本申请为分案申请,原案申请的申请日为2003年9月3日,申请号为03824997.9(PCT/US2003/027555),发明名称为“作为细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂的吡唑并嘧啶”。
具体实施方式
实施例
通常,本发明中所述的化合物可通过以下流程1中所述的通用路线制备。
流程1
将原料腈用叔丁醇钾和甲酸乙酯处理,得到中间体烯醇2,将其用肼处理,得到所需的取代的3-氨基吡唑。使3型化合物与5型的适当官能化的酮酯缩合,得到流程3中所示的吡啶酮6。该通用路线中使用的酮酯或者由市售提供或者可按流程2中所示制备。
流程2
9型氯化物可通过将吡啶酮8用POCl3处理制备。当R2等同于H时,通过亲电卤化、酰化和各种其它亲电性芳香取代,可能在9型化合物该位置上取代。
N7-氨基官能团的引入可通过使9型化合物与适当的胺反应,置换9型化合物的氯实现,如流程3中所示。
流程3
7型化合物与11型的适当官能化的马来酸酯缩合,可生成吡啶酮13,如流程4中所示。
14型氯化物可通过将吡啶酮13用POCl3处理制备。当R2为H时,通过亲电卤化、酰化和各种其它亲电性芳香取代,可能在9型化合物该位置上取代。
N7-氨基官能团的引入可通过区域选择性置换14型化合物的氯实现。N5-氨基官能团的引入通过在较高温度下加入适当的胺实现。
流程4
另外,使7型氨基吡唑与根据流程5制备的适当官能化的酮酯缩合,可生成13型的化合物,如流程4中所示。
流程5
14型氯化物可通过将吡啶酮13用POCl3处理制备。当R2为H时,通过亲电卤化、酰化和各种其它亲电性芳香取代,可能在14型化合物该位置上取代。
N7-氨基的官能团的引入可通过置换15型化合物的氯实现。
制备实施例
制备实施例1
步骤A:
按德国专利DE 19834047 A1P 19中的方法进行。向KOtBu(6.17g,0.055mol)的无水THF(40mL)溶液中滴加入环丙基乙腈(2.0g,0.025mol)和甲酸乙酯(4.07g,0.055mol)的无水THF(4mL)溶液。立即形成沉淀。将混合物搅拌12小时。真空浓缩,将残留物与乙醚(50mL)搅拌。将得到的残留物倾出,用乙醚(2×50mL)洗涤,真空除去残留物中的乙醚。将残留物溶于冷水(20mL)中,用12N HCl调节pH至4-5。将混合物用乙酸乙酯(2×50mL)提取。将有机层合并,经硫酸镁干燥,减压浓缩,得到醛,为褐色液体。
步骤B:
将制备实施例1步骤A中的产物(2.12g,0.0195mol)、NH2NH2.H2O(1.95g,0.039mol)和(1.8g 0.029mole)的冰醋酸(1.8g,0.029mol)溶解于EtOH(10mL)。回流6小时,真空浓缩。将残留物在二氯甲烷(150mL)中搅浆,用1N NaOH调节pH至9。将有机层用盐水洗涤,经硫酸镁干燥,真空浓缩,得到产物,为蜡状橙色固体。
制备实施例2-4:
根据制备实施例1中提出的基本相同的方法,仅用表2第2列中所示的腈代替,制备表2第3列中所示的化合物:
表2
制备实施例4
将2-羰基甲氧基环戊酮(6.6ml,0.05mol)的THF(15mL)溶液滴加到在0-10℃下的剧烈搅拌的NaH(60%矿油中,4g,0.1mol)的THF(100mL)混悬液中。鼓泡停止后,在相同温度下,将反应混合物用在THF(15mL)中的ClCOOMe(7.8ml,0.1mol)处理。室温下,将得到的灰白色混悬液搅拌30分钟,然后回流下搅拌30分钟。通过TLC监测反应中原料的消失。将反应混合物用水小心猝灭,在一分液漏斗中,将其在乙酸乙酯和饱和氯化铵水溶液之间分配。振摇,分离,将有机层用盐水洗涤,经无水硫酸钠干燥。除去溶剂,残留物经快速层析纯化,用5%和10%乙酸乙酯的己烷溶液顺次洗脱。得到9.4g无色油状物,94%收率。1H NMR(CDCl3)δ3.90(s,3H),3.73(s,3H),2.65(m,4H),1.98(m,2H)。
制备实施例5
向-65℃下的二异丙基氨化锂的THF溶液(2.0N,0.04mol)溶液中滴加入2,2-二羰基甲氧基环戊酮(4g,0.02mol)的THF(60mL)溶液。在相同温度下,将得到的反应混合物搅拌,然后加入氯甲酸甲酯(1.54ml,0.02mol)。将反应混合物搅拌1小时,倒入带有一些冰的饱和氯化铵溶液中。将该溶液用乙醚提取3次,合并的醚层经硫酸钠干燥。真空除去溶剂,残留物经快速层析纯化,用30%升高至50%的乙酸乙酯的己烷溶液洗脱。得到2.3g黄色油状物,58%收率。1H NMR(CDCl3)δ3.77(s,6H),3.32(t,1H),3.60-3.10(m,4H)。
制备实施例6
按(K.O.Olsen,J.Org.Chem.,(1987)52,4531-4536)中所述进行此类反应。因此,向-65℃至-70℃下的搅拌的二异丙基氨化锂的THF溶液中滴加入新蒸馏的乙酸乙酯。将得到的溶液搅拌30分钟,加入所述酰氯的THF溶液。在-65℃至-70℃下,将反应混合物搅拌30分钟,然后加入1N HCl溶液终止。将得到的两相混合物温热至室温。将得到的混合物用乙酸乙酯(100mL)稀释,收集有机层。将水层用乙酸乙酯提取(100mL)。将有机层合并,用盐水洗涤,干燥(Na2SO4),真空浓缩,得到粗品β-酮酯,其用于接下来的缩合反应中。
制备实施例7-19:
根据制备实施例6中提出的基本相同的方法,仅用表3第2列中所示的酰氯代替,制备表3第3列中所示的β-酮酯:
表3
制备实施例20
在-20℃至-30℃下,向所述酸的THF溶液中加入三乙胺,接着加入氯甲酸异丁基酯。在-20℃至-30℃下,将混合物搅拌30分钟后,在氩气下过滤出三乙胺盐酸盐,将滤液加入到-65℃至-70℃下的LDA-EtOAc反应混合物(按方法A中所述制备)中。加入1N HCl,然后按常规处理反应混合物,蒸发溶剂,分离粗品β-酮酯。该粗品物质用于接下来的缩合反应中。
制备实施例21-28:
根据制备实施例20中提出的基本相同的方法,仅用表4第2列中所示的羧酸代替,制备表4第3列中所示的化合物:
表4
制备实施例29
将3-氨基吡唑(2.0g,24.07mmol)和苄酰基乙酸乙酯(4.58mL,1.1eq.)的AcOH(15mL)溶液加热回流3小时。将反应混合物冷却至室温,真空浓缩。将得到的固体用乙酸乙酯稀释,过滤,得到白色固体(2.04g,40%收率)。
制备实施例30-73:
根据制备实施例29中提出的基本相同的方法,仅用表5第2列中所示的氨基吡唑和表5第3列中所示的酯代替,制备表5第4列中所示的化合物:
表5
制备实施例74
将苄酰基乙酸乙酯(1.76mL,1.1eq.)和3-氨基-4-氰基吡唑(1.0g,9.25mmol)在AcOH(5.0mL)和水(10mL)中的溶液加热回流72小时。将得到的溶液冷却至室温,真空浓缩,用乙酸乙酯稀释。过滤得到的沉淀,用乙酸乙酯洗涤,真空干燥(0.47g,21%收率)。
制备实施例75
按US专利3,907,799中的方法进行。将钠(2.3g,2eq.)分次加入到EtOH(150mL)中。当钠完全溶解后,加入3-氨基吡唑(4.2g,0.05mol)和丙二酸二乙酯(8.7g,1.1eq.),将得到的溶液加热回流3小时。将得到的混悬液冷却至室温,过滤。将滤饼用EtOH(100mL)洗涤,溶解于水(250mL)中。将得到的溶液在冰浴中冷却,用浓HCl将pH调节至1-2。将得到的混悬液过滤,用水(100mL)洗涤,真空干燥,得到白色固体(4.75g,63%收率)。
制备实施例76-78:
根据制备实施例75中提出的基本相同的方法,仅用表6第2列中所示的化合物代替,制备表6第3列中所示的化合物:
表6
制备实施例79
室温下,将制备实施例29中制备的化合物(1.0g,4.73mmol)在POCl3(5mL)和吡啶(0.25mL)中的溶液搅拌3日。将得到的浆状液用乙醚稀释,过滤,将固体残留物用乙醚洗涤。将合并的乙醚洗液冷却至0℃,然后用冰处理。当剧烈反应停止后,将得到的混合物用水稀释,分离,将水层用乙醚提取。将合并的有机层用水和饱和NaCl洗涤,经Na2SO4干燥,过滤,浓缩,得到浅黄色固体(0.86g,79%收率)。LCMS:MH+=230。
制备实施例80-122:
根据制备实施例79中提出的基本相同的方法,仅用表7第2列中所示的化合物代替,制备表7第3列中所示的化合物:
表7
制备实施例123
在氮气下,将POCl3(62mL)冷却至5℃,加入二甲苯胺(11.4g,2.8eq.)和制备实施例75中制备的化合物(4.75g,0.032mol)。将反应混合物温热至60℃,搅拌过夜。将反应混合物冷却至30℃,减压蒸馏出POCl3。将残留物溶解于二氯甲烷(300mL)中,倒入冰中。搅拌15分钟后,用固体碳酸氢钠,将混合物pH调节至7-8。分离各层,将有机层用水(3×200mL)洗涤,经MgSO4干燥,过滤,浓缩。粗产物经快速层析纯化,用50∶50二氯甲烷∶己烷溶液作为洗脱剂,洗脱出所述二甲苯胺。然后将洗脱液换为75∶25二氯甲烷∶己烷,洗脱出所需的产物(4.58g,77%收率)。MS:MH+=188。
制备实施例124-126:
根据制备实施例123中提出的基本相同的方法,仅用表8第2列中所示的化合物代替,制备表8第3列中所示的化合物:
表8
制备实施例127
将制备实施例79中制备的化合物(0.10g,0.435mmol)的乙腈(3mL)溶液用NBS(0.085g,1.1eq.)处理。室温下将反应混合物搅拌1小时,减压浓缩。粗产物经快速层析纯化,用20%乙酸乙酯的己烷溶液作为洗脱剂(0.13g,100%收率)。LCMS:MH+=308。
制备实施例128-164:
根据制备实施例127中提出的基本相同的方法,仅用表9第2列中所示的化合物代替,制备表9第3列中所示的化合物:
表9
制备实施例165
将制备实施例80中制备的化合物(0.3g,1.2mmol)的乙腈(15mL)溶液用NCS(0.18g,1.1eq.)处理,将得到的溶液加热回流4小时。再加入NCS(0.032g,0.2eq.),将得到的溶液在回流下搅拌过夜。将反应混合物冷却至室温,真空浓缩,残留物经快速层析纯化,用20%乙酸乙酯的己烷溶液作为洗脱剂(0.28g,83%收率)。LCMS:MH+=282。
制备实施例166-167:
根据制备实施例165中提出的基本相同的方法,仅用表10第2列中所示的化合物代替,制备表10第3列中所示的化合物:
表10
制备实施例167.10:
根据制备实施例165中提出的基本相同的方法,仅用N-碘代琥珀酰亚胺代替,制备以上化合物。
制备实施例168
向制备实施例79中制备的化合物(1.0g,4.35mmol)的DMF(6mL)溶液中加入POCl3(1.24mL,3.05eq.),室温下将得到的混合物搅拌过夜。将反应混合物冷却至0℃,加入冰猝灭过量的POCl3。将得到的溶液用1N NaOH中和,用水稀释,用二氯甲烷提取。合并的有机物经Na2SO4干燥,过滤,真空浓缩。粗产物经快速层析纯化,用5%甲醇的二氯甲烷溶液作为洗脱剂(0.95g,85%收率)。LCMS:MH+=258。
制备实施例169:
根据制备实施例168中提出的基本相同的方法,仅用制备实施例80中制备的化合物代替,制备以上化合物(0.45g,40%收率)。
制备实施例170
向制备实施例169的产物(0.25g,0.97mmol)的THF溶液中加入NaBH4(0.041g,1.1eq.),室温下将得到的混合物搅拌过夜。将反应混合物通过加入水猝灭,用二氯甲烷提取。合并的有机物经Na2SO4干燥,过滤,减压浓缩。粗产物经快速层析纯化,用60∶40己烷∶乙酸乙酯混合物作为洗脱剂(0.17g,69%收率)。MS:MH+=260。
制备实施例171
室温下,将制备实施例170中制备的化合物(0.12g,0.462mmol)、硫酸二甲酯(0.088mL,2.0eq.)、50% NaOH(0.26mL)和催化量的Bu4NBr的二氯甲烷(4mL)溶液搅拌过夜。将反应混合物用水稀释,用二氯甲烷提取。合并的有机相经Na2SO4干燥,过滤,减压浓缩。粗产物经快速层析纯化,用30%乙酸乙酯-己烷溶液作为洗脱剂(0.062g,48%收率)。
制备实施例172
向0℃下的PPh3(4.07g,4.0eq.)和CBr4(2.57g,2.0eq.)的二氯甲烷(75mL)溶液中加入制备实施例168中制备的化合物(1.0g,3.88mmol)。0℃下,将得到的溶液搅拌1小时,减压浓缩。残留物经快速层析纯化,用20%乙酸乙酯的己烷溶液作为洗脱剂(1.07g,67%收率)。
制备实施例173:
根据制备实施例172中提出的基本相同的方法,仅用制备实施例169中制备的化合物代替,制备以上化合物(0.5g,70%收率)。
制备实施例174
在一封闭的压力管中,50℃下,将制备实施例127中制备的化合物(3.08g,10.0mmol)、2.0M NH3的2-丙醇液(50mL,100.0mmol)和37% NH3水溶液(10.0mL)搅拌1日。蒸发溶剂,粗产物经快速层析纯化,用3∶1二氯甲烷∶乙酸乙酯作为洗脱剂。得到浅黄色固体(2.30g,80%)。LCMS:M+=289。
制备实施例175-180:
根据制备实施例174中提出的基本相同的方法,仅用表11第2列中所示的化合物代替,制备表11第3列中所示的化合物:
表11
制备实施例181:
将制备实施例80中制备的化合物(0.3g,1.2mmol)、K2CO3(0.33g,2eq)和4-氨基甲基吡啶(0.13mL,1.1eq.)加热回流过夜。将反应混合物冷却至室温,减压浓缩。残留物用水稀释,用二氯甲烷提取。将合并的有机物经Na2SO4干燥,过滤,浓缩。粗产物经快速层析纯化,用5%(10% NH4OH的甲醇溶液)的二氯甲烷溶液作为洗脱剂(0.051g,40%收率)。LCMS:MH+=320。
制备实施例182:
根据制备实施例181中提出的基本相同的方法,仅用制备实施例92中所述的化合物代替,制备上述化合物。LCMS:MH+=370。
制备实施例183:
向制备实施例123中制备的化合物(0.25g,1.3mmol)的二氧六环(5mL)溶液中加入iPr2NEt(0.47mL,2.0eq.)和3-氨基甲基吡啶(0.15mL,1.1eq.)。室温下,将得到的溶液搅拌72小时。将反应混合物用水稀释,用乙酸乙酯提取。将合并的有机物用水和饱和氯化钠洗涤,经Na2SO4干燥,过滤,真空浓缩。粗产物经快速层析纯化,用5%甲醇的二氯甲烷溶液作为洗脱剂(0.29g,83%收率)。MS:MH+=260。
制备实施例184-187:
根据制备实施例183中提出的基本相同的方法,仅用表12第2列中所示的化合物代替,制备表12第3列中所示的化合物:
表12
制备实施例188和制备实施例189:
向-78℃下的制备实施例185中制备的化合物(1.18g,3.98mmol)的THF(35mL)溶液中滴加入LAH(4.78mL,1M乙醚液,1.0eq.)。在-78℃下,将反应混合物搅拌3小时,然后再滴加LAH(2.0mL,1M乙醚液,0.42eq.)。将反应混合物再搅拌1.25小时,加入饱和硫酸钠(8.5mL)猝灭。将反应混合物用乙酸乙酯(23mL)、水(2mL)和甲醇(50mL)稀释。将得到的浆状物通过硅藻土小柱过滤。将该硅藻土用甲醇洗涤,经Na2SO4干燥滤液,过滤,浓缩。产物经快速层析纯化,用二氯甲烷∶甲醇(93∶7)溶液作为洗脱剂,先洗脱出的产物为醛,后洗脱出的产物为醇。
制备实施例188:(醛):0.4g,39%收率。MS:MH+=254。
制备实施例189:(醇):0.25g,24%收率。MS:MH+=256。
制备实施例190:
向0℃下的制备实施例188中制备的化合物(0.075g,0.30mmol)的THF(2.0mL)溶液中滴加入CH3MgBr(0.3mL,3.0M乙醚液,3.0eq.)。在0℃下,将得到的溶液再搅拌1.5小时,温热至室温,搅拌过夜。再加入CH3MgBr(0.15mL,3.0M乙醚液,1eq.),将得到的溶液再搅拌1.5小时。将反应混合物冷却至0℃,加入饱和氯化铵猝灭。将得到的溶液用氯仿和水稀释,用二氯甲烷提取。将合并的有机层用饱和氯化钠洗涤,经Na2SO4干燥,过滤,浓缩。粗产物经快速层析纯化,用二氯甲烷∶甲醇(90∶10)溶液作为洗脱剂(0.048g,60%收率)。MS:MH+=270。
制备实施例191:
根据制备实施例190中提出的基本相同的方法,仅用制备实施例185中制备的化合物代替,并使用过量的MeMgBr(5eq.),制备上述化合物。
制备实施例192:
室温下,将制备实施例181中制备的化合物(0.29g,0.91mmol)、BOC2O(0.22g,1.1eq)和DMAP(0.13g,1.1eq.)在二氧六环(10mL)中搅拌3日。再加入BOC2O(0.10g,0.5eq),将反应混合物搅拌4小时。将反应混合物真空浓缩,用饱和碳酸氢钠(15mL)稀释,用二氯甲烷提取(2×100mL)。将合并的有机层经Na2SO4干燥,过滤,减压浓缩。粗产物经快速层析纯化,用5%(10% NH4OH的甲醇溶液)的二氯甲烷溶液作为洗脱剂(0.35g,91%收率)。LCMS:MH+=420。
制备实施例193:
根据制备实施例192中提出的基本相同的方法,仅用制备实施例183中制备的化合物代替,制备上述化合物。MS:MH+=360。
制备实施例193.10:
根据制备实施例192中提出的基本相同的方法,仅用制备实施例184.1中制备的化合物代替,制备上述化合物。MS:MH+=454。
制备实施例194:
根据制备实施例192中提出的基本相同的方法,仅用制备实施例187.11中制备的化合物代替,制备上述化合物(0.223g,88%收率)。MS:MH+=528。
制备实施例195:
根据制备实施例127中提出的基本相同的方法,仅用制备实施例192中制备的上述化合物代替,制备上述化合物(0.38g,95%收率)。LCMS:MH+=498。
制备实施例196:
根据制备实施例195中提出的基本相同的方法,仅用制备实施例193中制备的化合物代替,制备上述化合物(0.3g,83%收率)。MS:MH+=438。
制备实施例197
将制备实施例195中制备的化合物(0.15g,0.3mmol)、苯基硼酸(0.073g,2.0eq.)、K3PO4(0.19g,3.0eq.)和Pd(PPh3)4(0.017g,5mol%)在DME(16mL)和水(4mL)中的溶液加热回流7小时。将得到的溶液冷却至室温,用水(10mL)稀释,用二氯甲烷(3×50mL)提取。将合并的有机物经Na2SO4干燥,过滤,浓缩。粗产物经快速层析纯化,用2.5%(10% NH4OH的甲醇溶液)的二氯甲烷溶液作为洗脱剂(0.16g,100%收率)。
制备实施例198:
向4-氨基甲基吡啶(1.41mL,13.87mmol)的二氯甲烷(50mL)溶液中,加入BOC2O(3.3g,1.1eq)和TEA,室温下,将得到的溶液搅拌2小时。将反应混合物用水(50mL)稀释,用二氯甲烷提取。将合并的有机层经Na2SO4干燥,过滤,减压浓缩。粗产物经快速层析纯化,用5%(10% NH4OH的甲醇溶液)的二氯甲烷溶液作为洗脱剂,得到黄色固体(2.62g,91%收率)。LCMS:MH+=209。
制备实施例199:
根据制备实施例198中提出的基本相同的方法,仅用3-氨基甲基吡啶代替,制备上述化合物,为黄色油状物(2.66g,92%收率)。LCMS:MH+=209。
制备实施例200:
向0℃下的制备实施例198中制备的化合物(0.20g,0.96mmol)的二氯甲烷(5mL)溶液中加入m-CPBA(0.17g,1.0eq),0℃下,将得到的溶液搅拌2小时,然后在4℃下储存过夜,然后将反应混合物温热至室温,搅拌3小时。将反应混合物用水稀释,用二氯甲烷提取。将合并的有机物经Na2SO4干燥,过滤,浓缩。粗产物经快速层析纯化,用10%(10% NH4OH的甲醇)溶液作为洗脱剂。LCMS:MH+=255。
制备实施例201:
将过硫酸氢钾制剂(58.6g)的水(250mL)溶液滴加至制备实施例199中制备的化合物(27g,0.13mol)和碳酸氢钠(21.8g,2.0eq.)的甲醇(200mL)和水(250mL)溶液中。室温下,将得到的溶液搅拌过夜。将反应混合物用二氯甲烷(500mL)稀释,过滤。分离各层,将水层用二氯甲烷提取。将合并的有机物经Na2SO4干燥,过滤,减压浓缩,得到白色固体(21.0g,72%收率)。MS:MH+=255。
制备实施例202:
室温下,将制备实施例200中制备的化合物(0.29g,1.29mmol)在4M HCl的二氧六环(0.97mL)中搅拌2小时。将反应混合物真空浓缩,无需进一步纯化而使用。LCMS:MH+=125。
制备实施例203:
根据制备实施例202中提出的基本相同的方法,仅用制备实施例201中制备的化合物代替,制备以上所示的化合物。LCMS:MH+=125。
制备实施例204:
向0℃下的4-N-叔丁氧基羰基氨基哌啶(0.8g,4.0mmol)的二氯甲烷(10mL)溶液中加入TEA(1.40mL,2.5eq)和3-三氟甲基苯甲酰氯(1.05g,1.25eq.)。将得到的混合物搅拌15分钟,温热至室温,然后搅拌3小时。将反应混合物用二氯甲烷稀释,用5%碳酸钠洗涤(2×100mL)。将有机层经Na2SO4干燥,过滤,浓缩,得到浅黄色固体(定量粗品收率)。
制备实施例205:
向0℃下的制备实施例204中制备的化合物(1.0g,2.76mmol)的二氯甲烷(15mL)溶液中加入TFA(8mL),0℃下,将得到的溶液搅拌30分钟,室温下搅拌1小时。将反应混合物倒入碳酸钠(40g)中,加入水(400mL),将得到的混合物用二氯甲烷提取。将合并的有机层经Na2SO4干燥,过滤,减压浓缩。粗产物经快速层析纯化,用20%(7NNH3的甲醇溶液)的二氯甲烷溶液作为洗脱剂(0.6g,82%收率)。
制备实施例206:
步骤A:
向室温下的6-氯烟酰胺(1g,6.39mmol)的异戊醇(15mL)溶液中顺次加入碳酸钠(0.81g,7.67mmol)和甲氧基乙胺(0.67mL,7.67mmol)。在130℃下,将混合物加热16小时,冷却至室温,通过一中心为玻璃丝填料的滤器过滤。将得到的滤液减压浓缩,将得到的固体用乙醚研磨(2×10mL)。将粗品固体置于高真空下,得到1.2g(96%)的浅黄色固体。M+H=196。
步骤B:
用10分钟,向0℃下的制备实施例206步骤A中制备的酰胺(1.2g,6.12mmol)的THF(5mL)溶液中滴加入BH3-THF溶液(43mL;43mmol)。将得到的溶液温热至室温,搅拌14小时。将混合物冷却至0℃,顺次用6M HCl(35mL)、水(30mL)和MeOH(150mL)处理。将混合物搅拌8小时,减压浓缩。将粗品残留物与甲醇研磨,减压浓缩,然后置于高真空下,得到1.6g(82%)白色固体,为二盐酸盐。M+H(游离碱)=182.0。用此物质粗品与7-Cl加成物偶合。
制备实施例207-211:
根据制备实施例206中提出的基本相同的已知的方法,仅利用表13第2列中所示的胺,制备表13第3列中所示的胺:
表13
制备实施例212:
根据WO 91/18904中所述的方法,制备以上化合物。
制备实施例213:
根据US 6,180,627 B1中所述的方法,制备以上化合物。
制备实施例214:
根据J.Med.Chem.(2001),44,4505-4508中所述的方法,制备已知的胺。
制备实施例215:
根据J.Med.Chem.(1997),40,3726-3733中所述的方法,制备已知的胺。
制备实施例216:
步骤A:
将醛(50g,0.41mol)[WO 0232893]的甲醇(300mL)溶液冷却至0℃,用20分钟小心用NaBH4(20g,0.53mol,分6批)处理。然后将反应物温热至20℃,搅拌4小时。再将混合物冷却至0℃,小心用饱和氯化铵水溶液猝灭,浓缩。快速层析(5-10% 7NNH3-MeOH/CH2Cl2),得到伯醇(31g,62%),为浅黄色固体。
步骤B:
将制备实施例216步骤A中的醇(31g,0.25mol)的二氯甲烷(500mL)浆状液冷却至0℃,慢慢用SOCl2(55mL,0.74mol,经30分钟)处理。然后在20℃下,将反应物搅拌过夜。将该物质浓缩,在丙酮中搅浆,然后过滤。将得到的米色固体在真空下干燥过夜(38.4g,52%,HCl盐)。
步骤C:
向一装有搅拌棒的15mL压力管中加入得自制备实施例216步骤B的氯化物(150mg,0.83mmol),接着加入7M NH3/MeOH(10mL)。室温下,将得到的溶液搅拌48小时,然后将混合物减压浓缩,得到浅黄色固体(0.146g,83%)。M+H(游离碱)=140。
制备实施例217:
根据WO 00/26210中所述的方法,制备以上化合物。
制备实施例218:
根据WO 99/10325中所述的方法,制备以上化合物。
制备实施例219:
根据WO 02/64211中所述的方法,制备已知的胺的二盐酸盐。
制备实施例220:
根据WO 02/64211中所述的方法,制备以上化合物。
制备实施例221:
根据WO 00/37473中所述的方法,制备已知的伯醇,然后根据WO 02/064211,按制备实施例220类似的方式,将所述伯醇转化为所需的胺的二盐酸盐。
制备实施例222:
步骤A:
向0℃下的醛(WO 02/32893)(0.46g,2.07mmol)的MeOH/THF(2mL/2mL)溶液中一次性加入NaBH4(94mg,2.48mmol)。室温下,将得到的混合物搅拌12小时,用饱和氯化铵水溶液(3mL)稀释。将混合物减压浓缩,将得到的水层用二氯甲烷(3×5mL)提取。将有机层合并,用盐水洗涤(1×5mL),干燥(Na2SO4),过滤。将有机层减压浓缩,得到417mg(90%收率)的白色固体。M+H=225。
步骤B:
将制备实施例222步骤A中的粗品醇(0.4g,1.78mmol)的二氯甲烷(4mL)溶液加入SOCl2(0.65mL,8.91mmol)中,室温下,将混合物搅拌2小时。将混合物减压浓缩,得到407mg(94%)的浅黄色固体。M+H=243。该粗品物质无需进一步纯化而使用。
步骤C:
向在一压力管中的制备实施例222步骤B中的粗品氯化物(0.33g,1.36mmol)的溶液中,加入7M NH3/MeOH(35mL),将混合物搅拌72小时。将混合物减压浓缩,得到257mg(85%)黄色半固体。M+H(游离碱)=224。
制备实施例223:
向一装有制备实施例222中的胺盐酸盐(0.24g,1.1mmol)和搅拌棒的园底烧瓶中加入4N HCl/二氧六环(10mL)。室温下,将得到的溶液搅拌12小时,减压浓缩,用二氯甲烷(3×5mL)研磨。将粗产物过滤,用乙醚(2×5mL)洗涤,高真空干燥,得到0.19g(91%),为二盐酸盐。M+H(游离碱)=124。
制备实施例224:
将Pd(PPh3)4(0.404gm,0.35mmol)加入到4-氰基苯硼酸(1.029g,7mmol)和2-溴吡啶(1.11g,7mmol)在75mL乙腈中的脱气溶液中。向反应混合物中加入0.4M碳酸钠溶液(35mL),在Ar下,将得到的溶液在90℃下回流24小时(通过TLC监测反应进程)。将反应混合物冷却,分离水层。将含有产物和所用的催化剂的有机层与硅胶(15g)混合,浓缩至干。通过柱层析分离4-(2-吡啶基)-苄腈(0.850g,68%)。
LCMS:MH+=181;1H NMR(CDCl3)δ8.85(d,1H),8.7(dd,1H),7.9(dd,1H),7.75(d,2H),7.7(d,2H),7.4(dd,1H).
