CN1861804A - 肾素基因与原发性高血压的相关性 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种检测原发性高血压易感性的方法，它包括检测个体的肾素基因REN、转录本和/或蛋白与正常相比是否存在变异，存在变异就表明该个体患原发性高血压的可能性大于正常人群。本发明还公开了相应的检测试剂盒。

Description

肾素基因与原发性高血压的相关性

技术领域

本发明涉及分子生物学和医学领域。更具体地涉及人肾素基因(Renin，REN)的单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism，SNP)及其与原发性高血压的相关性。本发明还涉及检测这些SNP的方法和试剂盒。

背景技术

原发性高血压(essential hypertension，EH)是最常见的心血管疾病，其发病率逐年上升，并可引起严重的心、脑、肾并发症，是脑卒中和冠心病的主要危险因素。EH是一种由遗传因素和环境因素相互作用而发病的多基因病，寻找EH相关基因进而阐明高血压发病的遗传机制已经成为目前研究的热点(HarrapSB.Hypertension：genes versus environment.Lancet，1994，344：169-171)。

肾素-血管紧张素(RAS)系统是体内调节血压和水盐代谢的重要系统，而起着推动作用的是肾素的释放，是由肾灌注减低或肾小管钠浓度减少引起。肾素主要由肾小球旁细胞分泌，释放入肺循环中的血管紧张素转换酶的作用转化为血管紧张素II(AngII)。AngII的作用为直接使小动脉平滑肌收缩，外周阻力增加；使交感神经冲动发放增加；刺激肾上腺皮质球状带，使醛固酮分泌增加，从而使肾小管远端集合管钠再加强，导致体内水与钠潴留。但目前没有证实REN基因与原发性高血压相关性的报道，更没有证实REN基因的SNP与原发性高血压相关性的报道。

综上所述，为了最终实现治疗高血压，本领域迫切需要寻找原发性高血压易感基因，并开发检测原发性高血压的方法、试剂盒，以及相关的治疗药物。

发明内容

本发明的目的就是提供一种辅助性诊断(尤其是早期诊断)高血压等高血压的方法及检测试剂盒。

本发明的另一目的是提供一种新的治疗高血压的方法。

在本发明的第一方面，提供了一种对个体的高血压易感性进行辅助性诊断的方法，它包括步骤：

检测该个体的REN基因、转录本和/或蛋白，并与正常的REN基因、转录本和/或蛋白相比较，

存在差异就表明该个体患高血压的可能性高于正常人群。

在另一优选例中，检测的是REN的基因或转录本，并与正常REN核苷酸序列比较差异。

在另一优选例中，所述的差异是选自下组的单核苷酸多态性：

12194位G→T；

12377位T→C；

其中，核苷酸位置编号基于SEQ ID NO：1。

在另一优选例中，所述的差异是12194位G→T，更佳地在该12194位上的两个等位基因的核苷酸都是T(即12194位为TT型)。

在本发明的第二方面，提供了一种检测样品是否存在REN基因的单核苷酸多态性的方法，包括步骤：

(a)用REN基因特异性引物扩增样品的REN基因，得到扩增产物；和

(b)检测扩增产物中是否存在选自下组的单核苷酸多态性：

12194位G→T；

12377位T→C；

其中，核苷酸位置编号基于SEQ ID NO：1。

在另一优选例中，所述的单核苷酸多态性是12194位G→T。

在本发明的第三方面，提供了一种药物组合物，它含有安全有效量的REN蛋白以及药学上可接受的载体。

还提供了一种REN基因和蛋白的用途，它们被用于(a)制备辅助性检测的试剂；或(b)制备治疗高血压的药物。

在本发明的第四方面，提供了一种用于辅助性检测高血压的试剂盒，它包括特异性扩增REN基因或转录本的引物和说明书。

在另一优选例中，所述的试剂盒还含有选自下组的试剂：

(a)与突变部位结合的探针；

(b)识别突变位点的限制性内切酶。

在另一优选例中，所述的突变选自：

12194位G→T；

12377位T→C；

其中，核苷酸位置编号基于SEQ ID NO：1。

更佳地，所述的单核苷酸多态性是12194位G→T。

附图说明

图1显示了REN的一种SNP图像(以SNP05为例)的测序结果。

具体实施方式

本发明人经过多年研究，首次发现和证明了REN基因与高血压密切相关，而且发现了它的新功能：REN的改变将导致高血压，其中关联研究结果显示，在REN第12194位的SNP05(G/T)在病例和对照组中的分布存在显著性差异(P＜0.05)。基于此发现，本发明提供了利用检测REN基因、转录本或蛋白是否存在突变，从而为诊断高血压提供辅助性或早期参考指标的方法和试剂盒。

REN基因的总长度为13518bp。其详细序列可参见网址http://genome.ucsc.edu/或http://www.ncbi.nlm.nih.gov/(例如http://genome.ucsc.edu/cgi-bin/hgTracks？org＝human&position＝BC047752)，或参见SEQ ID NO：1。

另外，与该SNP05连锁的核苷酸变化很可能改变氨基酸编码进而可能影响基因表达产物的功能。因此，基于本发明的新发现，REN蛋白或多肽有多方面的潜在用途。这些用途包括(但不限于)：直接做为药物治疗REN蛋白功能低下或丧失所致的疾病(如高血压)，和用于筛选促进REN蛋白功能的物质，如抗体、多肽或其它配体。用表达的重组人REN蛋白筛选多肽库可用于寻找有治疗价值的能刺激人REN蛋白功能的多肽分子。

另一方面，本发明还包括对人REN DNA或是其片段编码的多肽具有特异性的多克隆抗体和单克隆抗体，尤其是单克隆抗体。这里，“特异性”是指抗体能结合于人REN基因产物或片段。较佳地，指那些能与人REN基因产物或片段结合但不识别和结合于其它非相关抗原分子的抗体。本发明中抗体包括那些能够结合并抑制人REN蛋白的分子，也包括那些并不影响人REN蛋白功能的抗体。

本发明不仅包括完整的单克隆或多克隆抗体，而且还包括具有免疫活性的抗体片段，如Fab’或(Fab)₂片段；抗体重链；抗体轻链；遗传工程改造的单链Fv分子；或嵌合抗体。

本发明的抗体可以通过本领域内技术人员已知的各种技术进行制备。例如，纯化的人REN基因产物或者其具有抗原性的片段，可被施用于动物以诱导多克隆抗体的产生。与之相似的，表达人REN蛋白或其具有抗原性的片段的细胞可用来免疫动物来生产抗体。多种佐剂可用于增强免疫反应，包括但不限于弗氏佐剂等。

