CN1817866A - 一组连有核苷碱基的格尔德霉素衍生物 - Google Patents

一组连有核苷碱基的格尔德霉素衍生物 Download PDF

Info

Publication number
CN1817866A
CN1817866A CN 200610065232 CN200610065232A CN1817866A CN 1817866 A CN1817866 A CN 1817866A CN 200610065232 CN200610065232 CN 200610065232 CN 200610065232 A CN200610065232 A CN 200610065232A CN 1817866 A CN1817866 A CN 1817866A
Authority
CN
China
Prior art keywords
compound
geldanamycin
amino
och
nucleosides
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN 200610065232
Other languages
English (en)
Other versions
CN100519536C (zh
Inventor
李卓荣
陶佩珍
山广志
李玉环
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Institute of Medicinal Biotechnology of CAMS
Original Assignee
Institute of Medicinal Biotechnology of CAMS
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Institute of Medicinal Biotechnology of CAMS filed Critical Institute of Medicinal Biotechnology of CAMS
Priority to CNB2006100652320A priority Critical patent/CN100519536C/zh
Publication of CN1817866A publication Critical patent/CN1817866A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN100519536C publication Critical patent/CN100519536C/zh
Expired - Fee Related legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Abstract

本发明涉及一组连有核苷碱基的格尔德霉素衍生物，它是通过在格尔德霉素分子中引入水溶性强的核苷碱基，保留或增强格尔德霉素原有抗病毒活性的同时，通过改善其水溶性及组织分布等药代动力学性质，以获得具有较小毒性和较高疗效的新型化合物，其中，核苷碱基与格尔德霉素之间以带有氨基的链状结构部分(称为Linker)相连接。