制备实施例225-228:
根据制备实施例224中描述的基本相同的方法,仅用表14第2列中的溴化物代替,制备表14第3列中的化合物。
表14
制备实施例229:
在Ar下,将BH3-THF溶液(1M,24mL,5eq)慢慢加入到搅拌的4-(2-吡啶基)-苄腈(0.85g,4.72mmol)的无水THF(25mL)溶液中,将得到的溶液回流约12小时。使用冰水,将该溶液冷却至0℃。向冷的反应混合物中滴加甲醇(15mL),搅拌1小时以破坏过量的BH3。向反应混合物中慢慢加入HCl-甲醇(1M,10mL),回流5小时。将该溶液浓缩至干,将残留物溶于25mL水中,用乙醚提取以除去任何未反应的物质。将水溶液用固体碳酸钾中和至pH 10-11。将如此形成的游离胺用乙醚提取,经碳酸钾干燥(0.45g,50%)。
LCMS:MH+=185;1H NMR(CDCl3)δ8.85(d,1H),8.7(dd,1H),7.9(dd,1H),7.75(d,2H),7.7(d,2H),7.4(dd,1H),3.7(t,2H),1.7(t,2H).
制备实施例230-233:
根据制备实施例229中提出的基本相同的方法,制备表15第3列中的化合物。
表15
制备实施例234:
步骤A:
在Ar、80℃下,将4-氟苄腈(3g,25mmol)和咪唑基钠(2.48g,27.5mmol)的DMF(50mL)混合物搅拌12小时。通过TLC监测反应进程。将反应混合物真空浓缩,将残留物用50mL水稀释,搅拌。将该水性混合物用乙酸乙酯(2×50mL)提取。将合并的乙酸乙酯提取液经无水硫酸镁干燥,浓缩,经柱层析分离4-(1-咪唑基)-苄腈(3.6g,78%)。
LCMS:MH+=170;1H NMR(CDCl3)δ8.0(s,1H),7.5(d,2H),7.4(m,3H),7.3(d,1H)
步骤B:
将4-(1-咪唑基)-苄腈(1g,5.92mmol)溶解于无水THF(10mL)中,然后在室温下,将其滴加至搅拌的LAH-THF(1M在THF中,18mL)中。在Ar下,将反应混合物回流2小时,通过TLC监测反应进程。将混合物冷却至0℃,通过滴加饱和硫酸钠-水溶液猝灭。将混合物搅拌1小时,过滤除去锂盐。滤液经无水硫酸镁干燥,浓缩得到4-(1-咪唑基)-苄胺(0.8g,80%)。LCMS:MH+=174。
制备实施例235:
将4-(5-唑基)苯甲酸(1.0g,5.46mmol)和三乙胺(552mg,5.46mmol)在25mL THF中的混合物冷却至0℃,滴加入ClCOOi-Bu(745mg,5.46mmol)。加入完毕后,将反应混合物再搅拌5分钟,然后加入氢氧化铵水溶液(0.63mL的28%溶液,10.46mmol)。搅拌过夜后,蒸发溶剂,将残留物溶于水中,碱化至pH 9。将沉淀的固体过滤,用水洗涤,在真空干燥箱中经P2O5干燥,得到500mg(48%)的4-(5-唑基)-苯甲酰胺:1H NMR(DMSO-d6)δ8.50(s,1H),8.20-7.80(m,5H)。
制备实施例236:
将4-(5-唑基)苯甲酰胺(500mg,2.657mmol)的10mL无水THF混悬液冷却至0℃,加入10mL 1M BH3.THF(10.00mmol)。将混合物回流过夜,通过滴加甲醇破坏过量硼烷。蒸发溶剂,将残留物用甲醇制HCl处理以分解胺-硼烷复合物。蒸发甲醇后,将残留物吸收至水中,碱化至pH 10,将产物提取至DCM中。将DCM层干燥(K2CO3),蒸发溶剂,得到150mg(32%)的4-(5-唑基)苄胺:1H NMR(CDCl3)δ7.90(s,1H),7.60(d,2H),7.40(d,2H),7.30(s,1H),3.90(s,2H)。
制备实施例237-239:
根据以上提出的基本相同的方法,采用表16第3列中指出的方法,将表16第2列中的化合物还原,得到表16第4列中所示的胺。
表16
制备实施例240:
根据文献方法制备(PCT Int.Appl,WO 0105783)。
1HNMR(CDCl3)δ7.35(d,1H),7.24-7.10(m,2H),7.02(d,1H),3.95(t,1H),3.70(d,1H),3.37(d,1H),2.65(m,2H),2.45(s,3H),1.90(bs,2H)
制备实施例241:
3-(氨甲基)哌啶-1-甲酰胺
A.3-(叔丁氧基羰基氨基甲基)哌啶-1-甲酰胺
将3(R/S)-(叔丁氧基羰基氨基甲基)哌啶(3g,14.0mmol)溶解于无水二氯甲烷(50mL)中,加入三甲基甲硅烷基异氰酸酯(9.68g,11.4mL,84.0mmol)。在25℃、氩气下,将混合物搅拌68小时。再加入三甲基甲硅烷基异氰酸酯(4.84g,5.7mL,42.0mmol),在25℃下,将混合物搅拌共计90小时。将混合物蒸发至干,经硅胶柱层析(30×5cm),用2%(10%浓氢氧化铵的甲醇溶液)-二氯甲烷作为洗脱剂,得到3-(叔丁氧基羰基氨基甲基)哌啶-1-甲酰胺(3.05mg,85%):
FABMS:m/z 258.1(MH+);HRFABMS:m/z 258.1816(MH+).计算值C12H24O3N3:m/z258.1818;δH(CDCl3)1.2291H,m,CH2),1.42(9H,s,-COOC(CH3)3),1.48(1H,m,CH2),1.67(2H,m,CH2),1.78(1H,m,CH),2.80(1H,m,CH2),2.99,3H,m,CH2),3.59(1H,m,CH2O 3.69(1H,m,CH2),4.76(2H,bm,CONH2)和4.98ppm(1H,bm,NH);δC(CDCl3)CH3:28.5,28.5,28.5;CH2:24.0,28.3,43.2,45.1,47.8;CH:36.5;C:79.4,156.3,158.5.
B.3-(氨基甲基)哌啶-1-甲酰胺
将3-(叔丁氧基羰基氨基甲基)哌啶-1-甲酰胺(150mg,0.583mmol)(按以上制备实施例241步骤A中所述制备)溶解于甲醇(3mL)中。加入10%浓硫酸的1,4-二氧六环溶液(7.9mL),在25℃下,将混合物搅拌1小时。将混合物用甲醇稀释,加入BioRad AG1-X8树脂(OH-形式)直至pH为碱性。滤出该树脂,用甲醇洗涤,蒸发至干,经硅胶柱(15×2cm)层析纯化,用二氯甲烷和15%(10%浓氢氧化铵的甲醇溶液)-二氯甲烷顺次作为洗脱剂,得到3-(氨基甲基)哌啶-1-甲酰胺(80mg,87%):
FABMS:m/z 158.1(MH+);HRFABMS:m/z158.1294(MH+).计算值C7H16N3O:m/z 158.1293;δH(CDCl3+1滴CD3OD)1.20(1H,m,CH2),1.48(1H,m,CH2),1.60(1H,m,CH),1.68(1H,m,CH2),1.83(1H,m,CH2),2.64(bm,2H,-CH2NH2),2.82(1H,m,CH2),3.02(1H,m,CH2),2.98(2H,m,CH2),3.70(1H,m,-CH2NH2),3.78(1H,m,-CH2NH2)和5.24ppm(1H,bs,NH);δC(CDCl3+1滴CD3OD)CH2:24.1,28.6,44.0,44.8,47.9;CH:38.3;C:159.0.
制备实施例242:
3-(2-氨基乙基)哌啶-1-甲酰胺
A.3-(2-叔丁氧基羰基氨基乙基)哌啶-1-甲酰胺
将3-(2-叔丁氧基羰基氨基乙基)哌啶(500mg,2.19mmol)溶解于无水二氯甲烷(10mL)中,加入三甲基甲硅烷基异氰酸酯(2.96mL,21.9mmol)。在25℃、氩气下,将混合物搅拌3.35小时。将混合物用二氯甲烷稀释,用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤。将有机层干燥(MgSO4),过滤,蒸发至干,经硅胶柱层析(15×5cm),用5%(10%浓氢氧化铵的甲醇溶液)-二氯甲烷作为洗脱剂,得到3-(2-叔丁氧基羰基氨基乙基)哌啶-1-甲酰胺(417.7mg,70%):
FABMS:m/z 272.0(MH+);HRFABMS:m/z 272.1979(MH+).计算值C13H26O3:m/z272.1974;δH(CDCl3)1.16(1H,m,CH2),1-30-1.60(5H,m,CH/CH2),1.46(9H,s,-COOC(CH3)3),1.68(1H,m,CH2),184(1H,m,CH2),2.54(1H,dd,CH2),2.73(1H,m,CH2),3.08(1H,m,CH2),3.42(1H,m,CH2),4.02(1H,m,CH2),4.10(1H,m,CH2),4.84(1H,m,NH)和4.96ppm(2H,bm,CONH2);δC(CDCl3)CH3:28.5,28.5,28.5;CH2:25.2,31.7,34.9,37.3,44.6,50.3;CH:32.9;C:79.5,156.4,158.2.
B.3-(2-氨基乙基)哌啶-1-甲酰胺
将3-(2-叔丁氧基羰基氨基乙基)哌啶-1-甲酰胺(392.7mg,1.45mmol)(按以上制备实施例242步骤A中所述制备)溶解于甲醇(7.5mL)中,加入10%浓硫酸的1,4-二氧六环溶液(19.5mL)。在25℃下,将混合物搅拌1.25小时。将混合物用甲醇稀释,加入BioRad AG1-X8树脂(OH-形式)直至pH为碱性。滤出该树脂,用甲醇洗涤,蒸发至干,经硅胶柱(30×2.5cm)层析,用15%(10%浓氢氧化铵的甲醇溶液)-二氯甲烷作为洗脱剂,得到3-(2-氨基乙基)哌啶-1-甲酰胺(233mg,94%):
FABMS:m/z172.1(MH+):HRFABMS:m/z 172.1444(MH+).计算值C8H18N3O实测值:m/z172.1450;δH(CDCl3+3% CD3OD)1.14(1H,m,CH2),1.40(2H,m,CH2),1.49(1H,m,CH),1.58(1H,m,CH2),1.69(1H,m,CH2),1.85(1H,m,CH2),2.55(1H,m,CH2),2.67(5H,m,CH2/NH2),2.76(1H,bm,CH2),2.84(1H,m,CH2)和3.82ppm(2H,m,CONH2);δC(CDCl3+3% CD3OD)CH2:24.8,30.9,36.6,38.9,44.9,50.0;CH:33.4.
制备实施例243:
4-(2-氨基乙基)哌啶-1-甲酰胺
A.4-(2-叔丁氧基羰基氨基乙基)哌啶-1-甲酰胺
将4-(2-叔丁氧基羰基氨基乙基)哌啶(500mg,2.19mmol)溶解于无水二氯甲烷(10mL)中,加入三甲基甲硅烷基异氰酸酯(2.96mL,21.9mmol)。在25℃、氩气下,将混合物搅拌3.25小时。将混合物用二氯甲烷稀释,用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤。将有机层干燥(MgSO4),过滤,蒸发至干,经硅胶柱层析(15×5cm),用5%(10%浓氢氧化铵的甲醇溶液)-二氯甲烷作为洗脱剂,得到4-(2-叔丁氧基羰基氨基乙基)哌啶-1-甲酰胺(308.2mg,52%):
FABMS:m/z 272.0(MH+);HRFABMS:m/z 272.1965(MH+).计算值C13H26O3N3:m/z 272.1974;δH(CDCl3)1.20(2H,m,CH2),1.47(9H,s,-COOC(CH3)3),1.45-1.55(3H,m,CH/CH2),1.75(2H,m,CH2),2.82(2H,m,CH2),3.19(2H,m,CH2),3.96(2H,m,CH2),4.64(2H,m,CH2)和4.70ppm(1H,bm,NH);δC(CDCl3)CH3:28.5,28.5,28.5;CH2:31.8,31.8,36.7,38.0,44.5,44.5;CH:33.4;C:79.2,156.7,158.1.
B.3-(2-氨基乙基)哌啶-1-甲酰胺
将4-(2-叔丁氧基羰基氨基乙基)哌啶-1-甲酰胺(283.3mg,1.04mmol)(按以上制备实施例243步骤A中所述制备)溶解于甲醇(5.4mL)中,加入10%浓硫酸的1,4-二氧六环溶液(14.2mL),在25℃下,将混合物搅拌1.25小时。将混合物用甲醇稀释,加入BioRad AG1-X8树脂(OH-形式)直至pH为碱性。滤出该树脂,用甲醇洗涤,蒸发至干,经硅胶柱(30×2.5cm)层析纯化,用15%(10%浓氢氧化铵的甲醇溶液)-二氯甲烷作为洗脱剂,得到3-(2-氨基乙基)哌啶-1-甲酰胺(170mg,95%):
FABMS:m/z172.1(MH+);HRFABMS:m/z 172.1442.计算值C8H18N3O实测值:m/z172.1450;δH(CDCl3+3% CD3OD)1.16(2H,m,CH2),1.43(2H,m,CH2),1.52(1H,m,CH),1.70(2H,m,CH2),2.70-2.85(8H,m,CH2)和3.92ppm(2H,m,CONH2);δC(CDCl3+3% CD3OD)CH2:31.9,31.9,39.0,39.7,44.4,44.4;CH:33.5;C:158.7.
制备实施例244:
3-(氨甲基)-1-甲基哌啶
A.3-(溴甲基)-1-甲基哌啶
将3-(羟甲基)-1-甲基哌啶(2g,15.5mmol)溶解于无水乙腈(32mL)中,加入无水吡啶(2.02mL,24.8mmol),将该溶液冷却至0℃。在0℃下加入二溴三苯基正膦(triphenylphosphorane)(8.49g,20.2mmol),将混合物温热至25℃,搅拌94小时。将混合物蒸发至干,残留物经硅胶柱层析(30×5cm),用二氯甲烷、35%乙醚的二氯甲烷溶液和5-10%甲醇的二氯甲烷溶液作为洗脱液进行梯度洗脱,得到3-(溴甲基)-1-甲基哌啶(3.13g,100%):
FABMS:m/z 192.1(MH+);δH(CDCl3)1.52(1H,m,CH2),1.99(2H,m,CH2),2.43(1H,m,CH2),2.75(2H,m,CH2),2.82(1H,m,CH),2.86/2.88(3H,s,NCH3),3.42/3.49(2H,dd,-CH2Br)和3.56ppm(2H,m,CH2);δC(CDCl3)CH3:44.3;CH2:22.1,26.6,35.4,54.8,58.2;CH:34.6.
B.3-(二叔丁氧基羰基氨基甲基)-1-甲基哌啶
将3-(溴甲基)-1-甲基哌啶(1.5g,7.81mmol)(得自以上制备实施例244步骤A)和亚氨基二甲酸二叔丁基酯(1.697g,7.81mmol)溶解于无水乙腈(25mL)中。加入碳酸铯(5.1g,15.6mmol)和碘化锂(52mg,0.391mmol),在70℃下,将该混合物搅拌20小时。将混合物蒸发至干,将残留物在二氯甲烷和饱和碳酸氢钠水溶液之间分配。将有机层干燥(MgSO4),过滤,蒸发至干。残留物经硅胶柱(30×5cm)层析,用3%甲醇的二氯甲烷溶液作为洗脱剂,得到3-(二叔丁氧基羰基氨基)-1-甲基哌啶(1.331g,52%):
FABMS:m/z 329.2(MH+);HRFABMS:m/z 329.2438(MH+).计算值C17H33N2O4:m/z329.2440;δH(CDCl3)1.10(1H,m,CH2),1.54(18H,s,-COOC(CH3)3),1.86(2H,m,CH2),2.01(1H,m,CH2),2.19(1H m,CH),2.34(2H,bm,CH2),2.59(3H,-NCH3),3.19(2H,m,CH2)和3.52/3.52ppm(2H,-CH2N-);δC(CDCl3)CH3:28.5,28.5,28.5,28.5,28.5,28.5,47.2;CH2:25.4,28.3,50.4,56.8,60.8;CH:37.2;C:83.0,83.0,153.5.153.5.
C.3-(氨基甲基)-1-甲基哌啶
将3-(二叔丁氧基羰基氨基)-1-甲基哌啶(500mg,1.52mmol)(得自以上制备实施例244步骤B)溶解于甲醇(7.5mL)中,加入10%(v/v)浓硫酸的1,4-二氧六环溶液(19.75mL)。在25℃下,将该溶液搅拌0.5小时。加入甲醇(300mL),然后加入BioRad Ag1-X8树脂(OH-形式)直至pH约为10。滤出该树脂,用甲醇洗涤(2×200mL)。将合并的洗脱液蒸发至干,残留物经硅胶柱(30×2.5cm)层析纯化,用10%(10%浓氢氧化铵的甲醇溶液)-二氯甲烷作为洗脱剂,得到3-(氨基甲基)-1-甲基哌啶(69.2mg,35%):
FABMS:m/z 129.1(MH+);HRFABMS:m/z129.1392(MH+).计算值C7H17N2:m/z 129.1392;δH(CDCl3)0.90(2H,m,CH2),1.65(2H,m,CH2),1.72(1H,m,CH),1.79(1H,m,CH2),1.91(1H,m,CH2),2.30(3H,s,-NCH3),2.64(2H,m,CH2),2.82(1H,m,-CH2NH2)和2.92ppm(1H,m,-CH2NH2);δC(CDCl3)CH3:46.7;CH2:25.2,28.0,46.3,56.4,60.3;CH:39.9.
制备实施例245:
4-(氨甲基)-1-甲基哌啶
A.1-甲基异哌啶甲酰胺
将异哌啶甲酰胺(isonipecotamide)(10g,78.0mmol)溶解于蒸馏水(100mL)中,加入37%甲醛水溶液(7.6mL,相当于2.81g HCHO,93.6mmol)。在氩气下,加入湿的10% Pd-C(8匙刮刀),在25℃和50psi下,将该混合物氢化43小时。通过硅藻土过滤出催化剂,将硅藻土用水和甲醇洗涤。将合并的滤液蒸发至干,残留物经硅胶柱层析(60×5cm),用8%-10%-20%(10%浓氢氧化铵的甲醇溶液)-二氯甲烷作为洗脱液,得到1-甲基异哌啶甲酰胺(7.15g,64%):
FABMS:m/z 143.1(MH+);HRFABMS:m/z 143.1184(MH+).计算值C7H15N2O:m/z 143.1184;δH(d6-DMSO)1.50/1.57(4H,m,CH2),1.76/1.94(4H,m,CH2),2.10(3H,s,-NCH3),2.72(1H,m,CH)和6.68/7.18ppm(2H,m,CONH2);δC(d6-DMSO)CH3:41.2;CH2:28.5,28.5,54.9,54.9;CH:46.2;C:176.7.
B.4-(氨基甲基)-1-甲基哌啶
将1-甲基异哌啶甲酰胺(6.75g,47.5mmol)(按以上制备实施例245步骤A中所述制备)溶解于无水THF(350mL)中,在0℃、氮气下,将得到的混合物分次加入到搅拌的氢化铝锂(1.8g,47.5mmol)的无水THF(100mL)的浆状液中。在氮气下,在0℃,将混合物搅拌30分钟,然后在66℃下加热25小时。向0℃下的该搅拌的混合物中滴加入蒸馏水(1.88mL),然后顺次加入20%氢氧化钠水溶液(1.42mL)和蒸馏水(6.75mL),将混合物搅拌15分钟。过滤该混合物,将固体用THF和二氯甲烷洗涤。将合并的滤液蒸发至干,经硅胶柱(30×5cm)层析,用15%-20%(10%浓氢氧化铵的甲醇溶液)-二氯甲烷作为洗脱剂,得到4-(氨基甲基)-1-甲基哌啶(0.678g,11%):
FABMS:m/z 129.1(MH+);HRFABMS:m/z129.1389(MH+).计算值C7H17N2:m/z 129.1392;δH(d6-DMSO):2.08ppm(3H,s,-NCH3);δC(d6-DMSO):CH3:在DMSO峰之下;CH2:29.6,29.6,46.7,55.2,55.2;CH:46.2.
制备实施例246:
3-(氨甲基)苄腈
A.3-(二叔丁氧基羰基氨基)苄腈
将3-(溴甲基)苄腈(5g,25.5mmol)和亚氨基二甲酸二叔丁基酯(5.54g,25.5mmol)溶解于无水THF(50mL)中,加入碳酸铯(16.62g,25.5mmol)和碘化锂(170.5mg,1.275mmol)。在70℃下,将混合物搅拌22小时,然后按以上制备实施例89步骤B中所述对反应物进行后处理。残留物经硅胶柱(60×5cm)层析纯化,用5%乙酸乙酯的己烷溶液作为洗脱剂,得到3-(二叔丁氧基羰基氨基)苄腈(7.39g,87%):
FABMS:m/z 333.2(MH+);HRFABMS:m/z 333.1815(MH+);计算值C18H25N2O4:m/z 333.1814;δH(CDCl3)1.52(18H,s,-COOC(CH3)3),4.84.(2H,s,CH2),7.48(1H,m,Ar-H),7.60(2H,m,Ar-H)和7.65ppm(1H,m,Ar-H);δC(CDCl3)CH3:28.1,28.1,28.1,28.1,28.1,28.1;CH2:48.4;CH:129.2,131.0,131.0,131.9;C:83.2,83.2,112.5,118.8,140.1,152.5,152.5.
B.3-(氨基甲基)苄腈
将3-(二叔丁氧基羰基氨基)苄腈(2g,6.0mmol)(按以上制备实施例246步骤A中所述制备)溶解于甲醇(30mL)中,加入10%(v/v)(10%浓硫酸的1,4-二氧六环溶液)(79mL)。在25℃下,将该溶液搅拌0.25小时,然后按以上制备实施例89步骤C中所述进行后处理。残留物经硅胶柱(15×5cm)层析,用3%(10%浓氢氧化铵的甲醇溶液)-二氯甲烷作为洗脱剂,得到标题化合物(651.4mg,82%):
HRFABMS:m/z 133.0762(MH+).计算值C8H9N2:m/z 133.0766;δH(CDCl3)2.57(2H,s,-CH2NH2),3.92(2H,s,-CH2NH2),7.46(1H,m,Ar-H),7.57(2H,m,Ar-H)和7.64ppm(1H,m,Ar-H);δC(CDCl3)CH2:45.2;CH:129.4,130.7,130.7,131.8;C:112.4,118.8,143.8.