本发明的抗体也可以是单克隆抗体。此类单克隆抗体可以利用杂交瘤技术来制备。本发明的抗体包括能阻断人REN蛋白功能的抗体以及不影响人REN蛋白功能的抗体。本发明的各类抗体可以利用人REN基因产物的片段或功能区，通过常规免疫技术获得。这些片段或功能区可以利用重组方法制备或利用多肽合成仪合成。与人REN基因产物的未修饰形式结合的抗体可以用原核细胞(例如E.Coli)中生产的基因产物来免疫动物而产生；与翻译后修饰形式结合的抗体(如糖基化或磷酸化的蛋白或多肽)，可以用真核细胞(例如酵母或昆虫细胞)中产生的基因产物来免疫动物而获得。

抗人REN蛋白的抗体可用于免疫组织化学技术中，检测活检标本中的人REN蛋白。一种优选的抗REN抗体是不识别正常REN但识别突变REN的抗体，或者识别正常REN但不识别突变REN的抗体。利用该抗体对正常和异常REN蛋白的特异性差异，可以方便地进行蛋白质水平的高血压易感性检测。

利用本发明REN蛋白，通过各种常规筛选方法，可筛选出与REN蛋白发生相互作用的物质，如抑制剂、激动剂或拮抗剂等。

本发明REN蛋白及其抗体、抑制剂、激动剂、拮抗剂等，当在治疗上进行施用(给药)时，可提供不同的效果。通常，可将这些物质配制于无毒的、惰性的和药学上可接受的水性载体介质中，其中pH通常约为5-8，较佳地pH约为6-8，尽管pH值可随被配制物质的性质以及待治疗的病症而有所变化。配制好的药物组合物可以通过常规途径进行给药，其中包括(但并不限于)：肌内、静脉内、或皮下给药。

正常的REN多肽可直接用于疾病治疗，例如，用于高血压治疗。在使用本发明REN蛋白时，还可同时使用其他治疗高血压的药剂。

本发明还提供了一种药物组合物，它含有安全有效量的本发明REN蛋白以及药学上可接受的载体或赋形剂。这类载体包括(但并不限于)：盐水、缓冲液、葡萄糖、水、甘油、乙醇、及其组合。药物制剂应与给药方式相匹配。本发明的药物组合物可以被制成针剂形式，例如用生理盐水或含有葡萄糖和其他辅剂的水溶液通过常规方法进行制备。诸如片剂和胶囊之类的药物组合物，可通过常规方法进行制备。药物组合物如针剂、溶液、片剂和胶囊宜在无菌条件下制造。活性成分的给药量是治疗有效量，例如每天约0.1微克/千克体重-约10毫克/千克体重。此外，本发明的多肽还可与其他治疗剂一起使用。

使用药物组合物时，是将安全有效量的REN蛋白或其拮抗剂、激动剂施用于哺乳动物，其中该安全有效量通常至少约0.1微克/千克体重，而且在大多数情况下不超过约10毫克/千克体重，较佳地该剂量是约0.1微克/千克体重-约100微克/千克体重。当然，具体剂量还应考虑给药途径、病人健康状况等因素，这些都是熟练医师技能范围之内的。

人REN蛋白的多聚核苷酸也可用于多种治疗目的。基因治疗技术可用于治疗由于REN蛋白的无表达或异常/无活性的REN蛋白的表达所致的细胞增殖、发育或代谢异常。构建携带REN基因的重组病毒载体的方法可见于已有文献(Sambrook，et al.)。另外重组人REN基因可包装到脂质体中，然后再转移至细胞内。

多聚核苷酸导入组织或细胞内的方法包括：将多聚核苷酸直接注入到体内组织中；或在体外通过载体(如病毒、噬菌体或质粒等)先将多聚核苷酸导入细胞中，再将细胞移植到体内等。

本发明还涉及定量和定位检测人REN蛋白水平的诊断试验方法。这些试验是本领域所熟知的，且包括FISH测定和放射免疫测定。

一种检测检测样品中是否存在REN蛋白的方法是利用REN蛋白的特异性抗体进行检测，它包括：将样品与REN蛋白特异性抗体接触；观察是否形成抗体复合物，形成了抗体复合物就表示样品中存在REN蛋白。

REN蛋白的多聚核苷酸可用于REN蛋白相关疾病的诊断和治疗。在诊断方面，REN蛋白的多聚核苷酸可用于检测REN蛋白的表达与否或在疾病状态下REN蛋白的异常表达。如REN DNA序列可用于对活检标本的杂交以判断REN蛋白的表达异常。杂交技术包括Southern印迹法，Northern印迹法、原位杂交等。这些技术方法都是公开的成熟技术，相关的试剂盒都可从商业途径得到。本发明的多核苷酸的一部分或全部可作为探针固定在微阵列(microarray)或DNA芯片(又称为“基因芯片”)上，用于分析组织中基因的差异表达分析和基因诊断。用REN蛋白特异的引物进行RNA-聚合酶链反应(RT-PCR)体外扩增也可检测REN蛋白的转录产物。

检测REN基因的突变也可用于诊断高血压。检测可以针对cDNA，也可针对基因组DNA。REN蛋白突变的形式包括与正常野生型REN DNA序列相比的点突变、易位、缺失、重组和其它任何异常等。一类优选的突变是表2所示的SNP。可用已有的技术如Southern印迹法、DNA序列分析、PCR和原位杂交检测突变。另外，突变有可能影响蛋白的表达，因此用Northern印迹法、Western印迹法可间接判断基因有无突变。

本发明的主要优点在于：

首次用实验证实了REN的改变与高血压的密切相关性，进而提供了辅助性诊断高血压(或易感性)的方法和试剂盒。本发明可以为临床诊断(尤其是早期诊断)高血压提供极为有价值的辅助性参考指标，从而有利于实现早诊断、早预防、早得益。

下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件如Sambrook等人，分子克隆：实验室手册(New York：Cold Spring Harbor Laboratory Press，1989)中所述的条件，或按照制造厂商所建议的条件。

实施例1

1对象与方法

1.1研究对象

1.1.1中国人SNP发现和确认样本

样本为来自24个核心汉族高血压家系、无亲缘关系的24例原发性高血压病人。

1.1.2SNP分型和关联分析研究样本

所有受试者均为汉族。原发性高血压组(EH组)和正常血压组(NT组)各300例，均来自中国上海地区，彼此无亲缘关系。EH组为上海市瑞金医院高血压科住院病人，均为汉族，无亲缘关系。平均年龄为57.32±11.75岁。入选标准：