Description

一组连有核苷碱基的格尔德霉素衍生物
技术领域：
本发明涉及一组连有核苷碱基的格尔德霉素衍生物；本发明又涉及所说化合物的制备方法和在抗病毒及抗肿瘤方面的应用；本发明还涉及所说化合物的药物组合物。
背景技术：
格尔德霉素为吸湿链霉菌发酵产生的苯醌安莎类抗生素，由一个苯醌结构与一个平面性大环安莎桥构成。格尔德霉素的作用靶点是热休克蛋白Hsp90，它特异性地使Hsp90失活而抑制病毒的复制。格尔德霉素通过干扰Hsp90的正常功能，阻止Hsp90底物蛋白活化，诱导细胞周期阻断而抑制病毒复制，从而起到抗病毒或抗肿瘤的作用。独特的作用机理，使得格尔德霉素具有广抗病毒/肿瘤谱、与其它药物没有交叉耐药和本身难以产生耐药性的特性。格尔德霉素是以细胞因子为靶点的新型抗病毒或抗肿瘤药物合成与筛选的优异先导化合物。
以格尔德霉素为先导物进行结构改造的工作已有一些专利或文献报道，而国外研究多以抗肿瘤药物筛选为目的。1979年Kazuya Sasaki等报道了格尔德霉素17位胺基取代衍生物的合成与抗肿瘤活性(Kazuya Sasaki et al：J.Antibiotics，32(8)：849-851；1979)。其中，改造物17-环丙胺基和17-丙烯胺基衍生物的抗肿瘤活性强于格尔德霉素。而17-丙烯胺基衍生物的抗肿瘤活性较格尔德霉素有所提高的同时，肝毒性显著降低，是第一个进入临床试验的Hsp90抑制剂。在较低的浓度下，该衍生物能够迅速与肿瘤细胞来源的Hsp90靶向结合，主要聚集在肿瘤组织，优先杀伤肿瘤细胞。在体外、体内对p185erbB2具有较高的抑制活性(Schnur RC，Coman ML，Gallaschun RJ，et al.J Med Chem，38(19)：3813-3820；1995)。
格尔德霉素的另一衍生物17-DMAG(17-二甲基氨基乙氨基-17-去甲氧基格尔德霉素盐酸盐)，也是通过与ATP竞争结合Hsp90N-末端结合域来抑制Hsp90活性，目前正在进行I期临床试验。在体外活性筛选中，17-DMAG的半数生长抑制数GI50为51nM，强于17-AAG的GI50 120nM。17-DMAG对乳腺癌和白血病细胞系显示了潜在的活性，而这二者对17-AAG不敏感；更重要的是，17-DMAG比17-AAG有更好的溶解性和口服生物利用度。口服17-DMAG 5天，每天2次，每次6.7mg/kg，能够抑制种植胰腺瘤AsPC-1的生长，而17-AAG在此条件下没有活性。17-DMAG注射或口服给药对于黑色素瘤、腺癌、小细胞癌也显示了明显的抗肿瘤活性(Hollingshead M，et al.Cancer Chemother Pharmacol.56(2)：115-125；2005)。
针对格尔德霉素在体内分布不均、易集中于肝脏和肺部从而引起严重肝脏毒性的情况，Mandler R.等合成制备了激素或单克隆抗体与格尔德霉素的偶联物，该类偶联物能够选择性地引起雌激素受体和HER2的降解，对其它部位无明显影响，增强了其组织分布选择性和靶位专一性(Mandler R et al：J.Natl.CancerInst.，92(19)：1573-1581；2000)。其中Linker为 的格尔德霉素-雌二醇结合物的抗肿瘤活性最为理想，对HER2和雌激素受体IC50分别为0.1μmol和0.08μmol，对Raf-1的IC50为1.5μmol。格尔德霉素与单克隆抗体Herceptin能免疫偶联成复合物H：APA-GA。该免疫偶联物在体外对MDA-361/DYT2细胞的IC50为0.2±0.03mg/mL，而未经修饰的Herceptin在10mg/mL浓度下对MDA-361/DYT2细胞增生抑制率只有25％(Mandler R，Kobayashi H，Davis M，et al.Bioconjug Chem，13(4)：786-791.2002)。Randall James等以筛选抗肿瘤药物为目的，合成了一系列4，5-二氢格尔德霉素17-取代衍生物(RandallJames et al：WO 9501342 A1)。Lin Zhang等以改善药效学和生物学特性为目的，合成了格尔德霉素的二聚体类衍生物(Zhang Lin et al：WO 2003066005 A2)，其中，以二乙二胺为桥的格尔德霉素17位二聚体对BT474和SKOV-3肿瘤模型具有抑制活性。
总之，文献报道针对格尔德霉素的修饰，多为在17位引入脂肪性胺基取代基，或在17位引入单克隆抗体。在格尔德霉素17位引入核苷碱基筛选抗病毒药物的合成研究，迄今尚未见有文献报道。
中国医学科学院医药生物技术研究所以抗病毒药物筛选研究为主要目的，对格尔德霉素进行了系列研究，并拥有格尔德霉素抗病毒感染治疗药物用途的专利(ZL97100523)，对格尔德霉素的抗病毒活性、作用机理和开发应用等作了深入研究(Li Yuhuan，Tao Peizheng et al：Antimicrobial Agents and Chemotherapy，48(3)：867-872；2004)。在体外抗病毒实验中，格尔德霉素显著抑制非洲绿猴肾细胞(Vero)内疱疹病毒HSV-1的复制，其IC50为0.093μmol，对Vero细胞的毒性(CC50)为350μmol。格尔德霉素体外对疱疹病毒HSV-2、水痘禽口疾疫病毒VSV、柯萨奇三型病毒Cox B3、脊髓灰质炎病毒Polio-1、HIV-1和SARS冠状病毒的IC50均在μmol水平，有明显抑制活性。
格尔德霉素不影响病毒的吸附、穿入等，具有独特的抗病毒作用机理以及广抗病毒谱，并且具有与其它抗病毒药物无交叉耐药和本身难以产生耐药性的特性。
有关研究显示，格尔德霉素与核苷类抗病毒药物联合使具有协同作用，而且对耐药毒株亦有明显抑制活性。借鉴抗HIV治疗中“鸡尾酒疗法”的经验，考虑到联合用药的目的以及核苷碱基的强水溶性，本发明合成了一组连有核苷碱基的格尔德霉素衍生物，测定了所述化合物的抗病毒活性和抗病毒谱。
本发明的主要目的在于：通过在格尔德霉素分子中引入水溶性强的核苷碱基，保留或增强格尔德霉素原有抗病毒活性的同时，通过改善其水溶性及组织分布等药代动力学性质，以期获得具有较小毒性和较高疗效的新型化合物。其中，核苷碱基与格尔德霉素之间以带有氨基的链状结构部分(称为Linker)相连。
发明内容：
本发明提供了一组连有核苷碱基的格尔德霉素衍生物，其结构如式(I)所示：
Figure A20061006523200061
其中：
Linker为含有3-20个碳的直链或支链、饱和或不饱和、脂肪性或芳香性、不含或含有醚键或酯键或酰胺键的联结部分；
R为腺苷、鸟苷、胞苷、尿苷等核苷及其结构类似物，或腺嘌呤、鸟嘌呤、胞嘧啶或尿嘧啶等核苷碱基，以及带有取代基R1的上述官能团；
R1为含有1-8个碳原子的烃基、烃氧基，卤素，巯基。
本发明提供了式(I)化合物的制备方法，其反应路线如下：
Figure A20061006523200071
其中：
X为羧基、羟基、氨基或卤素；R为核苷或R1取代的核苷(R1为1～8个碳原子数的烃基、烃氧基、卤素、氨基或巯基)；M为羟基、巯基、氨基；Y代表酯键、酰胺键、醚键、硫醚键及亚胺键；n＝0～20。
该路线首先参照文献方法(赵知中等，有机化学中的保护基团，科学出版社，1984：41-49)，利用Boc2O(市售品)对起始化合物a(γ-氨基丁酸、δ-氨基戊酸、3-氨基丙酸、4-氨基丁醇、4-氨基丁硫醇、1，4-二氨基丁烷、1，3-二氨基丙烷等，均为市售品)的伯氨基进行保护得到Boc保护的相应产物b。
化合物b再与核苷或取代核苷R-M(环状或非环状腺苷、鸟苷、尿苷或胞苷，均购自Sigma试剂公司及北京试剂公司)的活泼羟基、胺基或巯基进行缩合，形成酯键、酰胺键、醚键、硫醚键及亚胺键实现核苷部分与Linker的连接，得到化合物c。
在三氟醋酸的作用下，化合物c脱去Boc保护基(部分核苷的异丙叉保护基亦同时脱去)，得到带有游离氨基的化合物d。
化合物d在卤代烷烃类溶剂如氯仿、醇性溶剂如甲醇或极性非质子性溶剂如N，N-二甲基甲酰胺、二甲亚砜、乙酸乙酯、乙腈、丙酮中，碱性条件(三乙胺、吡啶、N，N-二甲基吡啶、碳酸钾、碳酸钠、氢氧化钙)下，与格尔德霉素(自制样品，属于市售商品，可购自Sigma等公司)发生亲核取代反应，得到目标化合物(I)。
按照上述路线和方法制备得到了化合物1～27，结构见表1。
本发明发现了式(I)化合物具有抗HBV、HIV、HSV作用。
本发明还提供了所说化合物的药物组合物，可以含有治疗有效量的上述化合物为活性成分，以及含有一种或多种药学上可接受的载体。
本发明的化合物和药物组合物可用于制备抗病毒或抗肿瘤药物。
本发明药物组合物的各种剂型可以按照药学领域的常规生产方法制备，例如使活性成分与一种或多种载体混合，然后将其制成所需的剂型。
本发明的药物组合物优选含有重量比为0.1％-99.5％的活性成分，最优选含有重量比为0.5％-99.5％的活性成分。
发明效果：
按照以上所说路线和方法，能够稳定、可重复性地合成得到本发明化合物。
本发明采用细胞培养法测定了发明化合物的体外抗病毒活性和抗病毒谱，结果发明化合物具有广谱抗病毒活性，对逆转录病毒HIV-1和HBV的抑制作用较强，IC50在ng/ml水平，强于对照药拉米夫定，对疱疹病毒HSV-1和2型的活性明显强于对照药阿昔洛韦。另外，发明化合物对CoX病毒也有较强抑制活性。各化合物的活性测定结果如表1所示。
表1：发明化合物的抗病毒活性
Figure A20061006523200101
具体实施例：
以下实施例可以使本专业技术人员更全面的理解本发明，但不以任何方式限制本发明。所有化合物的结构均经1H NMR或MS所确定。
实施例1：17-(4’-((5”-(4-氨基-2-氧代嘧啶-1(2H)-基)-1”，3”-氧硫杂环戊-2”-基)甲氧基)-4’-氧代丁胺)-17-去甲氧基格尔德霉素(1)的制备
参照文献(赵知中等，有机化学中的保护基团，科学出版社，1984：41-49)，以Boc2O为原料，保护γ-氨基丁酸的伯氨基，得到γ-叔丁氧酰胺-丁酸。
取γ-叔丁氧酰胺-丁酸0.45g(2.22mmol)，加入5mL CHCl3。溶解后加入二环己基碳二亚胺(DCC)0.6g(2.91mmol)，室温搅拌，出现大量白色混浊。反应进行4小时，滤除白色沉淀，含有γ-叔丁氧酰胺-丁酸酐的滤液备用。
取拉米夫定0.6g(2.63mmol)置250mL带回流冷凝装置的圆底烧瓶中，加入N，N-二甲基甲酰胺50mL，70℃搅拌，至拉米夫定完全溶解。将上步反应所得滤液转入反应瓶，加入DCC 0.6g(2.91mmol)、N，N-二甲基吡啶(DMAP)0.06g(0.49mmol)，室温搅拌，出现白色混浊。反应进行30小时，滤除不溶物，油泵减压浓缩得略显黄色的粘稠液体，加入乙醚20mL，搅拌，出现大量白色沉淀，减压过滤，收集固体产物，得到拉米夫定与γ-叔丁氧酰胺-丁酸的酯化粗产物。
取上步所得拉米夫定与γ-叔丁氧酰胺-丁酸的酯化粗产物50mg(0.121mmol)，加入三氟醋酸0.5mL，N2保护下，室温反应约0.5小时。减压浓缩，得淡黄色油状液体。加入乙醚10mL搅拌，析出白色固体，过滤，得到拉米夫定与γ-氨基丁酸的酯化产物。
取格尔德霉素50mg(89.29μmol)，加入5mL CHCl3，甲醇0.5ml，搅拌至格尔德霉素溶解，反应液呈橙黄色。加入上步操作所得拉米夫定与γ-氨基丁酸的酯化产物70mg(164μmol)，室温反应进行4天，蒸干溶剂，得暗紫色固体，将固体残留物溶于10mL乙酸乙酯，依次用去离子水，饱和NaHCO3，1mol/LHCl溶液，饱和食盐水洗。有机相中加入无水Na2SO4干燥过夜。滤除干燥剂，有机相减压浓缩。用硅胶柱进行层析分离，得化合物(1)46.2mg(61.2％)。
