CN1822824A - 治疗退化性盘疾病的方法 - Google Patents

治疗退化性盘疾病的方法 Download PDF

Info

Publication number
CN1822824A
CN1822824A CNA2004800202597A CN200480020259A CN1822824A CN 1822824 A CN1822824 A CN 1822824A CN A2004800202597 A CNA2004800202597 A CN A2004800202597A CN 200480020259 A CN200480020259 A CN 200480020259A CN 1822824 A CN1822824 A CN 1822824A
Authority
CN
China
Prior art keywords
antagonist
preparation
tnf
dish
high specific
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CNA2004800202597A
Other languages
English (en)
Inventor
H·塞尔汉
T·M·迪莫罗
M·阿塔维亚
M·格雷西
S·卡迪亚拉
D·乌尔巴恩斯
S·布鲁德尔
G·科林斯
L·J·布朗
J·吉辛
P·L·普罗哈
C·史密斯
J·西基尔卡
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
DePuy Spine LLC
Original Assignee
DePuy Spine LLC
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by DePuy Spine LLC filed Critical DePuy Spine LLC
Publication of CN1822824A publication Critical patent/CN1822824A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
    • A61K35/28—Bone marrow; Haematopoietic stem cells; Mesenchymal stem cells of any origin, e.g. adipose-derived stem cells
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61B—DIAGNOSIS; SURGERY; IDENTIFICATION
    • A61B17/00—Surgical instruments, devices or methods, e.g. tourniquets
    • A61B17/56—Surgical instruments or methods for treatment of bones or joints; Devices specially adapted therefor
    • A61B17/58—Surgical instruments or methods for treatment of bones or joints; Devices specially adapted therefor for osteosynthesis, e.g. bone plates, screws, setting implements or the like
    • A61B17/68—Internal fixation devices, including fasteners and spinal fixators, even if a part thereof projects from the skin
    • A61B17/70—Spinal positioners or stabilisers ; Bone stabilisers comprising fluid filler in an implant
    • A61B17/7061—Spinal positioners or stabilisers ; Bone stabilisers comprising fluid filler in an implant for stabilising vertebrae or discs by improving the condition of their tissues, e.g. using implanted medication or fluid exchange
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
    • A61K35/32—Bones; Osteocytes; Osteoblasts; Tendons; Tenocytes; Teeth; Odontoblasts; Cartilage; Chondrocytes; Synovial membrane
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/177—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
    • A61K38/1793—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants for cytokines; for lymphokines; for interferons
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/18—Growth factors; Growth regulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/18—Growth factors; Growth regulators
    • A61K38/1841—Transforming growth factor [TGF]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/18—Growth factors; Growth regulators
    • A61K38/1875—Bone morphogenic factor; Osteogenins; Osteogenic factor; Bone-inducing factor
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/19—Cytokines; Lymphokines; Interferons
    • A61K38/20—Interleukins [IL]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/36—Blood coagulation or fibrinolysis factors
    • A61K38/363—Fibrinogen
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/43—Enzymes; Proenzymes; Derivatives thereof
    • A61K38/46—Hydrolases (3)
    • A61K38/48—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
    • A61K38/482—Serine endopeptidases (3.4.21)
    • A61K38/4833—Thrombin (3.4.21.5)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
    • A61K39/3955—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against proteinaceous materials, e.g. enzymes, hormones, lymphokines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
    • A61K47/34—Macromolecular compounds obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyesters, polyamino acids, polysiloxanes, polyphosphazines, copolymers of polyalkylene glycol or poloxamers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0085—Brain, e.g. brain implants; Spinal cord
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y304/00—Hydrolases acting on peptide bonds, i.e. peptidases (3.4)
    • C12Y304/21—Serine endopeptidases (3.4.21)
    • C12Y304/21005—Thrombin (3.4.21.5)
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
    • G01N33/6863—Cytokines, i.e. immune system proteins modifying a biological response such as cell growth proliferation or differentiation, e.g. TNF, CNF, GM-CSF, lymphotoxin, MIF or their receptors
    • G01N33/6869—Interleukin
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
    • G01N2333/435—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans
    • G01N2333/52—Assays involving cytokines
    • G01N2333/54—Interleukins [IL]

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Developmental Biology & Embryology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Surgery (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)

Abstract

本文描述了通过向患病椎间盘注射拮抗剂治疗退化性盘疾病的方法，所述拮抗剂为诸如高特异性细胞因子拮抗剂、MMP的高亲和性拮抗剂、高度特异的p38激酶抑制剂，和环素化合物。