收缩压140mmHg和/或舒张压90mmHg，或正在接受抗高血压药物治疗至少一年以上；

在30岁之前或60岁以后发病者除外；

临床上除外继发性高血压，如原发性醛固酮增多症、嗜铬细胞瘤、肾性高血压等。

NT组为上海地区40岁以上居民，均为汉族，无亲缘关系。平均年龄56.39±6.45岁。收缩压＜140mmHg且舒张压＜90mmHg，无服用抗高血压药物史，排除肝、肾功能障碍、甲状腺疾病、糖尿病、冠心病史。

1.2实验方法

1.2.1DNA提取

常规酚-氯仿法提取外周血白细胞DNA，并标化DNA浓度值至20ng/μl。

1.2.2PCR及测序引物的设计

根据GenBank中REN的基因组序列，应用prime3软件(美国麻省理工生物医学白头研究所，http://www-gonome.wi.mit.edu/cgi-bin/primer/primer3_www.cgi)设计引物。具体引物如下表所示。

                     表1  引物序列表

引物名称	位置	序列(5’-3’)	SEQ ID NO：
				RENP1	上游	taagactacaggcacgcacca	2

	下游	ggtccaccatcttcttggttt	3
				RENP2	上游	agctcgtatcacttgccacac	4
	下游	gcatgactgactccattttgc	5
				RENP3	上游	ttgaactgcaagctaaactcc	6
	下游	tcccatctagaacatgggtga	7
				RENP4	上游	aggtgatctacccaccttgg	8
	下游	taaatctcactgcgggacaga	9
				RENE1	上游	agcgtcactggacacaagatt	10
	下游	gactgaatgacaccgcatgt	11
				RENE2	上游	tgggctaacgttaaaggtggt	12
	下游	tcctatacctgtcggggtttc	13
				RENE3	上游	gacctagggctttctttgctg	14
	下游	atcttcccctctcccctacat	15
				RENE4	上游	ccaagaaacccagtccttgat	16
	下游	ccccataggtactgctgcttt	17
				RENE5	上游	tctgtaccctggagcatgtgt	18
	下游	aatttgcaatagtgccttcca	19
				RENE6	上游	acagctggactaccctggaac	20
	下游	ttaagaagtggctgcatttgg	21
				RENE7	上游	accactcaggaaggacatgc	22
	下游	cgtctcagcagacaaggagtc	23
				RENE8	上游	cgcttgttcacctcacactct	24
	下游	gtgacatgcacagccaagttt	25
				RENE9	上游	aaaactctccccctctgcc	26
	下游	aaccctagtgaacccagatgc	27

1.2.3REN基因的调控区和编码区分段体外扩增

以提取的DNA为模板，用Taq酶，在GeneAmp 9700 PCR仪上以Touchdown程序进行PCR扩增。反应条件为：94℃预变性2分钟，94℃变性30秒，63℃退火40秒，72℃延伸40秒，共10个循环，每个循环退火温度递减0.5℃；以后94℃变性30秒，58℃退火40秒，72℃延伸40秒，共30个循环；最后72℃延伸7分钟。PCR扩增产物经琼脂糖凝胶电泳验证。

1.2.4SNP的发现和检测

PCR产物经Resin树脂纯化后，用ABI-PRISM^TM 377DNA测序仪(美国应用生物系统公司appliedbiosystems(ABI))进行荧光标记末端终止法双向测序，用Polyphred软件(美国华盛顿大学http://droog.mbt.washington.edu/Polyphred.html)进行序列的判读和SNP确认。

1.2.5SNP基因分型和关联分析

用直接单向测序法进行SNP基因分型，即在300个高血压病人和300个正常血压对照组中进行分型和关联分析。

1.3统计学方法

SNPs各基因型在病人和正常血压对照中分布的比较采用R×C表χ²检验。P＜0.05认为有统计学差别。

2.结果

2.1REN基因SNP的发现和分布

REN的基因共有9个外显子，测序总长度是5245bp，共发现7个SNP，包括启动子区4个，内含子3个，其中内含子区的1个(SNP05)是新发现的SNP。REN基因SNP分布情况见表2。测序确认杂合子图像见图1。

         表2  中国人REN基因SNP的种类及其分布

SNP名称	在基因序列中的位置	基因区域	等位基因	检测引物
					SNP01	525	Promoter	A/G	RENP1
SNP02	556	Promoter	G/T	RENP1
					SNP03	838	Promoter	A/G	RENP2
SNP04	868	Promoter	G/T	RENP2
					SNP05	12194	intron	G/T	RENE7
SNP06	12377	intron	T/C	RENE8
					SNP07	12601	intron	A/G	RENE8

说明：

(1)表中第一列为SNP的名称；第二列为SNP在REN基因序列中的位置；第三列为SNP所属基因区域，Promoter为启动子区，Exon为外显子区，Intron为内含子区，3′UTR为3′末端非翻译序列；第四列为在等位基因中SNP的两个碱基；第五列为测序所用引物。

(2)SNP05(图1)为新发现的SNP。

2.2SNP位点的基因分型

在300例EH和300例NT中，对SNP05进行基因分型和关联分析。

结果提示，SNP05等位基因分布在两组中有显著差异(P＜0.05)(表3)表明该SNP与高血压显著相关。

                       表3  SNP05基因分型和关联分析结果

基因型					等位基因频率
									EHNT	300300	GG246261	GT3430	TT209	G0.880.92	T0.120.08	χ26.17	p0.01

EH，原发性高血压NT，正常血压对照

3.讨论

高血压是遗传因素与多种环境因素相互作用而导致的多基因疾病，其遗传机制的研究已经成为目前的研究热点。迄今研究者已经成功地确定了几种单基因遗传性高血压的候选基因，但占高血压约95％的原发性高血压的遗传方式和易感基因仍未确认。研究候选基因是原发性高血压遗传研究的主要策略之一。RAS系统是体内调节血压和水盐代谢的重要系统，该系统中的肾素主要由肾小球旁细胞分泌，释放入肺循环中的血管紧张素转换酶的作用转化为AngII。AngII的作用为直接使小动脉平滑肌收缩，外周阻力增加；使交感神经冲动发放增加；刺激肾上腺皮质球状带，使醛固酮分泌增加，从而使肾小管远端集合管钠再加强，导致体内水与钠潴留。