1H-NMR δ(ppm)：0.8～1.2(m，6H，C10-CH3，C14-CH3)；1.2～1.4(m，5H，C13-H2，C14-H，C15-H2)；1.5～1.7(m，2H，C17-NH-CH2-CH2-CH2-COO)；1.783(s，3H，C8-CH3)；2.011(s，3H，C2-CH3)；2.3～2.4(m，1H，C10-H)；2.532(s，2H，C17-NH-CH2-CH2-CH2-COO)；2.7～3.1(m，4H，C17-NH-CH2，氧硫杂环4位2H)；3.287(s，3H，C12-OCH3)；3.355(s，3H，C6-OCH3)；3.5～3.7(m，2H，C11-H，C12-H，)；4.3～4.6(m，2H，COO-CH2-CH-S-)；4.6～4.7(m，1H，C6-H)；4.902(br，2H，-NH2)；5.205(s，1H，C7-H)；5.3～5.4(m，1H，氧硫杂环2位1H)；5.8～5.9(m，2H，C9-H，C5-H)；6.281(s，1H，胞嘧啶C5-H)；6.409(s，1H，氧硫杂环5位1H)；6.562(t，J＝11.2Hz，1H，C4-H)；6.948(d，J＝11.6Hz，1H，C3-H)；7.224(s，1H，C19-H)；7.896(d，1H，J＝5.6Hz，胞嘧啶C6-H)。
MS(FAB)：m/z＝845(M+2)，843(M+)，112(胞嘧啶)。
实施例2：17-(4’-((5”-(4-氨基-5-氟-2-氧代嘧啶-1(2H)-基)-1”，3”-氧硫杂环戊-2”-基)甲氧基)-4’-氧代丁胺)-17-去甲氧基格尔德霉素(2)的制备
核苷碱基部分以5-氟拉米夫定为原料，Linker部分为γ-氨基丁酸，按实施例1类似方法合成得到(2)。
1H-NMR δ(ppm)：0.9～1.3(m，6H，C10-CH3，C14-CH3)；1.3～1.4(m，5H，C13-H2，C14-H，C15-H2)；1.5～1.7(m，2H，C17-NH-CH2-CH2-CH2-COO)；1.983(s，3H，C8-CH3)；2.211(s，3H，C2-CH3)；2.3～2.4(m，1H，C10-H)；2.632(s，2H，CH2-COO)；2.8～3.0(m，4H，C17-NH-CH2，氧硫杂环4位2H)；3.182(s，3H，C12-OCH3)；3.458(s，3H，C6-OCH3)；3.5～3.7(m，4H，C11-H，C12-H)；4.2～4.3(m，2H，COO-CH2-CH-S)；4.6～4.7(m，1H，C6-H)；5.294(s，1H，C7-H)；5.3～5.4(m，1H，氧硫杂环2位1H)；5.9～6.2(m，2H，C9-H，C5-H)；6.427(s，1H，氧硫杂环5位1H)；6.692(t，J＝11.6Hz，1H，C4-H)；7.148(d，J＝11.4Hz，1H，C3-H)；7.524(s，1H，C19-H)；8.362(s，1H，胞嘧啶C6-H)。
MS(FAB)：m/z＝863(M+2)，861(M+)。
实施例3：17-(4’-(2”-((2-氨基-6-氧-1，6-二氢-4H-嘌呤-9(5H)-基)甲氧基)乙氧基)-4’-氧代丁胺)-17-去甲氧基-格尔德霉素(3)的制备
核苷碱基部分以阿昔洛韦为原料，Linker部分为γ-氨基丁酸，按实施例1类似方法合成得到(3)。
1H-NMR δ(ppm)：0.7～1.1(m，6H，C10-CH3，C14-CH3)；1.2～1.5(m，5H，C13-H2，C14-H，C15-H2)；1.645(m，2H，C17-NH-CH2-CH2-CH2-COO)；2.135(s，3H，C8-CH3)；2.261(s，3H，C2-CH3)；2.3～2.4(m，1H，C10-H)；2.6～2.7(m，2H，CH2-COO)；2.7～2.9(m，2H，C17-NH-CH2)；3.242(s，3H，C12-OCH3)；3.388(s，3H，C6-OCH3)；3.5～3.9(m，6H，C11-H，C12-H，核苷侧链O-CH2-CH2OOC)；4.1～4.4(m，2H，核苷侧链OCH2-CH2-OOC)；4.6～4.8(m，1H，C6-H)；5.073(s，1H，C7-H)；5.283(s，2H，核苷侧链N-CH2-O)；6.0～6.3(m，2H，C9-H，C5-H)；6.773(t，J＝11.4Hz，1H，C4-H)；6.9～7.1(m，1H，C3-H)；7.449(s，1H，C19-H)；7.862(s，1H，鸟嘌呤C7-H)。
MS(FAB)：m/z＝842(M+1)，841(M+)。
实施例4：17-(4’-((5”-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-3”，4”-二羟-四氢呋喃-2”-基)甲氧基)-4’-氧代丁胺)-17-去甲氧基-格尔德霉素(4)的制备
核苷碱基部分以2’，3’-异丙叉腺苷为原料，Linker部分为γ-氨基丁酸，按实施例1类似方法合成得到(4)。
1H-NMR δ(ppm)：0.8～1.2(m，6H，C10-CH3，C14-CH3)；1.3～1.4(m，5H，C13-H2，C14-H，C15-H2)；1.861(m，2H，C17-NH-CH2-CH2-CH2-COO)；1.943(s，3H，C8-CH3)；2.181(s，3H，C2-CH3)；2.3～2.4(m，1H，C10-H)；2.5～2.7(m，2H，CH2-COO)；2.8～2.9(m，2H，C17-NH-CH2)；3.231(s，3H，C12-OCH3)；3.428(s，3H，C6-OCH3)；3.5～3.7(m，4H，C11-H，C12-H，糖环3，4位H)；4.1～4.4(m，2H，-CH2OCO)；4.6～4.7(m，，1H，C6-H)；5.294(s，1H，C7-H)；5.6～6.2(m，3H，C9-H，C5-H，糖环2位H)；6.427(s，1H，糖环5位H)；6.6～6.7(m，1H，C4-H)；6.9～7.0(m，1H，C3-H)；7.524(s，1H，C19-H)；8.164(s，1H，腺嘌呤C2-H)；8.758(s，1H，腺嘌呤C7-H)。
MS(FAB)：m/z＝883(M+2)，881(M+)
实施例5：17-(4’-((5”-(2-氨基-6-氧代-1，6-二氢嘌呤-9-基)-3”，4-二羟-四氢呋喃-2”-基)甲氧基)-4’氧代丁胺)-17-去甲氧基-格尔德霉素(5)的制备
核苷碱基部分以2’，3’-异丙叉鸟苷为原料，Linker部分为γ-氨基丁酸，按实施例1类似方法合成得到(5)。
1H-NMR δ(ppm)：0.8～1.2(m，6H，C10-CH3，C14-CH3)；1.3～1.4(m，5H，C13-H2，C14-H，C15-H2)；1.728(m，2H，C17-NH-CH2-CH2-CH2-COO)；1.739(s，3H，C8-CH3)；1.927(s，3H，C2-CH3)；2.2～2.3(m，1H，C10-H)；2.3～2.5(m，2H，CH2-COO)；2.6～2.8(m，2H，C17-NH-CH2)；3.263(s，3H，C12-OCH3)；3.381(s，3H，C6-OCH3)；3.5～3.7(m，4H，C11-H，C12-H，糖环3，4位H)；4.1～4.3(m，2H，)；4.5～4.8(m，1H，C6-H)；4.972(s，1H，C7-H)；5.6～6.2(m，3H，C9-H，C5-H，糖环2位H)；6.3～6.4(m，1H，糖环5位H)；6.7～6.8(m，1H，C4-H)；7.0～7.1(m，1H，C3-H)；7.739(s，1H，C19-H)；8.258(s，1H，鸟嘌呤C7-H)。
MS(FAB)：m/z＝898(M+1)，897(M+)
实施例6：17-(4’-((5”-(4-氨基-2-氧代嘧啶-1(2H)-基)-3”，4”-二羟-四氢呋喃-2”-基)甲氧基)-4’-氧代丁胺)-17-去甲氧基-格尔德霉素(6)的制备
核苷碱基部分以2’，3’-异丙叉胞苷为原料，Linker部分为γ-氨基丁酸，按实施例1类似方法合成得到(6)。
1H-NMR δ(ppm)：0.7～1.2(m，6H，C10-CH3，C14-CH3)；1.3～1.5(m，5H，C13-H2，C14-H，C15-H2)；1.752(m，2H，C17-NH-CH2-CH2-CH2-COO)；1.815(s，3H，C8-CH3)；2.108(s，3H，C2-CH3)；2.1～2.4(m，3H，C10-H，CH2-COO)；2.6～2.8(m，2H，C17-NH-CH2)；3.183(s，3H，C12-OCH3)；3.377(s，3H，C6-OCH3)；3.5～4.4(m，7H，C11-H，C12-H，糖环3，4位H，-CH2OCO，糖环2位H)；4.6～5.0(m，3H，C6-H，糖环5位H，胞嘧啶C5-H)；5.359(s，1H，C7-H)；5.5～5.8(m，2H，C9-H，C5-H)；5.9～6.0(m，1H，C4-H)；6.2～6.4(m，1H，C3-H)；6.829(s，1H，C19-H)；7.441(s，1H，胞嘧啶C6-H)。
MS(FAB)：m/z＝859(M+2)，857(M+)
实施例7：17-(4’-((5”-(2，4-二氧代-3，4-二氢嘧啶-1(2H)-基)-3”，4”-二羟-四氢呋喃-2”-基)甲氧基)-4’-氧代丁胺)-17-去甲氧基-格尔德霉素(7)的制备
核苷碱基部分以2’，3’-异丙叉尿苷为原料，Linker部分为γ-氨基丁酸，按实施例1类似方法合成得到(7)。
1H-NMR δ(ppm)：0.8～1.1(m，6H，C10-CH3，C14-CH3)；1.2～1.4(m，5H，C13-H2，C14-H，C15-H2)；1.594(m，2H，C17-NH-CH2-CHH2-CH2-COO)；1.775(s，3H，C8-CH3)；1.972(s，3H，C2-CH3)；2.0～2.4(m，3H，C10-H)；2.5～2.8(m，4H，C17-NH-CH2-CH2-CH2-COO)；2.891(s，3H，C12-OCH3)；3.117(s，3H，C6-OCH3)；3.5～4.0(m，4H，C11-H，C12-H，糖环3，4位H)；4.1～4.3(m，3H，-CH2OCO，糖环2位H)；4.4～4.6(m，2H，C6-H，糖环5位H)；4.947(s，1H，C7-H)；5.2～5.5(m，2H，C9-H，C5-H)；5.6～6.1(m，2H，C4-H，尿嘧啶C5-H)；6.3～6.3(m，1H，C3-H)；6.582(s，1H，C19-H)；7.763(s，1H，尿嘧啶C6-H)。
MS(FAB)：m/z＝859(M+1)，858(M+)
实施例8：17-(3’-((5”-(4-氨基-2-氧代嘧啶-1(2H)-基)-1”，3”-氧硫杂环戊-2”-基)甲氧基)-3’-氧代丙胺)-17-去甲氧基格尔德霉素(8)的制备
核苷碱基部分以拉米夫定为原料，Linker部分为3-氨基丙酸，按实施例1类似方法合成得到(8)。
