CN1741809A - 靶向肿瘤和内皮细胞的肽,其组合物和用途 - Google Patents

Abstract

本发明一般地涉及靶向肿瘤和内皮细胞并具有抗肿瘤、抗血管生成和抗转移活性的Ac－PHSCN－NH2的肽类似物，制造这些肽的方法，其组合物和利用这些肽和其药物组合物来治疗、预防和检测以肿瘤生长、转移和血管生成为特征的疾病的方法。该肽类似物可充当，特别地，放射活性的载体、PET活性化合物、毒素、荧光分子和PEG分子。

Description

靶向肿瘤和内皮细胞的肽，其组合物和用途

1.发明领域

本发明一般地涉及靶向肿瘤和内皮细胞并具有抗肿瘤、抗血管生成和抗转移活性的Ac-PHSCN-NH₂的肽类似物，制造这些肽的方法，其组合物和利用这些肽和其药物组合物来治疗、预防和检测以肿瘤生长、转移和血管生成为特征的疾病的方法。该肽类似物可充当，特别地，放射活性(radioactivity)的载体、PET活性化合物(PET-active compound)、毒素、荧光分子和PEG分子。

2.发明背景

整联蛋白是与细胞粘附、运动性和生存有关的二聚的跨膜蛋白(Geiger等，Nat.Rev.Mol.Cell Biol 2001，2(11)：793-805)。整联蛋白配体包含细胞外基质(ECM)和基底膜并包括胶原蛋白、层粘连蛋白、纤连蛋白、玻连蛋白和纤维蛋白原(Bokel，Dev.Cell 2002，3(3)：311-21；Stupack等，J Cell Sci 2002，115：3729-38；Bornstein等，Curr Opin Cell Biol 2002，14(5)：608-16)。在肿瘤组织中，整联蛋白的表达、更重要的是整联蛋白活化状态发生了改变(Liu等，Semin Oncol 2002，29(3Suppl 11)：96-103；Hood等，Nat.Rev.Cancer 20022(2)：91-100；Felding-Habermaim，Clin Exp Metastasis，2003，20(3)：203-13)。因此，几个整联蛋白，包括α_vβ₃、α_vβ₅、和α₅β₁，已经公认为是用于癌症的治疗和预防的有效治疗靶点(Kumar，Curr Drug Targets 2003，4(2)：123-31；Kerr等，Expert Opin Investig Drugs 2002，11(12)：1765-74；Rust等，J BiomedBiotechnol.2002，2(3)：124-130；Damiano，Curr Cancer Drug Targets 2002，2(1)：37-43；Tucker，Curr Opin Pharmacol 2002，2(4)：394-402)和靶向受体的肿瘤学成像方法(Herschman，Science 2003，302(5645)：605-8)；Aboagye等，Invest New Drugs 2003，21(2)：169-81；Van De Wiele等，Eur J Nucl MedMol Imaging 2002(5)：699-709；Glaser等，Int J Oncol 2003，22(2)：253-67)。

整联蛋白α₅β₁在静止的内皮细胞中通常不表达，但是在血管生成时被上调(Kim等，Am J Pathol 2000，156(4)：1345-62)。α₅β₁是纤连蛋白的受体，是一个也可能与细胞外基质有关的丰富的血浆蛋白质Labat-Robert，SeminCancer Biol 2002，12(3)：187-95)。通过几个表位和由10^th型III重复中的RGD序列介导的主要粘附相互作用(major adhesive interaction)，纤连蛋白与α₅β₁整联蛋白相互作用。主要粘附相互作用介导细胞信号事件，并能通过位于称为协同区(synergy region)的第九型III重复(即，PHSRN)上的第二表位被加强(Akiyama等，Cancer Metastasis Rev 1995，14(3)：173-89)。α₅β₁的拮抗物能抑制肿瘤血管生成和促使肿瘤衰退，这表明了靶向整联蛋白α₅β₁的治疗潜力(Kim等，见上)。整联蛋白α₅β₁还显示出在肿瘤细胞生存和转移方面的重要性(O′Brien等，Exp Cell Res 1996，224(1)：208-13；Ruoslahti，InvasionMetastasis1994-95：14(1-6)：87-9724-26)；Kemperman等，Invasion Metastasis1994-95，14(1-6)：98-108；Tani等，Br J Cancer 2003，88(2)：327-33)。

整联蛋白α_vβ₃也是抑制肿瘤血管生成的靶点，因为α_vβ₃的抑制剂(例如，单克隆抗体、环状RGD肽和小的非肽类有机化合物)在许多癌症进展的先期临床模型中是有效的(Kumar，Curr Drug Targets 2003，4(2)：123-31；Varner等，Important Adv Oncol 1996，69-87；Brooks，J Clin Invest 1995，96(4)：1815-22)。尽管α_vβ₃在上皮细胞上通常不表达，它在肿瘤细胞上被上调，导致肿瘤细胞粘附、转移和侵入(Metzner等，J Invest Dermatol 1996，107(4)：597-602)。已经表明α_vβ₃整联蛋白与黑素瘤进展和转移有牵连(Nip等，CancerMetastasis Rev 1995，14(3)：241-52)，在各种肿瘤细胞类型包括乳房、前列腺、胰腺、肾和神经胶质瘤中，α_vβ₃表达已经被文献记载(Felding-Habermann等，Proc Natl Acad Sci USA 2001，98(4)：1853-8；Platten等，Biochem BiophysRes Commun 2000，268(2)：607-11；Lohr等，Pancreas 1996，12(3)：248-59；Rabb等，Am J Nephrol 1996，16(5)：402-8；Cooper等，Neoplasia 2002，4(3)：191-4)。进一步的，α_vβ₃的表达已与向骨转移联系起来(Pecheur等，FASEBJ 2002，16(10)：1266-8.)。

Ac-PHSCN-NH₂衍生自纤连蛋白的协同序列(synergy sequence)，已经被指出靶向细胞表面的活化的α₅β₁和α_vβ₃整联蛋白(Livant，美国专利No.6,001,965；Livant，美国专利No.6,472,369；Livant等，Cancer Res 2000，60(2)：309-20)。进一步的，Ac-PHSCN-NH₂在鼠模型中完全的抑制DU145侵入和MatLyLu细胞的转移(Livant等，见上)，与5-FU输注结合改善了CT26结肠癌模型中的生存(Stoeltzing等，Int J Cancer 2003，104(4)：496-503)。因此，Ac-PHSCN-NH₂靶向肿瘤和滋养肿瘤细胞的血管，如Ac-PHSCN-NH₂衍生物的显像所示。

因而，需要Ac-PHSCN-NH₂的新型肽类似物来充分地探索Ac-PHSCN-NH₂衍生物靶向肿瘤和滋养肿瘤细胞的脉管系统的潜力。理想地，肽类似物将充当，特别地，用于成像和放射治疗的放射活性的载体、用于PET成像的PET活性化合物、用于细胞毒素的靶向传递的毒素、用于显像的荧光分子和用于改进药物代谢动力学参数的PEG分子。

3.发明概述

本发明通过提供靶向肿瘤和内皮细胞并具有抗肿瘤、抗血管生成和抗转移活性的Ac-PHSCN-NH₂的肽类似物来满足这些及其它需求，提供制造这些肽的方法、其组合物和利用这些肽和其药物组合物来治疗、预防和检测以肿瘤生长、转移和血管生成为特征的疾病的方法。该肽类似物可充当，特别地，放射活性的载体、PET活性化合物、毒素、荧光分子和PEG分子。

在一个方面本发明提供式(I)的化合物：

或其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物或N-氧化物，其中：

j和k独立地是0或1；

p和q独立地是在0和100之间且包括0和100的整数；

r和s独立地是0或1；

R¹是酰基、取代的酰基、酰基螯合物、烃基(alkyl)、取代的烃基、环烃基、取代的环烃基、亚氨基或取代的亚氨基；

R²是C₁-C₆烃基，其有至少一个氢原子被取代基替代，所述取代基选自-NR⁶R⁷、-OR⁸、-CO₂R⁹、-S(O)_zR¹⁰、-P(OR¹¹)OR¹²、芳基和取代的芳基；

R⁶、R⁷、R⁸、R⁹、R¹⁰、R¹¹和R¹²独立地选自氢、酰基、取代的酰基、酰基螯合物、烃基、取代的烃基、环烃基基、取代的环烃基、亚氨基和取代的亚氨基；

X₁是-NH(C＝C)_gCO-、-NH(CH₂)_hCO-或-NHCH(CH₃)CO-；

g和h独立地是1、2、3、4、5或6

X₂是

或

X₃是

X₄是

或

1是1到4的整数；

X₅是

或

R¹³是氢、烃基、取代的烃基、酰基、取代的酰基、芳烷基、取代的芳烷基、芳基、取代的芳基或-S(O)_xR¹⁴；

n是1到5的整数；

R¹⁴是烃基、取代的烃基基、酰基、取代的酰基、芳烃基(arylalkyl)、取代的芳烃基、芳基或取代的芳基；

y和x独立地是0、1或2；

X₆是

m是1、2、3或4中的整数；

X₇是-NH(C＝C)_dCO-、-NH(CH₂)_eCO-或-NHCH(CH₃)CO-；

d和e独立地是1、2、3、4、5或6；

R³是C₁-C₆烃基，其有至少一个氢原子被取代基取代，所述取代基选自-NR¹⁵R¹⁶、-OR¹⁷、-CO₂R¹⁸、-S(O)_nR¹⁹、-P(OR²⁰)OR²¹、芳基和取代的芳基；

R⁴和R⁵独立地是氢、烃基、或取代的烃基；和

R¹⁵、R¹⁶、R¹⁷、R¹⁸、R¹⁹、R²⁰和R²¹独立地选自氢、酰基、取代的酰基、酰基螯合物、烃基、取代的烃基、环烃基、取代的环烃基、亚氨基和取代的亚氨基；

附带条件为当R⁴和R⁵是氢以及r和s是0时R¹不是乙酰基。在第二个方面，本发明提供本发明的化合物的药物组合物。该药物组合物通常包含一个或多个本发明的化合物或其药学上可接受的盐、水合物(hydrate)或溶剂化物(solvate)和药学上可接受的稀释剂、载体、赋形剂和佐剂。稀释剂、载体、赋形剂和佐剂的选择取决于，同其它因素一起，期望的施用方式。

在第三个方面，本发明提供治疗或预防疾病或失调例如癌症的方法。该方法通常包括向需要这种治疗或预防的病人施用治疗有效量的本发明的化合物和/或其药物组合物。

在第四个方面，本发明提供用于检测疾病或失调例如癌症的方法。该方法通常包括向需要这种治疗或预防的病人施用诊断有效量的本发明的化合物和/或其药物组合物。

4.发明的详细说明

4.1定义

“本发明的化合物”指由在此公开的结构式(I)、(II)、(III)、(IV)和(V)所包含的化合物，并包括处于在此公开的通式中的任何特定的化合物。本发明的化合物可通过它们的化学结构和/或化学名称来鉴别。当化学结构与化学名称冲突时，化学结构对该化合物的身份是有决定作用的。本发明的化合物可包含一个或多个手性中心和/或双键，因此可作为立体异构体存在，例如双键异构体(即，几何异构体)、对映体或非对映体。因此，此处描绘的化学结构包含所说明的化合物的全部可能的对映异构体和立体异构体，包括立体异构体纯的形式(例如，几何纯、对应异构纯或非对应异构纯)，和对应异构体和立体异构体混合物。本发明的化合物也可存在于几个互变异构形式中。因此，此处描绘的化学结构包含所说明的化合物的全部可能的互变异构形式。本发明的化合物还包括同位素标记的化合物，其中一个或多个原子具有与通常在自然中发现的原子质量不同的原子质量。可归入到本发明的化合物中的同位素的实例包括但不限于，²H、³H、¹³C、¹⁴C、¹⁵N、¹⁷O、¹⁸O等等。本发明的化合物可以非溶剂化形式以及溶剂化形式存在，包括水合形式和N-氧化物形式。通常，水合的、溶剂化的和N-氧化物形式在本发明的范围之内。本发明的某些化合物可以多晶或非晶形式存在。通常，对于本发明预期的用途所有物质形式都是等同的，并试图被涵盖在本发明的范围之内。进一步地，应当理解的是，在说明本发明的化合物的部分结构时，那些括号表明该部分结构对分子其余部分的连接点。

“烃基 (alkyl)”本身或作为另一个取代基的一部分是指支化的、直链的或环状的一价饱和或不饱和烃基，其是通过从母体烷烃、烯烃或炔烃的单个碳原子上移除一个氢原子衍生的。典型的烷基基团包括但不限于，甲基；乙基，例如乙烷基、乙烯基、乙炔基；丙基，例如丙-1-基、丙-2-基、环丙-1-基、丙-1-烯-1-基、丙-1-烯-2-基、丙-2-烯-1-基(烯丙基)、环丙-1-烯-1-基；环丙-2-烯-1-基、丙-1-炔-1-基、丙-2-炔-1-基等；丁基，例如丁-1-基、丁-2-基、2-甲基-丙-1-基、2-甲基-丙-2-基、环丁-1-基、丁-1-烯-1-基、丁-1-烯-2-基、2-甲基-丙-1-烯-1-基、丁-2-烯-1-基、丁-2-烯-2-基、丁-1，3-二烯-1-基、丁-1，3-二烯-2-基、环丁-1-烯-1-基、环丁-1-烯-3-基、环丁-1，3-二烯-1-基、丁-1-炔-1-基、丁-1-炔-3-基、丁-3-炔-1-基等；诸如此类。

术语“烃基”特别地试图包括具有任何程度或水平的饱和度的基团，即，具有仅仅是碳-碳单键的基团、具有一个或多个碳-碳双键的基团、具有一个或多个碳-碳叁键的基团，和具有碳-碳单、双和叁键的混合的基团。当意指特定水平的饱和度时，使用“烷基”“烯基”和“炔基”的表述。优选地，烃基基团包含从1到20个碳原子，更优选地，从1到10个碳原子。例如，(C₁-C₆)烃基是指包含从1到6个碳原子的烃基基团。

“ 烷基(alkanyl)”本身或作为另一个取代基的一部分是指支化的、直链的或环状的饱和烷基，其是通过从母体烷烃的单个碳原子上移除一个氢原子衍生的。典型的烷基基团包括但不限于，甲基；乙基；丙基，例如丙-1-基、丙-2-基(异丙基)、环丙-1-基等；丁烷基，例如丁-1-基、丁-2-基(仲-丁基)、2-甲基-丙-1-基(异丁基)、2-甲基-丙-2-基(叔-丁基)、环丁-1-基等；诸如此类。

“ 烯基”本身或作为另一个取代基的一部分是指支化的、直链的或环状的不饱和烃基，其是具有至少一个碳-碳双键，通过从母体烯烃的单个碳原子上移除一个氢原子衍生的。关于双键，该基团可以是顺式和反式构型。典型的烯基基团包括但不限于，乙烯基；丙烯基，例如丙-1-烯-1-基、丙-1-烯-2-基、丙-2-烯-1基(烯丙基)、丙-2-烯-2-基、环丙-1-烯-1-基；环丙-2-烯-1-基；丁烯基，例如丁-1-烯-1基、丁-1-烯-2基、2-甲基-丙-1-烯-1-基、丁-2-烯-1-基、丁-2-烯-1-基、丁-2-烯-2-基、丁-1，3-二烯-1-基、丁-1，3-二烯-2-基、环丁-1-烯-1-基、环丁-1-烯-3-基、环丁-1，3-二烯-1-基，等；诸如此类。

“ 炔基”本身或作为另一个取代基的一部分是指支化的、直链的或环状的不饱和烃基，其具有至少一个碳-碳叁键，是通过从母体炔烃的单个碳原子上移除一个氢原子衍生的。典型的炔基基团包括但不限于，乙炔基；丙炔基，例如丙-1-炔-1-基、丙-2-炔-1基，等；丁炔基，例如丁-1-炔-1-基、丁-1-炔-3-基、丁-3-炔-1-基，等；诸如此类。

“ 酰基”本身或作为另一个取代基的一部分是指基团-C(O)R³⁰，其中R³⁰是如此处定义的氢、烷基、环烷基、环异烷基、芳基、芳烷基、异烷基、异芳烷基。典型的实例包括但不限于，甲酸基、乙酰基、环己基羰基、环己基甲基羰基、苯甲酰、苯甲基羰基等。

“ 酰基螯合物”本身或作为另一个取代基的部分是指基团-C(O)R³¹，其中R³¹是如此处定义的、被与合适的金属结合的螯合基团取代的烃基、环烃基、芳基。典型的实例包括-C(O)CH₂CH3-R³²，其中R³²是螯合基团例如，DOTA、TETA、多氨基羧化物(例如，NODAGA、EDTA、tricine、-C(O)CH₂-DTPA等)。

且其中螯合基团与金属例如发射正电子的标记物(例如，¹⁸F、⁴⁵Ti、⁴⁴Sc、⁵⁵Co、⁶¹Cu、⁶⁴Cu、⁶⁶Ga、⁶⁸Ga、⁶⁵Br、⁷⁶Br、⁸⁶Y、¹¹⁰In、¹²⁴I、⁸⁹Zr、⁹⁹Tc)、放射性核(例如，¹³⁷Cs、6⁰Co、¹³¹I、¹²³I、¹⁹²Ir、⁹⁰Y、⁶⁷Ga、⁹⁹Tc、¹²³I、¹²⁵I、¹³¹I、¹¹¹In、⁹⁷Ru、⁶⁷Cu、⁶⁸Ga、⁷²As、⁸⁹Zr、⁹⁰Y、²⁰¹Tl，等等)或镧系金属键合。

“ 烷氧基”本身或作为另一个取代基的一部分是指基团-OR³³，其中R³³表示如此处定义的烷基或环烷基。典型的实例包括但不限于，甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基、环己氧基等。

“ 芳基”本身或作为另一个取代基的部分是指一价的芳香烃基团，是通过从母体芳环体系的单个碳原子上移除一个氢原子衍生的。典型的芳基基团包括但不限于，衍生自aceanthrylene、苊烯、acephenanthrylene、并三苯、甘菊环烃、苯、屈(chrysene)、六苯并苯、荧蒽、芴、并六苯、萘并四并苯、hexalene、as-indacene、s-indacene、二氢化茚、茚、萘、octacene、octaphene、octalene、间二蒽嵌四并苯、并五-2，4-二烯、并五苯、并环戊二烯、戊芬、二萘嵌苯、phenalene、菲、二萘品并苯、pleiadene、嵌二萘、皮蒽、rubicene、苯并菲、三萘等的基团。优选的，芳基基团包含从6到20个碳原子，更优选的，从6到12个碳原子。

“ 芳烷基”本身或作为另一个取代基的一部分是指非环状烃基，其中与碳原子(一般是末端碳原子或sp³碳原子)键合的其中一个氢原子被芳基基团取代。典型的芳烃基基团包括但不限于，苯甲基、2-苯乙-1-基、2-苯乙烯-1-基、萘甲基、2-萘乙-1-基、2-萘乙烯-1-基、萘苯甲基、2-萘苯乙-1-基等。当意指特定的烃基部分时，使用命名的芳烷基、芳烯基和/或芳炔基。优选地，芳烃基基团是(C₆-C₃₀)芳烃基，例如芳烷基基团的烷基、烯基或炔基部分是(C₁-C₁₀)和芳基部分是(C₆-C₂₀)，更优选的，芳烃基基团是(C₆-C₂₀)芳烃基，例如芳烃基基团的烷基、烯基或炔基部分是(C₁-C₈)和芳基部分是(C₆-C₁₂)。

“ 环烃基”本身或作为另一个取代基的一部分是指饱和的或不饱和环状烃基。当意指特定水平的饱和度时，使用命名的“环烷基”或“环烯基”。典型的环烃基基团包括但不限于，衍生自环丙烷、环丁烷、环戊烷、环己烷等的基团。优选地，环烃基基团是(C₃-C₁₀)环烃基，更优选地是(C₃-C₇)环烃基。

“ 环杂烃基(cycloheteroalkyl)”本身或作为另一个取代基的一部分是指饱和的或不饱和的环状烃基，其中一个或多个碳原子(和任何相关联的氢原子)独立地被相同的或不同的杂原子所取代。取代替换碳原子的典型的杂原子包括但不限于，N、P、O、S、Si等。当意指特定水平的饱和度时，使用命名的“环异烷基(cycloheteroalkanyl)”或“环异烯基(cycloheteroalkenyl)”。典型的环杂烃基基团包括但不限于，衍生自环氧化物、azirines、硫杂丙环、咪唑烯、对氧氮己环、哌嗪、哌啶、吡唑烷、吡咯烷、奎宁环等的基团。

“ 诊断有效量”是指当施用给病人用于疾病的检测时，足够检测该疾病的化合物的量。“诊断有效量”将根据化合物、疾病和其严重性，以及将被治疗的病人的年龄、体重等变化。

“ 杂烃基、杂烷基、杂烯基和杂炔基”本身或作为另一个取代基的一部分分别是指烃基、烷基、烯基和炔基基团，其中一个或多个碳原子(和任何关联的氢原子)独立地被相同的或不同的杂原子基团所取代。可以被归入这些基团的典型的杂原子基团包括但不限于，-O-、-S-、-O-O-、-S-S-、-O-S-、-NR³⁴R³⁵、-＝N-N＝-、-N＝N-、-N＝N-NR³⁶R³⁷、-PR³⁸-、-P(O)₂-、-POR³⁹-、-O-P(O)₂-、-SO-、-SO₂-、-SnR⁴⁰R⁴¹-等，其中R³⁴、R³⁵、R³⁶、R³⁶、R³⁸、R³⁹、R⁴⁰和R⁴¹独立地是氢、烃基、取代的烃基、芳基、取代的芳基、芳烃基、取代的芳烃基、环烃基、取代的环烃基、环杂烃基、取代的环杂烃基、杂烃基、取代的杂烃基、杂芳基、取代的杂芳基、杂芳烃基或取代的杂芳烃基。

“ 杂芳基”本身或作为另一个取代基的一部分是指一价的杂芳族基团，其是通过从母体芳杂环体系的单个原子上移除一个氢原子衍生的。典型的杂芳基基团包括但不限于，衍生自吖啶、砷杂茚、咔唑、β-咔啉、色原烷、色原烯、肉啉、呋喃、咪唑、吲唑、吲哚、二氢吲哚、吲哚嗪、异构苯并呋喃、异色烯、异吲哚、异异二氢吲哚、异喹啉、异噻唑、异恶唑、萘啶、恶二唑、恶唑、泊啶、菲啶、邻二氮杂菲、吩嗪、酞嗪、蝶啶、嘌呤、吡喃、吡嗪、吡唑、哒嗪、吡啶、嘧啶、吡咯、吡咯嗪、喹唑啉、喹啉、喹嗪、喹喔啉、四唑、噻重氮、噻唑、噻吩、三唑、氧杂蒽等的基团。优选地，杂芳基基团是含有5-20个原子(membered)的杂芳基，更优选地是含有5-10个原子的杂芳基。优选的杂芳基基团是那些衍生自噻吩、吡咯、苯并噻吩、苯并呋喃、吲哚、吡啶、喹啉、咪唑、恶唑和吡嗪的基团。

“ 杂芳烃基”本身或作为另一个取代基的一部分是指非环状烃基，其中与碳原子(一般是末端碳原子或sp³碳原子)键合的其中一个氢原子被杂芳基基团取代。当意指特定的烷基部分时，使用命名的杂芳烷基、杂芳烯基和/或杂芳炔基。在一个优选方案中，杂芳烃基基团是含有6-30个原子的杂芳烃基，例如杂芳烃基的烷基、烯基、或炔基部分是含有1-10个原子的和杂芳基部分是含有5-20个原子杂芳基，更优选的，是含有6-20个原子的杂芳烃基，例如，杂芳烃基的烷基、烯基或炔基部分是含有1-8个原子的和杂芳基部分是含有5-12个原子的杂芳基。

“ 亚氨基”本身或作为另一个取代基的一部分是指基团-C＝NR⁴²，其中R⁴²是如此处定义的氢、烃基、环烃基、环杂烃基、芳基、芳烃基、杂烃基、杂芳基、杂芳烃基。

“ 母体芳环体系”指不饱和的、具有共轭的π电子体系的的环状或多核环体系。特别地包括在“母体芳环体系”内的是稠环体系，其中一个或多个环是芳族的和一个或多个环是饱和的或不饱和的，例如芴、二氢化茚、茚、phenalene等。典型的母体芳环体系包括但不限于，醋蒽烯、苊烯、acephenanthrylene、并三苯、甘菊环烃、苯、屈(chrysene)、六苯并苯、荧蒽、芴、并六苯、萘并四并苯、hexalene、as-indacene、s-indacene、二氢化茚、茚、萘、octacene、octaphene、octalene、间二蒽嵌四并苯、并五-2，4-二烯、并五苯、并环戊二烯、戊芬、二萘嵌苯、phenalene、菲、二萘品并苯、pleiadene、嵌二萘、皮蒽、rubicene、苯并菲、三萘等。