Description

治疗退化性盘疾病的方法
相关申请
本申请是2003年8月13日申请的美国申请No.10/640,412和2003年7月31日申请的美国申请No.10/631,487的部分继续申请，美国申请No.10/631,487是2003年6月31日申请的美国申请No.10/610,355的部分继续申请，美国申请No.10/610,355是2003年6月6日申请的美国申请No.10/456,948的部分继续申请，美国申请No.10/456,948要求2003年5月13日申请的美国临时申请No.60/470,098的利益。将上面的申请的完整教导完全并入本文作为参考。
发明背景
天然的椎间盘含有凝胶样髓核(nucleus pulposus)，其由纤维状纤维环(annulus fibrosus)包围。在轴负荷下，髓核压缩并将该负荷径向地转移到纤维环。纤维环的层叠性质为其提供了高抗张强度并且因此允许其响应该转移的负荷而快速径向扩张。
在健康椎间盘中，髓核中的细胞产生含有高百分比蛋白聚糖的细胞外基质(ECM)。这些蛋白聚糖含有硫酸化官能团，其保持水分，从而为髓核提供缓冲性质。这些髓核细胞还可以分泌少量细胞因子以及基质金属蛋白酶(MMPs)。这些细胞因子和MMPs帮助调节髓核细胞的代谢。
在退化性盘疾病(degenerative disc disease，DDD)的一些情况中，脊柱的其他部分中机械不稳定性导致椎间盘的逐渐退化。在这些情况中，对髓核增加的负荷和压力导致盘内的细胞(或者侵入的巨噬细胞)释放大于正常量的上述细胞因子。在DDD的其他情况中，遗传因素或者程序性细胞死亡也可以导致髓核内细胞释放毒性量的这些细胞因子和MMPs。在一些情况中，盘的抽吸作用可能功能失常(由于例如，髓核内蛋白聚糖的浓度降低)，从而阻碍营养物向盘内的流动以及废物从盘的流出。该清除废物能力的降低可以导致促炎细胞因子和/或MMPs的高水平积累，它们可以导致神经刺激和疼痛。
随着DDD的发展，髓核中存在的毒性水平的细胞因子和MMPs开始降解细胞外基质。具体地，MMPs(由细胞因子介导)开始切割蛋白聚糖的持水部分，从而降低它们的持水能力。该降解导致弹性降低的髓核，因此改变盘内的负荷模式，从而可能导致纤维环的脱层(delamination)。这些改变导致更大的机械不稳定性，从而导致细胞释放更多细胞因子，从而通常上调MMPs。随着该破坏性级联继续和DDD进一步发展，盘(disc)开始膨胀(“突出的盘”)，然后最终破裂，导致髓核接触脊髓和产生疼痛。
发明概述
本发明人已经开发了通过药物治疗有效治疗退化性盘疾病的多种方法。
根据本发明的一个实施方案，本发明人已经开发了治疗椎间盘的方法，其中透盘(即，靶组织是正在退化的盘)施用拮抗剂(例如，蛋白质)。文中所用的拮抗剂指抑制剂，例如，一种或几种蛋白质(如细胞因子和MMPs)，如从髓核和/或纤维环细胞释放的蛋白质的抑制剂。此类蛋白质可以由于DDD而以毒性量释放。在一些实施方案中，拮抗剂选自高特异性细胞因子拮抗剂(HSCA)、高亲和性抗基质金属蛋白酶(HAAMMP)、p38激酶的拮抗剂或者环素(cycline)化合物。
相信直接透盘对靶定的盘施用此类拮抗剂具有几个优点：
首先，HSCAs抑制细胞因子的活性。HAAMMPs和环素化合物抑制MMP的活性。因为已知细胞因子(如白介素和TNF-α)和MMPs在髓核的细胞外基质(ECM)的降解中起主要作用，将拮抗剂以治疗有效量直接注射到盘中可以防止细胞因子和/或MMP引起进一步的ECM降解。实际上，拮抗剂(例如，HAAMMPs)的透盘施用帮助阻止正在退化的盘的老化过程。因此，本发明设法在DDD的较早的阶段治疗退化性盘，从而防止ECM的降解。
其次，环素化合物和某些HSCAs抑制TNF-α的活性。还已知纤维环内存在神经末梢伤害性感受器，并且TNF-α参与神经的刺激。相信向盘间隙注射TNF-α拮抗剂(如环素化合物)还防止TNF-α引起盘内的神经刺激。从而，可以有效消除这些神经刺激导致的疼痛。
第三，因为某些拮抗剂是特异的，它们不抑制非靶定的细胞、组织或者蛋白质。此外，拮抗剂可以与其他(即额外的)治疗剂(如生长因子)联合，所述其他治疗剂也可以注射到盘内而不减小那些治疗剂的有效性。
第四，因为盘的纤维环部分含有致密的纤维结构，盘的该外部组分可以提供拮抗剂的适宜的贮库(depot)，从而，增加其在盘内的半寿期。
第五，因为侵入性巨噬细胞、髓核细胞或者纤维环细胞的至少一种至少可以分泌MMPs，所以环素化合物的透盘注射将有利地在它们的起源处攻击MMPs。
因此，在本发明的一个方面，提供了治疗具有髓核的椎间盘中退化性盘疾病的方法，其包括透盘施用含有有效量制剂的制剂，其中拮抗剂选自a)高特异性细胞因子拮抗剂，b)高亲和性抗基质金属蛋白酶(HAAMMP)，c)p38激酶的拮抗剂(即，p38激酶抑制剂)，和d)环素化合物。
在一个实施方案中，提供了治疗具有髓核的椎间盘中退化性盘疾病的方法，包括透盘施用有效量的制剂，该制剂包含：a)高特异性细胞因子拮抗剂，b)高亲和性抗基质金属蛋白酶(HAAMMP)，c)p38激酶的拮抗剂，和d)环素化合物。
在一个实施方案中，以一定剂量施用拮抗剂，例如p38激酶抑制剂以产生约5μg/kg到约50μg/kg的局部组织浓度。在一个实施方案中，以小于约1cc的量施用制剂。在一个实施方案中，拮抗剂以至少约100mg/ml的量存在于制剂中。在一个实施方案中，拮抗剂以不超过约0.5mg的量存在于制剂中。
本发明在此描述的一些实施方案中，制剂还含有缓释装置，例如，含有水凝胶的缓释装置。在一个实施方案中，缓释装置提供受控的释放。在另一实施方案中，缓释装置提供了连续释放。在再一个实施方案中，缓释装置提供了间歇性释放。
在一个实施方案中，缓释装置含有生物传感器。在一个实施方案中，缓释装置包含许多微球体。在一个实施方案中，缓释装置包含炎症响应性递送系统。
在另一实施方案中，拮抗剂主要通过其通过持续递送装置的扩散从持续递送装置释放。在再一个实施方案中，持续递送装置是聚合物。在一个实施方案中，拮抗剂主要通过持续递送装置的生物降解从持续递送装置释放。
在一个实施方案中，制剂还含有至少一种额外的(例如，第二、第三或第四种)治疗剂。在一个实施方案中，至少一种额外的治疗剂与拮抗剂共同施用(例如，顺序或同时施用)。在一个实施方案中，制剂以有效减少疼痛的量施用。在一个实施方案中，制剂以有效抑制髓核胞外基质的降解的量施用。额外的治疗剂可以含有本文公开的任意额外的活性剂，包括本文公开的任意拮抗剂。
在一个实施方案中，额外的治疗剂是生长因子。生长因子可以以有效修复椎间盘组织的量存在。在一个实施方案中，生长因子是TGF-β。在一个实施方案中，生长因子由血小板浓缩物提供。
在一个实施方案中，额外的治疗剂是质粒DNA。
在一个实施方案中，在透盘施用制剂前除去髓核。
在一个实施方案中，通过药物泵施用制剂。在再一个实施方案中，通过针头施用制剂。在一个实施方案中，针头具有24号的最大号。在再一个实施方案中，所施用的制剂的体积为约0.03ml到约0.3ml。
在本发明的一些实施方案中，施用包括提供附着到纤维环外壁的贴剂中的制剂。在另一实施方案中，施用包括在与纤维环外壁紧密相邻的位置处的贮库中提供制剂。在再一个实施方案中，施用包括在与相邻椎体的终板紧密相邻位置处的贮库中提供制剂。在另一个实施方案中，在与纤维环的外壁紧密相邻处提供制剂。在再一个实施方案中，将制剂注射到髓核中。在一个实施方案中，将制剂注射到纤维环中。
在一个实施方案中，正在退化的盘是完整的盘。在另一实施方案中，正在退化的盘是破裂的盘。在一个实施方案中，正在退化的盘是脱层的。在一个实施方案中，正在退化的盘具有裂缝。
还提供了治疗正在退化的盘疾病的含有拮抗剂的制剂，所述拮抗剂选自：
a)高特异性细胞因子拮抗剂，
b)高亲和性抗基质金属蛋白酶HAAMMP，
c)p38激酶的拮抗剂，
d)环素化合物；和
e)额外的治疗剂，其选自：
i).生长因子，和
ii).质粒DNA。
还提供了治疗性治疗正在退化的盘的方法，其包括步骤：
a)确定盘内促炎蛋白质的水平，
b)将所述水平与促炎蛋白质的预定水平比较，和
c)向盘内注射拮抗剂，其中拮抗剂选自：
i)高特异性细胞因子拮抗剂，
ii)高亲和性抗基质金属蛋白酶HAAMMP，
iii)p38激酶抑制剂的高特异性拮抗剂，和
iv)环素化合物。
在一个实施方案中，促炎蛋白质是白介素。在一个实施方案中，白介素的预定水平为至少100pg/ml。
在一个实施方案中，促炎蛋白质是白介素-6。在一个实施方案中，白介素-6的预定水平为至少100pg/ml。在一个实施方案中，白介素-6的预定水平为至少250pg/ml。
在一个实施方案中，促炎蛋白质是白介素-8。在一个实施方案中，白介素-8的预定水平为至少500pg/ml。
在一个实施方案中，促炎蛋白质是PEG2。在一个实施方案中，PEG2的预定水平为至少1000pg/ml。
在一个实施方案中，促炎蛋白质是TNF-α。在一个实施方案中，TNF-α的预定水平为至少20pg/ml。在一个实施方案中，TNF-α的预定水平为至少30pg/ml。在一个实施方案中，TNF-α的预定水平为至少1000pg/盘。
还提供了预防人类个体中椎间盘退化的方法，其包括：
a)确定个体的遗传图；
b)比较该个体的遗传图与处于危险中人的预定的遗传图水平；
c)确定该个体是处于危险的患者；和
d)向该个体的盘中注射拮抗剂，其中拮抗剂选自：
i)高特异性细胞因子拮抗剂，
ii)MMPs的高亲和性拮抗剂，
iii)p38激酶的高特异性拮抗剂，和
iv)环素化合物。
还提供了治疗具有髓核的椎间盘中退化性盘疾病的方法，该方法包括向椎间盘中透盘施用有效量的制剂，该制剂含有COX-2酶的拮抗剂、NO合酶的高特异性拮抗剂、高特异性抗氧化剂、高特异性抗增殖剂和/或高特异性抗程序性细胞死亡剂。
在一些实施方案中，所述制剂含有细胞因子化合物和至少一种高度特异的拮抗剂(HAS)，其选自：
i)促炎白介素的抑制剂；
ii)TNF-α合成抑制剂；
iii)膜结合TNF-α的抑制剂；
iv)TNF-α的天然受体的抑制剂；
v)NO合酶的抑制剂。
vi)PLA2酶的抑制剂；
vii)抗增殖剂；
viii)抗氧化剂；
ix)程序性细胞死亡抑制剂，其选自EPO模拟肽、EPO模拟体(mimetibody)、IGF-I、IGF-II和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase)抑制剂；
x)MMPs抑制剂；和
xi)p38激酶抑制剂。
发明详述
对于本发明，术语“抑制剂”和“拮抗剂”可以互换使用。蛋白质可以在合成水平上、翻译水平上受到脱落、抗体或者可溶性受体的抑制。术语“患者”指具有正在退化的盘的人。文中所用的拮抗剂包括，例如，来自DDD患者的盘或盘中存在的物质的抑制剂。例如，所述物质可以是细胞因子或MMPs。拮抗剂可以包括，例如，高特异性细胞因子拮抗剂、高亲和性抗基质金属蛋白酶(HAAMMP)、p38激酶抑制剂(即，p38激酶的拮抗剂)，例如，p38激酶的高特异性拮抗剂，和环素化合物(cycline compound)。
对于本发明，“透盘施用”包括，但不限于：
a)将制剂注射到正在退化的盘(degenerating disc)，如相对完整的正在退化的盘的髓核中；
b)将制剂注射到正在退化的盘，如相对完整的正在退化的盘的纤维环中；
c)提供附着到纤维环外壁的贴剂中的制剂；
d)在纤维环外壁外但是密切接近纤维环外壁的位置处的贮库中提供制剂(“透环施用”)；和
e)在相邻椎体终板外但是密切接近相邻椎体终板的位置处的贮库中提供制剂(下文中，“透终板施用”)。
因为DDD是连续过程，治疗药物所施用的正在退化的盘可能处于多种退化状态的任意一种。因此，正在退化的盘可以是完整盘。正在退化的盘可以是突出的盘(即，其中纤维环的一部分具有凸起)。正在退化的盘可以是破裂的盘(即，其中纤维环已受到破坏并且大量髓核已经渗出)。正在退化的盘可以是脱层的(即，其中纤维环的相邻层已经分离)。正在退化的盘可以具有裂缝(即，其中纤维环具有细小裂纹或撕裂，通过其可以渗漏来自髓核的所选分子)。在所有这些退化性状态中，纤维环或者髓核的胞外基质也在退化。
在一个实施方案中，本发明涉及直接通过患病的椎间盘提供能够特异抑制盘中存在的物质的至少一种拮抗剂，其中拮抗剂选自：a)高特异性细胞因子拮抗剂，b)高亲和性抗基质金属蛋白酶(HAAMMP)，c)p38激酶拮抗剂，或者d)环素化合物。
美国公布的专利申请No.US 2003/0039651(″Olmarker I″)教导了神经疾病的治疗性治疗，其包括施用治疗有效剂量的化合物，所述化合物包括MMPs的抑制剂、选自TNF抑制剂(特异和非特异的)、IL-1抑制剂、IL-6抑制剂、IL-8抑制剂、FAS抑制剂、FAS配体抑制剂，和IFN-γ抑制剂的至少两种物质。
在Olmarker I的实施例中，教导了通过全身途径施用的治疗性化合物。具体地，Olmarker I教导“TNF-α的主要贡献可能来源于募集的、聚集的和甚至外渗的白细胞，并且成功的药理学阻断可以仅通过全身治疗实现”。注意到，Olmarker I似乎劝阻向将要应用于脊髓的自体移植的髓核局部加入至少一种治疗性化合物(多西环素)。
PCT公布的专利申请No.WO 02/100387(″OlmarkerII″)教导通过施用抗血管生成物质预防椎间盘的新血管生成和/或新神经支配。然而，Olmarker II再次教导全身性施用这些治疗剂。
美国专利No.6,419,944(″Tobinick″)公开用细胞因子拮抗剂治疗突出的盘。Tobinick教导局部施用包括在脊髓附近皮下注射。因此，Tobinick没有教导包括持续递送药物以治疗DDD的方法，也没有教导向盘中直接施用药物。
美国公布的专利申请No.2003/0049256(″Tobinick II″)公开通过椎间注射，优选通过脊柱的两个相邻棘突之间的解剖学区域内的皮肤注射实现向脊柱相邻的解剖学区域注射此类治疗分子。
Tobinick II还教导通过在人的椎间注射可以施用治疗化合物并且剂量水平为每剂1mg到300mg，剂量间隔短至2天。Tobinick II还公开以治疗有效剂量施用其他治疗化合物，所述剂量通常为每剂10mg到200mg，并且它们的剂量间隔将短至每天一次。
Tobinick，Swiss Med.Weekly，133：170-7(2003)(″Tobinick III″)教导脊周和硬膜外施用TNF抑制剂。
Karppinen，Spine，28(8)：750-4(2003)教导给患有坐骨神经痛的患者静脉注射或者口服英夫单抗(infliximab)。
对于Tobinick I和Tobinick II，Karppinen没有教导包括持续递送用于治疗DDD的药物的方法，也没有教导向椎间盘间隙直接施用药物。
美国专利No.6,352,557(Ferree)教导向颗粒(morselized)胞外基质加入治疗性物质，如消炎药物，并且将该组合物注射到椎间盘。然而，许多消炎剂是非特异的，因此可能对其他细胞、蛋白质和组织产生不需要的副作用。此外，这些活性剂的疼痛减轻效果通常仅是暂时的。最后，这些活性剂通常仅减轻疼痛，并且不是治疗性的，也不是恢复性的。
Alini，Eur.Spine J.，11(Supp.2)：S215-220(2002)教导早期DDD治疗，包括注射刺激细胞代谢活性的蛋白水解酶或者生物因子(即，生长因子)的抑制剂以便减慢退化过程。蛋白水解酶的抑制剂组成了一大类化合物，包括i)蛋白水解酶合成抑制剂和ii)蛋白水解酶活性抑制剂。Alini I没有具体说明蛋白水解酶的任何希望类型的抑制剂。
美国公布的专利申请US 2002/0026244(″Trieu″)公开了含有水凝胶的椎间盘核，其可以递送所需药理学剂。Trieu教导这些药理学剂可以包括生长因子，如TGF-β和消炎药，包括类固醇。Trieu还教导这些药理学剂可以分散在水凝胶内，水凝胶具有适宜水平的孔隙率，从而以所希望的速率释放药理学剂。Trieu教导这些试剂可以在周期负荷或者再吸收时释放。
Goupille，Spine，23(14)：1612-1626(1998)鉴定MMPs的组织抑制剂(“TIMPs”)是MMP活性的降解剂。Goupille报导TIMP-1和TIMP-2以1∶1的摩尔比非共价结合活性MMPs并特异抑制它们的酶活性。然而，Goupille还鉴定糖皮质激素、视黄酸、TGF-β、PGE1和PGE2为MMP合成的抑制剂；鉴定α2巨球蛋白、氧肟酸、其衍生物、四环素和喹诺酮为MMP活性抑制剂，鉴定bFGF、EGF、Retenoicacid、TGF-β、IL-6、IL-1 LIF、地塞米松、佛波酯和合成维生素A类似物为TIMPs的刺激剂。此外，关于施用途径，Goupille明确认定仅口服途径。
Takegami，Spine，27(12)：1318-25(2000)教导向盘间隙注射TGF-β导致受细胞因子破坏的细胞外基质的补充增强。Takegami还教导注射到椎间盘的生长因子的半寿期可预期比注射到滑膜关节的更长，因为髓核被纤维环的纤维结构包围，从而，提供了封闭的环境。Diwan，Tissue Engineering in Orthopedic Surgery，31(3)：453-464(2000)报导了另一篇Takegami的文章，其断定将必须使用允许延长递送(＞3天)的递送系统来得到生长因子的观察到的效果。
Alini，Spine 28(5)：446-54(2003)公开接种细胞的胶原-透明质酸支架，其补加生长因子如TGF-β、bFGF和IGF-1，所述支架用于产生髓核。
Maeda等人Spine 25(2)：166-169(2000)报导了暴露于IL-1的兔纤维环对白介素-1受体拮抗剂蛋白质(IRAP)的体外应答。Maeda提出IRAP可以用于抑制盘的降解。
Yabuki，Spine，26(8)：870-5(2001)教导用于治疗坐骨神经痛的抗-TNF药物。
美国专利No.6,277,969(″Le″)公开了抗-TNF抗体用于治疗TNF-介导的病理的用途。Le教导肠胃外施用抗体。
Ariga，Spine，28(14)：1528-33(2003)报导了将p38 MAP激酶抑制剂应用于器官-培养的椎间盘培养物增加了培养物中终板软骨细胞中程序性细胞死亡的发生率。
Olmarker，Spine，26(8)：863-9(2001)(″Olmarker I″)和Aoki，Spine，27(15)：1614-17(2002)教导TNF-α(TNF-alpha)似乎在产生与接触脊髓的神经根的髓核相关的疼痛中起作用。Olmarker劝阻在脊柱相关的药物治疗中使用非特异TNF-α抑制剂，尤其具有抗生素效果的那些非特异TNF-α抑制剂。
美国公布的专利申请No.U.S.2003/0039651(″Olmarker II″)教导神经疾病的治疗性治疗，其包括施用治疗有效剂量的多种药物，包括环素化合物。根据Olmarker，四环素是TNF-α的非特异抑制剂。
