CN1762391A - 一种牛初乳和香菇提取物组合物及其制备方法和用途 - Google Patents
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Abstract
本发明是一种具免疫调节作用的组合物及其制备工艺及其用途，属食品、保健食品和医药技术领域，具体为一种由牛初乳和香菇提取物组成的组合物及其制备方法和用途。本发明所提供的配方及其制剂可迅速提高小鼠免疫力，无毒副作用，具有起效快、作用持久、标本兼治等明显特点。适用于免疫力低下、体弱多病人群，可起到提高免疫力，防病治病的保健效果。本发明原料易得，制备工艺简单，具广阔的市场前景。
Description
技术领域
本发明属医药、食品、保健品等技术领域，具体涉及一种具调节免疫功能的组合物及其制备方法和用途。
技术背景
免疫功能既是人体健康的重要保障，也是人体健康状态的重要指标。免疫功能低下则会引发各种疾病，或使人体长期处于亚健康状态。年龄、性格、精神状态是决定人体免疫功能的重要内因；生活环境、气候变化、病害侵犯、过分劳累及精神压力等是影响人体免疫功能的重要外部因素。婴幼儿及老年人通常免疫功能低下；青壮年则多由于工作和精神压力过大而导致免疫功能低下。使用调节免疫功能的食物和药物，是提高机体免疫功能、防病治病、健康长寿的重要途径。近年来，各种名目的调节免疫保健食品及药品层出不穷。牛初乳及香菇提取物均为重要的免疫功能食品添加剂，分别以牛初乳和香菇提取物为组分配制的保健食品，已有许多产品问世。但迄今为止，未见由牛初乳和香菇提取物组成的复合保健食品的产品、专利及文献报道。
发明内容
本发明的目的在于提供由牛初乳和香菇提取物组成的组合物及其制备方法和用途。
本发明所述的牛初乳，是指健康奶牛产犊后一周内所分泌的乳汁，冻干后为乳白色或淡黄色粉末，有淡奶香味。牛初乳中含有多种免疫因子，其中主要是免疫球蛋白，可在肠道内直接抵抗致病菌，从而达到防病治病的保健目的。
本发明所述的香菇提取物，是侧耳科真菌类植物香菇(Lentinu edodes(Kerk.)Sing)子实体经水提醇沉工艺制备成的干燥粉末，含有丰富的多糖类成分，可全面提高人体的免疫功能，因此具有抗癌、抗衰老等多种防病治病功能。香菇提取物有市售产品。
牛初乳和香菇提取物都具有提高人体免疫力的保健功能，但其活性物质及其作用机制是不同的。牛初乳中的主要活性物质是免疫球蛋白，其作用机制主要是在肠道中直接杀灭致病菌，其作用是直接的、迅速的，对人体而言则是一种被动的、短效的获得性免疫力，因此只能达到治标的目的，并不能实质性地提高人体的免疫水平，停用后人体的免疫能力即迅速降低到原有水平甚至更低。香菇提取物中的主要活性物质是多糖类，其作用机制是促进人体免疫细胞的增殖，提高其活力，诱导各种免疫因子的产生，从而全面提高人体自身免疫能力，达到强身健体、防病治病的根本目的。因此其作用是主动的、间接的、持久的、治本的，但其起效是缓慢的。由牛初乳和香菇提取物组成的组合物复方，则能起到优势互补、效应综合、标本兼治的优异效果。
本发明所提供的由牛初乳和香菇提取物组成的组合物，是由牛初乳和香菇提取物两种原料组成，其配伍质量比为：牛初乳∶香菇提取物＝1∶9～9∶1；其中优选的配伍质量比例为4∶6-6∶4。
本发明还提供牛初乳和香菇提取物组成的组合物的制备工艺，具体步骤为：将牛初乳及香菇提取物干燥粉末混合，依据不同剂型的需要加入一定量的辅料，如娇味剂、稀释剂、润湿剂或粘合剂、崩解剂、润滑剂等，充分搅拌后铝塑灌装，或制成胶囊剂、压成片剂等，辐射灭菌，即得。