“ 母体芳杂环体系统”是指其中一个或多个碳原子(和任何相关联的氢原子)独立地被相同或不同杂原子所取代的母体芳环系统。取代碳原子的典型的杂原子包括但不限于，N、P、O、S、Si等。特别地包括在“母体芳杂环体系”的定义内的是稠环体系，其中一个或多个环是芳族的和一个或多个环是饱和的或不饱和的，例如砷杂茚、苯并二烷、苯并呋喃、色原烷、色原烯、吲哚、二氢吲哚、氧杂蒽等。典型的母体芳杂环体系包括但不限于，砷杂茚、咔唑、β-咔啉、色原烷、色原烯、肉啉、呋喃、咪唑、吲唑、吲哚、二氢吲哚、中氮茚、苯并呋喃、异色烯、异吲哚、异异二氢吲哚、异喹啉、异噻唑、异恶唑、萘啶、恶二唑、恶唑、泊啶、菲啶、邻二氮杂菲、吩嗪、酞嗪、蝶啶、嘌呤、吡喃、吡嗪、吡唑、哒嗪、吡啶、嘧啶、吡咯、吡咯嗪、喹唑啉、喹啉、喹嗪、喹喔啉、四唑、噻重氮、噻唑、噻吩、三唑、氧杂蒽等。

“ 病人”包括人。术语“人”和“病人”在此可交换地使用。

“ 药学上可接受的盐”指本发明的化合物的盐，其是药学上可接受的并具有期望的母体化合物的药理学活性。这种盐包括：(1)酸加成盐，与无机酸例如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等形成的盐；或与有机酸例如乙酸、丙酸、己酸、环戊烷丙酸、乙二醇酸、丙酮酸、乳酸、丙二酸、琥珀酸、苹果酸、顺丁烯二酸、反丁烯二酸、酒石酸、柠檬酸、苯甲酸、3-(4-羟基苯甲酰)苯甲酸、苯丙烯酸、苯乙醇酸、甲磺酸、乙磺酸、1，2-乙烷-二磺酸、2-羟基乙磺酸、苯磺酸、4-氯苯磺酸、2-萘磺酸、4-甲苯磺酸、樟脑磺酸、4-甲基双环[2.2.2]-辛-2-烯-1-羧酸、葡庚糖酸、3-苯基丙酸、三甲基乙酸、三丁基乙酸、十二烷基硫磺酸、葡糖酸、谷氨酸、羟萘甲酸、水杨酸、硬脂酸、粘康酸等形成的盐；或(2)当存在于母体化合物中的酸性质子被金属离子取代时形成的盐，所述金属离子例如是碱金属离子、碱土金属离子或铝离子；或与有机碱形成的络合物，所述有机碱例如是乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、N-甲基葡糖胺等。

“ 药学上可接受的载体”是指与本发明的化合物一同施用的稀释剂、佐剂、赋形剂或载体。

“ 预防(preventing)”或“ 预防(prevention)”指减少获得疾病或失调的风险(即，使疾病的至少一个临床症状不在病人中发展，所述病人处于疾病的条件下或对疾病易感染，但还未经受或显示该疾病的症状)。

“ 取代的”指其中一个或多个氢原子独立地被相同的或不同的取代基所取代的基团。典型的取代基包括但不限于，-M、-R⁶⁰、-O^-、＝O、-OR⁶⁰、-SR⁶⁰、-S^-、＝S、-NR⁶⁰R⁶¹、＝NR⁶⁰、CF3、-CN、-OCN、-SCN、-NO、-NO₂、＝N₂、-N₃、-S(O)₂O^-、-S(O)₂OH、-S(O)₂R⁶⁰、-OS(O₂)O^-、-OS(O)₂R⁶⁰、-P(O)(O^-)₂、-P(O)(OR⁶⁰)(O^-)、-OP(O)(OR⁶⁰)(OR⁶¹)、-C(O)R⁶⁰、-C(S)R⁶⁰、-C(O)OR⁶⁰、-C(O)NR⁶⁰R⁶¹、-C(O)O^-、-C(S)OR⁶⁰、-NR⁶²C(O)NR⁶⁰R⁶¹、-NR⁶²C(S)NR⁶⁰R⁶¹、-NR⁶²C(NR⁶³)NR⁶⁰R⁶¹和-C(NR⁶²)NR⁶⁰R⁶¹，其中M独立地是卤素；R⁶⁰、R⁶¹、R⁶²和R⁶³独立地是氢、烃基、取代的烃基、烷氧基、取代的烷氧基、环烃基、取代的环烃基、环杂烃基、取代的环杂烃基、芳基、取代的芳基、杂芳基或取代的杂芳基，或任选地R⁶⁰和R⁶¹与它们键合的氮原子一起形成环杂烃基或取代的环杂烃基环；和R⁶⁴和R⁶⁵独立地是氢、烃基、取代的烃基、芳基、环烃基、取代的环烃基、环杂烃基、取代的环杂烃基、芳基、取代的芳基、杂芳基或取代的杂芳基、或任选地R⁶⁴和R⁶⁵与它们键合的氮原子一起形成环杂烃基或取代的环杂烃基环。优选地，取代基包括-M、-R⁶⁰、＝O、-OR⁶⁰、-SR⁶⁰、-S^-、＝S、-NR⁶⁰R⁶¹、＝NR⁶⁰、-CF₃、-CN、-OCN、-SCN、-NO、-NO₂、＝N₂、-N₃、-S(O)₂R⁶⁰、-OS(O₂)O^-、-OS(O)₂R⁶⁰、-P(O)(O^-)₂、-P(O)(OR⁶⁰)(O^-)、-OP(O)(OR⁶⁰)(OR⁶¹)、-C(O)R⁶⁰、-C(S)R⁶⁰、-C(O)OR⁶⁰、-C(O)NR⁶⁰R⁶¹、-C(O)O^-、-NR⁶²C(O)NR⁶⁰R⁶¹，更优选地包括-M、-R⁶⁰、＝O、-OR⁶⁰、-SR⁶⁰、-NR⁶⁰R⁶¹、-CF₃、-CN、-NO₂、-S(O)₂R⁶⁰、-P(O)(OR⁶⁰)(O^-)、-OP(O)(OR⁶⁰)(OR⁶¹)、-C(O)R⁶⁰、-C(O)OR⁶⁰、-C(O)NR⁶⁰R⁶¹、-C(O)O^-，最优选地包括-M、-R⁶⁰、＝O、-OR⁶⁰、-SR⁶⁰、-NR⁶⁰R⁶¹、-CF₃、-CN、-NO₂、-S(O)₂R⁶⁰、-OP(O)(OR⁶⁰)(OR⁶¹)、-C(O)R⁶⁰、-C(O)OR⁶⁰、-C(O)O^-，其中R⁶⁰、R⁶¹和R⁶²如上述定义。

对任何疾病或失调的“ 治疗”在一个具体实施方案中指，改善疾病或失调(即，预防或减少疾病或其至少一个临床症状的发展)。在另一个具体实施方案中“治疗”指改善至少一个身体参数，其可能是病人不能辨别的。在又一个具体化的方面，“治疗”指在身体上(例如，稳定可辨别的症状)、生理上(例如稳定身体参数)，或同时在身体上和生理上抑制疾病或失调。在又一个具体实施方案中，“治疗”指延迟疾病或失调的发作。

“ 治症有效量”是指当施用给病人用于疾病的治疗时，足够实施对这种疾病的治疗的化合物的量。“治疗有效量”将根据化合物、疾病和其严重性，以及将被治疗的病人的年龄、体重等变化。

现在将详细地说明本发明的优选方案。当结合优选实施方案描述本发明时，应当理解，这不是将本发明限定到那些优选实施方案。相反，其试图涵盖替换、改进和等同物，从而可被包括在权利要求书所限定的本发明的实质和范围之中。

4.2本发明的化合物

本发明通过提供靶向肿瘤和内皮细胞并具有抗肿瘤、抗血管生成和抗转移活性的Ac-PHSCN-NH2的肽类似物来满足这些及其它需求，提供制造这些肽的方法、其组合物和利用这些肽和其药物组合物来处理、预防和检测以肿瘤生长、转移和血管生成为特征的疾病的方法。该肽类似物可充当，特别地，放射活性的载体、PET活性化合物、毒素、荧光分子和PEG分子。

因此，在一个方面本发明提供式(I)的化合物：

或其药学上可接受的盐，溶剂化物，水合物或N-氧化物，其中：

j和k独立地是0或1；

p和q独立地是0和100之间且包括0和100的整数；

r和s独立地是0或1；

R¹是酰基、取代的酰基、酰基螯合物、烃基、取代的烃基、环烃基、取代的环烃基、亚氨基或取代的亚氨基；

R²是C₁-C₆烃基，其有至少一个氢原子被取代基取代，所述取代基选自-NR⁶R⁷、-OR⁸、-CO₂R⁹、-S(O)_zR¹⁰、-P(OR¹¹)OR¹²、芳基和取代的芳基；

R⁶、R⁷、R⁸、R⁹、R¹⁰、R¹¹和R¹²独立地选自氢、酰基、取代的酰基、酰基螯合物、烃基、取代的烃基、环烃基、取代的环烃基、亚氨基和取代的亚氨基；

X₁是-NH(C＝C)_gCO-、-NH(CH₂)_hCO-或-NHCH(CH₃)CO-；

g和h独立地是1、2、3、4、5或6

X₂是

或

X₃是

X₄是

或

1是1到4的整数；

X₅是

或；

R¹³是氢、烃基、取代的烃基、酰基、取代的酰基、芳烃基、取代的芳烃基、芳基、取代的芳基或-S(O)_xR¹⁴；

n是1到5的整数；

R¹⁴是烃基、取代的烃基、酰基、取代的酰基、芳烃基、取代的芳烃基、芳基或取代的芳基；

y和x独立地是0、1或2；

X₆是

m是1、2、3或4中的整数；

X₇是-NH(C＝C)_dCO-、-NH(CH₂)_eCO-或-NHCH(CH₃)CO-；

d和e独立地是1、2、3、4、5或6；

R³是C₁-C₆烃基，其有至少一个氢原子被取代基取代，所述取代基选自-NR¹⁵R¹⁶、-OR¹⁷、-CO₂R¹⁸、-S(O)_nR¹⁹、-P(OR²⁰)OR²¹、芳基和取代的芳基；

R⁴和R⁵独立地是氢、烃基、或取代的烃基；和

R¹⁵、R¹⁶、R¹⁷、R¹⁸、R¹⁹、R²⁰和R²¹独立地选自氢、酰基、取代的酰基、酰基螯合物、烃基、取代的烃基、环烃基、取代的环烃基、亚氨基和取代的亚氨基；

附带条件为当R⁴和R⁵是氢以及r和s是0时R¹不是乙酰基。

在一个实施方式中，当R⁴和R⁵是氢时R¹不是乙酰基。

在一个实施方式中，p和q独立地是1和50之间且包括1和50的整数。在另一个实施方式中，p和q独立地是1和25之间且包括1和25的整数。在又一个实施方式中，p和q独立地是1和10之间且包括1和10的整数。在又一个实施方式中，p和q独立地是1和5之间且包括1和5的整数。在又一个实施方式中，p和q独立地是1和3之间且包括1和3的整数。

在一个实施方式中，p和q独立地是0和50之间且包括0和50的整数。在另一个实施方式中，p和q独立地是0和25之间且包括0和25的整数。在又一个实施方式中，p和q独立地是0和10之间且包括0和10的整数。在又一个实施方式中，p和q独立地是0和5之间且包括0和5的整数。在又一个实施方式中，p和q独立地是0和3之间且包括0和3的整数。

在又一个实施方式中，s是0和r是1。在又一个实施方式中，s是0和r是0。在又一个实施方式中，s和r中的至少一个不是0。

在又一个实施方式中，R¹是酰基、取代的酰基、酰基螯合物、亚氨基或取代的亚氨基。在又一个实施方式中，R²是C₁-C₆烃基，其有至少一个氢原子被选自-NR⁶R⁷、-OR⁸和-CO₂R⁹的取代基取代。在又一个实施方式中，R⁶、R⁷、R⁸、R⁹、R¹⁰、R¹¹和R¹²独立地选自氢、酰基、取代的酰基、酰基螯合物、亚氨基或取代的亚氨基。

在又一个实施方式中，X₁是-NHCH₂CO-或-NHCH(CH₃)CO-。在又一个实施方式中，X₂是

在又一个实施方式中，1是1。在又一个实施方式中，n是1或2。在又一个实施方式中，m是1或2。

在又一个实施方式中，R³是C₁-C₆烃基，其有至少一个氢原子被选自-NR¹⁵R¹⁶、-OR¹⁷和-CO₂R¹⁸的取代基取代。在又一个实施方式中，R¹⁵、R¹⁶、R¹⁷、R¹⁸、R¹⁹、R²⁰和R²¹独立地选自氢、酰基、取代的酰基、酰基螯合物、亚氨基或取代的亚氨基。

在一个实施方式中，本发明的化合物具有式(II)的结构：

其中：

R¹是酰基、取代的酰基、酰基螯合物、烃基、取代的烃基、亚氨基或取代的亚氨基；

R⁴是氢；

R⁵是氢、烃基或取代的烃基；和

R²⁵是氢、酰基、取代的酰基、酰基螯合物、烃基、取代的烃基、亚氨基或取代的亚氨基；和

q是1、2、3、4、或5。

在式(I)和(II)的化合物的一个实施方式中，R¹是

或

和R¹⁴是氢、甲基或乙酰基。在一个具体实施方式中，r＝0和，R⁴和R⁵是氢。在另一个具体实施方式中，r＝1，q是2，R⁴、R⁵和R²⁵是氢。

在式(I)和(II)的化合物的另一个实施方式中，r＝1，q是2，R¹⁴是氢、甲基或乙酰基，和R²⁵是

或

在式(I)和(II)的化合物的另一个实施方式中，r＝0，R¹是乙酰基，R⁴是氢，R¹⁴是氢、甲基或乙酰基，和R⁵是

在式(I)和(II)的化合物的又一个实施方式中，r＝1，q是2，R¹是乙酰基，R⁴和R²⁵是氢，R¹⁴是氢、甲基或乙酰基，和R⁵是

在式(I)和(II)的化合物的又一个实施方式中，r＝0，R⁴和R⁵是氢，R¹⁴是氢、甲基或乙酰基，和R¹是

在式(I)和(II)的化合物的又一个实施方式中，r＝1，q＝2，R¹＝乙酰基，

R⁴和R⁵是氢，R¹⁴是氢、甲基或乙酰基，和R²⁵是

在式(I)和(II)的化合物的又一个实施方式中，r＝0，R⁴和R⁵是氢，R¹⁴是氢、甲基或乙酰基，和R¹是

或

在式(I)和(II)的化合物的又一个实施方式中，r＝1，q＝2，R⁴、R⁵和R²⁵是氢，R¹⁴是氢、甲基或乙酰基，和R¹是

或

在式(I)和(II)的化合物的又一个实施方式中，r＝1，q＝2，R¹是乙酰基，R⁴和R⁵是氢，R¹⁴是氢、甲基或乙酰基，和R²⁵是

或

在式(I)和(II)的化合物的又一个实施方式中，r＝0，R⁴和R⁵是氢，R¹⁴是氢、甲基或乙酰基，和R¹是

在式(I)和(II)的化合物的又一个实施方式中，r＝1，q＝2，R⁴、R⁵和R²⁵是氢，R¹⁴是氢、甲基或乙酰基，和R¹是

在式(I)和(II)的化合物的又一个实施方式中，r＝1，q＝2，R¹是乙酰基，R⁴和R⁵是氢，R¹⁴是氢、甲基或乙酰基，和R²⁵是

在式(I)和(II)的化合物的又一个实施方式中，r＝0，R⁴和R⁵是氢，R¹⁴是氢、甲基或乙酰基，和R¹是

和M是Cu、Ga、¹¹¹In或⁹⁰Y。

在式(I)，(II)的化合物的又一个实施方式中，r＝1，q＝2，R⁴、R⁵和R²⁵是氢，R¹⁴是氢、甲基或乙酰基，R¹是

和M是Cu、Ga、¹¹¹In或⁹⁰Y。

在式(I)和(II)的化合物的又一个实施方式中，r＝1，q＝2，R¹是乙酰基，R⁴和R⁵是氢，R¹⁴是氢、甲基或乙酰基，R²⁵是

和M是Cu、Ga、¹¹¹In或⁹⁰Y。

在式(I)和(II)的化合物的又一个实施方式中，r＝0，R⁴和R⁵是氢，R¹⁴是氢、甲基或乙酰基，和R¹是

和M是Cu。

在式(I)和(II)的化合物的又一个实施方式中，r＝1，q＝2，R⁴、R⁵和R²⁵是氢，R¹⁴是氢、甲基或乙酰基，R¹是

和M是Cu。

在式(I)和(II)的化合物的又一个实施方式中，r＝1，q＝2，R¹是乙酰基，R⁴和R⁵是氢，R¹⁴是氢、甲基或乙酰基，R²⁵是

和M是Cu。

在式(I)和(II)的化合物的又一个实施方式中，r＝0，R⁴和R⁵是氢，R¹⁴是氢、甲基、或乙酰基，和R¹是

和M是¹¹¹In、⁹⁰Y或Ga。

在式(I)和(II)的化合物的又一个实施方式中，r＝1，q＝2，R⁴、R⁵和R²⁵是氢，R¹⁴是氢、甲基或乙酰基，R¹是

和M是¹¹¹In、⁹⁰Y或Ga。

在式(I)和(II)的化合物的又一个实施方式中，r＝1，q＝2，R¹是乙酰基，R⁴和R⁵是氢，R¹⁴是氢、甲基或乙酰基，R²⁵是

和M是¹¹¹In、⁹⁰Y或Ga。

在式(I)和(II)的化合物的又一个实施方式中，r＝0，R⁴和R⁵是氢，R¹⁴是氢、甲基或乙酰基，R¹是

和M是¹¹¹In、⁶⁷Ga或⁶⁸Ga。

在式(I)和(II)的化合物的又一个实施方式中，r＝1，q＝2，R⁴、R⁵和R²⁵是氢，R¹⁴是氢、甲基或乙酰基，R¹是

和M是¹¹¹In、⁶⁷Ga或⁶⁸Ga。

在式(I)和(II)的化合物的又一个实施方式中，r＝1，q＝2，R¹是乙酰基，R⁴和R⁵是氢，R¹⁴是氢、甲基或乙酰基，R²⁵是

和M是¹¹¹In、⁶⁷Ga或⁶⁸Ga。

在式(I)和(II)的化合物的又一个实施方式中，其中r＝0，R⁴和R⁵是氢，R¹⁴是氢、甲基或乙酰基，R¹是

和M是Tc。

在式(I)和(II)的化合物的又一个实施方式中，r＝1，q＝2，R⁴、R⁵和R²⁵是氢，R¹⁴是氢、甲基或乙酰基，R¹是

和M是Tc。

在式(I)和(II)的化合物的又一个实施方式中，r＝1，q＝2，R¹是乙酰基，R⁴和R⁵是氢，R¹⁴是氢、甲基或乙酰基，R²⁵是

和M是Tc。

在式(I)和(II)的化合物的又一个实施方式中，r＝0，R⁴和R⁵是氢，R¹⁴是氢、甲基或乙酰基，和R¹是

在式(I)和(II)的化合物的又一个实施方式中，其中r＝1，q＝2，R⁴、R⁵和R²⁵是氢，R¹⁴是氢、甲基或乙酰基，和R¹是

在式(I)和(II)的化合物的又一个实施方式中，其中r＝1，q＝2，R¹是乙酰基，R⁴和R⁵是氢，R¹⁴是氢、甲基或乙酰基，和R²⁵是

在式(I)和(II)的化合物的又一个实施方式中，r＝0，R⁴和R⁵是氢，R¹⁴是氢、甲基或乙酰基，和R¹是

在式(I)和(II)的化合物的又一个实施方式中，r＝1，q＝2，R⁴、R⁵和R²⁵是氢，R¹⁴是氢、甲基或乙酰基，和R¹是

在式(I)和(II)的化合物的又一个实施方式中，r＝1，q＝2，R¹是乙酰基，R⁴和R⁵是氢，R¹⁴是氢、甲基或乙酰基，和R²⁵是

在式(I)和(II)的化合物的又一个实施方式中，r＝0，R⁴和R⁵是氢，R¹⁴是氢、甲基或乙酰基，和R¹是

A是H或Br。

在式(I)和(II)的化合物的又一个实施方式中，r＝1，q＝2，R⁴、R⁵和R²⁵是氢，R¹⁴是氢、甲基或乙酰基，和R¹是

A是H或Br。

在式(I)和(II)的化合物的又一个实施方式中，r＝1，q＝2，R¹是乙酰基，R⁴和R⁵是氢，R¹⁴是氢、甲基或乙酰基，和R²⁵是

A是H或Br。

在式(I)和(II)的化合物的又一个实施方式中，r＝0，R⁴和R⁵是氢，R¹⁴是氢、甲基或乙酰基，和R¹是

在式(I)和(II)的化合物的又一个实施方式中，r＝1，q＝2，R⁴、R⁵和R²⁵是氢，R¹⁴是氢、甲基或乙酰基，和R¹是

在式(I)和(II)的化合物的又一个实施方式中，r＝¹，q＝²，R¹是乙酰基，R⁴和R⁵是氢，R¹⁴是氢、甲基或乙酰基，和R²⁵是

在式(I)和(II)的化合物的又一个实施方式中，r＝0，R⁴和R⁵是氢，R¹⁴是氢、甲基或乙酰基，和R¹是

在式(I)和(II)的化合物的又一个实施方式中，r＝1，q＝2，R⁴、R⁵和R²⁵是氢，R¹⁴是氢、甲基或乙酰基，和R¹是

在式(I)和(II)的化合物的又一个实施方式中，r＝1，q＝2，R¹是乙酰基，R⁴和R⁵是氢，R¹⁴是氢、甲基或乙酰基，和R²是

在式(I)和(II)的化合物的又一个实施方式中，r＝0，R⁴和R⁵是氢，R¹⁴是氢、甲基或乙酰基，和R¹是

在式(I)和(II)的化合物的又一个实施方式中，r＝1，q＝2，R⁴、R⁵和R²⁵是氢，R¹⁴是氢、甲基或乙酰基，和R¹是

在式(I)和(II)的化合物的又一个实施方式中，r＝1，q＝2，R¹是乙酰基，R⁴和R⁵是氢，R¹⁴是氢、甲基或乙酰基，和R²⁵是

在式(I)和(II)的化合物的又一个实施方式中，其中r＝0，R⁴和R⁵是氢，R¹⁴是氢、甲基或乙酰基，和R¹是

A是H或I。

在式(I)和(II)的化合物的又一个实施方式中，其中r＝1，q＝2，R⁴、R⁵和R²⁵是氢，R¹⁴是氢、甲基或乙酰基，和R¹是

A是H或I。

在式(I)和(II)的化合物的又一个实施方式中，r＝1，q＝2，R¹是乙酰基，R⁴和R⁵是氢，R¹⁴是氢、甲基或乙酰基，和R²⁵是

A是H或I。

在式(I)和(II)的化合物的又一个实施方式中，r＝0，R⁴和R⁵是氢，R¹⁴是氢、甲基或乙酰基，和R¹是

在式(I)和(II)的化合物的又一个实施方式中，r＝1，q＝2，R⁴、R⁵和R²⁵是氢，R¹⁴是氢、甲基或乙酰基，和R¹是

在式(I)和(II)的化合物的又一个实施方式中，r＝1，q＝2，R¹是乙酰基，R⁴和R⁵是氢，R¹⁴是氢、甲基或乙酰基，和R²⁵是

在式(I)和(II)的化合物的又一个实施方式中，r＝0，R⁴和R⁵是氢，R¹⁴是氢、甲基或乙酰基，和R¹是

在式(I)和(II)的化合物的又一个实施方式中，r＝0，R⁴和R⁵是氢，R¹⁴是氢、甲基或乙酰基，和R¹是

在式(I)和(II)的化合物的又一个实施方式中，r＝1，q＝2，R⁴、R⁵和R²⁵是氢，R¹⁴是氢、甲基或乙酰基，和R¹是

在式(I)和(II)的化合物的又一个实施方式中，r＝1，q＝2，R¹是乙酰基，R⁴和R⁵是氢，R¹⁴是氢、甲基或乙酰基，和R²⁵是

D＝H或I。

在式(I)和(II)的化合物的又一个实施方式中，r＝1，q＝2，R⁴、R⁵和R²⁵是氢，R¹⁴是氢、甲基或乙酰基，和R¹是

D＝H或I。

在式(I)和(II)的化合物的又一个实施方式中，r＝1，q＝2，R¹是乙酰基，R⁴和R⁵是氢，R¹⁴是氢、甲基或乙酰基，和R²⁵是

D＝H或I。

在第一优选实施方式中，R¹是酰基或取代的酰基，R²是C₁-C₄烃基，其有至少一个氢原子被选自-NR⁶R⁷、芳基和取代的芳基的取代基取代，R⁶和R⁷独立地选自氢、酰基和取代的酰基，X₁是-NH(CH2)_hCO-，X₂是