由于多基因疾病表现型的复杂性、相关基因的微效性和人群的遗传异质性，其相关基因定位克隆研究一直是一个很大的挑战。在原发性高血压候选基因中筛选多态性标记，然后在病例-对照中进行相关分析是目前寻找疾病相关基因的重要方法之一。SNP数量多、分布广、密度高，是进行遗传连锁分析和关联研究最理想的遗传标记。本发明首次对中国汉族人群进行了REN基因的SNP检测，发现了位于启动子区的4个SNP和位于内含子连接区的3个SNP。位于内含子区的SNP05尚未被收录于NCBI的SNP数据库(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/SNP)中。本发明从REN基因的7个SNP中选出一个新发现的内含子区的SNP(SNP05)，在上海地区汉族中，通过病例-对照分析，进行它与高血压间的相关性研究。研究表明该SNP的T等位基因在高血压病例中的频率为12％，显著高于其在正常人中8％的频率，两者比较差异显著(P＝0.01)。尤其是TT型个体，几乎有70％都患有原发性高血压。本发明提示REN基因变异与中国汉族人群原发性高血压发生有关。

实施例2

原发性高血压易感性辅助检测试剂盒

制备一试剂盒，它含有：

名称                    序列(5’→3’)               编号              浓度

正向引物                accactcaggaaggacatgc         SEQ ID NO：22     干粉20D

反向引物                cgtctcagcagacaaggagtc        SEQ ID NO：23     干粉20D

PCR反应液               含Taq酶dNTP镁离子PCR反应缓冲液

抽取待检测男性病人的血液3ml，使用常规方法(或使用特定的试剂盒)从血液中提取DNA。将高血压检测试剂盒中的PCR引物稀释到1μmol/μl，以所提取的DNA为模板与所提供的引物进行PCR反应。PCR产物纯化后，用ABI-PRISM^TM 377DNA测序仪进行荧光标记末端终止法双向测序，用Polyphred软件进行序列的判读和SNP确认。检测结果图1所示。其中，含C表示高血压易感性高于正常人群。

用本实施例的试剂盒对近百例待测对象进行了SNP12194的检测，对于检测发现存在12194位G→T的30位对象。对于具有TT型的5位个体再对其进行血压测量，结果证实其中有4位的血压高于正常人。

在本发明提及的所有文献都在本申请中引用作为参考，就如同每一篇文献被单独引用作为参考那样。此外应理解，在阅读了本发明的上述讲授内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。

                              序列表

<110>上海市高血压研究所

     国家人类基因组南方研究中心

<120>肾素基因与原发性高血压的相关性

<130>052513

<160>27

<170>PatentIn version 3.1

<210>1

<211>13518

<212>DNA

<213>智人(Homo sapiens)

