CN1799596A - 一种治疗脑中风的中药组合物及其制备方法 - Google Patents

Abstract

一种治疗脑中风的中药组合物，其包括如下活性组分：石菖蒲、川芎、冰片。上述活性组分的重量配比为：石菖蒲50－500、川芎50－500、冰片1－10。优选重量配比：石菖蒲150、川芎150、冰片4。本发明将具有开窍豁痰、醒神益智的石菖蒲和活血行气、祛风止痛、开郁燥湿的川芎按照一定配比混合后进行萃取挥发油，然后加入醒神开窍、清热止痛的冰片和其他辅料基质得到的中药组合物，对CNS具有明确的作用，能迅速消除意识障碍和神经精神症状；具有明显抗惊厥、促进小鼠学习记忆、提高耐缺氧能力、中枢镇静作用和解热镇痛作用；有改善(提高)血脑屏障通透性的作用；改善实验性脑水肿神经元、胶质细胞、毛细血管的受损程度。

Description

一种治疗脑中风的中药组合物及其制备方法

技术领域

本发明涉及中药领域，特别涉及一种能够治疗脑中风的药物组合物及其制备方法。

背景技术

脑中风是指由于各种脑血管病变引起的，以急性起病和脑功能缺失为共同特征的最常见的神经科疾病，是因为出现了脑组织的缺血缺氧或者出血，根源在脑子的血管病变，包括了栓塞、血栓、供血不足、出血等。脑中风有着高发病、高死亡、高致残，主要症状包括偏瘫、偏身感觉障碍(麻木)、语言障碍、智力障碍，这些都影响着患者及其家属的生活质量。据报道，脑中风的发生率随着经济和社会的发展而步步高升，占总死亡人数的百分之十六点八，几乎每六名死亡者中便有一人是死于脑中风。中风的发生率与年龄成正比，一般而言，超过五十岁以上，发生率就逐渐增加，死亡率亦升高，且在天气比较寒冷的季节，脑中风发生率就升高，其中以每年十一月至翌年三月间的发生率最高。据估计，脑中风的生还者只有十分之一可以恢复工作，十分之四有轻度残障，但还可以自理起居饮食，另十分之四有严重后遗症需人照料，剩下的十分之一可能需要终生住在医院。引起脑中风的原因很多，高血压是长期性的疾病，血压忽高忽低均可能引起脑出血和脑缺血；血脂肪过高，使动脉发生粥状硬化、失去弹性，血流易凝固，形成血栓，引起脑中风；其它如糖尿病、肥胖、烟酒、心脏病等等，也都是可能的原因。目前治疗脑中风的中药组合物很多，对治疗脑中风都有一定的效果，但是它们都存在着疗效不显著、治疗时间长、治愈率低的问题。

发明内容

本发明所要解决的技术问题在于，提供一种对治疗脑中风具有疗效显著、治疗程短、治愈率高的中药组合物。

本发明的另一个目的在于，提供一种制备上述中药组合物的方法。

本发明的目的是通过如下技术方案实现的，

一种治疗脑中风的中药组合物，其特征在于，其包括如下活性组分：石菖蒲、川芎、冰片。上述活性组分的重量配比为：石菖蒲50-500、川芎50-500、冰片1-10。优选重量配比：石菖蒲150、川芎150、冰片4。

所述中药组合物还包括如下重量配比的辅料：聚乙二醇60005-50、聚乙二醇4000 5-50、聚山梨酯-80 0.5-3.5。优选重量配比：聚乙二醇6000 16.66、聚乙二醇4000 11.1、聚山梨酯-80 1.74。

上述治疗脑中风的中药组合物的制备方法为：按上述配比准备好原料后，取石菖蒲、川芎用二氧化碳超临界萃取或水蒸汽蒸馏提取挥发油，加入冰片、辅料基质，制成临床可接受的药剂学上所说的任何一种剂型。