X₄是

X₅是

R¹³是氢、酰基、取代的酰基、烃基或取代的烃基。

X₆是

X₇是-NH(CH₂)_eCO-，R³是C₁-C₄烃基，其有至少一个氢原子被选自-NR¹⁵R¹⁶、芳基和取代的芳基的取代基取代，R¹⁵和R¹⁶独立地选自氢、酰基和取代的酰基，和R⁴和R⁵是氢。在一个实施方式中，s是0和r是1，k是1，R¹是乙酰基，R¹³是氢，e是1和R³是-(CH₂)₄NH₂。优选地，q是2、4或6。在另一个实施方式中，s是0和r是1，k是1，R¹是乙酰基，R¹³是氢，e是2、4或6，和R³是-(CH₂)₄NHCO(CH₂)₂-Ph-(4-OH)。优选地，q是1。在又一个实施方式中，s是0和r是1，k是1，R¹是乙酰基，R¹³是氢，e是2、4或6，和R³是-CH₂-Ph-(4-OH)。优选地，q是1。在又一个实施方式中，s是0和r是1，k是1，R¹是乙酰基，R¹³是甲基，e是1和R³是-(CH₂)₄NH₂。优选地，q是2。在又一个实施方式中，s是1和r是0，j是1，R¹是乙酰基，R¹³是氢，h是1，和R²是-CH₂-Ph-(4-OH)。优选地，p是2、4或6。在又一个实施方式中，s是1和r是0，j是1，R¹是乙酰基，R¹³是氢，h是2、4或6，和R²是-CH₂-Ph-(4-OH)。优选地，p是1。在又一个实施方式中，s是1和r是0，j是0，R¹是-CO(CH₂)₂-Ph-(4-OH)，R¹³是氢和h是1。优选地，p是2、4或6。在又一个实施方式中，s是1和r是0，j是0，R¹是-CO(CH₂)₂-Ph-(4-OH)，R¹³是氢，和h是2、4或6。优选的，p是1。在又一个实施方式中，s是0和r是0，R¹是-(CH2)2-Ph-(4-OH)和R¹³是氢。在又一个实施方式中，s是0和r是0，R¹-COPh-(4-F)和R¹³是氢。在又一个实施方式中，s是0和r是1，k是1，R¹是乙酰基，R¹³是甲基或氢，e是1，和R³是-(CH₂)₄NHCOPh-(4-F)。优选地，q是2。在又一个实施方式中，s是0和r是1，k是1，R¹是乙酰基，R¹³是氢，e是1，和R³是-(CH₂)₄NH-8-[4′-氟苯甲基氨基]辛二酰或-(CH₂)₄NHCOCH₂F。优选地，q是2。在又一个实施方式中，s是1和r是0，j是0，R¹是8-[4′-氟苯甲基氨基]辛二酰或-COCH₂F，R¹³是氢和h是2。优选地，p是1。在又一个实施方式中，s是0和r是1，k是1，R¹是乙酰基，R¹³是氢和R³是-CH₂Ph-(3-碘，4-OH)或-CH₂Ph-(3，5-二碘，4-OH)。优选地，q是0。优选地，q是1和e是2。优选地，q是1和e是1。在又一个实施方式中，s是1和r是0，j是1，R¹是乙酰基，R¹³是氢和R²是-CH₂Ph-(3-碘，4-OH)或-CH₂Ph-(3，5-二碘，4-OH)。优选地，p是0。在又一个实施方式中，s是0和r是0，R¹是-CO(CH₂)₂Ph(4-OH，3，5二-碘)和R¹³是氢。在又一个实施方式中，s是1和r是0，j是0，R¹是-CO(CH₂)₂Ph(4-OH，3，5二-碘)，h是2和R¹³是氢。优选地，p是1。在又一个实施方式中，s是1和r是0，j是1，R¹是乙酰基，R²-CH₂-Ph(4-OH，3，5二-碘)，h是2和R¹³是氢。优选地，p是1。在又一个实施方式中，s是0和r是1，R³是-(CH₂)₄NHCO(CH₂)₂-Ph(4-OH，3，5二-碘)，e是1和R¹³是氢。优选地，q是2。

在又一个实施方式中，R¹是酰基螯合物，R²、R⁶、R⁷、X₁、X₂、X₄、X₅、R¹³、X₆、X₇、R³、R¹⁵、R¹⁶、R⁴和R⁵与在第一实施方式中定义的相同。在一个实施方式中，s是1和r是0，j是0，R¹是DOTA-In，h是2和R¹³是氢。优选地，p是1。在另一个实施方式中，s是0和r是0，R¹是DPTA或DPTA-In和R¹³是氢。

另一方面，本发明提供式(III)的化合物：

或其药学上可接受的盐，溶剂化物，水合物或N-氧化物，其中：

R²⁰是酰基、取代的酰基、烃基、取代的烃基、环烃基、取代的环烃基、亚氨基、取代的亚氨基或诊断剂；

R²¹是C₁-C₆烃基，其有至少一个氢原子被选自-NHR²²的取代基取代；

R²²是氢、酰基、取代的酰基、烃基、取代的烃基或诊断剂；和

j、k、p、q、r、s、R²、X₁、X₂、X₃、X₄、X₅、X₆、X₇、R⁴和R⁵与结构式(I)中定义的相同；

附带条件是R²⁰和R²²的至少一个是诊断剂。

在一个实施方式中，R²、X₁、X₂、X₃、X₄、X₅、X₆、X₇、R⁴和R⁵和在第一优选实施方式中定义的相同。在一个实施方式中，R²⁰是荧光剂。优选地，R²⁰是5/6羧基荧光素，s是1，r是0，j是0，e是2和p是1。在另一个实施方式中，R²²是荧光剂。优选地，R²¹是(CH₂)₄NH-，R²²是-5/6羧基荧光素，s是0，r是1，k是1，e是1和q是2。优选地，R²¹是(CH₂)₄NH-，R²²是生物素，s是0，r是1，k是1，e是1和q是2。

另一方面，本发明提供式(IV)的化合物：

或其药学上可接受的盐，溶剂化物，水合物或N-氧化物，其中：

R²³是酰基、取代的酰基、烃基、取代的烃基、环烃基、取代的环烃基、亚氨基、取代的亚氨基或聚乙二醇化(pegylating)剂；

R²⁴是C₁-C₆烃基，其有至少一个氢原子被选自-NHR²⁸的取代基取代，其中R²⁸是氢、酰基、取代的酰基、烃基、取代的烃基或聚乙二醇化剂；和

j、k、p、q、r、s、R²、X₁、X₂、X₃、X₄、X₅、X₆、X₇、R⁴和R⁵与在结构式(I)中定义的相同；

附带条件是R²³和R²⁸的至少一个是聚乙二醇化剂。

在一个实施方式中，R²、X₁、X₂、X₃、X₄、X₅、X₆、X₇、R⁴和R⁵和在第一优选实施方式中定义的相同。优选地，R²³是m-dPEG，s是1，r是0，j是0，h是2和p是1。

又一方面，本发明提供式(V)的化合物：

或其药学上可接受的盐，溶剂化物，水合物或N-氧化物，其中：

R²⁹是C₁-C₆烃基，其有至少一个氢原子被-NHR³²取代；

R³⁰是酰基、取代的酰基、烃基、取代的烃基或治疗剂。

R³¹是氢、烃基、取代的烃基或治疗剂；

R³²是氢、酰基、取代的酰基、烃基、取代的烃基或治疗剂；和

j、k、p、q、r、s、R²、X₁、X₂、X₃、X₄、X₅、X₆、X₇、R⁴和R⁵与结构式(I)中定义的相同；

附带条件是R³⁰、R³¹和R³²中的至少一个是治疗剂。

在一个实施方式中，R²、X₁、X₂、X₃、X₄、X₅、X₆、X₇和R⁴与在第一优选实施方式中定义的相同。优选地，R¹³是甲基或乙酰基，s是0，r是0，R³⁰是乙酰基和R³¹是治疗剂。在一个实施方式中，治疗剂是阿霉素。在又一个实施方式中，R¹³是甲基或氢，s是0，r是1，k是1，e是1，q是2，R³⁰是乙酰基，R³¹是氢，R²⁹是-(CH₂)₄NHR³²。优选地，R³²是-CO(CH₂)₃-阿霉素或原卟啉。

在本发明中使用非天然氨基酸是特别期待的。因此，在本发明的范围内，本发明的化合物的变体包括，例如，天然产生的氨基酸的D-氨基酸、β-丙氨酸、3-氨基丙酸、2，3-二氨基丙酸、4-氨基丁酸等，肌氨酸、orthinine、N-甲基甘氨酸、瓜氨酸、t-丁基丙氨酸、高精氨酸等。

本发明的化合物中的一个或多个氨基键可以任选地用本领域公知的同电子排列体例如-CH₂-NH-、-CH₂-S-、-CH₂-S(O)-、-CH₂-S(O)₂-、-COCH₂--CH＝CH-、CH(OH)CH₂取代(见，例如Spatola，″Chemistry andBiochemistry of Amino Acids，Peptides and Proteins，″B.Weinstein，(eds.)，Marcel Dekker，New York，1983；Spatola等，Life Sci.1986，38：1243-1249；Almquist等，J.Med.Chem.1980，23：1392；Holladay等，Tetrahedron Lett.1983，24：4401；Hruby，Life Sci.1982，4；189：199；Jennings-White等，Tetrahedron Lett.1982，23：2533；Hruby，Biopolymers 1993；33：1073-1082；Wiley等，Med.Res.Rev.199313：327-384；Moore等，Adv.inPharmacol 1995，33：91-141；Giannis等，1997，Adv.in Drug Res.29：1-78)。本发明的肽也可包含肽模拟物，例如在Olson等，J.Med.Chem.1993，36：3039和Chorev等，Science 1979，204：1210中描述的。

本发明化合物的共价改性属于本发明的范围内，并能改善溶解性、吸收、生物半衰期等。这种修饰可受特定的氨基酸残基与有机试剂的选择性反应的影响。例如，组氨酸残基可选择性地在pH5.5-7与焦碳酸二乙酯反应，和在pH6.0与对溴苯甲酰甲基溴化物反应。包含游离氨基基团的残基可选择性地与羧酸酐、酰亚胺酯、磷酸吡哆醛、三硝基苯磺酸、邻甲基异脲、2，4-戊二酮、乙醛酸等起反应。精氨酰残基可选择性地与苯甲酰甲醛和各种二酮起反应。谷氨酰胺和天冬酰胺残基可在温和的酸性条件下脱氨基，以提供相应的谷氨酰和天冬氨酰残基。脯氨酸和赖氨酸可被选择性地羟基化，而丝氨酸和苏氨酸残基可被选择性地磷酸化。组氨酸和赖氨酸的α-氨基可被选择性地甲基化(Creighton，Proteins：Structure and Molecule Properties，W.H.Freeman&Co.，San Francisco，pp.79-86(1983))。

双官能交联剂(例如，1-双(叠氮乙酰基)-2-苯乙烷、戊二醛、N-羟基-琥珀酰亚胺酯、4-叠氮水杨酸的酯、人双功能酰亚胺酯(例如，双琥珀酰亚胺酯(disuccinimidyl ester)例如3，3′-二硫代双(琥珀酰亚胺丙酸酯))、双官能马来酰亚胺(例如，双-N-马来酰亚胺-1，8-辛烷等)的衍生作用，可被用来使化合物与水不溶性的支持母体或其它高分子载体连接。光活化剂例如甲基-3-[(p-叠氮苯基)二硫]propioimidate也可被用来使化合物与水不溶性的支持母体连接。做为选择，化合物可以直接与反应性的水不溶性母体(例如，溴化氰活化的碳水化合物)起反应。

本发明还包括由本发明化合物的氨基酸序列的重复单元组成的更长的肽。在一个实施方式中，这种多聚体的重复单元是化合物的氨基酸序列，其中a、b、x、y和z是1。在另一个实施方式中，重复单元是本发明化合物的氨基酸序列，其中a、b、x、y和z中仅一个是0，其余的是1。

多聚体可以由重复单元的相同或不同组合组成，所述重复单元的组合由结构式(I)的化合物的氨基酸序列组成。这种多聚体肽可以通过化学合成或通过重组DNA技术，继而进行胱氨酸残基的化学改性来制备。优选地，合成的多聚体具有2到12个重复的核心肽序列，更优选地具有2到8个重复的核心肽序列。因此，多聚体中氨基酸的总数将不会超过约110个残基(或等同物，当包括连接体连接体或间隔基时)。

优选的多聚体具有式P¹ _n，其中P¹是五肽，n是2到8。在另一个实施方式中，多聚体具有式(P¹-X_m)-P²，其中P¹和P²是五肽。P¹和P²可以相同或不同，每个P¹可表示结构式(I)的不同的五肽衍生物。X是C₁-C₅核心肽序列、包含至多4个氧原子的C₁-C₅聚醚或Gly_z，其中z＝1-6，m＝0或1和n＝1-7。

优选的重组方法生产的肽多聚体具有式：(P¹-Gly_z)_n-P²，其中P¹和P²是相同或不同的五肽，并且在多聚体中的每个P¹可以是不同的五肽，n＝1-100和z＝0-6。多聚体可以任选地在N-端和C-端都进行官能化。

本发明的化合物可以通过任何类型的分子的共价连接来改性，只要该改性不阻止或抑制生物学功能(即，抑制或防止血管生成、细胞侵入、细胞增殖等等)。例如，本发明的化合物可以通过糖基化、乙酰化、聚乙二醇化、磷酸化、酰胺化、蛋白水解断裂、连接到细胞配体或蛋白等进行修饰。优选地，本发明的化合物直接地或通过连接部分与治疗剂或诊断剂结合。

优选地，连接部分首先与诊断剂或治疗剂连接以形成连接部分中间体，然后该中间体进一步连接到结构式(I)的化合物上。对熟练技术人员而言显而易见的是，连接部分也可以先与本发明化合物连接以形成连接部分中间体，然后该中间体能与诊断剂或治疗剂连接。

一般地，连接部分包括用于将治疗剂或诊断剂结合到肽上的连接体和连接基团。连接体的性质取决于特定的应用和期望的结合类型，连接体可以是亲水的或疏水的、长的或短的、刚性的或柔性的。连接体可以任选地被一个或多个相同或不同连接基团取代，从而提供多价的连接部分，其能使多个治疗剂或诊断剂与抗体结合。

本领域已知多种适合于将连接基团与氨基硝基化合物隔开的、由稳定的键组成的连接体，举例来说而非限制性地包括，烃基烃基、杂烃基烃基、非环状杂原子桥、芳基、芳芳基、芳烃基、杂芳基、杂芳基-杂芳基、取代的杂芳基-杂芳基、杂芳烃基、杂芳基-杂烃基等。因而，连接体可包括碳-碳单键、碳-碳双键、碳-碳叁键或芳族碳-碳键、氮-氮键、碳-氮键、碳-氧键和/或碳-硫键。因此，官能团例如羰基、醚、硫醚、甲酰胺、氨磺胺、尿素、氨基甲酸酯、肼等可被包含在连接体之中。

选择适合的连接体是在本领域技术人员的能力范围内的。例如，当期望使用刚性的连接体时，连接体可以是刚性的多不饱和烃基或芳基、双芳基、异芳基等。当期望使用柔性的连接体时，连接体可以是柔性的肽例如Gly-Gly-Gly或柔性的饱和烃基或杂烃基。亲水连接体可以是，例如，多元醇或聚醚例如聚亚羟基乙二醇。疏水连接体可以是，例如，烃基或芳基。

优选地，连接基团能调节与例如肽的互补性反应官能团形成共价键，来提供与该肽结合的治疗剂或诊断剂。因此，该连接基团可以是本领域技术人员所知的、能与肽中存在的常见的化学基团(例如，氨基、巯基羟基、羧化物、imidizaloyl、guandinium、酰胺等)反应的任何反应性官能团。因此，连接基团可以是，例如，光化学活化基团、电化学活化基团、自由基供体、自由基受体、亲核基团或亲电子基团。然而，本领域的技术人员也将认识到，在反应条件下通常不反应的多种官能基团可以被活化为反应性的。可被活化为反应性的基团包括，例如，醇类、羧酸类和酯，包括它们的盐。

连接基团可以是-NHR¹、-NH₂、-OH、-SH、卤素、-CHO、-R¹CO、-SO₂H、-PO₂H、-N₃、-CN、-CO₂H、-SO₃H、-PO₃H、-PO₂(OR¹)H、-CO₂R¹、-SO₃R¹或-PO(OR¹)₂，其中R¹是烃基。优选地，连接基团是-NHR¹、-NH₂、-OH、-SH、-CHO、-CO₂H、R¹CO-、卤素和-CO₂R¹。

连接体和连接基团的一些实施方式包括，例如，连接体是-(CH₂)_n-，n是1到8之间的整数，连接基团是-NH₂、-OH、-CO₂H和-CO₂R¹以及任何合适的氢被取代的相应类似物。连接部分的其它实施方式包括任何氨基酸，其可以是例如D或L氨基酸。因而，连接部分可以是由氨基酸的任意组合组成的二肽、三肽或四肽。在这些肽中肽键的极性可以是C-N或N-C。

治疗剂和诊断剂可以利用本领域技术人员所知的各种常规反应直接连接到肽上。例如，缩合试剂(例如，碳化二亚胺、羰基二咪唑等)可被用来形成在治疗剂或诊断剂的氨基和例如谷氨酸、天冬氨酸残基的羧酸基团和结构式(I)的化合物的C末端羧基之间的酰胺键连接。

类似的方法可被用来使包含连接体和连接基团的治疗剂和诊断剂连接到结构式(1)的化合物上。例如，包含连接体和连接基团的诊断剂和治疗剂可以利用本领域技术人员所知的常规方法被连接到赖氨酸的氨基、谷氨酸和天冬氨酸的羧酸基团、半胱氨酸的巯基、苏氨酸和丝氨酸的羟基，以及肽的芳族氨基酸的各个部分上。通常，选择用于直接地或通过连接体和连接基团将诊断剂或治疗剂结合到肽上的合适策略在技术人员的能力范围之内。

能与肽结合的治疗剂包括但不限于，放射性核素、用于光动力学治疗的卟啉(porphyrin)和卟啉衍生物(例如，原卟啉、苯卟啉衍生物一元酸A、tin-etio紫红素(purpurin)、间-四羟基氯苯、HPD、photofrin、原卟啉IX、Pc4、单天冬氨酰氯e₆、其它的参见Hassan等“PhotoDynamic Therapy of Cancer”inCancer medicine，fifth edition，R.C.Blast等，Ed.，B.C.Decker Inc，Canada，2000，p.489-502)、蛋白毒素(例如，蓖麻毒蛋白、假单胞菌外毒素、白喉毒素、皂草素(saporin)、美洲商陆抗病毒蛋白、bouganin等等)、细胞毒的癌症剂、喜树碱(例如，9-硝基喜树碱(9NC)、9-氨基喜树碱(9AC)、10-氨基喜树碱、9-氯喜树碱、10，11-亚甲二氧基喜树碱、irinothecin、芳香喜树碱酯类、烃基喜树碱酯、拓扑替康(topotecan)、(1S，9S)-1-氨基-9-乙基-5-氟-2，3-二氢-9-羟基-4-甲基-1H，12H-苯[去]吡喃[3′，4′:6，7]吲嗪[1，2-b]喹啉-10，13(9H，15H)-二酮甲磺酸酯二水合物(DX-8951f))、7-[(2-三甲基-甲硅烷基)乙基]-20(S)喜树碱(BNP1350)、卢比替康、依沙替康、勒托替康、Diflomotecan和其他的同型喜树碱等)、紫杉烷类(例如紫杉醇)、环硫酮(epithilones)、刺孢霉素(calicheamycins)、羟基脲、阿糖胞苷、环磷酰胺(cyclophosamide)、异膦酰胺、硝基脲、顺-二氯二氨络铂、丝裂霉素、美坦生(maytansines)、卡铂、氮烯唑胺、丙卡巴肼、依托泊苷、tenoposide、争光霉素、阿霉素(doxurobicin)、2-吡咯啉阿霉素(2-pyrrolinodoxurobicin)、道诺霉素、伊达比星(idarubican)、柔红霉素(daunorubicin)、更生霉素(dactinomycin)、普卡霉素(plicamycin)、米托蒽醌(mitoxantrone)、门冬酰胺酶(asparginase)、二羟基炭疽霉素二酮(dihydroxyanthracine dione)、光神霉素(mithrimycin)、放线菌素D(actinomycin D)、1-去氢睾酮(1-dehydrotestosterone)、细胞松驰素(cytochlasins)、长春碱(vinblastine)、长春新碱(vincristine)、长春瑞滨(vinorelbine)、紫杉醇(paclitaxel)、多西紫杉醇(docetaxel)、短杆菌肽D(gramicidinD)、糖皮质激素(glucocorticoids)、蒽环类抗生素(anthracyclines)、普鲁卡因(procaine)、丁卡因(teracaine)、利多卡因(lidocaine)、萘氧丙醇安(propanolol)、嘌罗霉素(puromycin)、甲氨蝶呤(methotrexate)、6-巯嘌呤(6-mercaptopurine)、6-硫代鸟嘌呤(6-thioguanine)、芥子毒素(mustard toxins)、anthyrimycin、紫杉醇(paclitaxel)、烷基化剂(例如双氯甲氨(mechoremethamine)、thicepa chlorambucil、美法仑(melphalan)、卡莫司汀(carmustine)、loustine、cyclothospamide、白消安(busulfan)、二溴甘露醇(dibromomannitol)、链唑霉素(streptozotocin)等)同系物和它们的类似物。优选地，治疗剂为一种细胞毒素癌症试剂，例如紫杉烷、喜树碱、epithilone或蒽环类抗生素。在一种实施方案中，治疗剂为多柔比星。在另一种实施方案中，治疗剂为放射性核素。

化合物与各种聚乙二醇化(pegylating)剂的连接也在本发明的范围之内。典型的聚乙二醇化剂包括但不限于，a-甲氧基-w-羧基-PEG 2K&5K1、a-甲氧基-w-N-琥珀酰亚氨基戊二酸酯-PEG 2K&5K1、a-甲氧基-w-戊二酸酯-PEG2K，5K，20K，30K2、a-甲氧基-w-GGG戊二酸酯-PEG 2K & 5K1、mPEG-Succinimidyl丙酸酯2K，5K，20K，30K2和m-PEG-ButyrALD 2K，5K，20K，30K2(其它的聚乙二醇化剂参见Li等，Biomacromolecules，2003，4，1055.1067)。常用的聚乙二醇化剂还可从商业供应例如NektarTherapeutics，San Carlos，CA获得。用于将各种PEG基团连接到肽上的方法有许多，是熟练技术人员公知的。

术语“诊断标记的”是指肽具有被连接的诊断可检测的标记物。本领域存在许多不同的标记物，标记的方法是技术人员公知的。能用于本发明的一般类型的标记物包括但不限于，放射性同位素、顺磁性同位素、能通过电子发射断层扫描(PET)成像的化合物、荧光或有色化合物、能通过磁共振成像的化合物、化学发光的化合物、生物发光的化合物等。合适的可检测的标记物包括但不限于，放射性的、荧光的、荧光团的或产色的标记物。有用的放射性标记物(放射性核素)，其可简单地通过γ粒子计数器、闪烁计数器或放射自显影检测，包括但不限于³H、¹²⁵I、¹³¹I、3⁵S和¹⁴C。

