CN1285586C - 鸢尾苷元的异黄酮类衍生物及其制备方法和以其为有效药用成分的抗病毒药物 - Google Patents

鸢尾苷元的异黄酮类衍生物及其制备方法和以其为有效药用成分的抗病毒药物 Download PDF

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Abstract

本发明涉及如式(II)所示结构的异黄酮类的鸢尾苷元化合物衍生物,其制备方法及以其为有效药用成分的抗病毒药物。该化合物的结构如右下式(Ⅱ):式中R1为H、NH2或SO3M;R2为OR′;R3为H或-CH2NR″,其中的R′为H、-CH2COONa或-CH2CH2NMe2;NR″为右下式(Ⅲ)或-NMe2;M为H、Na、K或N+H(CH2CH2OH)3

Description

鸢尾苷元的异黄酮类衍生物及其制备方法 和以其为有效药用成分的抗病毒药物
技术领域
本发明涉及的是一种鸢尾苷元化合物的衍生物,具体讲是化学名称为5,7,4′-三羟基-6-甲氧基异黄酮类的鸢尾苷元化合物的衍生物,以及其制备方法,和以该衍生物为有效药用成分的抗病毒药物及相应的制备方法。
背景技术
因流感病毒等多种病毒感染引起的上呼吸道感染、病毒性肺炎等疾病,一直都是一种常见并可导致死亡的多发性疾病。对这类呼吸道感染性疾病,目前主要多还是采用化学药物治疗。但耐药菌株和耐药病毒株的增加速度常超过化学抗生素药物发展的速度,已成为不容忽视的问题。利用和发扬天然药物的中药在这方面的优势,特别是从天然药物中提取和分离出的有效药用成分,和/或在此基础上进一步开发改造成新的药用化合物,已日益受到重视。
孙远碧等人在“射干与鸢尾化学成分的比较鉴定”(《中药通报》1984,9(5));陈芳群在“川射干中黄酮成分的分离和鉴定”(《中草药》1990,22(2));许云龙等人在“黄射干的异黄酮类成分”(《云南植物研究》1999,21(1));吉文亮等人在“中药射干的化学与药理研究进展”(《国外医药·植物药分册》2000,15(2))和“射干中异黄酮提取工艺的研究”(《中药材》2000,23(8))等许多研究和文献都报导,如式(I)所示结构的鸢尾苷元化合物,是广泛存在于具有抗病毒和抗菌、抗炎作用的鸢尾科植物,如鸢尾即川射干(Iris tectorum Maxim)、射干(Belamcanda chinensis(L.)DC.)、白射干(Iris dichotoma pall.)、扁竹根(Iris japonica)、黄射干(I,Iris tectorrum)等中药中的多种黄酮类化合物成分中的一种异黄酮化合物。
包括上述文献在内的许多文献报道的研究结果表明,中药鸢尾(Iris tectorum Maxim)所含的异黄酮部分具有显著的抗病毒、抗炎作用。鸢尾苷(tectoridin)是鸢尾中的主要有效成分(含量约为5%),文献报道及药理研究均证实其有较强的抗病毒、抗炎作用。作为鸢尾苷水解产物的鸢尾苷元,结构如上述式(I)所示,文献及药理研究均证实其有更强的抗病毒、抗炎作用。但鸢尾苷及其苷元的水溶性非常差,限制了其临床运用,因此改善和提高其水溶性,是首先需要解决的一个问题。实验结果显示,通过制剂学研究解决其水溶性的效果并不理想,而通过对鸢尾苷、鸢尾苷元进行化学修饰,改变其化学结构,在保持甚至提高其有效药用作用的前提下,达到增加水溶性,增强疗效及扩大其可适用的药物制剂范围的目的,就是一条可行的措施。
发明内容
根据上述情况,本发明首先将提供一种在上述式(I)所示结构的鸢尾苷元化合物的基础上,通过对其进行化学修饰而得到的一系列衍生物,在至少保持了其原有的抗菌、抗病毒、抗炎及解热镇痛等药效作用的前提下,能大大改善和提高其水溶性,为扩大其在制药及其临床运用中的适用范围提供了极大的便利条件。在此基础上,本发明进一步还将提供以所说的鸢尾苷元化合物的衍生物作为有效药用成分的抗病毒药物,特别是以其为有效药用成分的注射型药物制剂。