1H-NMR δ(ppm)：0.8～1.2(m，6H，C10-CH3，C14-CH3)；1.1～1.4(m，5H，C13-H2，C14-H，C15-H2)；1.886(s，3H，C8-CH3)；2.113(s，3H，C2-CH3)；2.2～2.4(m，1H，C10-H)；2.523(s，2H，氧硫杂环4位2H)；2.6～2.8(m，2H，C17-NH-CH2)；3.179(s，3H，C12-OCH3)；3.325(s，3H，C6-OCH3)；3.5～3.9(m，4H，C11-H，C12-H，COO-CH2-CH-S-)；4.4～4.7(m，2H，C6-H，胞嘧啶C5-H)；4.886(br，2H，-NH2)；5.120(s，1H，C7-H)；5.8～5.9(m，3H，C9-H，C5-H，氧硫杂环2位1H)；6.113(s，1H，氧硫杂环5位1H)；6.2～6.4(m，1H，C4-H)；6.6～6.7(m，1H，C3-H)；6.972(s，1H，C19-H)；7.396(s，1H，胞嘧啶C6-H)。
MS(FAB)：m/z＝831(M+2)，829(M+)。
实施例9：17-(3’-((5”-(2，4-二氧代-3，4-二氢嘧啶-1(2H)-基)-3”，4”-二羟-四氢呋喃-2”-基)甲氧基)-3’-氧代丙胺)-17-去甲氧基-格尔德霉素(9)的制备
核苷碱基部分以2’，3’-异丙叉尿苷为原料，Linker部分为3-氨基丙酸，按实施例1类似方法合成得到(9)。
1H-NMR δ(ppm)：0.6～1.0(m，6H，C10-CH3，C14-CH3)；1.1～1.5(m，5H，C13-H2，C14-H，C15-H2)；1.687(s，3H，C8-CH3)；1.904(s，3H，C2-CH3)；2.1～2.4(m，3H，C10-H，)；2.5～2.7(m，2H，CH2-COO)；2.731(s，3H，C12-OCH3)；2.8～3.0(m，2H，C17-NH-CH2)；3.317(s，3H，C6-OCH3)；3.6～4.0(m，4H，C11-H，C12-H，糖环3，4位H)；4.1～4.3(m，3H，-CH2OCO，糖环2位H)；4.4～4.6(m，2H，C6-H，糖环5位H)；5.073(s，1H，C7-H)；5.2～5.5(m，2H，C9-H，C5-H)；5.6～6.1(m，2H，C4-H，尿嘧啶C5-H)；6.3～6.4(m，1H，C3-H)；6.941(s，1H，C19-H)；7.795(s，1H，尿嘧啶C6-H)。
MS(FAB)：m/z＝844(M+)
实施例10：17-(3’-((5”-(4-氨基-2-氧代嘧啶-1(2H))-3”，4”-二羟-四氢呋喃-2”-基)甲氧基)-3’-氧代丙胺)-17-去甲氧基-格尔德霉素(10)的制备
核苷碱基部分以2’，3’-异丙叉胞苷为原料，Linker部分为3-氨基丙酸，按实施例1类似方法合成得到(10)。
1H-NMR δ(ppm)：0.9～1.2(m，6H，C10-CH3，C14-CH3)；1.3～1.6(m，5H，C13-H2，C14-H，C15-H2)；1.742(s，3H，C8-CH3)；1.992(s，3H，C2-CH3)；2.2～2.5(m，3H，C10-H，CH2-COO)；2.6～2.8(m，2H，C17-NH-CH2)；3.205(s，3H，C12-OCH3)；3.385(s，3H，C6-OCH3)；3.5～4.2(m，7H，C11-H，C12-H，糖环3，4位H，-CH2OCO，糖环2位H)；4.4～4.8(m，3H，C6-H，糖环5位H，胞嘧啶C6-H)；5.497(s，1H，C7-H)；5.6～5.8(m，2H，C9-H，C5-H)；6.0～6.2(m，1H，C4-H)；6.3～6.4(m，1H，C3-H)；6.795(s，1H，C19-H)；7.418(s，1H，胞嘧啶C6-H)。
MS(FAB)：m/z＝845(M+2)，843(M+)
实施例11：17-(5’-((5”-(2-氨基-6-氧代-1，6-二氢嘌吟-9-基)-3”，4-二羟-四氢呋喃-2”-基)甲氧基)-5’氧代戊胺)-17-去甲氧基-格尔德霉素(11)的制备
核苷碱基部分以2’，3’-异丙叉鸟苷为原料，Linker部分为δ-氨基戊酸，按实施例1类似方法合成得到(11)。
1H-NMR δ(ppm)：0.9～1.2(m，6H，C10-CH3，C14-CH3)；1.3～1.4(m，5H，C13-H2，C14-H，C15-H2)；1.5～1.7(m，4H，C17-NH-CH2-CH2-CH2-CH2-COO)；1.742(s，3H，C8-CH3)；1.875(s，3H，C2-CH3)；2.2～2.8(m，7H，C10-H，C17-NH-CH2-CH2-CH2-CH2-COO-CH2)；3.147(s，3H，C12-OCH3)；3.304(s，3H，C6-OCH3)；3.4～3.7(m，4H，C11-H，C12-H，糖环3，4位H)；4.1～4.3(m，2H，糖环2位H)；4.5～4.8(m，1H，C6-H)；4.855(s，1H，C7-H)；5.6～6.5(m，3H，C9-H，C5-H，糖环5位H)；6.5～6.6(m，1H，C4-H)；6.8～6.9(m，1H，C3-H)；7.334(s，1H，C19-H)；8.049(s，1H，鸟嘌呤C7-H)。
MS(FAB)：m/z＝911(M+)
实施例12：17-(5’-((5”-(4-氨基-2-氧代嘧啶-1(2H)-基)-1”，3”-氧硫杂环戊-2”-基)甲氧基)-5’-氧代戊胺)-17-去甲氧基格尔德霉素(12)的制备
核苷碱基部分以拉米夫定为原料，Linker部分为δ-氨基戊酸，按实施例1类似方法合成得到(12)。
1H-NMR δ(ppm)：1.0～1.3(m，6H，C10-CH3，C14-CH3)；1.3～1.4(m，5H，C13-H2，C14-H，C15-H2)；1.5～1.7(m，4H，CONH-CH2-CH2-CH2-CH2-COO)；1.895(s，3H，C8-CH3)；2.007(s，3H，C2-CH3)；2.2～2.9(m，5H，C10-H，C17-NH-CH2-CH2-CH2-CH2-COO)；3.173(s，3H，C12-OCH3)；3.464(s，3H，C6-OCH3)；3.5～3.7(m，4H，C11-H，C12-H，氧硫杂环4位2H)；4.3～4.6(m，2H，COO-CH2-CH-S-)；4.6～4.7(m，2H，C6-H，胞嘧啶C5-H)；4.902(br，2H，-NH2)；5.325(s，1H，C7-H)；5.472(s，1H，氧硫杂环2位1H)；5.8～6.0(m，2H，C9-H，C5-H)；6.397(s，1H，氧硫杂环5位1H)；6.5～6.6(m，1H，C4-H)；6.7～6.8(m，1H，C3-H)；7.129(s，1H，C19-H)；7.382(s，1H，胞嘧啶C6-H)。
MS(FAB)：m/z＝857(M+)。
实施例13：17-(5’-((5”-(4-氨基-2-氧代嘧啶-1(2H)-基)-3”，4”-二羟-四氢呋喃-2”-基)甲氧基)-5’-氧代戊胺)-17-去甲氧基-格尔德霉素(13)的制备
核苷碱基部分以2’，3’-异丙叉胞苷为原料，Linker部分为δ-氨基戊酸，按实施例1类似方法合成得到(13)。
1H-NMR δ(ppm)：0.9～1.2(m，6H，C10-CH3，C14-CH3)；1.2～1.5(m，5H，C13-H2，C14-H，C15-H2)；1.5～1.7(m，4H，-NH-CH2-CH2-CH2-CH2-COO)；1.874(s，3H，C8-CH3)；2.085(s，3H，C2-CH3)；2.2～2.7(m，7H，C10-H，C17-NH-CH2-CH2-CH2-CH2-COO)；2.987(s，3H，C12-OCH3)；3.149(s，3H，C6-OCH3)；3.3～4.1(m，7H，C11-H，C12-H，糖环3，4位H，-CH2OCO，糖环2位H)；4.4～4.8(m，3H，C6-H，糖环5位H，胞嘧啶C5-H)；5.239(s，1H，C7-H)；5.3～5.7(m，2H，C9-H，C5-H)；5.6～5.9(m，1H，C4-H)；6.1～6.3(m，1H，C3-H)；6.913(s，1H，C19-H)；7.294(s，1H，胞嘧啶C6-H)。
MS(FAB)：m/z＝871(M+)
实施例14：17-(4’-((5”-(4-氨基-2-氧代嘧啶-1(2H)-基)-1”，3”-氧硫杂环戊-2”-基)甲胺基)-4’-氧代丁胺)-17-去甲氧基格尔德霉素(14)的制备
核苷碱基部分以2’-氨甲基-2’-去羟甲基拉米夫定为原料，Linker部分为γ-氨基丁酸，按实施例1类似方法合成得到(14)。
1H-NMR δ(ppm)：0.7～1.2(m，6H，C10-CH3，C14-CH3)；1.2～1.4(m，5H，C13-H2，C14-H，C15-H2)；1.5～1.8(m，2H，-NH-CH2-CH2-CH2-CONH)；1.893(s，3H，C8-CH3)；2.161(s，3H，C2-CH3)；2.3～2.4(m，1H，C10-H)；2.5～2.9(m，4H，C17-NH-CH2-CH2-CH2-COO)；3.351(s，3H，C12-OCH3)；3.497(s，3H，C6-OCH3)；3.5～3.8(m，4H，C11-H，C12-H，氧硫杂环4位2H)；4.3～4.6(m，2H，CONH-CH2-CH-S-)；4.6～4.7(m，1H，C6-H)；5.146(s，1H，C7-H)；5.350(s，1H，氧硫杂环2位1H)；5.8～5.9(m，2H，C9-H，C5-H)；6.341(s，1H，胞嘧啶C5-H)；6.495(s，1H，氧硫杂环5位1H)；6.5～6.6(m，1H，C4-H)；6.8～6.9(m，1H，C3-H)；7.329(s，1H，C19-H)；7.746(s，1H，胞嘧啶C6-H)。
MS(FAB)：m/z＝859(M+1)，858(M+)。
实施例15：17-(4’-(2”-((2-氨基-6-氧-1，6-二氢-4H-嘌呤-9(5H)-基)甲氧基)乙胺基)-4’-氧代丁胺)-17-去甲氧基-格尔德霉素(15)的制备
核苷碱基部分以9-(O-(2’-氨基乙基)氧甲基)鸟嘌呤为原料，Linker部分仍为γ-氨基丁酸，按实施例1类似方法合成得到(15)。
1H-NMR δ(ppm)：0.7～1.2(m，6H，C10-CH3，C14-CH3)；1.2～1.5(m，5H，C13-H2，C14-H，C15-H2)；1.6～1.7(m，2H，NH-CH2-CH2-CH2-CONH)；1.964(s，3H，C8-CH3)；2.219(s，3H，C2-CH3)；2.3～2.4(m，1H，C10-H)；2.5～2.9(m，4H，NH-CH2-CH2-CH2-CONH)；3.152(s，3H，C12-OCH3)；3.371(s，3H，C6-OCH3)；3.5～3.9(m，6H，C11-H，C12-H，核苷侧链O-CH2-CH2NHCO)；4.1～4.4(m，2H，核苷侧链OCH2-CH2-NHCO)；4.6～4.8(m，1H，C6-H)；5.124(s，1H，C7-H)；5.316(m，2H，核苷侧链N-CH2-O)；6.0～6.3(m，2H，C9-H，C5-H)；6.6～6.8(m，1H，C4-H)；7.1～7.2(m，1H，C3-H)；7.267(s，1H，C19-H)；7.792(s，1H，鸟嘌呤C7-H)。
MS(FAB)：m/z＝839(M+)。
实施例16：17-(4’-((5”-(4-氨基-2-氧代嘧啶-1(2H)-基)-1”，3”-氧硫杂环戊-2”-基)甲氧基)丁胺)-17-去甲氧基格尔德霉素(16)的制备