用于将金属络合到肽上的方法和组合物是本领域公知的。金属优选地是可检测的金属原子，包括放射性核素，其被络合到蛋白和其它分子上(见，例如，美国专利No.5,627,286，5,618,513，5,567,408，5,443,816和5,561,220)。

常用的荧光标记包括，但不仅限于，荧光素钠、若丹明、丹酰、藻红蛋白、藻蓝蛋白、别藻蓝蛋白、o-邻苯二醛和胺荧(Haugland，Handbook ofFluorescent Probes and Research Chemicals，Sixth Ed.，Molecular Probes，Eugene，OR，1996)，它们可用于标记结构式(I)所示的化合物。荧光素、荧光素衍生物和荧光素样分子如俄勒冈绿和它的衍生物、若丹明绿和罗多尔绿，它们利用异硫氰酸酯、琥珀酰亚胺酯或二氯三吖嗪酰活性基团与胺类基团耦合。类似地，荧光团也可利用马来酰亚胺、碘乙酰胺和吖丙啶反应性基团与巯基耦合。长波长若丹明，它主要为取代氮原子的若丹明绿衍生物，是优选的标记试剂。这个基团包括四甲基若丹明、X-若丹明和德克萨斯红衍生物。其他优选的荧光团是那些被紫外光激发的荧光团。实例包括，但不仅限于，瀑布蓝、香豆素衍生物、萘类(丹磺酰氯为其成员)、芘和吡啶基唑衍生物。

无机材料如半导体纳米晶体(Bruchez，et al.，1998，Science281：2013-2016)和量子点，例如包覆硫化锌的硒化镉(Chan，et al.，Science 1998，281：2016-2018)也可用作诊断标记。

肽也可以用发射荧光的金属例如¹⁵²Eu或其它镧系元素标记。这些金属可以通过酰基螯合基团如二乙烯三胺五乙酸(DTPA)、乙二胺四乙酸(EDTA)等，与结构式(I)所示的化合物连接。

放射性核素可以与结构式(I)所示的化合物直接连接或利用酰基螯合基团如DTPA和EDTA间接连接以用于体内诊断。螯合化学是本领域所熟知的，不同范围的肽螯合剂可用于提供被标记的肽。当然，被标记的肽必须保持天然肽的生物活性。

任何具有诊断和治疗价值的放射性核素可以在本发明中用作放射性标记。在优选的实施方案中，放射性核素为一种γ发射或β发射的放射性核素，例如，一种选自镧系或者锕系元素的元素。正电子发射的放射性核素，例如⁶⁸Ga或⁶⁴Cu，也可以利用。合适的γ发射的放射性核素包括那些在诊断影像学应用中有用的放射性核素。γ发射的放射性核素优选地具有1小时-40天的半衰期，更优选地为12小时-3天。合适的γ发射的放射性核素实例包括⁶⁷Ga、¹¹¹In、⁹⁹mTc、¹⁶⁹Yb和¹⁸⁶Re。最优选的放射性核素为^99mTc。

优选的放射性核素的实例(以原子序号排列)为、⁶⁷Cu、⁶⁷Ga、⁶⁸Ga、⁷²As、⁸⁹Zr、⁹⁰Y、⁹⁷Ru、⁹⁹Tc、¹¹¹In、¹²³I、¹²⁵I、¹³¹I、¹⁶⁹Yb、¹⁸⁶Re、和²⁰¹T1。虽然关于正电子发射的放射性金属作为标记只做了有限的工作，但是某种蛋白质如铁传递蛋白和人血清白蛋白，已经用68Ga进行了标记。

许多金属(不是放射性同位素)可用于磁共振成像术，包括钆、锰、铜、铁、金和铕。钆是最优选的。一般地，被标记的肽用于诊断中达到检测限所需的量会根据如患者的年龄、状态、性别和病变范围、禁忌症(如果有的话)以及其他因素的变化而变化，而且可由个别的医生或诊断专家进行调节。药量可以从0.01mg/kg到100mg/kg变化。

如熟练技术人员所公知的，也可以通过与磷光的或化学发光的化合物连接来检测肽。优选的化学发光化合物包括，但不仅限于，鲁米诺、异鲁米诺、theromatic吖啶酯、咪唑、吖啶盐和草酸酯。相似地，生物发光化合物可用于检测抗体和/或它的偶联物，包括但不仅限于，荧光素、荧光素酶和水母发光蛋白。

基于具有或导致具有高消光系数的发色团的产色化合物而进行的比色检测也可用于检测结构式(I)的化合物。

4.3合成

本发明的化合物可通过常规的合成方法获得。对制备本发明的化合物有用的起始材料和其中间体是商售的，或可通过公知的合成方法制备。

可以利用例如Merrifield，J.Amer.Chem.Soc.1963，85：2149-54描述的固相合成，使用可从化学供应商(例如，Applied Biosystems，Foster City，CA)购买的自动化设备或手动设备来制备肽。可以通过使保护的α-氨基酸(Boc或FMOC保护)与合当的树脂偶联来从肽的C末端开始固相肽合成。这种起始材料可通过用酯键将α氨基被保护的氨基酸与氯甲基化树脂、羟甲基树脂、BHA树脂、MBHA树脂或Rink树脂连接来制备。这种本领域公知的方法在例如美国专利No.5,994,309中公开。做为选择，本发明化合物可利用被保护的α-氨基酸通过溶液相合成来制备(见，例如，Bodanszky，″Methods ofPeptideSynthesis，″Springer Verlag，New York，1984)。对本领域技术人员显而易见的是，可以将非天然氨基酸使用在上述标准化学合成方法中，非天然氨基酸可以通过本领域技术人员公知的常规方法制备。

熟练技术人员将能理解，合成本发明的化合物有两种常用的合成策略。具有含硫氨基酸的化合物可通过将合适的含硫氨基酸结合到如上所述的标准化学合成方法中来直接合成，或通过对合适的含硫醇的肽前体进行选择性地官能化，如有必要，对合成的含硫醚的肽进行选择性地氧化来间接合成。在存在多种有机官能团的情况下，选择性地官能化游离硫醇(例如，选择性的烃化、酰化、形成二硫化物等)的方法对熟练技术人员是公知的，如将硫化物氧化成亚砜(例如，NaBO₃、乙腈：水，NaIO₄、乙腈：水，等)和砜(例如，H₂O₂、HCO₂H)的方法。

4.4对本发明化合物的分析

本领域技术人员应理解本文所述测定化合物活性的体外和体内实验是示例性的而不是全面的。

4.4.1对内皮细胞迁移的分析

对于内皮细胞(EC)迁移，通过可转移孔(transwell)加入200μL胶原蛋白溶液用I型胶原(50μg/mL)包被所述可转移孔，然后在37℃保温过夜。将所述可转移孔置于24-孔板中，并将化学引诱剂(例如FGF-2)加入底部小室中总体积为0.8mL的介质中。将EC诸如人脐静脉内皮细胞(HUVEC)用胰蛋白酶从单层培养物分离出来以后，用无血清培养基将其稀释到终浓度约10⁶细胞/mL，并将0.2mL这种细胞悬液加入每个可转移孔的上方小室中。可将待检测的抑制物加入上方和下方的小室，并在潮湿环境下在37℃允许迁移持续5小时。将所述可转移孔从24-孔板中取出并用DiffQuik^染色。用棉签刮落去除上方小室中没有迁移的细胞，并将膜剥离，覆于载玻片上，在高倍视野(400x)下计数以确定发生迁移的细胞数目。

4.4.2抗侵入活性的生物分析

诸如EC或肿瘤细胞(例如，PC-3人前列腺癌)等的细胞在已知为Matrige^侵入实验系统的实验中侵袭穿过重构的基底膜(Matrigel^)的能力已经在现有技术中详细描述(Kleinman et al.，Biochemistry 1986，25：312-318；Parish et al.，1992，Int.J.Cancer 52：378-383)。Matrigel^是一种重构的基底膜，它含有IV型胶原，层粘连蛋白，硫酸肝素蛋白多糖诸如基底膜蛋白多糖。Matrigel^可结合并使bFGF，玻璃粘连蛋白(vitronectin)以及转化型生长因子-β(TGFβ)，尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)，组织纤溶酶原激活物(tPA)以及已知为I型纤溶酶原激活物抑制物(PAI-1)的丝氨酸蛋白酶抑制剂(serpin)(Chambers et al.，Canc.Res.1995，55：1578-1585)局部化。本领域认可对靶向细胞外受体或酶化合物的这种测定法所得的结果可预测这些化合物在体内的效力(Rabbani et al.，Int.J.Cancer 1995，63：840-845)。

所述测定法采用可转移孔组织培养插入物。侵袭性细胞可定义为这样的细胞，其可穿过Matrigel^以及聚碳酯膜的上面(upper aspect)并粘附于该膜的底面。含有聚碳酯膜(孔径8.0μm)的可转移孔(Costar)用Matrigel^(Collaborative Research)包被，所述Matrigel^已经在无菌PBS中稀释到终浓度75μg/mL(每插入物60μL稀释的Matrigel^，并置于24-孔板的孔中。将所述膜在生物学安全的箱(biological safety cabinet)内干燥过夜然后通过加入100μL含抗生素的DMEM并在摇床上保持1小时而再水合。通过吸出从各个插入物中去除DMEM，并将0.8mL DMEM/10％FBS/抗生素加入所述24-孔板的每个孔中使得其包围可转移孔的外部(“下方小室”)。将新鲜DMEM/抗生素(100μL)，人Glu-纤溶酶原(5μg/mL)，以及任何待检的抑制物加入上方，可转移孔内部(“上方小室”)。待检测的细胞通过胰蛋白酶消化并重悬于DMEM/抗生素中，然后将其以终浓度800,000细胞/mL加入可转移孔的上方小室。将上方小室的终体积调节到200μL。将安装好的板在潮湿的、5％CO₂环境下保温72小室。保温后，固定所述细胞并用DiffQuik^(Giemsa染色)染色，然后用棉签刮擦上方小室以去除Matrigel^以及任何没有侵入穿过该膜的细胞。利用X-acto^刀片将该膜从可转移孔剥离，利用Permount^和盖玻片放置在载玻片上，然后在高倍(400x)视野下计数。发生侵入的细胞的平均数通过计数5-10个视野确定并作为抑制物浓度的函数作图。

4.4.3 抗血管增生活性的血管形成实验(Tube-FormationAssay)

内皮细胞例如可制备或购得的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)或人微血管内皮细胞(HMVEC)以2×10⁵细胞/mL的浓度与纤维蛋白原(5mg/mL)在磷酸盐缓冲的盐水(PBS)中以1∶1(v/v)比率混合。加入凝血酶(5单位/mL终浓度)并将混合物立即转移到24-孔板(0.5mL每孔)。允许纤维蛋白凝胶形成，将VEGF和bFGF(各为5ng/mL的终浓度)以及受试化合物加入所述孔。将所述细胞在37℃、5％CO₂中保温4天，在此期间计数每个孔中的细胞并将所述细胞分类为圆形的，伸长型并没有分枝，以及伸长型有一个分枝，或伸长型有两个或两个以上的分枝。结果表示为5个不同孔中每一化合物浓度的平均值。通常，如存在血管生成抑制物，细胞保持圆形或形成未分化的管(tube)(例如0或1个分枝)。本领域认可该实验可预测体内的血管生成(或抗血管生成)效力(Min et al.，Cancer Res.1996，56：2428-2433)。

在另一实验中，内皮细胞管形成(endothelial cell tube formation)在内皮细胞于Matrigel^上培养时观察到(Schnaper et al.，J.Cell.Physiol.1995，165：107-118)。内皮细胞(1×10⁴细胞/孔)被转移到Matrigel^-包被的24-孔板上，并于48小时以后定量所述管形成。通过与内皮细胞同时加入抑制物或在加入内皮细胞后的各个时间点加入抑制物来检测该抑制物。也可通过加入(a)血管生成生长因子诸如bFGF或VEGF，(b)分化刺激剂(例如，PMA)或(c)这些物质的组合刺激管形成。

不受任何理论限制，该实验通过将具体类型的基底膜呈给内皮细胞而模拟了血管生成，所述基底膜是发生迁移并分化的内皮细胞首先遭遇的基质层。除了结合的生长因子以外，在Matrigel^(以及在基底膜原位)或其蛋白水解产物中发现的基质组分也可刺激内皮细胞管形成，这使得该模型与已经描述的纤维蛋白凝胶血管生成模型(Blood et al.，Biochim.Biophys.Acta 1990，1032：89-118；Odedrat al.，Pharmac.Ther.1991，49：111-124)互补。

4.4.4对增殖抑制的分析

化合物抑制EC增殖的能力在96孔模式中测定。用I型胶原(明胶)包被该板的各孔(PBS中0.1-1mg/mL，0.1mL每孔，室温30分钟)。洗涤该板(用PBS三次)以后，将3-6,000细胞铺于每孔并允许其在内皮生长培养基(EGM；Clonetics)或M199培养基(含0.1-2％FBS)中粘附4小时(37℃/5％CO₂)。4小时末，去除所述培养基以及任何未被粘附的细胞，并将含有bFGF(1-10ng/mL)或VEGF(1-10mg/mL)的新鲜培养基加入各孔。最后加入待检测的化合物，允许该板保温(37℃/5％CO₂)24-48小时。将MTS(Promega)加入每个孔并允许其保温1-4小时。测定在490mm的吸收(与细胞数呈比例)以便确定对照孔和含有受试化合物的孔的增殖差异。利用经培养的粘附性肿瘤细胞建立类似的测定系统。然而，在该模式中省去胶原。将肿瘤细胞(例如，3，000-10,000/孔)铺板并允许其粘附过夜。将无血清培养基加入所述孔，并使得所述细胞同步化24小时。随后将含有10％FBS的培养基加入各孔以刺激增殖。待检测的化合物包含在一些孔中。24小时以后，将MTS加入该板并如上所述进行测定并读取数值。

4.4.5细胞毒性的分析

测定化合物对各种细胞类型的抗增殖和细胞毒效应，所述细胞包括肿瘤细胞，EC，成纤维细胞和巨噬细胞。这在检测已经与治疗部分诸如放射治疗剂或毒素偶联化合物时尤其有用。例如，所述化合物之一与用¹³¹I碘化的Bolton-Hunter试剂的偶联物预期可抑制表达PHSCN结合位点/受体的细胞的增殖(很可能通过诱导凋亡)。预期可对肿瘤细胞以及经过刺激的内皮细胞产生抗增殖效应，但有时所述效应不针对静止的内皮细胞或正常人皮肤纤维母细胞。在正常细胞中观察到的任何抗增殖或细胞毒效应可代表所述偶联物的非特异性毒性。常见的测定法包括将细胞以每孔5-10,000细胞的密度铺于96孔板。待检测的化合物以10x IC₅₀(结合实验中检测到的)(有赖于偶联物)的浓度加入，并允许其与所述细胞一起保温30分钟。所述细胞用培养基洗涤三次，然后将含[³H]胸苷(1μCi/mL)的新鲜培养基加入所述细胞，并允许它们在37℃、5％CO₂中保温24和48小时。在各个时间点利用1M NaOH溶解细胞，并利用β-计数仪确定每孔计数。利用MTS试剂或CyQuant^通过非放射活性法测定增殖来测定总细胞数。对于细胞毒测定(测定细胞裂解)，利用Promega96孔细胞毒试剂盒。如果没有抗增殖活性的证据，可利用TumorTACS(Genzyme)测定对凋亡的诱导。

4.4.6Caspase-3活性

化合物促进EC凋亡的能力可通过测定caspase-3的活化来确定。用I型胶原(明胶)包被P100板，并将5×10⁵EC接种于含有10％FBS的EGM中。24小时(37℃、5％CO₂中)后，用含有2％FBS，10ng/ml bFGF以及所需受试化合物的EGM置换培养基。6小时后收获细胞，在1％Triton中制备细胞裂解物，根据厂家的说明书利用EnzChekCaspase-3分析试剂盒#1(MolecularProbes)进行分析。

4.4.7.角膜血管生成模型

所用方案与Volpert et al.，J.Clin.Invest.1996，98：671-679所述基本相同。简而言之，麻醉雌性Fischer大鼠(120-140克)并且将包含Hydron^，bFGF(150nM)以及待检测化合物的沉淀(5μl)植入距边缘1.0-1.5mm角膜处的微小切口中。植入后5和7天评估新生血管形成。第7天，麻醉动物，并输注染料诸如胶态炭等对血管进行染色。随后处死动物，用福尔马林固定角膜，使角膜平整并对其进行照相来评估新生血管化的程度。新生血管可通过对总血管面积或长度成像或简单地通过对血管进行计数来定量。

4.4.8MatrizelPlug分析

该测定法基本上如Passaniti et al.，1992，Lab Invest.67：519-528所述进行。将冰冷的Matrigel^(例如，500μL)(Collaborative Biomedical Products，Inc.，Bedford，MA)与肝素(例如，50μg/ml)，FGF-2(例如，400ng/ml)以及受试化合物混合。在一些测定中，bFGF可用肿瘤细胞代替作为血管生成刺激物。将Matrigel^混合物经皮下注入4-8周龄无胸腺裸鼠腹中线附近的部位，优选每只小鼠注射3次。注入的Matrigel^形成可触知的固体凝胶。选择注射位点使得每只动物接受阳性对照栓(诸如FGF-2+肝素)，阴性对照栓(例如，缓冲液+肝素)，以及包括待检测其对血管生成的效应的化合物的栓，例如，(FGF-2+肝素+化合物)。所有处理优选以一式三份进行。在注射约7天后或其它适合观察血管生成的时间，通过颈错位处死动物。沿腹中线剥离小鼠皮肤，回收Matrigel^栓并在高分辨率下立刻扫描。将所述栓分散在水中，并在37℃保温过夜。血色素(Hb)水平利用Drabkin溶液(例如得自Sigma)根据生产商说明测定。Hb在栓中的含量是血管生成的间接测定，这是由于它反映了样品中血的量。此外，或可选，可在处死动物前对其注射0.1ml缓冲液(优选PBS)，所述缓冲液含有与荧光团偶联的高分子量葡聚糖。通过荧光计测定的、在分散的栓中的荧光量也作为该栓中血管生成的测定法。利用抗-CD31单克隆抗体(CD31是“血小板-内皮细胞粘附分子或PECAM”)的染色也可用于确定所述栓中新生血管形成和微血管密度。

4.4.9鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)血管生成分析

该测定法基本如Nguyen et al.，Microvascular Res.1994，47：31-40所述进行。含有血管生成因子(bFGF)或肿瘤细胞以及抑制物的网状物被置于8日龄鸡胚的CAM上，并在植入所述样品以后观察所述CAM3-9天。血管生成通过测定网状物中含有血管的方格的百分比来定量。

4.4.10利用MatrigelPlug分析用肿瘤细胞体内评估血管生成抑制和抗 肿瘤效果

在该实验中，将肿瘤细胞，例如3LL Lewis肺癌或大鼠前列腺癌细胞系MatLyLu的1-5×10⁶个细胞与Matrigel^混合，然后根据上文B部分所述的方案注入小鼠肋腹部。约5-7天后，可在该栓中观察到肿瘤细胞块和强血管生成反应。在真正的肿瘤环境中化合物的抗肿瘤和抗血管生成作用可通过将该化合物包含在所述栓中进行评估。然后测定肿瘤重量，Hb水平或荧光水平(对于处死前注入的葡聚糖-荧光团偶联物)。为测定Hb或荧光，所述栓首先用组织匀浆器匀浆化。

4.4.11皮下(s.c.)肿瘤生长的异种移植模型

用MDA-MB-231细胞(人乳癌)或另一种适宜的人肿瘤细胞系以及Matrigel^(0.2mL中有1×10⁶细胞)皮下接种动物的右肋腹侧。肿瘤生长到200mm³，用开始用受试化合物的治疗(100μg/动物/天，q.b.IP给药)。每隔一天测定肿瘤体积并在治疗2-6周后处死动物。切下肿瘤，称重并用石蜡包埋。肿瘤的组织切片通过苏木精伊红，抗-CD31，Ki-67，TUNEL，CD68或其它免疫组织化学染色进行分析。

4.4.12转移的异种移植模型

利用实验转移模型检测化合物对晚期转移的抑制(Crowley et al.，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 1993，905021-5025)。晚期转移涉及的步骤有：肿瘤细胞的附着和溢出，局部侵入，种植，增生和血管生成。用转染了报道基因(优选绿色荧光蛋白(GFP)基因)的人前列腺癌细胞(PC-3)接种裸鼠，所述细胞也可用编码酶氯霉素乙酰转移酶(CAT)，萤光素酶或LacZ的基因转染。该方法允许利用这些标记物(GFP的荧光检测或酶活性的组织化学比色检测)来追踪这些细胞的命运。注入所述细胞，优选静脉内，约14天后鉴定转移，具体是在肺中但也见于局部淋巴结，股骨和脑。这模拟了人前列腺癌天然出现的转移的器官向性。例如，表达GFP的PC-3细胞(1×10⁶细胞每只小鼠)经静脉注入裸(nu/nu)小鼠的尾静脉。用受试化合物以100μg/动物/天、q.d.IP给药对动物进行处理。单个转移细胞和病灶通过荧光显微镜或光学显微镜组织化学法或通过研磨组织以及对可检测标记的定量比色测定得以定量。

4.4.13.通过PHSCN和功能衍生物体内自发性转移的抑制

大鼠同基因的乳癌系统采用Mat BIII大鼠乳癌细胞(Xing et al.，Int.J.Cancer 1996，67：423-429)。将肿瘤细胞，例如约10⁶悬浮于0.1mL PBS中，接种于雌性Fisher大鼠的乳腺脂肪垫中。接种时，将14-日Alza渗透微型泵植入腹腔内以分散受试化合物。该化合物溶于PBS(例如，200mM母液)中，经无菌过滤并置于微型泵中以达到约4mg/kg/天的释放率。对照动物接受微型泵中的单独的载体(PBS)或载体对照肽。约14天时处死动物。在用本发明化合物治疗的大鼠中，观察到原代肿瘤的体积以及脾、肺、肝、肾和淋巴结中的转移数(作为分离病灶计数)明显减小。组织学和免疫组织化学分析显示，受处理动物肿瘤中坏死和细胞程序死亡迹象增加。大的坏死区可见于缺乏新生血管化的肿瘤中。与¹³¹I偶联的人或兔PHSCN及其衍生物(每个分子肽1或2个原子)是有效的放射治疗剂，并发现它们的效力为未偶联的多肽的效力的至少两倍。反之，利用对照肽进行处理不能导致肿瘤体积或转移的明显改变。

4.4.14.3LLLewis肺癌：原发肿瘤生长

该肿瘤系作为C57BL/6小鼠中的肺癌自发出现(Malave等，J.Nat′l.Canc.Inst.1979，62：83-88)。其通过皮下(sc)接种在C57BL/6小鼠中传代而得以增殖，并在半同种异体的C57BL/6×DBA/2F1小鼠或同种异体C3H小鼠中检测。通常对于皮下(sc)植入为6只动物一组，对于肌内(im)植入为10只动物一组。将肿瘤作为2-4mm的片段皮下植入，或作为约0.5-2×10⁶细胞的悬浮细胞接种物肌内或皮下植入。植入24小时后开始治疗，并持续到具体体积的肿瘤(通常约400mg)可触知。每天ip给药受试化合物，持续11天。

通过测体重，触诊，和肿瘤体积测定对动物进行随诊。在肌内接种后第12天未经治疗的对照受试鼠中肿瘤的重量通常为500-2500mg。通常，半数存活时间为18-28天。使用阳性对照化合物例如环磷酰胺，其以20mg/kg/注射每天、在第1-11天使用。计算出的结果包括平均动物体重，肿瘤体积，肿瘤重量，存活时间。为了确定治疗活性，受试化合物应在两次多剂量测定中检测。

4.4.15  3LL Lewis肺癌：原代生长和转移模型

该实验在本领域已知(Gorelik et al.，J.Nat′l.Canc.Inst.1980，65：1257-1264；Gorelik et al.，Rec.Results Canc.Res.1980，75：20-28；Isakov et al.，Invasion Metas.2：12-32(1982)；Talmadge et al.，J.Nat′l.Canc.Inst.1982，69：975-980；Hilgard et al.，Br.J.Cancer 1977，35：78-86)。受试小鼠为雄性C57BL/6小鼠，2-3月龄。皮下，肌内或足垫内植入后，该肿瘤发生转移，