本发明所说的鸢尾苷元化合物的衍生物,化学名称为5,7,4′-三羟基-6-甲氧基异黄酮类的衍生物,结构如式(II)所示:其中:式中的R1为H、NH2或SO3M;R2为OR′;R3为H或-CH2NR″;其中的R′为H、-CH2COONa或-CH2CH2NMe2;NR″为 或-NMe2;M为H、Na、K或N+H(CH2CH2OH)3。
在上述通式(II)所示的化合物中,一个典型的化合物是如式(III)所示的R1为SO3M″的磺酸类化合物,其中M″可以为H、Na、K或-N+H(CH2CH2OH)3。
其中在通式(III)结构的化合物中的典型化合物为磺酸或磺酸盐类的化合物,即SO3M″中的M″为H、Na或K,结构如式(IV)所示:在通式(III)结构中的另一个典型化合物,是其中的磺酸基R1为-SO3-N+H(CH2CH2OH)3,结构如式(V)所示:本发明所说通式(II)中还包括的一个典型化合物,是其结构中的R1为NH2,R2为OH,R3为H,结构如式(VI)所示:作为本发明上述通式(II)中的再一个典型化合物,是结构中的R1为H,R2为-OCH2COONa,R3为H,结构如式(VII)所示:此外,本发明所说上述通式(II)中的还有的一个典型化合物,是式(II)结构中的R1和R3为H,R2为OCH2CH2NMe2,结构如式(VIII)所示:
此外,本发明上述通式(II)中的另一个典型化合物,是式(II)结构中的R1为H,R2为OH,R3为-CH2NR″,其中的NR″为 结构如式(IX)所示:此外,在本发明所说上述通式(II)中的又一个典型化合物,是式(II)结构中的R1为H,R2为OH,R3为-CH2NMe2,结构如式(X)所示:在上述所说的各典型化合物中,其中的式、(VI)、(VIII)、(IX)和(X)所示结构的化合物,还可以分别为其药学上可以接受的盐类化合物,如最常用的各相应的盐酸盐化合物。
本发明上述式(II)所示结构的化合物中,对于其具体取代基团和/或取代位置的不同,均可以由式(I)结构的异黄酮类鸢尾苷元化合物为原料,根据对制取同类取代化合物的已知制备原则和方法,采用相应的不同方法制备得到。
例如:作为本发明进行化学修饰原料使用的前体化合物,即上述式(I)结构的鸢尾苷元异黄酮化合物,除可以采用全合成的方式制备获得外,更方便易行的方式,是采用目前已有报导的方式,由前述的多种鸢尾科药用植物中提取并分离后得到。例如,一种可供参考的提取方式是:鸢尾原生药干燥、粉碎成粗粉过20目筛,置于提取容器内,分别用为药材重量4倍的70%乙醇加热回流三次,每次时间1小时,趁热过滤,合并滤液。减压回收乙醇后,得比重1.2g/ml(50℃)的棕黄色浸膏状提取物,收得率为药材重量的49-51%。上述浸膏中加入95%乙醇搅拌均匀,混悬液沉淀,过滤,滤出物再加入95%乙醇搅拌均匀,重复操作2次,至滤液近无色,得鸢尾苷粗品。加入70%乙醇加热回流1小时,放置,析出淡黄色沉淀,滤出沉淀,用70%乙醇再重结晶二次,得无色结晶性粉末鸢尾苷,收得率为药材量的4.5%。
将该鸢尾苷200g置于圆底烧瓶中,加50%乙醇2000ml搅拌均匀后,加入浓盐酸200ml,摇匀并加热回流2小时,趁热过滤后静置,析出淡黄色细长针晶。过滤,结晶用400ml95%乙醇溶解,倾入800ml沸水中,放冷析出淡黄色细长针晶。过滤后再重结晶一次,60℃减压干燥,得式(I)结构异黄酮的鸢尾精品120g,为淡黄色细长针晶,得率为药材量的3%,含量>98%。
式(III)结构的衍生物,一般可以采用硫酸对式(I)的异黄酮化合物进行磺化反应,即可得到R1为SO3H取代的产物。优选的方式之一是:称取鸢尾苷元1.0g,加入4.0ml浓硫酸搅拌溶解,室温下反应1.5~2小时,整个反应过程在无水条件进行,得到式(III)中的M”为H的磺酸衍生物产物。