在Olmarker II的实施例中，Olmarker II还教导这些药物通过全身途径施用。具体地，Olmarker II教导“TNF-α的主要贡献来源于募集的、聚集的和甚至外渗的白细胞，并且成功的药理学阻断可以仅通过全身治疗实现”。注意到，Olmarker II似乎劝阻向将要应用于脊髓的自体移植的髓核局部加入多西环素。
PCT公布的专利申请No.WO 02/100387(″Olmarker III″)教导通过施用抗血管生成物质预防椎间盘的新血管生成和/或新神经支配。然而，Olmarker III再次教导全身性施用这些治疗剂。
美国专利No.6,419,944(″Tobinick″)公开用细胞因子拮抗剂(包括英夫单抗)治疗突出的盘。然而，Tobinick教导局部施用包括在脊髓附近皮下注射。因此，Tobinick没有教导包括持续递送药物以治疗DDD的方法，也没有教导向盘中直接施用环素化合物。
美国公布的专利申请No.2003/0049256(″Tobinick II″)公开通过椎间注射，优选通过脊柱的两个相邻棘突之间的解剖学区域内的通过皮肤的注射实现向脊柱相邻的解剖学区域注射此类治疗分子。
Tobinick，Swiss Med.Weekly，133：170-77(2003)(″Tobinick III″)教导脊周和硬膜外施用特异TNF-α抑制剂。
Karppinen，Spine，28(8)：750-4(2003)教导向患有坐骨神经痛的患者静脉内注射或者口服英夫单抗。
对于Tobinick I和Tobinick II，Karppinen没有教导包括持续递送用于治疗DDD的药物的方法，也没有教导向盘中直接施用环素化合物。
总之，尽管研究人员已经一般性教导了透盘施用蛋白水解酶抑制剂，但是当研究人员具体指定施用环素化合物用于脊柱相关的治疗时，研究人员似乎仅教导向盘外部的组织施用某些拮抗剂(例如，环素化合物)。此外，Olmarker II似乎劝阻向髓核施用环素化合物。
高亲和性抗基质金属蛋白酶(HAAMMP)
在一个实施方案中，以有效量施用HAAMMP以抑制退化过程期间盘细胞释放的MMPs的特异作用。在一个实施方案中，以有效量施用HAAMMP以抑制髓核中存在的MMPs，从而帮助阻业细胞外基质的降解。
在一个实施方案中，HAAMMP是重组的。在一个实施方案中，HAAMMP以自体形式存在。HAAMMP可以例如，以自体浓缩形式存在。在一些实施方案中，HAAMMP含有螯合基团，其紧密结合MMP中活性位点中存在的锌组分。此类HAAMMPs可以选自Gordon，Clin.Exp.Rheumatol.，11(Supp 8)：S91-4(1993)；和Johnson，J.，EnzymeInhib.，2：1-22(1987)中公开的物质。
在一些实施方案中，HAAMMP是MMP的天然抑制剂，例如，MMPs的组织抑制剂(TIMP)。在一些实施方案中，TIMP选自TIMP-1和TIMP-2。在一些实施方案中，TIMP是自体的并通过过滤、离心或者免疫附着方法浓缩。在其他实施方案中，TIMP经重组生产并且优选以正常患者中发现的浓度的例如，至少1000倍的浓度存在。在一些实施方案中，可以从异种来源得到TIMP。
在一些实施方案中，HAAMMP是聚集蛋白聚糖酶的特异抑制剂(即，抗-聚集蛋白聚糖酶)。在一个实施方案中，抗-聚集蛋白聚糖酶以自体浓缩形式存在。在一个实施方案中，抗-聚集蛋白聚糖酶为重组抗-聚集蛋白聚糖酶。
在一些实施方案中，HAAMMP是胶原酶MMP的特异拮抗剂。在一些实施方案中，HAAMMP是溶基质素MMP的特异拮抗剂。在一些实施方案中，HAAMMP是明胶酶MMP的特异拮抗剂。在一些实施方案中，HAAMMP是膜MMP的特异拮抗剂。
在一些实施方案中，靶定的(targeted)MMP选自MMP-2、MMP-3和MMP-8。打靶(targeting)MMP-2和/或MMP-3是所希望的，因为认为这些MMPs降解蛋白聚糖。打靶MMP-8是所希望的，因为认为该MMP降解聚集蛋白聚糖。
在一些实施方案中，当拮抗剂是HAAMMP时，额外的治疗物质(即，试剂)是高特异性细胞因子拮抗剂(“HSCA”)。例如，高亲和性细胞因子拮抗剂可以选自TNF-α的HSCA，和白介素的HSCA。在一个实施方案中，至少一种治疗剂是TNF-α的拮抗剂。在一个实施方案中，另一种治疗剂是白介素的拮抗剂。
因为许多促炎蛋白质在盘退化中起作用，并且本发明的许多拮抗剂是高度特异的，所以还认为直接向盘中注射本发明的至少两种高度特异拮抗剂将是有益的。
因此，根据本发明，提供了治疗具有髓核的椎间盘中退化性盘疾病的方法，其包括施用含有HAAMMP，和促炎细胞因子的至少两种高特异性拮抗剂，所述促炎细胞因子选自TNF-α、白介素(优选IL-1、IL-6和IL-8)、FAS、和FAS配体，和IFN-γ。
细胞因子拮抗剂
在一个实施方案中，HSCA抑制退化过程中盘细胞或者侵入的巨噬细胞释放的特定促炎细胞因子的作用。
在一些实施方案中，所述拮抗剂能够特异抑制选自TNF-α、白介素(优选IL-1、IL-6和IL-8)、FAS、和FAS配体，和IFN-γ的促炎细胞因子。此类特异抑制剂包括在Olmarker II的5-18页鉴定的那些抑制剂。
在一些实施方案中，HSCA通过防止细胞因子的产生来抑制细胞因子。在一些实施方案中，HSCA通过结合到膜结合的细胞因子抑制细胞因子。在其他实施方案中，HSCA通过结合溶解的(例如，可溶性)细胞因子抑制细胞因子。在一些实施方案中，HSCA通过结合到膜结合的细胞因子和溶解的细胞因子抑制细胞因子。在一些实施方案中，HSCA是单克隆抗体(“mAb”)。mAb的使用是非常希望的，因为它们特异结合某种靶蛋白质并且不结合其他蛋白质。在一些实施方案中，HSCA通过结合靶标细胞因子的天然受体抑制细胞因子。
在一些实施方案中，HSCA通过防止细胞因子产生来抑制细胞因子。其一个实例是p38促分裂原活化蛋白(MAP)激酶的抑制剂。
在一些实施方案中，HSCA是TNF-α的的特异拮抗剂。在一些实施方案中，TNF抑制剂通过结合膜结合的TNF以防止其从膜释放而抑制TNF。在其他实施方案中，TNF抑制剂通过结合溶解的TNF抑制TNF。其一个实例是etanercept(ENBREL，Amgen)。在一些实施方案中，TNF抑制剂通过结合膜结合的TNF和结合溶解的TNF抑制TNF。其一个实例是REMICADE英夫单抗。在一些实施方案中，HSCA通过结合靶标细胞因子的天然受体抑制细胞因子(例如，TNF-α)。在一些实施方案中，TNF-α抑制剂是TNF-α合成抑制剂。
优选的TNF拮抗剂包括，但不限于下面的：etanercept(ENBREL，Amgen)、英夫单抗(REMICADE-Johnson andJohnson)；D2E7-人抗-TNF单克隆抗体(Knoll Pharmaceuticals，Abbott Laboratories)；CDP 571(人源化抗-TNF IgG4抗体)；CDP 870(抗TNFα人源化单克隆抗体片段)，都来自Celltech；可溶性I型TNF受体(Amgen)；聚乙二醇化可溶性I型TNF受体(PEGs TNF-R1)(Amgen)；和onercept-重组TNF结合蛋白(r-TBP-1)(Serono)。
适于本发明的组合物、组合治疗、共同施用、装置和/或方法(任选还包含本发明的至少一种抗体、其特定部分和/或变体)的TNF拮抗剂包括，但不限于，抗-TNF抗体(例如，至少一种TNF拮抗剂(例如，但不限于，TNF化学拮抗剂或者蛋白质拮抗剂、TNF单克隆或多克隆抗体或者片段、可溶性TNF受体(例如，p55、p70或者p85)或者其片段、融合多肽，或者小分子TNF拮抗剂，例如，TNF结合蛋白质I或II(TBP-1或TBP-II)、nerelimonmab、REMICADE英夫单抗、enteracept(ENBREL)、adalimulab(HUMIRATM)、CDP-571、CDP-870、阿非莫单抗(afelimomab)、来尼喹新(lenercept)，等等)、其抗原结合片段、和特异结合TNF的受体分子；防止和/或抑制TNF合成、TNF释放和其对靶细胞的作用的化合物，如沙立度胺、替尼达普、磷酸二酯酶抑制剂(例如，己酮可可碱和环戊苯吡酮)、A2b腺苷受体激动剂和A2b腺苷受体增强剂；防止和/或抑制TNF受体信号转导的化合物，如促分裂原活化蛋白(MAP)激酶抑制剂；阻断和/或抑制膜TNF切割的化合物，如金属蛋白酶抑制剂；阻断和/或抑制TNF活性的化合物，如血管紧张肽转变酶(ACE)抑制剂(例如，卡托普利)；和阻断和/或抑制TNF产生和/或合成的化合物，如MAP激酶抑制剂。
文中所用“肿瘤坏死因子抗体”、“TNF抗体”、“TNFα抗体”、或者片段等等在体外、原位和/或优选体内降低、阻断、抑制、消除或者干扰TNFα活性。例如，本发明的适宜的TNF人抗体可以结合TNFα并且包括抗-TNF抗体、其抗原结合片段，和其特异结合TNF-alpha(TNFα)的特定突变体或者结构域。适宜的TNF抗体或片段也可以降低、阻断、消除、干扰、防止和/或抑制TNF RNA、DNA或者蛋白质合成、TNF释放、TNF受体信号转导、膜TNF切割、TNF活性、TNF产生和/或合成。
嵌合抗体cA2由高特异性中和性小鼠抗人TNFα IgG1抗体的抗原结合可变区(称作A2)和人IgG1的恒定区κ免疫球蛋白组成。人IgG1 Fc区提高了同种异型抗体效应子功能，增加循环血清半寿期并降低了抗体的免疫原性。嵌合抗体cA2的亲合力和表位特异性来源于鼠抗体A2的可变区。在特定实施方案中，编码鼠抗体A2的可变区的核酸的优选来源是A2杂交瘤细胞系。
嵌合A2(cA2)以剂量依赖方式中和天然和重组人TNFα的细胞毒性效应。根据嵌合抗体cA2和重组人TNFα的结合测定法，计算嵌合抗体cA2的特异性常数为1.04×1010M-1。测定单克隆抗体特异性和竞争抑制的特异性的优选方法可以见
Harlow et al.，Antibodies：A Laboratory Manual，ColdSpring Harbor Laboratory Press，Cold Spring Harbor，New York(1988)；Colligan etal.，eds.，Current Protocols in Immunology，Greene Publishing Assoc.and WileyInterscience，New York，(1992-2000)；Kozbor et al.，lmmunol.Today，4：72-79(1983)；Ausubel et al.，eds.Current Protocols in Molecular Biology，WileyInterscience，New York(1987-2000)；and Muller，Meth.Enzymol.，92：589-601(1983)，本文完整引用这些参考文献作为参考。
在特定实施方案中，通过称作c134A的细胞系产生鼠单克隆抗体A2。通过称作c168A的细胞系产生嵌合抗体cA2。
可以用于本发明的单克隆抗-TNF抗体的额外实例在本领域中已被描述(见，例如，美国专利No.5,231,024；Mller，A.等人，Cytokine2(3)：162-169(1990)；美国申请No.07/943,852(1992年9月11日提交)；Rathjen等人，国际公开No.WO 91/02078(1991年2月21日公布)；Rubin等人，EPO专利公开No.0 218 868(1987年4月22日公布)；Yone等人，EPO专利公开No.0 288 088(1988年10月26日)；Liang，等人，Biochem.Biophys.Res.Comm.137：847-854(1986)；Meager，等人，Hybridoma 6：305-311(1987)；Fendly等人，Hybridoma6：359-369(1987)；Bringman，等人，Hybridoma 6：489-507(1987)；和Hirai，等人，J.Immunol.Meth.96：57-62(1987)，本文完整引用这些参考文献作为参考。
可用于本发明的优选的TNF受体分子为以高特异性结合TNFα(见，例如，Feldmann等人，国际公开No.WO 92/07076(1992年4月30日公布)；Schall等人，Cell，61：361-370(1990)；和Loetscher等人，Cell 61：351-359(1990)，本文完整引用这些参考文献作为参考)和任选地，具有低免疫原性的那些分子。具体地，55kDa(p55 TNF-R)和75kDa(p75 TNF-R)TNF细胞表面受体可以用于本发明。这些受体的截短形式包括该受体的细胞外结构域(ECD)或者其功能部分(见，例如，Corcoran等人，Eur.J.Biochem.223：831-840(1994))，所述截短形式也可以用于本发明。TNF受体的含有ECD的截短形式已经在尿和血清中检测到为30kDa和40kDa TNF抑制性结合蛋白质(Engelmann，H等人，J.Biol.Chem.265：1531-1536(1990))。TNF受体多聚体分子和TNF免疫受体融合分子，和其衍生物和片段或部分是可以用于本发明的方法和组合物的TNF受体分子的额外的实例。可以用于本发明的TNF受体分子的特征是它们能够长期治疗患者，好到极好地减轻症状并且具有低毒性。低免疫原性和/或高特异性，以及其他未定的特征可能促进了所实现的治疗结果。
可用于本发明的TNF受体多聚体分子包括两个或多个TNF受体的ECD的全部或功能部分，所述两个或多个TNF受体通过一个或多个多肽连接体或者其他非肽连接体，如聚乙二醇(PEG)连接。多聚体分子还可以含有分泌蛋白质的信号肽，其指导多聚体分子的表达。这些多聚体分子和它们的产生方法已经在美国申请No.08/437,533(1995年5月9日提交)中描述，将其内容完整并入本文作为参考。
可用于本发明的方法和组合物的TNF免疫受体融合分子包含一种或多种免疫球蛋白分子的至少一部分和一种或多种TNF受体的全部或功能部分。这些免疫受体融合分子可以装配成单体、或者异-或同多聚体。免疫受体融合分子还可以是单价或多价的。此类TNF免疫受体融合分子的一个实例是TNF受体/IgG融合蛋白质。TNF免疫受体融合分子和它们的产生方法已经在本领域描述(Lesslauer等人，Eur.J.Immunol.21：2883-2886(1991)；Ashkenazi等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 88：10535-10539(1991)；Peppel等人，J.Exp.Med.174：1483-1489(1991)；Kolls等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 91：215-219(1994)；Butler等人，Cytokine 6(6)：616-623(1994)；Baker等人，Eur.J.Immunol.24：2040-2048(1994)；Beutler等人，美国专利No.5,447,851；和美国申请No.08/442,133(1995年5月16日提交)。产生免疫受体融合分子的方法也可以见Capon等人，美国专利No.5,116,964；Capon等人，美国专利No.5,225,538；和Capon等人，Nature 337：525-531(1989)，本文完整引用这些参考文献作为参考。
TNF受体分子的功能等价物、衍生物、片段或者区域指TNF受体分子的部分，或者编码TNF受体分子的TNF受体分子序列的部分，其具有足够的大小和序列与可以用于本发明的TNF受体分子在功能上相似(例如，以高特异性结合TNFα并且具有低免疫原性)。TNF受体分子的功能等价物还包括经修饰的TNF受体分子，其与可以用于本发明的TNF受体分子在功能上相似(例如，以高特异性结合TNFα并且具有低免疫原性)。例如，TNF受体分子的功能等价物可以含有“沉默”密码子或者一个或多个氨基酸替换、缺失或加入(例如，一个酸性氨基酸替换另一个酸性氨基酸；或者编码相同或不同疏水氨基酸的一个密码子替换编码疏水氨基酸的另一密码子)。见Ausubel等人，Current Protocols in Molecular Biology，Greene PublishingAssoc.and Wiley-Interscience，New York(1987-2003)。
在一些实施方案中，抑制TNF-α的单克隆抗体选自单克隆啮齿类-人抗体、啮齿类抗体、人抗体或者其任意部分，它们具有免疫球蛋白可变区的至少一个抗原结合区，所述抗体结合TNF。优选地，该单克隆抗体选自美国专利No.6,277,969中公开的化合物。在一些实施方案中，REMICADE英夫单抗以制剂递送，所述制剂具有约30mg/ml到约60mg/ml的英夫单抗浓度。
还认为透盘施用有效量的促炎化合物的其他拮抗剂将也有助于提供对患有DDD的患者的治疗。在许多实施方案中，拮抗剂是酶，如激酶的拮抗剂。
还认为透盘施用有效量的p38激酶拮抗剂将也有助于提供对患有DDD的患者的治疗。认为p38激酶位点调节TNF-α、IL-1和COX-2酶的产生。因此，根据本发明的另一实施方案，提供了治疗具有髓核的椎间盘中退化性盘疾病的方法，其包括向椎间盘透盘施用有效量制剂，其含有p38激酶的高特异性拮抗剂。
因此，在一些实施方案中，拮抗剂，如高度特异的(即，高特异性)拮抗剂是p38 MAP激酶抑制剂，优选p38 MAP激酶的小分子抑制剂。认为p38 MAP激酶的抑制阻断TNF-α和IL-2的产生，TNF-α和IL-2都是促炎细胞因子。p38 MAP激酶的小分子抑制剂非常特异和有效(～nM)。不希望被理论所束缚，认为p38的抑制不应该阻断TGF信号转导或者TGF活性。
还认为p38抑制剂还可以阻断某些金属蛋白酶、COX 2和NO合成酶的诱导。还认为p38抑制剂不抑制与免疫细胞增殖有关的白介素，如IL-2。优选地，它们以10nM到10μM剂量提供。P38激酶的一些拮抗剂在Zhang，J.Biol.Chem.，272(20)，1997年5月16日(13397-402)；Pargellis，Nature Structural Biology，9(4)，April 2002 268-272，和Chae，Bone，28(1)，45-53(2001年1月)，和美国专利No.6,541,477(″Goehring″)中公开，将其说明书完整并入本文作为参考。在一个实施方案中，p38激酶的HSA以一定剂量施用以产生约5μg/kg到约50μg/kg的局部组织浓度。
在一些实施方案中，p38激酶抑制剂选自由以下成员构成的组：
a)二芳基咪唑；
b)N，N’-二芳基脲(由Bayer，Boehringer Ingelheim and Vertex开发)；