制备实施例247:
4-(氨甲基)苄腈
A.3-(二叔丁氧基羰基氨基甲基)苄腈
将4-(溴甲基)苄腈(5g,25.5mmol)和亚氨基二甲酸二叔丁基酯(5.54g,25.5mmol)溶解于无水THF(50mL)中,加入碳酸铯(16.62g,25.5mmol)和碘化锂(170.5mg,1.275mmol)。在70℃下,将混合物搅拌23小时,然后按以上制备实施例244步骤B中所述对反应物进行后处理。残留物经硅胶柱(50×5cm)层析,用5%乙酸乙酯的己烷溶液作为洗脱剂,得到4-(二叔丁氧基羰基氨基甲基)苄腈(7.07g,83%):
FABMS:m/z 333.2(MH+);HRFABMS:m/z 333.1816(MH+).计算值C18H25N2O4:m/z 333.1814;δH(CDCl3)1.45(18H,s,-COOC(CH3)3),4.81(2H,s,CH2),7.37(2H,d,Ar-H)和7.62ppm(2H,d,Ar-H);δC(CDCl3)CH3;28.1,28.1,28.1,28.1,28.1,28.1;CH2;49.2;CH:127.8,127.8,132.3,132.3;C:83.2,83.2,111.1,118.9,144.1,152.4,152.4.
B.4-(氨基甲基)苄腈
将4-(二叔丁氧基羰基氨基甲基)苄腈(2g,6.0mmol)(按以上制备实施例247步骤A中所述制备)溶解于THF(4mL)中,在25℃下,将该溶液搅拌0.25小时。将反应混合物用二氯甲烷稀释,用1N氢氧化钠提取。将有机层干燥(MgSO4),过滤,蒸发至干。残留物经硅胶柱(15×5cm)层析纯化,用3%(10%浓氢氧化铵的甲醇溶液)-二氯甲烷作为洗脱剂,得到4-(氨基甲基)苄腈(108mg,68%):
FABMS:m/z 133.1(MH+);HRFABMS:m/z133.0764(MH+).计算值C8H9N2:m/z 133.0766;δH(CDCl3)2.04(2H,s,-CH2NH2),3.89(2H,s,-CH2NH2),7.40(2H,d,Ar-H)和7.59ppm(2H,d,Ar-H);δC(CDCl3)CH2:45.7;CH:127.8,127.8,132.4,132.4;C:110.6.118.9.148.0.
制备实施例248:
向室温下的(1S,2S)-2-苄氧基环戊基胺(1.5g,7.84mmol)的甲醇(50mL)溶液中加入10% Pd/C(50%湿度,1.0g),接着滴加浓HCl(0.7mL)。在H2气球下,将混合物搅拌14小时,通过硅藻土垫过滤催化剂。将硅藻土垫用甲醇(2×10mL)洗涤,减压浓缩得到的滤液,得到0.97g(90%)的黄色半固体;M+H(游离碱)=102
制备实施例249-251:
按制备实施例248类似的方式,将表17中所列的苄基保护的环烷基胺(第2列)转化为所需的氨基环烷基醇盐酸盐衍生物(第3列)。
表17
制备实施例252
向在0℃下的酯(根据J.Org.Chem.(1999),64,330制备)(0.5g,2.43mmol)的THF(8mL)溶液中一次性加入LiAlH4(0.37g,9.74mmol)。将得到的混合物加热回流12小时,然后冷却至0℃。将混合物用水(1mL)、1M NaOH(1mL)和水(3mL)依次处理。向混合物中加入二氯甲烷(10mL),将混合物剧烈搅拌30分钟。将混合物通过硅藻土垫过滤,用二氯甲烷(3×5mL)充分洗涤。减压浓缩得到的滤液,得到0.41g(85%)的黄/橙色固体。M+H=142。
制备实施例253
步骤A:
向0℃下的盐酸L-脯氨酸甲酯(0.50g,3.0mmol)的二氯甲烷(15mL)溶液中加入三乙胺(1.1mL,7.55mmol),然后加入TFAA(0.56mL,3.92mmol)。室温下,将混合物搅拌12小时,然后加入1N HCl(25mL)。分离各层,将有机层依次用饱和碳酸氢钠水溶液(1×25mL)和盐水(1×25mL)洗涤。将有机层经Na2SO4干燥,过滤,减压浓缩,得到0.72g(100%)的黄色油状物。M+H=226。该粗品物质无需进一步纯化,直接用于步骤B。
步骤B:
用10分钟,向0℃下的制备实施例253步骤A制备的化合物(0.68mg,3.0mmol)的THF(20mL)溶液中滴加入MeMgI(5.1mL,3.0M乙醚液)。室温下,将得到的溶液搅拌16小时,然后通过加入饱和氯化铵水溶液猝灭混合物。将混合物浓缩至干,将得到的残留物与乙酸乙酯(100mL)搅拌45分钟,过滤。减压浓缩滤液,得到0.68g(100%)黄/橙色油状物。M+H=226。该粗品物质无需进一步纯化,直接用于步骤C。
步骤C:
向制备实施例253步骤B制备的化合物(0.68mg,3.0mmol)的甲醇(5mL)溶液中加入KOH(0.68g,12.1mmol)的甲醇(5mL)溶液。将混合物加热回流12小时,然后在室温下72小时,将混合物浓缩至干。将粗残留物悬浮于乙酸乙酯(50mL)中,剧烈搅拌30分钟,过滤。再将该步骤重复进行2次,减压浓缩得到的滤液,得到128mg(33%)栗色/橙色油状物。M+H=130。该物质无需纯化,用于接下来的偶合步骤中。
制备实施例254
根据Gupton(J.Heterocyclic Chem.(1991),28,1281)的方法,制备该醛。
制备实施例255
采用制备实施例254中的醛,应用Gupton(J.Heterocyclic Chem.(1991),28,1281)的方法,制备该目标醛。
制备实施例256
根据Ragan等在Synlett(2000),8,1172-1174中的方法,制备该目标醛。
制备实施例257
在Ragan(Synlett(2000),8,1172-1174)的条件下,进行已知盐酸环戊基胍的反应,得到该目标醛。
制备实施例258
根据已知文献Monatshefte fur Chemiet(1973),104,1372-1382的方法,制备该目标化合物。
实施例
实施例1
室温下,将制备实施例127中的产物(0.27g,0.875mmol)、4-氨基甲基吡啶(0.12g,1.3eq.)和碳酸钾(0.24g,2eq.)的乙腈(5mL)溶液搅拌48小时。将反应混合物用水稀释,用二氯甲烷提取。将合并的有机物经Na2SO4干燥,过滤,浓缩。粗产物经快速层析纯化,用4% MeOH的CH2Cl2溶液作为洗脱剂(0.28g,93%收率)。LCMS:MH+=380;mp=>205℃(分解)。
实施例2-210
根据实施例1中提出的基本相同的方法,仅用表18第2列所示的氯化物和表18第3列所示的胺代替,制备表18第4列中的化合物:
表18
以下给出所选实施例的其它数据。
实施例23:1H NMR(CD3OD)δ8.63(d,J=5.7Hz,2H),8.18(s,1H),7.81(dd,J=8.1Hz,2.1Hz,1H),7.58(d,J=6.0Hz,2H),7.48(m,1H),7.15-7.10(m,2H),6.50(s,1H),4.86(s,2H),3.70(s,3H)
实施例24:1H NMR(CDCl3)δ8.82(s,1H),8.73(d,J=4.2Hz,1H),8.11(s,1H),8.06(dd,J=7.8Hz,1.8Hz,1H),7.91(d,J=8.1Hz,1H),7.53-7.47(m,2H),7.20(m,1H),7.08(d,J=8.1Hz,1H),6.75(s,1H),4.81(d,J=4.5Hz,2H),3.86(s,3H)
实施例25:1H NMR(CDCl3)δ8.75(d,J=5.7Hz,2H),8.12(s,1H),7.81(d,J=2.1Hz,1H),7.53(dd,J=8.4,2.1Hz,1H),7.45(d,J=6.0Hz,2H),6.96(t,J=6.0Hz,2H),6.33(s,1H),4.85(d,J=6.0Hz,2H),4.09(s,3H),4.03(s,3H)
实施例26:1H NMR(CDCl3)δ8.82(s,1H),8.72(s,1H),8.09(m,1H),7.87-7,83(m,2H),7,60(m,1H),7.45(m,1H),7.03(d,J=8.4Hz,1H),6.87(s,1H),6.43(s,1H),4.83(d,J=4.5Hz,2H),4.11(s,3H),4.04(s,3H)
实施例27:1H NMR(CDCl3)δ8.75(d,J=4.5Hz,2H),8.19(s,1H),7.63(d,J=7.8Hz,2H),7.44-7.40(m,3H),7.07(m,1H),6.26(s,1H),4.83(d,J=5.1Hz,2H)
实施例28:1H NMR(CDCl3)δ8.86(s,1H),8.74(m,1H),8.17(s,1H),7.97(m,1H),7.66-7.63(m,2H),7.62(m,1H),7.41(m,1H),7.07(m,1H),6.35(s,1H),4.87(d,J=6.0Hz,2H)
实施例30:1H NMR(CDCl3)δ8.16(s,1H),7.66-7.62(m,2H),7.41(m,1H),7.33-7.22(m,3H),6.96(t,J=6.0Hz,1H),6.33(s,1H),4.73(d,J=6.0Hz,2H)
实施例31:1H NMR(CDCl3)δ8.13(s,1H),7.66(d,J=7.8Hz,2H),7.45-7.40(m,2H),7.10-7.04(m,2H),6.93(t,J=6.6Hz,1H),6.60(s,1H),4.84(d,J=6.6Hz,2H)
实施例32:1H NMR(CDCl3)δ8.16(s,1H),7.66-7.62(m,2H),7.57-7.55(m,2H),7.41(t,J=7.8Hz,1H),7.31(dd,J=7.8,1.8Hz,1H),6.99(t,J=6.0Hz,1H),6.32(s,1H),4.73(d,J=6.0Hz,2H)
实施例40:1H NMR(CDCl3)δ8.01(s,1H),7.31-7.24(d,J=8.2Hz,1H),6.72-6.64(br t,J=5.4Hz,1H),6.62-6.52(m,2H),6.05-6.01(s,1H),5.56-4.64(d,J=6.0Hz,2H),4.03-3.93(s,3H),3.94-3.86(s,3H),2.79-2.70(d,J=8.1Hz,2H),2.02-1.66(m,6H),1.43-1.22(m,3H),1.20-1.02(m,2H)
实施例45:1H NMR(CDCl3)δ8.73(d,2H),8.54(s,1H),7.41(d,2H),7.02(br,1H),5.90(s,1H),4.80(s,2H),4.48(q,2H),2.75(s,2H),1.50(t,2H),1.06(s,9H);
实施例46:1H NMR(CDCl3)δ8.79(s,1H),8.72(d,1H),8.14(s,1H),7.84(d,1H),7.54-7.33(m,4H),6.97(t,1H),6.18(s,1H),4.79(d,2H),2.47(s,3H)
实施例108:1H NMR(CDCl3)δ8.79(s,1H),8.72(d,J=3.0Hz,1H),8.16(s,1H),7.84(d,J=7.8Hz,1H),7.74(d,J=7.5Hz,2H),7.55-7.35(m,3H),6.92(t,J=6.3Hz,1H),6.42(s,1H),4.81(d,J=6.3Hz,2H)
实施例110:1H NMR(CDCl3)δ8.18(t,1H),8.03(s,1H),7.44(m,1H),7.30(t,1H),7.17(q,1H),6.66(8,1H),6.56(br,1H),4.28(d,2H),2.38(s,1H)
实施例111:1H NMR(CDCl3)δ8.72(br,1H),8.59(d,1H),8.11(t,1H),8.06(s,1H),7.73(d,1H),7.44(d,1H),7.42-7.21(m,3H),7.07(q,1H),6.39(d,1H),5.21(q,1H),4.16(q,2H),3.08(d,2H),1.22(t,3H)
实施例112:1H NMR(CDCl3)δ8.22(t,1H),8.15(s,1H),7.51-7.33(m,7H),7.21(q,1H),6.82(d,1H),6.51(s,1H),4.68(q,1H),2.18(m,2H),1.17(t,3H)
实施例113:1H NMR(CDCl3)δ8.22(t,1H),8.14(s,1H),7.51-7.33(m,7H),7.21(q,1H),6.82(d,1H),6.51(s,1H),4.68(q,1H),2.18(m,2H),1.17(t,3H)
实施例114:1H NMR(CDCl3)δ8.81(s,1H),8.75(d,1H),8.21(s,1H),7.84(d,1H),7.47(q,1H),6.96(s,1H),6.94(t,1H),4.85(d,2H),4.60(q,2H),1.58(t,3H)
实施例115:1H NMR(CDCl3)δ8.77(s,1H),8.72(d,1H),8.14(s,1H),7.83(d,1H),7.65(d,1H),7.44(q,1H),7.80(t,1H),7.6(d,1H),6.18(s,1H),4.75(d,2H),3.91(s,3H),3.81(s,3H)
实施例116:1H NMR(CDCl3)δ8.67(s,1H),8.55(d,1H),8.50(s,1H),7.92(d,1H),7.90(d,1H),7.78(t,1H),7.10(d,1H),6.97(s,1H),5.11(s,2H),3.77(s,6H)
实施例117:1H NMR(CDCl3)δ8.38(s,1H),8.30(d,1H),8.17(s,1H),7.52-7.37(m,6H),6.97(t,1H),6.13(s,1H),4.77(d,2H),2.50(s,3H)
实施例118:1H NMR(CDCl3)δ8.18(t,1H),8.03(s,1H),7.44(m,1H),7.30(t,1H),7.17(q,1H),6.66(s,1H),6.56(br,1H),4.28(d,2H),2.38(s,1H);
实施例121:1H NMR(CDCl3)δ8.6(S,1H),8.15(dt,1H),8.1(s,1H),8.0(d,2H),7.5(d,2H),7.4(dd,1H),7.2(d,1H),7.15(dd,1H),6.8(t,1H),6.6(s,1H),4.75(d,2H).
实施例126:1H NMR(CDCl3)δ8.15(dt,1H),8.0(s,1H),7.5(d,1H),7.42-7.35(m,2H),7.3-7.2(m,2H),7.15(dd,1H),7.1(dd,1H),7.0(t,1H),6.6(s,1H),4.8(d,2H).
实施例127:1H NMR(CDCl3)δ8.2(dt,1H),8.0(s,1H),7.4(dd,1H),7.3-7.25(m,3H),7.1(dd,1H),6.9-6.85(m,2H),6.7(t,1H),6.6(s,1H),4.6(d,2H),3.2(m,4H),2.6(m,4H),2.3(s,3H)
实施例128:1H NMR(CDCl3)δ8.15(dt,1H),8.1(s,1H),8.0(d,2H),7.5(d,2H),7.4(m,2H),7.25(d,1H),7.2(s,1H),7.15(dd,1H),7.0(s,1H),6.8(t,1H),6.6(s,1H),4.75(d,2H).
实施例129:1H NMR(CDCl3)δ8.15(dt,1H),8.05(s,1H),8.0(d,2H),7.5(d,2H),7.4(m,1H),7.3(dd,1H),7.15(dd,1H),6.9(t,1H),6.5(s,1H),4.75(d,2H),3.85(s,3H)
实施例130:1H NMR(CDCl3)δ8.2(dt,1H),8.0(s,1H),7.4(dd,1H),7.3(dd,1H),7.15(dd,1H),6.8(t,1H),6.4(s,1H),4.2(d,2H),3.8(s,3H).
实施例131:1H NMR(CDCl3)δ8.2(dt,1H),8.0(s,1H),7.4-7.15(m,3H),6.7(t,1H),4.2(q,2H),3.8(dt,2H),2.8(t,2H),1.2(t,3H)
实施例132:1H NMR(CDCl3)δ8.2(dt,1H),8.0(s,1H),7.4-7.15(m,3H),6.7(t,1H),4.2(q,2H),3.8(dt,2H),2.8(t,2H),2.05(m,2H)1.2(t,3H)
实施例133:1H NMR(CDCl3)δ8.15(dt,1H),8.0(s,1H),7.4(m,1H),7.3(dd1H),7.2(dd,1H),6.5(s,1H),6.4(t,1H),3.7(s,3H),3.5(dd,2H),2.4(t,2H),1.8(m,4H)
实施例134:1H NMR(CDCl3)δ8.15(dt,1H),8.0(s,1H),7.95(d,2H),7.6(d,2H),7.4(m,1H),7.25(dd,1H),7.1(dd,1H),6.9(t,1H),6.5(s,1H),4.8(d,2H),3.0(s,3H)
实施例135:1H NMR(DMSO d6)δ9.1(bs,2H),8.4(s,1H),8.0(t,1H),7.85(d,2H),7.7(d,2H),7.6(m,1H),7.4(m,2H),6.6(s,1H),4.8(bs,2H)
实施例136:1H NMR(CDCl3)δ8.2(dt,1H),8.0(s,1H),7.4(m,1H),7.25(dd,1H),7.15(dd,1H),6.9(m,3H),6.7(t,1H),6.5(s,1H),4.5(d,2H),4.2(s,4H)
实施例137:1H NMR(CDCl3)δ8.2(dt,1H),8.0(s,1H),7.4(m,1H),7.3(dd,1H),7.2(dd,1H),6.9(dd,1H),6.8(t,1H),6.7(m,1H),6.6(s,1H),5.3(s,2H),4.85(s,2H),4.6(d,2H).
实施例138:1H NMR(CDCl3)δ8.2(dt,1H),8.0(s,1H),7.9(d,1H),7.8(d,1H),7.4(m,2H),7.3(dd,1H),7.1(dd,1H),6.9(t,1H),6.6(s,1H),4.8(d,2H)
实施例139:1H NMR(CDCl3)δ8.2(dt,1H),8.0(s,1H),7.4(m,1H),7.3(m,2H),7.2(dd,1H),7.1(dd,1H),6.8(d,1H),6.7(t,1H),6.6(s,1H),4.6(m,4H),3.2(t,2H)
实施例140:1H NMR(CDCl3)δ8.45(s,1H),8.2(dt,1H),8.0(s,1H),7.7(dd,1H),7.4-7.3(m,3H),7.15(dd,1H),6.8(t,1H),6.6(s,1H),4.7(d,2H)
实施例141:1H NMR(CDCl3)δ8.2(dt,1H),8.0(s,1H),7.45-7.1(m,7H),6.6(s,1H),4.4(dt,2H),2.6(t,2H),1.8(m,2H),1.4(m,2H)
实施例171:1H NMR(CD30D)δ8.41(s,1H),8.25(d,J=6.3Hz,1H),8.15(s,1H),7.67(d,J=7.8Hz,2H),7.55-7.48(m,2H),7.45(dd,J=7.5,1.2Hz,1H),7.34(dd,J=7.5,1.8Hz,1H),6.28(s,1H),4.79(s,2H).
实施例172:1H NMR(CDCl3)δ8.64(s,1H),7.68-7.64(m,2H),7.52(m,1H),7.43(t,J=7.8Hz,1H),6.89(t,J=6.0Hz,1H),6.51(s,1H),6.48(m,2H),4.74(d,J=6.0Hz,2H).
实施例173:1H NMR(DMSO-d6)δ8.86(s,1H),8.46(s,1H),8.32-8.28(m,2H),7.97(m,1H),7.87(m,1H),7.52(m,1H),7.35.-7.24(m,2H),6.57(s,1H),6.46(m,1H),3.65(m,4H).
实施例174:1H NMR(CDCl3)d 8.37(s,1H),8.16(t,J=7.5Hz,1H),7.45-7.35(m,1H),7.32-7.20(m,3H),7.17-7.07(m,1H),6.92(t,J=6Hz,1H),6.48(s,1H),4.65(d,2H),2.50(s,3H).
实施例175:1H NMR(CDCl3)d 8.16(t,J=9Hz,1H),8.00(s,1H),7.49(d,J=9Hz,1H),7.46-7.36(m,1H),7.18-7.08(m,1H),7.00(d,J=9Hz,1H),6.62-6.50(m,2H),2.60(s,3H),2.55(s,3H).
实施例176:1H NMR(CDCl3)d 8.15(t,J=9Hz,1H),8.00(s,1H),7.45-7.35(m,1H),7.32-7.20(m,1H),7.20-7.05(m,3H),6.80(t,1H),6.50(s,1H).4.65(d,2H),2.65(s,3H),2.50(s,3H).
实施例177:1H NMR(CDCl3)d 8.20(t,1H),7.90(s,1H),7.50-7.05(m,8H),6.80(s,1H),5.054.90(m,2H),3.80(d,1H),3.45(d,1H),3.00(dd,1H),2.90(dd,1H),2.50(s,3H).
实施例181:1H NMR(300MHz,CDCl3)□8.41(s,1H),8.28-8.23(d,1H),8.15(s,1H),7.69-7.60(d,1H),7.62-7.50(m,3H),7.50-7.47.(dd,1H),6.35(s,1H),5.36(s,1H),4.80(s,2H).
实施例184:1H NMR (300MHz,CDCl3)□□8.96-8.90(s,1H),8.08(s,1H),8.04(d,1H),7.72(d,1H),7.70-7.61(dd,1H),7.24-7.20(dd,1H),6.92-6.84(t,1H),6.36(s,1H),4.96-4.89(d,2H).
实施例186:1H NMR(300MHz,CDCl3)□□8.96-8.90.(s,1H),8.08(s,1H),8.44(s,1H),8.27-8.24(d,1H),8.02(s,1H),7.78-7.76(d,1H),7.73-7.70(d,1H),7.58-7.51(m,2H),7.13-7.08(dd,1H),5.51(s,2H).
实施例195:1H NMR(CD3OD)δ8.40(s,1H),8.27(d,1H),8.03(s,1H),7.75-7.50(m,2H),6.10(s,1H),4.76(s,2H),4.05(m,2H),3.88(m,2H),3.52(m,1H),2.33(m,1H),2.20(m,1H).
实施例196:1H NMR(CD3OD)δ8.73(d,1H),8.58(q,1H),8.12(s,1H),8.00(d,1H),7.54(q,1H),6.19(s,1H),4.86(s,2H),4.22-4.08(m,2H),4.03-3.93(m,2H),3.63(m,1H),2.50-2.39(m,1H),2.32-2.21(m,1H).
实施例197:1H NMR(CD3OD)δ8.73(d,1H),8.58(q,1H),8.12(s,1H),8.00(d,1H),7.54(q,1H),6.19(s,1H),4.86(s,2H),4.22-4.08(m,2H),4.03-3.93(m,2H),3.63(m,1H),2.50-2.39(m,1H),2.32-2.21(m,1H).
实施例199:1H NMR(300MHz,CDCl3)□□8.29(s,1H),8.15(br s,1H),7.95(s,1H),7.28(d,1H),7.05-6.95.(apptt,1H),5.70(s,1H),4.62(d,2H),2.90(m,1H),2.30(m,1H),1.9-1.2(m,8H),0.65(d,3H).
实施例200:1H NMR(300MHz,CDCl3)□□8.71(s,2H),8.00(s,1H),6.13(s,1H),3.59(s,2H),3.01-2.58(m,1H),2.51-2.45(m,1H),2.44-2.30(m,1H),2.20(s,3H),2.09-1.95(m,2H),1.85-1.70(m,2H),0.80-0.76(d,3H).
实施例203:1H NMR(300MHz,CDCl3)□□8.10(s,1H),8.08(s,1H),6.27(s,2H),4.95(s,2H),3.00-2.90(dd,2H),2.60(m,2H),2.48(br s,1H),2.39(s,3h),2.25m,1H),1.95-1.70(m,3H).