进一步用如NaCl或KCl等饱和盐类水溶液进行处理后,即可以得到上述式(IV)的相应磺酸钠或磺酸钾化合物。其两步合成路线如下:制备上述式(V)所示结构的鸢尾苷元化合物的方法,可以采用将式(I)结构的异黄酮类鸢尾苷元化合物为原料与浓硫酸混合,在40-90℃优选为60℃下加热搅拌反应,冷却后倾入饱和的氯化钠、其他碱金属的盐酸盐、氢溴酸盐或硝酸盐等的溶液中,得3′-磺酸钠中间产物,将其悬浮于乙醇溶液中并加入强酸型阳离子树脂,室温搅拌使全部溶解,然后加入三乙醇胺,再减压蒸去溶剂,得到化合物(V),合成路线为:
制备上述式(VI)所示结构的鸢尾苷元化合物的方法,可以采用由式(I)结构的异黄酮类鸢尾苷元化合物为原料,在冰浴冷却下滴加硝酸和浓硫酸混酸的乙醇溶液(即(硝酸+硫酸)/乙醇),得到3′-硝基中间化合物,然后将其溶于甲醇中,在常压下以氢催化还原得到3′-氨基取代的化合物(VI),并且可以进一步与药物中可以接受的酸反应得到式(VI)结构的相应盐类化合物,合成路线为:在制备上述式(VII)所示结构的鸢尾苷元化合物时,可以将式(I)结构的异黄酮类鸢尾苷元化合物为原料与氯乙酸乙酯在丁酮和DMF混和溶剂中,加入无水k2CO3和催化量的NaI,搅拌下回流反应后,冷却至室温并滤除不溶物,减压浓缩滤液,残余物溶于适量水中,再乙酸乙酯提取和水洗,干燥后减压浓缩溶剂,flash柱分离,得4′-酯醚中间产物,用甲醇溶解后,搅拌下滴加NaOH水溶液后进行常温水解反应完全,再用酸调节至pH3~4,减压蒸除甲醇得絮状沉淀并溶于乙酸乙酯,水洗、干燥,浓缩后与NaHCO3反应制成钠盐,得到化合物(VII),合成路线为:对于上述式(VIII)所示结构的鸢尾苷元化合物的制备,可以采用先将β-二甲氨基乙醇于0℃条件下滴加入二氯亚砜并剧烈搅拌,滴完后于35~50℃搅拌反应,然后用无水乙醇重结晶,得中间产物β-二甲胺基氯乙烷盐酸盐A。然后将式(I)结构的异黄酮类鸢尾苷元化合物为原料溶于丁酮、丙酮、DMF、THF或二氧六环等溶剂,加入无水K2CO3或Na2CO3和DMF及催化量的NaI,加热至回流,可分成五批、每隔半小时加入上述中间产物A,80℃左右回流,薄层板检测,待却后过滤,将滤液于旋转蒸发器上减压浓缩得粘状物,适量水稀释(约10倍重量的水)后,用乙酸乙酯提取,提取液用水洗后干燥并出去溶剂,得到化合物(VIII),并且可以进一步与药物中可以接受的酸反应得到式(III)结构的相应盐类化合物,合成路线为:制备上述式(IX)所示结构的鸢尾苷元化合物的方法,则可以将式(I)结构的异黄酮类鸢尾苷元化合物原料、含量为37%重量的甲醛溶液、哌啶以及二氧六环、THF、甲醇或乙醇中的一种溶剂混和,回流反应后冷却,过滤得到化合物(IX),并且可以进一步与药物中可以接受的酸反应得到式(III)结构的相应盐类化合物,合成路线为:试验结果显示,上述反应的位置选择性十分专一,完全得到在A环上反应的产物,与文献报道和预先设计的位置(C环)不同。这提供了一种选择性在鸢尾苷元异黄酮A环上衍生化的方法,有利于全面考察结构改造对活性的影响。而其他的反应多是在C环上进行衍生化。在此基础上,采用类似方法可以得到上述式(X)所示结构的鸢尾苷元化合物。如:将式(I)结构的异黄酮类鸢尾苷元化合物原料、含量为37%重量的甲醛溶液、二甲胺的盐酸盐以及二氧六环、THF、甲醇或乙醇中的一种溶剂混和,回流反应后待冷,滤集沉淀得到化合物(X),并且可以进一步与药物中可以接受的酸反应得到式(III)结构的相应盐类化合物,合成路线为:
