CN1823884A - 一种艾迪注射制剂的制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明属于制药技术领域，具体公开了一种艾迪注射制剂的制备方法。药理实验表明，用本发明方法制备的艾迪注射制剂，疗效更好、毒性低、不良反应更小。

Description

一种艾迪注射制剂的制备方法

技术领域

本发明属于制药技术领域，具体涉及一种艾迪注射制剂的制备方法。

技术背景

艾迪注射液(部颁中药20册)是由斑蝥、人参、黄芪、刺五加4味中药制成的复方纯中药制剂，具有清热解毒、消瘀散结的作用，临床上主要用于原发性肝癌、肺癌、直肠癌、恶性淋巴瘤、妇科恶性肿瘤的治疗等。方中斑蝥为君药，具有“破血消癥，攻毒蚀疮”的功能，其中的主要有效成分斑蝥素具有细胞毒性和诱导细胞凋亡的作用，可以加强化疗药物的细胞毒性，并可诱导细胞凋亡，实验显示可抑制肿瘤细胞的生长，其抑制作用是通过干扰细胞的增殖与诱导细胞凋亡来实现的。人参具有大补元气、补脾益肺、生津止渴、安神增智的功效；黄芪具有补气升阳、固表止汗、利水消肿、托毒生肌的功效；刺五加则可以补肾安神，益气，健脾，生津安神。

中医认为，正气内虚、瘤毒内侵是肿瘤发生和发展的重要原因。扶正固本、解毒化淤、祛除毒结是消除癌瘤的重要措施。文献表明，艾迪注射液具有以下功能：1、抗肿瘤。对小鼠S180细胞、H22细胞有直接杀伤作用；对S180、H22、EAC呈剂量依赖性的抑瘤作用；2、增强免疫功能。能提高荷瘤小鼠网状内皮系统对碳粒的吞噬能力，增强非特异性免疫功能；能增加正常小鼠和荷瘤小鼠免疫器官的重量；促进荷瘤小鼠T淋细胞增殖和转化功能，增强DNCB致荷瘤小鼠迟发型超敏反应；提高荷瘤小鼠血清溶血素抗体水平；表明本品能明显增强小鼠细胞免疫和体液免疫功能；3、抗疲劳。有显著的抗疲劳功能，能明显延长荷瘤小鼠游泳时间；4、抗缺氧。能明显增强小鼠常压下的耐缺氧能力；5、对放、化疗的增效作用。与小剂量化疗药CTX或5-FU合用，抑瘤率高于单用化疗药或单用艾迪注射液，说明两者联合使用有抗癌协同作用；与60Co照射联合治疗，使EAC小鼠生存时间较单纯放疗组延长，证明本品对放疗有一定的增效作用；6、减毒作用。能治疗放、化疗引起的白细胞下降。因此，艾迪注射液在发挥抗瘤效应的同时，又可重建机体的免疫功能，提高细胞免疫。故补益正气、扶正固本、清热解毒、抑制肿瘤的生长和发展是艾迪注射液重要的作用所在。

艾迪注射液的制备方法为：将各药味的提取液用石硫法处理后，上清液醇沉，所得溶液即为含有效成分的溶液。此方法不但繁琐，而且提取率低。

申请号为CN200410004443.4的专利文献公开了一种用于治疗肿瘤的中药冻干粉针剂制备方法，其中采用醇提、大孔吸附树脂除杂和水提，超滤的方法相结合引入了药材中所含有的大量多糖，使得疗效有所提高，但同时又出现了新的问题。多糖的分子量范围很大，极小分子量多糖的药理作用不好，但大分子量的多糖注射给药很容易引起不良反应。

斑蝥是方中君药，其中的斑蝥素即是其抗癌作用的有效成分，也是其毒性的主要成分。申请号为CN200510008761.2的专利文献公开了一种抗肿瘤的中药冻干粉针剂及其制备方法，其中采用羟丙基-β-环糊精对斑蝥中的有效成分进行包合，达到了增强稳定性、降低刺激性和毒副作用的目的。

发明内容

在后续的实验中我们发现，采用羟丙基-β-环糊精对斑蝥中的有效成分进行包合同时具有很大的弊端。斑蝥素在羟丙基-β-环糊精包合物中的溶出有一个过程，因而在注射给药后使得人体中的斑蝥素的血药浓度比未包合直接给药的浓度低，从而会影响药物的治疗效果。由此看来，应用羟丙基-β-环糊精包合技术，即要增强药物稳定性、降低刺激性和毒副作用，同时又能提高疗效，仍是研究人员急需解决的问题。