石菖蒲和冰片是常用的芳香开窍药。石菖蒲开窍豁痰、醒神益智；冰片醒神开窍、清热止痛。石菖蒲对CNS具有明确的作用，对于临床上不同原因形成的脑水肿和脑性昏迷具有良好疗效，能迅速消除意识障碍和神经精神症状；具有明显抗惊厥、促进小鼠学习记忆、提高耐缺氧能力、中枢镇静作用和解热镇痛作用。研究表明，石菖蒲挥发油是其醒脑开窍和镇静、抗惊厥的主要组分。石菖蒲挥发油中含几十种成分，主要为β-细辛醚及α-细辛醚。国外报道细辛醚能保护脑皮质细胞，减轻由天门冬氨酸(NMDA)或谷氨酸(Glu)引起的神经毒性；能降低血脂、抗血小板聚集、抗血栓形成。以石菖蒲为主制成的复方制剂在治疗中风脑水肿方面效果显著，并能改善实验性脑水肿神经元、胶质细胞、毛细血管的受损程度。

冰片又名龙脑。《本草衍义》记载：“龙脑，此物大通利关膈热塞，其清香为百药之先，大人小儿风涎壅，及暴得惊热，甚济用。”冰片醒神开窍、清热止痛，用于治疗热病神昏、痰热内闭等症。有报道大鼠灌服冰片制剂后能明显提高庆大霉素在脑内的浓度，增加血清中庆大霉素的浓度，且能增强伊文氏蓝对脑组织的蓝染程度，提示冰片有改善(提高)血脑屏障通透性的作用。

川芎为伞形科植物川芎的干燥根茎，具有活血行气、祛风止痛、开郁燥湿等功效。中医药理论认为川芎“辛香走窜而行气，活血祛瘀以止血，上行头目而祛风，下入血海以调经。并外彻皮毛，旁通四肢，为血中之气药”。

本发明将具有开窍豁痰、醒神益智的石菖蒲和活血行气、祛风止痛、开郁燥湿的川芎按照一定配比混合后进行萃取挥发油，然后加入醒神开窍、清热止痛的冰片和其他辅料基质得到的中药组合物，对CNS具有明确的作用，对于临床上不同原因形成的脑水肿和脑性昏迷具有良好疗效，能迅速消除意识障碍和神经精神症状；具有明显抗惊厥、促进小鼠学习记忆、提高耐缺氧能力、中枢镇静作用和解热镇痛作用；能保护脑皮质细胞，减轻由天门冬氨酸(NMDA)或谷氨酸(Glu)引起的神经毒性；能降低血脂、抗血小板聚集、抗血栓形成，有改善(提高)血脑屏障通透性的作用；改善实验性脑水肿神经元、胶质细胞、毛细血管的受损程度。

下面结合药效学和毒理学实验，介绍本发明在治疗脑中风的效果。

药效学试验：

1、抗凝血作用和大鼠血栓形成实验

1.1动物：NIH小鼠，动物合格证号：2001A044；粤监证号2004A018；SD大鼠，动物合格证号：2001A026；粤监证号2004A021。所有动物均购自广东省医学实验动物中心。

试验环境：动物房保持通风、干燥、室温22-25℃，湿度50-70％，鼠料定量饲养，自由饮水。

1.2药物与剂量：

(1)、受试药物：醒神益智滴丸，丽珠医药集团股份有限公司提供，其包括如下活性组分：石菖蒲、川芎、冰片。

根据预实验结果，小鼠最低有效剂量0.45g/kg体重；大鼠最低有效剂量0.21g/kg体重。低、中、高剂量比为1∶2∶4，小鼠相应中、高剂量分别为0.90g/kg和1.8g/kg；大鼠相应中、高剂量分别为0.42g/kg和0.84g/kg，灌胃给药，每日两次，上、下午各一次