以有效用量的上述式(II)所示结构的鸢尾苷元化合物的衍生物作为有效药用成分,与药物中可接受的辅助添加成分和按现有的常规制备方式,可以制成为相应的可具有抗病毒作用的药物。在所说的这些用于抗病毒药物中,除可以按一般方式得到口服型制剂外,特别是由于上述已成为盐类形式的各化合物能具有满意的水溶性,因此尤为适宜制备成为具有抗病毒作用的注射型药物。例如,将上述各典型化合物按中国药典2000版二部凡例X页的溶解度实验方法进行了溶解性对比实验:称取研成细粉的供试样品,置于25℃±2℃一定量的溶剂中,每隔5分钟强力振摇30分钟内的溶解情况,并根据药典对各种溶解性能的定义进行判断。结果如表1所示。
表1  溶解性能对比试验结果
表1的结果显示,经本发明化学修饰后的多种结构形式的异黄酮鸢尾苷元化合物衍生物(II),由于在引入了许多易于成盐和/或亲水性的基团,从而可使该类衍生物的水溶性大为提高,有利于其在制药和临床上的应用,也有利于提高其在体内的吸收和生物利用度。
以此为基础,在制备上述的注射型药物制剂时,为进一步保证和提高上述式(II)结构鸢尾苷元化合物衍生物在注射液中的溶解稳定性能,制备时还可以在注射液中按允许的用量使用在注射剂药物中可接受的助溶剂成分。其中,经试验结果显示有效且方便的可供参考的优选方式之一,是在所说的注射型制剂中,添加为注射液总量的重量/体积比为2-15%的葡萄糖作为助溶剂,利用葡萄糖中的多羟基与式(II)结构的异黄酮结构缔合形成氢键,从而大大增加了其在水中的溶解度。
以上述式(IV)结构的鸢尾苷元磺酸钠为例,其在室温下的水溶解度仅为20mg/ml(2%),达不到用药浓度;加热至60-100℃后的水溶解度可增至50-60mg/ml(5-6%),冷却至室温后又析出沉淀。但在注射液中加入4%的葡萄糖后,能够保持在室温和低温(0℃-5℃)下放置保持澄清,而且可以用水或糖盐水任意稀释,不出混浊。因此其不但可供肌肉注射,还可加入糖和/或盐水中用于静脉注射。这就表明了葡萄糖在增加上述式(IV)鸢尾苷元磺酸钠在水中的溶解度的同时,还能大大提高注射制剂药物的稳定性。
例如,在制备以上述鸢尾苷元的异黄酮类衍生物(II)为有效药物成分的注射剂药物时可作为实施例之一的一种方法,可以采用将鸢尾苷元衍生物(II)5-80重量份和注射用葡萄糖20-150重量份,溶解于700~800重量份的注射用水中,溶解完全后再加入注射用水补足至相当于1000重量份的总体积,G4垂熔玻砂漏斗过滤后,经常规封装和灭菌处理,即得到淡黄色澄明液体的注射液,其中的葡萄糖含量2-15%,有效药物成分(II)的含量为5-80mg/ml。
以下通过具体实施方式的实例再对本发明的上述内容作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。在不脱离本发明上述技术思想情况下,根据本领域普通技术知识和惯用手段做出的各种替换或变更,均包括在本发明的范围内。
附图说明
图1是式(III)鸢尾苷元磺酸钠化合物的IR图谱图2是式(III)鸢尾苷元磺酸钠化合物的1HNMR图谱具体实施方式实施例1:化合物(IV)的制备取式(II)结构的鸢尾苷元120g,加浓H2SO4480ml,搅拌至全溶,放置反应1.5小时,然后缓缓倾入饱和氯化钠水溶液5000ml中,边加边搅,析出大量白色沉淀,过滤。沉淀物加水3000ml并水浴加热至全部溶解,趁热过滤、析晶、过滤,得淡黄色片晶。结晶加水1000ml,再水浴加热至全溶后,趁热过滤、析晶、过滤。沉淀物于60℃减压干燥,得式(IV)结构的鸢尾苷元磺酸钠精品150g,为淡黄色细长针状结晶,含量>98%。
对所得的式(IV)结构鸢尾苷元磺酸钠产品进行的光谱测试数据如下:IR(KBr压片,cm-1):3465(s),1654(s),1622(s),1575(s),1494,1465(s),1436,1367,1340,1278,1165(s),1095(s),1070,1031(s),993,833,815,767,731,667,632,567,543,509,459;1HNMR(D2O为溶剂,TMS内标,δHppm):7.88(s,1H),7.74(s,1H),7.25(d,1H),6.94(d,1H),6.21(s,1H),3.70(s,3H)。