针对以上问题，本发明研究人员经过大量的实验，研制出了一种即能增强药物稳定性、降低刺激性和毒副作用，同时又能提高疗效的艾迪注射制剂的制备新方法。本发明制备方法将从斑蝥中提取的含量更高的有效、有毒成分，用比常规用量更少的羟丙基-β-环糊精进行包合而得到斑蝥包合物，此斑蝥包合物即可以提高疗效，又可以降低其毒性。为了达到更好的治疗效果和最大限度的降低不良反应的发生，本发明研究人员还对人参、黄芪、刺五加提取物进行了精制：对从人参、黄芪、刺五加中提取的总皂苷有效部位进行纯化，使其纯度达到50％以上；对从人参、黄芪、刺五加中提取的多糖，采用截留分子量不同的超滤膜进行超滤，收集药理作用好、不良反应小的组分。最后将斑蝥包合物、总皂苷提取物和多糖有效组分一起制备成注射制剂。

本发明的目的就是公开一种艾迪注射制剂的制备新方法。

本发明注射制剂的原料药材及其重量份配比为：斑蝥1.0-1.5重量份、人参30-50重量份、黄芪70-100重量份、刺五加120-150重量份。

本发明注射制剂的有效组分包括斑蝥包合物、总皂苷提取物和多糖三个部分，具体的说是斑蝥羟丙基-β-环糊精包合物，人参、黄芪、刺五加总皂苷提取物，人参、黄芪、刺五加多糖。

上述的斑蝥包合物是通过将斑蝥的醇提水沉物采用4-6倍量的羟丙基-β-环糊精包合的方法得到的。

具体的说，上述的斑蝥包合物是通过将斑蝥用80％-95％乙醇超声提取，提取物用水进行沉淀，过滤，滤液高速离心，离心液浓缩，干燥，再用4-6倍量的羟丙基-β-环糊精进行包合的方法得到。

更具体的说，上述的斑蝥包合物是采用以下方法制备的：

取斑蝥，粉碎，过60目筛，放入超声振荡器中，加入6-10倍量80％-95％乙醇浸泡半小时后超声振荡提取，时间20-40分钟，频率30-50kHz，提取2-3次；合并提取液，静置，过滤，滤液减压浓缩成稠膏，加入8-10倍量的水，搅拌，静置，过滤，滤液以10000转/分以上的速度离心10-20分钟，离心液减压、浓缩、干燥，用少量乙醇溶解，加入到4-6倍量的羟丙基-β-环糊精制成的饱和溶液中，在50℃搅拌3小时，常温下再搅拌2小时，放置过夜，过滤，低温干燥，即得。

上述的总皂苷提取物是通过将人参、黄芪、刺五加药材提取物，用聚酰胺进行纯化，再用大孔吸附树脂进行纯化的方法得到。其中总皂苷有效部位的重量百分含量占提取物的50％以上。

具体的说，上述的总皂苷提取物是通过将人参、黄芪、刺五加药材用80％-95％乙醇提取，提取液用水沉淀后上聚酰胺柱，先用水洗至无色，再换用40％-60％乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，减压回收乙醇，浓缩液上大孔吸附树脂柱，先用水洗至无色，再换用50％-80％乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，减压浓缩，干燥，即得。

更具体的说，上述的总皂苷提取物是采用以下方法制备的：

取人参、黄芪、刺五加药材，粉碎，用6-10倍量的80％-95％乙醇提取2-3次，合并提取液，过滤，滤液减压浓缩成稠膏，加入10倍量的水，搅拌，静置，过滤，滤液上已处理好的聚酰胺柱，先用水洗至无色，再换用5-8倍量40％-60％乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，减压回收乙醇，浓缩液上已处理好的大孔吸附树脂柱，先用水洗至无色，再换用50％-80％乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，减压浓缩，干燥，粉碎，即得。