本发明提出由牛初乳和香菇提取物组成的组合物的用途。该组合物具有明显的提高人体免疫力功能，可制备成食品、功能性保健食品或医疗药品，用于预防和治疗各类人群、各种原因所导致的免疫力低下相关病症，并具有起效快，作用时间长、标本兼治等显著特点。以动物实验为例，已说明该配方及其制剂有明显的提高免疫力效果，因此在预防、辅助治疗免疫力低下各种相关病症上起着重要作用，有良好的应用前景。
具体实施方式
本发明对上述牛初乳和香菇提取物组成的组合物进行了动物实验，表明无毒、无副作用，可迅速提高小鼠的免疫功能。具体试验结果如下：
试验例1：小鼠急性经口毒性试验
1.试验目的：检测受试物短时间经口染毒时的毒性，作为毒性分级的依据。
2.材料与方法：
2.1受试物及配制：分别称取样品2150、4640、10000、21500mg，加双蒸水至20ml(最高剂量组加双蒸水至40ml)，备用
2.2试验动物：健康ICR小鼠40只，体重18-22g，中国药科大学实验动物中心提供，一级，合格证书：SCXK(苏)2002-0011号。实验动物环境设施合格证号：SYXK(苏)2002-0049号。饲料来源及证号：江浦振兴实验动物饲料厂，苏动(饲)字第95001号。
2.3试验方法：霍恩氏法。小鼠禁食过夜后，分雌雄按体重随机分入2150、4640、10000、和21500g/kg b.wt.各4个剂量组，每组5只。高剂量组样品分两次灌胃，中间间隔3h，其它组样品经口一次灌胃给予，每次灌胃容量均为20ml/kg b.wt。灌胃后4h给食，观察期14d。
3.试验结果：各剂量组小鼠灌胃后未见明显异常症状。观察期内无动物死亡。
香菇多糖初乳粉对小鼠经口毒性试验结果
| 剂量(mg/kg) | 死亡动物数/实验动物数雄 雌 | LD50值(mg/kg)雄 雌 | |
| 21504640100001500 | 0/50/50/50/5 | 0/50/50/50/5 | 均大于21500 |
4.结论：根据小鼠急性经口毒性分级标准，该样品属无毒性。
试验例2.小鼠睾丸初级精母细胞染色体畸变分析
1.试验目的：检测受试物对雄性小鼠睾丸初级精母细胞染色体有无诱变活性。
2.材料和方法：
2.1受试物及配制：样品配制方法同急性经口毒性试验，阳性对照物丝裂霉素C(MMC)2mg/支加生理盐水10ml使成0.2mg/ml浓度。
2.2试验动物：雄性健康ICR小鼠25只，体重25-30g，中国药科大学实验动物中心提供，一级，合格证书：SCXK(苏)2002-0011号。实验动物环境设施合格证号：SYXK(苏)2002-0049号。饲料来源及证号：江浦振兴实验动物饲料厂，苏动(饲)字第95001号。
2.3试验方法：小鼠按体重随机分入3个样品剂量组，1个溶剂对照物(双蒸水)和一个阳性对照物，每组5只。样品各剂量组和溶剂对照组动物连续灌胃5天，每天一次。阳性对照物丝裂霉素C(MMC)以10ml/kg的量一次腹腔注射。各组动物均于处死前6h腹腔注射秋水仙素4mg/kg，实验第12天杀鼠取睾丸，拉开精曲细管，低渗，固定，软化，制片，染色，镜检。按二项分布进行统计处理和推断。
3.试验结果：各样品剂量组小鼠具染色体畸变的初级精母细胞率与溶剂对照值之间均无统计学差异，也无剂量-反应关系。阳性对照值与溶剂对照值之间有极显著差异。见下表。
4.结论：在受试剂量下，未检测出该样品对雄性小鼠睾丸初级精母细胞染色体的诱变活性。
香菇多糖初乳粉对小鼠睾丸初级精母细胞染色体畸变试验结果(
x±s)
| 组别 | 剂量(mg/kg) | 动物数(只) | 观察细胞数(个) | 性染色体早熟分离(个，％) | 常染色体早熟分离(个，％) | 细胞畸变(个，％) | p值 |