实施例2:化合物(V)的制备原料300mg(1mmol)与浓硫酸5ml混合,在60℃加热搅拌3h,冷却,倾入20ml饱和氯化钠溶液中。静置,过滤,所得固体用5%的氯化钠溶液重结晶,得淡黄色晶体的中间产物283mg,产率70%。
上述中间产物150mg(0.294mmol)悬浮于5ml乙醇中,加入过量的预先处理过的强酸型阳离子树脂,室温下搅拌1h,悬浮固体全部溶解。过滤,树脂用丙酮洗涤。向滤液中加入55mg三乙醇胺,减压蒸去溶剂,加入二氯甲烷和丙酮处理得粉状固体的化合物(V),产率:90%。熔点:155-159℃。在水中的溶解度大于50mg/ml。
1H NMR(400MHz,D2O)δ:7.92(s,1H),7.78(s,1H),7.32(d,J=7.2Hz,1H),7.00(d,J=8.0Hz,1H),6.27(s,1H),3.96(t,J=5.2Hz,6H),3.74(s,3H),3.47(t,J=5.2Hz,6H)。
13C NMR(100MHz,D2O)δ:182.4,159.0,156.5,155.7,155.0,154.1,135.8,133.2,130.3,124.1,123.2,119.6,106.9,96.9,62.8,57.8,57.5。
IR cm-1(KBr):3356(OH,NH),3151,1655(C=O),1612,144,1291,1168,1090。
ESIMS:379.1[M-NH(CH2CH2OH)3]-。
元素分析:C22H27NO12S(%):C49.84,H5.22,N2.71;计算值:C49.90,H5.14,N2.65。
实施例3:化合物(VI)的制备将鸢尾苷元异黄酮(I)(以下均简称原料)300mg(1.0mmol)溶于5ml乙醇中,冰浴冷却下滴加硝酸(68%)210mg和浓硫酸500mg混酸的乙醇溶液(3ml),然后搅拌24h。过滤即得硝化产物170mg,产率49%。
熔点:>200℃。
ESI MS:346.1(M+1)+;344.1(M-1)-。
将上述硝基化合物150mg溶于4ml甲醇中,加入30mg 10%Pd/C,常压下氢解完全(5h)。过滤,减压除去甲醇后产物溶于5ml乙酸乙酯中,加入乙酸乙酯的HCl溶液至酸性(pH=2-3)。过滤得式(VI)结构的盐酸盐产物,产率80%。熔点:>250℃。在水中的溶解度大于1mg/ml。
相关的结构检测数据:1H NMR(400MHz,DMSO)δ:12.94(s,1H),10.78(br.s,1H),10.58(br.s,1H),8.34(s,1H),7.48(s,1H),7.25(d,J=8.4Hz,1H),7.03(d,J=8.4Hz,1H),6.55(s,1H),3.76(s,3H)。
13C NMR(100MHz,DMSO)δ:180.5,157.9,154.7,153.4,152.9,150.4,131.7,128.0,123.6,122.0,121.6,121.2,116.0,105.0,94.2,60.2。
IR cm-1(KBr):3421(OH,NH),3079,1645(C=O),1619,1518,1474,1284。
ESI MS:316.1(M+1)+;314.1(M-1)-。
元素分析:C16H14ClNO6(%):C54.35,H4.15,N4.35;计算值:C54.63,H4.01,N3.98。
