发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种用于测定血清中镁含量的操作简便快速、灵敏度高且廉价易得的试剂盒,发明还要提供这种该试剂盒的制备方法。
本发明试剂盒的原理是:在弱碱性缓冲液中,血清镁与偶氮类显色剂作用生成蓝紫色配合物,其颜色深浅与血清镁含量成正比,与同样处理的标准液进行比较,可求得血清镁含量。
为解决上述技术问题,本发明所采取的技术方案是:一种用于检测血清中镁含量的检测试剂盒,它由下列试剂组成:
(1)偶氮类显色液:偶氮类显色液中溶质包括偶氮类有机物、表面活性剂和掩蔽剂,溶剂由pH=8~10的三乙醇胺-盐酸或三羟甲基氨基甲烷缓冲液组成,
所述表面活性剂为固体表面活性剂、液体表面活性剂或固体表面活性剂和液体表面活性剂的混合物,所述液体表面活性剂为聚氧乙烯异辛基苯基醚,所述固体表面活性剂为聚氧乙烯月桂醚或聚乙烯吡咯烷酮中的一种或两种任意比例的混合物,所述掩蔽剂为乙二醇双(α-氨基乙基)醚四乙酸,每升显色液中溶剂的含量如下:
每升偶氮类显色液含有 |
偶氮类有机物 |
表面活性剂 |
掩蔽剂 |
50~150mg |
固体表面活性剂 |
液体表面活性剂 | 50~150mg |
5~20g |
5~15ml |
(2)镁标准液:浓度为0.823~1.234mmol/L。
所述溶质还包括叠氮钠,每升显色液含叠氮钠0.2~0.8g;所述偶氮类有机物为偶氮胂III、偶氮胂I或偶氮氯磷I。
本发明还提供了上述吡啶偶氮类显色液的制备方法为:每升偶氮类显色液按照上述比例称取吡啶偶氮类有机物、表面活性剂和掩蔽剂,用pH=8~10的三乙醇胺-盐酸或三羟甲基氨基甲烷缓冲液稀释为1000ml的吡啶偶氮类显色液。
本发明所能达到的有益效果是:用本试剂盒进行血清镁测定具有灵敏度高,准确度好,试剂空白值低,试剂简单稳定、操作快速简便等优点,适合临床常规普及应用。
具体实施方式
实施例一
一种血清镁检测试剂盒,本试剂盒是由以下物质组成的:
偶氮类显色液 1瓶
镁标准液(浓度为0.823mmol/L) 1瓶
本试剂盒的制备方法是通过如下步骤实现的:
(1)偶氮类显色液的制备方法:
a、称取偶氮氯磷I 50mg,乙二醇双(α-氨基乙基)醚四乙酸70mg,聚氧乙烯异辛基苯基醚5.0ml,用pH=9.8的三羟甲基氨基甲烷缓冲液稀释至1000ml;
(2)镁标准液:按常规方法配置。
检测方法:
1.手工分析法:血清(U管)、镁标准液(S管)、蒸馏水管(B管)各取50μl,然后在各管中分别加入显色液3.0ml,混匀,在分光光度计上用1cm光径比色皿空白管调零,然后在580nm处读取各管的吸光度(A)。
2.自动分析仪分析参数:反应类型:终点法;波长:640nm(主)/750nm(次);反应温度:37℃;校准方法:Linear;显色液:300μl;标本:5μl;读数时间:180秒。
血清镁的含量(μmol/L)=0.823×Au/As
实施例二
一种血清镁检测试剂盒,本试剂盒是由以下物质组成的:
偶氮类显色液 1瓶
镁标准液(浓度为1.234mmol/L) 1瓶
本试剂盒的制备方法是通过如下步骤实现的:
(1)偶氮类显色液的制备方法:
a、称取偶氮胂III75mg,乙二醇双(α-氨基乙基)醚四乙酸75mg,聚氧乙烯异辛基苯基醚5.0ml,聚氧乙烯月桂醚10.0g,用pH=9.0的三乙醇胺-盐酸缓冲液稀释至1000ml;