| 对照样品MMC | 20ml/kg1250250050002mg/kg | 55555 | 500500500500500 | 15 3.0±0.713 2.6±0.914 2.8±0.815 3.0±0.762**12.4±1.9 | 11 2.2±0.411 2.2±0.812 2.4±0.610 2.0±0.775**15.0±3.2 | 1 0.2±0.40 00 01 0.2±0.4115 23.0±6.3 | ＞0.05＞0.05＞0.05＜0.01 |
**与溶剂对照值相比，p＜0.01
试验例3.二硝基氟苯诱导小鼠迟发性变态反应(DTH)
1.实验动物：18-22g健康雄性ICR种小鼠40只，清洁级，由南京医科大学实验动物中心提供，动物证号：SCXK(苏)2002-0031；环境证号：SYXK(苏)2002-004；动物饲料来源及证号：江浦振兴实验动物饲料厂，苏动(饲)字第95001号。
2.实验方法：将小鼠按体重随机分入1667、834和417mg/kg b.wt.3个剂量组和1个对照组，每组10只。样品用双蒸水配制，每日经口灌胃容积为20ml/kg b.wt.对照组灌双蒸水。25d后，小鼠腹部去毛，1％二硝基氟苯(DNFB)丙酮麻油溶液50ul涂抹致敏。致敏后5d，小鼠右耳均匀涂抹1％DNFB丙酮麻油溶液10ul进行攻击，左耳涂抹丙酮麻油溶液作对照，攻击后24h处死小鼠，剪下左右耳壳，于同一部位取直径8mm的耳片称重，左右耳片重量之差作为肿胀度。同时取小鼠的胸腺及脾脏，以每10g小鼠的脾重(mg)作为脾脏/体重比值和胸腺/体重比值。
3.实验结果：见表1、表2和表3。由表1，表2可见，实验后各受试物剂量组小鼠增重与对照组相比无显著性差异；各组小鼠胸腺/体比值、脾/体比值与对照组相比亦无显著性差异(P＞0.05)；由表3可见，各剂量组小鼠的耳廓肿胀度均高于阴性对照组值，且随剂量增加而增加，经方差分析及两两比较统计学处理，高、中、低剂量组均由统计学差异(p＜0.01)。提示各剂量好尔牌复合初乳宝均壳增强DNFB引起的小鼠迟发性超敏反应。
表1.香菇多糖初乳粉对小鼠试验前后体重(g)的影响
| 组别 | 每日摄入剂量(mg/kg/d) | 动物数(只) | 体重 | 增重 | |
| 试验前 | 试验后 | ||||
| 对照组样品 | 04178341667 | 10101010 | 18.3±1.618.7±1.618.8±1.718.3±1.5 | 26.3±0.927.4±2.127.2±2.526.5±1.6 | 8.0±0.78.7±0.78.4±0.88.2±0.7 |
表2.香菇多糖初乳粉对小鼠脏器(mg)/体重(10g)比值的影响
| 组别 | 每日摄入剂量(mg/kg/d) | 动物数(只) | 脾脏/体重比值(x±s) | 增重(x±s) |
| 对照组样品 | 04178341667 | 10101010 | 41.08±7.1340.23±8.9939.71±9.542.86±10.28 | 35.24±8.6037.92±11.5633.90±5.4035.44±15.68 |
表3.香菇多糖初乳粉对小鼠耳廓迟发性超敏反应的影响
| 组别 | 每日摄入剂量(mg/kg/d) | 动物数(只) | 肿胀度(mg)(x±s) |
| 对照组样品 | 04178341667 | 10101010 | 13.67±2.1816.89±1.08**17.15±1.36**18.57±1.91** |
**与对照组相比p＜0.01
试验例4.血清溶血素测定
1.实验方法：半数溶血值(HC50)测定法。动物分组，剂量和处理同DTH试验。连续灌胃25d后每鼠腹腔注射2％(v/v)压积SRBC 0.2ml致敏。免疫5d后，小鼠摘眼球采血，取血清测溶血反应，另设不加血清(以SA缓冲液代替)的对照管为比色空白，于540nm分别测定各管光密度值。按下式计算各鼠的样品HC50：