实施例4:化合物(VII)的制备原料300mg(1mmol)、氯乙酸乙酯135mg(1.1mmol)、丁酮8ml、少许5%体积的DMF混和,加入无水K2CO3207.3mg(1.5mmol)和催化量(约5mol%)的NaI,搅拌下回流8h。冷至室温,滤除不溶物,减压浓缩滤液,残余物溶于适量水中,乙酸乙酯提取,水洗两次,干燥,减压浓缩溶剂,快速柱层析柱分离,得淡黄色固体中间产物,产率:39.3%。熔点:164~167℃。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:12.85(s,1H),7.89(s,1H),7.36(d,J=8.4Hz,2H),6.86(d,J=8.4Hz,2H),6.35(s,1H),5.51(s,1H),4.81(s,2H),4.31(q,J=7.2Hz,2H),3.98s,3H),1.33(t,J=7.2Hz,3H)。
ESI MS:387.2(M+1)+。
上述中间产物125mg(0.32mmol)用甲醇4ml溶解,NaOH64.8mg(1.6mmol)配成水溶液(1mmol/ml),搅拌下滴加到上述甲醇溶液,常温下反应24h,使水解完全,溶液用稀盐酸调节至pH3~4,减压蒸除甲醇,生成的白色絮状沉淀溶于乙酸乙酯,水洗,干燥,浓缩,与NaHCO3反应制成化合物(VII)的钠盐,产率80%。熔点:>250℃。在水中的溶解度大于2mg/ml。
1H NMR(400MHz,DMSO)δ:9.24(s,1H),10.58(br.s,1H),8.32(s,1H),7.24(d,J=8.4Hz,2H),6.72(d,J=8.4Hz,2H),6.47(s,1H),4.38(s,2H),3.78(s,3H)。
13C NMR(50MHz,DMSO)δ:180.7,170.3,158.9,158.2,154.2,152.9,152.6,132.2,130.0,122.3,120.7,115.4,105.5,92.2,68.5,60.1。
IR cm-1(KBr):3420(OH),1655(C=O),1614,1422,1290,1176。
ESI MS:359.1(M-Na+2)+,357.0(M-Na)-。
元素分析:C18H13NaO8(%):C56.82,H3.32;计算值:C56.85,H3.45。
实施例5:化合物(VIII)的制备将二氯亚砜14.5ml(0.12mol)置干燥圆底烧瓶中,冰水浴冷却下用滴液漏斗缓慢滴加β-二甲氨基乙醇,剧烈搅拌。滴加完毕得褐色粘状物,35~50℃搅拌1h,加入50ml无水乙醇重结晶,得β-二甲胺基氯乙烷盐酸盐中间产物。适量无水乙醇及乙醚洗涤,密封保存备用。
原料150mg(0.5mmol)溶于15ml丁酮,加入无水K2CO3214mg(1.55mmol),DMF0.5ml,催化量(约5mol%)的NaI,加热至回流,分次加入(可分成五批、每隔半小时加入)上述中间产物115.3mg(0.8mmol),80℃左右回流48h,待冷,滤除不溶物,滤液在旋转蒸发器上减压浓缩至干,得粘状物。适量(10倍重量)水稀释后,乙酸乙酯提取,水洗,干燥,浓缩,得黄色固体产品的化合物(VIII),产率46.5%。按一般方法制得盐酸盐。熔点:190℃软化,235℃分解。在水中的溶解度大于2mg/ml。
1H NMR(400MHz,DMSO)δ:12.98(s,1H),10.57(br.s,1H),9.69(s,1H),8.49(s,1H),7.41(d,J=8.4Hz,2H),6.94(s,1H),6.84(d,J=8.1Hz,2H),4.54(t,J=5.2Hz,2H),3.78(s,3H),3.58(t,J=4.8Hz,2H),2.89(s,6H)。
13C NMR(50MHz,DMSO)δ:180.9,157.8,157.2,157.0,154.8,153.0,132.2,130.3,122.4,121.1,115.4,106.5,92.4,64.4,60.5,55.2,43.2。
IR cm-1(KBr):3418(OH,NH),1656(C=O),1614,1515,1460,1272.
