CN1823748A - 辅酶q10脂质体的药物制剂及其制备工艺 - Google Patents

Abstract

本发明公开了辅酶Q₁₀脂质体的药物制剂及其制备方法。本发明制备的辅酶Q₁₀脂质体是一种液体制剂，该制剂包括辅酶Q₁₀、脂质成份和常用药物辅料，所述辅酶Q₁₀在脂质体中浓度为0.05－50％。每10mL制剂中含有下述成分：辅酶Q₁₀ 5mg－5g脂质成分4mg－10g缓冲液10mL。本发明技术解决了辅酶Q₁₀液体制剂的稳定性，并且增强其体内生物利用度，实现药物的被动靶向作用。本发明可以制成口服或注射用辅酶Q₁₀脂质体混悬液。本发明操作简单，适用于工业化大生产。

Description

辅酶Q10脂质体的药物制剂及其制备工艺

技术领域

本发明涉及辅酶Q₁₀脂质体及其制备方法，属于医药技术领域。

背景技术

辅酶Q₁₀(coenzyme Q₁₀，CoQ₁₀)是动物体内的一种内源性物质，存在于线粒体的内膜中，是呼吸链中的递氢体，细胞代谢的激活剂，是人体维持生命的必需物质，在体内通过线粒体内膜酶系的作用由对羟基苯甲酸及异戊烯焦磷脂合成。内源性辅酶Q₁₀在人体内的总含量为0.5-1.5mg，在心脏、肝及胰中的水平较高，有结合蛋白质的功能。临床研究发现，外源性辅酶Q₁₀有抗氧化及细胞膜稳定作用，可使细胞内外环境得以维持，对免疫有特殊的增强作用。

辅酶Q₁₀应用广泛，在治疗心血管疾病方面有独特的疗效，临床上主要用于充血性心力衰竭、缺血性心脏病、冠心病、高血压、心律不齐、急慢性肝炎及癌症的辅助用药，此外对胆固醇增多症、颈部外伤后遗症、脑血管疾病、出血性休克、胃溃疡、十二指肠溃疡、坏血病、坏死性牙周炎、肺气肿、支气管哮喘、听觉障碍、再生障碍性贫血等疾病也有疗效，并且在延缓衰老和提高免疫力方面有不可替代的作用和广阔的应用前景，而最近更发现它对艾滋病有显著的辅助疗效，是目前应用相当广泛的药物。

心血管疾病，是目前世界范围内导致人类死亡的主要疾病之一。由于人口老龄化、肥胖、高血压等原因，目前临床药物大多不能特定作用于心血管系统，因而生物利用度低，毒副作用大。我国是世界上心血管疾病发病和死亡人数最多的国家，近年来我国心血管疾病的发病率及死亡率呈明显上升趋势，对这类药物进行新剂型及新给药途径的研究具有重大现实意义。脂质体作为药物载体能够导向治疗心血管疾病这一结论已得到证实，越来越多的研究工作正围绕此方向展开。

临床研究表明，几乎所有心血管疾病患者以及某些非心血管疾病患者其组织细胞内均有程度不等的辅酶Q₁₀缺乏。动物实验证实，当组织内辅酶Q₁₀含量减少至75％时，心脏功能即明显下降，补充外源性辅酶Q₁₀后可纠正心肌病变组织辅酶Q₁₀缺乏状态，从而使患者临床心功能症状得到改善。

脂质体(Liposomes)是药剂学第四代给药系统——靶向给药系统的新剂型，作为靶向给药系统中研究最成熟的一种剂型，其研究已从实验室研究阶段发展进入商业化阶段，体现出了巨大的实际应用价值。国外先后有两性霉素B脂质体、柔红霉素脂质体和PEG化阿霉素脂质体等上市，另外还有几十个正在进行II期和III期临床试验。

脂质体作为药物在体导向治疗心血管疾病的研究越来越受到重视，脂质体可被动靶向于缺血心肌，已被不少实验研究所证实。脂质体被动靶向于缺血心肌的靶向机制主要与粒径大小有关。大脂质体缺乏血管通透性，不能通过肝血管的细胞间隙，易被网状内皮细胞吞噬，故在体内半衰期较短，而小单室脂质体能增加靶部位的聚集和延长其在血液中的半衰期。有研究表明，粒径在200nm左右，带正电的小单室脂质体可靶向于缺血组织。

辅酶Q₁₀理化性质不稳定，存在氧化还原两重性，导致辅酶Q₁₀的注射剂很不稳定。我们制备了辅酶Q₁₀脂质体注射剂，提高了辅酶Q₁₀注射剂的稳定性，并起到缓释和靶向的作用。当前辅酶Q₁₀的口服剂型主要是片剂、胶囊、软胶囊等，这些剂型都存在患者吞咽不便，生物利用度不高等问题。我们研制的辅酶Q₁₀口服脂质体，便于服用，易于分剂量，减少药物的刺激性，易于吸收，提高药物的生物利用度和稳定性。

发明内容：

本发明是针对辅酶Q₁₀现有剂型的不足，制备了辅酶Q₁₀脂质体。本发明能够提高辅酶Q₁₀和脂质体的稳定性，提高辅酶Q₁₀的生物利用度，并适用于工业化大生产。

本发明制备成辅酶Q₁₀脂质体注射剂，可以增强辅酶Q₁₀的稳定性，延缓药物的释放，并起到被动靶向的作用。

本发明制备的辅酶Q₁₀脂质体口服液，可以显著提高口服生物利用度，提高患者的顺应性。

本发明每10mL含有下述成分：

辅酶Q₁₀                   5mg-5g

脂质成分                   4mg-10g

缓冲液                     10mL

本发明制备方法包括以下步骤：

(1)将辅酶Q₁₀与脂质成分通过加热或用适当的有机溶剂溶解，制成脂质溶液；

(2)将脂质溶液通过薄膜分散或反相蒸发或注入法制成辅酶Q₁₀脂质体；

(3)通过减压蒸发除掉有机溶剂。

(4)也可以不采用(1)，(2)，(3)的步骤，将辅酶Q₁₀与脂质成分和缓冲液以机械方法反复处理，均可分散成辅酶Q₁₀脂质体混悬液。

(5)将辅酶Q₁₀脂质体通过0.2m滤膜的挤出仪挤出，即得辅酶Q₁₀脂质体。

本发明所述的有机溶媒包括氯仿，二氯甲烷，四氢呋喃，乙醚，乙醇，乙酸乙酯，丙酮。

所选脂质成分是下述至少一种成分：大豆磷脂、蛋黄卵磷脂、氢化磷脂、磷脂酰胆碱、胆固醇。

所使用的缓冲液包括磷酸盐缓冲液、碳酸盐缓冲液、Tris缓冲液，pH值为5.0-9.0，浓度为0.001-10mol/L。

本发明具有以下优点：

制备的辅酶Q₁₀脂质体注射剂可显著提高辅酶Q₁₀的稳定性。

由于辅酶Q₁₀理化性质不稳定，存在氧化还原两重性，其现有的注射剂很不稳定，存在析出现象，而本发明能克服原有注射剂型的弊端，显著提高辅酶Q₁₀的稳定性。延长辅酶Q₁₀的释放时间。提高辅酶Q₁₀的被动靶向性。

4.提高生物利用度。

不管是口服还是注射剂型，本发明都能够显著提高药物在体内的生物利用度，提高治疗作用。

5.服用方便。

口服剂型为液体制剂，使患者服用方便；注射液相较于冻干粉针剂型，给药较方便。

附图说明

图1为辅酶Q₁₀脂质体和辅酶Q₁₀注射剂小鼠尾静脉注射的药-时曲线(n＝6)。

图2为辅酶Q₁₀脂质体注射液在小鼠体内的药动学参数。

图3为辅酶Q₁₀脂质体和辅酶Q₁₀溶液剂在组织中的药-时曲线。

具体实施方式：

本发明的稳定性实验如下：

1.光照影响

取适量辅酶Q₁₀脂质体成品，装于密封小瓶中，置1000Lx条件下照射10天，于第0、1、3、5、10天取样，考察药物含量、包封率、过氧化值、pH值等项目。结果见表1。结果表明辅酶Q₁₀脂质体对光很不稳定，应避光保存。

2.温度影响

取适量辅酶Q₁₀脂质体成品，装于密封小瓶中，分别置于25、40、60℃水浴中，放置10天，定时取样，考察稳定性。结果见表2-4。结果表明辅酶Q₁₀脂质体在25℃和40℃的条件下比较稳定，在60℃下较不稳定。

表1.辅酶Q₁₀脂质体在光照下稳定性

Table1.Stability of CoQ₁₀ liposome in 1000 Lx

0

1

3

5

10

药物含量(％)包封率(％)过氧化值POVpH值

10099.20.0157.02

82.897.50.0936.82

49.299.60.1216.92

17.375.40.0546.98

0.8131.50.0476.86

表2.辅酶Q₁₀脂质体在25℃下稳定性

Table2.Stability of CoQ₁₀ liposome in 25℃

	0	1	3	5	10
						药物含量(％)包封率(％)过氧化值POVpH值	10099.20.0157.02	99.599.70.0216.98	99.899.00.0377.00	102.798.70.0237.01	100.999.50.0256.98

表3.辅酶Q₁₀脂质体在40℃下稳定性

Table3.Stability of CoQ₁₀ liposome in 40℃

	0	1	3	5	10
						药物含量(％)包封率(％)过氧化值POVpH值	10099.20.0157.02	101.398.20.0206.86	103.295.30.0986.92	101.296.80.0276.94	103.597.50.0686.84

表4.辅酶Q₁₀脂质体在60℃下稳定性

Table4.Stability of CoQ₁₀ liposome in 60℃

	0	1	3	5	10
						药物含量(％)包封率(％)过氧化值POVpH值	10099.20.0157.02	95.0101.30.0446.84	91.498.90.1576.94	89.888.60.1446.98	71.362.10.0796.72

不管是口服还是注射剂型，本发明都能显著延长药物在体内的释放时间，延长半衰期，减少给药次数，减轻病人的痛苦。

辅酶Q₁₀脂质体注射液在小鼠体内的药动学参数见图2，药时曲线如图1所示。

表5辅酶Q₁₀脂质体和辅酶Q₁₀溶液剂小鼠尾静脉注射的药动学参数

Tab5 Pharmacokinetic parameters of Coenzyme Q₁₀ liposome and CoenzymeQ₁₀ solution after iv administration to mice(n＝6)

Parameter	liposome	Solution
			C0K	15.89ug/mL0.3866h-1	15.89ug/mL0.5943h-1

t1/2AUCClR2

1.793h41.1(g/mL)·h0.073L·kg-1·h-10.9519

1.166h26.74(g/mL)·h0.112L·kg-1·h-10.9620

通过小鼠体内的组织分布实验证明，制备的辅酶Q₁₀脂质体注射剂，可明显提高辅酶Q₁₀在心中的分布，提高药效，减少毒副作用。

辅酶Q₁₀脂质体和辅酶Q₁₀溶液剂在小鼠不同组织中的浓度随时间变化如图3所示。

liposome

solutionTab2 concentration-time curve of Coenzyme Q₁₀ liposome and Coenzyme Q₁₀solution in heart(a)，liver(b)，spleen(c)，lung(d)，kidney(e)，brain(f)after ivadministration(n＝6)

实施例1：

辅酶Q₁₀50mg，大豆卵磷脂300mg，胆固醇300mg，pH6.5磷酸盐缓冲液10mL。

将处方中辅酶Q₁₀、大豆卵磷脂、胆固醇置梨形瓶中，加30mL二氯甲烷，加热溶解，置旋转蒸发仪上，水浴60℃下减压除去二氯甲烷，加入磷酸盐缓冲液，继续旋转1小时，过0.8m滤膜挤出，即得辅酶Q₁₀脂质体口服液。

实施例2：

辅酶Q₁₀10mg，蛋黄卵磷脂60mg，胆固醇30mg，pH7.5的Tris缓冲液10mL。

将处方中辅酶Q₁₀、蛋黄卵磷脂、胆固醇，加2mL乙醇溶解，Tris缓冲液置三颈瓶中，水浴50℃下将脂质溶液注入缓冲液中，过0.2m滤膜挤出，即得辅酶Q₁₀脂质体注射剂。

实施例3：

辅酶Q₁₀15mg，大豆磷脂100mg，胆固醇20mg，pH6.7磷酸盐缓冲液10mL。

将处方中辅酶Q₁₀、大豆卵磷脂、胆固醇置梨形瓶中，加10mL三氯甲烷溶解，置旋转蒸发仪上，水浴40℃下减压5分钟至胶状，加入磷酸盐缓冲液10mL，继续旋转1小时，过0.45m滤膜挤出，即得辅酶Q₁₀脂质体注射液。

Claims (6)

1、辅酶Q₁₀脂质体的药物制剂，其特征在于：该制剂包括辅酶Q₁₀、脂质成份和常用药物辅料，所述辅酶Q₁₀在脂质体中浓度为0.05-50％。

2、根据权利要求1所述的辅酶Q₁₀脂质体的药物制剂，其特征在于：

每10mL制剂中含有下述成分：

                  辅酶Q₁₀   5mg-5g

                  脂质成分   4mg-10g

                  缓冲液     10mL。

3、根据权利要求1或2所述的辅酶Q₁₀脂质体的药物制剂，其特征在于：所述的脂质成份是下述中的至少一种成份：大豆磷脂、蛋黄卵磷脂、氢化磷脂、磷脂酰胆碱、胆固醇。

4、一种如权利要求1所述的辅酶Q₁₀脂质体的药物制剂的制备方法，其特征在于：制备方法包括以下步骤：

(1)将辅酶Q₁₀与脂质成分通过加热或用适当的有机溶剂溶解，制成脂质溶液；

(2)将脂质溶液通过薄膜分散或反相蒸发或注入法制成辅酶Q₁₀脂质体；

(3)通过减压蒸发除掉有机溶剂；

(4)也可以不采用(1)，(2)，(3)的步骤，将辅酶Q₁₀与脂质成分和缓冲液以机械方法反复处理，均可分散成辅酶Q₁₀脂质体混悬液；

(5)将辅酶Q₁₀脂质体通过0.2m滤膜的挤出仪挤出，即得辅酶Q₁₀脂质体。

5、根据权利要求4所述的辅酶Q₁₀脂质体的药物制剂的制备方法，其特征在于：所述的辅酶Q₁₀脂质体制备方法中，有机溶媒为氯仿，二氯甲烷，四氢呋喃，乙醚，乙醇，乙酸乙酯，丙酮。

6、根据权利4所述的辅酶Q₁₀脂质体的药物制剂的制备方法中，挤出滤膜为0.1-10m。

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