优选在肺内。对于一些肿瘤系，原代肿瘤显示抗转移效应并且必须在研究转移期之前必须首先被切除(见美国专利5,639,725)。

单细胞悬浮物可通过用0.3％胰蛋白酶溶液处理切碎的肿瘤组织从实体瘤制备。细胞用PBS(pH7.4)洗涤3次，并悬于PBS中。以这种方式制备的3LL细胞存活率通常为约95-99％(通过锥虫蓝染料排除检测)。悬浮于0.05mlPBS中的存活的肿瘤细胞(3×10⁴-5×10⁶)经皮下注入C57BL/6小鼠的背部或一后足垫中。可见到的肿瘤在背部sc注入10⁶细胞以后3-4天出现。肿瘤出现的日子和所建立的肿瘤的直径每两天用卡钳测定。将所述治疗作为每周的1-5个剂量的肽或衍生物给药。另一实施方案中，所述肽通过渗透微型泵递送。

在涉及背部肿瘤的肿瘤切除的实验中，当肿瘤体积达约1500mm³时，将小鼠随机分成两组：(1)原代肿瘤完全切除；或(2)进行假手术并保持肿瘤完整。尽管500-3000mm³的肿瘤抑制转移物的生长，1500mm³是可被安全切除且生存率较高而不会有局部再生长的原代肿瘤的最大体积。21天后，处死所有小鼠并进行尸检。

取出肺并称重。在Bouin′s溶液中固定肺，并记录可见转移的数量。转移物的直径也利用装置有含千分尺的双目镜立体镜(binocular stereoscope)在8倍放大率下通过目视测定。在记录的直径的基础上，可能计算每处转移物的体积。为测定每个肺中的转移物总体积，用可观察到的转移物的平均数乘以转移物的平均体积。为了进一步测定转移物生长，可测定¹²⁵IdUrd掺入肺细胞(Thakur et al.，J.Lab.Clin.Med.1977，89：217-288)。肿瘤切除10天后，将25μg荧光脱氧尿苷接种到带有肿瘤的腹膜中(并且如果使用为肿瘤切除后的小鼠)。30分钟后，给予小鼠1μCi¹²⁵IdUrd(碘代脱氧尿苷)。一天后，去除肺和脾并称重，利用γ计数器测定¹²⁵IdUrd掺入的程度。

有具有足垫肿瘤的小鼠中，当肿瘤直径达约8-10mm时，将小鼠随机分成2组：(1)在膝关节以上结扎后截除具有肿瘤的腿；或(2)使小鼠作为不进行切除的带有未切除肿瘤的对照。(切除肿瘤携带型小鼠中的无肿瘤腿对于随后的转移没有已知的影响，这排除了麻醉，应激或手术的可能影响)。截肢后10-14天处死小鼠。如上所述评估转移。

统计学：代表转移发生率以及其在肿瘤携带型小鼠肺内的生长的值并非正态分布。因此，非参数统计学诸如Mann-Whitney U-检验可用于分析。

Gorelik et al.对该模型的研究(见上文)显示肿瘤细胞接种物的体积决定了转移生长的程度。接受手术后小鼠肺内转移的速率与携带原代肿瘤的小鼠中的转移速率不同。因此，在于其中诱导了原代肿瘤的小鼠肺中，转移物数量低于未经手术的肿瘤携带型小鼠中的转移物数量，但前者的转移物体积高于未经手术的对照鼠中的转移物体积，所述原代肿瘤的诱导使通过接种大量3LL细胞(1-5×10⁶)然后手术切除来进行的。利用¹²⁵IdUrd掺入作为肺转移的测定法，没有发现肿瘤切除的小鼠和肿瘤携带型小鼠的肺之间有显著差异，所述小鼠最初用10⁶3LL细胞接种。切除接种10⁵肿瘤细胞后产生的肿瘤显著加速转移物生长。这些结果与切除局部肿瘤后小鼠的存活一致。切除局部肿瘤后转移物生长加速的现象已经反复观察到(例如见美国专利5,639,725)。这些观察提示接受癌症手术的患者的预后。

4.4.15与DU145前列腺癌细胞的竞争结合分析

这可以在6倍浓度的肽中进行以确定IC₅₀。这个分析是生物学活性的替代标记。简要地，通过与胰蛋白酶简短的温育收获DU145细胞，添加需检测的肽衍生物(竞争剂)和标准的肽，悬浮液在4℃搅动2小时。沉淀细胞，吸出上清液，添加PBS，重复该过程三次(洗涤)。添加HPR-链霉抗生物素蛋白，容许结合，继之以第二系列的洗涤步骤。添加适当的HRP底物并在之前定义的反应的线性部分内显色。

4.4.16人内皮细胞(HUVEC)增殖分析

该分析在96孔测定上进行48小时。简要地，HUVEC(Cascade Biologicals)在包含2％FBS的M200中培养过夜。第二天，将3,000细胞铺板到明胶包被的96孔平板的每个孔中。容许细胞附着和蔓延4-6小时，之后将培养基用包含2％FBS、1ng/ml FGF-2和不同浓度的特定测试化合物的新鲜培养基替换。然后再培养细胞48小时，在每个孔中的相应细胞数目利用Cell TiterAqueous Cell Proliferation Assay(Promega)确定。结果是一IC₅₀，能与标准化合物对比。这是个反映肽衍生物针对它们的靶细胞的生物学功能的测定。

4.4.17剂量范围和动力学

将四种剂量的肽(2、4、8和10μCi用于生物分布(biodistribution)，和10、50、100和200μCi用于γ闪烁照相术)通过尾静脉注射到携带肿瘤(B16F10黑素瘤细胞)(200-300mm³)的C57B 1/6小鼠中。首先和其次测量最低的和最高的肽剂量。因而，可能根据最初获得的结果修改需测试的肽衍生物的剂量。

(组1，剂量测定法(Dosimetry)3只动物/剂)在给予¹²⁵I标记的肽之后2小时处死动物。然后移除肿瘤(理论的高值)和心脏(理论的低值)并对放射活性计数。

(组2，γ闪烁照相术3只动物/剂)麻醉动物，在注射¹²⁵I放射性标记的肽后2小时成像(γ闪烁照相术)。根据这些结果选择肽剂量。

4.4.18成像可行性

¹²⁵I标记的肽以节4.4.17中的方法确定的剂量通过尾静脉注射到携带肿瘤(200-300mm³肿瘤)的小鼠中。三只小鼠在0.5h、1h、2h、4h、6h、24h和48h每个时间点进行麻醉和成像，这将确定成像的最佳时间。作为对照，以100倍摩尔的过量的未标记的肽与¹²⁵I标记的肽共同注射，来证明两个种类的等价(equivalency)。

4.5重组DNA方法

文献中已经充分地描述了分子生物学的一般方法(Sambrook，等，Molecular Cloning：A Laboratory Manual，2nd(or later)Edition，Cold SpringHarbor Press，Cold Spring Harbor，NY，1989；Ausube等，Current Protocolsin Molecular Biology，Vol.2，Wiley-Interscience，New York，(当前版本)；Kriegler，Gene Transfer and Expression：A Laboratory Manual(1990)；Glover，DM，editor，DNA Cloning：A Practical Approach，vol.I & II，IRL Press，1985；Alberts等，Molecular Biology of the Cell，2nd(or later)Ed.，Garland Publishing，Inc.，New York，NY(1989)；Watson等，Recombinant DNA，2nd(or later)Ed.，Scientific American Books，New York，1992；和Old等，Principles of GeneManipulation ：An Introduction to Genetic Engineering，2nd(or later)Ed.，University of Califomia Press，Berkeley，CA(1981))。

除非另有陈述，特定的核酸序列意思是其包含保守性替换的变体(例如，简并密码子替换)和互补序列。术语“核酸”与“多核苷酸”同义，意思是包括基因基因、cDNA分子、mRNA分子，以及这些中任何一个的片段例如寡聚核苷酸，进一步的，包括其等同物(下文中更充分的解释了)。核酸的大小按照千碱基(kb)或碱基对(bp)表示。这些是从琼脂糖或聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)测定的，来自用户确定的或公开的核酸序列。蛋白大小按照分子量以千道尔顿(kDa)或按照长度(氨基酸残基数量)表示。蛋白大小是从PAGE测定的，来自序列、来自以编码核酸序列为基础推定的氨基酸序列、或来自公开的氨基酸序列。

特别地，编码相应于本发明的肽多聚体的氨基酸序列的DNA分子，或其活性变体，可利用衍生自此处公开的蛋白序列的引物通过聚合酶链式反应(PCR)(参见，例如，美国专利No.4,683,202)来合成。然后可将这些cDNA序列装配到真核或原核表达载体中，得到的表达载体可用于通过适当的宿主细胞，例如COS或CHO细胞，指导融合多肽或其片段的合成。

本文术语“核酸”意图包括所述片段或等同物。本发明的核酸序列可为DNA或RNA。经转化或转染而表达所述多聚物的原核或真核宿主细胞在本发明的范围内。例如，所述多肽多聚物可表达在以下细胞中：细菌细胞诸如大肠杆菌，昆虫细胞(杆状病毒)，酵母或哺乳动物细胞诸如中国仓鼠卵巢细胞(CHO)或人细胞(优选用于经转染的细胞对人类的治疗)。本领域已知其它适宜的宿主。在真核细胞中的表达导致重组多肽的部分或完全糖基化和/或相关链间或链内二硫键形成。在酵母酿酒酵母(S.cerevisiae)中表达的载体的实例包括pYepSecl(Baldari et al.，1987，EMBO J.6：229-234)，pMFa(Kurjan et al.，1982 Cell 30：933-943)，pJRY88(Schultz et al.，1987，Gene 54：113-123)，和pYES2(Invitrogen Corporation，San Diego，Calif.)。用于在培养的昆虫细胞(SF9细胞)中表达蛋白的杆状病毒载体包括pAc系列(Smith et al.，1983，Mol.CellBiol.3：2156-2165)和pVL系列(Lucklow et al.，(1989)Virology 170：31-39)。通常，COS细胞(Gluzman，1981Cell 23：175-182)与诸如pCDM8的载体联用(Aruffo et al.，见上文)，用于在哺乳动物细胞中的瞬时扩增/表达，而CHO(dhfr-阴性CHO)细胞与诸如pMT2PC(Kaufman et al.，1987，EMBO J.6：187-195)的载体联用，用于在哺乳动物细胞中稳定扩增/表达。NSO骨髓瘤细胞系(谷氨酰胺合成酶表达系统)可得自Celltech Ltd。

含有所需编码和对照序列的适宜载体的构建采用标准连接和限制技术，所述技术是本领域已知的。分离的质粒，DNA序列或合成的寡核苷酸被切割，剪接，并以所需形式进行再连接。形成载体的DNA序列可得自多种来源。骨架载体(backbone vector)和对照系统通常可见于可得“宿主”载体，所述载体用于构建中的大部分序列。对于相关编码序列，初始构建可以并通常是从cDNA或基因组DNA文库获取适宜序列。然而，一旦所述序列被公开，可能从单个核苷酸衍生物开始在体外合成整个基因序列。大小可测定(例如500-100bp)的基因的整个基因序列可通过以下方法制备：合成单个重叠互补寡核苷酸，利用DNA聚合在存在脱氧核糖核苷酸三磷酸的条件下填满单链非重叠部分。该方法已经成功用于构建已知序列的数种基因。见例如Edge，Nature 1981，292：756；Nambair et al.，Science 1984，223：1299；and Jay，J Biol.Chem.1984，259：6311。

合成寡核苷酸可通过磷酸三酯法(如上述文献所述)或亚膦酰胺法(如Beaucage et al.，Tetrahedron Lett.1981，22：1859；和Matteucci et al.，J.Am.Chem.Soc.1981，103：3185所述)制备，并可利用可购得的自动化寡核苷酸合成仪制备。退火以前或为了标记而用激酶处理单链可利用已知方法实现。

一旦所需载体的组分可得，可利用标准限制和连接方法切下所述组分并连接。位点特异性DNA切割通过用适宜的一或多种限制酶在本领域通常理解的条件下进行处理来实施，其细节由这些可购得的限制酶的生产商说明。见，例如，New England Biolabs，产品目录。如需要，经切割的片段的大小分离可通过聚丙烯酰胺凝胶或琼脂糖凝胶利用标准技术实施。大小分离的常见描述见于Meth.Enzymol.(1980)65：499-560。

可用于将突变导入编码序列以产生变体的多种方法中的任何一种都可使用，条件是所述变体是重组产生的。这些突变包括简单的缺失或插入，碱基簇的系统性缺失，插入或取代或者单个碱基的取代。DNA序列的修饰可通过定点诱变这种已知的技术(其方案和试剂可购得)产生(Zoller et al.，Nucleic Acids Res.1982，10：6487-6500和Adelman et al.，DNA1983，2：183-193))。所述分离的DNA通过限制分析和/或通过Sanger，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 1977，74：5463)所述以及Messing et al.，Nucleic Acids Res.1981，9：309进一步描述的双脱氧核苷酸法，或通过Maxam et al.，Meth.Enzymol.所述的方法(见上文)进行测序。

载体DNA可通过常规技术而被导入哺乳动物细胞中，所述技术诸如磷酸钙或氯化钙共沉淀，DEAE-葡聚糖介导的转染，脂转染或电穿孔。转化宿主细胞的适宜方法见于Sambrook等(上文)以及其它标准教科书。在融合表达载体中，将蛋白水解位点引入报道物组和靶蛋白的接点以便在纯化该融合蛋白后将该靶蛋白从报道物组中分离出来。用于这种裂解的蛋白水解酶以及其识别序列包括因子Xa，凝血酶以及肠激酶。

4.6治疗用途

根据本发明，将本发明的化合物和/或其药物组合物施予遭受癌症或以血管生成为特征的疾病的病人，优选的人。本发明的化合物和/或其药物组合物可用来治疗或预防癌症或非期望的血管生成。

优选，特征为异常血管化的疾病包括癌症(例如，任何血管化的肿瘤，优选实体瘤，包括但不限于肺癌、乳腺癌、卵巢癌、胃癌、胰腺癌、喉癌、食管癌、睾丸癌、肝癌、腮腺癌、胆道癌、结肠癌、直肠癌、宫颈癌、子宫癌、子宫内膜癌、肾癌、膀胱癌、前列腺癌、甲状腺癌、鳞状细胞癌、腺癌、小细胞癌、黑素瘤、胶质瘤、神经母细胞癌、肉瘤(例如血管肉瘤，软骨肉瘤))，关节炎，糖尿病，动脉硬化，动静脉畸形，角膜移植物新生血管化，伤口愈合延迟，糖尿病视网膜病，老年性黄斑病变，肉芽形成，烧伤，血友病性关节，类风湿性关节炎，肥厚性疤痕，新生血管性青光眼，不联合性骨折，Osier Weber综合征，牛皮癣，脓性肉芽肿，晶状体后纤维组织形成(retrolental fibroplasias)，翼状胬肉，硬皮病，沙眼，血管粘连，眼新生血管化，寄生虫性疾病，术后过度生长(hypertrophy following surgery)，毛发生长抑制，黄斑变性(包括湿性和干性)，类风湿性关节炎和骨性关节炎。

同样期待的是治疗病人的方法，病人具有疾病或与非期望的细胞迁移、侵入或增殖有关的情况，包括向患者施用治疗有效量的本发明的化合物和/或其药物组合物。在上述方法中，病人具有肿瘤，血管生成抑制导致该肿瘤的大小和生长率的减少或破坏该肿瘤。优选的，患者是人。

上述方法可能有效的疾病和病症的其它实例包括实体瘤的原代生长，白血病或淋巴瘤，肿瘤侵入，转移或肿瘤转移物生长；良性增生；动脉粥样硬化，心肌血管增生；球囊血管成型术后血管再狭窄，血管损伤后新生内膜形成，血管移植物再狭窄，冠脉侧枝循环形成(coronary collateral formation)，深静脉血栓，缺血性四肢血管生成；毛细管扩张，化腔性肉芽肿，角膜疾病，虹膜红变(rubeosis)，新生血管性青光眼(neovascular glaucoma)，糖尿病性和其它视网膜病，晶状体后纤维组织形成，糖尿病性新生血管化，黄斑变性，子宫内膜炎，关节炎，与慢性炎性疾病相关的纤维化，外伤性脊髓损伤包括缺血、疤痕形成和纤维化，肺纤维化，化疗诱导的纤维化；外伤愈合同时的疤痕形成和纤维化，胃溃疡，骨折，瘢痕瘤，或血管生成性疾病，血细胞生成性疾病，与病理性细胞侵入或血管生成相关的排卵，月经，妊娠或胎盘形成。

优选用上述方法治疗的疾病或病症是肿瘤生长，侵入或转移，具体是脑肿瘤。这种脑肿瘤的实例是星形细胞瘤，恶性星形细胞瘤(anaplasticastrocytoma)。胶质母细胞瘤，多形性胶质母细胞瘤，纤维状细胞性星形细胞瘤(pilocytic astrocytoma)，多形性黄色星形细胞瘤(pleiomorphicxanthoastrocytoma)，室管膜下巨细胞星形细胞瘤(subependymal giant cellastrocytoma)，原纤维性星形细胞瘤(fibrillary astrocytoma)，肥胖细胞型星形细胞瘤(gemistocytic astrocytoma)，原浆型星形细胞瘤(protoplasmicastrocytoma)，寡突胶质瘤(oligodendroglioma)，分化不良性寡突胶质瘤(anaplastic oligodendroglioma)，室管膜瘤(ependymoma)，分化不良性室管膜瘤(anaplastic ependymoma)，粘液乳头状室管膜瘤(myxopapillaryependymoma)，室管膜下瘤(subependymoma)，混合型寡星形细胞瘤(mixedoligoastrocytoma)和恶性寡星形细胞瘤(malignant oligoastrocytoma)。

上述方法也可用于治疗子宫疾病诸如子宫内膜易位以及病理性眼新生血管化，后者与以下疾病相关或导致以下疾病：增生性糖尿病性视网膜病(proliferative diabetic retinopathy)，新生血管性老年性黄斑病变(neovascularage-related macular degeneration)，幼年视网膜病(retinopathy of prematurity)，镰刀细胞视网膜病(sickle cell retinopathy)或视网膜静脉堵塞(retinal veinocclusion)。

此外，在具体的实施方案中，将化合物和/或其药物组合物给药患者，优选人，作为针对以异常血管化为特征的各种疾病或病症的预防性措施。因此，可将化合物和/或其药物组合物作为预防性措施给予患者，所述患者具有患以异常血管化为特征的疾病的倾向。因此，所述化合物和/或其药物组合物可用来预防一种疾病或病症同时治疗另一种(例如在治疗癌症的同时预防关节炎)。

本发明的化合物和/或其药物组合物在治疗或预防各种疾病或失调例如癌症方面的适用性，可通过此处和文献中描述的方法来测定。因此，测定和使用本发明的化合物和/或其药物组合物来治疗或预防疾病或失调例如癌症，是本领域技术人员能力所及的。

4.7诊断用途和方法

将本发明的化合物和/或其药物组合物以诊断有效量施予病人，优选的人，来检测疾病或反映疾病，疾病例如上述5.6节中列出的。进一步的，可通过施予患者诊断有效量的本发明的化合物和/或其药物组合物，将本发明的化合物和/或其药物组合物用于检测或反映与非期望的细胞迁移、侵入或增殖有关的疾病或情况，例如上述节5.6中列出的那些。

化合物可被诊断性标记并用于例如检测细胞迁移，细胞侵入和细胞增生。在结合期间和结合后化合物的分布可利用适宜方法检测所述标记而在体外或体内追踪。诊断性标记的化合物可用于体内来进行诊断和预后，例如用来显示潜隐的转移灶或用于其它类型的原位评估。对于诊断应用，化合物可包括结合的接头部分，这是本领域技术人员已知的。

被标记的化合物的原位检测可通过从受试者取出组织学样品，并通过显微镜在适宜条件下检测所述样品以检测所述标记来实施。本领域技术人员可轻易理解多种组织学方法(诸如染色方法)的任一种可被修饰以便实现所述原位检测。

对于诊断性体内放射显影，可用的检测装置的类型是选择放射性核素中的主要因素。所选放射性核素必须具有一种类型的衰变，所述衰变可通过具体的装置检测。通常，任何用于显示诊断性显像的常规方法可根据本发明使用。选择放射性核素用于体内诊断的另一因素是其半寿期要足够长，以便使得在靶组织的最大吸收时仍可检出该标记，但同时也足够短使得对宿主有害的辐射被最小化。在一个优选实施方案中，用于体内显像的放射性核素不发射粒子，但产生大量140-200keV范围内的光子，其可通过常规γ照相机轻易检测。

体内显像被用于检测潜隐的转移，其不能通过其它方法检出。本发明的化合物可用于对所需动物种类的任何适宜的细胞、组织、器官或生物样品进行诊断、预后或研究步骤。术语“生物样品”指来自正常或患病受试者的身体的任何液体或其它物质，诸如血液，血清，血浆，淋巴液，尿液，唾液，泪液，脑脊液，乳汁，羊膜液，胆汁，腹水，脓液等。该术语还包括器官或组织提取物以及培养液，来自受试者的任何细胞或组织制备物已经在其中保湿。

有用的剂量被定义为化合物对于具体诊断措施的有效量。因此，有效量指足以利用适宜检测系统例如磁共振显像检测仪，γ照相机等而被检出的量。最低可检出量有赖于与肿瘤(信号)特异性结合的经标记化合物的量与非特异性结合或游离于血浆或细胞外液中的标记的化合物的量之比。

待给药的组合物量有赖于所选的具体组合物，疾病或病症，给药途径，显像领域技术人员的判断。通常，用于诊断的化合物的可检测量有赖于如下因素：诸如患者年龄，疾病，性别以及患病程度，禁忌病(如果有的话)，以及其它变量，并可通过个体内科医师或诊断医师来调节。剂量可为0.01mg/kg-100mg/kg。

4.8治疗性的/预防性的给药

本发明化合物和/或其药物组合物可以有利地应用在人类药物中。如在上述4.6节描述的，本发明的化合物和/或其药物组合物对于治疗或预防各种疾病或失调例如癌症是有用的。

当用于治疗或预防上述疾病或病症时，化合物和/或其药物组合物可单独给药或应用，或与其它试剂联合用药。所述化合物和/或其药物组合物也可单独给药或应用，与其它药物活性剂(例如，其它抗癌药剂，其它抗血管生成药剂诸如鳌合剂例如锌，青霉胺，thiomolybdate等)，包括其它化合物联用。

本发明提供通过给药患者治疗有效量的化合物和/或其药物组合物来治疗或预防的方法。所述患者可以是动物，更优选是哺乳动物，更优选是人。

本发明的化合物和/或其药物组合物可口服给药。所述化合物和/或其药物组合物也可通过任何其它常规途径给药，例如通过输注或药团推注，通过上皮或粘膜皮肤层(例如口腔粘膜，直肠和小肠粘膜等)吸收。给药可为系统或局部的。各种递送系统(例如包囊化在脂质体、微粒、微胶囊、胶囊等中)也可用于给药化合物和/或其药物组合物。给药方法包括，但不限于，经皮内，经肌内，经腹腔内，经静脉内，经皮下，经鼻内，经硬膜外，口服，经舌下，经鼻内，经脑内，经阴道内，透皮，经直肠，通过吸入或局部给药，具体可给药耳，鼻，眼或皮肤。给药的优选模式由实施者来判断，并部分有赖于给药位点的情况。在大多数情况下，给药将导致所述化合物和/或其药物组合物释放到血液中。

在具体实施方案中，需要将一或多种化合物和/或其药物组合物局部给药需要治疗的区域。这可通过，例如但不限于以下途径实现：在手述过程中局部输注，局部应用，例如术后与伤口敷料一同应用，通过注射，经导管，经由栓剂，或经由植入物，所述植入物为多孔的、无孔的或凝胶状物质，包括膜诸如sialastic膜，或纤维。一个实施方案中，给药可通过在癌症或关节炎位点(或模型(former)位点)直接注射给药。

在具体实施方案中，可将一或多种化合物和/或其药物组合物通过任何适宜途径(包括经脑室内，经鞘内和经硬膜外注入)导入中枢神经系统。经脑室内诸如可通过例如附着于脑池诸如Ommaya脑池的脑室内导管而得以易化。