2.实验结果：见表4。各剂量组小鼠的血清半数血值(HC50)均高于阴性对照组值，且随剂量增加而增加，经方差分析及两两比较统计学处理，高剂量组有统计学差异(p＜0.05)。表明高剂量好尔牌复合初乳宝具有增强小鼠血清溶血素反应的作用。
香菇多糖初乳粉对血清溶血素水平的影响
| 组别 | 每日摄入剂量(mg/kg/d) | 动物数(只) | 半数溶血值(HC50)(x±s) |
| 对照组样品 | 04178341667 | 10101010 | 129.62±7.81137.74±15.74141.49±10.74144.25±3.19* |
**与对照组相比p＜0.01
试验例5小鼠碳廓清试验
1.实验方法：动物分组，剂量和处理同DTH试验。连续灌胃30d后小鼠每10g体重尾静脉注射1∶3(v/v)稀释的印度墨汁0.1ml，注入后立即计时，并分别于2、10min从内眦静脉丛取血0.025ml，加到2ml0.1％碳酸钠中，测定OD600nm。并取肝、脾称重，按公式a＝3√K×体重/(肝重×脾重)求小鼠吞噬指数a值(K＝(lgOD1-lgOD2)/(t2-t1))。
2.实验结果：见表5。各剂量组小鼠的吞噬指数a均高于阴性对照组，经方差分析及两两比较统计学处理，中剂量组有统计学差异(P＜0.05)。表明中剂量好尔牌复合初乳宝具有增强小鼠单核-巨噬细胞吞噬功能的作用。
香菇多糖初乳粉对小鼠碳廓清的影响(x±s)
| 组别 | 每日摄入剂量(mg/kg/d) | 动物数(只) | K值 | 吞噬指数a |
| 对照组样品 | 04178341667 | 10101010 | 0.0339±0.0070.0437±0.0090.0482±0.0080.0378±0.008 | 6.800±0.297.230±0.417.594±0.73*6.895±0.60 |
*与对照组相比p＜0.05
实施例1香菇多糖初乳胶囊的制备及其应用
处方组成：牛初乳冻干粉90g；香菇提取物10g。
制法：以上1味，充分搅拌混匀后，装填0号胶囊，规格0.5g/粒，幅照灭菌，剂量5Kgy，即得。
保健功能：免疫调节。
适宜人群：免疫力低下、体弱多病者。
实施例2香菇多糖初乳粉的制备及其应用
处方组成：牛初乳冻干粉30g；香菇提取物20g；低聚异麦芽糖50g。
制法：以上3味，充分搅拌混匀后，铝塑灌装，规格5g/袋，幅照灭菌，剂量5Kgy，即得。
保健功能：免疫调节。
适宜人群：免疫力低下、体弱多病者。
用法及用量：每日1-2次，每次5g，中老年、免疫功能明显低下者加倍。40℃以下温水冲服或调入牛奶中服用。
实施例3香菇多糖初乳片的制备及其应用
处方组成：牛初乳冻干粉25g；香菇提取物25g；粘合剂、润滑剂、崩解剂等辅料共50g。
制法：以上2味及各种辅料，充分搅拌混匀后，以50％含水乙醇适当润湿，压片，规格0.5g/片，幅照灭菌，剂量5Kgy，即得。
保健功能：免疫调节。
适宜人群：免疫力低下、体弱多病者。
用法及用量：每日1-2次，每次5g，中老年、免疫功能明显低下者加倍。40℃以下温水冲服或调入牛奶中服用。
Claims (3)
1、一种由牛初乳和香菇提取物组成的组合物，其特征在于牛初乳和香菇提取物的配伍质量比为1∶9至9∶1之间。
2、一种如权利要求1所述的由牛初乳和香菇提取物组成的组合物的制备工艺，其特征在于：将牛初乳和香菇提取物的粉末混合，加入必要的辅料，充分搅拌混匀后铝塑灌装，或制成胶囊剂、压成片剂，辐射灭菌，即得。
3、如权利要求1所述牛初乳和香菇提取物组成的组合物在预防和辅助治疗与免疫力低下相关的病症的药物或保健食品中的应用。
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