<400>1

caaaacagaa ccgccggtct ttgtaaaata ataattattc atttcacaaa agtgataatt    60

aaaagacttt aatagcaata cagaaagtta catgaatata aagacttaac ctttctaaag   120

ctcagttttc ctaagtaatc aaaaacctga taaagataac aagaatgagg aattatcttg   180

agaaaatgta aaatctttcc ttttattttt tgagacaggg tctcactctg tcatccaggc   240

taaagtgcag tggcacaatc atagctcact acagccttga actcctggac tcaagtgatc   300

ctcccgcctc agcctcccca gtagctaaga ctacaggcac gcaccaccac acccagctaa   360

tttttttcag agatggggtc ttgctatatt gccctggctg gtcttgaacg agcttcaagt   420

gagcgtgagc ctcctacctc atcctcccaa agcactagga ttacaggcat gagccactgt   480

ttcccagcct aaaataattg tttcttaggc cagctaccaa aaacgcaaag aaaaactttc   540

tgtagtgtga ttgcttcttc ttatgggaag cccatttaga taacctgtaa gtcaaacctg   600

atgaaaacaa tacttgaatg taatcagaca cagaaagact gttcaaggct atgagtagct   660

gagtccaagc tcgtatcact tgccacacaa cagccaataa gtctagagac aaggtattgt   720

ggcaaggaaa gctaccttat tcagagaacc agaaaaccaa gaagatggtg gaccagcatc   780

ataaagaacc atctgaagtc agcatgaacg ttaggctctt ctttatgtta agggaagggg   840

aagaagaagg ggattgggat caagaggtga ctgatgacca cagacacctg ggtgccagca   900

agggtctgag gacgttgtaa aacttctttt ttctaggtca ggtcacaatg ttcctataca   960

tctttaacat aacattgtta tttgtctgta tatttcctta tctccttggg ggttagtttg  1020

gggaaaggaa ctgttaccat tttttttaaa gttgaactgc aagctaaact cctataatta  1080

gctggtctat gtacagagct aagcagaagc ttttagccta aaggataata cccctggggg  1140

tcagaggcaa aatggagtca gtcatgctaa gtctccctcc actctctttc ttttttgaga  1200

tggaatttca ctcttattgc ccaggccgga gtgcagtggc atgatctcag ctcactgcaa  1260

cctccgcctc ctgggttcaa gcaattctct tgcctcagcc tcctgagtag ctgagattac  1320

aggtgtccat caccacaccc agctaatttt tgtagtttag tggagatggg gtttcaccat  1380

tgttggtcag gctggtctgg aactcctgac ctcaggtgat ctacccacct tggcctccca  1440

aagtgctggg acaggtgtga gccaccatgc ctggcccctc tactcttata attaaaccag  1500

ctgttgcttt tcctgccaag aaaccagtca tgaagattca cccatgttct agatgggaaa  1560

actgggctgt agcctgggag aggccagtca gggacaaagc caaagttaat atagagaatg  1620

gagcttccag ggtatagggg ttgggtctgg gctagggagc tggaaaccta ggttttacgc  1680

ttgtcccagt tttgatgtta gccctgagca gtgctgtttc tcatcagcct ctgcctgctc  1740

caggggtcac agggccaagc cagatagagg gctgctagcg tcactggaca caagattgct  1800

ttcccacagc tgtccttcct ccagcccctc tgctccccat ccggaaacct gggtaccctt  1860

cacccaccta gctctgtccc gcagtgagat ttattgctga ctgccctgcc atctacccca  1920

gggtaataaa tcagggcaga gcagaattgc aatcacccca tgcatggagt gtataaaagg  1980

ggaagggcta agggagccac agaacctcag tggatctcag agagagcccc agactgaggg  2040

aagcatggat ggatggagaa ggatgcctcg ctggggactg ctgctgctgc tctggggctc    2100

ctgtaccttt ggtctcccga cagacaccac cacctttaaa cggtaattgg taactcaggc    2160

agagaagggg tgggaggggt gcagggttcc caccttccca acaccctggc ttttccacat    2220

gcggtgtcat tcagtcctta cgatcagctg gacagggaag tatggacctg ttcagagagg    2280

tcaagtgact tgcccaataa atgacactag tagtcaggtc tagaagctgt gacttttgct    2340

tcctgcccag agcaccatgc taactaagca ctgtagagaa ctcagaagta ttaggacatg    2400

ccccttgcac ttgaggagct cacagcctga atattaagaa gggcatgggt ggttgggcgc    2460

ggtggctcct gcctgtaatc ccagcacttt gggaggctga gacggatcac ttgaggtcag    2520

gagtttgaga ccagcctggc caacatgggg aaaccccatc tctactaaaa atacaaaaat    2580

tagccgggca tggtggcagg cacttgtaat ccccagctac tcgggaagct gaggcaggag    2640

aatcgtttga gcccggaagg tggagattgc tgagccaaga tcgtgccact gcactccagc    2700

ctgagtgaca gaacaagact ccatctcaaa aaaaaaaaag acgggggtcg gggcatgggt    2760

acagttaact gtaccaggga agcagcttga tatcgtggtt aaatgcaagg cttatagagt    2820

tagattgcct tcatttaaat tttgcttcac tagcagaaca aactaggtct ggaatcatgg    2880

gcaagttatt taacctctcc aagtctcagt ttatcatttt aaacaggtat gataataaca    2940

gtacctactt gatggggctg ctttggggat tttaggagat aaggcataga aagctgggca    3000

cgttgtaaga gcccagctac tgttagtact acaggataga ttcttacaaa tatcaaaagc    3060

aaggtttggc cgggagcagt ggctcacgcc tataatccca acactttggg aggccgaggg    3120

gggcagatca cccgaggtca ggagttcaag accagcctga ccaacatgga gaaaccctgt    3180

ctctactaaa aatacaaaat tagccgggcg tggtggcaca tgcctgtaat tccagctact    3240

tgggaggctg aggcaggaga atcgcttgaa cctgggaggc tgaggttgca gtgagccgac    3300

atagcgccat tgcactccag cctggtcaac aagagcaaaa ctcagtctaa aaaaaaaaaa    3360

gaaagaaaaa aacaaggctt taggtagccc acaattagaa ggagaaaacc ttagcatccc    3420

ctaggtgcca ggccttgtgg gaacaagtga ttcattaaga ctgtagaagg aagctgggca    3480

cgcggctcat gcttgtaatt ccagcacttt gagaggctga ggtgggcaga tcgcttgagc    3540

tcacgagttc aagaccagcc taggcaacat ggtgaaacct tgtctgtaca aatacaaaaa    3600

ttagctaggt gtggtggtgc aaatctgtag tcccagctac tcgggaggct gaggtgggag    3660

catcacttca gcctgggagg tggaggctgc agtgagcaga gactgaccca ctgtgctcta    3720

gcctgggtga tagagccaga ccttatgtaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aagactgaag    3780