c)N，N-二芳基脲(由Vertex开发)；
d)二苯甲酮(由Leo Pharmaceuticals开发)；
e)吡唑酮(由Hoffman-LaRoche开发)；
f)吲哚酰胺(由GlaxoSmithKline和Scios开发)；
g)二酰胺(由AstraZeneca开发)；
h)喹唑啉(由GlaxoSmithKline开发)；
i)嘧啶并[4，5-d]嘧啶酮(pyrimidinone)(由GlaxoSmithKlineand和Hoffman LaRoche开发)；和
j)吡啶基氨基-喹唑啉(由Scios开发)。
该组成员在例如，Zhang等人，如前，Pargellis等人，如前，Chae等人，如前，和Cirillo等人，Current Topics in Medicinal Chemistry，2：1021-1035(2002)，Boehm等人，Exp.Opin，Ther.Patents，10(1)：25-38(2000)，和Lee等人，Immunopharmacology，47：185-2001(2000)中描述。
在一些实施方案中，p38激酶抑制剂选自：
a)SK & F 86002；
b)SB 203580；
c)L-167307；
d)HEP 689；
e)SB220025；
f)VX-745；
g)SU4984；
h)RWJ 68354；
i)ZM336372；
j)PD098059；
k)SB235699；和
i)SB220025。
在一些实施方案中，p38激酶抑制剂的特征是1-芳基-2-吡啶基杂环。在一些实施方案中，1-芳基-2-吡啶基杂环选自：
a)4，5取代的咪唑，
b)1，4，5取代的咪唑；
c)2，4，5取代的咪唑；
d)1，2，4，5取代的咪唑；和
e)非咪唑5-元环杂环。
在一些实施方案中，p38激酶抑制剂具有至少3个环状基团。
在一些实施方案中，p38激酶抑制剂易溶于水(水溶性的)。在一些实施方案中，p38激酶抑制剂基本上是水不溶性分子。基本上水不溶性p38抑制剂可以是有利的，因为如果注射到髓核中，其将作为固体保持在髓核中并且仅随时间微溶，从而提供了缓释。
在一个实施方案中，所述制剂还含有p38激酶抑制剂和糖胺聚糖。
在一些实施方案中，HSCA是白介素的特异拮抗剂。优选地，靶标白介素选自IL-1、IL-2、IL-6和IL-8和IL-12。优选的拮抗剂包括但不限于Kineretg(重组IL 1-RA，Amgen)、2型IL1-受体(Amgen)和IL-1Trap(Regeneron)。
还认为本发明还可以用于防止人个体中椎间盘的退化，即，按照包括下面步骤的方法实现：
a)确定个体的遗传图；
b)比较该个体的遗传图与处于危险中人的预定的遗传图；
c)确定该个体是处于危险的患者；和
d)向该个体的盘中注射拮抗剂。
环素化合物
一方面，本发明涉及对患病椎间盘直接提供(例如，通过患病椎间盘)环素化合物。在一个实施方案中，提供了治疗具有髓核的椎间盘中退化性盘疾病的方法，其包括向椎间盘中透盘施用含有环素化合物的制剂。在另一实施方案中，所述制剂还含有缓冲剂。
在一个实施方案中，环素化合物以有效量施用以抑制促炎细胞因子(如TNF-α)或者基质金属蛋白酶(MMP)的作用。这些细胞因子可以存在于髓核中。在一个实施方案中，以有效量施用环素化合物以抑制退化过程中盘细胞释放的MMP的作用。在一个实施方案中，以有效量施用环素化合物以a)抑制特定促炎细胞因子(如TNF-α)和b)抑制退化过程中局部细胞释放的ECM-降解的MMP。在一个实施方案中，以有效量施用环素化合物以抑制MMP(例如，髓核中存在的MMP)，从而阻止细胞外基质的降解。在一个实施方案中，以有效量施用环素化合物以抑制TNF-α(例如，髓核中存在的TNF-α)，从而抑制细胞外基质的降解和/或减轻疼痛。
在一些实施方案中，环素化合物选自多西环素、赖甲环素、氧环素(oxicycline)化合物、四环素、米诺环素、化学修饰的四环素(CMT)和KB-R7785。优选地，选择多西环素或米诺环素。
在一些实施方案中，拮抗剂(例如，环素化合物)与额外的治疗剂一起施用。在一个实施方案中，额外的治疗剂包括促炎白介素的拮抗剂，白介素为白介素-1β，白介素为IL-2，白介素为IL-6，白介素为IL-8，白介素为IL-12，白介素为IL-19。
在一个实施方案中，额外的治疗剂为TNF-α的拮抗剂。在一个实施方案中，TNF-α的拮抗剂是可溶性TNF-α、TNF-α合成、TNF-α的天然受体、p38激酶和/或基本上不溶于水的p38激酶的抑制剂。
在一些实施方案中，HSCA是白介素(例如，促炎白介素)的特异抑制剂(例如，高特异性拮抗剂)。优选地，靶标白介素选自IL-1、IL-1β、IL-2、IL-6、IL-8、IL-12和IL-19。优选的拮抗剂包括，但不限于，Kineretg(重组IL 1-RA，Amgen)、2型IL-1受体(Amgen)和IL-1 Trap(Regeneron)。
因为许多促炎蛋白质在盘退化中起作用，并且其拮抗剂优选高度特异，所以还认为向盘中直接注射本发明的至少两种高度特异的拮抗剂将是有益的。
因此，根据本发明，提供了治疗具有髓核的椎间盘中退化性盘疾病的方法，其包括向椎间盘中施用制剂，所述制剂含有：
i)环素化合物；和
ii)选自TNF-α、白介素(例如，IL-1、IL-6和IL-8)、FAS、FAS配体和IFN-γ的促炎细胞因子的至少两种高度特异的拮抗剂。
环素化合物以非特异方式抑制TNF-α。TNF-α和其他相似生物活性物质首先以非活性形式产生并转运到细胞膜。一旦活化，切割并释放TNF-α原的活性部分。该过程称作脱落(shedding)并且可以由一种或多种酶启动。这些酶都共同地具有金属离子并且称作基质金属蛋白酶(MMPs)。已知环素化合物结合金属离子并从而抑制MMP的作用和随后以非特异方式抑制释放TNF-α和其他促炎细胞因子。
其他拮抗剂和试剂
还认为透盘施用有效量的COX-2酶的拮抗剂将有助于提供对DDD患者的治疗。认为COX-2酶是对前列腺素的产生的调节剂，前列腺素与炎症和疼痛的产生有关。因此，根据本发明的另一实施方案，提供了治疗具有髓核的椎间盘中退化性盘疾病的方法，其包括向椎间盘中透盘施用有效量的制剂，其含有COX-2酶的高亲和性拮抗剂。
COX-2酶的通常的拮抗剂包括塞来昔布(Searle)，罗非克西(Merck)；美洛昔康(Boehringer Manheim)；尼美舒利；双氯酚酸钠和乙哚酸。
还认为透盘施用有效量的PLA2酶的拮抗剂也有助于提供对DDD患者的治疗。认为PLA2酶是对前列腺素产生的调节剂。因此，根据本发明的另一实施方案，提供了治疗具有髓核的椎间盘中退化性盘疾病的方法，其包括向椎间盘中透盘施用有效量的制剂，其含有PLA2酶的高亲和性拮抗剂。在一些实施方案中，可以全身性施用PLA2的拮抗剂。
在Kawakami，Clin.Orthop.，351：241-51(1998)中公开了PLA2的至少一种拮抗剂。
还认为透盘施用有效量的NO合酶的拮抗剂也有助于提供对DDD患者的治疗。认为NO合酶调节NO产生，已知NO具有促炎效果。因此，根据本发明的另一实施方案，提供了治疗具有髓核的椎间盘中退化性盘疾病的方法，其包括向椎间盘中透盘施用有效量的制剂，其含有NO合酶的高亲和性拮抗剂。在一些实施方案中，可以全身性施用NO合酶的拮抗剂。
NO合酶的一些拮抗剂是N-亚氨基乙基-L-赖氨酸(L-NIL)和NG-单甲基-L-精氨酸。
还认为透盘施用有效量的高特异性抗氧化剂也有助于提供对DDD患者的治疗。认为氧化剂降解髓核细胞外基质。通常的抗氧化剂包括自由基清除剂和超氧化物歧化酶。因此，根据本发明的另一实施方案，提供了治疗具有髓核的椎间盘中退化性盘疾病的方法，其包括向椎间盘中透盘施用有效量的制剂，其含有高亲和性抗氧化剂。在一些实施方案中，可以全身性施用高特异性抗氧化剂。
还认为透盘施用有效量的高特异性抗增殖剂也有助于提供对DDD患者的治疗。认为抗增殖剂通过影响发炎组织对炎症产生影响，其将限制炎性细胞因子的产生。在一些实施方案中，高特异性抗增殖剂选自a)雷帕霉素；b)依赖环素的激酶9(cdk)的抑制剂；和c)达汀(statin)(如MEVASTATINTM和LOVASTATINTM)。在一个实施方案中，当选择雷帕霉素时，采用产生约0.5μg/kg到约50μg/kg的局部组织浓度的剂量。
因此，根据本发明的另一实施方案，提供了治疗具有髓核的椎间盘中退化性盘疾病的方法，其包括向椎间盘中透盘施用有效量的制剂，其含有高特异性抗增殖剂。
雷帕霉素是TOR(雷帕霉素靶标)蛋白质的下游信号转导的强烈抑制剂。同样，其负责协调蛋白质合成和蛋白质分解之间的平衡。认为细胞外基质合成和降解之间平衡的丧失导致DDD增殖。因为TOR蛋白质调节多种代谢途径，所以雷帕霉素可以稳定该循环的平衡。雷帕霉素还可以直接影响软骨细胞增殖和随后的免疫反应。此外，退化性软骨细胞表现出低水平的增殖活性，相比之下，正常细胞不表现出活性。认为这导致软骨中软骨细胞聚簇。雷帕霉素还可以消除非典型软骨细胞增殖。在一个实施方案中，雷帕霉素以约0.1到约10μM的剂量提供。
Cdk抑制剂可以直接影响软骨细胞的增殖和随后的免疫反应。Cdk抑制剂还可以直接影响软骨细胞聚簇，公知软骨细胞聚簇是特征性退化事件。代表性cdk抑制剂包括flavopiridol、roscovitine和PCT专利公开No.WO 02/057240(Lin)和美国临时专利申请60/257,703中公开的化合物，将所述专利申请的内容完整并入本文作为参考。在一个实施方案中，以1到10μM的剂量提供cdk抑制剂。
本发明还涉及对患病关节提供高特异性抗程序性细胞死亡分子。这些分子用以保护软骨细胞防止程序性细胞死亡。优选的化合物包括EPO、红细胞生成素模拟肽、EPO模拟抗体融合蛋白质、IGF-I、IGF-II、和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶抑制剂。
因此，根据本发明的另一实施方案，提供了治疗具有髓核的椎间盘中退化性盘疾病的方法，其包括向椎间盘中透盘施用有效量的制剂，其含有高特异性抗程序性细胞死亡剂。
此外，非类固醇消炎药物(NSAIDs)也可以选择作为第二种治疗剂。在一些实施方案中，NSAID是合成代谢的并且优选选自TOLMETINTM(可从Ortho-MacNeil得到)、SUPROLTM(可从Johnson& Johnson得到)，和噻洛芬酸(可从Roussel Labs得到)。优选地，以足够剂量施用合成代谢性NSAID以产生约5μg/kg到约500μg/kg的最初局部组织浓度。在一些实施方案中，NSAID为COX和LOX途径的双重抑制剂并且优选为TEPOXALINTM(可从Johnson & Johnson得到)。
此外，也可以根据本发明使用抗-组织蛋白酶。认为这些酶的抑制会抑制细胞外基质的分解。优选地，拮抗剂抑制选自组织蛋白酶B、组织蛋白酶L和组织蛋白酶K的组织蛋白酶。
在一些实施方案中，额外的治疗剂选自：
i)生长因子；和
ii)质粒DNA。
对退化性盘疾病患者的施用
DDD涉及盘的进行性退化，其中涉及许多因子。在许多情况中，仅仅提供单次剂量或者甚至几天内的给药方案可能都不足以解决DDD。例如，如果DDD部分地由功能性脊柱单位中的机械不稳定性导致，那么对透盘细胞简单地提供一次治疗将可能仅仅延迟DDD的发作。因此，需要提供DDD的长期药物疗法治疗，其不需要多次注射。
因为DDD是持续的过程并且因为认为一些目的细胞因子当存在于髓核中时产生疼痛和降解ECM，所以希望拮抗剂以药学有效量尽可能长时间地保持在髓核中。髓核中拮抗剂的半寿期取决于许多因素，包括拮抗剂的大小及其电荷。通常，拮抗剂的分子量越大，其越可能保持包含在盘的纤维环部分中。
当使用短半寿期拮抗剂时，希望透盘(即，到盘中)施用相对大剂量的拮抗剂。在该条件中，拮抗剂的快速耗竭将不导致拮抗剂下降到盘中的治疗有效水平以下，直到经过了延长的时间。
尽管在此类情况中希望大剂量拮抗剂，但是注射临界体积的水会增加髓核中压力。纤维环的内壁上存在的伤害性感受器对该增加的压力产生反应并产生疼痛。在一些情况中，产生疼痛的加入量按体积计可以少至1cc。因此，如果向髓核中加入稀释浓度的拮抗剂以提供大剂量，该加入的体积导致的所得压力增加可足以产生剧烈疼痛。
例如，如果确定需要约100mg拮抗剂来治疗性影响髓核，并且拮抗剂以约30到约60mg/ml的浓度提供，那么为了提供所希望的疗效，将需要向髓核中注射至少约1.5ml拮抗剂。然而，当向髓核注射体积时，希望递送的药物体积不超过约1ml，优选不超过约0.5ml(即，最大0.5ml)，更优选约0.1到约0.3ml。当以这些更小量注射时，认为所加的体积将不导致髓核中明显的压力增加。
因此，在一些实施方案中，所施用的制剂中拮抗剂的浓度为至少约100mg/ml。当需要约100mg拮抗剂以产生所希望的治疗结果时，需要注射不超过约1ml药物。在一些实施方案中，所施用的药物中拮抗剂的浓度为至少约200mg/ml。在该条件中，需要注射不超过约0.5ml药物。在一些实施方案中，所施用的药物中拮抗剂的浓度为至少约500mg/ml。在该条件中，需要注射的制剂为约0.03到约0.3ml。
在另一实施例中，如果确定治疗性影响髓核需要约2mg环素化合物，并且以约2mg/ml的浓度提供环素化合物，那么为了提供希望的疗效，需要向髓核注射至少约1ml环素化合物。然而，当向髓核注射体积时，希望递送的药物的体积小于约1ml，优选不超过0.5ml，更优选约0.03到约0.3ml。当以这些更小量注射时，认为所加入的体积将不导致髓核中明显的压力增加。
因此，在一些实施方案中，所施用的药物，即制剂(即，持续递送装置)中环素化合物的浓度为至少约20mg/ml。在该条件下，需要注射不超过0.1ml药物。优选地，施用的药物中环素化合物的浓度为至少50mg/ml。在该条件下，需要注射不超过约0.05ml(即，最大0.05ml)药物。在一个实施方案中，制剂中环素化合物的浓度小于约100mg/ml。
在一些实施方案中，以缓释装置(即，持续递送装置)提供拮抗剂。缓释装置适于在盘内长期保留并缓慢释放其中所含拮抗剂到周围环境中。该递送方式允许拮抗剂在盘内长期保持治疗有效量。
在一些实施方案中，拮抗剂主要通过其通过持续递送装置(例如，通过聚合物)的扩散从持续递送装置释放。在其他实施方案中，拮抗剂主要通过持续递送装置的生物降解(例如，聚合物的生物降解)从持续递送装置释放。
在一些实施方案中，缓释装置(即，持续递送装置)包含生物可再吸收的材料，其逐渐腐蚀导致拮抗剂逐渐释放到盘环境中。在一些实施方案中，缓释装置包含生物可再吸收的聚合物。在一些实施方案中，生物可再吸收的聚合物的半寿期为至少1个月，更优选至少2个月，更优选至少6个月。
在一些实施方案中，持续递送装置包含生物可腐蚀的大球体。拮抗剂优选包含在胶囊内的明胶(或者水或其他溶剂)内，并且当外壳被腐蚀时释放到盘环境中。该装置可以包括具有不同厚度的外壳的多种胶囊，从而外壳的顺序分解提供了拮抗剂的定期释放。
在一些实施方案中，缓释装置提供了控释。在一些实施方案中，其提供了连续释放。在一些实施方案中，其提供了间歇性释放。在一些实施方案中，缓释装置包含生物传感器。也可以使用其他释放方式。
在一些实施方案中，持续递送装置包含炎症应答性递送系统，如含有可以被侵入的巨噬细胞腐蚀的生物可腐蚀的微球体的递送系统。该技术提供了盘环境的生理炎症和拮抗剂向该环境的释放之间的高度对应。在一个实施方案中，选择Brown等人，Arthritis.Rheum.Dec.，41(12)：2185-95(1998)中公开的技术。
在一些实施方案中，持续递送装置包含美国专利No.5,728,396(″Peery″)中公开的装置，将该专利的说明书完整引用作为本文的参考。
在一些实施方案中，持续递送装置包含脂质体递送系统，如WO03/000190中公开的系统。脂质体是小球体，它们的壁是具有水的脂质层。随着它们的形成，脂质体捕获水和其中存在的任何水溶性溶质。因为该捕获能力，它们可用作递送系统。对于本发明，优选的实施方案包括使用多层小泡，和任意天然发生的磷脂，如二棕榈酰磷脂酰胆碱(DPPC)。
脂质体可以是具有围绕内部液相的至少一个脂质双层的小泡(脂质双层围绕液体核心或者分散在该脂质双层和另一脂质双层之间的液相)。脂质体可以具有多种结构，如多层(MLVs)、单层(ULVs)和paucilamellar(PLVs)小泡。脂质体的所得结构部分取决于形成疏水相的材料和生产参数，如温度和孵育时间的选择。
一些脂质体包含至少一种两亲性形成双层的物质。其中所含治疗性物质可以包含在脂质体的脂质双层或者亲水隔室中。两亲性形成双层的物质包含亲水和亲脂基团并且能够单独或者联合其他脂质形成脂质体的双层。脂质可以具有一条或者多条亲脂侧链，其在本质上是饱和或不饱和的和在结构上是分枝或线性的。两亲性形成双层的物质可以是磷脂或者神经酰胺。
在一些实施方案中，持续递送装置含有许多(例如，至少100个)含有水的小室，每个小室都含有拮抗剂。小室由双层脂质膜限定，所述双层脂质膜含有天然存在的脂质的合成复制品。通过改变水性赋形剂、脂质组分和生产参数的至少一种可以控制药物的释放。优选地，制剂含有不超过10％的脂质。在一些实施方案中，选择SkyepharmaPLC(London，United Kingdom)的DEPOFOAMTM技术。
在一些实施方案中，持续递送装置含有美国专利No.5,270,300(″Hunziker″)中公开的递送系统，将所述专利的说明书完整引用作为本文的参考。
在一些实施方案中，持续递送装置含有共聚物聚-DL-丙交酯-共-乙交酯(PLG)。优选地，通过将拮抗剂或者额外的治疗剂、共聚物和溶剂组合形成小滴，然后蒸发溶剂形成微球体来生产制剂。然后将许多微球体在生物相容性稀释剂中组合。优选地，拮抗剂或者额外治疗剂通过其经共聚物的扩散和共聚物的生物降解从该共聚物释放。在其一些实施方案中，选择Alkermes(位于Cambridge，MA)的PROLEASETM技术。
水凝胶也可以用于以缓释方式递送拮抗剂到盘环境。“水凝胶”是当有机聚合物(天然或合成的)被固定或固化产生三维开放网格结构时形成的物质，所述网格结构捕获水分子或者其他溶液而形成凝胶。例如，通过聚集、凝结、疏水相互作用或者交联可以发生固化。用于本发明的水凝胶可以快速固化使HAAMMP保持在应用部位，从而消除了从盘的不希望的迁移。水凝胶也是生物相容的，例如，对于悬浮在水凝胶中的物质是无毒的。
“水凝胶拮抗剂组合物”是含有所希望的拮抗剂的水凝胶的悬浮物。水凝胶-拮抗剂组合物形成拮抗剂的均匀分布，其具有明确并且可以精确控制的密度。而且，水凝胶可以支持密度非常大的拮抗剂。此外，水凝胶允许营养物扩散到终板，和废物从终板扩散出去，这促进了组织生长。