参照文献(赵知中等，有机化学中的保护基团，科学出版社，1984：41-49)以Boc2O为原料，保护4-氨基丁醇的伯氨基，得到N-叔丁氧酰-4-氨基-丁醇。
取2’-溴甲基-2’-去羟甲基拉米夫定1.0g(3.45mmol)溶于50mlDMSO中，加入N-叔丁氧酰-4-氨基-丁醇2.0g(10.64mmol)，KOH0.5g(8.93mmol)。反应进行8小时后，滤除不溶物，加入50mlH2O，用盐酸调pH至7，用乙酸乙酯提取，乙酸乙酯相水洗后用无水硫酸钠干燥过夜。滤除干燥剂后，滤液减压浓缩，得到无色油状液体(核苷部分与N-叔丁氧酰-4-氨基-丁醇的缩合粗产物)1.3g。
取得到的油状液体0.5g，加入CHCl310ml和三氟醋酸1.05mL，室温反应0.5小时。减压浓缩。加入乙醚10mL搅拌，析出白色固体，过滤，得核苷与4-氨基-丁醇的缩合产物247mg。
取格尔德霉素50mg(89.29μmol)，加入5mL CHCl3，甲醇0.5mL，搅拌至格尔德霉素溶解，反应液呈橙黄色。加入上述白色固体50mg(166μmol)，室温避光反应2天，蒸干溶剂，得暗紫色固体，将固体残留物溶于10mL乙酸乙酯，依次用去离子水10mL，1mol/LHCl溶液10mL，饱和食盐水10mL洗。有机相中加入无水Na2SO4干燥过夜。滤除干燥剂，有机相减压浓缩至约1mL，用自制制备型薄层板(20cm×20cm)进行分离，得目标化合物(16)43.8mg(59.2％)。
1H-NMR δ(ppm)：0.7～1.1(m，6H，C10-CH3，C14-CH3)；1.2～1.4(m，5H，C13-H2，C14-H，C15-H2)；1.4～1.7(m，4H，-NH-CH2-CH2-CH2-CH2-O-)；1.832(s，3H，C8-CH3)；2.141(s，3H，C2-CH3)；2.3～2.4(m，1H，C10-H)；2.6～2.9(m，4H，C17-NH-CH2-CH2-CH2-CH2-O-)；3.187(s，3H，C12-OCH3)；3.389(s，3H，C6-OCH3)；3.6～3.9(m，4H，C11-H，C12-H，氧硫杂环4位2H)；4.3～4.6(m，2H，COO-CH2-CH-S-)；4.6～4.7(m，1H，C6-H)；5.116(s，1H，C7-H)；5.2～5.3(m，1H，氧硫杂环2位1H)；5.489(s，1H，胞嘧啶C5-H)；5.5～5.7(m，2H，C9-H，C5-H)；6.291(s，1H，氧硫杂环5位1H)；6.5～6.7(m，1H，C4-H)；6.8～6.9(m，1H，C3-H)；7.018(s，1H，C19-H)；7.583(s，1H，胞嘧啶C6-H)。
MS(FAB)：m/z＝829(M+)。
实施例17：17-(4’-((5”-(4-氨基-5-氟-2-氧代嘧啶-1(2H)-基)-1”，3”-氧硫杂环戊-2”-基)甲氧基)丁胺)-17-去甲氧基格尔德霉素(17)的制备
核苷碱基部分以2’-溴甲基-2’-去羟甲基-5-氟拉米夫定为原料，Linker部分为4-氨基丁醇，按实施例16类似方法合成得到(17)。
1H-NMR δ(ppm)：0.8～1.3(m，6H，C10-CH3，C14-CH3)；1.3～1.4(m，5H，C13-H2，C14-H，C15-H2)；1.4～1.8(m，4H，-NH-CH2-CH2-CH2-CH2-O-)；2.036(s，3H，C8-CH3)；2.315(s，3H，C2-CH3)；2.3～2.4(m，1H，C10-H)；2.6～3.0(m，4H，-NH-CH2-CH2-CH2-CH2-O-)；3.215(s，3H，C12-OCH3)；3.341(s，3H，C6-OCH3)；3.4～3.9(m，4H，C11-H，C12-H，氧硫杂环4位2H)；4.2～4.4(m，2H，COO-CH2-CH-S)；4.6～4.7(m，1H，C6-H)；5.047(s，1H，C7-H)；5.2～5.4(m，1H，氧硫杂环2位1H)；5.5～5.8(m，2H，C9-H，C5-H)；6.264(s，1H，氧硫杂环5位1H)；6.4～6.6(m，1H，C4-H)；6.7～6.8(m，1H，C3-H)；7.261(s，1H，C19-H)；8.024(s，1H，胞嘧啶C6-H)。
MS(FAB)：m/z＝847(M+)。
实施例18：17-(4’-((5”-(2，4-二氧代-3，4-二氢嘧啶-1(2H)-基)-3”，4”-二羟-四氢呋喃-2”-基)甲氧基)丁胺)-17-去甲氧基-格尔德霉素(18)的制备
核苷碱基部分以1’-溴-2’，3’-异丙叉尿苷为原料，Linker部分为4-氨基丁醇，按实施例16类似方法合成得到(18)。
1H-NMR δ(ppm)：0.9～1.2(m，6H，C10-CH3，C14-CH3)；1.2～1.4(m，5H，C13-H2，C14-H，C15-H2)；1.4～1.6(m，4H，-NH-CH2-CH2-CH2-CH2-O-)；1.724(s，3H，C8-CH3)；1.899(s，3H，C2-CH3)；1.9～2.2(m，3H，C10-H，)；2.3～2.6(m，6H，-NH-CH2-CH2-CH2-CH2-O-CH2-)；2.773(s，3H，C12-OCH3)；3.057(s，3H，C6-OCH3)；3.3～4.0(m，4H，C11-H，C12-H，糖环3，4位H)；4.1～4.4(m，1H，糖环2位H)；4.4～4.6(m，2H，C6-H，糖环5位H)；4.826(s，1H，C7-H)；5.1～5.3(m，2H，C9-H，C5-H)；5.7～6.0(m，2H，C4-H，尿嘧啶C5-H)；6.3～6.5(m，1H，C3-H)；6.831(s，1H，C19-H)；7.572(s，1H，尿嘧啶C6-H)。
MS(FAB)：m/z＝844(M+)
实施例19：17-(4’-(2”-((2-氨基-6-氧-1，6-二氢-4H-嘌呤-9(5H)-基)甲氧基)乙氧基)丁胺)-17-去甲氧基-格尔德霉素(19)的制备
核苷碱基部分以9-(O-(2’-溴乙基)氧甲基)鸟嘌呤为原料，Linker部分为4-氨基丁醇，按实施例16类似方法合成得到(19)。
1H-NMR δ(ppm)：0.7～1.2(m，6H，C10-CH3，C14-CH3)；1.2～1.4(m，5H，C13-H2，C14-H，C15-H2)；1.4～1.8(m，4H，-NH-CH2-CH2-CH2-CH2-O-)；2.036(s，3H，C8-CH3)；2.194(s，3H，C2-CH3)；2.3～2.5(m，1H，C10-H)；2.6～3.1(m，4H，C17-NH-CH2-CH2-CH2-CH2-O-)；3.252(s，3H，C12-OCH3)；3.329(s，3H，C6-OCH3)；3.5～3.9(m，4H，C11-H，C12-H，核苷侧链O-CH2-CH2-O-)；4.2～4.3(m，2H，核苷侧链OCH2-CH2-O-)；4.6～4.8(m，1H，C6-H)；4.957(s，1H，C7-H)；5.1～5.3(m，2H，核苷侧链N-CH2-O)；6.1～6.4(m，2H，C9-H，C5-H)；6.5～6.6(m，1H，C4-H)；6.8～7.0(m，1H，C3-H)；7.252(s，1H，C19-H)；7.742(s，1H，鸟嘌呤C7-H)。
MS(FAB)：m/z＝828(M+1)，827(M+)
实施例20：17-(4’-((5”-(4-氨基-2-氧代嘧啶-1(2H)-基)-1”，3”-氧硫杂环戊-2”-基)甲硫基)丁胺)-17-去甲氧基格尔德霉素(20)的制备
核苷碱基部分以2’-溴甲基-2’-去羟甲基拉米夫定为原料，Linker部分为4-氨基丁硫醇，按实施例16类似方法合成得到(20)。
1H-NMR δ(ppm)：0.6～1.2(m，6H，C10-CH3，C14-CH3)；1.2～1.4(m，5H，C13-H2，C14-H，C15-H2)；1.4～1.6(m，4H，-NH-CH2-CH2-CH2-CH2-S-)；1.921(s，3H，C8-CH3)；2.024(s，3H，C2-CH3)；2.3～2.4(m，1H，C10-H)；2.6～2.8(m，2H，C17-NH-CH2)；3.078(s，3H，C12-OCH3)；3.254(s，3H，C6-OCH3)；3.3～3.5(m，2H，-NH-CH2-CH2-CH2-CH2-S-)；3.6～3.8(m，4H，C11-H，C12-H，氧硫杂环4位2H)；4.2～4.5(m，2H，COO-CH2-CH-S-)；4.5～4.6(m，1H，C6-H)；4.984(s，1H，C7-H)；5.1～5.2(m，1H，氧硫杂环2位1H)；5.329(s，1H，胞嘧啶C5-H)；5.5～5.7(m，2H，C9-H，C5-H)；6.029(s，1H，氧硫杂环5位1H)；6.5～6.6(m，1H，C4-H)；6.9～7.0(m，1H，C3-H)；7.215(s，1H，C19-H)；7.483(s，1H，胞嘧啶C6-H)。
MS(FAB)：m/z＝844(M+)。
实施例21：17-(4’-(2”-((2-氨基-6-氧-1，6-二氢-4H-嘌呤-9(5H)-基)甲氧基)乙硫基)丁胺)-17-去甲氧基-格尔德霉素(21)的制备
核苷碱基部分以9-(O-(2’-溴乙基)氧甲基)鸟嘌呤为原料，Linker部分为4-氨基丁硫醇，按实施例16类似方法合成得到(21)。
1H-NMR δ(ppm)：0.7～1.1(m，6H，C10-CH3，C14-CH3)；1.1～1.5(m，5H，C13-H2，C14-H，C15-H2)；1.5～1.6(m，4H，-NH-CH2-CH2-CH2-CH2-S-)；1.875(s，3H，C8-CH3)；2.096(s，3H，C2-CH3)；2.4～2.5(m，1H，C10-H)；2.7～2.8(m，2H，C17-NH-CH2)；3.0～3.2(m，2H，-NH-CH2-CH2-CH2-CH2-S-)；3.275(s，3H，C12-OCH3)；3.367(s，3H，C6-OCH3)；3.4～4.0(m，6H，C11-H，C12-H，核苷侧链O-CH2-CH2-O-)；4.2～4.3(m，2H，核苷侧链OCH2-CH2-O-)；4.7～4.8(m，1H，C6-H)；4.931(s，1H，C7-H)；5.3～5.5(m，2H，核苷侧链N-CH2-O)；6.2～6.4(m，2H，C9-H，C5-H)；6.6～6.7(m，1H，C4-H)；6.8～6.8(m，1H，C3-H)；7.229(s，1H，C19-H)；7.685(s，1H，鸟嘌呤C7-H)。
MS(FAB)：m/z＝312(M+)
实施例22：17-(4’-((5”-(4-氨基-2-氧代嘧啶-1(2H)-基)-3”，4”-二羟-四氢呋喃-2”-基)甲硫基)丁胺)-17-去甲氧基-格尔德霉素(22)的制备
核苷碱基部分以1’-溴-2’，3’-异丙叉胞苷为原料，Linker部分为4-氨基丁硫醇，按实施例16类似方法合成得到(22)。
1H-NMR δ(ppm)：0.6～1.1(m，6H，C10-CH3，C14-CH3)；1.2～1.4(m，5H，C13-H2，C14-H，C15-H2)；1.4～1.6(m，4H，-NH-CH2-CH2-CH2-CH2-S-)；1.873(s，3H，C8-CH3)；2.122(s，3H，C2-CH3)；2.3～2.4(m，1H，C10-H)；2.6～2.8(m，6H，C17-NH-CH2-CH2-CH2-CH2-S-CH2-)；2.994(s，3H，C12-OCH3)；3.164(s，3H，C6-OCH3)；3.6～3.9(m，3H，C11-H，C12-H，糖环3位H)；4.2～4.5(m，2H，糖环4位H，糖环2位H)；4.5～4.6(m，1H，C6-H)；4.984(s，1H，C7-H)；5.329(s，1H，胞嘧啶C5-H)；5.5～5.7(m，2H，C9-H，C5-H)；6.029(s，1H，糖环5位H)；6.5～6.6(m，1H，C4-H)；6.8～7.0(m，1H，C3-H)；7.215(s，1H，C19-H)；7.483(s，1H，胞嘧啶C6-H)。