实施例211
在0℃、N2下,向实施例156中制备的化合物(100mg,0.23mmol)的无水THF(4mL)溶液中加入LiAlH4(1.0M的THF溶液,0.110mL,0.110mmol)。在0℃下,将混合物搅拌1小时,温热至25℃,然后再加入LiAlH4(1.0M的THF溶液,0.400mL),将混合物搅拌20分钟,然后用MeOH(2.0mL)猝灭。蒸发溶剂,粗产物经快速层析纯化,用10∶1CH2Cl2∶MeOH作为洗脱剂。得到白色固体(46mg,49%收率)。LCMS:M+=416;mp=71-72℃。
实施例212
在N2下,向实施例156中制备的化合物(70mg,0.16mmol)的无水THF(3mL)溶液中加入MeMgBr(3.0M的乙醚溶液,1.10mL,3.20mmol)。在25℃下,将混合物搅拌45分钟,然后用饱和氯化铵水溶液(5.0mL)猝灭。将混合物倒入饱和氯化铵水溶液(30mL)中,用二氯甲烷(3×20mL)提取。提取物经Na2SO4干燥,过滤。蒸发溶剂,粗产物经快速层析纯化,用20∶1CH2Cl2∶MeOH作为洗脱剂。得到白色固体(25mg,36%)。LCMS:M+=444;mp=76-80℃。
实施例213
在N2下,将无水DMF(40mL)加入到制备实施例174中制备的化合物(2.50g,8.65mmol)和在矿油中的60% NaH(346mg,8.65mmol)中。25℃下,将混合物搅拌1小时,然后慢慢加入在无水DMF(20mL)中的2-氯-5-氯甲基吡啶N-氧化物(1.54g,8.65mmol)。在25℃下,将混合物搅拌18小时,蒸发溶剂,粗产物经快速层析纯化,用30∶1CH2Cl2∶MeOH作为洗脱剂。用50mL 1∶1乙酸乙酯∶己烷研磨如此得到的固体。得到浅黄色固体(1.25g,34%)。LCMS:MH+=432;Mp=224-226℃。
实施例214-217
根据实施例213中提出的基本相同的方法,使表19第2列所示的化合物与表19第3列的化合物化合,制备表19第4列中所示的化合物。
表19
实施例218
在N2下,将CF3CH2OH(3.0mL)加入在矿油中的60% NaH(40mg,1.0mmol)中,将混合物搅拌20分钟,然后加入实施例213中制备的产物(50mg,0.12mmol)。将混合物回流20小时,蒸发溶剂,残留物经快速层析纯化,用20∶1 CH2Cl2∶MeOH作为洗脱剂,得到浅黄色固体(35mg,61%)。LCMS:M2H+=496;Mp=208-210℃。
实施例219-225
根据实施例218中提出的基本相同的方法,使表20第1列所示的化合物与适合的醇混合,制备表20第2列中所示的化合物。
实施例226
在N2下,将实施例213中制备的产物(100mg,0.23mmol)和KOH(95mg,1.70mmol)在1,2-二甲氧基乙烷(3mL)和水(1.5mL)中的混合物回流20小时,用乙酸(0.30mL)猝灭,蒸发溶剂。将残留物悬浮于水(15mL)中,过滤,将固体用水(15mL)和乙醚(10mL)洗涤。然后与二氯甲烷(2mL)和乙醚(2mL)混合,过滤。将乙醚(5mL)加入到滤液中,将混合物室温下放置过夜。过滤除去固体,用乙醚洗涤,然后溶于甲醇(5mL)中。过滤溶剂,从滤液中蒸发溶剂。得到灰白色固体(5mg,5%收率)。LCMS:M+=412;mp=206-208℃。
实施例227
在100℃下,将实施例213中制备的产物(129mg,0.30mmol)、N,N-二甲基乙二胺(0.165mL,1.50mmol)和二异丙基乙胺(0.10mL)的无水N-甲基吡咯烷酮(1.0mL)的混合物搅拌24小时。蒸发溶剂,残留物经快速层析纯化,用20∶1CH2Cl2∶7N NH3的MeOH溶液作为洗脱剂,得到浅黄色固体(110mg,76%)。LCMS:M+=482;mp=76-78℃。
实施例228-233
根据实施例227中提出的基本相同的方法,使表21第1列所示的化合物与适合的胺混合,制备表21第2列中所示的化合物。
表21
实施例234
在50℃下,在密封压力管中,将实施例213中制备的产物(80mg,0.19mmol)和2.0M甲胺的THF溶液的混合物搅拌72小时。蒸发溶剂,残留物经快速层析纯化,用10∶1CH2Cl2∶MeOH作为洗脱剂,得到浅黄色固体(40mg,51%)。LCMS:M2H+=427;Mp=217-219℃。
实施例235
根据实施例234中提出的基本相同的方法,制备以上所示的化合物。LCMS:M2H+=441;Mp=98-101℃。
实施例236
在50℃、N2下,将制备实施例174中制备的化合物(140mg,0.48mmol)和醛(71mg,0.58mmol)在无水THF(4mL)中搅拌。加入Ti(OiPr)4(0.574mL,1.92mmol),在50℃下,将混合物搅拌3小时,然后冷却至25℃。加入NaBH3CN(181mg,2.88mmol),再将混合物搅拌2小时,然后倒入10%碳酸钠水溶液(100mL)中,用乙酸乙酯(3×50mL)提取。合并的提取液经Na2SO4干燥,过滤,减压浓缩。残留物经快速层析纯化,用15∶1的CH2Cl2∶MeOH作为洗脱剂,得到浅黄色固体(40mg,21%)。LCMS:MH+=398;Mp>230℃。
实施例237-256
根据实施例236中提出的基本相同的方法,使表22第2列和第3列所示的化合物化合,制备表22第4列中所示的化合物。
实施例257
在100℃、N2下,将实施例242中制备的化合物(100mg,0.24mmol)、浓HCl水溶液(1.0mL)和乙酸(2.0mL)的混合物搅拌2小时,然后倒入Na2CO3(15g)中,用1∶1丙酮∶二氯甲烷(3×30mL)提取。将合并的提取液过滤,蒸发溶剂。残留物经快速层析纯化,用10∶1CH2Cl2∶MeOH作为洗脱剂,得到浅黄色固体(36mg,37%)。LCMS:M2H+=398。
实施例258-260
根据实施例257中提出的基本相同的方法,用表23第1列中所示的化合物作为原料,制备表23第2列中所示的化合物。
表23
实施例261
在-78℃下,向实施例239制备的化合物(41mg,0.10mmol)的二氯甲烷的搅拌的溶液中,加入1.0M BBr3(0.30mL,0.30mmol)的二氯甲烷溶液。在-78℃下,将混合物搅拌5分钟,然后在24℃下搅拌3小时,然后加入甲醇(2.0mL),将混合物搅拌10分钟。蒸发溶剂,残留物经快速层析纯化,用5∶1∶0.1 CH2Cl2∶MeOH∶浓NH4OH作为洗脱剂,得到白色固体(39mg,99%)。LCMS:M+=397。Mp>230℃。
实施例262
在N2下,将实施例217制备的产物(40mg,0.077mmol)和5.0MNaOH水溶液(0.8mL)的混合物回流1小时。加入NaHCO3(700mg),蒸发溶剂。残留物经快速层析纯化,用10∶1∶0.1 CH2Cl2∶MeOH∶浓NH4OH作为洗脱剂,得到白色固体(10mg,35%)。LCMS:M2H+=371。Mp=237-239℃。
实施例263-264
根据实施例262中提出的基本相同的方法,用表24第1列所示的化合物为原料,制备表24第2列所示的化合物。
表24
实施例265
将TFA(0.5mL)加入到0℃下的制备实施例197中制备的化合物(0.08g,0.16mmol)的CH2Cl2(2.0mL)溶液中,将得到的溶液搅拌2.5小时,在4℃下储存过夜,期间再加入TFA(0.5mL)。将得到的溶液搅拌4小时,真空浓缩。将残留物用1N NaOH中和,用CH2Cl2提取。将合并的有机层经Na2SO4干燥,过滤,减压浓缩。粗产物经快速层析纯化,用2.5%(10% NH4OH的MeOH溶液)的CH2Cl2溶液作为洗脱剂(0.009g,15%收率)。LCMS:MH+=396;mp=53-54℃。
实施例266
将制备实施例182中制备的化合物(26mg,0.070mmol)和硫氰酸钾(13mg,0.14mmol)的MeOH(1mL)溶液在冷水浴中冷却。向其中滴加溴(22mg,0.14mmol)的MeOH(0.7mL)溶液。室温下,将得到的反应混合物搅拌4小时,减压除去挥发性物质。将得到的残留物悬浮于少量CH2Cl2中。滤除溴化钾,通过加入氨水将滤液的pH调节至约7。减压浓缩,残留油状物经制备薄层层析,用15% MeOH的CH2Cl2溶液作为洗脱剂(26mg,87%收率)。
1H NMR(CDCl3)δ8.75(d,J=4.2Hz,2H),8.38(s,1H),7.68-7.64(m,2H),7.46-7.39(m,3H),7.22(t,J=6.3Hz,1H),6.43(s,1H),4.84(d,J=6.3Hz,2H);LCMS:MH+=427.
实施例267
氩气气氛下,将三溴化硼(1M的CH2Cl2溶液,0.60mL,0.60mmol)滴加到冰冷却的搅拌的实施例24中制备的化合物(50mg,0.12mmol)的CH2Cl2(1.5mL)溶液中。0℃下,将得到的反应混合物搅拌30分钟,温热至室温,搅拌过夜。将混合物通过加入少量水猝灭,用CH2Cl2提取。有机层经硫酸镁干燥,真空浓缩(45mg,94%收率)。
1H NMR(CD3OD)δ9.16(s,1H),8.95(s,1H),8.88(d,J=8.1Hz,1H),8.24(t,J=6.9Hz,1H),8.18(s,1H),7.95(d,J =7.8Hz,1H),7.40(t,J=7.8Hz,1H),7.00-6.96(m,2H),6.86(s,1H),5.28(s,2H);LCMS:.MH+=396.
实施例268
将制备实施例184中制备的化合物(0.05g,0.15mmol)、N-甲基哌嗪(20μL,1.2eq.)和iPr2Et(52μL,2.0eq.)在二氧六环(1mL)中的溶液加热至70℃过夜。将反应混合物冷却至室温,用水和饱和碳酸氢钠稀释。将得到的混合物用CH2Cl2提取,将合并的有机物经Na2SO4干燥,过滤,减压浓缩。粗产物经制备型TLC纯化,用5%(10%NH4OH的MeOH溶液)的CH2Cl2溶液作为洗脱剂(0.028g,47%收率)。MS:MH+=402;mp=210℃(分解)。
实施例269-275
根据实施例268中提出的基本相同的方法,仅用表25第2列中的胺和表25第3列中的氯化物代替,制备表25第4列所示的化合物。
实施例276
步骤A:
将4-氟苯基溴化镁(0.68mL,1.2eq.)加入制备实施例193中制备的化合物(0.20g,0.55mmol)和PdCl2(dppf)2(0.037g,10mol%)的THF溶液中,室温下,将得到的溶液搅拌72小时。将反应混合物用饱和氯化铵稀释,用乙酸乙酯提取。将合并的有机层用饱和氯化钠洗涤,经Na2SO4干燥,过滤,浓缩。粗产物经快速层析纯化,用纯乙酸乙酯作为洗脱剂(0.15g,65%收率)。MS:MH+=420。
步骤B:
根据制备实施例127中提出的基本相同的方法,仅用实施例276步骤A制备的化合物代替,制备以上化合物(0.17g,94%收率)。
步骤C:
根据制备实施例200中提出的基本相同的方法,仅用实施例276步骤B制备的化合物代替,制备以上化合物(0.1g,100%收率)。
步骤D:
根据实施例265中提出的基本相同的方法,仅用实施例276步骤C制备的化合物代替,制备以上化合物(0.049g,62%收率)。MS:MH+=414;mp=110-115℃。
实施例277
步骤A:
将Pd(PPh3)4(0.065g,10mol%)加入到3-氰基苯基碘化锌(2.2mL,0.5M的THF溶液,2eq.)和制备实施例193中制备的化合物(0.20g,0.56mmol)的DMF(2.0mL)溶液中,将得到的溶液加热至80℃ 144小时。将反应混合物冷却至室温,用饱和氯化铵稀释,用乙酸乙酯提取。将合并的有机物用水和盐水洗涤,经Na2SO4干燥,过滤,减压浓缩。粗产物经快速层析纯化,用纯乙酸乙酯作为洗脱剂(0.07g,29%收率)。MS:MH+=427。
步骤B至步骤D:
根据实施例276步骤B至步骤D中提出的基本相同的方法,制备以上化合物(0.023g,53%收率)。MS:MH+=421;mp=230℃(分解)。
实施例278:
根据实施例276中提出的基本相同的方法,仅用步骤A中适当的环丙基溴化镁代替,制备以上化合物。MS:MH+=372;mp=96-98℃。
实施例279
按J.Org.Chem.(1999),453中所述类似的方法,进行把催化的锌交联偶合反应。将所述氯代吡唑并嘧啶(200mg,0.458mmol)、Pd(PPh3)4(53mg,0.046mmol)和外-2-降冰片基溴化锌(0.5M的THF溶液,0.95mL,0.47mmol)的DMF(2mL)溶液在100℃(油浴温度)下回流过夜。将反应混合物用半饱和氯化铵猝灭,用二氯甲烷提取。将有机相经MgSO4干燥,减压浓缩。残留物经快速层析纯化,用50%乙酸乙酯的己烷溶液作为洗脱剂。将得到的N-Boc保护的产物(121mg,53%收率,LCMS:MH+=498)和TFA(1mL)的二氯甲烷(2mL)溶液室温下搅拌2小时。减压除去挥发物。将残留物溶解于二氯甲烷中,用饱和碳酸氢钠中和,用二氯甲烷提取。将有机相经MgSO4干燥,真空浓缩(96mg,99%收率)。
LCMS:MH+=398;1H NMR(CDCl3)δ8.78(s,1H),8.71(d,J=4.2Hz,1H),8.04(d,J=3.9Hz,1H),7.80(d,J=7.8Hz,1H),7.44(m,1H),6.73(m,1H),5.98(d,J=7.5Hz,1H),4.74(d,J=5.4Hz,2H),3.40-1.00(m,11H).
实施例280-294
根据实施例279中提出的基本相同的方法,仅用表26第2列中所示的氯化物和表26第3列中所示的有机锌试剂代替,制备表26第4列中的化合物。
表26
所选化合物的其它数据如下所示。
实施例280:1H NMR(CDCl3)δ8.65(s,1H),8.57(d,J=4.2Hz,1H),8.50(d,J=4.5Hz,1H),8.01(s,1H),7.69(d,J=7.5Hz,1H),7.61(d,J=7.8Hz,1H),7.31-7.22(m,2H),6.77(m,2H),4.71(d,J=5.4Hz,2H),2.68(s,3H).
实施例281:1H NMR(CDCl3)δ8.80(s,1H),8.72(d,J=4.8Hz,1H),8.08(s,1H),7.85-7.40(m,3H),7.02(d,J=5.1Hz,1H),6.90(t,J=6.0Hz,1H),6.29(s,1H),4.79(d,J=6.0Hz,2H),2.61(s,3H).
实施例282:1H NMR(CDCl3)δ8.67(s,1H),8.61(d,J=3.9Hz,1H),8.03(s,1H),7.72-7.31(m,3H),7.22-7.00(m,2H),6.81(t,J=6.0Hz,1H),6.03(s,1H),4.68(d,J=6.0Hz,2H),2.28(s,3H).
实施例283:1H NMR(CDCl3)δ8.68(s,1H),8.63(d,J=4.0Hz,1H),8.00(s,1H),7.80-7.72(m,2H),7.54-7.47(m,3H),7.35(m,1H),6.74(t,J=6.0Hz,1H),6.19(s,1H),4.67(d,J=6.0Hz,2H),4.21(q,J=7.2Hz,2H),1.13(t,J=7.2Hz,3H).
实施例284:1H NMR(CDCl3)δ7.97(s,1H),7.65(d,J=7.2Hz,1H),7.33-7.15(m-5H),6.73(t,J=5.4Hz,1H),5.99(s,1H),4.61(d,J=5.4Hz,2H),3.09(sept,J=6.9Hz,1H),1.11(d,J=6.9Hz,6H).
实施例285:1H NMR(CDCl3)δ8.56-8.55(m,2H),7.94(s,1H),7.54(m,1H),7.30-7.22(m,6H),6.59(t,J=5.7Hz,1H),5.66(s,1H),4.47(d,J=5.7Hz,2H),4.26(q,J=7.2Hz,1H),1.68(d,J=7.2Hz,3H).
实施例286:1H NMR(CDCl3)δ8.67(m,2H),7.94(s,1H),7.69(d,J=7.8Hz,1H),7.34(m,1H),6.63(t,J=5.7Hz,1H),5.87(s,1H),4.62(d,J=5.7Hz,2H),3.64(s,3H),3.13(m,2H),2.82(m,1H),1.22(m,3H).
实施例287:1H NMR(CDCl3)δ8.66(m,2H),7.94(s,1H),7.68(d,J=7.8Hz,1H),7.34(m,1H),6.62(t,J=6.0Hz,1H),5.87(s,1H),4.62(d,J=6.0Hz,2H),3.64(s,3H),3.13(m,2H),2.81(m,1H),1.22(m,3H).
实施例288:1H NMR(CDCl3)δ8.64(s,1H),8.60(d,J=3.6Hz,1H),8.04(s,1H),7.68(m,1H),7.31(m,1H),7.16(m,1H),7.07-7.05(m,2H),6.80(t,J=6.3Hz,1H),5.93(s,1H),4.64(d,J=6.3Hz,2H),2.08(s,6H).
实施例289:1H NMR(CDCl3)δ8.72(s,1H),8.62(d,J=4.8Hz,1H),7.99-7.97(m,2H),7.73-7.69(m,2H),7.40-7.33(m,2H),6.67(t,J=6.0Hz,1H),6.29(s,1H),4.71(d,J=6.0Hz,2H).
实施例290:1H NMR(CDCl3)δ8.73(s,1H),8.62(d,J=4.5Hz,1H),8.01(s,1H),7.76(m,1H),7.41(d,J=5.1Hz,1H),7.34(dd,J=8.1,5.1Hz,1H),7.05(d,J=5.1Hz,1H),7.01(s,1H),6.79(t,J=6.0Hz,1H),4.74(d,J=6.0Hz,2H).
实施例291:1H NMR(DMSO-d6)δ9.12(s,1H),8.40(s,1H),8.33(s,1H),8.13(m,1H),7.82(d,J=5.1Hz,1H),7.40-7.39(m,2H),7.22(d,J=5.1Hz,1H),6.86(s,1H),4.86(s,2H).
实施例292:1H NMR(CDCl3)δ8.23(s,1H),8.16(d,J=6.0Hz,1H),8.06(s,1H),7.31-7.05(m,5H),6.86(m,1H),5.87(s,1H),4.62(d,J=6.3Hz,2H),2.09(s,6H).
实施例293:1H NMR(CDCl3)δ8.14(s,1H),8.12(d,J=6.3Hz,1H),7.94(s,1H),7.29-7.16(m,6H),7.07(m,1H),6.78(t,J=6.0Hz,1H),5.54(s,1H),4.44(d,J=6.0Hz,2H),4.24(t,J=7.2Hz,1H),1.68(d,J=7.2Hz,3H).
实施例294:1H NMR(CDCl3)δ8.67(s,1H),8.59(d,J=4.8Hz,1H),8.01(s,1H),7.71(m,1H),7.52(dd,J=7.8,1.8Hz,1H),7.40-7.19(m,4H),6.78(t,J=6.0Hz,1H),6,32(s,1H),4.67(d,J=6.0Hz,2H),2.38(s,3H).
实施例295
向0℃下的氢化铝锂(10mg,0.26mmol)的无水THF(2mL)悬浮液中滴加实施例283制备的化合物(20mg,0.044mmol)的无水THF(2mL)溶液。将得到的混合物回流l小时,室温下搅拌过夜,用稀硫酸中和,然后用乙酸乙酯提取。将有机相经MgSO4干燥,减压浓缩。粗产物经制备薄层层析纯化,用5%甲醇的乙酸乙酯溶液作为洗脱剂(15mg,83%收率)。
LCMS:MH+=410;1H NMR(CDCl3)δ8.69(s,1H),8.61(d,J=3.9Hz,1H),8.05(d,J=2.1Hz,1H),7.74(d,J=7.8Hz,1H),7.52-7.31(m,5H),6.97(t,J=6.3Hz,1H),6.55(d,J=2.7Hz,1H),6.20(s,1H),4.71(d,J=6.3Hz,2H),4.52(s,2H).
实施例296
向-50℃下的实施例294中制备的N-Boc保护的化合物(45mg,0.085mmol)的二氯甲烷(4mL)溶液中加入m-CPBA(18mg,0.10mmol)。-50℃下搅拌1小时后,再加入m-CPBA(4mg,0.02mmol)。将混合物再搅拌2小时,用二氯甲烷(20mL)稀释,用饱和碳酸氢钠(20mL)洗涤。将有机相经MgSO4干燥,减压浓缩。残留物经制备薄层层析纯化,用2.5%甲醇的二氯甲烷溶液作为洗脱剂。室温下,将得到的N-Boc保护的产物(37mg,80%收率,LCMS:MH+=542)和TFA(1mL)的二氯甲烷(2mL)溶液搅拌2小时。减压除去挥发物。将残留物溶解于二氯甲烷中,用饱和碳酸氢钠中和,用二氯甲烷提取。将有机相经MgSO4干燥,减压浓缩。粗产物经制备薄层层析纯化,用5%甲醇的乙酸乙酯溶液作为洗脱剂(26mg,89%收率)。
LCMS:MH+=442;1H NMR(CDCl3)δ8.71(s,1H),8.64(d,J=3.9Hz,1H),8.41(m,1H),8.03(s,1H),7.75-7.54(m,4H),7.36(dd,J=8.1,5.1Hz,1H),6.81(t,J=6.0Hz,1H),6.34(s,1H),4.74(d,J=6.0Hz,2H),3.25(s,3H).
实施例297
向0℃下的实施例294中制备的N-Boc保护的化合物(56mg,0.11mmol)的二氯甲烷(4mL)溶液中加入m-CPBA(42mg,0.24mmol)。室温下搅拌2小时后,再加入m-CPBA(13mg,0.075mmol)。室温下,将混合物搅拌过夜,用二氯甲烷(20mL)稀释,用饱和碳酸氢钠(20mL)洗涤。将有机相经MgSO4干燥,减压浓缩。残留物经制备薄层层析纯化,用2.5%甲醇的乙酸乙酯溶液作为洗脱剂。室温下,将得到的N-Boc保护的产物(29mg,49%收率,LCMS:MH+=558)和TFA(1mL)的二氯甲烷(2mL)溶液搅拌2小时。减压除去挥发物。将残留物溶解于二氯甲烷中,用饱和碳酸氢钠中和,用二氯甲烷提取。将有机相经MgSO4干燥,减压浓缩。粗产物经制备薄层层析纯化,用2.5%甲醇的乙酸乙酯溶液作为洗脱剂(21mg,91%收率)。
LCMS:MH+=458;1H NMR(CDCl3)δ8.64(s,2H),8.20(m,1H),8.01(s,1H),7.73-7.60(m,3H),7.46(m,1H),7.35(s,1H),6.82(t,J=5.9Hz,1H),6.17(s,1H),4.65(d,J=5.7Hz,2H),3.60(s,3H).