适宜用于本发明的水凝胶包括含有水的凝胶，即特征是亲水性和在水中不溶的聚合物。见，例如，Concise Encyclopedia of PolymerScience and Engineering，编者Mark等人，Wiley and Sons(1990)458-459页的“水凝胶”，将该文献的公开完整并入本文作为参考。尽管它们可以任选用于本发明，但是包括水凝胶是高度有益的，因为它们往往具有许多希望的性质。通过它们的亲水、含水性质，水凝胶可以有助于盘的承重能力。
在一个实施方案中，水凝胶是细小的粉状合成水凝胶。适宜的水凝胶显示出此类性质的最优组合，所述性质为诸如与所选基质聚合物的相容性，和生物相容性。水凝胶可以包括任意一种或多种下面的物质：多糖、蛋白质、聚磷腈、聚(氧乙烯)-聚(氧丙烯)嵌段共聚物、乙二胺的聚(氧乙烯)-聚(氧丙烯)嵌段共聚物、聚(丙烯酸)、聚(甲基丙烯酸)、丙烯酸和甲基丙烯酸的共聚物、聚(乙酸乙烯酯)，和磺化聚合物。
通常，这些聚合物至少部分可以溶于水性溶液，例如，水，或者具有带电侧基的水性醇溶液，或者其单价离子盐中。有许多具有可以与阳离子反应的酸性侧基的聚合物的实例，例如，聚(磷腈)、聚(丙烯酸)，和聚(甲基丙烯酸)。酸性基团的实例包括羧酸基、磺酸基、和卤化(优选氟化)醇基。具有可以与阴离子反应的碱性侧基的聚合物的实例为聚(乙烯基胺)、聚(乙烯基吡啶)和聚(乙烯基咪唑)。
在一些实施方案中，持续递送装置包括选自PLA、PGA、PCL和它们的混合物的聚合物。
如果盘中拮抗剂的半寿期相对较长，那么可以设想可以对盘施用相对小剂量的拮抗剂。在该条件下，在经过延长的时间之前拮抗剂的缓慢耗竭将不导致盘中拮抗剂下降到治疗有效水平以下。
在其中拮抗剂在盘空间中具有长半寿期的一些实施方案中，所施用的剂量可以非常小。
例如，如果认为当拮抗剂以约1到约10mg/kg或者约1到约10ppm的范围存在时是有效的(认为对于TNF拮抗剂REMICADE英夫单抗是这样的情况)，因为盘的通常的髓核具有约3ml(或者3cc，或者3g)的体积，那么需要对盘施用仅约3到约30μg拮抗剂以便提供拮抗剂的长期有效量。可以以1cc以下的量施用制剂。作为参考点，Tobinick公开为了治疗背部疼痛，应该脊柱周施用至少1mg细胞因子拮抗剂。相似地，Olmarker混合含有1.11mg/ml单克隆抗体的100ml制剂到40mg提取的髓核中，从而产生约3/1000的单克隆抗体浓度。通过该途径可获得的更小量减小了拮抗剂的有害副作用的机会。
例如，如果临床医生向2.7cc盘施用0.3ml 60mg/ml的拮抗剂，如REMICADE英夫单抗，这将在盘中产生约6mg/ml，或者6/1000的拮抗剂浓度。不希望被理论所束缚，如果拮抗剂(例如，HAAMMP)在髓核内具有与全身性施用时相同的半寿期(即约1周)，那么拮抗剂的浓度将保持高于约10ppm约9周。因此，如果需要另一剂，临床医生将仅需要在约2个月后提供第二剂。
因此，在一些实施方案中，以小于约1mg，例如，小于约0.5mg，更优选小于约0.1mg，更优选小于约0.01mg，更优选小于约0.001mg的剂量提供拮抗剂。通过该途径可获得的更小量减小了拮抗剂的有害副作用的机会。当拮抗剂是HSCA时，优选地，以这些更小量提供的HSCA是TNF拮抗剂，更优选其是REMICADE英夫单抗。
在一些实施方案中，将本发明的制剂通过纤维环的外壁直接施用到盘中。更优选地，直接施用包括将拮抗剂沉积在盘的髓核部分。在该条件下，围绕髓核的纤维环的纤维状性质将有助于将拮抗剂保持在盘中。
在一些实施方案中，将本发明的制剂通过小孔针头注射到盘中。在一些实施方案中，针头具有约22号(gauge)或更小的孔，从而，产生突出(herniation)的可能性减小了。例如，针头可以具有约24号或更小的孔，从而，进一步减小产生突出的可能性。
如果制剂的直接注射体积足够高从而导致对髓核的过压力的担心，那么优选在直接注射前除去髓核的至少一部分。在一些实施方案中，所除去的髓核的体积基本上相似于待注射的制剂的体积。例如，所除去的髓核的体积可以为待注射的制剂的体积的80-120％。此外，该方法还具有从患者至少部分除去一些已退化的盘的额外益处。
在其他实施方案中，将制剂通过相对椎体的终板递送到盘空间。该方法不需要纤维环的穿刺，并且因此消除了突出的可能性。
尽管拮抗剂可通过结合MMP，从而减轻疼痛和阻止ECM的降解而治疗性治疗盘，但是认为这些拮抗剂的至少一些无助于修复MMP对ECM造成的伤害。
根据本发明，提供了治疗具有髓核的椎间盘中退化性盘疾病的方法，其包括：
a)向正在退化的盘透盘施用拮抗剂；和
在另一实施方案中，可能需要提供也有助于修复ECM的治疗。
b)因此，透盘施用至少一种额外的治疗剂，所述额外的治疗剂可以以有效量施用以至少部分修复盘(即，盘组织)。
根据本发明的一方面，向盘空间局部施用拮抗剂和至少一种额外的(例如，第二种)治疗剂。当拮抗剂是HSCA时，因为HSCA是特异的，所以其不干扰局部施用的额外的治疗剂，并且因此每种试剂独立地工作以提供对患病盘的治疗。
可以施用一种以上的额外的治疗剂。例如，可以有第三、第四和第五种治疗剂。
在一些实施方案中，拮抗剂和额外的治疗剂(即，额外的治疗物质)同时施用。在一个实施方案中，拮抗剂和额外的治疗剂在含有所述拮抗剂和额外的治疗剂的制剂中共同施用。在其他实施方案中，拮抗剂首先施用。在其他实施方案中，第二种治疗剂首先施用。
额外的治疗剂可以是本文公开的一种或多种拮抗剂。例如，可以加入盘的其他化合物包括，但不限于：维生素和其他营养补充物；激素；糖蛋白；纤连蛋白；肽和蛋白质；糖(简单和/或复杂的)；蛋白聚糖；寡核苷酸(有义和/或反义DNA和/或RNA)；骨形态发生蛋白(BMPs)；抗体(例如，针对感染物、肿瘤、药物或激素抗血管生成素的抗体)；脱矿质骨基质(DBM)；抗体(例如，针对感染物、肿瘤、药物的抗体)；基因治疗试剂；和抗癌剂。如果希望，还可以将诸如止痛剂和麻醉剂的物质与聚合物混合以递送和释放到盘空间(discspace)。
在一些实施方案中，生长因子是额外的治疗剂。文中所用术语“生长因子”包括调节其他细胞，尤其结缔组织祖细胞生长和分化的任意细胞产物。根据本发明可以使用的生长因子包括，但不限于，成纤维细胞生长因子家族的成员，包括酸性和碱性成纤维细胞生长因子(FGF-1和-2)和FGF-4、血小板衍生生长因子(PDGF)家族的成员，包括PDGF-AB、PDGF-BB和PDGF-AA；EGFs，胰岛素样生长因子(IGF)家族的成员，包括IGF-I和-II；TGF-β超家族，包括TGF-β1、2和3(包括MP-52)，类骨质诱导因子(OIF)、血管生成素、内皮缩血管肽、肝细胞生长因子和角质细胞生长因子；骨形态发生蛋白(BMPs)的成员BMP-1；BMP-3；BMP-2；OP-1；BMP-2A，-2B，-4，-7和-14；HBGF-1和HBGF-2；生长分化因子(GDFs)、刺猬蛋白质家族成员，包括印度、音速(sonic)和沙漠刺猬蛋白质；ADMP-1；GDF-5；和集落刺激因子(CSF)家族成员，包括CSF-1、G-CSF和GM-CSF；和它们的同种型。
在一些实施方案中，生长因子选自TGF-β、bFGF和IGF-1。认为这些生长因子促进髓核的再生，或者刺激软骨细胞的增殖和/或分化，以及ECM分泌。在一个实施方案中，生子因子是TGF-β。更优选地，以约10ng/ml到约5000ng/ml，例如，约50ng/ml到约500ng/ml，例如，约100ng/ml到约300ng/ml的量施用TGF-β。
在一些实施方案中，提供血小板浓缩物作为额外的治疗剂。在一个实施方案中，血小板释放的生长因子以大于血小板从中采集的血液中发现的量的至少两倍(例如，四倍)的量存在。在一些实施方案中，血小板浓缩物是自体的。在一些实施方案中，血小板浓缩物是富含血小板的血浆(PRP)。PRP是有益的，因为其含有可以再刺激ECM生长的生长因子，还因为其血纤蛋白基质为新组织生长提供适宜的支架。
在一个实施方案中，额外的治疗剂是NO合酶的拮抗剂。在一个实施方案中，拮抗剂是L-NIL和NG-单甲基-L-精氨酸。在一个实施方案中，额外的治疗剂是PLA2的拮抗剂。在一个实施方案中，额外的治疗剂是高特异性抗增殖剂，如包括雷帕霉素、cdk抑制剂、达汀和抗氧化剂的高特异性抗增殖剂。在再一个实施方案中，抗氧化剂包含超氧化物歧化酶。
在一个实施方案中，额外的治疗剂是选自EPO模拟肽和EPO模拟抗体融合蛋白质的高度特异的程序性细胞死亡抑制剂。在一个实施方案中，额外的治疗剂是选自IGF-1和IGF-II的高度特异的程序性细胞死亡抑制剂。在一个实施方案中，额外的治疗剂是高度特异的半胱氨酸天冬氨蛋白酶(caspase)抑制剂。在一个实施方案中，额外的治疗剂包含糖胺聚糖。
在一个实施方案中，制剂还包括脂质体递送系统。
在一些实施方案中，制剂含有适宜的生物相容的载体，如盐水。在一些实施方案中，载体选自美国专利No.6,277,969(″Le″)中公开的载体，将所述专利完整引用作为本文的参考。
在一些实施方案中，通过药物泵施用制剂。
还根据本发明，提供了药盒，其包含含有以有效量存在以至少部分修复正在退化的盘的拮抗剂的装置。
还根据本发明，提供了用于治疗退化性盘疾病的制剂，其含有：
a)拮抗剂，和
b)生长因子。
在一些优选实施方案中，拮抗剂与粘性补充物(viscosupplement)组合在制剂中。所述粘性补充物具有与天然健康髓核ECM基本上相似的特征。
优选地，粘性补充物包含糖胺聚糖(GAGS)。GAGS是由重复多糖单位组成的生物聚合物，并且天然存在于细胞表面上以及动物的细胞外基质中。GAGS是含有重复二糖单位的长的未分枝的多糖。所述二糖单位含有两种经修饰的糖之一：N-乙酰半乳糖胺或N-乙酰葡糖胺和糖醛酸，如葡糖醛酸或者艾杜糖醛酸。GAGS是高度带负电荷的分子，具有延伸构象，其赋予溶液的高粘性。除了高粘性，GAGS通常具有低压缩性，其使得这些分子是关节中的理想的润滑液。同时，它们的刚性为细胞提供了结构完整性并提供了细胞间的通道，允许细胞迁移。
最近工作已经表明质粒DNA将不会像使用病毒载体那样引起炎症反应。编码软骨(合成代谢)剂(如BMP)的基因如果注射到关节中将是有效的。此外，过表达本文中提供的任一种生长因子或其他试剂，如将限制局部MMP活性的MMP的组织抑制剂(TIMP)，将对软骨细胞和ECM保护具有积极效果。在一些实施方案中，TIMP选自TIMP-1和TIMP-2。在一些实施方案中，TIMP是自体的并且通过过滤、离心或者通过免疫附着方法浓缩。在其他实施方案中，TIMP经重组产生并且优选以患者中发现的至少1000倍的浓度存在。在一个实施方案中，质粒含有人TGF-β或者EPO的遗传密码。
透明质酸(HA)是N-乙酰葡糖胺和葡糖醛酸分子的高分子量多糖，其天然存在于所有哺乳动物的多种组织和某些细菌种类中。对于本发明，HA包括任意衍生物，如透明质酸酐(hyaluronan)和透明质酸自身，其H+离子附着到COO-基，和透明质酸的盐，从而另一阳离子取代H+离子，例如，用Na+取代，从而形成透明质酸钠。HA的定义中还包括任意物理上或者化学上交联的透明质酸或者衍生物。HA在GAGS中是独特的，因为其不含有任何硫酸盐并且没有发现共价连接到蛋白质作为蛋白聚糖。HA聚合物非常大，分子量为约100,000到10,000,000，并且可以置换大体积水。对于本发明，优选的实施方案包括分子量为0.5-10M道尔顿的非交联的HA。
优选地，粘性补充物选自透明质酸和透明质酸盐(交联或未交联的)。在一些实施方案中，粘性补充物是ARTHREASETM(DePuyLtd.，Leeds，U.K.)。在一些实施方案中，粘性补充物是选自在美国序号09/298,539，标题为″Method of Treating Diseased，Injured orAbnormal Cartilage with Hyaluronic Acid and Growth Factors″(Radomsky等人)的申请中公开的透明质酸的透明质酸，将所述申请的说明书完整引用作为本文的参考。
最近工作已经表明质粒DNA将不会像使用病毒载体那样引起炎症反应。编码软骨(合成代谢)剂(如BMP)的基因如果注射到关节中将是有效的。此外，过表达本文中提供的任一种生长因子和其他活性剂，如将限制局部MMP活性的TIMP，将对软骨细胞和ECM保护具有积极效果。在一个实施方案中，质粒含有人TGF-β或者EPO的遗传密码。
因为下方背疼痛的原因可能太多，而且因为某些拮抗剂的昂贵成本，在提供注射前，临床医生首先进行诊断试验以便证实靶标盘实际上具有高水平靶标蛋白质(例如，促炎细胞因子和/或MMP)是有用的。
在一个实施方案中，诊断试验包括非侵入性诊断试验，其包括例如，使用MRI。在一些实施方案中，MRI能够定量盘中的聚集蛋白聚糖水平。
在一个实施方案中，临床医生将首先进行椎间盘造影(discogram)以便鉴定哪个或哪些盘造成患者的下部背痛。然后，临床医生将对目的盘进行侵入性或非侵入性试验以证实促炎细胞因子和/或MMPs的存在或者量化其水平。
在一个实施方案中，诊断试验包括侵入性试验，其中取走并分析一部分盘。在一些实施方案中，临床医生取走一部分髓核。在一些实施方案中，临床医生取走一部分纤维环。优选地，除去的材料是一部分髓核。通过包括，但不限于电泳、或者酶联免疫吸附测定(ELISA)(按照Burke，Br.JBJS，84-B(2)，2002)的方法可以检测所取走的材料中促炎细胞因子和/或MMPs的存在。
在一些实施方案中，选择美国专利No.6,277,969(″Le″)中公开的诊断方法。在这些方法中，高特异性抗-TNF-α化合物用作检测已知或者怀疑具有高水平TNF-α的患者中TNF-α的诊断工具。
测定正在退化的盘中不同促炎细胞因子和/或MMPs的水平后，临床医生将优选继续比较这些诊断水平与一种或几种蛋白质(如细胞因子或MMPs)的预先确定的水平。如果促炎细胞因子和/或MMPs的诊断水平超出预先确定的水平，那么临床医生可以推断这些更高水平导致不希望的炎性作用并且向盘中直接注射能够抑制靶标蛋白质的目的拮抗剂(例如，高特异性p38激酶抑制剂)。
在一些实施方案中，在诊断试验中使用含有“芯片上实验室”的生物微机电系统(bioMES)装置。
在一些实施方案中，白介素的预定水平为至少100pg/ml。在一些实施方案中，IL-6的预定水平为至少250pg/ml。在一些实施方案中，IL-8的预定水平为至少500pg/ml。在一些实施方案中，PGE2的预定水平为至少1000pg/ml。在一些实施方案中，TNF-α的预定水平为至少500pg/ml。在其他实施方案中，TNF-α的预定水平为至少20pg/ml，更优选至少30pg/ml，更优选至少50pg/ml，更优选至少1ng/ml。在其他实施方案中，TNF-α的预定水平为至少1ng/盘，在其他实施方案中，TNF-α的预定水平为至少1000pg/盘。
还有用的是能够确定是否直接施用本发明的治疗物质实际上是有效的。因此，可以测量施用后盘中剩余细胞因子或MMP的水平。
实施例I
该非限制性预言性实施例(prophetic example)描述怎样将含有HAAMMP和盐水的制剂透盘施用到正在退化的盘的髓核中。
首先，临床医生使用诊断试验证实患者中特定盘具有高水平MMPs。
然后，临床医生向所关心的盘的背侧区域提供局部麻醉剂(如5ml利多卡因)以减小皮下疼痛。
接着，临床医生用其中具有管心针(stylet)的相对较大(例如，18-19号)针头穿刺所关心的盘背侧的患者皮肤，推动针头通过皮下脂肪和背部骶腰韧带和肌肉到达椎间盘的外边缘。
然后，从针头取下管心针。
接着，临床医生接到注射器，其具有适于安装在较大号针头内的较小号针头。该针头通常为22或24号针头。注射器的柱体含有本发明的制剂。
制剂含有HAAMMP，并且具有约30mg/ml到约60mg/mlHAAMMP浓度。
然后，临床医生将较小针头同轴地推动通过较大针头并经过较大针头的远端，从而，穿刺纤维环。然后较小针头进一步进入髓核的中心。最后，临床医生压下注射器活塞，从而，向髓核注射约0.1到1ml制剂。
实施例II
该非限制性预言性实施例基本上与实施例I相似，只是制剂包含缓释装置，其含有共聚物聚-DL-丙交酯-共聚-乙交酯(PLG)。制剂含有作为拮抗剂的HAAMMP，并且具有约30mg/ml到约60mg/mlHAAMMP浓度。
实施例III
该非限制性预言性实施例描述怎样向正在退化的盘的髓核中透盘施用含有HSCA和盐水的制剂。
首先，临床医生使用诊断试验证实患者中特定盘具有高水平特定促炎细胞因子。
然后，临床医生向所关心的盘的背侧区域提供局部麻醉剂(如5ml利多卡因)以减小皮下疼痛。
接着，临床医生用其中具有管心针的相对较大(例如，18-19号)针头穿刺所关心的盘背侧的患者皮肤，推动针头通过皮下脂肪和背部骶腰韧带和肌肉到达椎间盘的外边缘。
然后，从针头取下管心针。
接着，临床医生接到注射器，其具有适于安装在较大号针头内的较小号针头。该针头通常为22或24号针头。注射器的柱体含有本发明的制剂。
制剂含有REMICADE英夫单抗，并且具有约30mg/ml到约60mg/ml的英夫单抗浓度。
然后，临床医生将较小针头同轴地通过通过较大针头并经过较大针头的远端，从而，穿刺纤维环。然后较小针头进一步推入髓核的中心。最后，临床医生压下注射器活塞，从而，向髓核中注射约0.1到1ml制剂。
实施例IV
该非限制性预言性实施例基本上与实施例III相似，只是制剂包含缓释装置，其含有共聚物聚-DL-丙交酯-共聚-乙交酯(PLG)。制剂含有作为拮抗剂的英夫单抗，并且具有约30mg/ml到约60mg/ml英夫单抗浓度。
尽管已经参考本发明的优选实施方案具体显示和描述了本发明，但是本领域技术人员将理解可以在形式和细节中进行多种改变而不背离所述权利要求书包括的本发明的范围。
实施例V
该非限制性预言性实施例描述怎样向正在退化的盘的髓核中透盘施用含有环素化合物的制剂。
首先，临床医生使用诊断试验证实患者中特定盘具有高水平特定促炎细胞因子和/或MMPs。
然后，临床医生向所关心的盘的背侧区域提供局部麻醉剂(如5ml利多卡因)以减小皮下疼痛。
接着，临床医生用其中具有管心针的相对较大(例如，18-19号)针头穿刺所关心的盘背侧的患者皮肤，针头通过皮下脂肪和背部骶腰韧带和肌肉到达椎间盘的外边缘。
然后，从针头取下管心针。
在一个实施方案中，髓核的部分在施用环素化合物之前取出。
接着，临床医生接到注射器，其具有适于安装在较大号针头内的较小号针头。该针头通常为22或24号针头。注射器的柱体含有本发明的制剂。
制剂含有约50mg/ml多西环素。
然后，临床医生将较小针头同轴地推动通过较大针头并经过较大针头的远端，从而，穿刺纤维环。然后较小针头进一步进入髓核的中心。最后，临床医生压下注射器活塞，从而，向髓核注射约0.1到约1ml制剂。
实施例VI
该非限制性预言性实施例基本上与实施例I相似，只是制剂包含缓释装置，其含有共聚物聚-DL-丙交酯-共聚-乙交酯(PLG)。制剂含有多西环素化合物。
尽管已经参考本发明的优选实施方案具体显示和描述了本发明，但是本领域技术人员将理解可以在形式和细节中进行多种改变而不背离所述权利要求书包括的本发明的范围。