以下为本发明研究人员用分光光度法测定的5批总皂苷提取物中的总皂苷含量。含量测定结果见表1。

                    表1  总皂苷含量测定结果

批号	含量(％)
		12345	8286778075

本发明所述的多糖是通过将上述人参、黄芪、刺五加药渣的水提液，采用大孔吸附树脂除杂，超滤的方法得到的。

具体的说，上述的多糖是通过将上述人参、黄芪、刺五加药渣的水煎液浓缩，水沉，过大孔吸附树脂，收集直接流出液和水洗液，浓缩，干燥，即得。

更具体的说，上述的多糖是采用以下方法制备的：

将上述人参、黄芪、刺五加药渣加入5倍量的水煎煮提取3次，每次1小时，合并提取液，过滤，滤液减压浓缩成稠膏，稠膏加入10倍量的水搅拌，静置，上清液过已处理好的大孔吸附树脂柱，用8倍量的水洗脱，收集直接流出液和水洗液，分别用截留分子量为1万和20万的超滤膜超滤，收集富含分子量1万-20万的溶液，浓缩，干燥，即得。

上述制备方法中所述的大孔吸附树脂为非极性或弱极性，包括AB-8型、D101型、DA-201型、NKA型等。

本发明艾迪注射制剂包括水针制剂、输液制剂、粉针制剂和冻干粉针制剂。

水针制剂的制备：取上述斑蝥包合物、总皂苷提取物、多糖用注射用水溶解，调pH值为4.0-5.0，用0.22μm微孔滤膜过滤，灭菌，制备成水针制剂。

输液制剂的制备：取上述斑蝥包合物、总皂苷提取物、多糖用注射用水溶解，调等渗，调pH值为4.0-5.0，用0.22μm微孔滤膜过滤，灭菌，制备成输液制剂。

粉针制剂的制备：取上述斑蝥包合物、总皂苷提取物、多糖用注射用水溶解，加入水溶性注射用赋形剂，调pH值为4.0-5.0，用0.22μm微孔滤膜过滤，干燥，制备成粉针制剂。

冻干粉针制剂的制备：取上述斑蝥包合物、总皂苷提取物、多糖用注射用水溶解，加入水溶性注射用赋形剂，调pH值为4.0-5.0，用0.22μm微孔滤膜过滤，冷冻干燥，制备成冻干粉针制剂。

上述输液制剂中用于调节渗透压的等渗调节剂，可以是氯化钠、氯化钾、氯化镁、氯化钙、乳酸钠、葡萄糖、木糖醇、山梨醇和右旋糖酐等，优选为氯化钠和/或葡萄糖。

上述的粉针制剂和冻干粉针制剂中的水溶性注射用赋形剂，可以是甘露醇、果糖、葡聚糖、聚乙烯吡咯烷酮、右旋糖酐等中的一种、两种或几种的混合物。

上述药物制剂中，还可以含有药学上可接受的，例如亚硫酸氢钠、亚硫酸钠、硫代硫酸钠等抗氧剂和吐温-80等增溶剂。

本发明研究人员在实验中发现，在用羟丙基-β-环糊精对斑蝥提取物进行包合时，提取物和羟丙基-β-环糊精的用量比例是关键。羟丙基-β-环糊精的量太少，对有效、有毒成分的包合率低，将起不到增强稳定性、降低刺激性和毒副作用的目的；羟丙基-β-环糊精的量太多，对有效、有毒成分的包合率高，将起不到提高疗效的作用。为此，本发明研究人员以疗效和毒性为治标，对斑蝥提取物和羟丙基-β-环糊精的用量比例进行的优选。实验结果见表2。

          表2  斑蝥提取物和羟丙基-β-环糊精的用量比例优选

斑蝥提取物∶羟丙基-β-环糊精(g∶g)	疗效	毒性
			1∶11∶21∶31∶41∶51∶61∶71∶8	++++++++++++++++	+++++++++++

由上述实验结果可以看出，当斑蝥提取物和羟丙基-β-环糊精的用量比例为1∶4-6时，疗效好，毒性也小。

将市售的同一批药材斑蝥1.5g、人参50g、黄芪100g、刺五加150g，制备成下述药物：1号药物，按照艾迪注射液(部颁中药20册)中的方法制成1000支；2号药物，按照申请号为CN200410004443.4的专利文献中的方法制成1000支；3号药物，按照本发明方法制成1000支。

斑蝥素的含量测定按照艾迪注射液(部颁中药20册)含量测定项下斑蝥素的气相色谱法进行。含量测定结果见表3。

                表3  斑蝥素含量测定结果

批号	斑蝥素含量(mg/支)
				1号药物	2号药物	3号药物
	123	0.0180.0170.020	0.0200.0190.022				0.0380.0430.040

由上述含量测定结果可以看出，本发明注射制剂中的主要有效成分斑蝥素的含量高于1号药物和2号药物，说明本发明制备方法对于斑蝥中的有效成分斑蝥素的提取是科学合理的。

本发明研究人员对本发明注射制剂进行了以下的药效学实验。

阳性对照药选用上述的2号药物和3’号药物；3’号药物是按照本发明上述方法制成1000支，其中斑蝥提取物按照申请号为CN200510008761.2专利文献中的羟丙基-β-环糊精的用量进行包合。所用实验动物为昆明种小鼠，体重18-22g。

1、对小鼠S180肉瘤的影响取健康、肿瘤生长旺盛的肉瘤S180荷瘤小鼠，处死后取出瘤块，在匀浆器中加入生理盐水，制成肿瘤匀浆液，再以生理盐水1∶3稀释，然后取0.2ml注入小鼠左腋下皮下，24小时称重，取实验药物，注射给药剂量为3g生药/kg，每日小鼠尾静脉给药一次，对照组尾静脉给药注射0.2ml生理盐水，连续给药10天。停药次日处死小鼠，称体重并小心剥离皮下瘤块，于电子天平称取瘤重。结果见表4。

              表4  对小鼠肉瘤S180的生长抑制作用

组别	瘤体重量(g)	抑制率(％)
			正常对照组	2.12	-
2号药物组	1.36	35.8**
			3’号药物组	1.31	38.2**
3号药物组	1.21	42.9**#

注：与正常对照组比较：^**P＜0.01；与2号药物组比较：#P＜0.05。

2、对移植性肝癌H22的抑瘤作用无菌抽取接种后第7天的H22荷瘤雄性小鼠腹水，加4倍量生理盐水混匀，接种于小鼠右前肢腋窝处皮下，每只接种0.2ml，接种后24小时随机分组，尾静脉注射给药，给药剂量同上，每日给药1次，连续给药10天，于末次给药后24小时脱颈处死小鼠，剥取肿瘤称重，按照公式：(对照组平均瘤重-给药组平均瘤重)×100％/对照组瘤重，求出抑瘤率。结果见表5。

               表5  对移植性肝癌H22的抑瘤作用

组别	瘤体重量(g)	抑制率(％)
			正常对照组	2.78	-
2号药物组	1.75	37.1**
			3’号药物组	1.66	40.3**
3号药物组	1.55	44.2**#

注：与正常对照组比较：^**P＜0.01；与2号药物组比较：#P＜0.05。

由上述药效学实验结果可以看出，斑蝥提取物中斑蝥素含量的增加能提高药物的疗效。按照申请号为CN200510008761.2专利文献中羟丙基-β-环糊精对斑蝥提取物的用量比例进行包合的方法，对药物的疗效有一定的提高，但是效果并不明显；

本发明药物疗效的提高最为明显。

本发明研究人员用毒性试验证明了本发明药物制剂在斑蝥素含量提高的同时，并没有增加药物的毒性。

取小鼠，随机分为正常对照组、3’号药物组、3号药物组。每组20只，分别给小鼠尾静脉注射同等剂量的上述3’号、3号药物，为成人每日临床剂量的200倍，观察小时死亡情况。结果见表6。

                        表6  毒性实验结果

组别	鼠只(只)	死亡(只)	死亡率(％)
				3’号药物3号药物	2020	77	3535

由上述实验结果可以看出，本发明注射制剂在主要有效成分斑蝥素含量提高的同时，并没有增加其毒性。

本发明研究人员在进一步的对本发明制备方法中得到的多糖和申请号为CN200410004443.4的专利文献中得到的多糖的药理实验中发现，虽然本发明制备方法得到的多糖的药理活性与申请号为CN200410004443.4的专利文献中得到的多糖的药理活性比较没有大的提高，但是本发明制备方法得到的多糖，保留了分子量较小、对人体刺激性小的活性多糖，所以安全性更高，即在一个疗程30天的长时间静脉滴注给药过程中，患者出现明显的不良反应的几率比申请号为CN200410004443.4的专利文献中得到的多糖的几率小很多。

具体实施方式

下面用实施例进一步描述本发明，有利于对本发明及其优点、效果更好的了解，但所述实施例仅用于说明本发明而不是限制本发明。

实施例1

斑蝥15g、人参500g、黄芪1000g，刺五加1500g。

取上述斑蝥，粉碎，过60目筛，放入超声振荡器中，加入10倍量95％乙醇浸泡半小时后超声振荡提取，时间40分钟，频率350kHz，提取3次；合并提取液，静置，过滤，滤液减压浓缩成稠膏，加入10倍量的水，搅拌，静置，过滤，滤液以10000转/分的速度离心20分钟，离心液减压浓缩、干燥，用少量乙醇溶解，加入到4倍量的羟丙基-β-环糊精制成的饱和溶液中，在50℃搅拌3小时，常温下再搅拌2小时，放置过夜，过滤，低温干燥，即得斑蝥包合物。

取上述人参、黄芪、刺五加药材，粉碎，用10倍量的95％乙醇提取3次，合并提取液，过滤，滤液减压浓缩成稠膏，加入10倍量的水，搅拌，静置，过滤，滤液过已处理好的聚酰胺柱，先用水洗至无色，再换用8倍量60％乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，减压回收乙醇，浓缩液过已处理好的D101型大孔吸附树脂柱，先用水洗至无色，再换用80％乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，减压浓缩，干燥，粉碎，即得总皂苷提取物。

将上述药渣加入5倍量的水回流提取3次，每次1小时，合并提取液，过滤，滤液减压浓缩成稠膏，稠膏加入10倍量的水搅拌，静置，上清液过已处理好的D101型大孔吸附树脂柱，用8倍量的水洗脱，收集水洗液，分别用截留分子量为1万和20万的超滤膜超滤，收集富含分子量1万-20万的溶液，浓缩，干燥，即得多糖。

将上述斑蝥包合物、总皂苷提取物、多糖用注射用水溶解，调pH值为4.0，用0.22μm微孔滤膜过滤，灭菌，制备成水针制剂1000支。

实施例2

斑蝥10g、人参300g、黄芪700g，刺五加1200g。

取上述斑蝥，粉碎，过60目筛，放入超声振荡器中，加入6倍量80％乙醇浸泡半小时后超声振荡提取，时间20分钟，频率30kHz，提取2次；合并提取液，静置，过滤，滤液减压浓缩成稠膏，加入8倍量的水，搅拌，静置，过滤，滤液以15000转/分的速度离心10分钟，离心液减压浓缩、干燥，用少量乙醇溶解，加入到6倍量的羟丙基-β-环糊精制成的饱和溶液中，在50℃搅拌3小时，常温下再搅拌2小时，放置过夜，过滤，低温干燥，即得斑蝥包合物。

取上述人参、黄芪、刺五加药材，粉碎，用6倍量的80％乙醇提取2次，合并提取液，过滤，滤液减压浓缩成稠膏，加入10倍量的水，搅拌，静置，过滤，滤液过已处理好的聚酰胺柱，先用水洗至无色，再换用5倍量40％乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，减压回收乙醇，浓缩液过已处理好的AB-8型大孔吸附树脂柱，先用水洗至无色，再换用50％乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，减压浓缩，干燥，粉碎，即得总皂苷提取物。

将上述药渣加入5倍量的水回流提取3次，每次1小时，合并提取液，过滤，滤液减压浓缩成稠膏，稠膏加入10倍量的水搅拌，静置，上清液过已处理好的DA-201型大孔吸附树脂柱，用8倍量的水洗脱，收集水洗液，分别用截留分子量为1万和20万的超滤膜超滤，收集富含分子量1万-20万的溶液，浓缩，干燥，即得多糖。

将上述斑蝥包合物、总皂苷提取物、多糖用注射用水溶解，用氯化钠调等渗，调pH值为5.0，用0.22μm微孔滤膜过滤，灭菌，制备成输液制剂1000瓶。

实施例3

斑蝥12g、人参400g、黄芪850g，刺五加1300g。

取上述斑蝥，粉碎，过60目筛，放入超声振荡器中，加入8倍量90％乙醇浸泡半小时后超声振荡提取，时间30分钟，频率40kHz，提取2次；合并提取液，静置，过滤，滤液减压浓缩成稠膏，加入10倍量的水，搅拌，静置，过滤，滤液以12000转/分的速度离心15分钟，离心液减压浓缩、干燥，用少量乙醇溶解，加入到5倍量的羟丙基-β-环糊精制成的饱和溶液中，在50℃搅拌3小时，常温下再搅拌2小时，放置过夜，过滤，低温干燥，即得斑蝥包合物。

取上述人参、黄芪、刺五加药材，粉碎，用8倍量的85％乙醇提取3次，合并提取液，过滤，滤液减压浓缩成稠膏，加入10倍量的水，搅拌，静置，过滤，滤液过已处理好的聚酰胺柱，先用水洗至无色，再换用6倍量50％乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，减压回收乙醇，浓缩液过已处理好的NKA型大孔吸附树脂柱，先用水洗至无色，再换用70％乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，减压浓缩，干燥，粉碎，即得总皂苷提取物。

将上述药渣加入5倍量的水回流提取3次，每次1小时，合并提取液，过滤，滤液减压浓缩成稠膏，稠膏加入10倍量的水搅拌，静置，上清液过已处理好的D101型大孔吸附树脂柱，用8倍量的水洗脱，收集水洗液，分别用截留分子量为1万和20万的超滤膜超滤，收集富含分子量1万-20万的溶液，浓缩，干燥，即得多糖。

将上述斑蝥包合物、总皂苷提取物、多糖用注射用水溶解，加入聚乙烯吡咯烷酮，调pH值为4.5，用0.22μm微孔滤膜过滤，干燥，制备成粉针制剂1000支。

实施例4

斑蝥14g、人参450g、黄芪750g，刺五加1400g。

取上述斑蝥，粉碎，过60目筛，放入超声振荡器中，加入9倍量85％乙醇浸泡半小时后超声振荡提取，时间25分钟，频率45kHz，提取3次；合并提取液，静置，过滤，滤液减压浓缩成稠膏，加入10倍量的水，搅拌，静置，过滤，滤液以14000转/分的速度离心12分钟，离心液减压浓缩、干燥，用少量乙醇溶解，加入到5倍量的羟丙基-β-环糊精制成的饱和溶液中，在50℃搅拌3小时，常温下再搅拌2小时，放置过夜，过滤，低温干燥，即得斑蝥包合物。

取上述人参、黄芪、刺五加药材，粉碎，用6倍量的90％乙醇提取2次，合并提取液，过滤，滤液减压浓缩成稠膏，加入10倍量的水，搅拌，静置，过滤，滤液过已处理好的聚酰胺柱，先用水洗至无色，再换用6倍量55％乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，减压回收乙醇，浓缩液过已处理好的AB-8型大孔吸附树脂柱，先用水洗至无色，再换用60％乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，减压浓缩，干燥，粉碎，即得总皂苷提取物。

将上述药渣加入5倍量的水回流提取3次，每次1小时，合并提取液，过滤，滤液减压浓缩成稠膏，稠膏加入10倍量的水搅拌，静置，上清液过已处理好的AB-8型大孔吸附树脂柱，用8倍量的水洗脱，收集水洗液，分别用截留分子量为1万和20万的超滤膜超滤，收集富含分子量1万-20万的溶液，浓缩，干燥，即得多糖。

将上述斑蝥包合物、总皂苷提取物、多糖用注射用水溶解，加入甘露醇和果糖，调pH值为4.8，用0.22μm微孔滤膜过滤，冷冻干燥，制备成冻干粉针制剂1000支。

实施例5

按照实施例1的处方和方法制备斑蝥包合物、总皂苷提取物和多糖。

将上述斑蝥包合物、总皂苷提取物、多糖用注射用水溶解，用葡萄糖调等渗，调pH值为4.5，用0.22μm微孔滤膜过滤，灭菌，制备成输液制剂1000瓶。

实施例6

按照实施例2的处方和方法制备斑蝥包合物、总皂苷提取物和多糖。

将上述斑蝥包合物、总皂苷提取物、多糖用注射用水溶解，加入右旋糖酐，调pH值为4.0，用0.22μm微孔滤膜过滤，干燥，制备成粉针制剂1000支。

实施例7

按照实施例3的处方和方法制备斑蝥包合物、总皂苷提取物和多糖。

将上述斑蝥包合物、总皂苷提取物、多糖用注射用水溶解，加入葡聚糖和聚乙烯吡咯烷酮，调pH值为5.0，用0.22μm微孔滤膜过滤，干燥，制备成粉针制剂1000支。

Claims (6)

1、一种艾迪注射制剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)处方为：斑蝥1.0-1.5重量份、人参30-50重量份、黄芪70-100重量份、刺五加120-150重量份；

(2)将斑蝥用80％-95％乙醇超声提取，提取物用水进行沉淀，过滤，滤液高速离心，离心液浓缩，干燥，再用4-6倍量的羟丙基-β-环糊精进行包合，即得斑蝥包合物；

(3)将人参、黄芪、刺五加药材用80％-95％乙醇提取，提取液用水沉淀后上聚酰胺柱，先用水洗至无色，再换用40％-60％乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，减压回收乙醇，浓缩液上大孔吸附树脂柱，先用水洗至无色，再换用50％-80％乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，减压浓缩，干燥，即得总皂苷提取物；

(4)将上述人参、黄芪、刺五加药渣的水煎液浓缩，水沉，过大孔吸附树脂，收集直接流出液和水洗液，浓缩，干燥，即得多糖。

2、根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，还包括以下步骤：

(1)取斑蝥，粉碎，过60目筛，放入超声振荡器中，加入6-10倍量80％-95％乙醇浸泡半小时后超声振荡提取，时间20-40分钟，频率30-50kHz，提取2-3次；合并提取液，静置，过滤，滤液减压浓缩成稠膏，加入8-10倍量的水，搅拌，静置，过滤，滤液以10000转/分以上的速度离心10-20分钟，离心液减压、浓缩、干燥，用少量乙醇溶解，加入到4-6倍量的羟丙基-β-环糊精制成的饱和溶液中，在50℃搅拌3小时，常温下再搅拌2小时，放置过夜，过滤，低温干燥，即得斑蝥包合物；

(2)取人参、黄芪、刺五加药材，粉碎，用6-10倍量的80％-95％乙醇提取2-3次，合并提取液，过滤，滤液减压浓缩成稠膏，加入10倍量的水，搅拌，静置，过滤，滤液上已处理好的聚酰胺柱，先用水洗至无色，再换用5-8倍量40％-60％乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，减压回收乙醇，浓缩液上已处理好的大孔吸附树脂柱，先用水洗至无色，再换用50％-80％乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，减压浓缩，干燥，粉碎，即得总皂苷提取物；

(3)将上述人参、黄芪、刺五加药渣加入5倍量的水煎煮提取3次，每次1小时，合并提取液，过滤，滤液减压浓缩成稠膏，稠膏加入10倍量的水搅拌，静置，上清液过已处理好的大孔吸附树脂柱，用8倍量的水洗脱，收集直接流出液和水洗液，分别用截留分子量为1万和20万的超滤膜超滤，收集富含分子量1万-20万的溶液，浓缩，干燥，即得多糖。

3、根据权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于，还包括以下步骤：

水针制剂的制备：取上述斑蝥包合物、总皂苷提取物、多糖用注射用水溶解，调pH值为4.0-5.0，用0.22μm微孔滤膜过滤，灭菌，制备成水针制剂；

输液制剂的制备：取上述斑蝥包合物、总皂苷提取物、多糖用注射用水溶解，加入等渗调节剂，调pH值为4.0-5.0，用0.22μm微孔滤膜过滤，灭菌，制备成输液制剂；

粉针制剂的制备：取上述斑蝥包合物、总皂苷提取物、多糖用注射用水溶解，加入水溶性注射用赋形剂，调pH值为4.0-5.0，用0.22μm微孔滤膜过滤，干燥，制备成粉针制剂；

冻干粉针制剂的制备：取上述斑蝥包合物、总皂苷提取物、多糖用注射用水溶解，加入水溶性注射用赋形剂，调pH值为4.0-5.0，用0.22μm微孔滤膜过滤，冷冻干燥，制备成冻干粉针制剂。

4、根据权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于，所述的大孔吸附树脂为非极性或弱极性，包括AB-8型、D101型、DA-201型、NKA型。

5、根据权利要求3所述的注射制剂的制备方法，其特征在于，所述的等渗调节剂可以是氯化钠、氯化钾、氯化镁、氯化钙、乳酸钠、葡萄糖、木糖醇、山梨醇和右旋糖酐等，优选为氯化钠和/或葡萄糖。

6、根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述的水溶性注射用赋形剂，可以是甘露醇、果糖、葡聚糖、聚乙烯吡咯烷酮、右旋糖酐等中的一种、两种或几种的混合物。