化合物和/或其药物组合物也可通过吸入直接给药肺。对于通过吸入给药，化合物和/或其药物组合物可通过多种不同装置方便地给药肺。例如，计量的剂量吸入器(Metered Dose Inhaler)(″MDI″)，其利用含有适宜低沸点推进剂(例如，二氟二氯甲烷，三氯氟甲烷，二氯四氟乙烷，二氧化碳或任何其它适宜气体)的罐可被用于将化合物直接递送给肺。

可选，干粉吸入器(Dry Powder Inhaler)(″DPI″)装置可用于将化合物和/或其药物组合物给药肺。DPI装置通常利用这样的机制，其使得气体释放在容器内产生干粉云，其随后可由患者吸入。DPI装置在本领域也是已知的。常见的改变是多剂量DPI(″MDDPI″)系统，其允许递送一个以上治疗剂量。MDDPI装置可得自诸如Astra Zeneca，Glaxo Wellcome，IVAX，ScheringPlough，Skye Pharma和Vectura等公司。例如，用于吸入器或吹入器中的凝胶质胶囊和药筒可配制成含有化合物以及适宜用于这些系统的粉状基质诸如乳糖或淀粉的粉末混合物。

可用于递送化合物和/或其药物组合物其它形式的装置是例如由Aradigm Corporation，Hayward，CA提供的液体喷雾装置。液体喷雾系统利用非常小的喷嘴孔使得液体药物配制剂气溶胶化，并随后直接吸入肺。

一个实施方案中，利用雾化器将化合物和/或其药物组合物递送到肺。雾化器通过利用例如超声能量以形成可轻易吸入的细微颗粒而从液体药物配制剂产生气溶胶(见例如，Verschoyle et al.，British J.Cancer，1999，80，Suppl.2，96，包含在本文作为参考)。雾化器的实例包括Batelle PulmonaryTherapeutics，Columbus，OH(见，Armer et al.，美国专利5,954,047；van derLinden et al.，United States Patent No.5,950,619；van der Linden et al.，美国专利5,970,974)提供的装置。

另一实施方案中，电流体力学(electrohydrodynamic)(″EHD″)气溶胶装置用于将化合物和/或其药物组合物递送到肺。EHD气溶胶装置利用电能将液体药物溶液或悬液气溶胶化(见例如，Noakes et al.，美国专利4,765,539)。所述配制剂的电化学性质在利用EHD气溶胶装置将化合物和/或其药物组合物递送到肺时是重要的可优化参数，且所述优化通常由本领域技术人员实施。EHD气溶胶装置可比已知的肺递送技术更有效地将药物递送到肺。

另一实施方案中，所述化合物和/或其药物组合物可在囊泡具体是脂质体中递送(见Langer，1990，Science，249：1527-1533；Treat et al.，in″Liposomesin the Therapy of Infectious Disease and Cancer，″Lopez-Berestein andFidler(eds.)，Liss，New York，pp.353-365(1989)；一般地见″Liposomes in theTherapy of Infectious Disease and Cancer，″Lopez-Berestein and Fidler(eds.)，Liss，New York，pp.353-365(1989))。

另一实施方案中，所述化合物和/或其药物组合物可经由持续释放系统优选口服持续释放系统来递送。一个实施方案中，可利用泵(Langer，supra；Sefton，1987，CRC Crit.Ref.Bronzed.Eng.14：201；Saudek et al.，1989，N.Engl.JMed.321：574)。

一个实施方案中，可利用聚合物材料(见″Medical Applications ofControlled Release，″Langer and Wise(eds.)，CRC Pres.，Boca Raton，Florida(1974)；″Controlled Drug Bioavailability，″Drug Product Design andPerformance，Smolen and Ball(eds.)，Wiley，New York(1984)；Langertal.，1983，JMacromol.Sci.Rev.Macromol Chem.23：61；Levy et al.，1985，Science228：190；During et al.，1989，Ann.Neurol.25：351；Howard et al.，1989，JNeurosurg.71：105)。另一实施方案中，聚合物材料可用于口服持续释放型递送。优选的聚合物包括羧甲基纤维素纳，羟基丙基纤维素，羟基丙基甲基纤维素和羟基乙基纤维素(最优选，羟基丙基甲基纤维素)。其它优选纤维素酯已经有所描述(Alderman，Int.J.Pharm.Tech.&Prod.Mfr.1984，5(3)1-9)。影响药物释放的因素是本领域已知的并已经在现有技术中描述(Bamba et al.，Int.J.Plzarm.1979，2，307)。

另一实施方案中，肠包衣制剂可用于口服持续释放给药。优选的包衣材料包括具有pH依赖性溶解性(即，pH-控制的释放)的聚合物，具有缓慢或pH依赖性膨胀、溶解或侵蚀速率的聚合物，(即，时间控制的释放)，通过酶降解的聚合物(即，酶控制的释放)以及形成可通过压力升高而被破坏的坚固层的聚合物(即，压力控制的释放)。

在另一实施方案中，渗透性递送系统可用于口服持续释放给药(Verma etal.，Drug Dev.Ind.Pharm.2000，26：695-708)。在另一实施方案中，OROS^TM渗透装置可用于口服持续释放递送装置(Theeuwes et al.，United States Patent No.3,845,770；Theeuwes et al.，美国专利3,916,899)。

在另一实施方案中，控制释放的系统可置于所述化合物和/或其药物组合物的靶附近，由此仅需要部分系统剂量(见，例如Goodson，in″MedicalApplications of Controlled Release，″supra，vol.2，pp.115-138(1994))。其它在Langer，1990，Science249：1527-1533控制释放系统中描述的也可被使用。

4.9药物组合物

本发明的药物组合物含有治疗有效量的一或多种化合物，优选是纯化的形式，并含有适宜量的药学上可接受载体，以提供给药患者的适宜形式。当给药患者时，所述化合物以及药学上可接受的载体优选无菌。当所述化合物经静脉内给药时水是优选的载体。盐水溶液和含水葡聚糖以及甘油溶液也可用作液体赋形剂，尤其对于可注射的溶液而言更加如此。适宜的药用载体还包括赋形剂，诸如淀粉，葡萄糖，乳糖，蔗糖，明胶，麦芽糖，大米，面粉，白尘粉，硅胶，硬脂酸钠，单硬脂酸甘油，滑石，氯化钠，干燥的脱脂奶，甘油，丙烯，乙二醇，水，乙醇等。本发明的药物组合物在需要时可包括较少量的湿化或乳化剂，或pH缓冲剂。此外，辅助性的稳定剂、稠化剂、润滑剂和着色剂也可使用。

包含化合物的药物组合物也可通过常规的混合，溶解，粒化，糖衣丸制备，磨细，乳化，胶囊化，包陷或冻干法来制备。药物组合物可利用一或多种生理上可接受的载体，稀释剂，赋形剂或辅助剂以常规方式配制，所述物质可促进将化合物加工成药学上可接受的制备物。正确的配制有赖于所选给药途径。

本发明药物组合物可以是溶液，悬液，乳液，片剂，丸剂，小药丸，胶囊，含液体的胶囊，粉末，持续释放的配制剂，栓剂，乳液，气溶胶，喷雾剂，悬液或其它适宜使用的形式。一个实施方案中，所述药学上可接受的载体是胶囊(例如Grosswald et al.，美国专利5,698,155)。其它适宜的药物载体的实例也在本领域描述(见Remington′s Pharmaceutical Sciences，PhiladelphiaCollege of Pharmacy and Science，19th Edition，1995)。

对于局部给药，可将化合物配制成溶液，凝胶，油膏，乳膏，悬液等，如本领域已知的。系统性配制剂包括被设计为通过注射例如经皮下，经静脉内，经肌内，经鞘内或经腹膜内注射给药的那些，以及被设计为经皮，经粘膜，口服或对肺给药的那些。系统性配制剂可以和其它活性剂配置在一起，后者改善气道粘液的粘膜纤毛清洁作用或降低粘液粘性。这些活性剂包括，但不限于，钠通道阻断剂，抗生素，N-乙酰半胱氨酸，同型半胱氨酸和磷脂。

一个实施方案中，所述化合物根据常规方法作为用于经静脉内给药人的药物组合物进行配制。通常，用于经静脉内给药的化合物是位于无菌等张含水缓冲液中的溶液。为了注射，化合物可配制在含水溶液中，优选在生理上相容的缓冲液诸如Hank′s溶液，林格氏液，或生理盐水缓冲液中。所述溶液可含有配制用试剂诸如悬浮化，稳定化和/或分散化剂。必要时，所述药物组合物还可包含增溶剂。用于经静脉内给药的药物组合物可选包括局部麻醉剂诸如利多卡因来缓解注射部位的疼痛。通常，所述成分可分别给药或混合在单位剂型中给药，例如作为在标有活性剂的量的密封容器诸如安瓿或小袋中的冻干的粉末或无水浓缩物。当所述化合物通过输注给药时，其可用含有无菌的药用级水或盐水的输注瓶配制。当化合物通过注射给药时，可提供含注射用无菌水或盐水的安瓿使得所述成分在给药前得以混合。

对于经粘膜给药，适宜待穿透屏障的穿透剂被用于配制剂中。这种穿透剂通常是本领域已知的。

用于口服给药的药物组合物的形式可以是例如片剂，锭剂，含水或含油悬液，颗粒，粉末，乳剂，胶囊，糖浆或酏剂。口服给药的药物组合物可含有一或多种可选试剂，例如甜味剂诸如果糖，天冬氨酰苯丙氨酸甲酯或糖精；调味剂诸如薄荷油，冬青油，或樱桃色着色剂以及防腐剂，以提供药学上可口的制备物。此外，当为片剂或丸剂形式时，所述组合物可被包被以延缓在胃肠道的崩解和吸收，从而在延长的时间内提供持续的作用。包绕渗透活性驱动化合物的选择性可渗透膜也适宜口服给药用化合物。在这些后述的平台(platform)中，来自所述胶囊周围环境的液体被所述驱动化合物吸收，后者膨胀并通过开口取代所述药剂或药剂组合物。这些递送平台可提供基本上0级递送图谱(zero order delivery profile)，这与立即释放的配制剂的有峰的图谱相反。时间延迟物质诸如单硬脂酸甘油或硬脂酸甘油也可使用。口服组合物可包括标准载体，诸如甘露醇，乳糖，淀粉，硬脂酸镁，糖精钠，纤维素，碳酸镁等。所述载体优选是药用级别的。

对于口服液体制备物诸如悬液，酏剂和溶液，适宜的载体，赋形剂或稀释剂包括水，盐水，亚烷基甘油(例如丙二醇)，聚亚烷基甘油(例如聚丙二醇)油，乙醇，微酸性的缓冲液(pH4-6)(例如约5.0mM-约50.0mM的乙酸，柠檬酸，抗坏血酸盐)等。此外，可加入调味剂，防腐剂，着色剂，胆盐，酰基肉毒碱等。

对于经颊给药，所述药物组合物可以为片剂，锭剂等形式，其可以常规方式配制。

适宜通过雾化器和液体喷雾装置以及EHD气溶胶装置使用的液体药物配制剂通常包括具有药学上可接受载体的化合物。优选，药学上可接受的载体是液体诸如乙醇，水，聚乙二醇或全氟碳。可选，可加入另一种物质来改变所述化合物的溶液或悬液的气溶胶性质。优选，该物质是液体，诸如乙醇，乙二醇，聚乙二醇或脂肪酸。其它配制适宜用于气溶胶装置的液体药物溶液或悬液的方法是本领域已知的(见，例如，Biesalski，美国专利5,112,598；Biesalski，美国专利5,556,611)。

化合物也可配制成直肠或阴道用药物组合物，诸如栓剂或储留型灌肠剂(retention enema)，例如含有常规栓剂基质诸如可可油或其它甘油酯。

除了前述配制剂以外，化合物也可配制成储留型制备物。所述长期作用的配制剂可通过植入(例如经皮下或肌内)或通过肌内注射给药。因此，例如化合物可与适宜的聚合或疏水物质(例如作为在可接受的油中的乳剂)或离子交换树脂配制在一起，或作为几乎不溶的衍生物，例如作为几乎不溶的盐。

当化合物为酸性时，其可包含在上述配制剂任何一种当中作为游离酸或药学上可接受的盐。基本上保持游离酸的活性的药学上可接受盐可通过与碱反应制备，并其倾向于在含水和其它质子溶剂中的溶解度高于其相应的游离酸形式。

4.10剂量

本发明的化合物，或其药物组合物一般地以有效的实现预定目的的数量来使用。对于治疗或预防疾病或失调例如癌症的用途，结构式(I)的化合物和/或其药物组合物以治疗有效量施用或应用。对于检测疾病或失调例例如癌症的用途，结构式(I)的化合物和/或其药物组合物以诊断有效量施用或应用。

可有效治疗本发明公开的具体疾病的化合物的量有赖于所述疾病或病症的性质，并可通过如前所述的本领域已知的标准临床技术确定。此外，可选采用体外或体内实验来辅助鉴定优化剂量范围。所给药化合物的量当然有赖于待治疗的受试者，受试者的体重，疾痛的严重性，给药方式以及给药医师的判断和其它因素。

例如，所述剂量可通过单次给药，多次应用或有控制的释放在药物组合物中递送。一个实施方案中，通过口服持续释放给药来递送化合物。优选，一个实施方案中，本发明的化合物以每天两次(更优选每天一次)给药。可间歇性重复给药，单次给药或者与其它药物联合用药，并且如果需要对疾病状态或疾病的有效治疗可持续给药。

口服给药的适宜剂量有赖于药物的效力，但通常为约0.001mg-约200mg本发明化合物每千克体重。剂量范围可由本领域普通技术人员已知的方法轻易确定。

对于静脉内(i.v.)施用适当的剂量范围是每公斤体重约0.01mg到约100mg。对于鼻内的施用适当的剂量范围一般是约0.01mg到约1mg/公斤体重。栓剂一般地包含每公斤体重约0.01毫克到约50毫克的本发明的化合物和包含按重量计算约0.5％到约10％范围内的活性成分。对于皮内的、肌肉的、腹膜内的、皮下的、硬膜外的、舌下的、或脑内的施用，推荐的剂量在每公斤体重约0.001mg到约200mg的范围内。有效的剂量可以从来源于体外或动物模型测试系统的剂量反应曲线推断。这种动物模型和系统是本领域公知的。

如上所述，在人体使用前，优选的在体外和体内测定本发明的化合物的期望的治疗、预防或诊断活性。例如，体外测定可用来确定施用特定的本发明的化合物或本发明的化合物的组合对于治疗、预防或诊断癌症是否是优选的。也可利用动物模型系统来表明本发明的化合物是有效的和安全的。

优选的，此处描述的治疗有效剂量的本发明的化合物将提供治疗性的利益而不导致实际上的毒性。类似地，此处描述的诊断有效剂量的本发明的化合物将提供诊断性的利益而不导致实际上的毒性。本发明的化合物的毒性可以通过标准的药物程序来确定，可以由熟练技术人员容易地确定。在有毒的和治疗的效果之间的剂量比例是治疗指数。本发明的化合物优选的在治疗疾病和失调中显示特别高的治疗指数。此处描述的本发明的化合物的剂量优选的在一循环的浓度范围内，包括很小或没有毒性的有效的治疗或诊断剂量。

4.11联合治疗

在具体实施方案中，所述化合物和/或其药物组合物可与至少一种其它治疗剂联合用药。所述化合物和/或其药物组合物以及所述治疗剂的作用可为相加性的，或更优选为协同性的。一个实施方案中，化合物和/或其药物组合物可与另一种治疗剂同时给药，后者可以是相同药物组合物的一部分或不同药物组合物。另一实施方案中，药物组合物在给药另一种治疗剂以前或以后给药。

具体地，一个优选的实施方案中，化合物和/或其药物组合物可与其它化疗剂(例如，烷化剂(例如，氮芥类(nitrogen mustards)(例如，环磷酰胺，异环磷酰胺(ifosfamide)，氮芥(mechlorethamine)，美法仑(melphalen)，苯丁酸氮芥(chlorambucil)，六氯环己烷(hexamethylmelamine)，硫替派(thiotepa))，烷基磺酸盐(例如，白消安(busulfan)，亚硝基脲，三嗪类)，抗代谢物(例如，叶酸类似物，嘧啶类似物(例如，氟尿嘧啶(fluorouracil)，5-氟脱氧尿苷(floxuridine)，胞嘧啶阿拉拍糖苷(cytosine arabinoside)等)，嘌呤类似物(例如，6-巯基嘌呤(mercaptopurine)，硫代鸟嘌呤(thiogunaine)，喷司他丁(pentostatin)等)，天然产物(例如，长春花碱(vinblastine)，长春新碱(vincristine)，依托泊苷(etoposide)，tertiposide，更生霉素(dactinomycin)，柔红霉素(daunorubicin)，doxurubicin，博来霉素(bleomycin)，光辉霉素(mithnnycin)，丝裂霉素C(mitomycin C)，L-天冬酰胺酶，干扰素α)，铂配位络合物(例如，顺铂，卡铂(carboplatin)等)，光托蒽醌(mitoxantrone)，羟基脲(hydroxyurea)，丙卡巴肼(procarbazine)，激素和拮抗剂(例如，泼尼松，己酸羟孕酮(hydroxyprogesteronecaproate)，甲羟孕酮酸酯(medroxyprogesterone acetate)，醋酸甲地孕酮(megestrol acetate)，己烯雌酚(diethylstilbestrol)，炔雌醇(ethinyl estradiol)，炔雌醇(tamoxifen)，丙酸睾丸酮(testosterone propionate)，氟氢甲睾酮(fluoxymesterone)，氟他米特(flutamide)，醋酸亮丙瑞林(leuprolide)等，抗血管生成剂或抑制剂(例如，血管他丁(angiostatin)，视黄酸(retinoic acid)和紫杉醇(paclitaxel)，雌二醇衍生物(estradiol derivatives)，噻唑嘧啶衍生物(thiazolopyrimidine derivatives)等)，凋亡诱导剂(例如，阻断抑凋亡的癌基因的反义核苷酸，肿瘤抑制物，TRAIL，TRAIL多肽，Fas-结合的因子1，白介素-1β-转化酶，磷酸酪氨酸抑制剂，RXR类视黄醇受体激动剂，喹诺酮衍生物(carbostyril derivatives)等以及鳌合剂(青霉胺(penicillamine)，锌(zinc)，曲恩汀(trientine)等))。

4.12治疗试剂盒

本发明提供了治疗性试剂盒，其包含本发明的化合物和/或其药物组合物。该治疗性试剂盒也包含其它化合物(例如，化疗剂，天然产品，激素或拮抗剂，抗血管增生剂或抑制剂，凋亡诱导剂或鳌合剂)和/或这些其它化合物的药物组合物。

治疗性试剂盒具有单个容器，其含有化合物及其药物组合物，并含有或不含有其它组分(例如其它化合物或这些其它化合物的药物组合物)，或者每种组分具有单独的容器。优选，本发明的试剂盒包括化合物和/或其药物组合物，包装起来用于与第二种化合物(优选，化疗剂，天然产物，激素或拮抗剂，抗血管生成剂或抑制剂，凋亡诱导剂或鳌合剂)和/或其药物组合物的联合使用。所述试剂盒的组分可以是预先复合的(pre-complexed)或者每种组分在给药患者以前可以位于分离的不同容器中。

该试剂盒的组分可在一或多种溶液提供，所述溶液优选含水溶液，更优选无菌水溶液。该试剂盒的组分也可作为固体提供，其可通过加入适宜的溶剂而转化成液体，所述溶剂优选在另一种不同的容器中提供。

治疗性试剂盒的容器可以是管型瓶，试管，烧瓶，罐(bottle)，注射器或其它任何密闭固体或液体的装置。通常，当存在一种以上组分时，所述试剂盒含有第二个管型瓶或其它容器，其允许分别配制。该试剂盒也可含有另一容纳药学上可接受液体的容器。

优选，治疗性试剂盒将包含装置(例如，一或多个针头，注射器，滴眼剂，移液管等)，其使得能够给药该试剂盒的组分。

5.实施例

本发明还通过参考以下详细描述的实施例、本发明化合物的制备以及用于检测生物活性的方法来进一步说明。本领域技术人员应理解可对材料和方法实施许多修饰而不偏离本发明的范围。

以下实施例中，以下缩写具有以下含义。如果没有定义任何缩写，则其含义是通常接受的含义。

AcCN＝乙腈

Boc＝叔-丁基氧羰基

CPM＝每分钟计数

DMF＝N，N-二甲基甲酰胺

DMSO＝二甲基亚砜

Fomoc＝9-芴基甲氧基羰基

g＝克

h＝小时

HBTU＝O-苯并三唑，N，N，N，N-四甲基脲阳离子六氟代磷酸酯(O-Benzotriazole，N，N，N，N-tetramethyl uranium hexafluoro phosphate)

HBSS＝Hank′s缓冲盐水溶液

HOBT＝N-羟基苯并三唑(N-hydroxybenxotriazole)

HPLC＝高压液相色谱

L＝升

LC/MS＝液相色谱/质谱

M＝摩尔

min＝分

mL＝毫升

mmol＝毫摩尔

NHS＝N-羟基琥珀酰亚胺

NMM＝N-甲基吗啉

TFA＝三氟代乙酸

TIS＝三异丙基硅烷

TLC＝薄层色谱

μL＝微升

μM＝微摩尔

v/v＝体积比

5.1实施例1：标准树脂结合氨基酸偶联

用20％哌啶在DMF(每100mg树脂1mL)中用氮气搅动或振动处理RinkAmide AM树脂(Novabiochem)三分钟，过滤反应混合物。这个步骤再重复两次。用DMF洗涤树脂三次，用甲醇洗涤三次和用二氯甲烷洗涤三次。将期望的Fmoc保护的、三苯甲基化的氨基酸(BOC或iVDde用于赖氨酸和t-Bu用于酪氨酸)(3eq)、HBTU(3eq)和HOBt(3eq)溶于DMF(每100mg树脂1mL)中，添加到上述树脂，之后添加N-甲基对氧氮己环(N-Methylmorpholine)(NMM)(6eq)，将混合物搅动1小时。过滤反应混合物，用DMF洗涤树脂。重复这个偶联步骤，然后用DMF洗涤树脂三次，用MeOH洗涤三次和DCM三次。如上所述用20％哌啶在DMF(每个3×3分钟)中处理树脂，除去在第一个氨基酸上的Fmoc基团。然后将下一个期望的Fmoc保护的、三苯甲基化的氨基酸(3eq)、HBTU(3eq)和HOBt(3eq)溶于DMF(每100mg树脂1mL)中，添加到上述树脂，之后添加N-甲基对氧氮己环(NMM)(6eq)，将混合物搅动1小时。过滤反应混合物，然后用DMF洗涤树脂三次，用MeOH洗涤三次和DCM三次。随后的氨基酸按类似的方式偶联。对于含N-末端乙酰基的肽，使用以下商售的氨基酸，Ac-Pro-OH(3eq)或Ac-Tyr-OH(3eq)，与HBTU(3eq)、HOBT(3eq)和NMM(6eq)偶联一小时。对于所有其它实施例，N末端的帽化通过用适当酸(3eq)、HBTU(3eq)、HOBT(3eq)和NMM(6eq)将末端胺偶联在树脂上来实现。在RinkAmide AM树脂上充分地装配的N-帽化的肽用TFA/TIS/水(95∶2.5∶2.5，每100mg树脂1mL)处理，用氮气搅动或振动1小时。过滤反应混合物，树脂用TFA/TIS/水洗涤，和用二氯甲烷洗涤。在真空中除去溶剂，得到的残余物用醚粉化(triturated)三次。

5.2实施例2：肽的纯化

将粗肽溶于最低量的甲醇和水或几滴冰醋酸和水中，使用PhenomenexSynergihydro-RP C18柱(250mm×21.2mm)通过预备的反相HPLC(Beckman)纯化。以20mL/min的流速用3-100％B的梯度洗脱30min，其中溶剂A是含0.1％三氟乙酸的水溶液，溶剂B是包含0.1％三氟乙酸的乙腈。在220或254nm检测。将利用3-100％B梯度通过分析性的HPLC分析(水，Phenomenexhydro RP(250mm×4.6mm)40分钟)得到的＞95％纯的馏分合并，通过循环蒸发浓缩至约2-4毫升的体积，冻干。

5.3实施例3：从树脂上裂解肽

用2％肼在DMF(每100mg树脂1mL)中用氮气搅动或振动处理RinkAmide AM树脂(Novabiochem)三分钟，过滤反应混合物。这个步骤再重复五次。用DMF洗涤树脂三次，和用二氯甲烷洗涤三次。然后将期望的羧酸(4eq)、HBTU(4eq)和HOBt(4eq)溶于DMF(每100mg树脂1mL)中，添加到上述树脂，之后添加N-甲基对氧氮己环(8eq)，将混合物搅动1小时。过滤反应混合物，树脂用DMF洗涤三次和用二氯甲烷洗涤三次。树脂用TFA/TIS/水(95∶2.5∶2.5，每100mg树脂1mL)处理，用氮气搅动或振动1小时。过滤反应混合物，树脂用TFA/TIS/水洗涤一次，用二氯甲烷洗涤三次，浓缩滤液。残余物用二乙醚粉化4次。

5.4实施例4：肽与阿霉素的偶联

将期望的肽(1eq)和阿霉素盐酸盐(0.6-0.7eq)溶于DMF(0.05M)中，然后将HOBt(1.2eq)和二异丙基乙胺(4eq)添加到该红色溶液中。在室温下搅拌反应混合物5分钟，然后添加EDAC(1.2eq)。在室温下搅拌反应混合物17小时，在真空中除去溶剂。

5.5实施例5：4-氟苯甲酰(Fluorobenzoyl)-Pro-His-Ser-Cys-Asn-NH ₂

根据实施例1和2的程序制备这个化合物，用4-氟苯甲酸代替氨基酸使用。以白色、蓬松的固体分离出(10.4mg，19％)：¹H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ8.94-8.84(m，1H)，8.53-7.96(m，4H)，7.66-7.58(m，2H)，7.44-7.21(m，4H)，7.09(d，J＝10.9Hz，2H)，6.92(s，1H)，5.09(brs，1H)，4.72-4.65(m，1H)，4.52-4.31(m，4H)，3.70-3.48(m，6H，与水的峰重叠)，3.07-2.72(m，4H)，2.22-2.08(m，1H)，1.93-1.75(m，3H)；ES MS m/z(M+H)⁺6784。

5.6实施例6：Ac-Pro-His-Ser-Cys(Me)-Asn-OH

Wang树脂(397mg，1.00mmol)用二氯甲烷洗涤三次、用甲醇洗涤三次和用二氯甲烷洗涤三次。将Fmoc-Asn(trt)-OH(2.40g，4.02mmol)和二异丙基碳二亚胺(0.625mL，4.01mmol)在0℃溶于4mL二氯甲烷和3mL DMF中，搅拌20分钟。在真空中除去二氯甲烷，向溶液添加3mL DMF，将溶液添加到烧结玻璃漏斗中的上述Wang树脂上。将1mL DMF中的DMAP(49mg，0.40mmol)添加到树脂，用氮气搅动混合物一小时。过滤反应混合物，树脂用DMF洗涤一次，用二氯甲烷洗涤三次，完全如上所述重复偶联程序。除了Fmoc-Ser(trt)-OH和Fmoc-His(trt)-OH的偶联利用3eq的氨基酸、3eq的HBTU、3eq的HOBt和6eq的NMM进行，利用实施例1的程序添加剩余的氨基酸。用实施例2的程序裂解和纯化肽，得到282mg(46％)白色固体，是以83∶17的比例的两个化合物的混合物：¹H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ8.97(s，1H)，8.46-8.27(m，2H)，8.25-8.15(m，1H)，7.98-7.87(m，1H)，7.40-7.35(m，2H)，6.93(s，1H)，4.79-4.60(m，1H)，4.56-4.47(m，2H)，4.39-4.25(m，2H)，3.66-3.60(m，3H，与水的峰重叠)，3.22-3.12(m，2H)，3.05-2.94(m，1H)，2.91-2.82(m，1H)，2.68-2.41(m，3H，与DMSO峰重叠)，2.07(s，3H)，2.00(s，3H)，1.91-1.65(m，4H)；ES MS m/z(M+H)⁺613.4。

5.7实施例7：Ac-Pro-His-Ser-Cys(Me)-Asn-Gly-Gly-Lys(4-氟苯甲酰)-NH₂

将三乙胺(17μL，0.12mmol)添加到Ac-Pro-His-Ser-Cys(Me)-Asn-Gly-Gly-Lys-NH₂(21mg，0.024mmol)和4-氟苯甲酰琥珀酰亚胺(6.2mg，0.026mmol)在1mL DMF的溶液中，将该溶液在室温下搅拌3.5小时。浓缩反应混合物，用预备的HPLC(3到100％乙腈-水，30分钟)纯化残余物，获得17mg(71％)的白色蓬松固体：¹H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ8.98(s，1H)，8.49-8.42(m，1H)，8.35-8.22(m，3H)，8.14-8.07(m，2H)，7.94-7.87(m，3H)，7.82(d，J＝8.0Hz，1H)，7.46(s，1H)，7.40-7.35(m，1H)，7.32-7.26(m，3H)，7.02(s，2H)，4.82-4.61(m，1H)，4.60-4.47(m，2H)，4.40-4.26(m，2H)，4.21-4.13(m，1H)，3.77-3.69(m，5H)，3.68-3.61(m，2H，与水的峰重叠)，3.27-3.14(m，5H，与水的峰重叠)，3.05-2.95(m，2H)，2.91-2.83(m，1H)，2.72-2.55(m，3H，与DMSO峰重叠)，2.08(s，3H)，2.01(s，3H)，1.92-1.65(m，5H)，1.61-1.46(m，3H)，1.38-1.24(m，2H)；ES MS m/z(M+H)⁺976.7。

5.8实施例8：5-(&6-)羧基荧光素-β-Ala-Pro-His-Ser-Cys-Asn-NH₂

根据实施例1和2的程序从Rink amide AM树脂(0.0584mmol)制备化合物，除了Fmoc-Cys(trt)-OH的偶联是用3eq氨基酸、3eq HBTU、3eq HOBt和6eq NMM进行，而偶联Fmoc-Ser(trt)-OH、Fmoc-His(trt)-OH、Fmoc-Pro-OH和5-(&6-)羧基荧光素(Carboxyfluorescein)是利用2eq的酸、2eq HBTU、2eqHOBt和4eq NMM进行。分离出标题的化合物(27mg，46％)，为黄色蓬松的固体，是两个化合物的混合物：¹HNMR(300MHz，DMSO-d6)δ10.38-10.04(brs，1H)，8.98-8.92(m，1H)，8.90-8.68(m，1H)，8.48-8.41(m，1H)，8.35-8.18(m，2H)，8.18-8.04(m，2H)，8.02-7.96(m，1H)，7.66(s，0.5H)，7.42-7.33(m，2.5H)，7.10(d，J＝7.3Hz，2H)，6.95-6.90(m，1H)，6.70(s，2H)，6.62-6.51(m，4H)，4.76-4.57(m，1H)，4.51-4.25(m，4H)，3.05-2.92(m，2H)，2.85-2.71(m，3H)，2.69-2.60(m，1H)，2.58-2.54(m，1H)，2.47-2.37(m，2H)，2.09-1.70(m，5H)；ES MS m/z(M+H)⁺985.6；Anal.calcd为C₄₅H₄8N₁₀O₁₄S：N，14.22。发现：10.54(肽含量，74％)。

5.9实施例9：Ac-Pro-His-Ser-Cys-Asn-Gly-Gly-Lys(4-氟苯甲酰)-NH₂

根据程序C从Ac-Pro-His(trt)-Ser(trt)-Cys(trt)-Asn(trt)-Gly-Gly-Lys(ivDde)-Rink amide AM树脂(208mg，加载0.32mmol/g，0.067mmol)制备这个化合物。根据程序B裂解和纯化该产物，得到28mg(44％)的标题化合物，为蓬松的白色固体：¹HNMR(300MHz，DMSO-d6)δ8.96(s，1H)，8.48-8.40(m，1H)，8.30-8.18(m，2H)，8.16-8.00(m，2H)，7.97-7.79(m，4H)，7.46-7.33(m，2H)，7.32-7.24(m，4H)，7.11(s，0.5H)，7.01(s，2H)，6.94(s，0.5H)，4.79-4.11(m，7H)，3.78-3.60(m，8H，与水的峰重叠)，3.27-3.12(m，5H，与水的峰重叠)，3.04-2.93(m，1H)，2.89-2.70(m，2H)，2.64-2.44(m，2H，与DMSO峰重叠)，2.40-2.32(m，1H)，2.09-1.97(m，3H)，1.91-1.66(m，5H)，1.58-1.45(m，3H)，1.37-1.23(m，2H)；ES MS m/z(M+H)⁺962.8。

5.10实施例10：Ac-Tyr-Gly-Gly-Pro-His-Ser-Cys-Asn-NH₂

根据实施例1和2的程序从Pink amide AM树脂(0.100mmol)制备这个化合物。标题化合物(54mg，61％)以一白色蓬松的固体分离，是比例为3∶1的两个化合物的混合物：¹H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ8.94(s，0.75H)，8.89(s，0.25H)，8.54-8.22(m，3H)，8.11(t，J＝8.7Hz，2H)，7.98(d，J＝7.0Hz，1H)，7.84-7.78(m，1H)，7.41-7.32(m，2H)，7.10(d，J＝8.6Hz，2H)，7.05-6.99(m，2H)，6.92(s，1H)，6.63(d，J＝8.2Hz，2H)，4.79-4.55(m，13H，与水的峰重叠)，4.49-4.30(m，7H，与水的峰重叠)，4.03-3.84(m，2H)，3.83-3.58(m，4H)，3.55-3.47(m，1H)，3.44-3.25(m，1H)，3.22-3.09(m，1H)，3.06-2.72(m，4H)，2.69-2.55(m，1H)，2.47-2.38(m，2H，与DMSO峰重叠)，2.09-1.96(m，1H)，1.93-1.82(m，2H)，1.77(s，4H)；ES MS m/z(M+H)⁺875.7；Anal.calcd为C₃₆H₅₀N₁₂O₁₂S：N，19.21。发现：12.90(肽含量，67％)。

5.11实施例11：Ac-Tyr-Gly-Gly-Gly-Gly-Pro-His-Ser-Cys-Asn-NH₂

根据实施例1和2的程序从Rink amide AM树脂(0.100mmol)制备这个化合物。标题化合物(51mg，52％)以白色蓬松的固体分离，是比例为73∶27的两个化合物的混合物：¹H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ8.94(s，0.73H)，8.88(s，0.27H)，8.56-8.21(m，3H)，8.18-8.01(m，4H)，7.99-7.87(m，2H)，7.40(s，1H)，7.37-7.33(m，1H)，7.10(d，J＝8.4Hz，2H)，7.02(d，J＝8.5Hz，2H)，6.92(s，1H)，6.64(d，J＝8.5Hz，2H)，4.78-4.26(m，26H，与水的峰重叠)，4.03-3.85(m，3H，与水的峰重叠)，3.81-3.58(m，8H)，3.55-3.46(m，1H)，3.21-3.10(m，1H)，3.05-2.71(m，4ro，2.69-2.56(m，1H)，2.51-2.38(m，2H，与DMSO峰重叠)，2.05-1.95(m，1H)，1.92-1.82(m，2H)，1.77(s，4H)；ESMS m/z(M+W)⁺989.7；Anal.calcd为C₄₀H₅₆N₁₄O₁₄S：N，19.83。发现：14.52(肽含量，73％)。

5.12实施例12：Ac-Tyr-Gly-Gly-Gly-Gly-Gly-Gly-Pro-His-Ser-Cys-Asn-NH₂

根据实施例1和2的程序从Rink amide AM树脂(0.100mmol)制备这个化合物。标题化合物(37mg，33％)以白色蓬松的固体分离，是比例为63∶37的两个化合物的混合物：¹H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ8.94(s，0.63H)，8.88(s，0.37H)，8.55-8.20(m，3H)，8.17-7.86(m，7H)，7.40(s，1H)，7.37-7.32(m，1H)，7.10(d，J＝8.3Hz，2H)，7.02(d，J＝8.4Hz，2H)，6.92(s，1H)，6.63(d，J＝8.4Hz，2H)，4.76-4.59(m，3H，与水的峰重叠)，4.50-4.30(m，6H)，4.03-3.85(m，2H)，3.81-3.69(m，8H)，3.68-3.58(m，2H)，3.55-3.47(m，2H)，3.43-3.10(m，2H)，3.04-2.70(m，4H)，2.68-2.55(m，2H)，2.47-2.37(m，2H，与DMSO峰重叠)，2.05-1.94(m，1H)，1.92-1.81(m，2H)，1.77(s，4H)；ESMS m/z(M+H)₊1103.8：Anal.calcd为C₄₄H₆₂N₁₆O₁₆S：N，20.32。发现：14.61(肽含量，72％)。

5.13实施例13：Ac-Tyr-Gly-Gly-Gly-Gly-Gly-Gly-Pro-His-Ser-Cys-Asn-NH₂

根据实施例1和2的程序从Rink amideAM树脂(0.100mmol)制备这个化合物。标题化合物(37mg，33％)以白色蓬松的固体分离，是比例为63∶37的两个化合物的混合物：¹H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ8.94(s，0.63H)，8.88(s，0.37H)，8.55-8.20(m，3H)，8.17-7.86(m，7H)，7.40(s，1H)，7.37-7.32(m，1H)，7.10(d，J＝8.3Hz，2H)，7.02(d，J＝8.4Hz，2H)，6.92(s，1H)，6.63(d，J＝8.4Hz，2H)，4.76-4.59(m，3H，与水的峰重叠)，4.50-4.30(m，6H)，4.03-3.85(m，2H)，3.81-3.69(m，8H)，3.68-3.58(m，2H)，3.55-3.47(m，2H)，3.43-3.10(m，2H)，3.04-2.70(m，4H)，2.68-2.55(m，2H)，2.47-2.37(m，2H，与DMSO峰重叠)，2.05-1.94(m，1H)，1.92-1.81(m，2H)，1.77(s，4H)；ESMS m/z(M+H)⁺1103.8；Anal.calcd为C₄₄H₆₂N₁₆O₁₆S：N，20.32。发现：14.61(肽含量，72％)。

5.14实施例14：Ac-Tyr-NH-(CH₂)₄-CO-Pro-His-Ser-Cys-Asn-NH₂

根据实施例1和2的程序从Rink amide AM树脂(0.103mmol)制备这个化合物。标题化合物(53mg，60％)以白色蓬松的固体分离，是比例为66∶34的两个化合物的混合物：¹H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ8.97(s，1H)，8.45-8.21(m，2H)，8.13(d，J＝7.9Hz，1H)，8.08-7.96(m，2H)，7.93-7.85(m，1H)，7.40(s，1H)，7.37-7.32(m，1H)，7.09(d，J＝10.0Hz，2H)，7.02-6.95(m，2H)，6.92(s，1H)，6.63(d，J＝8.5Hz，2H)，4.79-4.59(m，4H，与水的峰重叠)，4.51-4.27(m，7H，与水的峰重叠)，3.72-3.56(m，2H)，3.54-3.28(m，2H)，3.21-3.10(m，1H)，3.07-2.94(m，3H)，2.88-2.72(m，3H)，2.65-2.55(m，1H)，2.46-2.38(m，2H，与DMSO峰重叠)，2.33-2.17(m，2H)，2.04-1.95(m，1H)，1.93-1.74(m，6H)，1.50-1.23(m，4H)；ES MS m/z(M+H)⁺860.7，Anal.calcd为C₃₇H₅₃N₁₁O₁₁S：N，17.92。发现：12.40(肽含量，69％)。

5.15实施例：3-(4-羟苯基)丙酰基-NH-(CH₂)₄-CO-Pro-His-Ser-Cys-Asn-NH₂

根据实施例1和2的程序从Rink amide AM树脂(0.103mmol)制备这个化合物。标题化合物(50mg，60％)以白色蓬松的固体分离，是比例为7∶3的两个化合物的混合物：¹H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ8.97(s，1H)，8.47-8.21(m，2H)，8.12(d，J＝7.9Hz，1H)，8.09-7.92(m，1H)，7.81-7.73(m，1H)，7.40(s，1H)，7.37-7.32(m，1H)，7.09(d，J＝10.0Hz，2H)，6.99-6.89(m，3H)，6.64(d，J＝8.5Hz，2H)，4.78-4.59(m，2H)，4.51-4.27(m，6H，与水的峰重叠)，3.71-3.56(m，3H)，3.54-3.45(m，2H)，3.44-3.27(m，1H)，3.21-3.10(m，1H)，3.06-2.93(m，3H)，2.85-2.75(m，2H)，2.72-2.64(m，2H)，2.46-2.37(m，2H，与DMSO峰重叠)，2.32-2.21(m，4H)，2.08-1.95(m，1H)，1.90-1.69(m，3H)，1.52-1.23(m，4H)；ES MS m/z(M+H)⁺803.6；Anal.calcd为C₃₅H₅₀N₁₀O₁₀S：N，17.45。发现：12.86(肽含量，74％)。

5.16实施例16：Ac-Pro-His-Ser-Cys(Me)-Asn-Dox

根据实施例4的程序从Ac-Pro-His-Ser-Cys(Me)-Asn-OH(62mg，0.10mmol)和阿霉素盐酸盐(37mg，0.063mmol)制备这个化合物。根据实施例2的程序纯化得到的残余物，获得标题化合物(28mg，39％)为蓬松的橙色固体：¹H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ8.97-8.93(m，1H)，8.44-8.16(m，3H)，7.96-7.87(m，3H)，7.70-7.63(m，1H)，7.41-7.26(m，3H)，6.93-6.86(m，1H)，5.48-5.42(m，1H)，5.24-5.20(m，1H)，5.10-4.92(m，2H)，4.79-4.40(m，7H)，4.37-4.24(m，2H)，4.16-4.11(m，1H)，4：01-3.88(m，4H)，3.65-3.48(m，6H，与水的峰重叠)，3.25-3.11(m，2H)，3.06-2.91(m，3H)，2.86-2.70(m，1H)，2.67-2.55(m，2H，与DMSO峰重叠)，2.39-2.25(m，1H)，2.22-2.07(m，2H)，2.04(s，3H)，2.00(s，3H)，1.90-1.62(m，4H)，1.52-1.41(m，1H)，1.12(d，J＝6.4Hz，3H)；ES MS m/z(M+H)⁺1138.5。

5.17实施例17：Ac-Pro-His-Ser-Cys(Ac)-Asn-Dox

根据实施例3的程序从Ac-Pro-His-Ser-Cys(Ac)-Asn-OH(52mg，0.081mmol)和阿霉素盐酸盐(33mg，0.057mmol)制备这个化合物。根据实施例2的程序纯化得到残余物，获得标题化合物(36mg，54％)为蓬松的橙色固体：¹H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ8.95(s，1H)，8.44-8.10(m，3H)，7.96-7.85(m，2H)，7.69-7.62(m，1H)，7.40-7.28(m，2H)，6.90(s，1H)，5.46(brs，1H)，5.32-5.21(m，1H)，4.98-4.92(m，1H)，4.76-4.12(m，8H)，4.00-3.88(m，3H)，3.07-2.73(m，5H)，2.38-2.26(m，1H)，2.28(s，3H)，2.22-2.06(m，2H)，2.00(s，3H)，1.91-1.63(m，5H)，1.52-1.42(m，1H)，1.13(d，J＝6.4Hz，3H)；ES MS m/z(M+H)⁺1166.6。

5.18实施例18：Ac-Pro-His-Ser-Cys(Me)-Asn-Gly-Gly-Lys(CO-(CH₂)₃-CO-Dox)-NH₂

将Ac-Pro-His-Ser-Cys(Me)-Asn-Gly-Gly-Lys-NH₂(74mg，0.087mmol)和Fmoc-Dox-半戊二酸(hemiglutarate)(70％纯，74mg，0.059mmol)在在室温下溶于3mL的DMF中。向该红色溶液添加HOBt(14mg，0.11mmol)和二异丙基乙胺(60μL，0.34mmol)，搅拌反应混合物5分钟。向反应混合物添加EDAC(21mg，0.11mmol)并再搅拌18小时。在真空中除去溶剂，得到的红油用乙酸乙酯粉化(triturate)三次来得到红色固体。将红色固体溶于5mL DMF和500μL哌啶中。在冰浴中将反应混合物冷却到0℃，添加450μL TFA、1.05mL吡啶和3mL DMF的混合物。5分钟之后，在真空中除去溶剂，残余物用乙酸乙酯粉化一次和用二乙醚粉化一次，得到红色固体。根据实施例2的程序纯化产物，得到标题化合物(14mg，16％)为蓬松的橙色固体：ES MSm/z(M+H)⁺1493.8。

5.19实施例19：2-氟苯甲酰-β-Ala-Pro-His-Ser-Cys-Asn-NH₂

根据实施例1和2的程序从Rink amide AM树脂(0.111mmol)制备这个化合物。分离出标题化合物(30mg，40％)为白色蓬松的固体：¹H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ8.98-8.93(m，1H)，8.43-8.21(m，2H)，8.15-8.07(m，2H)，8.01-7.90(m，1H)，7.41-7.32(m，2H)，7.09(d，J＝9.9Hz，2H)，6.92(s，1H)，4.87-4.70(m，2H)，4.68-4.59(m，1H)，4.50-4.28(m，5H)，3.36-3.28(m，4H，与水的峰重叠)，3.22-3.10(m，2H)，3.05-2.91(m，1H)，2.89-2.72(m，3H)，2：46-2.36(m，3H，与DMSO峰重叠)，2.09-1.95(m，1H)，1.90-1.55(m，4H)；ES MS m/z(M+H)⁺687.5；Anal.calcd为C₂₆H₃₉FN₁₀O₉S：N，20.40。发现：14.89(肽含量，73％)。

5.20实施例20：Ac-Pro-His-Ser-Cys-Asn-Gly-Gly-Lys(2-氟苯甲酰)-NH₂

根据实施例3的程序从Ac-Pro-His(trt)-Ser(trt)-Cys(trt)-Asn(trt)-Gly-Gly-Lys(ivDde)-Rink amide AM树脂(317mg，加载0.32mmol/g，0.101mmol)制备这个化合物。根据实施例2的程序纯化产物，得到21mg(23％)标题化合物为蓬松的白色固体：¹H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ8.97(s，1H)，8.45-8.17(m，3H)，8.16-8.01(m，3H)，7.95(d，J＝7.2Hz，1H)，7.80(d，J＝8.1Hz，1H)，7.45(s，1H)，7.41-7.33(m，1H)，7.27(s，1H)，7.01(s，2H)，4.74(d，J＝47Hz，2H)，4.78-4.61(m，1H)，4.59-4.24(m，5H)，4.19-4.10(m，2H)，3.55-3.46(m，3H，与水的峰重叠)，3.38-2.94(m，6H)，2.87-2.70(m，2H)，2.65-2.42(m，2H，与DMSO峰重叠)，2.36(t，J＝8.5Hz，1H)，2.00(s，3H)，1.90-1.61(m，5H)，1.56-1.36(m，3H)，1.31-1.15(m，2H)；ESMS m/z(M+H)⁺900.8；Anal.calcd为C₃₅H₅₄FN₁₃O₁₂S：N，20.23。发现：14.55(肽含量，72％)。

5.21实施例21：Ac-Pro-His-Ser-Cys-Asn-Gly-Gly-Lys(8-[(4′-氟苯甲酰)氨基]辛二酰)-NH₂

根据实施例3的程序从Ac-Pro-His(trt)-Ser(trt)-Cys(trt)-Asn(trt)-Gly-Gly-Lys(ivDde)-Rinkamide AM树脂(312mg，加载0.32mmol/g，0.0997mmol)制备这个化合物。根据实施例2的程序纯化产物(42.3mg粗料)，得到3.9mg(11％)PLG-107，为蓬松的白色固体：ES MS m/z(M+H)⁺1104.0。

5.22实施例22：Ac-Pro-His-Ser-Cys-Asn-β-Ala-Lys(3-(4-羟苯基)-丙酰基)-NH₂

根据实施例1的程序在Rink amide AM树脂(0.100mmol)上制备Ac-Pro-His(trt)-Ser(trt)-Cys(trt)-Asn(trt)-β-Ala-Lys(ivDde)，但不从树脂上裂解。根据实施例3的程序从这个结合树脂的肽制备标题化合物。根据实施例2的程序纯化粗产物，得到39mg(41％)的标题化合物为蓬松的白色固体：¹HNMR(300MHz，DMSO-d6)δ8.97(s，1H)，8.46-8.26(m，1H)，8.21(d，J＝7.7Hz，1H)，8.13(d，J＝7.7Hz，1H)，8.07-7.87(m，2H)，7.77-7.66(m，2H)，7.40(s，1H)，7.36-7.28(m，2H)，6.99-6.88(m，4H)，6.67-6.62(m，2H)，4.80-4.60(m，1H)，4.52-4.25(m，6H)，3.72-3.59(m，4H，与水的峰重叠)，3.56-3.44(m，2H)，3.38-3.12(m，4H)，3.05-2.93(m，3H)，2.87-2.75(m，2H)，2.71-2.64(m，2H)，2.45-2.35(m，2H)，2.31-2.23(m，4H)，2.00(s，3H)，1.91-1.58(m，5H)，1.54-1.41(m，1H)，1.39-1.17(m，4H)：ES MS m/z(M+H)⁺945.8；Anal.calcd为C₄₁H6₀N₁₂O₁₂S：N，17.79。发现：12.95(肽含量，73％)。