MS(FAB)：m/z＝859(M+)。
实施例23：17-(4’-((5”-(4-氨基-2-氧代嘧啶-1(2H)-基)-1”，3”-氧硫杂环戊-2”-基)甲胺基)丁胺)-17-去甲氧基格尔德霉素(23)的制备
核苷碱基部分以2’-溴甲基-2’-去羟甲基-拉米夫定为原料，Linker部分为1，4-二氨基丁烷，按实施例16类似方法合成得到(23)。
1H-NMR δ(ppm)：0.7～1.1(m，6H，C10-CH3，C14-CH3)；1.2～1.4(m，5H，C13-H2，C14-H，C15-H2)；1.4～1.7(m，4H，C17-NH-CH2-CH2-CH2-CH2-NH-)；1.917(s，3H，C8-CH3)；2.129(s，3H，C2-CH3)；2.3～2.4(m，1H，C10-H)；2.5～3.1(m，6H，C17-NH-CH2-CH2-CH2-CH2-NH-CH2-)；3.187(s，3H，C12-OCH3)；3.254(s，3H，C6-OCH3)；3.6～3.9(m，4H，C11-H，C12-H，氧硫杂环4位2H)；4.6～4.7(m，1H，C6-H)；4.964(s，1H，C7-H)；5.146(s，1H，氧硫杂环2位1H)；5.392(s，1H，胞嘧啶C5-H)；5.4～5.7(m，2H，C9-H，C5-H)；6.096(s，1H，氧硫杂环5位1H)；6.4～6.6(m，1H，C4-H)；6.7～6.9(m，1H，C3-H)；7.186(s，1H，C19-H)；7.338(s，1H，胞嘧啶C6-H)。
MS(FAB)：m/z＝827(M+)。
实施例24：17-(4’-(2”-((2-氨基-6-氧-1，6-二氢-4H-嘌呤-9(5H)-基)甲氧基)乙胺基)丁胺)-17-去甲氧基-格尔德霉素(24)的制备
核苷碱基部分以9-(O-(2’-溴乙基)氧甲基)鸟嘌呤为原料，Linker部分为1，4-二氨基丁烷，按实施例16类似方法合成得到(24)。
1H-NMR δ(ppm)：0.7～1.2(m，6H，C10-CH3，C14-CH3)；1.2～1.5(m，5H，C13-H2，C14-H，C15-H2)；1.6～1.7(m，2H，C17-NH-CH2-CH2-CH2-CH2-NH)；1.924(s，3H，C8-CH3)；2.879(s，3H，C2-CH3)；2.3～2.4(m，1H，C10-H)；2.5～3.0(m，6H，C17-NH-CH2-CH2-CH2-CH2-NH-CH2)；3.248(s，3H，C12-OCH3)；3.451(s，3H，C6-OCH3)；3.5～3.9(m，6H，C11-H，C12-H，核苷侧链O-CH2-CH2NH)；4.6～4.8(m，1H，C6-H)；5.075(s，1H，C7-H)；5.1～5.3(m，2H，核苷侧链N-CH2-O)；6.0～6.3(m，2H，C9-H，C5-H)；6.6～6.8(m，1H，C4-H)；7.1～7.2(m，1H，C3-H)；7.314(s，1H，C19-H)；7.498(s，1H，鸟嘌呤C7-H)。
MS(FAB)：m/z＝825(M+)。
实施例25：17-(4’-((5”-(4-氨基-2-氧代嘧啶-1(2H)-基)-3”，4”-二羟-四氢呋喃-2”-基)甲胺基)丁胺)-17-去甲氧基-格尔德霉素(25)的制备
核苷碱基部分以1’-溴-2’，3’-异丙叉胞苷为原料，Linker部分为1，4-二氨基丁烷，按实施例16类似方法合成得到(25)。
1H-NMR δ(ppm)：0.6～1.2(m，6H，C10-CH3，C14-CH3)；1.2～1.4(m，5H，C13-H2，C14-H，C15-H2)；1.4～1.6(m，4H，C17-NH-CH2-CH2-CH2-CH2-NH-)；1.916(s，3H，C8-CH3)；2.209(s，3H，C2-CH3)；2.3～2.4(m，1H，C10-H)；2.6～2.8(m，6H，C17-NH-CH2-CH2-CH2-CH2-NH-CH2-) ；3.024(s，3H，C12-OCH3)；3.352(s，3H，C6-OCH3)；3.6～4.0(m，3H，C11-H，C12-H，糖环3-H)；4.1～4.5(m，3H，糖环4位-H，糖环2位-H)；4.5～4.6(m，1H，C6-H)；5.046(s，1H，C7-H)；5.142(s，1H，胞嘧啶C5-H)；5.5～5.7(m，2H，C9-H，C5-H)；5.961(s，1H，糖环5位-H)；6.4～6.6(m，1H，C4-H)；6.8～7.0(m，1H，C3-H)；7.159(s，1H，C19-H)；7.571(s，1H，胞嘧啶C6-H)。
MS(FAB)：m/z＝842(M+)。
实施例26：17-(3’-((5”-(4-氨基-2-氧代嘧啶-1(2H)-基)-1”，3”-氧硫杂环戊-2”-基)甲胺基)丙胺)-17-去甲氧基格尔德霉素(26)的制备
核苷碱基部分以2’-溴甲基-2’-去羟甲基-拉米夫定为原料，Linker部分为1，4-二氨基丙烷，按实施例16类似方法合成得到(26)。
1H-NMR δ(ppm)：0.7～1.2(m，6H，C10-CH3，C14-CH3)；1.2～1.4(m，5H，C13-H2，C14-H，C15-H2)；1.5～1.7(m，2H，C17-NH-CH2-CH2-CH2-NH-)；1.927(s，3H，C8-CH3)；2.216(s，3H，C2-CH3)；2.2～2.4(m，1H，C10-H)；2.5～2.8(m，4H，C17-NH-CH2-CH2-CH2-NH-)；3.006(s，3H，C12-OCH3)；3.149(s，3H，C6-OCH3)；3.2～3.6(m，4H，C11-H，C12-H，氧硫杂环4位2H)；4.3～4.6(m，2H，-S-CH-CH2-NH-)；4.6～4.7(m，1H，C6-H)；5.017(s，1H，C7-H)；5.314(s，1H，氧硫杂环2位1H)；5.489(s，1H，胞嘧啶C5-H)；5.5～5.7(m，2H，C9-H，C5-H)；6.168(s，1H，氧硫杂环5位1H)；6.3～6.5(m，1H，C4-H)；6.6～6.8(m，1H，C3-H)；6.902(s，1H，C19-H)；7.371(s，1H，胞嘧啶C6-H)。
MS(FAB)：m/z＝813(M+)。
实施例27：17-(3’-(2”-((2-氨基-6-氧-1，6-二氢-4H-嘌呤-9(5H)-基)甲氧基)乙胺基)丙胺)-17-去甲氧基-格尔德霉素(27)的制备
核苷碱基部分以9-(O-(2’-溴乙基)氧甲基)鸟嘌呤为原料，Linker部分为1，4-二氨基丙烷，按实施例16类似方法合成得到(27)。
1H-NMR δ(ppm)：0.8～1.2(m，6H，C10-CH3，C14-CH3)；1.2～1.5(m，5H，C13-H2，C14-H，C15-H2)；1.6～1.8(m，4H，C17-NH-CH2-CH2-CH2-NH-)；1.994(s，3H，C8-CH3)；2.182(s，3H，C2-CH3)；2.3～2.5(m，1H，C10-H)；2.6～3.0(m，6H，C17-NH-CH2-CH2-CH2-NH-CH2-)；3.177(s，3H，C12-OCH3)；3.281(s，3H，C6-OCH3)；3.5～3.9(m，4H，C11-H，C12-H，核苷侧链O-CH2-CH2-NH-)；4.4～4.6(m，1H，C6-H)；4.883(s，1H，C7-H)；4.9～5.1(m，2H，核苷侧链N-CH2-O)；5.9～6.3(m，2H，C9-H，C5-H)；6.5～6.7(m，1H，C4-H)；6.7～6.8(m，1H，C3-H)；7.172(s，1H，C19-H)；7.604(s，1H，鸟嘌呤C7-H)。
MS(FAB)：m/z＝812(M+)
实施例28：测定化合物抗单纯疱疹病毒1型(VR733株)病毒活性的实验方法
在长满VERO细胞的培养瓶内加入0.25％胰酶0.1ml，0.02％EDTA 5ml。于37℃消化20～25分钟。废弃消化液，加培养液吹打。1∶3传代，3天长满。配制成每毫升20～30万个细胞，接种到96孔细胞培养板，每孔0.1ml。于37℃，5％CO2条件下培养24小时，细胞长成单层后进行实验。
取20～30万个VERO细胞每毫升的细胞培养液接种96孔细胞培养板，每孔0.1ml。于37℃，5％CO2条件下培养24小时。弃去培养液，加入适量HSV-1病毒，吸附1小时后，弃去病毒液。加入测试药物，每浓度2孔。于37℃，5％CO2条件下培养。48小时后观察细胞病变。按下式计算药物抑制病毒的半数有效浓度(IC50)，结果见表1。
I C 50 = Anti log ( A + 50 - A B - A × C )
A＝log(病变＜50％的药物浓度)
B＝log(病变＞50％的药物浓度)
C＝log(稀释倍数)
实施例29：测定化合物抗单纯疱疹病毒2型(SAV株)活性的实验方法
按实施例28类似的方法测定化合物抗HSV-2病毒IC50值，结果见表1。
实施例30：抗HBV病毒活性的测定
采用细胞培养法，测定了本发明化合物在体外对乙肝病毒和HIV病毒复制的影响。抗乙肝病毒活性研究中，样品细胞毒性试验方法为：将试验细胞配制成每毫升10万个细胞接种细胞培养板，96孔板每孔100μl，37℃ 5％CO2培养24小时，细胞长成单层后进行实验。目标化合物和对照药用培养液配制成所需浓度后加入96孔细胞培养板，每浓度4孔，每4天换同浓度药液一次，同时设无药物细胞对照组。以观察细胞病变为指标，8天显微镜下观察细胞病变程度。样品抑制肝炎病毒活性试验方法为：每毫升10万个试验细胞接种96孔细胞培养板，每孔100μl，37℃ 5％CO2培养24小时，加入药物，同时设细胞对照组，4天换原浓度药液或对照培养液一次。细胞裂解后按分子克隆实验技术方法提取HBVDNA。各样品斑点杂交、放射自显影、测量各杂交点的A值后，利用标准曲线的回归方程计算细胞对照及给药组的HBV DNA含量后，计算半数有效浓度(IC50)，结果见表1。
实施例31：药物抑制HIV-1活性测定
在96孔细胞培养中加入8个不同稀释浓度的药液和阳性对照药液，每个稀释度重复2孔，设细胞对照；再将2×105细胞/ml 100μl接种于含药96孔细胞培养板内。置37℃、5％CO2和饱和湿度培养箱内培养，每天观察细胞病变。按HIV-1P24抗原试剂盒提供的操作步骤，测定加药后第4天(96小时)细胞培养上清HIV-1 P24抗原含量，计算药物半数有效浓度(IC50)，结果见表1。
实施例32：测定化合物抗Cox B3病毒活性的实验方法
按实施例28类似的方法测定化合物抗Cox B3型病毒IC50值，结果见表1。
实施例33：测定化合物抗Cox B6病毒活件的实验方法
按实施例28类似的方法测定化合物抗Cox B6型病毒IC50值，结果见表1。
实施例34：测定化合物抗VSV病毒活性的实验方法
按实施例28类似的方法测定化合物抗VSV病毒IC50值，结果见表1。