(2)镁标准液:按常规方法配置。
检测方法:
1.手工分析法:血清(U管)、镁标准液(S管)、蒸馏水管(B管)各取50μl,然后在各管中分别加入显色液3.0ml,混匀,在分光光度计上用1cm光径比色皿空白管调零,然后在650nm处读取各管的吸光度(A)。
2.自动分析仪分析参数:反应类型:终点法;波长:650nm(主)/750nm(次);反应温度:37℃;校准方法:Linear;显色液:300μl;标本:5μl;读数时间:180秒。
血清镁的含量(μmol/L)=1.234×Au/As
实施例三
一种血清镁检测试剂盒,本试剂盒是由以下物质组成的:
偶氮类显色液 1瓶
镁标准液(浓度为0.983mmol/L) 1瓶
本试剂盒的制备方法是通过如下步骤实现的:
(1)偶氮类显色液的制备方法:
a、称取偶氮氯磷I 85mg,乙二醇双(α-氨基乙基)醚四乙酸100mg,叠氮钠0.5g,聚乙烯吡咯烷酮15.0g,用pH=9.5三羟甲基氨基甲烷缓冲液稀释至1000ml;
(2)镁标准液:按常规方法配置。
检测方法:
手工分析法:血清(U管)、镁标准液(S管)、蒸馏水管(B管)各取50μl,然后在各管中分别加入显色液3.0ml,混匀,在分光光度计上用1cm光径比色皿空白管调零,然后在580nm处读取各管的吸光度(A)。
血清镁的含量(μmol/L)=0.983×Au/As
实施例四
一种血清镁检测试剂盒,本试剂盒是由以下物质组成的:
偶氮类显色液 1瓶
镁标准液(浓度为0.823mmol/L) 1瓶
本试剂盒的制备方法是通过如下步骤实现的:
(3)偶氮类显色液的制备方法:
a、称取偶氮胂I 100mg,乙二醇双(α-氨基乙基)醚四乙酸120mg,聚氧乙烯异辛基苯基醚10.0ml,用pH=8.5的三乙醇胺-盐酸缓冲液稀释至1000ml;
(4)镁标准液:按常规方法配置。
检测方法:
1.手工分析法:血清(U管)、镁标准液(S管)、蒸馏水管(B管)各取50μl,然后在各管中分别加入显色液3.0ml,混匀,在分光光度计上用1cm光径比色皿空白管调零,然后在580nm处读取各管的吸光度(A)。
2.自动分析仪分析参数:反应类型:终点法;波长:580nm(主)/750nm(次);反应温度:37℃;校准方法:Linear;显色液:300μl;标本:5μl;读数时间:180秒。
血清镁的含量(μmol/L)=0.823×Au/As
实施例五
一种血清镁检测试剂盒,本试剂盒是由以下物质组成的:
偶氮类显色液 1瓶
镁标准液(浓度为1.234mmol/L) 1瓶
本试剂盒的制备方法是通过如下步骤实现的:
(5)偶氮类显色液的制备方法:
a、称取偶氮胂III 150mg,乙二醇双(α-氨基乙基)醚四乙酸150mg,聚氧乙烯月桂醚10g、聚乙烯吡咯烷酮8g,叠氮钠0.8g,用pH=8.5的三乙醇胺-盐酸缓冲液稀释至1000ml;
(6)镁标准液:按常规方法配置。
检测方法:
1.手工分析法:血清(U管)、镁标准液(S管)、蒸馏水管(B管)各取50μl,然后在各管中分别加入显色液3.0ml,混匀,在分光光度计上用1cm光径比色皿空白管调零,然后在650nm处读取各管的吸光度(A)。
2.自动分析仪分析参数:反应类型:终点法;波长:650nm(主)/750nm(次);反应温度:37℃;校准方法:Linear;显色液:300μl;标本:5μl;读数时间:180秒。
血清镁的含量(μmol/L)=1.234×Au/As。