ESI MS:372.1(M+1)+。
元素分析:C20H22ClNO6(%):C58.85,H5.78,N3.64;计算值:C58.90,H5.44,N3.43。
实施例6:化合物(IX)的制备原料300mg(1.0mmol)、含量为37%重量的甲醛溶液81mg(1.0mmol)、哌啶(2当量)和二氧六环5ml混和,回流3h。冷却,过滤得淡黄色固体产物(IX)。在乙醇中加入适量浓盐酸得相应盐酸盐,产率:90%。熔点:245℃分解。在水中的溶解度小于1mg/ml。
1H NMR(400MHz,DMSO)δ:13.43(s,1H),11.26(s,1H),10.03(br.s,1H),9.74(s,1H),8.42(s,1H),7.38(d,J=8.4Hz,2H),6.86(d,J=8.4Hz,2H),4.30(s,2H),3.82(s,3H),3.45-3.38(m,2H),2.97(m,2H),1.78-1.63(m,4H),1.38-1.36(m,1H),1.07-1.04(m,1H)。
13C NMR(50MHz,DMSO)δ:181.0,157.9,157.1,154.3,152.4,131.1,130.2,122.1,120.9,115.4,105.0,95.5,80.5,56.2,52.1,48.2,22.4,21.2,18.8。
IR cm-1(KBr):3197(OH,NH),2954,1652(C=O),1585,1515,1458,1374,1226。
ESI MS:398.0(M+1)+;396.2(M-1)-。
元素分析:C22H24ClNO6(%):C60.50,H5.74,N3.54;计算值:C60.90,H5.58,N3.23。
实施例7:化合物(X)的制备原料150mg(0.5mmol),含量为37%重量的甲醛溶液40.5mg(0.5mmol),二甲胺的盐酸盐61.2mg(0.75mmol)和二氧六环2ml混和,70~80℃回流10h,待冷,滤集不溶物,得到化合物(X)。在酸性(盐酸pH=2~3)条件下用乙醇重结晶,得产品的盐酸盐,产率:38.7%。熔点:248℃分解。在水中的溶解度大于2mg/ml。此反应产物的位置选择性与上述化合物(VII)的相同。
1H NMR(400MHz,DMSO)δ:13.40(s,1H),11.32(br.s,1H),10.23(br.s,1H),9.74(s,1H),8.40(s,1H),7.38(d,J=8.4Hz,2H),6.85(d,J=8.4Hz,2H),4.34(S,1H),3.81(s,3H),2.77(s,6H)。
13C NMR(100MHz,DMSO)δ:181.0,157.9,156.9,154.3,154.2,152.3,131.1,130.2,122.2,120.9,115.4,105.0,95.9,60.6,48.6,42.3。
IR cm-1(KBr):3145(OH,NH),1656(C=O),1577,1462,1379,1223。
ESI MS:357.9(M+1)+;356.2(M-1)-。
元素分析:C19H20ClNO6(%):C57.99,H5.11,N3.85;计算值:C57.95,H5.12,N3.56。
实施例8:各种剂型药物的制备1.注射液的制备添加为注射液总量的重量/体积比为2~15%的葡萄糖作为助溶剂,利用葡萄糖中的多羟基与异黄酮基缔合形成氢键,从而大大增加了其在水中的溶解度。
鸢尾苷元磺酸钠为例,其在室温下的水溶解度仅为20mg/ml(2%),达不到用药浓度;加热至60-100℃后的水溶解度可增至50-60mg/ml(5-6%),冷却至室温后又析出沉淀。但在注射液中加入2-15%的葡萄糖后,能够保持在室温和低温(0℃-5℃)下放置保持澄清,而且可以用水或糖盐水任意稀释,不出混浊。因此其不但可供肌肉注射,还可加入糖和/或盐水中用于静脉注射。这就表明了葡萄糖在增加鸢尾苷元磺酸钠在水中的溶解度的同时,还能大大提高注射制剂药物的稳定性。
称取鸢尾苷元磺酸钠100g,注射用葡萄糖150g,溶解于1500ml注射用水中,待溶解完全后加入注射用水至体积2000ml,用G4垂熔玻砂漏斗过滤后,滤液以常规方式封装于安瓿瓶中,并按常规方式作灭菌处理。所得注射液为淡黄色的澄明液体。
称取式(V)化合物100g,注射用葡萄糖100g,溶解于1500ml注射用水中,待溶解完全后加入注射用水至体积2000ml,用G4垂熔玻砂漏斗过滤后,滤液以常规方式封装于安瓿瓶中,并按常规方式作灭菌处理。所得注射液为淡黄色的澄明液体。
称取鸢尾苷元磺酸钠100g,注射用葡萄糖80g,溶解于1500ml注射用水中,待溶解完全后加入注射用水至体积2000ml,用G4垂熔玻砂漏斗过滤后,滤液以常规方式封装于安瓿瓶中,并按常规方式作灭菌处理。所得注射液为淡黄色的澄明液体,然后置于冷冻干燥机中进行冻干15-28小时,即得到黄色疏松的冻干粉针。
2.口服制剂的制备包括:片剂、散剂、颗粒剂、胶囊剂、丸剂、滴丸和微丸、各种溶液剂等。
作为固体口服制剂散剂是各种剂型的基础,因为我们合成产生的衍生物都是淡黄色到黄色固体,进行烘干然后粉碎成细粉(指全部能通过五号筛,含有能通过六号筛不少于95%的粉末。)然后过筛、加入适量辅料滑石粉增加其流动性,分装,即得。
颗粒剂的制备:把药物与辅料粉碎后进行充分的混合,然后加入适当的粘合剂进行制粒,干燥,整粒,分装,即可。
胶囊剂的制备:胶囊剂分为软胶囊和硬胶囊,硬胶囊是采用药物的粉末或者是颗粒进行装胶囊制得,软胶囊是把药液密封于球形或软质胶囊材料中。采用合适的材料干明胶:甘油∶水=1∶0.4:混合均匀,调配好作为软胶囊的囊壁,溶液药物PH值调到4.5-7.5,也可采用固体药物粉末需要通过80目筛,然后滴制法或压制法制备软胶囊。另外,可以制成肠溶胶囊。
另外,按照常规制剂的程序,选用不同的辅料如:乙烯-醋酸乙烯共聚物(EVA)、聚丙烯等,作为缓控释可以制成缓、释控释的制剂骨架。如将鸢尾苷元衍生物药物制成微囊,然后装入普通空胶囊中,可以成为按照需要进行药物释放的产品。
滴丸或微丸:滴丸的优点是发挥药效迅速,生物利用度高,副作用小,液体药物制成固体滴丸便于服用和运输,增加药物稳定性,生产设备简单,操作容易,重量差异小,成本低无粉尘,根据需要可以制成内服、外用、缓释、控释或局部治疗等多种类型的滴丸剂。
取药物基质,如:聚乙二醇类、硬脂酸加热后,将药液与基质混合均匀,置于滴丸机中保温,然后滴制到适当的冷凝剂中盛碗,洗除冷凝剂干燥整理,经过质检后包装。
片剂:包括普通压制片、咀嚼片、泡腾片、多层片、缓释片、控释片,包衣片(糖衣片、薄膜衣片、肠溶衣片)、分散片、口含片、舌下片等鸢尾苷元衍生物50g,淀粉、糖粉950g,将以上原辅料进行粉碎、过筛、混合均匀,加入适量的粘合剂形成软材,过筛,成为颗粒,干燥整粒,加入崩解剂、润滑剂充分混合,然后压片,包衣,质检,包装。
缓释片控释片将鸢尾苷元衍生物50g,加入骨架剂聚乙稀、聚丙烯混合均匀,压片,按照普通的制剂方法,制