Claims (6)

1、一组连有核苷碱基的格尔德霉素衍生物，其结构如式(I)所示：
其中：
Linker为含有3-20个碳的直链或支链、饱和或不饱和、脂肪性或芳香性、不含或含有醚键或酯键或酰胺键的联结部分；
R为腺苷、鸟苷、胞苷、尿苷等核苷及其结构类似物，或腺嘌呤、鸟嘌呤、胞嘧啶或尿嘧啶等核苷碱基，以及带有取代基R1的上述官能团；
R1为含有1-8个碳原子的烃基、烃氧基，卤素，巯基。
2、一种制备权利要求1所述式(I)化合物的方法，其反应式如下：
Figure A2006100652320002C2
其中，X为羧基、羟基、氨基或卤素；R为核苷或R1取代的核苷；M为羟基、巯基、氨基；Y代表酯键、酰胺键、醚键、硫醚键及亚胺键；n＝0～20；具体反应步骤为：
A、利用Boc2O对起始化合物a的伯氨基进行保护，得到Boc保护的相应产物b；
B、化合物b再与核苷或取代核苷R-M的活泼羟基、胺基或巯基进行缩合，形成酯键、酰胺键、醚键、硫醚键及亚胺键，实现核苷部分与Linker的连接，得到化合物c；
C、在三氟醋酸的作用下，化合物c脱去Boc保护基，得到带有游离氨基的化合物d；
D、化合物d在碱性条件下，与格尔德霉素发生亲核取代反应，得到目标化合物(I)。
3、权利要求1所述化合物的药物组合物，可以含有治疗有效量的上述化合物为活性成分，并含有一种或多种药学上可接受的载体。
4、权利要求1所述化合物及其药物组合物在制备抗病毒或抗肿瘤药物中的应用。
5、权利要求1所述化合物的各种剂型可以按照药学领域的常规生产方法制备，如使活性成分与一种或多种载体混合，然后将其制成所需的剂型。
6、权利要求1所述化合物的药物组合物优选含有重量比为0.1％-99.5％的活性成分，最优选含有重量比为0.5％-99.5％的活性成分。
CNB2006100652320A 2006-03-21 2006-03-21 一组连有核苷碱基的格尔德霉素衍生物 Expired - Fee Related CN100519536C (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CNB2006100652320A CN100519536C (zh) 2006-03-21 2006-03-21 一组连有核苷碱基的格尔德霉素衍生物