Claims (140)

1.治疗具有髓核的椎间盘中退化性盘疾病的方法，其包括向椎间盘中透盘施用有效量制剂，其中该制剂含有拮抗剂，所述拮抗剂选自：
a)高特异性细胞因子拮抗剂，
b)高亲和性抗基质金属蛋白酶(HAAMMP)，
c)p38激酶抑制剂，和
d)环素化合物。
2.权利要求1的方法，其中p38激酶抑制剂选自：
k)二芳基咪唑；
l)N，N’-二芳基脲；
m)N，N-二芳基脲；
n)二苯甲酮；
o)吡唑酮；
p)吲哚酰胺；
q)二酰胺；
r)喹唑啉；
s)嘧啶并[4，5-d]嘧啶酮；和
t)吡啶基氨基-喹唑啉。
3.权利要求1的方法，其中p38激酶抑制剂是1-芳基-2-吡啶基杂环。
4.权利要求1的方法，其中p38激酶抑制剂具有至少三个环基团。
5.权利要求1的方法，其中拮抗剂是水不溶性的或者基本上水不溶性的。
6.权利要求1的方法，其中HAAMMP是TIMP。
7.权利要求1的方法，其中HAAMMP是抗-聚集蛋白聚糖酶。
8.权利要求1的方法，其中HAAMMP是选自胶原酶MMP、溶基质素MMP、和明胶酶MMP的MMP的特异拮抗剂。
9.权利要求1的方法，其中HAAMMP是选自MMP-2、MMP-3和MMP-8的MMP的特异拮抗剂。
10.权利要求1的方法，其中环素化合物选自多西环素、赖甲环素、氧环素化合物、四环素、米诺环素、化学修饰的四环素和KB-R7785。
11.权利要求1的方法，其中制剂主要通过其通过持续递送装置的扩散或者持续递送装置的生物降解从持续递送装置释放。
12.权利要求1的方法，其中制剂还含有至少一种额外的治疗剂。
13.权利要求1的方法，其中制剂以有效减轻疼痛的量施用。
14.权利要求1的方法，其中制剂以有效抑制髓核的细胞外基质降解的量施用。
15.权利要求1的方法，其中拮抗剂以产生约5μg/kg到约50μg/kg的局部组织浓度的剂量施用。
16.权利要求1的方法，其中制剂以小于约1cc的量施用。
17.权利要求1的方法，其中拮抗剂以至少约100mg/ml的量存在于制剂中。
18.权利要求1的方法，其中制剂还含有缓释装置或者糖胺聚糖。
19.权利要求1的方法，其中在紧邻纤维环的外壁处提供制剂。
20.权利要求1的方法，其中制剂中存在的拮抗剂的量不超过约0.5mg。
21.权利要求1的方法，其中制剂还含有以有效修复盘组织的量存在的生长因子。
22.权利要求1的方法，其中通过药物泵施用制剂。
23.权利要求1的方法，其中将制剂注射到髓核中。
24.权利要求1的方法，其中将制剂注射到纤维环中。
25.权利要求1的方法，其中在透盘施用制剂前取出一部分髓核。
26.权利要求1的方法，其中通过针头施用制剂。
27.权利要求1的方法，其中以约0.03ml到约0.3ml的体积施用制剂。
28.权利要求1的方法，其中施用包括：
a)提供附着到纤维环中的外壁的贴剂中的制剂；
b)提供与纤维环的外壁紧密相邻的位置处贮库中的制剂；
c)提供与相邻椎体的终板紧密相邻位置处的贮库中的制剂。
29.权利要求1的方法，其中正在退化的盘是完整的盘。
30.权利要求1的方法，其中正在退化的盘是破裂的盘。
31.权利要求1的方法，其中正在退化的盘是脱层的。
32.权利要求1的方法，其中正在退化的盘具有裂缝。
33.治疗正在退化的盘疾病的制剂，其含有拮抗剂，其中拮抗剂选自：
a)高特异性细胞因子拮抗剂，
b)高亲和性抗基质金属蛋白酶HAAMMP，
c)p38激酶的抑制剂，
d)环素化合物；和
e)额外的治疗剂，其选自：
i).生长因子，
ii).质粒DNA，
iii).促炎白介素的高特异性拮抗剂，
iv).TNF-α的高特异性拮抗剂，
v).PLA2的高特异性拮抗剂，
vi).高特异性抗增殖剂，和
vii).高度特异的程序性细胞死亡抑制剂。
34.治疗性治疗正在退化的盘的方法，其包括步骤：
a)确定盘内促炎蛋白质的水平，
b)将所述水平与促炎蛋白质的预定水平比较，和
c)向盘内注射拮抗剂，其中拮抗剂选自：
i)高特异性细胞因子拮抗剂，
ii)高亲和性抗基质金属蛋白酶HAAMMP，
iii)p38激酶抑制剂，
iv)环素化合物。
35.权利要求34的方法，其中促炎蛋白质是白介素-6或者白介素-8。
36.权利要求34的方法，其中TNF-α的预定水平为至少20pg/ml，至少30pg/ml，或至少1000pg/盘。
37.预防人类个体中椎间盘退化的方法，其包括：
a)确定个体的遗传图；
b)比较该个体的遗传图与处于危险中的人的预定的遗传图水平；
c)确定该个体是处于危险的患者；和
d)向该个体的盘注射拮抗剂，其中拮抗剂选自：
i)高特异性细胞因子拮抗剂，
ii)MMPs的高亲和性拮抗剂，
iii)P38激酶拮抗剂，
iv)环素化合物。
38.治疗具有髓核的椎间盘中正在退化的盘疾病的方法，其包括向椎间盘中透盘施用有效量的制剂，该制剂含有COX-2酶的拮抗剂、NO合酶的拮抗剂、高特异性抗氧化剂、高特异性抗增殖剂、或高特异性抗程序性细胞死亡剂。
39.权利要求1的方法，其中高特异性细胞因子拮抗剂抑制TNF-α。
40.权利要求1的方法，其中HAAMMP以有效抑制髓核中存在的MMP和帮助阻止细胞外基质降解的量施用。
41.权利要求6的方法，其中TIMP是重组TIMP。
42.权利要求6的方法，其中TIMP以自体浓缩形式存在。
43.权利要求7的方法，其中抗聚集蛋白聚糖酶以自体浓缩形式存在。
44.权利要求7的方法，其中抗聚集蛋白聚糖酶是重组抗聚集蛋白聚糖酶。
45.权利要求1的方法，其中制剂中HAAMMP的浓度为至少100mg/m。
46.权利要求1的方法，其中制剂还包括缓释装置。
47.权利要求46的方法，其中缓释装置包含水凝胶。
48.权利要求46的方法，其中缓释装置提供了控释。
49.权利要求46的方法，其中缓释装置提供了连续释放。
50.权利要求46的方法，其中缓释装置提供了间歇性释放。
51.权利要求46的方法，其中缓释装置包含生物传感器。
52.权利要求46的方法，其中缓释装置包含微球体。
53.权利要求46的方法，其中HAAMMP主要通过其通过持续递送装置的扩散或者持续递送装置的生物降解从持续递送装置释放。
54.权利要求46的方法，其中缓释装置包含炎症应答性递送系统。
55.权利要求1的方法，其中HAAMMP以约0.5mg的最大量存在于制剂中。
56.权利要求1的方法，其中制剂还含有以有效修复盘组织的量存在的生长因子。
57.权利要求56的方法，其中生长因子是TGF-β。
58.权利要求56的方法，其中通过血小板浓缩物提供生长因子。
59.权利要求1的方法，其中制剂中环素化合物的浓度为小于约100mg/ml。
60.权利要求1的方法，其中将制剂注射到髓核中。
61.权利要求1的方法，其中将制剂注射到纤维环中。
62.权利要求26的方法，其中针头具有24号的最大号。
63.权利要求1的方法，其中施用包括提供附着到纤维环外壁的贴剂中的制剂。
64.权利要求1的方法，其中施用包括提供紧邻纤维环外壁的贮库中的制剂。
65.权利要求1的方法，其中施用包括提供与相邻椎体的终板紧密相邻位置处的贮库中的制剂。
66.权利要求1的方法，其中正在退化的盘是完整的盘。
67.权利要求1的方法，其中正在退化的盘是破裂的盘。
68.权利要求1的方法，其中正在退化的盘是脱层的。
69.权利要求1的方法，其中正在退化的盘具有裂缝。
70.权利要求1的方法，其中HAAMMP主要通过其通过持续递送装置扩散从持续递送装置释放。
71.权利要求70的方法，其中持续递送装置是聚合物。
72.权利要求1的方法，其中HAAMMP主要通过持续递送装置的生物降解从持续递送装置释放。
73.权利要求1的方法，其中HAAMMP是胶原酶MMP的特异拮抗剂。
74.权利要求1的方法，其中HAAMMP是溶基质素MMP的特异拮抗剂。
75.权利要求1的方法，其中HAAMMP是明胶酶MMP的特异拮抗剂。
76.权利要求1的方法，其中HAAMMP是膜MMP的特异拮抗剂。
77.权利要求1的方法，其中HAAMMP是MMP-2的特异拮抗剂。
78.权利要求1的方法，其中HAAMMP是MMP-3的特异拮抗剂。
79.权利要求1的方法，其中HAAMMP是MMP-8的特异拮抗剂。
80.权利要求1的方法，其中环素化合物的浓度为至少约20mg/ml。
81.权利要求33的制剂，其中额外的治疗剂是生长因子。
82.权利要求1的方法，其中环素化合物以有效抑制髓核中存在的TNF-α并因此阻止细胞外基质降解的量施用。
83.权利要求1的方法，其中施用包括提供附着到纤维环外壁的贴剂中的制剂。
84.权利要求33的制剂，其中HAAMMP选自TIMP-1和TIMP-2。
85.权利要求33的制剂，其中HAAMMP是抗-聚集蛋白聚糖酶。
86.权利要求1的方法，其中p38激酶抑制剂是基本上不溶于水的。
87.权利要求1的方法，其中p38激酶以产生约5μg/kg到约50μg/kg的局部组织浓度的剂量施用。
88.权利要求1的方法，其中p38激酶抑制剂是水溶性的。
89.权利要求3的方法，其中1-芳基-2-吡啶基杂环选自：
f)4，5取代的咪唑，
g)1，4，5取代的咪唑；
h)2，4，5取代的咪唑；
i)1，2，4，5取代的咪唑；和
j)非咪唑5-元环杂环。
90.权利要求1的方法，其中p38激酶抑制剂具有至少3个环状基团。
91.权利要求1的方法，其中p38激酶抑制剂以至少约100mg/ml的量存在于制剂中。
92.权利要求1的方法，其中p38激酶抑制剂以不超过约0.5mg的量存在于制剂中。
93.权利要求1的方法，其中制剂还含有糖胺聚糖。
94.权利要求33的制剂，其中额外的治疗剂是质粒DNA。
95.权利要求34的方法，其中促炎蛋白质是白介素。
96.权利要求35的方法，其中白介素的预定水平为至少100pg/ml。
97.权利要求35的方法，其中白介素-6的预定水平为至少100pg/ml。
98.权利要求35的方法，其中白介素-6的预定水平为至少250pg/ml。
99.权利要求35的方法，其中白介素-8的预定水平为至少500pg/ml。
100.权利要求34的方法，其中促炎蛋白质是PGE2。
101.权利要求100的方法，其中PGE2的预定水平为至少1000pg/ml。
102.权利要求34的方法，其中促炎蛋白质是TNF-α。
103.权利要求102的方法，其中TNF-α的预定水平为至少20pg/ml。
104.权利要求102的方法，其中TNF-α的预定水平为至少30pg/ml。
105.权利要求35的方法，其中TNF-α的预定水平为至少1000pg/盘。
106.权利要求38的方法，其中NO合酶的高特异性拮抗剂选自N-亚氨基乙基-L-赖氨酸(L-NIL)和NG-单甲基-L-精氨酸。
107.权利要求38的方法，其中高特异性抗增殖剂是雷帕霉素。
108.权利要求107的方法，其中以约0.1到约10μM剂量提供雷帕霉素。
109.权利要求107的方法，其中高特异性抗增殖剂是cdk抑制剂。
110.权利要求109的方法，其中以约0.1到约10μM剂量提供cdk抑制剂。
111.权利要求38的方法，其中抗程序性细胞死亡剂选自EPO、红细胞生成素模拟肽、EPO模拟抗体融合蛋白质、IGF-I、IGF-II、和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶抑制剂。
112.权利要求1的方法，其中制剂还含有缓冲剂。
113.权利要求1的方法，其中环素化合物以有效抑制髓核中存在的MMP和从而阻止细胞外基质降解的量施用。
114.权利要求1的方法，其中环素化合物以有效抑制髓核中存在的TNF-α从而减轻疼痛的量施用。
115.权利要求33的方法，其中额外的治疗剂含有促炎白介素的高特异性拮抗剂。
116.权利要求115的方法，其中白介素是IL-1β，白介素是IL-2，白介素是IL-6，白介素是IL-8，白介素是IL-12，白介素是IL-19。
117.权利要求33的方法，其中额外的治疗剂是TNF-α的高特异性拮抗剂。
118.权利要求117的方法，其中TNF-α的高特异性拮抗剂是可溶TNF-α的抑制剂。
119.权利要求117的方法，其中TNF-α的高特异性拮抗剂是TNF-α合成的抑制剂。
120.权利要求117的方法，其中TNF-α的高特异性拮抗剂是TNF-α的天然受体的抑制剂。
121.权利要求117的方法，其中TNF-α的高特异性拮抗剂是p38激酶抑制剂。
122.权利要求117的方法，其中TNF-α的高特异性拮抗剂是基本上不溶于水的p38激酶抑制剂。
123.权利要求33的方法，其中额外的治疗剂是NO合酶的高特异性拮抗剂。
124.权利要求123的方法，其中高特异性拮抗剂是L-NIL。
125.权利要求123的方法，其中高特异性拮抗剂是NG-单甲基-L-精氨酸。
126.权利要求33的方法，其中额外的治疗剂是PLA2的高特异性拮抗剂。
127.权利要求33的方法，其中额外的治疗剂是高特异性抗增殖剂。
128.权利要求127的方法，其中高特异性抗增殖剂包含雷帕霉素。
129.权利要求127的方法，其中高特异性抗增殖剂包含cdk-抑制剂。
130.权利要求127的方法，其中高特异性抗增殖剂包含达汀。
131.权利要求127的方法，其中高特异性抗增殖剂包含抗氧化剂。
132.权利要求131的方法，其中抗氧化剂包含超氧化物歧化酶。
133.权利要求33的方法，其中额外的治疗剂是选自EPO模拟肽和EPO模拟体的高特异性程序性细胞死亡抑制剂。
134.权利要求33的方法，其中额外的治疗剂是选自IGF-I和IGF-II的高度特异的程序性细胞死亡抑制剂。
135.权利要求1的方法，其中拮抗剂是单克隆抗体。
136.权利要求1的方法，其中单克隆抗体是英夫单抗。
137.权利要求1的方法，其中拮抗剂是etanercept。
138.权利要求1的方法，其中拮抗剂结合膜结合的细胞因子。
139.权利要求1的方法，其中结合剂结合可溶细胞因子。
140.权利要求46的方法，其中缓释装置包含大球体。
CNA2004800202597A 2003-05-13 2004-05-13 治疗退化性盘疾病的方法 Pending CN1822824A (zh)