aaggggaaga gacagcattt gagaaaaggc ctcacagaga aaggggtttt caatctgggg    3840

acagcagata tgaccagcag tcctgaaggt agggaggcac actttaataa tggtaatagt    3900

tgctaagcct ataaaatgct tagggtgtca caggatcttt tcacatgtct catctcaagt    3960

catgccccca acaactcagc attcccactt tgcagatgag gacactgagg ctcagggagg    4020

tgatatgtaa gaggctaagc ctcaacacac actgggcctt ttgcttccga aactgctttc    4080

ccttgctctg aggctctcgg agagtaattg ctgggttgtg agcactgggt aagaggatgg    4140

gtgcttcaaa gcagctgcac tccaggataa aggtagagga aagtaaaaac atcttcccct    4200

gctgttatcc aaaagagaaa aagaatggaa ttgggcaagg ggtggagggg gaatccagct    4260

tttgaaacag tattatagga attttgctac ccgctatgtg cagagcatca tgcgaggcac    4320

ttgggacagc tgaatgaatg agctccattc tcaaggtgaa catgtacata tacacaccta    4380

caatttacat ttattgagca gtggtcgcat ggtttcatct gcacagtgac tctgaggtag    4440

gtactaccat taggcccatt gttagagagg ggttaatgga gacttagaag aggcccagag    4500

aggttaggta gctttctcag aatcacataa gtggtaaggg gattcaggca tgccccctgc    4560

aaccactgtc ttcaccaccg tacggcacca gttccacaag ctgtacagtg tgggctgtga    4620

gacccaagga aaaacagagc tgaggcccac gggaaggtga ggccggtgtg ggctggaggc    4680

cttggggtaa gcttcctgga ggtgggggta catgttgggc cttggaggac taaagaactg    4740

gggggaaaag gaagggaaga aggaaaggat tttctgaaaa ggaaatggca agaagtaaag    4800

gtccaaagca taggctgttg tgagtaaaca gtgggaaatg caacctcttt ggggccaaac    4860

ctctgaccct ccacgttccc agctgtgaag tgggagtaat aaaatcatcc accttatgag    4920

agcaaataaa ataatgattg tgaaaatatt ttggtaacag taacctgtga taggaagata    4980

acaaatcatt tctgttacaa taccatgctg ataggcataa aagttgcatt catgttcatg    5040

ggcaaaatgg gggtaagtag aatgcatggg acgcaagaag gatgtaggaa ggaaagggta    5100

gtgtgagtat aggaggacta gccactgaga agaaagtaga agaaagaggg aatctttgtg    5160

tgtatgggaa agtctattgc agagtcaact tgggcttcca tcctgggacc ttcccgtgaa    5220

cagctagaga catcttcctc tgggctttgg cagcctttat gtcgggaccc aggggaccct    5280

atatgggaaa tagggccaga cacatgctct gaatccctgc ttcaacattt ctgagtcacc    5340

tttgtccctg tgagccttca tttttctcat ctataaaatg gatgacagct agcttgttgg    5400

tgtgatttca gtagcggctc agtagagtca gtttcctagg tctctttaat tctgcctctc    5460

aaaggtgatg ggaaaacatc tagacaagaa gccaagggac cgggacacat ctctccaagg    5520

acgaggtgca tggcgctctg aagatgctgg catctctcta ggcccaaccc agctcagggg    5580

gtccactcca ccacagccct ggctgggtgc ctgtcccctg gtatcctgga gaccttgcag    5640

ctgctgtggg catctgctgc cacctagcgg cctcccatgg cactgtctcc ccgccagccc    5700

ctagttttga caggggcact ccctggcatt aatctcttca gagggaatgt ctgtgcctgt    5760

ttcctgtctg tcctcccgcc aggtggagtt ccttaaaggc agtcatgatc attatctttc    5820

tagctccagt gtccagcaca gtgaggcaca aagtagttgt tcagcaggtg attacggaat    5880

aaatgaatga acggaccaat aaacaaatag ccttgtctaa tcaaaattag gcaacagaag    5940

gaagtcactt cagggttatt taatccccgg gcagctgact cctctaaatt gactcttgac    6000

aagaagtaac tcttataaat gctccagagg ccctcagcga cagaggtgat ttccaggtgg    6060

ctgggctaac gttaaaggtg gttgtactaa aagcaggggt ttggcctcag ggactccacc    6120

actgtggtgg aggtacagca cttttctatt tttgcttcct ccaccctggg ccaggatctt    6180

cctcaagaga atgccctcaa tccgagaaag cctgaaggaa cgaggtgtgg acatggccag    6240

gcttggtccc gagtggagcc aacccatgaa gaggctgaca cttggcaaca ccacctcctc    6300

cgtgatcctc accaactaca tggacgtgag tgcttggctc agcccctcgc tccctccctg    6360

tctcctttcc ctcatggacc tagggctttc tttgctgcaa gactcaccct ttccaagctg    6420

tgtttgacga aggcgctgag tagcacgtga gcaccctaga aaattcccat tttccagctg    6480

gaaagcctga gcacagaaga caggaaggca tccaggggcc attcaggggc agggttaggt    6540

ttggaactca gcccaggcct caagccaggt gtcacaggtg ggtgggaagg ggtgtgtgac    6600

tcaggtgggg gtttctgtga cctggcccag cacaacctga tggcttcctg ccccagagga    6660

tcctcaagag tcaagtttgc ttcctgcttc attctcaatg ttttgatttt gccctcttgt    6720

cttactgaga ctcccacttt ctgggatgcc atggggagat gctaagcctc ctaccagttc    6780

ctgcaggaaa atggaaaccc cgagaggcta taggacctcg cctgggccaa gtctcacacc    6840

gagagccaag agtgaagcca ggcaagaccc caagacccaa ggtcccctga gcccctccag    6900

ccctctcttt ttacccccac agacccagta ctatggcgag attggcatcg gcaccccacc    6960

ccagaccttc aaagtcgtct ttgacactgg ttcgtccaat gtttgggtgc cctcctccaa    7020

gtgcagccgt ctctacactg cctgtggtga gacctaagac ccacagtgcc tctcctccat    7080

ccccctgccc tactgtgcat gagcaatcct gcccaacacc cagctcccat ccctcttgcc    7140

accaagggag tggcttcctc tctgcctctg tgcccactga catgtagggg agaggggaag    7200

atgtctcccg tttttctgat acagccacca aggttaaaaa caaaaaaagg tccaagaacc    7260

cctgagcacc cagaaggcca cttcccagtc ttcctgagat tgagacagga ctgaattctc    7320

aaacccatcc caggcactcg gaactcttcc atccctagtc ttaatcaaca acctcttact    7380

aggcacttac tctgtgcctg gcatcttctc tggtgttatc agtgttagtg attactttaa    7440

attccttcat ttaggacaaa attctcgatg tatgggcaca ttaggagagc ccaagaaacc    7500

cagtccttga ttgatgaagc acatattcca agccccctga ccctagggcc actcatccct    7560

gcacctaagc taaccagcca tacccacaat gcaccctgcc tctgagtccc cctgtctggg    7620

ccactcttgg acaaacctga gcctctgtcc ccctgccagt gtatcacaag ctcttcgatg    7680

cttcggattc ctccagctac aagcacaatg gaacagaact caccctccgc tattcaacag    7740

ggacagtcag tggctttctc agccaggaca tcatcaccgt aagttgggcc gccctaggtc    7800

atctgccccg gaccccttct gtccccaggc ctctcctgac cctccagggc ccacacctgc    7860

ggggaggtac actgcagccc acttggagcc tggggagctg aggaacaccc tactctgcca    7920

catctggctg ttgctgcaaa gcagcagtac ctatggggga gcaagcctgg gctacgggct    7980

caccgttggg tggtttgtgg atgtttttgc atctaacttg catgtagggc ttgtcctgag    8040

ccccgtggct gcagtcaagt aactcgtcca agttcaccag ctctgactgg gctacaccct    8100

agactgaaat ccagggtcag agtcaggctg agttttaggg tcaggcatag gttttaaggt    8160

cacagttgag gttgactctg ggactcaggt caaggcctgc ttttcttttc catgtggccc    8220

atgtctgacc gtttcctcat cctggagttt ctcaggccct gctccatcag agttagggga    8280

ggggcacacg tggcacctga gaggaaatca gggtgattcc tgcctccctt cctttttctg    8340

tgaactcaga tataaaggag ggagaagggc aagcttgtct gtgctaaaga aacccttcgc    8400

ccatgataag ggtgggggcc aagacccagt cctgccaggc acgaaagtct ggccactggg   8460

gaggggagga gctcttggca gcttttcttt tgctgcttgg caggaccacc ctctcagcct   8520

ctgctctccg atccctggtc aactctagct ctctctgggc tccgcagcag agatgtgtat   8580

tggcacagag tgtgtgcgtg cagggttgag gaaatactct taccccgatt tctgtaccct   8640

ggagcatgtg tgcccctggg atccctagtg tggaagccca gaccagactc caaccaagga   8700

gtgggcagtg ggcttggtct cctctggtcc ttcctcccac aggtgggtgg aatcacggtg   8760

acacagatgt ttggagaggt cacggagatg cccgccttac ccttcatgct ggccgagttt   8820

gatggggttg tgggcatggg cttcattgaa caggccattg gcagggtcac ccctatcttc   8880

gacaacatca tctcccaagg ggtgctaaaa gaggacgtct tctctttcta ctacaacagg   8940

tggggactgg gactccaagg gctgaggtgg ggggacagga ggggagaaga gatggggagt   9000

ggaaggagag tctgggccag aattgtaaag tgtttgtaat taggtgacag ccaatcaata   9060

tctagagctg tactagccaa tatggaaggc actattgaaa tttaaattaa ttaaatacag   9120

ttaagcatca attaagcatt caactggtgg ctcttagttg tactagccac acgtcaaatg   9180

cctggcagcc acggtggcta gtaactacag tcttatgaca gtgcagatag agaatattcc   9240

cagcatgaca ggacattcta atagacagcg ccactctgga gcaagaggag atgcaaggtg   9300

ggggcgatgg taaataaggg attactgtga cctgtagccc tgcctgttag ggccatggct   9360

cctcccacac agagacagcc aacttcagtc atccattaga tccttcattc gtttgtttgc   9420

tcactcatca gttcagtaaa tgctatgtgc caagcactgt ggtaggctct gggggtgcag   9480

cagtgaacac agtgaacaag gcagaatctg tactccccta cccacataga gcttacaggc   9540

taacagggaa gacaagacat attccaacat aaagagtgtc acaggcaggc agcaagtgtg   9600

gtgctgaaaa ccatggatgc ttttcaattc taggctgagc ttatatgcag ctcagccagc   9660

cttggggaag ctcttgagca gggttgggct ctactccaaa ctgctgggct tagaaagatg   9720

gcatgagttg gagacaagag agctggaggc aaaaggggct gggtgcagtg gctcatgcct   9780

gtaatcccag cactttggga ggccaaggcg agaggatcgc atgagcccag gagttaaggc   9840

ttcagtgagc agtgattgtg ccactgcact ccagctaagg caacagagtg agatccagtc   9900

tcaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaagtca caagggtaag aacatgaggc cagtggcaaa   9960