(2)、阳性对照药：

阿斯匹林肠溶片：杭州恩华药业集团有限责任公司。灌胃给药，每日二次，上、下午各一次，每次剂量为：小鼠61mg/kg体重，大鼠28.2mg/kg体重。

(3)、阴性对照药：小鼠2.25％基质，大鼠2.1％基质(基质：用本发明组分中除去活性成分石菖蒲挥发油、川芎挥发油、冰片的辅料配制)。

给药方法：灌胃。

1.3数据及统计学处理：实验数据用 x±SD表示，用SPSS 10.0软件ANOVA方差分析进行差异显著性检验。

1.4实验方法

1.4.1抗凝血作用：取健康NIH小鼠60只，雌雄各半，随机分5组：醒神益智滴丸高、中、低剂量组、阳性对照组(给阿斯匹林，0.12g/kg.d)、阴性对照组(给等体积基质)，每组12只。灌胃给药7d，分2次/d给药，第7d给药30min后用内径为1mm的玻璃毛细管插入小鼠内眦眼球后静脉丛取血，至毛细管血柱达5cm。每隔30s折断毛细玻管1小段，检查有无出现血凝丝。计算从毛细玻管采血到出现血凝丝的时间，即为凝血时间，与对照组进行比较(见表1)。

表1醒神益智滴丸对小鼠凝血时间的影响(X±S)

组别	n	凝血时间(S)
			高剂量组	12	255.27±36.86***
中剂量组	12	243.85±42.78**
			低剂量组	12	237.74±45.05**
阿斯匹林组	12	221.33±41.06*
			阴性对照组	12	179.60±43.91

与阴性对照组比：*P＜0.05  **P＜0.01  ***P＜0.001

结果提示：醒神益智滴丸能延长小鼠的凝血时间，与阴性对照组比较有显著性差别，说明该药有抗凝血作用；与阳性对照组比较，凝血时间无显著性差别，说明在抗凝血方面与现有药品的疗效相当；另外，醒神益智滴丸有随剂量增大作用增强的趋势。

1.4.2大鼠血栓形成实验：取健康SD大鼠50只，雌雄各半，随机分5组：醒神益智滴丸高、中、低剂量组、阳性对照组(给阿斯匹林，0.0564g/kg.d)、阴性对照组(给等体积基质)，每组10只。灌胃给药7d，分2次/d给药，末次给药30min后，大鼠用10％水合氯醛(3ml/kg体重)腹腔注射麻醉，取仰卧位，于腹正中线切开皮肤约3cm，从腹白线打开腹腔，找到下腔静脉并分离，于左肾静脉下方用粗线结扎下腔静脉，缝合腹壁。2h后，重新打开腹腔，在结扎下方2cm处用止血钳夹住血管，将该段管腔内血液吸尽，然后纵行剪开管腔，观察有无血栓形成，如有则取出60℃干燥，24h后称重。以血栓形成百分率和血栓重量为指标。比较给药组与对照组有无显著差异(见表2)。

表2对大鼠血栓形成的影响(X±S，n＝10)

组别	血栓形成例数	血栓抑制率(％)	血栓干重(mg)
				高剂量组	8	80	2.63±2.33*
中剂量组	9	90	2.49±1.30*
				低剂量组	8	80	2.68±1.72*
阿斯匹林组	9	90	2.67±1.53*
				阴性对照组	10	100	4.77±2.20

与阴性对照组比：*P＜0.05

结果提示：醒神益智滴丸能降低大鼠血栓形成百分率，减少血栓重量，与阴性对照组比较有显著性差别，说明该药有抑制大鼠血栓形成的作用。

2、对麻醉犬脑血管的影响

2.1动物

健康杂种犬，由第二军医大学动物房提供，动物饲养合格证号：SCXK(沪)20020006。体重：10～13kg；性别：雌雄兼用；每组动物数：犬6条。动物总数：30条

2.2试验方法  动物用戊巴比妥钠静脉麻醉(30mg·kg^-1)；分离右颈总动脉及颈外动脉，结扎颈外动脉后，在颈总动脉上安放直径为2.5～3mm的电磁流量计探头，以MFV-1100/1200型电磁流量计记录颈内动脉血流量(日本Nihon Kohden公司)；分离股动脉，并行插管，经压力传感器记录动脉平均血压；针头电极插入四肢皮下记录标II导联心电图，将颈内动脉血流量、血压和心电信号通过PowerLab数据采集记录分析系统(ML785/8S，AD Instruments，澳大利亚)输入多导生理记录仪。手术结束后，稳定30分钟，记录一次各项指标作为给药前对照值，溶剂对照组灌胃给生理盐水2ml/kg，阳性药对照组灌胃脑安胶囊160mg/kg。受试药物组灌胃醒神益智滴丸，给药后15、30、60、90、120、180分钟分别记录各项指标值。180分钟后处死犬，取大脑称重。以右颈总动脉血流量乘以2代表全脑血流量(CBF)。脑血管阻力可用公式计算：R＝BP(kPa)/[CBF(ml/min)·100g brain]。

2.3剂量设置：根据预实验结果，犬最低有效剂量为0.4g/kg，低、中、高剂量比为1∶3∶6，相应中、高剂量分别为1.2g/kg和2.4g/kg。阳性对照脑安胶囊(吉林省辽源亚东药业股份有限公司，批号040716)，其推荐临床剂量为1.6g/人/天，人按60kg体重计算，相应剂量为27mg/kg/d，折算为犬的剂量为54mg/kg，设计阳性药剂量相当受试药物的中剂量，故取为160mg/kg。

2.4溶剂对照：生理盐水按2ml/kg灌胃给药。

2.5观察指标及观察时间：观察记录颈内动脉血流量、血压、心电图、心率，观察时间为给药0、15、30、60、90、120、180分钟。

2.6数据及统计学处理：实验数据用 x±SD表示，用SPSS 10.0软件ANOVA方差分析进行差异显著性检验。

2.7试验结果：麻醉犬在术后稳定30min，记录犬的心率、血压、颈内动脉血流量作为给药前对照值，然后分别灌胃醒神益智滴丸、脑安胶囊或生理盐水，并于灌胃后15、30、60、90、120、180min分别记录各项指标。实验结果显示：

(1)对脑血流量的影响：溶剂对照组脑血流量15～180min有波动，但与给药前比较无显著差异。醒神益智滴丸低、中、高剂量(0.4、1.2、2.4g/kg)组和阳性对照脑安胶囊组灌胃给药，脑血流量增加。醒神益智滴丸变化率与溶剂对照组同时间点比较：醒神益智滴丸低剂量组(0.4g/kg)在给药后30～60min脑血流量增加与空白对照组相比有显著升高(P＜0.05)，90～120min时脑血流量增加具有非常显著意义(P＜0.01)；中剂量组(1.2g/kg)及高剂量组(2.4g/kg)给药后30～180min脑血流量增加具有非常显著意义(P＜0.01)；脑安胶囊组给药后60～180min脑血流量增加具有非常显著意义(P＜0.01)。实验结果见表3及图1。

(2)对脑血管阻力的影响：溶剂对照组脑血管阻力15～180min有波动，但与给药前比较无显著差异。醒神益智滴丸低、中、高剂量组(0.4、1.2、2.4g/kg)和脑安胶囊组灌胃给药，脑血管阻力降低。变化率与溶剂对照组同时间点比较：醒神益智滴丸低剂量组(0.4g/kg)在给药后30min时脑血管阻力降低具有显著意义(P＜0.05)，60～120min时具有非常显著意义(P＜0.01)；中剂量组(1.2g/kg)给药后，30～120min时脑血管阻力降低具有非常显著意义(P＜0.01)，180min时仍有显著意义(P＜0.05)；高剂量组(2.4g/kg)给药后30～180min脑血管阻力降低与空白对照组相比，均有非常显著意义(P＜0.01)；脑安胶囊组给药后90～120min时脑血管阻力降低具有非常显著意义(P＜0.01)。实验结果见表4及图2。

(3)对血压、心率的影响：空白对照组、醒神益智滴丸中低剂量(0.4g/kg、1.2g/kg)及阳性对照脑安胶囊组麻醉犬的血压、心率各时间点略有变化，但之间无显著性差异。醒神益智滴丸高剂量(2.4g/kg)组60～90min时血压较空白对照组同时间点相比显著降低(P＜0.01及P＜0.05)。实验结果见表5、6及图3、4。

试验结论：醒神益智滴丸灌胃低、中剂量组(0.4g/kg、1.2g/kg)对血压、心率无显著影响；高剂量组60～90min时血压显著降低，其余各时间点及心率与空白对照组相比无显著影响；各剂量组均可显著增加麻醉犬的脑血流量，降低脑血管阻力。

毒理学研究：

1、急性毒性：按中药新药审批办法中有关急性毒性试验研究的具体要求，对醒神益智滴丸进行急性毒性试验。结果醒神益智滴丸小鼠经口灌胃LD₅₀为5.1255g/kg，LD₅₀的95％平均可信限为5.1255±0.1686g/kg。醒神益智滴丸小鼠安全剂量为4.348g/kg，相当于临床用药的348倍，在该剂量下，动物呼吸较均匀，活动稍有减少，其它一般状态良好，进食饮水正常，体重增加，无明显的毒性反应症状，动物无一例死亡。说明醒神益智滴丸虽有毒性反应，但在该剂量下，没有明显的急性毒性作用。

2、长期毒性：大鼠连续3个月灌胃给予醒神益智滴丸。受试大鼠分为四组，每组20只，雌雄各半。高、中、低剂量组给药剂量分别为：每日1.4g/kg(体重)、0.7g/kg(体重)和0.35g/kg(体重)，对照组给予基质。每日观察一般状况，每周测量体重1次，以调整给药量。给药3个月后，每组处死2/3只动物进行病理、血液学检查、血液生化学检查。剩余动物停药后继续观察2周，同样进行病理、血液学检查、血液生化学检查。结果：高剂量组有些动物活动减少、毛发松散，精神状态稍差；其它各组大鼠活动基本正常，未出现明显毒性症状或死亡。血液学检查、血液生化学检查及病理学检查等结果表明：连续给予醒神益智滴丸3个月后，高剂量组白细胞总数(WBC)、淋巴细胞数(LYM)和血糖(Glu)升高，血红蛋白(HGB)降低(P＜0.05)，其余各项血液学、血液生化学检查未见异常；病理学检查，高剂量组：2只大鼠心肌有灶状水肿、空泡变性，其中1只伴纤维化瘢痕形成，其余各器官未见异常；病理解剖及器官指数未见异常，中、低剂量组未见异常；

表3醒神益智滴丸对麻醉犬脑血流量的影响(ml/min， x±SD，n＝6)

组别	给药前	给药后
								15min	30min	60min	90min	120min	180min
		溶剂对照组变化率％	126.8±31.7	122.0±27.0-0.03±0.04	121.6±28.4-0.04±0.05	118.5±26.7-0.06±0.04	112.3±22.7-0.10±0.06							101.3±27.9-0.20±0.11	103.0±23.6-0.18±0.09
脑安胶囊160mg/kg变化率％	119.3±30.2							120.9±31.10.01±0.03	124.6±28.70.05±0.02	143.6±23.70.22±0.16**	144.8±29.30.23±0.10**	137.2±40.20.15±0.08**	127.1±28.90.07±0.05**
		醒神益智滴丸0.4g/kg变化率％	107.4±17.0	102.6±16.2-0.04±0.05	115.1±19.10.07±0.06*	119.3±19.10.11±0.07*	121.1±17.10.13±0.06**							118.0±19.70.10±0.05**	97.3±21.6-0.10±0.11
醒神益智滴丸1.2g/kg变化率％	118.9±22.3							123.6±23.60.04±0.05	134.0±18.90.14±0.09**	145.1±21.50.23±0.10**	156.4±33.60.32±0.13**	159.3±38.50.33±0.12**	145.5±43.10.21±0.19**
		醒神益智滴丸2.4g/kg变化率％	109.3±37.6	108.2±38.1-0.01±0.06	120.9±40.00.11±0.07**	133.8±34.40.26±0.19**	131.5±35.90.23±0.15**							128.1±39.80.18±0.08**	122.5±41.00.12±0.07**

变化率与溶剂对照组同时间点比较，^*P＜0.05，^**P＜0.01

表4醒神益智滴丸对麻醉犬脑血管阻力的影响(kPa·min/ml·100g brain， x±SD，n＝6)

组别	给药前	给药后
								15min	30min	60min	90min	120min	180min
		溶剂对照组变化率％	0.12±0.04	0.12±0.030.04±0.04	0.13±0.040.06±0.04	0.13±0.040.08±0.05	0.13±0.040.13±0.09							0.15±0.040.27±0.23	0.14±0.050.21±0.15
脑安胶囊160mg/kg变化率％	0.12±0.03							0.12±0.03-0.00±0.04	0.11±0.03-0.04±0.02	0.09±0.01-0.20±0.13	0.09±0.02-0.19±0.07**	0.10±0.02-0.13±0.07**	0.11±0.02-0.04±0.08
		醒神益智滴丸0.4g/kg变化率％	0.13±0.03	0.13±0.030.03±0.05	0.12±0.03-0.08±0.06*	0.11±0.02-0.13±0.07**	0.11±0.02-0.12±0.07**							0.12±0.02-0.09±0.06**	0.15±0.040.17±0.19
醒神益智滴丸1.2g/kg变化率％	0.11±0.02							0.10±0.02-0.04±0.05	0.10±0.20-0.12±0.06**	0.09±0.01-0.19±0.07**	0.08±0.02-0.23±0.07**	0.09±0.02-0.22±0.05**	0.10±0.02-0.11±0.08*
		醒神益智滴丸2.4g/kg变化率％	0.14±0.04	0.14±0.04-0.02±0.05	0.12±0.03-0.13±0.06**	0.10±0.02-0.24±0.13**	0.10±0.02-0.24±0.10**							0.11±0.03-0.22±0.08**	0.11±0.03-0.17±0.09**

变化率与溶剂对照组同时间点比较，^*P＜0.05，^**P＜0.01

表5醒神益智滴丸对麻醉犬平均血压的影响(kPa， x±SD，n＝6)

组别	给药前	给药后
								15min	30min	60min	90min	120min	180min
		溶剂对照组变化率％	20.8±3.55	20.9±3.180.01±0.03	21.2±3.180.02±0.03	21.0±3.160.02±0.06	21.0±3.800.01±0.09							20.7±3.130.00±0.05	20.4±3.52-0.02±0.06
脑安胶囊160mg/kg变化率％	20.3±1.98							20.6±2.380.01±0.02	20.4±2.270.00±0.02	19.5±1.44-0.04±0.05	20.1±1.73-0.01±0.04	20.1±1.63-0.01±0.05	20.7±1.920.02±0.06
		醒神益智滴丸0.4g/kg变化率％	20.0±3.72	19.8±4.02-0.01±0.04	19.7±3.90-0.01±0.03	19.4±3.61-0.03±0.05	19.7±2.90-0.01±0.06							19.9±3.000.00±0.07	20.6±3.610.04±0.07
醒神益智滴丸1.2g/kg变化率％	19.6±1.41							19.5±1.42-0.01±0.01	19.5±1.61-0.01±0.03	19.5±1.51-0.01±0.01	19.7±1.160.01±0.02	20.3±0.680.04±0.05	20.9±1.150.07±0.06
		醒神益智滴丸2.4g/kg变化率％	21.7±3.91	21.0±3.31-0.03±0.04	20.7±3.23-0.04±0.03	20.1±3.10-0.07±0.03**	19.9±2.90-0.07±0.04*							19.7±2.61-0.08±0.05	19.8±2.24-0.08±0.07

变化率与溶剂对照组同时间点比较，^*P＜0.05，^**P＜0.01

表6醒神益智滴丸对麻醉犬心率的影响(次/min， x±SD，n＝6)

组别	给药前	给药后
								15min	30min	60min	90min	120min	180min
		溶剂对照组变化率％	187.8±29.9	179.2±49.2-0.06±0.09	186.7±37.2-0.01±0.05	187.9±31.70.00±0.03	180.6±36.5-0.04±0.05							185.6±25.2-0.01±0.09	188.0±26.80.00±0.05
脑安胶囊160mg/kg变化率％	166.0±25.0							165.3±40.3-0.01±0.11	167.0±36.0-0.00±0.07	162.6±27.6-0.02±0.04	154.7±25.1-0.07±0.04	15.4±24.1-0.07±0.05	151.6±24.6-0.09±0.08
		醒神益智滴丸0.4g/kg变化率％	186.2±38.9	180.9±34.0-0.03±0.03	181.3±32.3-0.02±0.05	179.5±31.1-0.03±0.08	178.1±28.6-0.03±0.11							174.5±35.3-0.06±0.10	175.4±33.6-0.05±0.10
醒神益智滴丸1.2g/kg变化率％	170.5±21.5							164.7±17.7-0.03±0.03	163.0±20.9-0.04±0.04	175.2±8.090.04±0.10	175.2±15.00.04±0.13	179.6±18.80.06±0.12	171.3±33.2-0.00±0.11
		醒神益智滴丸2.4g/kg变化率％	160.6±29.4	159.1±34.0-0.01±0.04	160.0±43.4-0.01±0.12	151.2±37.3-0.06±0.12	141.0±30.3-0.12±0.10							142.2±34.7-0.12±0.12	142.5±38.6-0.12±0.12

变化率与溶剂对照组同时间点比较，^*P＜0.05

停药2周后，各组血液学、血液生化学检查、病理解剖、组织学检查及器官指数未见异常。说明醒神益智滴丸在高剂量下虽有毒性反应，但在该剂量下，没有明显的毒性作用；在中低剂量下，没有毒性作用。

3、ICR小鼠骨髓细胞染色体畸变试验

采用ICR小鼠体内染色体畸变试验方法，检测了醒神益智滴丸对染色体的损伤作用，试验设2.0、1.0和0.5g/kg三个剂量组(分别相当于小鼠LD₅₀的1/2.5、1/5、1/10)，经口一次给药。结果显示：在受试剂量下ICR小鼠骨髓细胞染色体畸变率与对照组无显著性差异，说明该药对ICR小鼠骨髓细胞染色体无致畸变作用。

4、啮齿类动物微核试验

按《新药(西药)临床前研究指导原则汇编》的设计要求，应用小鼠骨髓微核试验方法对醒神益智滴丸进行致突变性研究。试验设2.0、1.0和0.5g/kg三个剂量组(分别相当于小鼠LD₅₀的1/2.5、1/5、1/10)，一次灌胃给药。结果显示：在所设剂量下，醒神益智滴丸对NIH小鼠的微核诱发率(‰)与阴性对照组比较均无显著差异(P＞0.05)，表明受试物醒神益智滴丸对NIH小鼠无诱发骨髓嗜多染红细胞微核的效应。

5、微生物回复突变试验

按《新药(西药)临床前研究指导原则汇编》的设计要求，选用组氨酸缺陷型鼠伤寒沙门氏菌(S.typhimurium)TA97、TA98、TA100、TA102及TA1535为指示菌株，采用标准平板掺入法检测了醒神益智滴丸的致突变性。设5000、500、50、5、0.5μg/皿五个剂量组，试验在加和不加代谢活化系统(S9)条件下进行。结果显示，在5000μg/皿受试剂量下，对TA97和TA98菌株有一定的抑菌作用。受试物在不加代谢活化剂(S9)时，在各受试剂量下对TA98的回变菌落数均有明显增加，但加入代谢活化剂(S9)时回变菌落数与对照无明显差异，说明药物可经代谢解毒。受试剂量下对其他各菌株在加或不加代谢活化剂(S9)条件下均与阴性对照组的回变数相近。表明醒神益智滴丸在不加S9时对TA98具有致突变性。但在加入代谢活化剂(S9)条件下无致突变性。

6、致畸敏感期毒性试验

应用标准致畸试验方法，检测醒神益智滴丸对受孕SD大鼠在致畸敏感期的毒性。实验设3个剂量组，即1.0g·kg^-1，0.5g·kg^-1和0.25g·kg^-1体重(相当于小鼠LD₅₀的1/5-20/1和临床推荐剂量540mg/人/日，9.33mg/kg的25-100倍)和1个阴性对照(溶剂)，于GD6至GD15器官发生敏感期，采用灌胃给药，GD20剖杀并观察有无大体畸形、骨骼畸形及内脏畸形。结果：醒神益智滴丸在高剂量(1.0g·kg^-1)时母鼠增重降低、活胎率降低和死胎率增高。对胎鼠性别比无明显影响；也未见明显的大体畸形、骨骼畸形和内脏畸形。结论：醒神益智滴丸在1.0g·kg^-1剂量时，对大鼠有母体毒性和胚胎毒性，在0.5g·kg^-1和0.25g·kg^-1以下剂量未观察到母体毒性和胚胎毒性，受试剂量下均未观察到有明显的致畸作用。

附图说明

图1醒神益智滴丸对麻醉犬脑血流量的影响；

图2醒神益智滴丸对麻醉犬脑血管阻力的影响；

图3醒神益智滴丸对麻醉犬血压的影响；

图4醒神益智滴丸对麻醉犬心率的影响；

具体实施方式

实施例一

按照重量配比取石菖蒲50g、川芎50g、冰片1g、聚乙二醇6000 5g、聚乙二醇4000 5g、聚山梨酯-80 0.5g。准备好原料后，取石菖蒲、川芎用二氧化碳超临界萃取或水蒸汽蒸馏提取挥发油，加入冰片、辅料基质，制成滴丸。

实施例二

按照重量配比取石菖蒲500g、川芎500g、冰片10g、聚乙二醇6000 50g、聚乙二醇4000 50g、聚山梨酯-80 3.5g。准备好原料后，取石菖蒲、川芎用二氧化碳超临界萃取或水蒸汽蒸馏提取挥发油，加入冰片、辅料基质，制成凝胶。

实施例三

按照重量配比取石菖蒲150g、川芎150g、冰片4g、聚乙二醇6000 16.7g、聚乙二醇4000 11.1g、聚山梨酯-801.74g。准备好原料后，取石菖蒲、川芎用二氧化碳超临界萃取或水蒸汽蒸馏提取挥发油，加入冰片、辅料基质，制成颗粒。

实施例四

按照重量配比取石菖蒲150g、川芎150g、冰片4g、聚乙二醇6000 16.7g、聚乙二醇4000 11.1g、聚山梨酯-801.74g。准备好原料后，取石菖蒲、川芎用二氧化碳超临界萃取或水蒸汽蒸馏提取挥发油，加入冰片、辅料基质，制成胶囊。

Claims (7)

1、一种治疗脑中风的中药组合物，其特征在于，其包括如下活性组分：石菖蒲、川芎、冰片。

2、根据权利要求1所述的一种治疗脑中风的中药组合物，其特征在于，所述活性组分的重量配比为：石菖蒲50-500、川芎50-500、冰片1-10。

3、根据权利要求2所述的一种治疗脑中风的中药组合物，其特征在于，所述中药组合物还包括如下重量配比的辅料：聚乙二醇6000 5-50、聚乙二醇4000 5-50、聚山梨酯-800.5-3.5。

4、根据权利要求1或2或3所述的一种治疗脑中风的中药组合物，其特征在于，所述活性组分的重量配比为：石菖蒲150、川芎150、冰片4。

5、根据权利要求4所述的一种治疗脑中风的中药组合物，其特征在于，所述中药组合物还包括如下重量配比的辅料：聚乙二醇6000 16.66、聚乙二醇4000 11.1、聚山梨酯-801.74。

6、根据权利要求1或2或3所述的一种治疗脑中风的中药组合物，其特征在于，所述中药组合物为临床可接受的药剂学上所说的任何一种剂型。

7、制备权利要求1-6中任意一顶所述的一种治疗脑中风的中药组合物的方法，其特征在于，按上述配比准备好原料后，取石菖蒲、川芎用二氧化碳超临界萃取或水蒸汽蒸馏提取挥发油，加入冰片、辅料基质，制成临床可接受的药剂学上所说的任何一种剂型。

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