Applications Claiming Priority (6)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US47009803P 2003-05-13 2003-05-13
US60/470,098 2003-05-13
US10/456,948 2003-06-06
US10/610,355 2003-06-30
US10/631,487 2003-07-31
US10/640,412 2003-08-13

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN1822824A true CN1822824A (zh) 2006-08-23

Family

ID=36923759

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CNA2004800202597A Pending CN1822824A (zh) 2003-05-13 2004-05-13 治疗退化性盘疾病的方法

Country Status (2)

Country Link
US (14) US7344716B2 (zh)
CN (1) CN1822824A (zh)

Cited By (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103458926A (zh) * 2010-11-11 2013-12-18 阿布维生物技术有限公司 改进的高浓度抗TNF α 抗体液体制剂
CN104955464A (zh) * 2012-09-19 2015-09-30 微血管组织有限公司 用于治疗和预防组织损伤和疾病的组合物和方法
CN108251351A (zh) * 2018-01-10 2018-07-06 暨赛再生医学科技有限公司 一种椎间盘细胞自噬作用的诱导物
US10596202B2 (en) 2012-09-19 2020-03-24 Microvascular Tissues, Inc. Compositions and methods for treating and preventing tissue injury and disease
US10617792B2 (en) 2012-09-19 2020-04-14 Microvascular Tissues, Inc. Compositions and methods for treating and preventing tissue injury and disease
US11819522B2 (en) 2012-09-19 2023-11-21 Microvascular Tissues, Inc. Compositions and methods for treating and preventing tissue injury and disease

Families Citing this family (22)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US7115557B2 (en) * 1998-09-25 2006-10-03 Sciaticon Ab Use of certain drugs for treating nerve root injury
US7553827B2 (en) * 2003-08-13 2009-06-30 Depuy Spine, Inc. Transdiscal administration of cycline compounds
US7429378B2 (en) * 2003-05-13 2008-09-30 Depuy Spine, Inc. Transdiscal administration of high affinity anti-MMP inhibitors
US8273347B2 (en) * 2003-05-13 2012-09-25 Depuy Spine, Inc. Autologous treatment of degenerated disc with cells
US20040229878A1 (en) * 2003-05-13 2004-11-18 Depuy Spine, Inc. Transdiscal administration of specific inhibitors of P38 kinase
US7344716B2 (en) * 2003-05-13 2008-03-18 Depuy Spine, Inc. Transdiscal administration of specific inhibitors of pro-inflammatory cytokines
US8361467B2 (en) 2003-07-30 2013-01-29 Depuy Spine, Inc. Trans-capsular administration of high specificity cytokine inhibitors into orthopedic joints
US8895540B2 (en) * 2003-11-26 2014-11-25 DePuy Synthes Products, LLC Local intraosseous administration of bone forming agents and anti-resorptive agents, and devices therefor
US20060046960A1 (en) * 2004-09-02 2006-03-02 Mckay William F Controlled and directed local delivery of anti-inflammatory compositions
US20070036788A1 (en) * 2004-09-22 2007-02-15 Ahmed Sheriff Use of a compound for reducing the biological effectiveness of il-6
US8673268B2 (en) 2004-10-15 2014-03-18 Galapagos N.V. Molecular targets and compounds, and methods to identify the same, useful in the treatment of joint degenerative and inflammatory diseases
US7485468B2 (en) * 2004-10-15 2009-02-03 Galapagos Bv Molecular targets and compounds, and methods to identify the same, useful in the treatment of joint degenerative and inflammatory diseases
US20070253960A1 (en) * 2006-04-28 2007-11-01 Josee Roy Pharmaceutical removal of vascular extensions from a degenerating disc
US20100093829A1 (en) * 2006-07-07 2010-04-15 Gorman James R Methods for preventing, postponing or improving the outcome of spinal device and fusion procedures
US20090162351A1 (en) * 2007-12-21 2009-06-25 Depuy Spine, Inc. Transdiscal administration of inhibitors of p38 MAP kinase
US8986696B2 (en) * 2007-12-21 2015-03-24 Depuy Mitek, Inc. Trans-capsular administration of p38 map kinase inhibitors into orthopedic joints
US9775978B2 (en) 2014-07-25 2017-10-03 Warsaw Orthopedic, Inc. Drug delivery device and methods having a retaining member
US10080877B2 (en) 2014-07-25 2018-09-25 Warsaw Orthopedic, Inc. Drug delivery device and methods having a drug cartridge
US10076650B2 (en) 2015-11-23 2018-09-18 Warsaw Orthopedic, Inc. Enhanced stylet for drug depot injector
US10549081B2 (en) 2016-06-23 2020-02-04 Warsaw Orthopedic, Inc. Drug delivery device and methods having a retaining member
US10434261B2 (en) 2016-11-08 2019-10-08 Warsaw Orthopedic, Inc. Drug pellet delivery system and method
US20240135548A1 (en) * 2022-10-19 2024-04-25 Universal City Studios Llc Systems and methods for tracking an interactive object