aagaatagag gagaggatca gagttcagag aaatctcaca gtaaaatgga gaggagtctc  10020

cggtttggtg atagaaagtg aggccttgag aaaaggccaa ttggcggctc tgcattcagg  10080

ggtggtcttt agaagaactg ttttagagga agtgggggca aggccagatg gcaagaagtt  10140

aagaggtgga cgacgtgggt gtcaggaagt ggaggtcatg agatgtaggc tgccctggga  10200

cattcaacag ggaagggaat ggggggtggc gtggggggtg agatccagaa gcagaagagg  10260

aagggtgggt gtttttaaat gctagaggat gctcgagtga tgcctgtagg tggaggaaga  10320

agccaatgga aagaaagaga ttaaaaatgt ggaaagaaga ggagctaaat gggggcactg  10380

gagtttggag gccttgaaag agatgaggtt ccagcagaca ggaagaagcc aggttttgca  10440

gaggagaggg ctggcctctt cttttatctt gggatgggaa ggagggaaca tccagagaga  10500

tactgaagtg ttgagagaca ggcaggaggg aatttgtgct agcatataca catacattcc  10560

gaatttataa aaacacaagt agtttgcagt tgcacaaaat aacatatgca cacctacaca  10620

cccatgcaca catgtgcatg tgtgaattct agtatgaatt ctggaaaaac acatcacaca  10680

cacaggcatg ccctggagac taggcctaca gtagtccctg agccaagtgc agtgaggagg  10740

aaaggaaggt gaggggaatc agctccagac ggggcaccag gagcctggct ccagtccccc  10800

acttgttcac tcatggactg ggtaacttca ggcaagtgac ttcgcctctt ggtgactcca  10860

ttgcctgaag ggcaaagaga gtacataaca cccaccctgc caaacagcag ggctgatgag  10920

gctggcatga aatgaagctt cctttctgct gtctctcttt ctctgcagag attccgagta  10980

aggagacaaa acccccacat ggctgtgacc ttccagtact ccccgagcac ctgacctaga  11040

attacacacg ccaccggccc aaaactcaca tcagcaagcc cagcctccgc tagatgccga  11100

agttctctgt ctctccttcc tgctctctcc atgccacctg cccaccccat acccaatagc  11160

ctccccaggg tcccctccca tgcacctgct caatcagcag caacccaaga gtgaggggtg  11220

tccatttgtg tcttgttcac atccactcac tgtccttgta cctgctcctt ttctgtgacc  11280

tctctgggga tgctttttgg gggaacagct ggactaccct ggaacaacct ctggttggtc  11340

ttggggaggg gaagaaaggc agagaagcag tatgttctgc atgcttccca acgacagctc  11400

cgagcctggc tgtctgtccc acattcctct gctctagagc cctctgtcct cccctgcacc  11460

cttgtgcaac cttccccaat tgcctgagtt gctgggtcct ggaggttatg ggtttccaag  11520

agcttctgat ctttccttta ggaattccca atcgctggga ggacagattg tgctgggagg  11580

cagcgacccc cagcattacg aagggaattt ccactatatc aacctcatca agactggtgt  11640

ctggcagatt caaatgaagg ggtcagaaat cctcaaccct ccccgggctc caaaaaatgc  11700

tgccgtcact ggggttgggg agggtgggga aggactgcat taccatcctg ccctctttcc  11760

aaatgcagcc acttcttaag cacagccacc atttgctctc tgcctgctct gtccaggctg  11820

gggaacagag aagggagggg cctggggaga agtggtggag ggtgacagta ccttccctcc  11880

tctactcact gcctcaacag gccaccagcg tggcctccac ccacccaccc acactcagga  11940

aggacatgca gcctggaggt gccccatcag ccttctgtct gtctgtctgt ctgtctgtct  12000

gactgtggcc tcccccaggg tgtctgtggg gtcatccacc ttgctctgtg aagacggctg  12060

cctggcattg gtagacaccg gtgcatccta catctcaggt tctaccagct ccatagagaa  12120

gctcatggag gccttgggag ccaagaagag gctgtttgat gtaagaagcc aaagagggaa  12180

ggtgctgtgg gtggggggag cgccacctgg tatcggctca caaatccccc aggcaaatga  12240

ggccatctca ggccttcgct tgttcacctc acactctcca cacatgtggc tggtcaccca  12300

tggggcgggg cactgtcccc agccctctcc agcagagaga ccaggccacc agcgcaggac  12360

tccttgtctg ctgagacgtc ttccatactc aagaaggctc tctttgcccc ccaccccagt  12420

atgtcgtgaa gtgtaacgag ggccctacac tccccgacat ctctttccac ctgggaggca  12480

aagaatacac gctcaccagc gcggactatg tatttcaggt gaggttcgag tcggccccct  12540

cggtggcagg gagaaaggct ggacagagac cctcaaagag tgacagatta caatgcacag  12600

gtcatgttag aactgtagtt ctcaaacttg gctgtgcatg tcacctggag agctttgaaa  12660

aatcctggta cctgggccac atcccatacc tattaaatca gaacctctag aagtggcacc  12720

tggggttcag tttccccagg tgattccaat gtgtggccat gtttgggcat cactatgcct  12780

gttccctcat ctccattttc tcatcaaata ctcccaagaa tcctatgctc ctatattctt  12840

accctctttt cataatcaat aggcttagag aagttgaata acttgtctag gatcagaagc  12900

taaggcaaac tgtaagctcc tgaaggaagc acggtgcctg atgcattgtt tgcctgggat  12960

ctagcacagg ggctaaacat aggagtggtg cagtccacga tggggcaaaa tggccatgat  13020

gtgagggagg cccagtgtgg ctaggggaga gatgggggcg agagggggaa tgttgctgaa  13080

gacagttgct gggggtcagg caaggtgaaa ggagaatgct catgtgctgg gtatggagaa  13140

actctccccc ttcctgccag gaatcctaca gtagtaaaaa gctgtgcaca ctggccatcc  13200

acgccatgga tatcccgcca cccactggac ccacctgggc cctgggggcc accttcatcc  13260

gaaagttcta cacagagttt gatcggcgta acaaccgcat tggcttcgcc ttggcccgct  13320

gaggccctct gccacccagg caggccctgc cttcagccct ggcccagagc tggaacactc  13380

tctgagatgc ccctctgcct gggcttatgc cctcagatgg agacattgga tgtggagctc  13440

ctgctggatg cgtgccctga cccctgcacc agcccttccc tgctttgagg acaaagagaa  13500

taaagacttc atgttcac                                                13518

<210>2

<211>21

<212>DNA

<213>智人(Homo sapiens)

<400>2

taagactaca ggcacgcacc a                                            21

<210>3

<211>21

<212>DNA

<213>智人(Homo sapiens)

<400>3

ggtccaccat cttcttggtt t                                            21

<210>4

<211>21

<212>DNA

<213>智人(Homo sapiens)

<400>4

agctcgtatc acttgccaca c                                            21

<210>5

<211>21

<212>DNA

<213>智人(Homo sapiens)

<400>5

gcatgactga ctccattttg c                                            21

<210>6

<211>21

<212>DNA

<213>智人(Homo sapiens)

<400>6

ttgaactgca agctaaactc c                                            21

<210>7

<211>21

<212>DNA

<213>智人(Homo sapiens)

<400>7

tcccatctag aacatgggtg a                                            21

<210>8

<211>20

<212>DNA

<213>智人(Homo sapiens)

<400>8

aggtgatcta cccaccttgg                                              20

<210>9

<211>21

<212>DNA

<213>智人(Homo sapiens)

<400>9

taaatctcac tgcgggacag a                                            21

<210>10

<211>21

<212>DNA

<213>智人(Homo sapiens)

<400>10

agcgtcactg gacacaagat t                                            21

<210>11

<211>20

<212>DNA

<213>智人(Homo sapiens)

<400>11

gactgaatga caccgcatgt                                              20

<210>12

<211>21

<212>DNA

<213>智人(Homo sapiens)

<400>12

tgggctaacg ttaaaggtgg t                                            21

<210>13

<211>21

<212>DNA

<213>智人(Homo sapiens)

<400>13

tcctatacct gtcggggttt c                                            21

<210>14

<211>21

<212>DNA

<213>智人(Homo sapiens)

<400>14

gacctagggc tttctttgct g                                            21

<210>15

<211>21

<212>DNA

<213>智人(Homo sapiens)

<400>15

atcttcccct ctcccctaca t                                            21

<210>16

<211>21

<212>DNA

<213>智人(Homo sapiens)

<400>16

ccaagaaacc cagtccttga t                                            21

<210>17

<211>21

<212>DNA

<213>智人(Homo sapiens)

<400>17

ccccataggt actgctgctt t                                            21

<210>18

<211>21

<212>DNA

<213>智人(Homo sapiens)

<400>18

tctgtaccct ggagcatgtg t                                            21

<210>19

<211>21

<212>DNA

<213>智人(Homo sapiens)

<400>19

aatttgcaat agtgccttcc a                                            21

<210>20

<211>21

<212>DNA

<213>智人(Homo sapiens)

<400>20

acagctggac taccctggaa c                                            21

<210>21

<211>21

<212>DNA

<213>智人(Homo sapiens)

<400>21

ttaagaagtg gctgcatttg g                                            21

<210>22

<211>20

<212>DNA

<213>智人(Homo sapiens)

<400>22

accactcagg aaggacatgc                                              20

<210>23

<211>21

<212>DNA

<213>智人(Homo sapiens)

<400>23

cgtctcagca gacaaggagt c                                            21

<210>24

<211>21

<212>DNA

<213>智人(Homo sapiens)

<400>24

cgcttgttca cctcacactc t                                            21

<210>25

<211>21

<212>DNA

<213>智人(Homo sapiens)

<400>25

gtgacatgca cagccaagtt t                                            21

<210>26

<211>19

<212>DNA

<213>智人(Homo sapiens)

<400>26

aaaactctcc ccctctgcc                                               19

<210>27

<211>21

<212>DNA

<213>智人(Homo sapiens)

<400>27

aaccctagtg aacccagatg c                                            21

Claims (10)

1.一种对个体的高血压易感性进行辅助性诊断的方法，其特征在于，它包括步骤：

检测该个体的肾素REN基因、转录本和/或蛋白，并与正常的REN基因、转录本和/或蛋白相比较，

存在差异就表明该个体患高血压的可能性高于正常人群。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，检测的是REN的基因或转录本，并与正常REN核苷酸序列比较差异。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的差异是选自下组的单核苷酸多态性：

    12194位G→T；

    12377位T→C；

其中，核苷酸位置编号基于SEQ ID NO：1。

4.一种检测样品是否存在REN基因的单核苷酸多态性的方法，其特征在于，包括步骤：

(a)用REN基因特异性引物扩增样品的REN基因，得到扩增产物；和

(b)检测扩增产物中是否存在选自下组的单核苷酸多态性：

    12194位G→T；

    12377位T→C；

其中，核苷酸位置编号基于SEQ ID NO：1。

5.如权利要求4所述的方法，其特征在于，所述的单核苷酸多态性是12194位G→T。

6.一种REN基因和蛋白的用途，其特征在于，用于制备辅助性检测的试剂。

7.一种用于辅助性检测高血压的试剂盒，其特征在于，它包括特异性扩增REN基因或转录本的引物和说明书。

8.如权利要求7所述的试剂盒，其特征在于，它还含有选自下组的试剂：

(a)与突变部位结合的探针；

(b)识别突变位点的限制性内切酶。

9.如权利要求8所述的试剂盒，其特征在于，所述的突变选自：

    12194位G→T；

    12377位T→C；

其中，核苷酸位置编号基于SEQ ID NO：1。

10.如权利要求9所述的试剂盒，其特征在于，所述的单核苷酸多态性是12194位G→T。

Images