实施例298
根据制备实施例127中提出的基本相同的方法,仅用制备实施例189中制备的化合物代替,制备以上化合物。MS:MH+=334;mp=170-173℃。
实施例299-300
根据实施例298中提出的基本相同的方法,仅用表27第2列中所示的化合物代替,制备表27第3列中所示的化合物。
表27
实施例301
向-78℃下的制备实施例186中制备的化合物(0.1g,0.21mmol)的THF(4.0mL)溶液中加入-78℃下的nBuLi(0.57mL,2.16M的己烷溶液,5.0eq.)。-78℃下,将反应混合物搅拌2小时,用水猝灭,温热至室温,用乙酸乙酯提取。将合并的有机相经Na2SO4干燥,过滤,减压浓缩。粗产物经制备TLC纯化,用2.5%(10%NH4OH的CH3OH)溶液的CH2Cl2溶液作为洗脱剂(0.013g,20%收率)。MS:MH+=326;mp=71-72℃。
实施例302
根据实施例301中提出的基本相同的方法,仅用制备实施例187的化合物代替,制备以上化合物(0.049g,68%收率)。MS:MH+=344;mp=69-71℃。
实施例303
向0℃下的制备实施例187.1中的3H-加成物(0.70g,2.32mmol)的DMF(4.2mL)溶液中滴加入POCl3(0.67mL,7.2mmol)。室温下将混合物搅拌14小时,冷却至0℃,然后加入冰猝灭。小心加入1N NaOH调节pH至8,将混合物用二氯甲烷(3×25mL)提取。将有机层合并,经Na2SO4干燥,过滤,减压浓缩。将粗产物用乙酸乙酯重结晶,得到0.43g(56%)黄色固体。mp=181-183℃;M+H=330。
实施例304
步骤A:
用5分钟,向0℃下的实施例303中的醛(100mg,0.30mmol)的THF(1mL)溶液中滴加入环己基溴化镁(0.46mL,2.0M乙醚液)。0℃下,将得到的混合物搅拌2小时,然后在室温下搅拌12小时。将混合物冷却至0℃,然后用饱和氯化铵水溶液(3mL)和二氯甲烷(5mL)处理。分离各层,将水层用二氯甲烷(2×5mL)提取。将有机相合并,用盐水(1×5mL)洗涤,经Na2SO4干燥,过滤,减压浓缩,得到110mg(89%)浅黄色半固体。M+H=414。该粗品物质无需进一步纯化,直接用于步骤B。
步骤B:
向0℃下的醇(53mg,0.13mmol)的二氯甲烷(0.5mL)溶液中顺次加入Et3SiH(24μL,0.15mmol)和TFA(24μL,0.30mmol)。0℃下,将混合物搅拌2小时,然后在室温下搅拌2小时,然后再加入部分Et3SiH(24μL,0.15mmol)和TFA(24μL,0.30mmol),室温下将混合物搅拌3小时(直至通过TLC监测反应完全)。将混合物减压浓缩,将粗品残留物在二氯甲烷(5mL)和饱和碳酸氢钠水溶液(2.5mL)之间分配。分离各层,将水层用二氯甲烷(2×5mL)提取。将有机层合并,用盐水(1×5mL)洗涤,经Na2SO4干燥,过滤,减压浓缩。粗产物经制备TLC纯化(8×1000mM),用CH2Cl2/MeOH(22∶1)洗脱,得到29mg(56%)的黄色半固体。M+H=398。
实施例305-312
根据实施例304中提出的基本相同的方法,利用实施例303的醛以及用表28第2列中所示的格氏试剂或有机锂试剂代替,制备表28第3列的化合物:
表28
实施例313
向实施例303中的醛(81mg,0.25mmol)的苯(2.5mL)溶液中一次性加入羰基乙氧基亚甲基三苯膦(0.12g,0.33mmol)。将混合物加热回流24小时,冷却至室温,然后减压浓缩。将混合物用二氯甲烷(5mL)稀释,加入盐水(2mL),分离各层。将水层用二氯甲烷(2×4mL)提取。将有机相合并,经NaXSO4干燥,过滤,减压浓缩。粗产物经制备TLC纯化(8×1000μM),用CH2Cl2/MeOH(20∶1)洗脱,得到98mg(100%)的白色固体。mp=151-153℃;M+H=400。
实施例314
向溴化苄基三苯(0.59g,1.37mmol)的THF(3mL)混合物中加入NaH(55mg,1.37mmol)。将混合物搅拌30分钟。一次性加入实施例303中的醛(0.15g,0.46mmol),将混合物加热回流36小时。将混合物冷却至室温,减压浓缩。将混合物用二氯甲烷(5mL)稀释,加入盐水(2mL),分离各层。将水层用二氯甲烷(2×4mL)提取。将有机相合并,经Na2SO4干燥,过滤,减压浓缩。粗产物经制备TLC纯化(8×1000μM),用CH2Cl2/MeOH(20∶1)洗脱,得到58mg(32%)的黄色固体。mp=138-141℃;M+H=404。
实施例315
向实施例303的醛(0.20g,0.60mmol)的THF(3mL)溶液中滴加Ti(i-OPr)4(0.36mL,1.21mmol),然后加入(S)-(-)-2-甲基-2-丙基亚磺酰胺(74mg,0.61mmol)。在回流下,将得到的混合物搅拌18小时,冷却至室温,用盐水(2mL)猝灭。将混合物通过硅藻土垫过滤,用EtOAc(2×2mL)洗涤。分离各层,将水层用乙酸乙酯(2×4mL)提取。将有机相合并,经Na2SO4干燥,过滤,减压浓缩。粗产物经制备TLC纯化(8×1000μM),用CH2Cl2/MeOH(20∶1)洗脱,得到0.21g(80%)的黄色固体。mp=108-110℃;M+H=433。
实施例316
按实施例315相同的方法制备,但用(R)-(-)-2-甲基-2-丙基亚磺酰胺代替,得到0.25g(94%)黄色固体。mp=107-109℃;M+H=433。
实施例317
步骤A:
向-40℃下的实施例316的亚磺酰亚胺(50mg,0.12mmol)的二氯甲烷(2.5mL)溶液中滴加MeMgBr(96mL,0.29mmol)。-40℃下,将混合物搅拌5小时,然后在室温搅拌12小时。再加入部分MeMgBr(96mL,0.29mmol),将混合物搅拌12小时。加入饱和氯化铵水溶液(2mL),将混合物用EtOAc(3×4mL)提取。将有机层合并,经Na2SO4干燥,过滤,减压浓缩,得到30mg(58%)粗残余物。该物质无需进一步纯化直接用于下一步。
步骤B:
向步骤A的粗品物质(30mg,0.067mmol)的甲醇(2mL)溶液加入到浓HCl(2mL)中。室温下,将混合物搅拌12小时,然后将混合物浓缩至干。将粗产物在二氯甲烷(3mL)和饱和碳酸氢钠水溶液(2mL)之间分配,分离各层。将水层用二氯甲烷(2×3mL)提取,将有机层合并。将有机层干燥(Na2SO4),过滤,减压浓缩,得到6mg(24%)标题化合物,为浅黄色固体。mp=100-102℃;M+H=345。
实施例318
向室温下的实施例300的醛(75mg,0.23mmol)的THF/CH2Cl2(5mL/1mL)溶液中加入MeONH2·HCl(38mg,0.46mmol),然后滴加入吡啶(46μL,0.57mmol)。室温下,将混合物搅拌72小时,然后将混合物浓缩至干。将粗产物在二氯甲烷(3mL)和饱和碳酸氢钠水溶液(2mL)之间分配,分离各层。将水层用二氯甲烷(2×3mL)提取,将有机层合并。将有机层干燥(Na2SO4),过滤,减压浓缩。粗产物经制备TLC纯化(3×1000μM),用CH2Cl2/MeOH(22∶1)洗脱,得到90mg(100%)的浅黄色固体。mp=173-175℃;M+H=359。
实施例319
向实施例303的醛(60mg,0.18mmol)的EtOH(2.5mL)溶液中加入羟吲哚(48mg,0.37mmol),然后加入哌啶(3滴)。将混合物加热回流14小时,然后将混合物冷却至室温。过滤得到的沉淀,用冷EtOH(2×2mL)洗涤。将产物在高真空下干燥,得到81mg(100%)的标题化合物,为橙/棕色固体。mp=182-185℃;M+H=445。
实施例320
向制备实施例187.10的3-H同系物(analog)(106mg,0.35mmol)的AcOH(2mL)溶液中加入37%甲醛水溶液(1.5mL,1.40mmol),然后加入哌啶(100μL,0.37mmol)。室温下,将得到的混合物搅拌24小时,减压除去AcOH。将混合物用水(2mL)稀释,用2M NaOH中和至pH=8。将水层用二氯甲烷(2×7mL)提取,将有机层合并。将有机层用盐水(1×4mL)洗涤,干燥(Na2SO4),过滤,减压浓缩,得到96mg(69%)的灰白色固体。mp=88-90℃;M+H=399。
实施例321-322
根据实施例320中提出的基本相同的方法,仅用表29第2列中的胺代替并应用制备实施例187.10中的所述3-H加成物,制备表29第3列中的化合物。
表29
实施例323
向室温下的制备实施例187.10的3-H同系物(113mg,0.38mmol)的CH2Cl2(5mL)溶液中加入AlCl3(215mg,1.61mmol),然后加入AcCl(100mL,1.40mmol)。将混合物加热回流12小时,然后冷却至室温。将混合物顺次用3M HCl(3mL)和饱和碳酸氢钠水溶液处理(至pH=8)。分离各层。将水层用二氯甲烷(2×5mL)提取,将有机层合并,干燥(Na2SO4),过滤,减压浓缩。粗产物经制备TLC纯化(8×1000mM),用CH2Cl2/MeOH(20∶1)洗脱,得到68mg(52%)的白色固体。mp=220-221℃;M+H=344。
实施例324
利用实施例323中所述的方法,但使用苯甲酰氯,制备标题化合物,收率61%,为白色固体。mp=172-175℃;M+H=406。
实施例325
向0℃下的实施例323的酮(100mg,0.29mmol)的二氯甲烷(2.5mL)溶液中滴加MeMgBr(0.35mL,3.0M乙醚液)。室温下,将得到的混合物搅拌18小时,然后通过加入饱和氯化铵水溶液(2mL)小心地猝灭,加入二氯甲烷(2mL)。分离各层,将水层用二氯甲烷(2×4mL)提取。将有机层合并,干燥(Na2SO4),过滤,减压浓缩。粗产物经制备TLC纯化(8×1000μM),用CH2Cl2/MeOH(10∶1)洗脱,得到68mg(52%)黄色固体。mp 160-162℃;M+H=360。
实施例326
向0℃下的实施例323的酮(84mg,0.24mmol)的MeOH/THF(1∶1;总共2mL)溶液中一次性加入NaBH4(12mg,0.30mmol)。室温下,将得到的混合物搅拌18小时,然后再加入部分NaBH4(12mg,0.30mmol)。将混合物搅拌12小时,将混合物用冰猝灭,然后加入1MNaOH调节pH=9。将混合物用二氯甲烷(5mL)稀释。分离各层,将水层用二氯甲烷(2×4mL)提取。将有机层合并,干燥(Na2SO4),过滤,减压浓缩。粗产物经制备TLC纯化(8×1000μM),用CH2Cl2/MeOH(10∶1)洗脱,得到25mg(30%)黄色固体。mp 148-150℃;M+H=346。
实施例327
利用实施例326中所述相同的方法,将酮(84mg,0.21mmol)转化为53mg(62%)浅黄色固体。mp=78-80℃;M+H=408。
实施例328
向制备实施例187.10的3-H加成物(1.3g,4.31mmol)的二氯甲烷(50mL)溶液中加入Esehenmoser氏盐(0.79g,4.31mmol),然后滴加入TFA(0.56mL,7.33mmol)。室温下,将混合物搅拌48小时,用二氯甲烷(250mL)稀释。将有机层用饱和碳酸氢钠水溶液(2×125mL)洗涤,得到1.41g(92%)的黄色固体。mp=231-233℃;M+H=359。
实施例329
向一压力管中的实施例328的叔胺加成物(100mg,0.28mmol)的50% DMF(5mL)水溶液的溶液中加入KCN(0.15g,2.32mmol)。将管盖上盖子,在100℃下加热96小时。将混合物冷却至室温,用乙酸乙酯(25mL)稀释。将有机层用盐水(1×5mL)和水(1×5mL)洗涤。将有机层干燥(Na2SO4),过滤,减压浓缩。粗产物经制备TLC纯化(4×1000μM),用EtOAc洗脱,得到21mg(30%)棕色固体。mp 152-155℃;M+H=341。
实施例330
向0℃下的实施例17.10的醇(45mg,0.14mmol)的二氯甲烷(0.7mL)溶液中加入Et3SiH(26μL,0.16mmol),接着加入TFA(25μL,0.33mmol)。0℃下,将混合物搅拌2小时,然后在室温下搅拌2小时,再加入部分Et3SiH(26μL,0.16mmol)和TFA(25μL,0.33mmol),室温下将混合物搅拌4小时(直至通过TLC检测反应完全)。将混合物减压浓缩,将粗产物在二氯甲烷(3mL)和饱和碳酸氢钠水溶液(1.5mL)之间分配。分离各层,将水层用二氯甲烷(2×4mL)提取。将有机层合并,用盐水(1×5mL)洗涤,干燥(Na2SO4),过滤,减压浓缩。粗产物经制备TLC纯化(4×1000mM),用CH2Cl2/MeOH(20∶1)洗脱,得到21mg(48%)黄色固体。mp 146-148℃;M+H=316。
实施例331
向0℃下的制备实施例187.10的3-H加成物(90mg,0.30mmol)的浓硫酸(2mL)溶液中滴加入发烟硝酸(30μL,0.72mmol)。0℃下,将得到的混合物搅拌1小时,然后向混合物中加入冰(约1g)。收集得到的沉淀,用水(2×2mL)和二氯甲烷(2×2mL)洗涤。将粗产物高真空干燥,得到67mg(60%)的单硫酸盐,为黄/橙色固体。mp 250℃;M+H(游离碱)=392。
实施例332
步骤A:
向0℃下的制备实施例168的醛(0.10g,0.39mmol)的THF(2.5mL)溶液中加入CF3TMS(64mL,0.43mmol),接着加入CsF(10mg)。0℃下,将得到的混合物搅拌2小时,然后在室温搅拌2小时。加入1M HCl(5mL),将混合物用二氯甲烷稀释(10mL)。分离各层,将水层用二氯甲烷(2×10mL)提取,将有机层合并。将有机层用盐水(1×10mL)洗涤,经Na2SO4干燥,过滤,减压浓缩,得到127mg(99%)的黄色半固体。M+H=328。该产物无需进一步纯化。
步骤B:
通过利用实施例1中提出的通用方法,使实施例332步骤A中的7-Cl加成物(127mg,0.39mmol)与3-(氨基甲基)吡啶(73μL,0.43mmol)反应,得到80mg(51%)标题化合物,为浅黄色固体。mp=68-72℃;M+H=400。
实施例333
向室温下的制备实施例174的苯胺(200mg,0.69mmol)的THF(6mL)溶液中加入制备实施例256中的醛(114mg,0.83mmol),接着滴加入Ti(i-OPr)4(0.82mL,2.77mmol)。将混合物在回流下搅拌4小时,然后冷却至室温。加入NaCNBH3(347mg,5.53mmol),室温下将混合物搅拌2小时。将混合物冷却至0℃,用1M NaOH(4mL)和盐水(1mL)处理,搅拌30分钟。将混合物用二氯甲烷(3×10mL)提取,将有机层合并。将有机层用盐水(1×7mL)洗涤,干燥(Na2SO4),过滤,减压浓缩。粗产物经制备型薄层层析纯化(8×1000υM板),用CH2Cl2/MeOH(25∶1)洗脱,得到89mg(31%)的标题化合物,为黄色固体。mp 210-213℃;M+H=411。
实施例334-337
根据实施例333中提出的基本相同的方法,仅用表30第2列中所示的苯胺和表30第3列中所示的醛,制备表30第4列中的化合物。
表30
实施例 |
列2(苯胺) |
列3(醛) |
列4(最终产物) |
CMPD1.mp(℃)2.M+H |
实施例338
步骤A:
在实施例333所述的反应条件下,使苯胺(0.20g,0.69mmol)与醛(0.13g,0.83mmol)反应,得到70mg(23%)的硫代甲基衍生物,为黄色固体。M+H=428。
步骤B:
向实施例338步骤A的硫代甲基衍生物(60mg,0.14mmol)的二氧六环(2mL)溶液中加入Boc2O(61mg,0.28mmol),接着加入DMAP(21mg,0.17mmol)。室温下将混合物搅拌14小时,减压浓缩。粗产物经制备TLC纯化(6×1000μM板),用己烷/乙酸乙酯(4∶1)洗脱,得到61mg(83%)的标题化合物,为黄色固体。M+H=528。
步骤C:
向实施例338步骤B的硫代甲基衍生物(41mg,0.078mmol)的二氯甲烷(2mL)溶液中一次性加入MCPBA(33mg,0.19mmol)。将得到的混合物于室温下搅拌3小时,将混合物用二氯甲烷(5mL)和饱和碳酸氢钠水溶液(2.5mL)稀释。分离各层,将水层用二氯甲烷(2×5mL)提取,将有机层合并。将有机层干燥(Na2SO4),过滤,减压浓缩,得到40mg(92%)的砜加成物,为浅黄色固体。M+H=560。
步骤D:
向装有实施例338步骤C的砜(75mg,0.13mmol)和搅拌棒的烧瓶中加入吗啉(2mL,22mmol)。将混合物加热回流12小时,冷却至室温,高真空下浓缩。粗产物经制备TLC纯化(6×1000μM板),用二氯甲烷/甲醇(40∶1)洗脱,得到41mg(68%)的标题化合物,为黄色固体。mp209-210℃;M+H=466。
实施例339
根据实施例338中所述的方法制备标题化合物,但使用苄胺为原料,得到12mg(70%)的白色固体。mp 194-196℃;M+H=487。
实施例340
步骤A:
向室温下的5-氯加成物(0.15g,0.34mmol)的二氧六环/DIPEA(2.5mL/1.0mL)溶液中滴加入环戊胺(0.041μL,0.41mmol)。在回流下,将得到的溶液搅拌16小时,冷却至室温,减压浓缩。粗品物质经制备TLC纯化(8×1000μM),用二氯甲烷/甲醇(25∶1)洗脱,得到148mg(89%)的黄色油状物。M+H=489。
步骤B:用TFA除去叔丁氧基羰基保护基
向室温下的实施例340步骤A制备的化合物(135mg,0.28mmol)的二氯甲烷(2mL)溶液中滴加入TFA(0.54mL,7.0mmol)。室温下,将得到的溶液搅拌18小时,减压浓缩。将粗品物质再溶解于二氯甲烷(5mL),将有机层顺次用饱和碳酸氢钠水溶液(2×2mL)和盐水(1×2mL)洗涤。将有机层干燥(Na2SO4),过滤,减压浓缩。粗品物质经制备TLC纯化(8×1000μM),用二氯甲烷/甲醇(20∶1)洗脱,得到105mg(97%)的白色固体。mp 120-122℃;M+H=389。
实施例341
步骤A:
根据实施例340中提出的基本相同的方法,仅用适当的胺代替,制备上述化合物。MS:MH+=431。
步骤B:用KOH除去叔丁氧基羰基保护基
向实施例341步骤A制备的化合物(0.14g,0.26mmol)的EtOH∶H2O(3mL,2∶1)混合物中一次性加入KOH(0.29g,20eq.)。回流下,将得到的溶液搅拌14小时,冷却至室温,减压浓缩。将残留物溶解于二氯甲烷(5mL)中,用饱和碳酸氢钠(2mL)稀释。分离各层,将水层用二氯甲烷(2×4mL)提取。将合并的有机层用盐水洗涤,经Na2SO4干燥,过滤,减压浓缩。粗产物经制备TLC纯化(8×1000μM),用5%甲醇的二氯甲烷溶液洗脱(0.066g,59%得率)。MS:MH+=432。Mp=219-221℃。
实施例342-397:
根据实施例340中提出的基本相同的方法,仅用表31第2列中的氯化物代替,并通过表31第3列中所示的方法除去叔丁氧基羰基保护基,制备表31第4列中所示的化合物。
表31
以下给出所选实施例的其它数据:
实施例392:1H NMR(DMSO-d6)δ8.65(s,1H),8.46(d,J=3.3Hz,1H),8.21(t,J=6.6Hz,1H),7.90(s,1H),7.80(d,J=7.8Hz,1H),7.35(dd,J=7.8,4.8Hz,1H),5.46(s,1H),4.61(d,J=6.9Hz,2H),3.01(s,6H).
实施例393:1H NMR(CDCl3)δ8.65(s,1H),8.60(d,J=4.8Hz,1H),7.76(s,1H),7.70(m,1H),7.32(dd,J=8.1,4.8Hz,1H),6.43(t,J=6.0Hz,1H),5.08(s,1H),4.80(m,1H),4.56(d,J=6.0Hz,2H),2.96(d,J=5.1Hz,3H).
实施例394:1H NMR(CDCl3)δ8.68(s,1H),8.60(d,J=4.8Hz,1H),7.76(s,1H),7.72(m,1H),7.32(dd,J=7.8,5.4Hz,1H),6.55(t,J=5.7Hz,1H),5.53(s,1H),5.35(s,1H),4.62(d,J=5.7Hz,2H),2.49(m,1H),0.75(m,2H),0.51(m,2H).
实施例395:1H NMR(CDCl3)δ8.65.(s,1H),8.60(d,J=4.0Hz,1H),7.75(s,1H),7.69(m,1H),7.33(dd,J=8.1,5.1Hz,1H),6.45(t,J=6.0Hz,1H),5.07(s,1H),4.69(m,1H),4.54(d,J=6.0Hz,2H),3.98(m,1H),3.79(dd,J=10.8,2.4Hz,1H),3.59(dd,J=11.1,7.2Hz,1H),1.59-1.36(m,4H),0.94(t,J=6.9Hz,3H).
实施例396:1H NMR(CDCl3)δ8.60(s,1H),8.56(d,J=4.2Hz,1H),7.73(s,1H),7.66(m,1H),7.31(dd,J=7.8,4.8Hz,1H),6.51(t,J=6.0Hz,1H),5.05(s,1H),4.86(d,J=6.6Hz,1H),4.50(d,J=6.0Hz,2H),3.94(m,1H),3.78(dd,J=11.1,2.4Hz,1H),3.57(dd,J=11.1,7.2Hz,1H),1.57-1.34(m,4H),0.91(t,J=7.2Hz,3H).
实施例397:1H NMR(CDCl3)δ8.65(s,1H),8.59(d,J=4.5Hz,1H),7,75(s,1H),7.69(m,1H),7.31(m,1H),6.43(t,J=6.0Hz,1H),5.06(s,1H),4.88(m,1H),4.55(d,J=6.0Hz,2H),3.70(m,2H),3.38(m,2H),1.79-1.61(m,4H).
实施例398-416:
根据实施例341步骤A和B中提出的基本相同的方法,仅用制备实施例193.10中制备的化合物代替,制备表32第4列中的化合物。
表32
以下给出所选实施例的其它数据:
实施例414:1H NMR(DMSO-d6)δ8.26(s,1H),8.23(m,1H),8.13(m,1H),7.90(s,1H),7.40-7.27(m,3H),5.34(s,1H),4.49(d,J=6.3Hz,2H),2.56(m,1H),0.67(m,2H),0.35(m,2H).
实施例403:1H NMR(DMSO-d6+CDCl3)δ8.08(s,1H),7.90(d,J=6.3Hz,1H),7.49(s,1H),7.34(t,J=6.3Hz,1H),7.16-7.09(m,2H),5.65(d,J=6.6Hz,1H),4.97(s,1H),4.90(s,1H),4.29(d,J=6.3Hz,2H),3.70.(m,1H),3.46(m,1H),3.34(m,1H),1.35-1.17(m,4H),0.71(t,J=7.2Hz,3H).
实施例404:1H NMR(DMSO-d6)δ8.21(s,1H),8.12(d,J=6.6Hz,1H),8.06(m,1H),7.86(s,1H),7.38(t,J=7.8Hz,1H),7.30(d,J=7.5Hz,1H),6.73(d,J=8.7Hz,1H),5.28(s,1H),4.70(t,J=5.1Hz,1H),4.41(d,J=6.6Hz,2H).4.00(s,1H),3.39(m,1H),1.53(m,1H),1.36-1.25(m,3H),0.86(t,J=7.0Hz,3H).
实施例417-421:
根据Chem.Pharm.Bull.,1999,47,928-938中提出的方法,用表33所述第2列所示的氧或硫亲核试剂,并通过表33第3列中所列的裂解方法,制备表33第4列中的化合物:
表33
实施例422
向室温下的实施例373的氨基化合物(18mg,0.043mmol)的二氯甲烷(1mL)溶液中顺次加入DIPEA(10μL,0.056mmol)和MeSO2Cl(4mL,0.052mmol)。室温下,将混合物搅拌12小时,用二氯甲烷(2mL)和饱和碳酸氢钠水溶液(2mL)稀释。分离各层,将有机层用盐水(1×2ml)提取。将有机层干燥(Na2SO4),过滤,减压浓缩。粗品物质经制备TLC纯化(4×1000μM),用二氯甲烷/甲醇(20∶1)洗脱,得到16mg(75%)的白色固体。mp 152-154℃;M+H=495。
实施例423-424:
利用实施例422中提出的方法,将表34中的所述氨基化合物(第2列)转化为对应的甲磺酰胺化合物(第3列)。
表34
实施例425
步骤A:
在N2下,将制备实施例194制备的化合物(132mg,0.25mmol)、三丁基乙烯基锡(95mg,0.30mmol)和四(三苯瞵)钯(29mg,0.025mmol)在无水二氧六环(5mL)中的混合物回流24小时。蒸发溶剂,残留物经快速层析纯化,用2∶1二氯甲烷∶乙酸乙酯洗脱,得到黄色蜡状固体(53mg,50%)。LCMS:MH+=428。
步骤B:
在70℃、N2下,将实施例425步骤A制备的化合物(50mg,0.12mmol)和KOH(100mg,1.80mmol)在乙醇(3mL)和水(0.6mL)中的混合物搅拌24小时。加入碳酸氢钠(1.0g)、Na2SO4(2.0g)和二氯甲烷(20mL),将混合物振摇,然后过滤。蒸发溶剂,残留物经快速层析纯化,用20∶1∶0.1二氯甲烷∶甲醇∶浓NH4OH作为洗脱剂,得到黄色蜡状固体(17mg,45%)。LCMS:MH+=328。Mp=45-51℃。
实施例426:
步骤A:
根据实施例425步骤A提出的基本相同的方法,仅采用三丁基甲基乙炔基锡,制备以上所示的化合物。
步骤B:
在1大气压氢气下,将实施例426步骤A制备的化合物(150mg,0.34mmol)和PtO2(30mg,0.13mmol)在冰醋酸(3mL)中的混合物搅拌20小时。将混合物过滤,加入新的PtO2(30mg,0.13mmol),在1大气压氢气下,将混合物搅拌2.5小时。将混合物倒入碳酸钠(20g)和水(200mL)中,用二氯甲烷提取(4×20mL)。将合并的提取物经Na2SO4干燥,过滤。蒸发溶剂,残留物经快速层析纯化,用1∶1二氯甲烷∶乙酸乙酯作为洗脱剂,得到黄色蜡状固体(68mg,45%)。
步骤C:
根据实施例425步骤B提出的基本相同的方法,仅用实施例426步骤B中制备的化合物代替,制备以上所示的化合物,MS:MH+=344;Mp=110-112℃。
实施例427
步骤A:
在封闭压力管中,在80℃下,将制备实施例194制备的化合物(527mg,1.00mmol)、三乙基(三氟甲基)硅烷(666mg,3.60mmol)、氟化钾(210mg,3.60mmol)和CuI(850mg,4.46mmol)在无水DMF(4mL)中的混合物搅拌72小时。加入二氯甲烷(80mL),将混合物通过硅藻土过滤。蒸发溶剂,残留物经快速层析纯化,用2∶1二氯甲烷∶乙酸乙酯作为洗脱剂,得到浅橙色蜡状固体(70mg,15%)。LCMS:M+=470。
步骤B:
在0℃、N2下,将TFA(0.70mL)加入到实施例427步骤A制备的化合物(70mg,0.15mmol)在无水二氯甲烷(3mL)中的搅拌的溶液中。在0℃下,将混合物搅拌10分钟,然后在25℃下搅拌2小时。倒入10%碳酸钠水溶液(50mL)中,用二氯甲烷提取(3×15mL),经Na2SO4干燥,过滤。蒸发溶剂,残留物经快速层析纯化,用乙酸乙酯作为洗脱剂,得到灰白色固体(40mg,73%)。LCMS:M+=370。Mp=156-158℃。
实施例428
步骤A:
在氮气中,将制备实施例193制备的化合物(100mg,0.28mmol)、四环丙基锡(91mg,0.32mmol)、Pd2dba3(8.0mg,0.009mmol)和Pd(Pt-Bu3)2(9.0mg,0.017mmol)在无水二氧六环(3mL)中的混合物回流72小时。蒸发溶剂,残留物经快速层析纯化,用1∶1二氯甲烷∶乙酸乙酯作为洗脱剂,得到无色蜡状固体(38mg,38%)。LCMS:MH+=366。
步骤B:
在N2下,将实施例428步骤A中制备的化合物(36mg,0.10mmol)和KOH(300mg,5.40mmol)在乙醇(3mL)、1,2-二甲氧基乙烷(3.0mL)和水(0.8mL)中的混合物回流4小时。倒入饱和碳酸氢钠水溶液(100mL)中,用二氯甲烷提取(5×10mL),经Na2SO4干燥,过滤。蒸发溶剂,残留物经快速层析纯化,用30∶1乙酸乙酯∶甲醇作为洗脱剂,得到无色蜡状物(18mg,69%)。LCMS:MH+=266。
步骤C:
在N2下,将N-溴琥珀酰亚胺(12mg,0.068mL)的无水乙腈(2mL)溶液加入到实施例428步骤B制备的化合物(18mg,0.068mmol)在无水乙腈(2mL)中的搅拌的溶液中。在25℃下,将混合物搅拌2小时。蒸发溶剂,残留物经快速层析纯化,用乙酸乙酯作为洗脱剂,得到5mg(17%)的二溴代化合物(白色固体,LCMS:MH+=370,mp=150-152℃)和8mg(34%)的一溴代化合物(无色固体,LCMS:M+=344,mp=196-198℃)。
实施例429
步骤A:
在氮气中,将1,3-丙基磺内酰胺(72mg,0.60mmol)的无水DMF(3mL)溶液中加入在矿油中的60%NaH(36mg,0.90mmol)。将混合物搅拌20分钟,然后加入制备实施例196制备的化合物(200mg,0.46mmol)。在100℃下,将混合物搅拌30分钟,蒸发溶剂,残留物经快速层析纯化,用乙酸乙酯作为洗脱剂,得到无色固体(150mg,63%)。LCMS:M+=523。
步骤B:
在0℃、N2下,将TFA(1.5mL)加入到制备实施例196制备的化合物(140mg,0.27mmol)在无水二氯甲烷(5mL)中的搅拌的溶液中。在0℃下,将混合物搅拌10分钟,然后在25℃下搅拌2小时。倒入碳酸钠(10g)中,用二氯甲烷提取(3×50mL),过滤。蒸发溶剂,残留物经快速层析纯化,用40∶1乙酸乙酯∶甲醇作为洗脱剂,得到白色固体(32mg,28%)。LCMS:M+=423,Mp=218-220℃。
实施例430
其中:R2=H或Cl
将3-溴-7-氯-5-(2-氯苯基)-吡唑并[1,5-a]嘧啶(1当量)(根据制备实施例129中所述制备)或3-溴-7-氯-5-苯基吡唑并[1,5-a]嘧啶(1当量)(根据制备实施例127中所述制备)、R1NH2(1.2当量)和二异丙基乙胺(2当量)溶解于无水1,4-二氧六环中,将混合物在75℃下加热,时间见表97中所示。将溶液蒸发至干,按表97中所述,将残留物经硅胶柱层析,得到标题化合物。
采用适当的反应物,按以上所述基本相同的方法,制备实施例431-438的产物。表35中指出反应条件中的各种变量。
表35
以下给出所述化合物的其它物理数据:
实施例431:反应物:3-溴-7-氯-5-(2-氯苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶(110mg,0.318mmol)(根据制备实施例129中所述制备);3-(氨基甲基)哌啶-1-甲酰胺(60mg,0.382mmol)(根据以上制备实施例241中所述制备);二异丙基乙胺(0.111mL,0.636mmol);无水1,4-二氧六环(2.5mL)。物理性质:
HRFABMS:m/z 463.0628(MH+).计算值C19H21N6OBrCl:m/z463.0649:δH(CDCl3)1.38(1H,m,CH2),1.52(1H,m,CH2),1.73(1H,m,CH),1.93(1H,m,CH2),2.02(1H,m,CH2),2.98(1H,m,CH2),3.06(1H,m,CH2),3.37(2H,m,CH2),3.58(1H,m,CH2),3.82(1H,m,CH2),4.87(2H,bm,CONH2),6.28(1H,s,H6),7.02(1H,m,NH),7.36(2H,m,Ar-H),7.45(1H,m,Ar-H),7.68(1H,m,Ar-H)和8.00ppm(1H,s,H2);δC(CDCl3)CH2:23.7,28.1,44.6,45.5,47.2;CH:35.2,87.4,127.2,130.1,130.3,131.6,143.9:C:83.1,132.1,138.6,145.5,146.5,158.0,158.4.
实施例432:反应物:3-溴-7-氯-5-苯基吡唑并[1,5-a]嘧啶(500mg,1.62mmol)(根据制备实施例127中所述制备);3-(氨基甲基)哌啶-1-甲酰胺(306mg,1.944mmol)(根据以上制备实施例241中所述制备);二异丙基乙胺(0.566mL,3.24mmol);无水1,4-二氧六环(13mL)。物理性质:
HRFABMS:m/z 429.1031(MH+).计算值C19H22N6OBr:m/z 429.1038;δH(CDCl3)1.44(1H,m,CH2),1.59(1H,m,CH2),1.79(1H,m,CH),2.01(1H,m,CH2),2.08(1H,m,CH2),3.03(1H,m,CH2),3.13(1H,m,CH2),3.39(1H,m,CH2),3.47(1H,m,CH2),3.63(1H,m,CH2),3.90(1H,m,CH2),4.88(2H,bm,CONH2),6.40(1H,s,H6),6.90(1H,m,NH),7.53(2H,m,Ar-H),8.02(1H,s,H2)和8.12(1H,m,Ar-H);δC(CDCl3)CH2:23.7,28.2,44.7,45.5,47.3;CH:35.2,82.9,127.5,127.5,128.7,128.7,130.0,143.9;C:83.0,138.5,145.8,147.1,158.3,158.5.
实施例433:反应物:3-溴-7-氯-5-(2-氯苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶(347mg,1.01mmol)(根据制备实施例129中所述制备);3-(氨基乙基)哌啶-1-甲酰胺(208mg,1.21mmol)(根据以上制备实施例242中所述制备);二异丙基乙胺(0.393mL,2.02mmol);无水1,4-二氧六环(9mL)。物理性质:
δH(CDCl3)1.24(1H,m,CH2),1.55(1H,m,CH),1.72(4H,m,CH2),1.93(1H,m,CH2),2.69(1H,m,CH2),2.94(1H,m,CH2),3.55(2H,m,CH2),3.73(1H,m,CH2),3.98(1H,m,CH2),4.83(2H,bm,CONH2),6.55(1H,s,H6),6.78(1H,m,NH),7.41(2H,m,Ar-H),7.50(1H,m,Ar-H),7.75(1H,m,Ar-H)和8.04ppm(1H,s,H2);δC(CDCl3)CH2:24.6,30.7,32.6,39.9,45.3,49.3;CH:33.3,87.5,127.4,130.1,130.2,131.6,143.8;C:83.2,132.1,138.8,145.7,146.2,158.1,158.1.
实施例434:反应物:3-溴-7-氯-5-(2-氯苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶(275mg,0.803mmol)(根据制备实施例129中所述制备);4-(氨基乙基)哌啶-1-甲酰胺(165mg,0.963mmol)(根据以上制备实施例243中所述制备);二异丙基乙胺(0.311mL,0.963mmol);无水1,4-二氧六环(7.2mL)。物理性质:
δH(d6-DMSO)1.00(2H,m,CH2),1.50(1H,m,CH),1.59(2H,m,CH2),1.67(2H,m,CH2),2.60(2H,m,CH2),3.48(2H,m,CH2),3.70(2H,m,CH2),5.84(2H,bs,CONH2),6.43(1H,s,H6),7.50(2H,m,Ar-H),7.62(2H,m,Ar-H),8.30(1H,s,H2)和8.36ppm(1H,m,NH);δC(d6-DMSO)CH2:31.5,31.5,34.8,43.5,43.5,43.5;CH:32.8,86.8,127.1,129.7,130.3,131.0,143.3;CH:81.3,131.0,138.7,145.1,146.4,157.3,157.8.
实施例435:反应物:3-溴-7-氯-5-苯基吡唑并[1,5-a]嘧啶(174mg,0.507mmol)(根据制备实施例129中所述制备)和3-(氨基甲基)-1-甲基哌啶(65mg,0.507mmol)(根据以上制备实施例244中所述制备);二异丙基乙胺(0.178mL,1.014mmol);无水1,4-二氧六环(2.5mL)。物理性质:
HRFABMS:m/z 434.0742(MH+).计算值C19H22NsBrCl:m/z 434.0747;δH(CDCl3)1.18(1H,m,CH2),1.68(1H,m,CH2),1.80(1H,m,CH2),1.87(1H,m,CH2),1.96(1H,m,CH),2.14(2H,m,CH2),2.32(3H,s,NCH3),2.75(1H,m,CH2),2.29(1H,m,CH2),3.42(2H,m,-NHCH2CH),6.36(1H,s,H6),6.64(1H.bm,NH),7.41(2H,m,Ar-H),7.51(1H,m,Ar-H),7.74(1H,m,Ar-H)和8.06ppm(1H,s,H2);δC(CDCl3)CH3:46.6;CH2:24.4,27.9,46.1,56.1,59.6;CH:36.0,87.4,127.1,130.1,130.2,131.6,143.8;C:83.2,132.1,138.9,145.6,146.4,158.2.
实施例436:反应物:3-溴-7-氯-5-苯基吡唑并[1,5-a]嘧啶(111.4mg,0.325mmol)(根据制备实施例129中所述制备);4-(氨基甲基)-1-甲基哌啶(50mg,0.39mmol)(根据以上制备实施例245中所述制备);二异丙基乙胺(0.1135mL,0.65mmol);无水1,4-二氧六环(1.5mL)。物理数据:
HRFABMS:m/z434.0735(MH+).计算值C19H22N5BrCl:m/z 434.0747;δH(CDCl3)1.42(2H,m,CH2),1.72(1H,m,CH),1.82(2H,m,CH2),1.93(2H,m,CH2),2.20(3H,s,NCH3),2.89(2H,m,CH2),3.34(2H,m,-NHCH2CH),6.31(1H,s,H6),6.46(1H,m,NH),7.36(2H,m,Ar-H),7.46(1H,m,Ar-H),7.70(1H,m,Ar-H)和8.00ppm(1H,s,H2);δC(CDCl3)CH3:46.4;CH2:30.2,30.2,48.0,55.3,55.3;CH:35.4,87.5,127.2,130.2,130.2,131.6,143.8;C:83.3,132.2,138.9,145.7,146.4,158.1.
实施例437:反应物:3-溴-7-氯-5-苯基吡唑并[1,5-a]嘧啶(191mg,0.557mmol)(根据制备实施例129中所述制备);3-(氨基甲基)苄腈(88.3mg,0.668mmol)(根据以上制备实施例246中所述制备);二异丙基乙胺(0.192mL,1.114mmol);无水1,4-二氧六环(4.5mL)。物理数据:
HRFABMS:m/z438.0125(MH+).计算值C19H12N5BrCl:m/z 438.0121;δH(CDCl3)4.76(2H,d,-CH2NH-),6.32(1H,s,H6),7.00(1H,m,-CH2NH-),7.40(2H,m,Ar-H),7.46(1H,m,Ar-H),7.55(1H,m,Ar-H),7.67(2H,m,Ar-H),7.71(1H,m,Ar-H),7.75(1H,mAr-H)和8.10ppm(1H,s,H2);δC(CDCl3)CH2:45.5;CH:88.2,127.2,130.0,130.2,130.4,130.6,131.4,131.6,131.9,144.1;C:83.8,113.4,118.3,132.0,137.8,138.3,145.6,145.9,158.0.
实施例438:反应物:3-溴-7-氯-5-苯基吡唑并[1,5-a]嘧啶(233.5mg,0.681mmol)(根据制备实施例129中所述制备);4-(氨基甲基)苄腈(108mg,0.817mmol)(根据以上制备实施例247中所述制备);二异丙基乙胺(0.235mL,1.362mmol);无水1,4-二氧六环(5.3mL)。物理数据:
HRFABMS:m/z438.0117(MH+)计算值C20H14N5BrCl:m/z 438.0121;δH(CDCl3)4.80(2H,d,CH2),6.30(1H,s,H6),7.01(1H,m,NH),7.40(2H,m,Ar-H),7.47(1H,m,Ar-H),7.70(2H,m,Ar-H),7.72(2H,m,Ar-H),7.80(1H,m,Ar-H)和8.10ppm(1H,s,H2);δC(CDCl3)CH2:45.8;CH:88.2,127.2,127.7,127.7,130.2,130.4,131.6,132.9,132.9,144.1;C:83.8,112.2,118.4,132.0,138.2,141.5,145.5,146.0,158.0.
实施例439:
在一GeneVac Technologies旋转反应管中,将3-溴-7-氯-5-(2-氯苯基)-吡唑并[1,5-a]嘧啶(50mg,0.146mmol)(根据制备实施例129中所述制备)溶解于无水1,4-二氧六环(5mL)中。向各管中加入PS-二异丙基乙胺树脂(161mg,0.5828mmol)。向各管中加入1M新制的适当胺R1NH2的无水1,4-二氧六环(0.2185mL,0.2185mmol)溶液,将各管密封,在反应分区板中磁力搅拌下,加热至70℃下78小时。将各管过滤,将树脂用无水1,4-二氧六环和二氯甲烷顺次洗涤。将各管合并的各滤液蒸发至干,将残留物各自再溶解于无水1,4-二氧六环(5mL)中,然后置于GeneVac反应管中。向各管中加入PS-异氰酸酯树脂(594mg,0.8742mmol)和PS-三甲醇氨基甲烷(trisamine)树脂(129mg,0.4371mmol),在反应分区板中,25℃下将各管搅拌20小时。滤出树脂,用无水1,4-二氧六环和二氯甲烷洗涤。将各管中的滤液蒸发至干,将残留物各自经硅胶柱层析纯化,所用柱体积和洗脱剂在表36中给出,得到所述标题化合物。
表36
以下给出所述化合物的其它物理数据:
实施例440:物理性质:
HRFABMS:m/z 428.0272(MH+).计算值C19H16N5BrCl:m/z 428.0278;δH(CDCl3)3.28(2H,dd,C5H4NCH2CH2NH-),3.94(2H,ddd,C5H4NCH2CH2NH-),6.40(1H,s,H6),7.22-7.29(3H,m,Ar-H),7.38-7.44(2H,m,Ar-H),7.51(1H,m,Ar-H),7.68(1H,ddd,Ar-H),7.73(1H,Ar-H),8.18(1H,s,H2)和8.68ppm(1H,NH);δC(CDCl3)CH2:36.4,41.5;CH:87.3,122.1,123.6,127.1,130.1,130.1,131.6,137.0,143.8,149.5;C:83.1,132.1,138.9,145.7,146.3,158.0,158.1.
实施例441:物理性质:
HRFABMS:m/z 428.0272(MH+).计算值C19H16N5BrCl:m/z 428.0278;δH(CDCl3)3.12(2H,dd,C5H4NCH2CH2NH-),3.77(2H,ddd,C5H4NCH2CH2NH-),6.40(1H,s,H6),6.59(1H,m,Ar-H),7.34(1H,bm,Ar-H),7.39-7.45(2H,m,Ar-H),7.52(1H,m,Ar-H),7.62(1H,m,Ar-H),7.75(1H,m,Ar-H),8.05(1H,s,H2)和8.63ppm(1H,m,NH);δC(CDCl3)CH2:32.7,43.1;CH:87.5,127.2,130.2,130.3,131.6,136.4,142.9,148.3,149.8;C:83.5,132.0,138.6.145.6.145.9,158.1.
实施例442:物理性质:
HRFABMS:m/z 428.0275(MH+).计算值C19H16N5BrCl:m/z 428.0278;δH(CDCl3)3.13(2H,dd,C5H4NCH2CH2NH-),3.80(2H,ddd,C5H4NCH2CH2NH-),6.42(1H,s,H6),6.53(1H,m,Ar-H),7.23(2H,m,Ar-H),7.40-7.46(2H,m,Ar-H),7.62(1H,m,Ar-H),7.76(1H,m,Ar-H),8.07(1H,s,H2)和8.63ppm(1H,m,NH);δC(CDCl3)CH2:34.7,42.5;CH:87.4,124.5,124.5,127.2,130.2,130.3,131.6,144.0,150.2,150.2;C:83.5,132.0,138.6,145.6,145.9,146.6,158.1.
实施例443:物理性质:
HRFABMS:m/z 463.1003(MH+).计算值C20H25N6BrCl:m/z 463.1013;δH(CDCl3)1.98(2H,m,=NCH2CH2CH2NH-),2.43(3H,s,NCH3),2.67(2H,m,=NCH2CH2CH2NH-),2.70(8H,哌嗪CH2),3.58(2H,m,=NCH2CH2CH2NH-),6.32(1H,s,H6),7.37-7.43(2H,m,Ar-H),7.50(1H,m,Ar-H),7.73(1H,m,Ar-H),8.06(1H,s,H2)和8.60ppm(1H,m,NH);δC(CDCl3)CH3:46.1;CH2:24.1,42.8,53.3,54.6,54.6,57.5,57.5;CH:87.1,127.0,130.0,130.1,131.5,143.4;C:82.7,132.1,139.2,145.7,146.7,158.0.
实施例444:物理性质:
HRFABMS:m/z 434.0742(MH+).计算值C19H22N5BrCl:m/z 434.0747;δH(CDCl3)1.72(1H,m,CH/CH2),1.78-1.90(2H,m,CH/CH2),2.02(3H,m,CH/CH2),2.50(1H,m,CH/CH2),2.45(3H,s,NCH3),2.51(1H,m,CH/CH2),3.23(1H,m,CH/CH2),3.54(1H,m,CH/CH2),3.60(1H,m,CH/CH2),6.32(1H,s,H6),7.38-7.44(2H,m,Ar-H),7.51(1H,m,Ar-H),7.75(1H,m,Ar-H),7.96(1H,bm,NH)和8.05ppm(1H,s,H2);δC(CDCl3)CH3:40.7;CH2:22.7,29.3,30.1,39.4,57.0;CH:64.2,87.1,127.1,130.0,130.1,131.6,143.8;C:82.8,132.1,139.1,145.7,146.4,158.0.
实施例445:物理性质:
HRFABMS:m/z 448.0910(MH+).计算值C20H24N5BrCl:m/z 448.0904;δH(CDCl3)1.90(4H,m,CH2),2.00(4H,m,CH2),2.84(2H,m,CH2),2.95(4H,m,CH2),3.51(2H,m,CH2),6.32(1H,s,H6),7.05(1H,bm,NH),7.37-7.43(2H,m,Ar-H),7.50(1H,m,Ar-H),7.73(1H,m,Ar-H)和8.04ppm(1H,s,H2);δC(CDCl3)CH2:23.4,23.4,24,8,26.4,41.8,53.9,53.9,55.2;CH:87.3,127.1,130.1,130.2,131.6,143.7;C:83.0,132.0,138.9,145.7,146.3,158.1.
实施例446:物理性质:
HRFABMS:m/z 448.0548(MH+).计算值C19H20N5OBrCl:m/z 448.0540;δH(CDCl3)1.94(2H,m,CH2),2.09(2H,m,CH2),2.49(2H,m,CH2),3.45(2H,m,CH2),3.51(4H,m,CH2),6.32(1H,s,H6),7.37-7.44(3H,m,Ar-H/NH),7.51(1H,m,Ar-H),7.75(1H,m,Ar-H)和8.10ppm(1H,s,H2);δC(CDCl3)CH2:18,0,26.3,30.8,39.2,39.9,47.5;CH:87.0,127.1,130.1,130.1,131.6,144.1;C:82.9,132.1,138.9,145.6,146.2,157.9,176.2.
实施例447:物理性质:
HRFABMS:m/z 436.0532(MH+).计算值C18H20N5OBrCl:m/z 436.0540;δH(CDCl3)2.60(4H,bm,-N(CH2CH2)2O),2.83(2H,m,=NCH2CH2NH-),3.57(2H,m,=NCH2CH2NH-),3.83(4H,m,-N(CH2CH2)2O),6.37(1H,s,H6),6.99(1H,bm,NH),7.38-7.45(2H,m,Ar-H),7.51(1H,m,Ar-H),7.75(1H,m,Ar-H)和8.09ppm(1H,s,H2);δC(CDCl3)CH2:38.2,53.3,53.3,56.2,66.9,66.9;CH:87.6,127.1,130.1,130.2,131.6,143.9;C;83.1,132.1,138.9,145.7,146.2,158.1.
实施例448:物理性质:
HRFABMS:m/z 450.0688(MH+).计算值C19H22N5OBrCl:m/z 450.0696;δH(CDCl3)1.98(2H,m,=NCH2CH2CH2NH-),2.58(4H,m,-N(CH2CH2)2O),2.67(2H,m,=NCH2CH2CH2NH-),3.59(2H,m,=NCH2CH2CH2NH-),3.94(4H,m,-N(CH2CH2)2O),6.31(1H,s,H6),7.37-7.44(2H,Ar-H),7.51(1H,m,Ar-H),7,78(1H,m,Ar-H),8.08(1H,s,H2)和8.60ppm(1H,bm,NH);δC(CDCl3)CH2:23.7,42.7,52.9,52.9,58.0,66.6,66.6;CH:87.0,127.1,130.0,130.1,131.5,143.6;C:82.8,132.1,139.1,145.7,146.7,158.0.
实施例449:物理性质:
HRFABMS:m/z 381.0114(MH+).计算值C15H15N4OBrCl:m/z 381.0118;δH(CDCl3)1.39(3H,d,CHCH3),2.76(1H,bm,-OH),3.71(1H,m,=CHCH2OH),3.81(1H,m,=CHCH2OH),3.88(1H,m,=CHCH2OH),6.38(1H,s,H6),7.38(2H,m,Ar-H),7.48(1H,m,Ar-H),7.68(1H,m,Ar-H)和8.02ppm(1H,s,H2);δC(CDCl3)CH3:16.9;CH2:65.0;CH:50.0,88.0,127.1,130.1,130.3,131.4,143.8;C:83.0,132.0,138.5,145.6,146.0,158.2.
实施例450
在一GeneVac Technologies旋转反应管中,将3-溴-7-氯-5-(2-氯苯基)-吡唑并[1,5-a]嘧啶(50mg,0.146mmol)(根据制备实施例129中所述制备)溶解于无水1,4-二氧六环(5mL)中。向各管中加入PS-二异丙基乙胺树脂(161mg,0.5828mmol)。向各管中加入新制的适当胺R1NH2(0.219mmol)的无水1,4-二氧六环(0.3mL)溶液,但实施例99-5例外,将其中的胺溶解于10%甲醇的1,4-二氧六环(0.3mL)溶液中,将各管密封,在反应板中磁力搅拌下,加热至70℃下74小时。将各管过滤,将树脂用无水1,4-二氧六环和二氯甲烷顺次洗涤。将各管合并的各滤液蒸发至干,将残留物各自再溶解于无水1,4-二氧六环(5mL)中,然后置于GeneVac反应管中。向各管中加入PS-异氰酸酯树脂(594mg,0.8742mmol)和PS-三甲醇氨基甲烷树脂(129mg,0.4371mmol),在反应板中,25℃下将各管搅拌20小时。过滤树脂,用无水1,4-二氧六环和二氯甲烷洗涤。将各管中的滤液蒸发至干,将残留物各自经硅胶柱层析,所用柱体积和洗脱剂在表37中给出,得到所述标题化合物。
表37
以下给出所述化合物的其它物理数据:
实施例451:物理性质:HRFABMS:m/z 381.0115(MH+).计算值C15H15N4OBrCl:m/z 381.0118;[α]D 25℃+1.4°(c=0.25,MeOH);δH(CDCl3)1.44(3H,d,-CHCH3),3.773.89(1H,dd,CHCH2OH),(1H,dd,CHCH2OH),3.94(1H,m,CHCH2OH),6.41(1H,s,H6),6.58(1H,d,NH),7.41(2H,m,Ar-H),7.51(1H,m,Ar-H),7.74(1H,m,Ar-H)和8.04ppm(1H,s,H2);δC(CDCl3)CH3:17.1;CH2:65.5;CH:49.9,88.0,127.1,130.1,130.2,131.6,143.8;C:83.2,132.1,138.7,145.6,145.8,158.1.
实施例452:物理性质:HRFABMS:m/z 381.0115(MH+).计算值C15H15N4OBrCl:m/z 381.0118;[α]D 25℃+6.5°(c=0.32,MeOH);δH(CDCl3)1.44(3H,d,-CHCH3),3.78(1H,dd,CHCH2OH),3.89(1H,dd,CHCH2OH),3.96(1H,m,CHCH2OH),6.41(1H,s,H6),6.58(1H,d,NH),7.41(2H,m,Ar-H),7.51(1H,m,Ar-H),7.75(1H,m,Ar-H)和8.04ppm(1H,s,H2);δC(CDCl3)CH3:17.1;CH2:65.5;CH:49.9,88.0,127.1,130.1,130.3,131.6,143.8;C:83.2,132.1,138.6,145.6,145.8,158.1.
实施例453:物理性质:HRFABMS:m/z 381.0115(MH+).计算值C15H15N4OBrCl:m/z 381.0118;[α]D 25℃+9.4°(c=0.27,MeOH);δH(CDCl3)1.33(3H,d,CH3),2.25(1H,bs,OH),3.37(1H,dd,CH2),3.51(1H,m,CH2),4.16(1H,m,CHOH),6.35(1H,s,H6),6.93(1H,m,NH),7.40(2H,m,Ar-H),7.50(1H,m,Ar-H),7.70(1H,m,Ar-H)和8.04ppm(1H,s,H2);δC(CDCl3)CH3:20.8;CH2:49.2;CH:65.7,87.8,127.1,130.1,130.2,131.2,143.9;C:83.1,132.1,138.5,145.6,146.6,158.3.
实施例454:物理性质:HRFABMS:m/z 381.0112(MH+).计算值C15H15N4OBrCl:m/z381.0118;[α]D 25℃-3.2°(c=0.29,MeOH);δH(CDCl3)1.32(3H,d,CH3),2.48(1H,bs,OH),3.35(1H,dd,CH2),3.49(1H,m,CH2),4.15(1H,m,CHOH),6.34(1H,s,H6),6.93(1H,m,NH),7.39(2H,m,Ar-H),7.49(1H,m,Ar-H),7.68(1H,m,Ar-H)和8.03ppm(1H,s,H2);δC(CDCl3)CH3:20.8;CH2:49.2;CH:65.7,87.7,127.1,130.1,130.3,131.4,143.9;C:83.0,132.0,138.6,145.6,146.6,158.3.
实施例455:物理性质:HRFABMS:m/z 397.0054(MH+).计算值C15H15N4O2BrCl:m/z 397.0067;[α]D 25℃-9.5°(c=0.28,MeOH);δH(CDCl3)3.18(2H,bs,OH),3.47(1H,dd,CH2),3.58(1H,dd,CH2),3.63(1H,dd,CH2OH),3.70(1H,dd,CH2OH),3.98(1H,m,CH),6.35(1H,s,H6),7.10(1H,m,NH),7.37(2H,m,Ar-H),7.46(1H,m,Ar-H),7.64(1H,m,Ar-H)和8.01ppm(1H,s,H2);δC(CDCl3)CH2:44.7,64.0;CH:69.7,87.7,127.0,130.1,130.3,131.3,143.9;C:82.9,132.0,138.4,145.4,146.7,158.3.
实施例456:根据上述基本相同的方法,可制备该对映异构体。
实施例457:物理性质:HRFABMS:m/z 395.0260(MH+).计算值C16H17N4OBrCl:m/z 395.0274;[α]D 25℃-34.3°(c=0.28,MeOH);δH(CDCl3)1.08(3H,dd,CH3),1.78(1H,m,CH2),1.86(1H,m,CH2),2.35(1H,bs,CH2OH),3.71(1H,m,CHNH),3.81(1H,dd,CH2OH),3.90(1H,dd,CH2OH),6.42(1H,s,H6),6.53(1H,m,NH),7.41(2H,m,Ar-H),7.51(1H,Ar-H),7.75(1H,m,Ar-H)和8.04ppm(1H,s,H2);δC(CDCl3)CH3:10.5;CH2:24.5,63.7;CH:55.9,88.0,127.1,130.1,130.2,131.6,143.8;C:83.2,132.1,138.6,145.6,146.3,158.1.
实施例458:物理性质:HRFABMS:m/z 395.0274(MH+).计算值C16H17N4OBrCl:m/z 395.0274;[α]D 25℃+27.5°(c=0.25,MeOH);δH(CDCl3)1.05(3H,dd,CH3),1.76(1H,m,CH2),1.85(1H,m,CH2),2.28(1H,bs,CH2OH),3.67(1H,m,CHNH),3.77(1H,dd,CH2OH),3.84(1H,dd,CH2OH),6.49(1H,s,H6),6.66(1H,m,NH),7.39(2H,m,Ar-H),7.49(1H,Ar-H),7.71(1H,m,Ar-H)和8.04ppm(1H,s,H2);δC(CDCl3)CH3:10.5;CH2:24.3,63.3;CH:56.1,88.0,127.1,130.1,130.3,131.5,143.8;C:83.0,132.1,138.6,145.6,146.3,158.2.
实施例459:物理性质:HRFABMS:m/z 395.0264(MH+).计算值C16H17N4OBrCl:m/z 395.0274;δH(CDCl3)1.77(2H,m,-NHCH2CH2CH2CH2OH),1.90(1H,bm,-NHCH2CH2CH2CH2OH),1.93(2H,m,-NHCH2CH2CH2CH2OH),3.54(2H,m,-NHCH2CH2CH2CH2OH),3.77(2H,m,-NHCH2CH2CH2CH2OH),6.37(1H,s,H6),6.72(1H,m,-NHCH2CH2CH2CH2OH),7.41(2H,m,Ar-H),7.51(1H,m,Ar-H),7.75(1H,m,Ar-H)和8.06ppm(1H,s,H2);δC(CDCl3)CH2:25.7,29.7,42.2,62.2;CH:87.4,127.1,130.1,130.2,131.6,143.8;C:83.1,132.1,138.8,145.6,146.3,158.1.
实施例460:
4-{[3-溴-5-(2-氯苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-基氨基]甲基}哌啶-1-甲酰胺:
A:4-{[3-溴-5-(2-氯苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-基氨基]甲基}哌啶-1-甲酸叔丁基酯:
将3-溴-7-氯-5-(2-氯苯基)-吡唑并[1,5-a]嘧啶(300mg,0.875mmol)(根据制备实施例129中所述制备)溶解于无水1,4-二氧六环(6.8mL)中。加入4-(氨基甲基)哌啶-1-甲酸叔丁基酯(225mg,1.05mmol)和二异丙基乙胺(0.3055mL,1.75mmol),将混合物加热至75℃下24小时。将溶液蒸发至干,残留物经硅胶柱层析(15×5cm),用二氯甲烷作为洗脱剂,得到4-{[3-溴-5-(2-氯苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-基氨基]甲基}哌啶-1-甲酸叔丁基酯(461.2mg,100%)。
FABMS:m/z 520.1(MH+);HRFABMS:m/z 520.1111(MH+).计算值C23H28N5O2BrCl:m/z 520.1115;δH(CDCl3)1.30(2H,m,CH2),1.51(9H,s,-COOC(CH3)3),1.85(2H,d,CH2),1.95(1H,m,CH),2.76(2H,m,CH2),3.40(2H,m,CH2),6.37(1H,s,H6),6.55(1H,m,NH),7.42(2H,m,Ar-H),7.52(1H,m,Ar-H),7.76(1H,m,Ar-H)和8.07ppm(1H,s,H2);δC(CDCl3)CH3:28.5,28.5,28.5;CH2:29.1,29.1,43.5,43.5,47.9;CH:36.3,87.5,127.2,130.2,130.3,131.6,143.9;C:79.7,83.3,132.1,138.6,145.4,146.3,154.7,158.1.
B:[3-溴-5-(2-氯苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-基]哌啶-4-基甲胺:
将4-{[3-溴-5-(2-氯苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-基氨基]甲基}哌啶-1-甲酸叔丁基酯(441mg,0.847mmol)(根据实施例460步骤A中所述制备)溶解于甲醇(4.5mL)中,加入10%(v/v)浓硫酸的1,4-二氧六环(11.46mL)溶液。将混合物在25℃下搅拌0.5小时。按制备实施例241步骤B中所述对产物进行处理,经硅胶柱层析(15×5cm),用8%(10%浓氢氧化铵的甲醇溶液)-二氯甲烷作为洗脱剂,得到[3-溴-5-(2-氯苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-基]哌啶-4-基甲胺(314.4mg,88%):
FABMS:m/z 420.0(MH+);HRFABMS:m/z 420.0585(MH+).计算值C18H20N5BrCl:m/z 420.0591;δH(CDCl3)1.34(2H,m,CH2),1.86(2H,m,CH2),1.91(1H,m,CH),2.10(1H,bm,哌啶-NH),2.67(2H,m,CH2),3.18(2H,m,CH2),3.38(2H,m,CH2),6.37(1H,s,H6),6.53(1H,m,NH),7.42(2H,m,Ar-H),7.52(1H,m,Ar-H),7.76(1H,m,Ar-H)和8.06ppm(1H,s Ar-H);δC(CDCl3)CH2:31.2,31.2,46.2,46.2,48.4;CH:36.4,89.5,127.1,130.1,130.5,131.6,143.8;C:83.2,132.1,138.9,145.6,146.4,158.1.
C:4-{[3-溴-5-(2-氯苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-基氨基]甲基}哌啶-1-甲酰胺:
将[3-溴-5-(2-氯苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-基]哌啶-4-基甲胺(57mg,0.136mmol)(根据以上实施例460步骤B中所述制备)溶解于无水二氯甲烷(1.2mL)中,加入三甲基甲硅烷基异氰酸酯(0.091mL,0.679mmol)。将混合物在25℃下搅拌2.5小时。将混合物用二氯甲烷稀释,用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤。将有机层干燥(MgSO4),过滤,蒸发至干。残留物经硅胶柱层析(30×2.5cm),用3%(10%浓氢氧化铵的甲醇溶液)-二氯甲烷作为洗脱剂,得到4-{[3-溴-5-(2-氯苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-基氨基]甲基}哌啶-1-甲酰胺(53.7mg,86%):
HRFABMS:m/z 463.0647(MH+).计算值C19H21N6OBrCl:m/z 463.0649;δH(d6-DMSO)1.09(2H,m,CH2),1.63(2H,m,CH2),1.87(1H,m,CH),2.60(2H,m,CH2),3.53(2H,bm,CONH2),3.91(2H,d,CH2),6.52(1H,s,H6),7.50(2H,m,Ar-H),7.62(2H,m,Ar-H),8.33(1H,s,H2)和8.52ppm(1H,m,NH);δC(d6-DMSO)CH2:30.1,30.1,44.2,44.2,47.7;CH:36.4,88.2,128.1,130.7,131.4,132.1,147.9;C:82.1,132.1,139.4,145.7,147.9,158.1,158.8.
实施例461:
2-{2-[3-溴-5-(2-氯苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-基氨基]乙基}哌啶-1-甲酰胺:
A:2-{2-[3-溴-5-(2-氯苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-基氨基]乙基}哌啶-1-甲酸叔丁基酯:
将3-溴-7-氯-5-(2-氯苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶(400mg,1.166mmol)(根据制备实施例129中所述制备)溶解于无水1,4-二氧六环(5.7mL)中。加入2-氨基乙基哌啶-1-甲酸叔丁基酯(266mg,1.166mmol)和二异丙基乙胺(0.409mL,2.33mmol),将混合物加热至75℃下48小时。再加入另外的二异丙基乙胺(0.204mL,1.166mmol),继续加热总计58小时。将溶液蒸发至干,残留物经硅胶柱层析(15×5cm),顺次用二氯甲烷和3%(10%浓氢氧化铵的甲醇溶液)-二氯甲烷作为洗脱剂,得到2-{[3-溴-5-(2-氯苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-基氨基]乙基}哌啶-1-甲酸叔丁基酯(491.1mg,79%):
FABMS:m/z 534.1(MH+);HRESIMS:m/z 534.12797(MH+).计算值C24H30N5O2BrCl:m/z 534.12714;δH(CDCl3)1.50(1H,m,CH2),1.51(9H,s,COOC(CH3)3),1.57(2H,m,CH2),1.68(2H,m,CH2),1.76(2H,m,CH2),2.24(1H,bm,CH2),2.82/3.40/3.54/4.08/4.51(5H,m,CH/CH2),6.34(1H,s,H6),7.41(2H,m,Ar-H),7.51(1H,m,Ar-H),7.76(1H,m,Ar-H)和8.08ppm(1H,s,H2);δC(CDCl3)CH3:28.5,28.5,28.5;CH2:19.2,25.5,29.2,29.2,39.2,67.1;CH:~47.4,87.1,127.1,130,1,130.1,131.6,143.9;C:80.0,83.0,132.1,138.9,145.7,146.2,158.0.
B:[3-溴-5-(2-氯苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-基]-(2-哌啶-2-基乙基)胺:
将2-{[3-溴-5-(2-氯苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-基氨基]乙基}哌啶-1-甲酸叔丁基酯(465mg,0.869mmol)(根据以上实施例461步骤A中所述制备)溶解于甲醇(4.5mL)中,加入10%(v/v)浓硫酸的1,4-二氧六环(11.76mL)溶液。将混合物在25℃下搅拌1.5小时。按制备实施例241步骤B中所述对产物进行处理,经硅胶柱层析(15×5cm),用3.5%(10%浓氢氧化铵的甲醇溶液)-二氯甲烷作为洗脱剂,得到[3-溴-5-(2-氯苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-基]哌啶-2-基乙基]胺(365.6mg,97%):
FABMS:m/z 434.1(MH+);HRFABMS:m/z 434.0726(MH+).计算值C19H22NsBrCl:m/z 434.0747;δH(CDCl3)1.24(1H,m,CH2),1.41(1H,m,CH2),1.49(1H,m,CH2),1.66(1H,m,CH2),1.73(1H,m,CH2),1.81(1H,m,CH2),1.88(2H,m,CH2),2.68(1H,m,CH2),2.78(1H,m,CH2),3.20(1H,m,CH),3.55(1H,m,CH2),3.60(1H,m,CH2),6.32(1H,s,H6),7.41(2H,m,Ar-H),7.51(1H,m,Ar-H),7.74(1H,m,Ar-H),7.78(1H,m,NH)和8.05ppm(1H,s,H2);δC(CDCl3)CH2:24.7,26.8,33.1,35.2,40.3,47.0;CH;55.7,87.2,127.1,130.0,130.1,131.5,143.8;C:82.9,132.1,139.0,145.7,146.5,158.1.
C:2-{2-[3-溴-5-(2-氯苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-基氨基]乙基}哌啶-1-甲酰胺:
将[3-溴-5-(2-氯苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-基]哌啶-2-基乙基]胺(200mg,0.46mmol)(根据以上实施例461步骤B中所述制备)溶解于无水二氯甲烷(2mL)中,加入三甲基甲硅烷基异氰酸酯(0.31mL,2.3mmol)。将混合物在25℃下搅拌1.25小时。再加入三甲基甲硅烷基异氰酸酯(0.155mL,1.15mmol),继续搅拌总计3小时。将混合物用二氯甲烷稀释,用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤。将有机层干燥(MgSO4),过滤,蒸发至干。残留物经硅胶柱层析(30×2.5cm),用2%(10%浓氢氧化铵的甲醇溶液)-二氯甲烷作为洗脱剂,得到2-{2-[3-溴-5-(2-氯苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-基氨基]乙基}哌啶-1-甲酰胺(106.3mg,48%):
FABMS:m/z 477.0(MH+);HRFABMS:m/z477.0804(MH+).计算值C20H23N6OBrCl:m/z 477.0805;δH(d6-DMSO)1.29(1H,m,CH2),1.52(5H,m,CH2),1.72(1H,m,CH2),2,05(1H,m,CH2),2.51(2H,s,CONH2),2.79(1H,dd,CH),3.31(1H,m,CH2),3.34(1H,m,CH2),3.76(1H,m,CH2),4.30(1H,bm,CH2),6.42(1H,s,H6),7.50(2H,m,Ar-H),7.60(1H,m,Ar-H),7.63(1H,m,Ar-H),8.29(1H,s,H2)和8.38ppm(1H,dd,NH);δC(d6-DMSO)CH2:18.6,25.2,28.2,38.4,38.6,54.8;CH:46.7,86.6,127.1,129.7,130.3,131.0,143.4;C:81.2,131.0,138.7,145.1,146.4,158.2.
实施例462
室温下,向实施例204中制备的化合物(1.11g,2.12mmol)的无水乙腈(20mL)溶液中滴加入TMSI(1.70g,8.52mmol)。10分钟后,真空除去乙腈。将得到的黄色泡沫状物用2N HCl溶液(7mL)处理,然后立即用乙醚洗涤(5x)。用50% NaOH水溶液将所述水溶液的pH调节至10,然后通过用NaCl(s)溶液饱和,再用二氯甲烷提取(5x),分离产物,得到结晶性产物(733mg,89%收率)。MH+=387;m.p.=207.5℃。
实施例463-472:
基本按实施例462中提出的相同方法,仅用表38第2列中所示的化合物代替,制备表38第3列中所示的化合物。
表38
实施例473
步骤A:
将所述磺酸(560mg,1.17mmol)在5mL无水DMF中的溶液冷却至0℃,加入SOCl2(278mg,2.34mmol)。将反应混合物升至室温,搅拌过夜。次日,将内容物倒入冰上,小心调解pH至8。将产物提取至乙酸乙酯中,干燥(Na2SO4),除去溶剂,得到240mg(41%)的粗品磺酰氯,不需进一步纯化,直接用于下一步中。
1H NMR(CDCl3)δ8.20-8.10(m,1H),8.10-7.95(m,3H),7.65(d,2H),7.45-7.35(m,1H),7.35-7.20(m,1H),7.15-7.05(m,1H),6.95(t,1H),4.85(d,2H).
步骤B:
室温下,将实施例473步骤A制备的化合物(120mg,0.24mmol)在10mL THF中的溶液用2mL 1M MeNH2(2.00mmol)的THF溶液处理过夜。除去溶剂,残留物经层析(硅胶,己烷∶乙酸乙酯(4∶1→1∶1))纯化,得到56mg(48%)磺酰胺。
1H NMR(DMSO-d6)δ9.05(t,J=9Hz,1H),8.35(s,1H),7.90(t,J=7.5Hz,1H),7.75(d,J=9Hz,2H),7.62(d,J=9Hz,2H),7.55-7.46(m,1H),7.45-7.38(m,1H),7.38-7.25(m,1H),6.50(s,1H),4.80(d,2H),3.30(s,3H)LCMS:MH+=492.1
实施例474:
基本按实施例473中提出的相同方法,仅用二甲胺代替,制备上述化合物。1H NMR(CDCl3)δ8.14(t,J=9Hz,1H),8.00(s,1H),7.76(d,J=9Hz,2H),7.54(d,J=9Hz,2H),7.34-7.44(m,1H),7.26(t,J=9Hz,1H),7.14-7.04(m,1H),6.93(t,J=6Hz,1H),6.45(s,1H),4.75(d,2H),2.70(s,6H)
LCMS:MH+=504.2
实施例475
25℃下,将实施例129中制备的化合物(300mg,0.66mmol)、NaOH(5g)、CH3OH-H2O(100mL,90∶10)的混合物搅拌约15小时。通过TLC检查水解过程。将反应混合物浓缩以除去甲醇。将浓缩液用50mL水稀释,用乙醚提取以除去任何未反应的酯。将如此获得的水溶液用3NHCl中和至pH 4,得到游离酸,过滤,用水重复洗涤。将该酸真空干燥(270mg,93%),使用时无需进一步纯化。
实施例476-479:
基本按实施例475中提出的相同方法,仅用表39第2列中的化合物代替,制备表39第3列中的化合物。
表39
以下给出所选实施例的其它数据:
实施例476:
1H NMR(CDCl3)δ8.15(m,2H),8.0(m,1H),7.6(m,1H),7.3(m,2H),6.6(s,1H),4.2(d,2H).
实施例477:
1H NMR(CDCl3)δ8.15(dt,1H),8.0(s,1H),7.4(m,1H),7.25(dd,1H),7.15(dd,1H),7.0(t,1H),6.5(s,1H),3.8(dt,2H),2.6(t,2H).
实施例479:
1H NMR(CDCl3)δ8.15(dt,1H),8.0(s,1H),7.4(m,1H),7.25(dd,1H),7.15(dd,1H),6.8(t,1H),3.5(dt,2H),2.4(t,2H),1.8(m,4H).
实施例480:
25℃下,将实施例475中的酸(85mg,0.193mmol)和三乙胺(20mg,0.193mmol)在THF(20mL)中的混合物搅拌15分钟。向该反应混合物中加入氯甲酸异丁基酯(Isobutyryl chloroformate)(28mg,0.205mmol),搅拌10分钟,然后加入NH4OH溶液(0.5mL)。将反应混合物搅拌1小时,浓缩至干。将该干燥物质经柱层析纯化。
实施例481-509:
基本按实施例480中提出的相同方法,仅用表40第2列中所示的羧酸和表40第3列中所示的胺代替,制备表40第4列中所示的化合物。
表40
以下给出所选实施例的其它数据:
实施例481:1H NMR(CDCl3)δ8.15(dt,1H),8.0(s,1H),7.7(d,2H),7.4(s,1H),7.35(d,2H),7.25(dd,1H),7.1(dd,1H),6.95(t,1H),6.5(s,1H),6.25(bs,1H),4.7(d,2H),3.0(d,3H).
实施例482:1H NMR(CDCl3)δ8.15(dt,1H),8.0(s,1H),7.45-7.35(m,4H),7.25(d,2H),7.15(dd,1H),6.7(t,1H),6.5(s,1H),4.7(d,2H),3.1(s,3H),3.0(s,3H).
实施例483:1H NMR(CDCl3)δ8.15(dt,1H),8.0(s,1H),7.8(bs,1H),7.7(d,1H),7.5-7.3(m,3H),7.25(d,1H),7.15(dd,1H),6.75(t,1H),6.5(s,1H),6.2(bs,1H),4.7(d,2H),3.0(d,3H).
实施例484:1H NMR(CDCl3)δ8.15(dt,1H),8.0(s,1H),7.7(d,2H),7.4(d,2H),7.35(m,1H),7.25(dd,1H),7.15(dd,1H),6.8(t,1H),6.5(s,1H),6.D bs,1H),4.7(d,2H),4.25(m,1H),1.2(d,6H).
实施例485:1H NMR(CDCl3)δ8.15(dt,1H),8.0(s,1H),7.7(d,2H),7.4(d,2H),7.35(s,1H),7.25(dd,1H),7.1(dd,1H),6.9(t,1H),6.5(s,1H),6.3(t,1H),4.7(d,2H),2.9(m,1H),0.8(bt,2H),0.6(bt,2H).
实施例486:1H NMR(CDCl3)δ8.15(dt,1H),8.0(s,1H),7.8(d,2H),7.4(d,2H),7.35(d,1H),7.25(dd,1H),7.1(dd,1H),6.9(t,1H),6.5(s,1H),6.2(t,1H),4.7(d,2H),3.3(dd,2H),1.05(m,1H),0.5(m,2H),0.25(m,2H).
实施例487:1H NMR(CDCl3)δ8.15(dt,1H),8.0(s,1H),7.7(d,2H),7.4(d,2H),7.35(m,1H),7.25(dd,1H),7.15(dd,1H),6.85(t,1H),6.5(s,1H),6.2(bs,1H),4.7(d,2H),4.6(m,1H),2.4(m,2H),1.95(m,1H),1.75(m,2H).
实施例488:1H NMR(CDCl3)δ8.5(t,1H),8.15(dt,1H),8.0(s,1H),7.7(d,2H),7.4(d,2H),7.35(m,1H),7.25(dd,1H),7.15(dd,1H),6.8(t,1H),6.5(s,1H),5.9(bs,1H),4.7(d,2H),1.4(s,9H).
实施例489:1H NMR(CDCl3)δ8.15(dt,1H),8.0(s,1H),7.7(d,2H),7.4(d,2H),7.35(m,1H),7.25(dd,1H),7.15(dd,1H),6.8(t,1H),6.5(s,1H),6.0bs,1H),4.7(d,2H),4.4(m,1H),2.05(m,2H),1.7(m,4H),1.4(m,2H).
实施例490:1H NMR(CDCl3)δ8.15(dt,1H),8.0(s,1H),7.7(d,2H),7.4(d,2H),7.35(m,1H),7.25(dd,1H),7.15(dd,1H),6.8(t,1H),6.5(s,1H),6.5(bs,2H),4.7(d,2H),4.1(m,1H),3.9-3.7(m,3H),3.3(m,1H),2.0-1.9(m,4H).
实施例491:1H NMR(CDCl3)δ8.15(dt,1H),8.0(s,1H),7.45-7.35(m,5H),7.25(dd,1H),7.1(dd,1H),6.8(t,1H),6.5(s,1H),4.7(d,2H),3.7(bs,2H),3.3(bs,2H),1.7(bs,4H),1.5(bs,2H).
实施例492:1H NMR(CDCl3)δ8.15(dt,1H),8.0(s,1H),7.45-7.35(m,5H),7.25(dd,1H),7.1(dd,1H),6.85(t,1H),6.5(s,1H),4.7(d,2H),3.8-3.4(bm,8H).
实施例493:1H NMR(CDCl3)δ8.15(dt,1H),8.0(s,1H),7.45-7.35(m,5H),7.25(dd,1H),7.1(dd,1H),6.80(t,1H),6.5(s,1H),4.7(d,2H),4.0(m,2H),3.6(m,2H),2.8-2.45(m,4H).
实施例494:1H NMR(CH3OD)δ8.15(8,1H),8.0(dt,1H),7.45-7.35(m,5H),7.25(dd,1H),7.1(dd,1H),6.80(t,1H),6.5(s,1H),4.7(d,2H),3.7(bs,2H),3.4(bs,2H),2.5-2.4(m,4H),2.2(s,3H).
实施例495:1H NMR(CDCl3)δ8.15(dt,1H),8.0(s,1H),7.45-7.35(m,5H),7.25(dd,1H),7.1(dd,1H),6.80(t,1H),6.5(s,1H),4.7(d,2H),3.75(bs,2H),3.35(bs,2H),2.4(bs,2H),2.3(s,3H),2.2(bs,2H).
实施例496:1H NMR(CDCl3)δ7.95(s,1H),7.9(dt,1H),7.8(t,1H),7.7(d,2H),7.15(m,4H),7.05(dd,1H),6.9(dd,1H),6.2(s,1H),4.5(d,2H),3.6(t,2H),3.3(dt,2H).
实施例497:1H NMR(CH3OD)δ8.1(s,1H),7.9(dt,1H),7.8(d,2H),7.5(d,2H),7.4(m,1H),7.3(dd,1H),7.2(dd,1H),6.4(s,1H),4.7(d,2H),3.5(t,2H),2.7(m,2H),2.6(bs,4H),1.8(bs,4H).
实施例498:1H NMR(CDCl3)δ8.5(t,1H),8.15(dt,1H),8.0(s,1H),7.8(d,2H),7.4(d,2H),7.35(m,1H),7.25(dd,1H),7.15(dd,1H),6.8(t,1H),6.5(s,1H),4.7(d,2H),3.7-2.5(m,4H),2.35(s,3H),2.2(m,1H),1.9-1.6(m,6H).
实施例499:1H NMR(CDCl3)δ8.15(dt,1H),8.0(s,1H),7.8(d,2H),7.4(d,2H),7.35(m,1H),7.25(dd,1H),7.15(dd,1H),6.8(t,1H),6.5(s,1H),4.7(d,2H),3.7(m,4H),3.5(dt,2H),2.6(t,2H),2.5(m,4H).
实施例500:1H NMR(CH3OD)δ8.15(s,1H),7.9(dt,1H),7.8(d,2H),7.45(d,2H),7.4(m,1H),7.25(dd,1H),7.15(dd,1H),6.4(s,1H),4.75(d,2H),4.2(m,1H),3.4-2.8(m,7H),1.9-1.6(m,4H).
实施例501:1H NMR(CDCl3)δ8.05(dt,1H),8.0(s,1H),7.6(d,2H),7.4(s,1H),7.35(d,2H),7.25(dd,1H),7.1(dd,1H),6.9(t,1H),6.5(s,1H),6.4(t,1H),4.7(d,2H),4.2(d,2H),2.3(bs,1H).
实施例502:1H NMR(CDCl3)δ8.15(dt,1H),8.0(s,1H),7.75(d,2H),7.45(s,1H),7.4(d,2H),7.3(dd,1H),7.1(dd,1H),6.8(t,1H),6.5(s,1H),6.1(bs,1H),4.7(d,2H),3.5(dq,2H),1.2(t,3H).
实施例503:1H NMR(CDCl3)δ8.15(dt,1H),8.0(s,1H),7.8(d,2H),7.4(d,2H),7.35(m,1H),7.25(dd,1H),7.15(dd,1H),6.9(t,1H),6.5(s,1H),6.4(t,1H),4.75(d,2H),4.1(m,2H).
实施例504:1H NMR(CDCl3)δ8.15(dt,1H),8.0(s,1H),7.8(d,2H),7.45(d,2H),7.4(m,1H),7.25(dd,1H),7.1(dd,1H),6.8(t,1H),6.6(t,1H),6.5(s,1H),4.7(d,1H),3.6(m,2H),2.8(t,2H),2.6(q,2H),1.3(t,3H).
实施例505:1H NMR(CDCl3)δ8.15(dt,1H),8.0(s,1H),7.4(m,1H),7.25(dd,1H),7.15(dd,1H),7.0(t,1H),6.5(s,1H),3.8(m,2H),2.7(t,2H),3.0(d,3H).
实施例506:1H NMR(CDCl3)δ8.15(dt,1H),8.0(s,1H),7.4(m,1H),7.25(dd,1H),7.15(dd,1H),7.0(t,1H),6.5(s,1H),3.8(m,2H),3.6(m,6H),3.4(m,2H),2.7(t,2H).