Family Cites Families (120)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6948A (en) * 1849-12-11 David vaughan
US32155A (en) * 1861-04-23 Jakob sttjber and friedrich frank
US198599A (en) * 1877-12-25 Improvement in tents
US26801A (en) * 1860-01-10 peters
US3678158A (en) 1971-05-11 1972-07-18 Worthington Bio Chem Corp Treatment of herniated intervertebral discs of mammals
GB1523965A (en) 1976-03-19 1978-09-06 Ici Ltd Pharmaceutical compositions containing steroids
DK144800C (da) 1980-04-21 1982-10-25 Forenede Bryggerier As Fremgangsmaade til udvinding af enzymer,fortrinsvis cu,zn-superoxid-dismutase (sod),catalase og carbonsyreanhydrase,fra blod
US4435506A (en) 1982-08-13 1984-03-06 Miles Laboratories, Inc. Isolation of superoxide dismutase
US4870163A (en) 1985-08-29 1989-09-26 New York Blood Center, Inc. Preparation of pure human tumor necrosis factor and hybridomas producing monoclonal antibodies to human tumor necrosis factor
US4696816A (en) 1985-11-07 1987-09-29 Brown Mark D Method for treating intervertebral disc displacement with enzymes
DE3631229A1 (de) 1986-09-13 1988-03-24 Basf Ag Monoklonale antikoerper gegen humanen tumornekrosefaktor (tnf) und deren verwendung
DE3888224T2 (de) 1987-04-24 1994-07-21 Teijin Ltd Bestimmung vom Tumornekrosefaktor; monoklonaler Antikörper und Zusammensetzung.
KR0148009B1 (ko) 1988-05-27 1998-08-01 그래고리 비. 아보트 인터루킨-1 억제제
JPH03215430A (ja) 1990-01-19 1991-09-20 Kita Kiyoshi 関節腔抗凝固剤
US5225538A (en) 1989-02-23 1993-07-06 Genentech, Inc. Lymphocyte homing receptor/immunoglobulin fusion proteins
US5116964A (en) 1989-02-23 1992-05-26 Genentech, Inc. Hybrid immunoglobulins
SE464761B (sv) * 1989-05-31 1991-06-10 Post Mix Equipment Ab Foerfarande och anordning foer kolsyresaettning och kylning av en vaetska
US5194596A (en) 1989-07-27 1993-03-16 California Biotechnology Inc. Production of vascular endothelial cell growth factor
JP3443119B2 (ja) 1989-08-07 2003-09-02 ペプテック リミテッド 腫瘍壊死因子結合リガンド
US5095037B1 (en) 1989-12-21 1995-12-19 Nissho Kk Combined anti-inflammatory agent
GB9022648D0 (en) 1990-10-18 1990-11-28 Charing Cross Sunley Research Polypeptide and its use
US5223248A (en) 1991-02-11 1993-06-29 The Research Foundation Of State University Of New York Non-antibacterial tetracycline compositions possessing antiplaque properties
US5656272A (en) 1991-03-18 1997-08-12 New York University Medical Center Methods of treating TNF-α-mediated Crohn's disease using chimeric anti-TNF antibodies
US6277969B1 (en) 1991-03-18 2001-08-21 New York University Anti-TNF antibodies and peptides of human tumor necrosis factor
CA2106299C (en) 1991-03-18 2001-02-06 Junming Le Monoclonal and chimeric antibodies specific for human tumor necrosis factor
US6284471B1 (en) 1991-03-18 2001-09-04 New York University Medical Center Anti-TNFa antibodies and assays employing anti-TNFa antibodies
US5270300A (en) 1991-09-06 1993-12-14 Robert Francis Shaw Methods and compositions for the treatment and repair of defects or lesions in cartilage or bone
US5656644A (en) 1994-07-20 1997-08-12 Smithkline Beecham Corporation Pyridyl imidazoles
CZ287715B6 (en) 1992-02-12 2001-01-17 Bioph Biotech Entw Pharm Gmbh DNA sequence, recombinant DNA molecule containing thereof, process for preparing protein from the group of TGF-beta substances, pharmaceutical preparation containing such protein, antibody or fragment thereof and its use
US5447851B1 (en) 1992-04-02 1999-07-06 Univ Texas System Board Of Dna encoding a chimeric polypeptide comprising the extracellular domain of tnf receptor fused to igg vectors and host cells
US5258371A (en) 1992-05-29 1993-11-02 Kuraray Co., Ltd. Method to reduce connective tissue destruction
US5368841A (en) 1993-02-11 1994-11-29 The General Hospital Corporation Photodynamic therapy for the destruction of the synovium in the treatment of rheumatoid arthritis and the inflammatory arthritides
TW303299B (zh) 1993-07-22 1997-04-21 Lilly Co Eli
US5602156A (en) * 1993-09-17 1997-02-11 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Method for inhibiting metalloproteinase expression
EP1306377A3 (en) 1993-11-08 2003-05-07 Smithkline Beecham Corporation Pyridyl-oxazoles and their use as cytokines inhibitors
DE19505287A1 (de) 1994-02-18 1995-08-24 Immuno Ag Zusammensetzung und Verfahren zur Prävention und Behandlung von Entzündungen mit Immunglobulin A
US20030207827A1 (en) 1995-12-22 2003-11-06 William J. Boyle Osteoprotegerin
SK284136B6 (sk) 1996-02-02 2004-09-08 Alza Corporation Implantabilné zariadenie na dodávanie leuprolidu do okolitého kvapalného prostredia
JP4344404B2 (ja) 1996-02-09 2009-10-14 アムジェン インコーポレイテッド インターロイキン―１インヒビターおよび制御放出ポリマーを含む組成物
US5842477A (en) * 1996-02-21 1998-12-01 Advanced Tissue Sciences, Inc. Method for repairing cartilage
NZ331238A (en) 1996-03-05 2000-05-26 Orquest Inc Method of promoting bone growth with hyaluronic acid and growth factors (bFGF)
US5824084A (en) 1996-07-03 1998-10-20 The Cleveland Clinic Foundation Method of preparing a composite bone graft
US7069087B2 (en) * 2000-02-25 2006-06-27 Oratec Interventions, Inc. Apparatus and method for accessing and performing a function within an intervertebral disc
DE69738948D1 (de) 1996-12-06 2008-10-09 Amgen Inc Il-1-inhibitor in kombinationstherapie zur behandlung il-1-vermittelter krankheiten
US6294170B1 (en) 1997-08-08 2001-09-25 Amgen Inc. Composition and method for treating inflammatory diseases
US6316408B1 (en) * 1997-04-16 2001-11-13 Amgen Inc. Methods of use for osetoprotegerin binding protein receptors
PL191111B1 (pl) 1997-04-24 2006-03-31 Ortho Mcneil Pharm Inc Podstawione imidazole, sposób ich wytwarzania, kompozycje zawierające podstawione imidazole oraz ich zastosowanie
US5827886A (en) * 1997-05-07 1998-10-27 Thione International, Inc. Composition for relief of arthritis-induced symptoms
GB9713726D0 (en) * 1997-06-30 1997-09-03 Ciba Geigy Ag Organic compounds
AU739517B2 (en) 1997-08-16 2001-10-11 Orthogen Gentechnologie Gmbh A method for inducing therapeutically-effective proteins
US6770623B1 (en) 1997-12-09 2004-08-03 Eli Lilly And Company Stabilized teriparatide solutions
KR20010033268A (ko) 1997-12-18 2001-04-25 피터 지. 스트링거 결정형 테리파라타이드
EP0950417A3 (en) 1998-02-23 2000-02-23 Pfizer Products Inc. Treatment of skeletal disorders
EP1061917A1 (en) 1998-03-13 2000-12-27 Merck & Co., Inc. Methods of inhibiting bone resorption
JP2002510646A (ja) 1998-04-03 2002-04-09 カイロン コーポレイション 関節軟骨障害を処置するためのｉｇｆｉの使用
SE9803710L (sv) 1998-09-25 2000-03-26 A & Science Invest Ab Användning av vissa substanser för behandling av nervrotsskador
US7115557B2 (en) 1998-09-25 2006-10-03 Sciaticon Ab Use of certain drugs for treating nerve root injury
US7067144B2 (en) * 1998-10-20 2006-06-27 Omeros Corporation Compositions and methods for systemic inhibition of cartilage degradation
US20010006948A1 (en) 1998-11-25 2001-07-05 James D. Kang Gene transfer to intervertebral disc cells
DE69903976T2 (de) 1998-12-16 2003-07-24 Aventis Pharma Ltd Heteroaryl-zyklische acetale
DE19903876B4 (de) 1999-02-01 2006-09-28 Orthogen Gentechnologie Gmbh Verfahren zur in-vitro-Bildung und Anreicherung von Interleukin-1 Rezeptor-Antagonisten
US6982089B2 (en) 1999-02-24 2006-01-03 Tact Ip, Llc Cytokine antagonists for neurological and neuropsychiatric disorders
US6537549B2 (en) * 1999-02-24 2003-03-25 Edward L. Tobinick Cytokine antagonists for the treatment of localized disorders
US6015557A (en) 1999-02-24 2000-01-18 Tobinick; Edward L. Tumor necrosis factor antagonists for the treatment of neurological disorders
US20030007972A1 (en) 1999-02-24 2003-01-09 Edward Tobinick Cytokine antagonists and other biologics for the treatment of bone metastases
US6419944B2 (en) 1999-02-24 2002-07-16 Edward L. Tobinick Cytokine antagonists for the treatment of localized disorders
US6428576B1 (en) 1999-04-16 2002-08-06 Endospine, Ltd. System for repairing inter-vertebral discs
US6340369B1 (en) * 1999-08-13 2002-01-22 Bret A. Ferree Treating degenerative disc disease with harvested disc cells and analogues of the extracellular matrix
US6352557B1 (en) 1999-08-13 2002-03-05 Bret A. Ferree Treating degenerative disc disease through transplantion of extracellular nucleus pulposus matrix and autograft nucleus pulposus cells
WO2001012630A1 (en) * 1999-08-13 2001-02-22 Sepracor Inc. Spirocyclic ligands for sigma receptors, and libraries and methods of use thereof
US6541477B2 (en) 1999-08-27 2003-04-01 Scios, Inc. Inhibitors of p38-a kinase
AU2001238019A1 (en) 2000-02-04 2001-08-14 Regeneration Technologies, Inc. Methods for injecting materials into bone
US6723335B1 (en) * 2000-04-07 2004-04-20 Jeffrey William Moehlenbruck Methods and compositions for treating intervertebral disc degeneration
US6554830B1 (en) 2000-04-10 2003-04-29 Sdgi Holdings, Inc. Fenestrated surgical anchor and method
US6645485B2 (en) 2000-05-10 2003-11-11 Allan R. Dunn Method of treating inflammation in the joints of a body
US6800298B1 (en) 2000-05-11 2004-10-05 Clemson University Biological lubricant composition and method of applying lubricant composition
US20020032155A1 (en) 2000-06-30 2002-03-14 Ferree Bret A. Method of treating disc herniation and disc degeneration with concentrated growth and differentiation factors
US20020026244A1 (en) 2000-08-30 2002-02-28 Trieu Hai H. Intervertebral disc nucleus implants and methods
US7998507B2 (en) 2000-09-21 2011-08-16 Elan Pharma International Ltd. Nanoparticulate compositions of mitogen-activated protein (MAP) kinase inhibitors
US6756215B1 (en) 2000-10-20 2004-06-29 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health & Human Services Functionalized TGF-β fusion proteins
EP1330270A2 (en) 2000-11-03 2003-07-30 Control Delivery Systems, Inc. Sustained release device for treating conditions of the joint
US6593310B1 (en) * 2000-11-21 2003-07-15 Arthropharm Pty. Ltd. Treatment of osteoporosis
CN100357278C (zh) 2000-12-22 2007-12-26 奥索-麦克尼尔药品公司 作为激酶抑制剂的取代的三唑二胺衍生物
US20020082697A1 (en) * 2000-12-22 2002-06-27 Damien Christopher J. Implantable osteogenic material
US20030069639A1 (en) 2001-04-14 2003-04-10 Tom Sander Methods and compositions for repair or replacement of joints and soft tissues
CA2817619A1 (en) * 2001-06-08 2002-12-08 Abbott Laboratories (Bermuda) Ltd. Methods of administering anti-tnf.alpha. antibodies
CA2450400A1 (en) * 2001-06-11 2002-12-19 Takeda Chemical Industries, Ltd. Medicinal compositions
SE0102067D0 (sv) 2001-06-11 2001-06-11 A & Science Invest Ab Prevention of neovascularization of intervertebral discs and/or of tissues with local inflammation
EP1406571A4 (en) 2001-06-25 2007-05-30 Depuy Int Ltd LIPOSOMAL ENCAPSULATION OF GLYCOSAMINOGLYCANS FOR THE TREATMENT OF ARTHROSIS JOINTS
US20030008817A1 (en) * 2001-07-03 2003-01-09 Tom Sander Cross-link reversing agent
IL162419A0 (en) * 2001-12-10 2005-11-20 Colbar Lifescience Ltd Methods, devices, and preparations for intervertebral disc treatment
US20030220692A1 (en) * 2002-02-09 2003-11-27 Shapiro Irving M. Preparations of nucleus pulposus cells and methods for their generation, identification, and use
FR2836681B1 (fr) * 2002-03-04 2004-06-18 Centre Nat Rech Scient Compose phosphocalcique modifie, composition injectable le contenant
KR20050042466A (ko) * 2002-07-19 2005-05-09 애보트 바이오테크놀로지 리미티드 ＴＮＦα 관련 질환의 치료
US7674250B2 (en) * 2002-08-05 2010-03-09 Boston Scientific Scimed, Inc. Methods of delivering therapeutic agents
AR047712A1 (es) 2002-09-07 2006-02-15 Royal Veterinary College Metodo de tratamiento de una lesion de tejido esqueletico blando natural administrando una composicion de celulas madre mesenquimatosas
US20060140914A1 (en) 2002-10-31 2006-06-29 The General Hospital Corporation Repairing or replacing tissues or organs
US7135575B2 (en) 2003-03-03 2006-11-14 Array Biopharma, Inc. P38 inhibitors and methods of use thereof
US20040193274A1 (en) 2003-03-28 2004-09-30 Trieu Hai H. Materials and methods for augmenting and/or repairing intervertebral discs
US20040193270A1 (en) 2003-03-31 2004-09-30 Depuyacromed, Inc. Implantable bone graft
WO2005000283A2 (en) 2003-05-13 2005-01-06 Depuy Spine, Inc. A method of treating degenerative disc disease
US7553827B2 (en) * 2003-08-13 2009-06-30 Depuy Spine, Inc. Transdiscal administration of cycline compounds
US20040229878A1 (en) 2003-05-13 2004-11-18 Depuy Spine, Inc. Transdiscal administration of specific inhibitors of P38 kinase
US7429378B2 (en) 2003-05-13 2008-09-30 Depuy Spine, Inc. Transdiscal administration of high affinity anti-MMP inhibitors
US8273347B2 (en) 2003-05-13 2012-09-25 Depuy Spine, Inc. Autologous treatment of degenerated disc with cells
US7344716B2 (en) * 2003-05-13 2008-03-18 Depuy Spine, Inc. Transdiscal administration of specific inhibitors of pro-inflammatory cytokines
US8361467B2 (en) 2003-07-30 2013-01-29 Depuy Spine, Inc. Trans-capsular administration of high specificity cytokine inhibitors into orthopedic joints
US20050100538A1 (en) 2003-07-31 2005-05-12 Attawia Mohamed Intradiscal injection of anti-oxidants
US7897384B2 (en) * 2003-09-08 2011-03-01 Ethicon, Inc. Chondrocyte therapeutic delivery system
US20050090801A1 (en) * 2003-10-27 2005-04-28 Racz N. S. Safety spinal catheter
US20050208095A1 (en) * 2003-11-20 2005-09-22 Angiotech International Ag Polymer compositions and methods for their use
US8895540B2 (en) 2003-11-26 2014-11-25 DePuy Synthes Products, LLC Local intraosseous administration of bone forming agents and anti-resorptive agents, and devices therefor
US7833452B2 (en) 2004-05-11 2010-11-16 The General Hospital Corporation Method for making oxidation resistant polymeric material
JP2008504895A (ja) * 2004-06-29 2008-02-21 スパイン・ウェイブ・インコーポレーテッド 椎間板の欠陥及び損傷を治療する方法
US7741273B2 (en) * 2006-04-13 2010-06-22 Warsaw Orthopedic, Inc. Drug depot implant designs
US20070282300A1 (en) * 2006-06-05 2007-12-06 Mohamed Attawia Intervertebral Disc Puncture and Treatment System
US8333697B2 (en) * 2006-06-08 2012-12-18 Warsaw Orthopedic, Inc. Diagnostic kits and methods for diagnosis of axial pain with or without radiculopathy
US20090162351A1 (en) * 2007-12-21 2009-06-25 Depuy Spine, Inc. Transdiscal administration of inhibitors of p38 MAP kinase
US8986696B2 (en) * 2007-12-21 2015-03-24 Depuy Mitek, Inc. Trans-capsular administration of p38 map kinase inhibitors into orthopedic joints
US20140276591A1 (en) * 2013-03-14 2014-09-18 Mi4Spine, Llc Percutaneous intervertebral annular regeneration

Cited By (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103458926A (zh) * 2010-11-11 2013-12-18 阿布维生物技术有限公司 改进的高浓度抗TNF α 抗体液体制剂
CN103458926B (zh) * 2010-11-11 2016-10-26 艾伯维生物技术有限公司 改进的高浓度抗TNF α 抗体液体制剂
CN104955464A (zh) * 2012-09-19 2015-09-30 微血管组织有限公司 用于治疗和预防组织损伤和疾病的组合物和方法
CN104955464B (zh) * 2012-09-19 2020-02-28 微血管组织有限公司 用于治疗和预防组织损伤和疾病的组合物和方法
US10596202B2 (en) 2012-09-19 2020-03-24 Microvascular Tissues, Inc. Compositions and methods for treating and preventing tissue injury and disease
US10617792B2 (en) 2012-09-19 2020-04-14 Microvascular Tissues, Inc. Compositions and methods for treating and preventing tissue injury and disease
US10729729B2 (en) 2012-09-19 2020-08-04 Microvascular Tissues, Inc. Compositions and methods for treating and preventing tissue injury and disease
US11246891B2 (en) 2012-09-19 2022-02-15 Micro Vascular Tissues, Inc. Compositions and methods for treating and preventing tissue injury and disease
US11819522B2 (en) 2012-09-19 2023-11-21 Microvascular Tissues, Inc. Compositions and methods for treating and preventing tissue injury and disease
CN108251351A (zh) * 2018-01-10 2018-07-06 暨赛再生医学科技有限公司 一种椎间盘细胞自噬作用的诱导物
CN108251351B (zh) * 2018-01-10 2019-01-25 暨赛再生医学科技有限公司 一种椎间盘细胞自噬作用的诱导物

Also Published As

Publication number Publication date
US20160310573A1 (en) 2016-10-27
US20160310537A1 (en) 2016-10-27
US20090175943A1 (en) 2009-07-09
US20160310538A1 (en) 2016-10-27
US20160310536A1 (en) 2016-10-27
US20160228558A1 (en) 2016-08-11
US20160310539A1 (en) 2016-10-27
US8877193B2 (en) 2014-11-04
US8728523B2 (en) 2014-05-20
US20170065641A1 (en) 2017-03-09
US20070237777A1 (en) 2007-10-11
US20160310535A1 (en) 2016-10-27
US20080213261A1 (en) 2008-09-04
US7344716B2 (en) 2008-03-18
US20140199322A1 (en) 2014-07-17
US20170252375A1 (en) 2017-09-07
US20090155364A1 (en) 2009-06-18

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN1822824A (zh) 治疗退化性盘疾病的方法
US8361467B2 (en) Trans-capsular administration of high specificity cytokine inhibitors into orthopedic joints
Alves et al. Animal models of bone loss in inflammatory arthritis: from cytokines in the bench to novel treatments for bone loss in the bedside—a comprehensive review
Stamp et al. Interleukin‐17: the missing link between T‐cell accumulation and effector cell actions in rheumatoid arthritis?
CN1905921A (zh) 骨形成剂和抗再吸收剂的局部骨内给药及其装置
Kugyelka et al. Enigma of IL‐17 and Th17 cells in rheumatoid arthritis and in autoimmune animal models of arthritis
Adami et al. The role of interleukin-17A in psoriatic disease
Sarkar et al. The role of T helper type 17 cells in inflammatory arthritis
Nograles et al. Anti-cytokine therapies for psoriasis
Crow et al. Regulation of CD40 ligand expression in systemic lupus erythematosus
JP2007500723A5 (zh)
CN1295482A (zh) 炎性介质拮抗剂
US20040229878A1 (en) Transdiscal administration of specific inhibitors of P38 kinase
CN1658901A (zh) 用于治疗tweak相关病症的方法
Pasparakis et al. Tumour necrosis factors in immune regulation: everything that's interesting is… new!
KR20060014048A (ko) 퇴행성 디스크 질환을 치료하는 방법
CN1404400A (zh) Il－18抑制剂的应用
Rasheed et al. Update on targets of biologic therapies for rheumatoid arthritis
Zhang et al. No significant effects of IL-23 on initiating and perpetuating the axial spondyloarthritis: the reasons for the failure of IL-23 inhibitors
Moreland Clinical and pharmacological experience with etanercept
Das et al. Molecular target and therapeutic aspects of rheumatoid arthritis: a review
CN1871028A (zh) 通过施用神经生长因子拮抗剂和nsaid和含有它们的组合物治疗疼痛的方法
Nedospasov et al. Anti-Tumour Necrosis Factor and New Paradigms for Therapies Using Antibodies
Fernandes et al. THE USE OF BIOLOGICS IN THE TREATMENT OF AUTOIMMUNE DISEASE: A REVIEW
CN101062415A (zh) Il－18抑制剂的应用

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C02 Deemed withdrawal of patent application after publication (patent law 2001)
WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication