CN1765923A - 从葛根中提取分离蛋白质的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种从葛根中提取分离蛋白质的方法，包括以下步骤：将干净的葛根进破碎机加水破碎，制得葛根淀粉浆液；淀粉浆液经洗涤筛分得到粗淀粉，粗淀粉经旋分分离得到葛根粗蛋白溶液；用碱性液调节葛根粗蛋白溶液pH至8～10，在25～50℃保持20～60分钟，将溶液分离得固相和上清液；将上清液用酸调pH至3.5～5.0后，沉淀，分离去上清液，保留沉积物；用pH为8.0～10.0的碱溶液调节沉积物pH至6.5～7.5，制得葛根分离蛋白。本发明工艺简单易行，生产成本低，宜于实现工业化生产，可以从葛根中提取出有价值的植物蛋白，经济效益、社会效益显著，为葛根资源的综合利用提供了一条新途径。
Description
(一)技术领域
本发明涉及一种从葛根中提取分离蛋白质的方法。
(二)技术背景
在国内，葛根种植范围相当广泛，基本上各个省份均有种植。葛根为药食两用植物，味甘、性平，具有清热解毒的功效，其葛根异黄酮对高血压、冠心病等心血管疾病有显著疗效。目前国内外对葛根的提取只是涉及了对原料中的葛根异黄酮和葛根淀粉的研究，其中几乎全部的蛋白质却随二次原料被排放掉，造成了蛋白质资源的极大浪费。从全球的营养调查结果表明，膳食中的蛋白质的量与质的不足仍是当今世界特别是发展中国家最大的营养问题，开发和利用新的蛋白资源仍是食品科学领域中重要的研究课题。葛根蛋白含有8种人体必需氨基酸：赖氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、苏氨酸、甲硫氨酸、组氨酸、精氨酸。与其他植物蛋白相比，葛根蛋白又具有一定的药用价值，药食两用。但葛根蛋白的提取研究至今无人报道，因此，开发葛根蛋白资源意义重大。
(三)发明内容
为了充分发掘葛根中的蛋白资源，本发明目的在于提供一种从葛根中提取分离蛋白质的方法。本发明所采用的技术方案是：
一种从葛根中提取分离蛋白质的方法，其特征在于包括以下步骤：
(1)将干净的葛根进破碎机加水破碎，制得葛根淀粉浆液；
(2)步骤(1)制得淀粉浆液经洗涤筛分得到粗淀粉，粗淀粉经旋分分离得到葛根粗蛋白溶液；
(3)用碱性液调节葛根粗蛋白溶液pH至8～10，在25～50℃保持20～60分钟，将溶液分离得固相(I)和上清液(I)；
(4)将所得上清液用酸调pH至3.5～5.0后，沉淀，分离去上清液，保留沉积物；
(5)用pH为8.0～10.0的碱溶液调节步骤(4)所得沉积物pH至6.5～7.5，制得葛根分离蛋白。
步骤(3)和(4)所述的分离均可采用离心分离或其它可以接受的化学分离方法。
步骤(3)为碱溶浸提的过程，所述的碱性液优选为下列之一的溶液：①亚硫酸钠，②亚硫酸氢钠，③氢氧化钠，碱性液将粗蛋白中蛋白成份提取，提取时的优选条件是在30～50℃保持30～40分钟。为了提高原料利用率，优选将步骤(3)中得到的固相(I)加入水或碱性液洗涤，经分离得固相(II)和上清液(II)，上清液(II)用于步骤(4)。此时分离可以用超滤的方法。
步骤(5)中所述的碱溶液优选为氢氧化钠溶液，pH优选为9.0。
作为对本发明得到的蛋白质产物的进一步处理，所述步骤(5)得到的葛根分离蛋白还经均质杀菌、喷雾干燥后，以得到葛根分离蛋白成品。其中所述的均质杀菌优选为瞬时杀菌，温度为120～140℃。
应用凯氏定氮法测定制得蛋白成品中的蛋白质含量，采用下式计算：
x＝(V-V0)*C(HCl)*14*F/m
注：x：样品中蛋白质的质量分数，％(g/ml)
V0：滴定空白用去的盐酸液毫升数；
V：滴定样品用去的盐酸液毫升数；
C：盐酸标准液浓度；
m：样品质量(g)；
F：蛋白质换算系数(6.25)。
本发明工艺简单易行，生产成本低，宜于实现工业化生产，可以从葛根中提取出有价值的植物蛋白，经济效益、社会效益显著，为葛根资源的综合利用提供了一条新途径。
(四)具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作进一步说明，但本发明的保护范围并不限于此。
实施例1葛根分离蛋白及其成品的制备
(1)将干净的葛根进破碎机加水破碎，制得葛根淀粉浆液；
(2)步骤(1)制得淀粉浆液经洗涤筛分得到粗淀粉，粗淀粉经旋分分离得到葛根粗蛋白溶液；
(3)用亚硫酸钠溶液调节葛根粗蛋白溶液pH至10，在50℃保持40分钟，将溶液离心分离得固相和上清液；
(4)将所得上清液用稀盐酸调pH至5.0后，沉淀，离心分离去上清液，保留沉积物；
(5)用pH为9.0的氢氧化钠溶液调节步骤(4)所得沉积物pH至7.0，制得葛根分离蛋白。
葛根分离蛋白在120℃经瞬时杀菌，喷雾干燥后，得到葛根分离蛋白成品。经凯氏定氮法测定制得蛋白成品中的蛋白质含量为71％。
实施例2葛根分离蛋白及其成品的制备
(1)将干净的葛根进破碎机加水破碎，制得葛根淀粉浆液；
(2)步骤(1)制得淀粉浆液经洗涤筛分得到粗淀粉，粗淀粉经旋分分离得到葛根粗蛋白溶液；
(3)用亚硫酸钠溶液调节葛根粗蛋白溶液pH至9，在45℃保持40分钟，将溶液离心分离得固相和上清液；
(4)将所得上清液用稀盐酸调pH至4.5后，沉淀，离心分离去上清液，保留沉积物；
(5)用pH为9.0的氢氧化钠溶液调节步骤(4)所得沉积物pH至7.0，制得葛根分离蛋白。
葛根分离蛋白在120℃经瞬时杀菌，喷雾干燥后，得到葛根分离蛋白成品。经凯氏定氮法测定制得蛋白成品中的蛋白质含量为72％。
实施例3葛根分离蛋白及其成品的制备
(1)将干净的葛根进破碎机加水破碎，制得葛根淀粉浆液；
(2)步骤(1)制得淀粉浆液经洗涤筛分得到粗淀粉，粗淀粉经旋分分离得到葛根粗蛋白溶液；
(3)用亚硫酸钠溶液调节葛根粗蛋白溶液pH至8，在40℃保持35分钟，将溶液离心分离得固相和上清液；
(4)将所得上清液用稀盐酸调pH至5.0后，沉淀，离心分离去上清液，保留沉积物；
(5)用pH为9.0的氢氧化钠溶液调节步骤(4)所得沉积物pH至6.8，制得葛根分离蛋白。
葛根分离蛋白在125℃经瞬时杀菌，喷雾干燥后，得到葛根分离蛋白成品。经凯氏定氮法测定制得蛋白成品中的蛋白质含量为74％。
实施例4葛根分离蛋白及其成品的制备
(1)将干净的葛根进破碎机加水破碎，制得葛根淀粉浆液；
(2)步骤(1)制得淀粉浆液经洗涤筛分得到粗淀粉，粗淀粉经旋分分离得到葛根粗蛋白溶液；
(3)用亚硫酸钠溶液调节葛根粗蛋白溶液pH至8.5，在35℃保持45分钟，将溶液离心分离得固相和上清液；
(4)将所得上清液用稀盐酸调pH至3.5后，沉淀，离心分离去上清液，保留沉积物；
(5)用pH为8.5的氢氧化钠溶液调节步骤(4)所得沉积物pH至7.1，制得葛根分离蛋白。
葛根分离蛋白在125℃经瞬时杀菌，喷雾干燥后，得到葛根分离蛋白成品。经凯氏定氮法测定制得蛋白成品中的蛋白质含量为75％。
实施例5葛根分离蛋白及其成品的制备
(1)将干净的葛根进破碎机加水破碎，制得葛根淀粉浆液；
(2)步骤(1)制得淀粉浆液经洗涤筛分得到粗淀粉，粗淀粉经旋分分离得到葛根粗蛋白溶液；
(3)用亚硫酸氢钠溶液调节葛根粗蛋白溶液pH至10，在30℃保持40分钟，将溶液离心分离得固相和上清液；
(4)将所得上清液用稀盐酸调pH至4.0后，沉淀，离心分离去上清液，保留沉积物；
(5)用pH为9.5的氢氧化钾溶液调节步骤(4)所得沉积物pH至7.0，制得葛根分离蛋白。
葛根分离蛋白在130℃经瞬时杀菌，喷雾干燥后，得到葛根分离蛋白成品。经凯氏定氮法测定制得蛋白成品中的蛋白质含量为71％。
实施例6葛根分离蛋白及其成品的制备
(1)将干净的葛根进破碎机加水破碎，制得葛根淀粉浆液；
