下的硫普罗宁门冬氨酸盐：

6.权利要求1的一种硫普罗宁氨基酸盐的制备方法，其特征在于按以下方式进行。

a.投料克分子比：

硫普罗宁∶氨基酸＝1∶0.8-1.2

b.操作步骤：

按上述投料比加入两种化合物，按其总重量的20-30倍加入有机溶剂和/或水，加热，回流反应3小时，趁热过滤，滤液于5-10℃冷却结晶，过滤，将结晶体在80℃干燥6小时，得成品。

7.根据权利要求6的一种硫普罗宁氨基酸盐的制备方法，其特征在于所述有机溶剂为甲醇或乙醇。

8.权利要求1的一种硫普罗宁氨基酸盐在制备药物制剂中的应用。