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CNB2006100652320A CN100519536C (zh) 2006-03-21 2006-03-21 一组连有核苷碱基的格尔德霉素衍生物

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN1817866A true CN1817866A (zh) 2006-08-16
CN100519536C CN100519536C (zh) 2009-07-29

Family

ID=36918095

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CNB2006100652320A Expired - Fee Related CN100519536C (zh) 2006-03-21 2006-03-21 一组连有核苷碱基的格尔德霉素衍生物

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN100519536C (zh)

Cited By (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2009092295A1 (zh) 2008-01-18 2009-07-30 Institute Of Medicinal Biotechnology, Chinese Academy Of Medical Sciences 一组格尔德霉素衍生物及其制备方法
WO2012056976A1 (ja) * 2010-10-27 2012-05-03 公立大学法人横浜市立大学 アデニル酸シクラーゼの活性調節剤
CN102603635A (zh) * 2011-01-21 2012-07-25 杭州华东医药集团生物工程研究所有限公司 格尔德霉素衍生物及其制备方法和用途
CN102731401A (zh) * 2011-04-08 2012-10-17 杭州中美华东制药有限公司 格尔德霉素衍生物及其制备方法和用途
CN103804296A (zh) * 2014-03-03 2014-05-21 山东大学 17-(6-(取代肉桂酰氨基)己二胺)-17-去甲氧基格尔德霉素衍生物及其应用
CN103819456A (zh) * 2014-02-12 2014-05-28 复旦大学附属上海市第五人民医院 一组格尔德霉素衍生物及其应用
US9738678B2 (en) 2007-07-09 2017-08-22 Eastern Virginia Medical School Substituted nucleoside derivatives with antiviral and antimicrobial properties

Family Cites Families (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP1098666B1 (en) * 1998-07-17 2013-01-16 The United States of America, represented by the Secretary, Department of Health and Human Services Water-soluble drugs and methods for their production
DE60213386T2 (de) * 2001-03-30 2006-11-23 The United States Of America Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Geldanamycinderivate zur krebsbehandlung
CA2549463A1 (en) * 2002-12-12 2004-07-01 Conforma Therapeutics Corporation Cytotoxins and diagnostic imaging agents comprising hsp90 ligands

Cited By (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US9738678B2 (en) 2007-07-09 2017-08-22 Eastern Virginia Medical School Substituted nucleoside derivatives with antiviral and antimicrobial properties
CN101220068B (zh) * 2008-01-18 2012-06-13 中国医学科学院医药生物技术研究所 一组格尔德霉素衍生物及其制备方法
WO2009092295A1 (zh) 2008-01-18 2009-07-30 Institute Of Medicinal Biotechnology, Chinese Academy Of Medical Sciences 一组格尔德霉素衍生物及其制备方法
US9096632B2 (en) 2010-10-27 2015-08-04 Public University Corporation Yokohama City University Modulator of activity of adenylate cyclase
WO2012056976A1 (ja) * 2010-10-27 2012-05-03 公立大学法人横浜市立大学 アデニル酸シクラーゼの活性調節剤
JP5849336B2 (ja) * 2010-10-27 2016-01-27 公立大学法人横浜市立大学 アデニル酸シクラーゼの活性調節剤
CN102603635A (zh) * 2011-01-21 2012-07-25 杭州华东医药集团生物工程研究所有限公司 格尔德霉素衍生物及其制备方法和用途
CN102603635B (zh) * 2011-01-21 2016-08-03 杭州华东医药集团生物工程研究所有限公司 格尔德霉素衍生物及其制备方法和用途
CN102731401B (zh) * 2011-04-08 2016-03-09 杭州中美华东制药有限公司 格尔德霉素衍生物及其制备方法和用途
CN102731401A (zh) * 2011-04-08 2012-10-17 杭州中美华东制药有限公司 格尔德霉素衍生物及其制备方法和用途
CN103819456A (zh) * 2014-02-12 2014-05-28 复旦大学附属上海市第五人民医院 一组格尔德霉素衍生物及其应用
CN103819456B (zh) * 2014-02-12 2015-10-28 复旦大学附属上海市第五人民医院 一组格尔德霉素衍生物及其应用
CN103804296A (zh) * 2014-03-03 2014-05-21 山东大学 17-(6-(取代肉桂酰氨基)己二胺)-17-去甲氧基格尔德霉素衍生物及其应用

Also Published As

Publication number Publication date
CN100519536C (zh) 2009-07-29

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN1817866A (zh) 一组连有核苷碱基的格尔德霉素衍生物
CN1027169C (zh) 表鬼臼毒葡糖苷4′-磷酸酯衍生物的制备方法
US20180044367A1 (en) Nucleoside phosphoramidates
US9284342B2 (en) Nucleoside phosphoramidates
CN1154512C (zh) 喜树碱的聚合衍生物
AU2020201369A1 (en) Synthesis of polycyclic-carbamoylpyridone compounds
CN104693257B (zh) 苯磺酰基呋咱修饰的吉西他滨衍生物及其制备方法和用途
CN1426418A (zh) 膦酸酯核苷酸化合物
CN1058598A (zh) 新型生物活性缀合物
CN1148391A (zh) 通过与聚吡咯甲酰氨基萘衍生物连接提高生物活性化合物的生物药效性
EA014872B1 (ru) Азиридинилэпотилоновые соединения
CN1946727A (zh) 表鬼臼毒素的(多)氨基烷基氨基乙酰胺衍生物，它们的制备方法和它们在治疗中作为抗癌剂的应用
US20090048253A1 (en) Benzenoid ansamycin derivative
CN1285586C (zh) 鸢尾苷元的异黄酮类衍生物及其制备方法和以其为有效药用成分的抗病毒药物
CN112592331A (zh) 一种奥司他韦protac化合物及其制备方法与在抗流感病毒药物中的应用
US20130005696A1 (en) Bufadienolide derivatives, preparing process thereof, composition comprising the same and the use thereof
CN1693309A (zh) N4－（取代的氧羰基）－2′，2′－二氟－2′－脱氧胞苷衍生物及其应用
CN1727332A (zh) 芳甲氨基二硫代甲酸酯类化合物及其制备方法和应用
CN1726025A (zh) 作为免疫调节剂和抗癌剂的雷公藤内酯醇衍生物
CN1930151A (zh) 将dna的特定碱基序列烷基化的新吲哚衍生物和使用其的烷基化剂以及药剂
CN87105512A (zh) 嘧啶衍生物
CN112574272B (zh) 一种灵芝酸a衍生物的制备及其应用
EP1968971B1 (en) Dioxolane derivates for the treatment of cancer
CN1931869A (zh) 5′－脱氧－5－氟胞苷类衍生物，它的制备方法及其用途
ES2704056T3 (es) Compuestos de epoxicetona para la inhibición de enzimas

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee

Granted publication date: 20090729

Termination date: 20150321

EXPY Termination of patent right or utility model