(2)步骤(1)制得淀粉浆液经洗涤筛分得到粗淀粉，粗淀粉经旋分分离得到葛根粗蛋白溶液；
(3)用氢氧化钠溶液调节葛根粗蛋白溶液pH至9.5，在40℃保持35分钟，将溶液离心分离得固相和上清液；
(4)将所得上清液用稀盐酸调pH至4.5后，沉淀，离心分离去上清液，保留沉积物；
(5)用pH为9.0的氢氧化钠溶液调节步骤(4)所得沉积物pH至7.0，制得葛根分离蛋白。
葛根分离蛋白在130℃经瞬时杀菌，喷雾干燥后，得到葛根分离蛋白成品。经凯氏定氮法测定制得蛋白成品中的蛋白质含量为69％。
实施例7葛根分离蛋白及其成品的制备
(1)将干净的葛根进破碎机加水破碎，制得葛根淀粉浆液；
(2)步骤(1)制得淀粉浆液经洗涤筛分得到粗淀粉，粗淀粉经旋分分离得到葛根粗蛋白溶液；
(3)用氢氧化钠溶液调节葛根粗蛋白溶液pH至9.5，在50℃保持20分钟，将溶液离心分离得固相和上清液；
(4)将所得上清液用稀盐酸调pH至4.5后，沉淀，离心分离去上清液，保留沉积物；
(5)用pH为9.0的氢氧化钠溶液调节步骤(4)所得沉积物pH至7.0，制得葛根分离蛋白。
葛根分离蛋白在130℃经瞬时杀菌，喷雾干燥后，得到葛根分离蛋白成品。经凯氏定氮法测定制得蛋白成品中的蛋白质含量为70％。
实施例8葛根分离蛋白及其成品的制备
(1)将干净的葛根进破碎机加水破碎，制得葛根淀粉浆液；
(2)步骤(1)制得淀粉浆液经洗涤筛分得到粗淀粉，粗淀粉经旋分分离得到葛根粗蛋白溶液；
(3)用氢氧化钠溶液调节葛根粗蛋白溶液pH至9.5，在25℃保持60分钟，将溶液离心分离得固相和上清液；
(4)将所得上清液用稀盐酸调pH至4.5后，沉淀，离心分离去上清液，保留沉积物；
(5)用pH为9.0的氢氧化钾溶液调节步骤(4)所得沉积物pH至7.0，制得葛根分离蛋白。
葛根分离蛋白在130℃经瞬时杀菌，喷雾干燥后，得到葛根分离蛋白成品。经凯氏定氮法测定制得蛋白成品中的蛋白质含量为72％。
Claims (8)
1、一种从葛根中提取分离蛋白质的方法，其特征在于包括以下步骤：
(1)将干净的葛根进破碎机加水破碎，制得葛根淀粉浆液；
(2)步骤(1)制得淀粉浆液经洗涤筛分得到粗淀粉，粗淀粉经旋分分离得到葛根粗蛋白溶液；
(3)用碱性液调节葛根粗蛋白溶液pH至8～10，在25～50℃保持20～60分钟，将溶液分离得固相(I)和上清液(I)；
(4)将所得上清液用酸调pH至3.5～5.0后，沉淀，分离去上清液，保留沉积物；
(5)用pH为8.0～10.0的碱溶液调节步骤(4)所得沉积物pH至6.5～7.5，制得葛根分离蛋白。
2、根据权利要求1所述的从葛根中提取分离蛋白质的方法，其特征在于步骤(3)中所述的分离为离心分离。
3、根据权利要求1所述的从葛根中提取分离蛋白质的方法，其特征在于步骤(4)中所述的分离为离心分离。
4、根据权利要求1所述的从葛根中提取分离蛋白质的方法，其特征在于所述的步骤(3)中得到的固相(I)加入水或碱性液洗涤，经分离得固相(II)和上清液(II)，上清液(II)用于步骤(4)。
5、根据权利要求1～4之一所述的从葛根中提取分离蛋白质的方法，其特征在于所述的碱性液为下列之一的溶液：①亚硫酸钠，②亚硫酸氢钠，③氢氧化钠。
6、根据权利要求5所述的从葛根中提取分离蛋白质的方法，其特征在于所述步骤(5)中氢氧化钠溶液pH为9.0。
7、根据权利要求5所述的从葛根中提取分离蛋白质的方法，其特征在于所述的步骤(3)为：用碱性液调节葛根粗蛋白溶液pH至8～10，在30～50℃保持30～40分钟，将溶液分离得固相(I)和上清液(I)。
8、根据权利要求7所述的从葛根中提取分离蛋白质的方法，其特征在于步骤(5)中所述的碱溶液为氢氧化钠溶液。
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