实施例507:1H NMR(CDCl3)δ8.15(dt,1H),8.0(s,1H),7.4(m,1H),7.25(dd,1H),7.15(dd,1H),7.0(t,1H),6.5(s,1H),3.9(1,2H),3.8(dt,2H),3.7(t,2H),2.7(t,2H),2.6(m,4H).
实施例508:1H NMR(CH3OD)δ8.1(s,1H),7.95(dt,1H),7.5(m,1H),7.35-7.2(m,2H),6.5(s,1H),3.6(m,4H),3.25(m,4H),2.4(t,2H),2.05(dt,2H).
实施例509:
将NaOH(59mg,1.47mmol)的1mL水溶液加入到0℃下的NH2OH·HCl(102mg,1.47mmol)在10mL甲醇中的悬浮液中。5分钟后,加入实施例210.10中制备的化合物(208mg,0.49mmol),将反应混合物回流过夜。真空除去溶剂,将残留物在水和乙酸乙酯之间分配。将乙酸乙酯层干燥(Na2SO4),蒸发溶剂。将得到的粗品偕胺肟悬浮于含有催化量的PTS的原甲酸三甲酯中,回流过夜。除去溶剂,将残留物溶于乙酸乙酯中。将乙酸乙酯层用碳酸氢钠水溶液、水和盐水依次洗涤。蒸发溶剂,残留物经层析(硅胶,己烷∶乙酸乙酯(1∶1))纯化,得到80mg(35%)的二唑。
1H NMR(CDCl3)δ8.75(s,1H),8.20-8.10(m,3H),8.03(s,1H),7.53(d,J=9Hz,2H),7.45-7.36(m,1H),7.30-7.22(m,2H),7.16-7.08(m,1H),6.80(t,J=5Hz,1H),6.56(s,1H).
LCMS:MH+=465.2
实施例510:
基本按实施例509中提出的相同方法,仅用制备实施例192中制备的化合物代替,制备以上化合物。收率=75;MH+=453;m.p.=79.3℃。
实施例511:
Ar下,将所述腈(235mg,0.56mmol)和Me3SnN3(343mg,1.67mmol)在20mL无水甲苯中的混合物回流2天。真空除去溶剂,将残留物溶于无水甲醇中。向该溶液中通入HCl气体15分钟,将反应混合物在室温下放置过夜。次日,除去溶剂,将残留物溶于水中,将pH调节至5。将沉淀的产物提取至乙酸乙酯中。干燥(Na2SO4)后,蒸发乙酸乙酯层,得到的残留物经层析(硅胶,DCM∶MeOH(98∶2→95∶5))纯化,得到50mg(19%)的纯四唑。
1H NMR(CD3OD)δ8.10(s,1H),8.00(d,J=9Hz,2H),7.90(t,J=7Hz,1H),7.65(d,J=9Hz,2H),7.50-7.40(m,1H),7.30-7.10(m,2H),6.45(s,1H),4.80(s,2H);LCMS:MH+=465.0
实施例512:
基本按实施例511中提出的相同方法,仅用实施例192中制备的化合物代替,制备以上化合物。收率=64;MH+=453;m.p.=238.9℃。
实施例513:
将实施例157中制备的化合物溶解于二氧六环(30mL)中,加入HCl-二氧六环溶液(4M,30mL)。室温下将反应混合物搅拌4小时。将反应混合物减压蒸发,加入乙酸乙酯(200mL)。将有机溶液用1N氢氧化钠洗涤,接着用饱和盐水洗涤。将有机层经无水硫酸钠干燥,减压蒸发。MH+=442.1。
实施例514-526:
基本按实施例513中提出的相同方法,仅用表41第2列中所示的化合物代替,制备表41第3列中所示的化合物。
表41
实施例528-564:
5-哌啶基类似物库(parallel library)制备的通用方法:
向表42第2列所示的原料(80mg,0.21mmol)在无水二氯甲烷(1.5mL)中的混合物中加入DIPEA(75μL,0.42mmol)和适当的封端试剂(1.1eq.,0.23mmol)。1-2小时后,将反应混合物加入到1000微米制备TLC板上,接着用8-10% EtOH-CH2Cl2作为洗脱剂展开,得到表42第3列中所示的化合物。
以下给出所选实施例的其它数据:
实施例534:1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.66-8.62(s,1H),8.62-8.58(d,1H),7.95(s,1H),7.72-7.68(d,1H),7.36-7.31(dd,1H),6.66-6.62(t,1H),5.93(s,1H),4.65-4.62(d,2H),3.86-3.82(d,1H),3.65-3.58(m,1H),3.26-3.12(dd,4H),3.02-2.80(m,3H),2.10-2.00(m,1H),1.67-1.57(m,3H).
实施例535:1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.66-8.62(s,1H),8.62-8.58(d,1H),7.95(s,1H),7.72-7.67(d,1H),7.36-7.30(dd,1H),6.70-6.64(t,1H),5.90(s,1H),4.63-4.61(d,2H),3.93-3.86(m,1H),3.69-3.61(m,4H),3.27-3.23(m,4H),3.10-3.01(dd,1H),2.93-2.84(m,2H),2.08-2.03(m,1H),1.90-1.57(m,4H).
实施例536:1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.67(s,1H),8.62-8.58(d,1H),7.96(s,1H),7.72-7.68(d,1H),7.36-7.30(dd,1H),6.79-6.72(t,1H),5.96(s,1H),4.86(br s,2H),4.66-4.63(d,2H),3.89-3.73(m,2H),3.55-3.32(m,2H),3.00-2.89(m,1H),2.10-1.97(m,2H),1.70-1.53(m,2H).
实施例537:1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.66(s,1H),8.62-8.58(d,1H),7.98(s,1H),7.77-7.76(t,1H),7.72-7.69(d,1H),7.63-7.59(m,1H),7.56(s,1H),7.36-7.29(dd,1H),6.83-6.79(t,1H),5.96(s,1H),4.67-4.64(d,2H),3.98-3.93(dd,1H),3.79-3.68(m,2H),3.37-3.28(m,1H),3.03-2.94(m,1H),2.12-1.99(m,1H),1.76-1.56(m,3H).
实施例544:1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.66-8.62(d,1H).8.61-8.58(dd,1H),7.95(s,1H),7.72-7.67(d,1H),7.36-7.30(dd,1H),6.80-6.62(br s,1H),5.88(s,1H),4.63(s,2H),3.08-2.95(m,2H),2.87-2.80(m,2H),2.04(m,1H),1.85-1.78(m,4H),1.52-1.44(m,1H),0.87-0.82(m,2H),0.72-0.66(m,2H).
实施例545:1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.66(s,1H),8.62-8.58(br t,1H),7.97(s,1H),7.73-7.68(d,1H),7.36-7.30(br t,1H),6.79-6.72(br t,1H),5.96(s,1H),4.64(br s,2H),4.59-4.46(br d,1H),3.95-3.74(br m,1H),3.57-3.49(dd,1H),3.10-3.01(dd,1H),2.86-2.70(m,2H),2.13(s,3H),2.06-2.00(m,2H),1.65-1.48(m,2H).
实施例551:1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.67(s,1H),8.63-8.59(d,1H),7.96(s,1H),7.74-7.69(d,1H),7.36-7.30(dd,1H),6.69-6.64(t,1H),5.95(s,1H),4.67-4.63(d,2H),3.85 3.65(m,1H),3.75-3.65(m,1H),3.25-3.18(dd,1H),3.03-2.90(m,2H),2.81(s,6H),2.03-1.95(m,1H),1.89-1.68(m,3H).
实施例552:1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.67(s,1H),8.62-8.59(d,1H),7.95(s,1H),7.74-7.69(d,1H),7.36-7.31(dd,1H),6.67-6.60(t,1H),5.98(s,1H),4.67-4.63(d,2H),3.92-3.86(m,1H),3.85-3.75(m,1H),3.40-3.30(dd,1H),3.27-3.16(m,1H),3.10-2.86(m,2H),2.1D-1.78(m,3H),1.40-1.30(d,6H).
实施例553:1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.67(s,1H),8.62(br s,1H),7.96(s,1H),7.74-7.69(d,1H),7.36-7.31(dd,1H),6.70-6.66(t,1H),5.98(s,1H),4.67-4.63(d,2H),3.88-3.81(m,1H),3.71-3.65(m,1H),3.20-3.11(dd,1H),3.02-2.91(m,1H),2.90-2.80(m,4H),2.01-1.80(m,3H).
实施例559:1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.66-8.60(d,1H),8.50-8.44(dd,1H),8.01(s,1H),7.93(m,1H),7.48-7.40(dd,1H),6.08(s,1H),4.80-7.74(s,2H),4.32-4.19(br d,2H),3.10-2.86(m,2H),1.95-1.68(m,4H).
实施例563:1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.66(s,1H),8.62-8.58(d,1H),7.96(s,1H),7.73-7.68(d,1H),7.36-7.30(dd,1H),6.96-6.86(br s,1H),6.79-6.74(t,1H),6.00(s,1H),4.67-4.64(d,2H),4.37-4.30(dd,1H),4.22-4.13(m,1H),3.97-3.86(dd,1H),3.73-3.64(m,1H),3.17-3.14(d,3H),3.07-2.99(m,1H),2.20-1.97(m,2H),1.68-1.48(m,2H).
通用方法1:所述酰胺形成的平行合成方法:
平行合成在带有可移动顶端封盖和固定底部封垫的聚丙烯96-孔反应板中进行。每个反应孔中装有一20微米聚丙烯底部过滤器板,最大体积为3mL。收集板中不装有该底部过滤器板。向每个反应孔中加入溶于DMF-THF-MeCN混合物(4∶3∶3 v/v,0.95mL)中的胺(0.021mmol)、EDC树脂(P-EDC,Polymer Laboratories Ltd.,43mg,0.063mmol)、1-羟基苯并三唑(HOBt,5.67mg,0.042mmol)和羧酸的二甲基甲酰胺溶液(1M,0.0315mL,0.0315mmol)。室温下将反应混合物搅拌16小时。将粗产物溶液过滤至一装有三甲醇氨基甲烷树脂(P-NH2,Argonaut Tech.Inc.,30mg,0.126mmol)和异氰酸酯树脂(P-NCO,Argonaut Tech.Inc.,35mg,0.063mmol)的反应孔中。室温下将反应混合物搅拌16小时,过滤至收集板中。减压蒸发产物溶液,得到所需的酰胺产物。
通用方法2:所述磺酰胺形成的平行合成方法:
平行合成在带有可移动顶端封盖和固定底部封垫的聚丙烯96-孔反应板中进行。每个反应孔中装有一20微米聚丙烯底部过滤器板,最大体积为3mL。收集板中不装有该底部过滤器板。向每个反应孔中加入溶于DMF-THF-MeCN混合物(3∶2∶2 v/v,0.95mL)中的胺(0.021mmol)、DIEA树脂(P-DIEA,Argonaut Tech.Inc.,18mg,0.063mmol)和磺酰氯的二甲基甲酰胺溶液(1M,0.0315mL,0.0315mmol)。室温下将反应混合物搅拌16小时。将粗产物溶液过滤至一装有三甲醇氨基甲烷树脂(P-NH2,Argonaut Tech.Inc.,30mg,0.126mmol)和异氰酸酯树脂(P-NCO,Argonaut Tech.Inc.,35mg,0.063mmol)的反应孔中。室温下将反应混合物搅拌16小时,过滤至收集板中。减压蒸发产物溶液,得到所需的磺酰胺产物。
通用方法3:所述脲形成的平行合成方法:
平行合成在带有可移动顶端封盖和固定底部封垫的聚丙烯96-孔反应板(block)中进行。每个反应孔中装有一20微米聚丙烯底部过滤器板(frit),最大体积为3mL。收集板中不装有该底部过滤器板。向每个反应孔中加入溶于DMF-MeCN混合物(1∶1 v/v,0.95mL)中的胺(0.021mmol)和异氰酸酯的二氯甲烷溶液(0.33M,0.126mL,0.042mmol)。室温下将反应混合物搅拌16小时。将粗产物溶液过滤至一装有三甲醇氨基甲烷树脂(P-NH2,Argonaut Tech.Inc.,30mg,0.126mmol)和异氰酸酯树脂(P-NCO,Argonaut Tech.Inc.,35mg,0.063mmol)的反应孔中。室温下将反应混合物搅拌16小时,过滤至收集板中。减压蒸发产物溶液,得到所需的脲产物。
通用方法4:所述还原烷基化的平行合成方法:
平行合成在带有可移动顶端封盖和固定底部封垫的聚丙烯96-孔反应板中进行。每个反应孔中装有一20微米聚丙烯底部过滤器板,最大体积为3mL。收集板中不装有该底部过滤器板。向每个反应孔中加入溶于AcOH-DCE混合物(1∶99 v/v,0.5mL)中的胺(0.021mmol)、醛或酮的二氯乙烷溶液(1M,0.147mL,0.147mmol)和溶于AcOH-DCE混合物(1∶99 v/v,0.5mL)中的三乙酰氧基硼氢化四甲基铵溶液(11mg,0.042mmol)。室温下将反应混合物搅拌3日。将粗产物溶液过滤至一装有磺酸树脂Lanterns(P-SO3H,MimotopesPty Ltd.,0.3mmol)的反应孔中。室温下将反应混合物搅拌2小时,轻轻倒出溶液。将产物树脂Lanterns用甲醇(1mL)洗涤3次。加入铵的甲醇溶液(2M,1.2mL)。室温下将反应混合物搅拌30分钟,过滤至收集板中。减压蒸发产物溶液,得到所需的叔胺产物。
通用方法5:7,N-取代的吡唑并[1,5a]嘧啶的平行合成方法:
向3-溴-7-氯-5-(2-氯-苯基)-吡唑并[1,5-a]嘧啶(9.0mg,0.03mmol)的四氢呋喃溶液中加入二异丙基乙胺(12μL,0.07),接着加入环丙基甲胺(70μL,0.07mmol;1M的DMF溶液)。将反应混合物加热至70℃下36小时,然后冷却至室温。将混合物用(P-NCO,Argonaut Tech.Inc.,70mg,0.12mmol)和P-CO3 -(Argonaut Tech.Inc.,70mg,0.24mmol)处理,室温下振摇12-18小时。过滤该溶液,蒸发至干,得到所要求产物。测得m/z 375.21。
通用方法6:5,N-取代的吡唑并[1,5a]嘧啶的平行合成方法:
通用方法:
平行合成在如上所述的96-孔聚丙烯板中进行。在本法中需要加热,各反应分别在用聚丙烯垫密封的2.5mL玻璃管中进行,并通过96孔加热转移板实现加热。
步骤A:
向3-溴-5-氯-7-N-Boc-烷基氨基-吡唑并[1,5-a]嘧啶(17mg,0.04mmol)的p-二氧六环液中加入DIEA(9μL,0.05),接着加入环丙基-甲胺(80μL,0.08mmol;1M的异丙醇溶液)。将混合物加热至90℃下36小时,然后冷却至室温。将混合物用P-NCO(Argonaut Tech.Inc.,70mg,0.12mmol)和P-CO3 -(Argonaut Tech.Inc.,70mg,0.24mmol)处理,室温下振摇12-18小时。过滤该溶液,蒸发至干,得到所要求产物。
步骤B(酸性):
将步骤A的产物溶于35% TFA/DCM中,搅拌4小时,然后高真空浓缩。将残留物用10% HCl(aq)的甲醇溶液搅拌处理2小时,然后浓缩,得到所需的产物。测得m/z 375.21。
步骤C(碱性):
将步骤A的产物溶于EtOH中,用Ambersep900-OH离子交换树脂(Acros,100mg)处理,温和搅拌下加热回流48小时。将反应混合物冷却至室温,过滤,浓缩,得到所需的产物。
实施例565
利用通用方法1中提出的方法和实施例462所示的化合物,制备表43中所示的具有实测的m/z值的化合物。
实施例566
利用通用方法1中提出的方法和实施例471所示的化合物,制备表44中所示的化合物,同时给出实测的m/z值。
实施例567
利用通用方法1中提出的方法和实施例515项下所示的化合物,制备表45中所示的化合物,同时给出实测的m/z值。
实施例568
利用通用方法1中提出的方法和实施例513项下所示的化合物,制备表46中所示的化合物,同时给出实测的m/z值。
实施例569
利用通用方法1中提出的方法和实施例526项下所示的化合物,制备表47中所示的化合物,同时给出实测的m/z值。
实施例570
利用通用方法1中提出的方法和实施例524项下所示的化合物,制备表48中所示的化合物,同时给出实测的m/z值。
实施例571
利用通用方法1中提出的方法和实施例525项下所示的化合物,制备表49中所示的化合物,同时给出实测的m/z值。
实施例572
利用通用方法1中提出的方法和实施例526.10项下所示的化合物,制备表50中所示的具有实测的m/z值的化合物。
实施例573
利用通用方法1中提出的方法和实施例518项下所示的化合物,制备表51中所示的化合物,同时给出实测的m/z值。
实施例574
利用通用方法1中提出的方法和实施例519项下所示的化合物,制备表52中所示的化合物,同时给出实测的m/z值。
实施例575
利用通用方法1中提出的方法和实施例520项下所示的化合物,制备表53中所示的化合物,同时给出实测的m/z值。
实施例576
利用通用方法1中提出的方法和实施例522项下所示的化合物,制备表54中所示的化合物,同时给出实测的m/z值。
实施例577
利用通用方法1中提出的方法和实施例523项下所示的化合物,制备表55中所示的化合物,同时给出实测的m/z值。
实施例578
利用通用方法2中提出的方法和实施例462项下所示的化合物,制备表56中所示的化合物,同时给出实测的m/z值。
实施例579
利用通用方法2中提出的方法和实施例471项下所示的化合物,制备表57中所示的具有实测的m/z值的化合物。
实施例580
利用通用方法2中提出的方法和实施例515项下所示的化合物,制备表58中所示的化合物,同时给出实测的m/z值。
实施例581
利用通用方法2中提出的方法和实施例513项下所示的化合物,制备表59中所示的化合物,同时给出实测的m/z值。
实施例582
利用通用方法2中提出的方法和实施例513项下所示的化合物,制备表60中所示的化合物,同时给出实测的m/z值。
实施例583
利用通用方法2中提出的方法和实施例524项下所示的化合物,制备表61中所示的化合物,同时给出实测的m/z值。
实施例584
利用通用方法2中提出的方法和实施例525项下所示的化合物,制备表62中所示的化合物,同时给出实测的m/z值。
实施例585
利用通用方法2中提出的方法和实施例526.10项下所示的化合物,制备表63中所示的化合物,同时给出实测的m/z值。
实施例586
利用通用方法2中提出的方法和实施例518项下所示的化合物,制备表64中所示的具有实测的m/z值的化合物。
实施例587
利用通用方法2中提出的方法和实施例519项下所示的化合物,制备表65中所示的化合物,同时给出实测的m/z值。
实施例588
利用通用方法2中提出的方法和实施例520项下所示的化合物,制备表67中所示的化合物,同时给出实测的m/z值。
实施例589
利用通用方法2中提出的方法和实施例521项下所示的化合物,制备表68中所示的化合物,同时给出实测的m/z值。
实施例590
利用通用方法2中提出的方法和实施例523项下所示的化合物,制备表69中所示的化合物,同时给出实测的m/z值。
实施例591
利用通用方法3中提出的方法和实施例462项下所示的化合物,制备表70中所示的化合物,同时给出实测的m/z值。
实施例592
利用通用方法3中提出的方法和实施例471项下所示的化合物,制备表71中所示的化合物,同时给出实测的m/z值。
实施例593
利用通用方法3中提出的方法和实施例513项下所示的化合物,制备表72中所示的化合物,同时给出实测的m/z值。
实施例594
利用通用方法3中提出的方法和实施例524项下所示的化合物,制备表73中所示的具有实测的m/z值的化合物。
实施例595
利用通用方法3中提出的方法和实施例524项下所示的化合物,制备表74中所示的化合物,同时给出实测的m/z值。
实施例596
利用通用方法3中提出的方法和实施例519项下所示的化合物,制备表75中所示的化合物,同时给出实测的m/z值。
实施例597
利用通用方法3中提出的方法和实施例520项下所示的化合物,制备表76中所示的化合物,同时给出实测的m/z值。
实施例598
利用通用方法3中提出的方法和实施例521项下所示的化合物,制备表77中所示的化合物,同时给出实测的m/z值。
实施例599
利用通用方法3中提出的方法和实施例523项下所示的化合物,制备表78中所示的化合物,同时给出实测的m/z值。
实施例600
利用通用方法4中提出的方法和实施例462项下所示的化合物,制备表79中所示的化合物,同时给出实测的m/z值。
实施例601
利用通用方法4中提出的方法和实施例471项下所示的化合物,制备表80中所示的化合物,同时给出实测的m/z值。
实施例602
利用通用方法4中提出的方法和实施例525项下所示的化合物,制备表81中所示的化合物,同时给出实测的m/z值。
实施例603
利用通用方法4中提出的方法和实施例526.10项下所示的化合物,制备表82中所示的化合物,同时给出实测的m/z值。
实施例604
利用通用方法4中提出的方法和实施例521项下所示的化合物,制备表83中所示的化合物,同时给出实测的m/z值。
实施例605
利用通用方法4中提出的方法和实施例523项下所示的化合物,制备表84中所示的化合物,同时给出实测的m/z值。
实施例606
利用通用方法5中提出的方法和制备实施例81项下所示的化合物,制备表85中所示的化合物,同时给出实测的m/z值。
实施例607
利用通用方法6中提出的方法和制备实施例196项下所示的化合物,制备表86中所示的化合物,同时给出实测的m/z值。
生物测定
杆状病毒(baculovirus)构建:
将细胞周期蛋白A和E通过PCR克隆至pFASTBAC(Invitrogen)中,在所述氨基酸末端加入GluTAG序列(EYMPME),然后在抗-GluTAG亲合柱上纯化。该表达的蛋白大小约为46kDa(细胞周期蛋白E)和50kDa(细胞周期蛋白A)。将CDK2也通过PCR克隆至pFASTBAC中,在所述羧基末端加入血凝素抗原决定基标记(YDVPDYAS)。该表达的蛋白大小约为34kDa。
酶产物:
将表达细胞周期蛋白A、E和CDK2的重组杆状病毒以感染复数(MOI)为5转染至SF9细胞中,进行48小时。通过在1000RPM下离心10分钟收集细胞。将含细胞周期蛋白(E或A)的沉淀与含CDK2的细胞沉淀合并,在5倍于裂解缓冲液的所述沉淀体积中,在冰上裂解30分钟,所述裂解缓冲液(Roche Diagnostics GmbH,Mannheim,德国)包含50mM Tris pH 8.0、0.5% NP40、1mM DTT和蛋白酶/磷酸酶抑制剂。将混合物搅拌30-60分钟,促进细胞周期蛋白-CDK2复合物的形成。然后将混合的溶胞产物在15000RPM下旋转10分钟,保留上清液。然后用5ml抗-GluTAG珠粒(1升的SF9细胞)捕获细胞周期蛋白-CDK2复合物。在裂解缓冲液中,将结合的珠粒洗涤3次。用含有100-200ug/mL的所述GluTAG肽的裂解缓冲液竞争性洗脱蛋白质。将洗脱液在2升激酶缓冲液中透析过夜,所述激酶缓冲液含有50mM Tris pH 8.0、1mM DTT、10mM MgCl2、100uM原钒酸钠和20%甘油。将酶分等份在-70℃下储存。
体外激酶测试:
在低蛋白结合的96孔板(Coming Inc,Corning,New York)中进行CDK2激酶试验(细胞周期蛋白A或E-依赖性)。在含有50mM Tris pH8.0、10mM MgCl2、1mM DTT和0.1mM原钒酸钠的激酶缓冲液中,将酶稀释至终浓度50ug/ml。这些反应中所用的底物为源自组蛋白H1的生物素化肽(购自Amersham,UK)。将底物在冰上溶融并在激酶缓冲液中稀释至2uM。将化合物在10% DMSO中稀释至所需的浓度。对于每个激酶反应,将20ul的50ug/ml酶溶液(lug酶)与20ul的luM底物溶液混合,然后与每管中的10ul稀释的化合物混合进行试验。通过加入50ul的4uM ATP和1uCi的33P-ATP(购自Amersham,UK)启动所述激酶反应。使反应在室温下进行1小时。通过加入200ul终止缓冲液终止反应15分钟,该缓冲液含有0.1% Triton X-100、1mMATP、5mM EDTA和5mg/ml链霉抗生物素包被的SPA珠粒(购自Amersham,UK)。然后用Filtermate广泛收集器(Packard/Perkin ElmerLife Sciences),将该SPA珠粒捕获至96孔GF/B滤板上(Packard/PerkinElmer Life Sciences)。通过用2M NaCl洗涤珠粒2次,然后用含有1%磷酸的2M NaCl洗涤珠粒2次,消除非特异性信号。然后采用TopCount96孔液体闪烁计数器(购自Packard/Perkin Elmer Life Sciences)测定放射活性信号。
IC50测定:
用从抑制化合物的8个点的系列稀释液(一式两份)中得到的抑制数据绘制剂量-响应曲线。将化合物浓度对%激酶活性作图,%激酶活性由处理样本的CPM除以未处理样本的CPM计算。为得到IC50值,然后将所述剂量-响应曲线拟合为标准S形曲线,然后由非线性回归分析导出IC50值。表87中给出如此获得的本发明化合物的IC50值。采用上述测定法,应用细胞周期蛋白A或E得到这些激酶活性。
表87
从以上所示的试验值可见,本发明化合物呈现出优越的CDK抑制性质。
虽然结合上述具体的实施方案已对本发明进行了说明,但其许多替代、修饰和其它变化对本领域普通技术人员来讲是十分清楚的。所有这些替代、修饰和变化均意欲涵盖在本发明的精神和范围之内。
表43
表44
表45
表46
表47
表48
表49
表50
表51
表52
表53
表54
表55
表56
表57
表58
表59
表60
表61
表62
表63
表64
表65
表67
表68
表69
表70
表71
表72
表73
表74
表75
表76
表77
表78
表79
表80
表81
表82
表83
表84
表85
表86