5.23实施例23：Ac-Pro-His-Ser-Cys-Asn-NH-(CH₂)₄-CO-Lys(3-(4-羟苯基)丙酰基)-NH₂

根据实施例1的程序在Rink amide AM树脂(0.100mmol)上制备Ac-Pro-His(trt)-Ser(trt)-Cys(trt)-Asn(trt)-NH-(CH₂)₄-CO-Lys(ivDde)，但不从树脂上裂解。根据实施例3的程序从这个结合树脂的肽制备标题化合物。根据实施例2的程序纯化粗产物，得到34mg(35％)的标题化合物为蓬松的白色固体：¹H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ8.97(s，1H)，8.45-8.19(m，2H)，8.13(d，J＝7.8Hz，1H)，8.04-7.92(m，1H)，7.81-7.71(m，2H)，7.66-7.59(m，1H)，7.40(s，1H)，7.35(brs，1H)，7.29(brs，1H)，6.96(d，J＝8.4Hz，2H)，6.93(brs，2H)，6.64(d，J＝8.4Hz，2H)，4.81-4.60(m，2H)，4.53-4.24(m，8H，与水的峰重叠)，3.72-3.60(m，3H，与水的峰重叠)，3.56-3.46(m，2H)，3.39-3.25(m，1H)，3.24-3.11(m，1H)，3.07-2.92(m，5H)，2.84-2.72(m，2H)，2.71-2.63(m，2H)，2.46-2.36(m，2H，与DMSO峰重叠)，2.30-2.24(m，2H)，2.16-2.07(m，2H)，2.00(s，3H)，1.91-1.55(m，5H)，1.53-1.16(m，9H)；ES MS m/z(M+H)⁺973.8；Anal.calcd为C₄₃H₆₄N₁₂O₁₂S：N，17.27。发现：11.42(肽含量，66％)。

5.24实施例24：Ac-Pro-His-Ser-Cys-Asn-NH-(CH₂)₆-CO-Lys(3-(4-羟苯基)丙酰基)-NH₂

根据实施例1的程序在Rink amide AM树脂(0.100mmol)上制备Ac-Pro-His(trt)-Ser(trt)-Cys(trt)-Asn(trt)-NH-(CH₂)₆-CO-Lys(ivDde)，但不从树脂上裂解。根据实施例3的程序从这个结合树脂的肽制备标题化合物。根据实施例2的程序纯化粗产物，得到29mg(29％)的标题化合物为蓬松的白色固体：¹H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ9.12(s，1H)，8.91-8.82(m，1H)，8.43-8.26(m，2H)，8.03-7.97(m，1H)，7.94-7.83(m，1H)，7.79-7.71(m，2H)，7.41-7.20(m，3H)，6.96(d，J＝8.5Hz，2H)，6.93-6.87(m，2H)，6.64(d，J＝8.5Hz，2H)，5.09(brs，1H)，4.80-4.57(m，1H)，4.48-4.39(m，1H)，4.36-4.20(m，3H)，4.19-4.09(m，1H)，3.69-3.53(m，4H)，3.04-2.88(m，7H)，2.73-2.63(m，3H)，2.45-2.33(m，3H，与DMSO峰重叠)，2.29-2.23(m，3H)，2.12-2.05(m，3H)，1.99(s，3H)，1.91-1.56(m，5H)，1.51-1.12(m，13H)；ES MS m/z(M+H)⁺1002.1；Anal.calcd为C₄₅H₆8N₁₂O₁₂S：N，16.79。发现：10.78(肽含量，64％)。

5.25实施例25：乙酰基-Pro-His-Ser-Cys-Asn-Tyr(3-碘代)-NH₂

根据实施例1和2的程序制备这个化合物，得到标题化合物(32.9mg，16％)为细小的白色粉未。NMR数据表明一种比例约80∶20的两种物质的混合物：¹H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ10.06(s，1H)，8.96(m，1H)，8.14-8.43(m，3H)，7.88-8.05(m，2H)，7.50(d，1H，J＝1.8Hz)，7.40(s，3H)，7.09(bs，1H)，6.98-7.03(m，2H)，6.75(d，1H，J＝8.4Hz)，5.06(bs，1H)，4.60-4.74(m，1H)，4.47-4.54(m，1H)，4.374.46(m，1H)，4.22-4.36(m，3H)，3.57-3.69(m，2H)，3.47-3.55(m，2H)，3.11-3.21(m，1H)，2.86-3.04(m，3H)，2.59-2-78(m，3H)，2.35-2.43(m，1H)，2.26-2.31(t，1H，J＝7.8Hz)，2.00(s，3H)，1.69-1.94(m，4H)；MS m/z(C₃₂H₄₃IN₁₀O₁₀S+H)⁺887.4：Anal.calcd为C₃₂H₄₃IN₁₀O₁₀S：N，15.80。发现：N，12.30(肽含量：78％)。

5.26实施例26：乙酰基-Pro-His-Ser-Cys-Asn-Tyr(3，5-二碘)-NH₂

根据实施例1和2的程序制备这个化合物，得到标题化合物(25.0mg，11％)为细小的白色粉未。NMR数据表明一种比例约80∶20的两种物质的混合物：¹H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ9.32(bs，1H)，8.94-8.95(m，1H)，8.14-8.43(m，3H)，7.91-8.04(m，2H)，7.58(s，2H)，7.34-7.42(m，3H)，7.12(s，1H)，6.98(s，1H)，5.06(bs，1H)4.60-4.79(m1，H)，4.39-4.53(m，2H)，4.23-4.35(3H)，3.58-3.69(m，2H)，3.47-3.54(m，2H)，3.11-3.21(m，1H)，2.56-3.07(m，7H)，2.37-2.44(m1H)，2.29(t，1H，J＝9.7Hz)，2.00(s，3H)，1.68-1.90(m，4H)；MS m/z(C₃₂H₄₂I₂N₁₀O₁₀S+H)⁺1013.4；Anal.calcd为C₃₂H₄₂I₂N₁₀O₁₀S：N，13.83。发现：N，11.26(肽含量：81％)。

5.27实施例27：乙酰-Pro-His-Ser-Cys(甲基)-Asn-Gly-Gly-Lys-NH₂

根据实施例1和2的程序制备这个化合物，得到标题化合物(151.2mg，44％)为细小的白色粉未。NMR数据表明一种比例约80∶20的两种物质的混合物：¹H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ8.96-8.97(m，1H)，8.24-8.46(m，3H)，8.09(appt，2H)，7.79-7.95(m，2H)，7.65(bs，3H)，7.45(bs，1H)，7.34-7.39(m，1H)，7.29(bs，1H)，7.05(bs，1H)，7.00(bs，1H)，5.05(bs，1H)，4.60-4.79(m，1H)，4.47-4.58(2H)，4.25-4.40(m，2H)，4.12-4.20(m，1H)3.69-3.79(m，4H)，3.60-3.66(m，3H)，3.12-3.22(m，2H)，2.94-3.04(m，1H)，2.56-2.89(m，6H)，2.07(s，3H)，2.00(s，3H)，1.64-1.88(m，4H)，1.46-1.58(m，3H)，1.23-1.37(m，2H)；MS m/z(C₃₄H₅₅N₁₃O₁₁S+H)⁺854.7；Anal.calcd为C₃₄H₅₅N₁₃O₁₁S：N，21.32。发现：N，14.88(肽含量：70％)。

5.28实施例28：3-(4-羟苯基)丙酰基-Pro-His-Ser-Cys-Asn-NH₂

根据实施例1和2的程序用以下修饰制备这个化合物：利用N-succinimidyl-3-(4-羟苯基)丙酸(4.0eq)和TEA(12.0eq)对N末端进行帽化。分离出标题化合物(43.0mg，38％)为细小的白色粉未。NMR数据表明一种比例约80∶20的两种物质的混合物：¹H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ9.12(bs，1H)，8.87-8.95(m，1H)，8.09-8.39(m，4H)，7.97(app d，1H)，7.39(s，1H)，7.33(bs，1H)，6.99-7.09(m，4H)，6.90-6.92(2H)，6.61-6.66(m，2H)，5.09(bs，1H)，4.59-4.77(m，2H)，4.27-4.46(m，5H)，3-57-3.70(m，3H)，3.12-3.19(m，1H)，2.97-3.02(m，1H)，2.66-2.80(m，4H)，2.37-2.45(m，2H)，1.63-2.30(m，5H)；MS m/z(C₃₀H₄₁N₉O₉S+H)⁺704.4；Anal.calcd为C₃₀H₄₁N₉O₉S：N，17.91。发现：N，13.88(肽含量：77％)。

5.29实施例29：乙酰基-Tyr(3，5-二碘)-Pro-His-Ser-Cys-Asn-NH₂

根据实施例1和2的程序制备这个化合物，得到标题化合物(48.8mg，29％)为细小的白色粉未。NMR数据表明一种比例约80∶20的两种物质的混合物：¹H NMR(300MHz，MeOD)δ8.79(m，1H)，8.26-8.46(m，1H)，7.61-7.65(m，2H)，7.42-7.47(m，1H)，4.70-4.76(m，1H)，4.52-4.56(m，1H)，4.38-4.45(m，2H)，3.80-3.96(m，3H)，3.59-3.67(m，1H)，3.35-3.43(m，2H)，3.17-3.27(m，1H)，2.99-3.06(m，1H)，2.93-2.95(m，2H)，2.65-2.80(m，3H)，1.99-2.25(m，3H)，1.93-1.96(m，3H)；MS m/z(C₃₂H₄₂I₂N₁₀O₁₀S+H)⁺1013.0；Anal.calcd为C₃₂H₄₂I₂N₁₀O₁₀S：N，13.83。发现：N，11.33(肽含量：82％)。

5.30实施例30：乙酰-Pro-His-Ser-Cys-Asn-β-Ala-Tyr(3-碘代)-NH2

根据实施例1和2的程序制备这个化合物，得到标题化合物(8.1mg，6％)为细小的白色粉未。NMR数据表明一种比例约80∶20的两种物质的混合物：¹H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ10.07(s，1H)，8.96(m，1H)，8.11-8.44(m，3H)，7.94-8.02(m，2H)，7.68(app t，1H)，7.54(d，1H，J＝2.1Hz)，7.40-7.41(m，2H)，7.34(m，1H)，7.02-7.05(m，2H)，6.90(bs，1H)，6.75(d，1H，J＝8.4Hz)，5.09(bs，1H)，4.60-4.80(m，2H)，4.26-4.51(m，4H)，3.59-3.70(m，2H)，3.47-3.54(m，2H)，3.11-3.21(m，4H)，2.72-3.03(m，5H)，2.56-2.64(m，1H)，2.36-2.43(m，2H)，2.14-2.29(m，3H)，2.00(s，3H)，1.67-1.91(m，3H)；MSm/z(C₃₅H₄₈IN₁₁O₁₁S+H)⁺958.5；Anal.calcd为C₃₅H₄₈IN₁₁O₁₁S：N，16.09。发现：N，12.85(肽含量：80％)。

5.31实施例31：3-(4-羟基-3，5-二碘苯基)丙酰基-Pro-His-Ser-Cys -Asn-NH2

根据实施例1和2的程序用以下修饰制备这个化合物：通过与3-(4-羟苯基)丙酸(3.0eq)单独偶联来实现N-末端的帽化。分离出标题化合物(23.9mg，23％)为细小的白色粉未。NMR数据表明一种比例约80∶20的两种物质的混合物：¹H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ9.31(bs，1H)，8.93-8.97(m，1H)，7.99-8.44(m，4H)，7.62(m，2H)，7.41-7.56(m，1H)，7.34(bs，1H)，7.09(appd，2H)，6.92(s，1H)，5.12(bs，1H)，4.29-4.78(m，6H)，3.59-3.72(m，3H)，3.14-3.22(m，2H)，2.96-3.03(m，2H)，2.77-2.84(m，2H)，2.65-2.71(m，2H)，2.39-2.46(m，2H)，1.56-2.15(m，5H)；MS m/z(C30H39I2N9O9S+H)⁺956.3；Anal.calcd为C₃₀H₃₉I₂N₉O₉S：N，13.19。发现：N，10.84(肽含量：82％)。

5.32实施例32：乙酰-Tyr(3，5-二碘)-β-Ala-Pro-His-Ser-Cys-Asn-NH2

根据实施例1和2的程序用以下修饰制备这个化合物：用Fmoc-β-Ala-OH和乙酰-Tyr(3，5-二碘)-OH进行仅单一的偶联。分离标题化合物为细小的白色粉未(55.0mg，51％)。NMR数据表明一种比例约80∶20的两种物质的混合物：¹H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ9.35(bs，1H)，8.96(m，1H)，8.22-8.41(m，3H)，7.97-8.14(m，4H)，7.60-7.63(m，2H)，7.39(s，1H)，7.34(bs，1H)，7.09(appd，2H)，6.92(s，1H)，4.60-4.78(m，2H)，4.28-4.50(m，6H)，3.59-3.71(m，2H)，2.94-3.06(m，2H)，2.72-2.83(m，3H)，2.38-2.46(m，3H)，1.76-2.09(m，7H)；MS m/z(C₃₅H₄₇I₂N₁₁O₁₁S+H)⁺1084.5；Anal.calcd为C₃₅H₄₇I₂N₁₁O₁₁S：N，14.22。发现：N，11.39(肽含量：80％)。

5.33实施例33：乙酰-Pro-His-Ser-Cys-Asn-β-Ala-Tyr(3，5-二碘)-NH2

根据实施例1和2的程序制备这个化合物，有以下修改：对每个氨基酸仅进行单个偶联。分离标题化合物为细小的白色粉未(14.5mg，9％)。NMR数据表明一种比例约80∶20的两种物质的混合物：¹H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ9.35(bs，1H)，8.96(m，1H)，7.94-8.44(m，6H)，7.68-7.72(m，1H)，7.62(s，2H)，7.46(bs，1H)，7.40(bs，1H)，7.34(bs，1H)，7.06(bs，1H)，6.90(bs，1H)，5.11(bs，1H)，4.61-4.80(m，6H)，3.57-3.71(m，2H)，3.08-3.22(m，3H)，2.94-3.07(m，2H)，2.73-2.86(m，4H)，2.36-2.43(m，2H)，2.14-2.30(m，3H)，2.00(s，3H)，1.68-1.89(m，4H)；MS m/z(C₃₅H₄₇I₂N₁₁O₁₁S)+1084.5；Anal.calcd为C₃₅H₄₇I₂N₁₁O₁₁S：N，14.22。发现：N，11.64(肽含量：82％)。

5.34实施例34：乙酰-Tyr(3-碘代)-Pro-His-Ser-Cys-Asn-NH2

根据实施例1和2的程序用以下修饰制备这个化合物：最终的氨基酸偶联用Ac-Tyr(3-碘代)-OH(4eq)、HBTU(4eq)、HOBT(4eq)和NMM(8eq)进行。分离标题化合物为细小的白色粉未(7.7mg，16％)。NMR数据表明一种比例约75∶25的两种物质的混合物：¹H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ10.10-10.17(m，1H)，8.91-8.97(m，1H)，8.25-8.52(m，2H)，8.05-8.15(m，2H)，7.58(d，1H，J＝2.0Hz)，7.35-7.43(m，2H)，7.09-7.11(m，3H)，6.92(bs，1H)，6.75-6.77(m，1H)，5.11(bs，1H)，4.55-4.69(m，2H)，4.33-4.50(m，4H)，3.49-3.77(m，4H)，3.17(s，2H)，2.69-2.85(m，4H)，1.76-2.07(m，6H)；MSm/z(C₃₂H₄₃IN₁₀O₁₀S+H)⁺887.5；Anal.calcd为C₃₂H₄₃IN₁₀O₁₀S：N，15.80。发现：N，12.15(肽含量：77％)。

5.35实施例35：乙酰-Pro-His-Ser-Cys-Asn-Gly-Gly-Lys(3-(4-羟基-3，4-二 碘代苯基)丙酰)-NH2

根据实施例3和2的程序用以下修饰制备这个化合物：在赖氨酸上的酰胺形成用3-(4-羟基-3，4-二碘代苯基)丙酸(4eq)、HBTU(4eq)、HOBT(4eq)和NMM(8eq)进行。分离标题化合物为细小的白色粉未(16.2mg，13％)。NMR数据表明一种比例约75∶25的两种物质的混合物：¹H NMR(300MHz，DMSO-d6)89.31(bs，1H)，8.96(m，1H)，8.19-8.44(m，3H)，8.01-8.14(m，2H)，7.95(m，1H)，7.76-7.82(m，2H)，7.55(s，2H)，7.45(s，1H)7.34，7.39(s，1H)，7.27(s，1H)，7.01(s，2H)，5.09(bs，1H)，4.61-4.77(m，1H)，4.51-4.57(m，1H)，4.26-4.37(m，2H)，4.10-4.17(m，1H)，3.62-3.74(m，5H)，3.47-3.52(m，2H)，2.94-3.02(m，5H)，2.73-2.83(m，3H)，2.64-2.69(m，3H)，2.26-2.39(m，4H)，2.00(s，3H)，1.61-1.89(m，4H)，1.44-1.56(m，1H)，1.18-1.39(m，5H)；MS m/z(C₄₂H₅₉I₂N₁₃O₁₃S+H)⁺1240.7；Anal.calcd为C₄₂H₅₉I₂N₁₃O₁₃S：N，14.69。发现：N，12.28(肽含量：84％)。

5.36实施例36：3-(4-羟基-3，5-二碘苯基)丙酰基-β-Ala-Pro-His-Ser-Cys -Asn-NH2

根据实施例1和2的程序用以下修饰制备这个化合物：N-末端的帽化利用3-(4-羟基-3，5-二碘代苯基)丙酸(4.0eq)、HBTU(4.0eq)、HOBT(4.0eq)和NMM(8.0eq)进行。分离出标题化合物(23.3mg，32％)为细小的白色粉未。NMR数据表明一种比例约80∶20的两种物质的混合物：¹H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ9.32(bs，1H)，8.95(s，1H)，8.22-8.42(m，2H)，8.11-8.13app d，1H)，7.97-7.99(app d，1H)，7.81-7.87(m，1H)，7.56(s，2H)，7.35-7.39(m，2H)，7.08-7.11(app d，2H)，6.92(s，1H)，5.12(bs，1H)，4.60-4.78m(m，1H)，4.27-4.50(m，5H)，3.59-3.70(m，3H)，2.94-3.02(m，1H)，2.76-2.83(m，2H)，2.65-2.69(m，2H)，2.28-2.46(m，6H)，1.72-2.09(m，4H)；MSm/z(C₃₃H₄₄I₂N₁₀O₁₀S+H)⁺1027.5；Anal.calcd为C₃₃H₄₄I₂N₁₀O₁₀S：N，13.64。发现：N，10.85(肽含量：80％)。

5.37实施例37：乙酰-Pro-His-Ser-Cys-Asn-Gly-Gly-Lys(5-和6-羧基荧光 素)-NH2

根据实施例2和3的程序用以下修饰制备这个化合物：在赖氨酸上的酰胺形成用5-(和6)羧基荧光素(3eq)、HBTU(3eq)、HOBT(3eq)和NMM(6eq)进行。分离标题化合物为细小的白色粉未(10.5mg，18％)。NMR数据表明一种异构体的混合物：¹H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ10.16(s，1H)，8.78-8.92(m，1H)，8.44，8.68(m，m，1H)，8.05-8.28(m，3H)，7.79-7.96(m，1H)，7.45，7.66(s，s，1H)，7.25-7.37(m，2H)，6.97-7.02(m，2H)，6.69(m，1H)，6.52-6.59(m，2H)，5.08(bs，1H)，4.06-4.80(m，8H)，2.24-2.31，1.99(m，s，3H)，1.67-1.92(m，2H)，1.23-1.59(m，3H)；MS m/z(C₅₄H₆₃N₁₃O₁₇S+H)⁺1198.7；Anal.calcd为C₅₄H₆₃N₁₃O₁₇S：N，15.20。发现：N，11.18(肽含量：73％)。

5.38实施例38：(3-(4-羟苯基)丙酰)-Gly-Gly-Pro-His-Ser-Cys-Asn-NH2

根据实施例1和2的程序用以下修饰制备这个化合物：N-末端的帽化利用3-(4-羟基-3，5-二碘代苯基)丙酸(3eq)、HBTU(3eq)、HOBT(3eq)和NMM(6eq)进行。分离标题化合物为细小的白色粉未(24.2mg，30％)。NMR数据表明一种比例约80∶20的两种物质的混合物：¹H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ9.17，8.51(bs，d，1H，J＝8.2Hz)，8.87-8.93(m，1H)，8.10-8.31(m，3H)，7.80-7.98(m，2H)，7.35-7.38(m，2H)，7.09(d，2H，J＝7.4Hz)，6.96-6.99(m，2H)，6.92(s，1H)，6.63-6.66(m，2H)，5.14(bs，1H)，4.594.77(m，1H)，4.30-4.50(m，4H)，3.85-4.00(m，2H)，3.59-3.75(m，5H)，2.89-3.05(m，1H)，2.66-2.83(m，4H)，2.36-2.46(m，4H)，1.97-2.08(m，1H)，1.67-1.90(m，2H)；MSm/z(C₃₄H₄₇N₁₁O₁₁S+H)⁺818.6；Anal.Calcd为C₃₄H₄₇N₁₁O₁₁S：N，18.84。发现：N，14.36(肽含量：76％)。

5.39实施例39：乙酰-Pro-His-Ser-Cys-Asn-Gly-Gly-Lys(3-(4-羟苯基)丙 酰)-NH2

根据实施例2和3的程序用以下修饰制备这个化合物：在赖氨酸上的酰胺形成用3-(4-羟苯基)丙酸(4eq)、HBTU(4eq)、HOBT(4eq)和NMM(8eq)进行。分离标题化合物为细小的白色粉未(16.2mg，13％)。NMR数据表明一种比例约75∶25的两种物质的混合物：¹H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ8.97(m，1H)，8.42-8.44，8.19-8.30(m，m，3H)，8.07-8.15(m，2H)，7.94-8.04(m，1H)，7.73-7.82(m，2H)，7.45(bs，1H)，7.35，7.40(bs，1H)，7.27(m，1H)，6.95-7.01(m，4H)，6.63-6.65(m，2H)，4.72-4.79(m，1H)，4.61-4.68(m，1H)，4.51-4.58(m，1H)，4.41-4.48(m，1H)，4.264.39(m，2H)，4.10-4.17(m，1H)，3.61-3.79(m，6H)，3.48-3.55(m，2H)，3.12-3.21(m，1H)，2.96-3.02(m，3H)，2.61-2.86(m，4H)，2.25-2.39(m，3H)，2.00(s，3H)，1.63-1.91(m，3H)，1.44-1.56(m，1H)，1.18-1.37(m，4H)；MS m/z(C₄₂H₆₁N₁₃O₁₃S+H)⁺988.8；Anal.calcd为C₄₂H₆₁N₁₃O₁₃S：N，18.43。发现：N，12.75(肽含量：69％)。

5.40实施例40：(3-(4-羟苯基)丙酰)-Gly-Gly-Gly-Gly-Pro-His-Ser-Cys -Asn-NH2

根据实施例1和2的程序用以下修饰制备这个化合物：N-末端的帽化利用3-(4-羟基-3，5-二碘代苯基)丙酸(3eq.)、HBTU(3eq.)、HOBT(3eq.)和NMM(6eq.)进行。分离出标题化合物为细小的白色粉未(27.3mg，29％)。NMR数据表明一种比例约80∶20的两种物质的混合物：¹H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ8.87-8.92(m，1H)，8.24，8.53(d，d，1H，J＝7.4，8.4Hz)，8.31(1H，J＝8.4Hz)，8.08-8.19(m，4H)，7.87-7.98(m，2H)，7.39(s，1H)，7.36(s，1H)，7.10(d，1H，J＝6.5Hz)，6.99(app d，2H)，6.92(s，1H)，6.65(app d，2H)，4.59-4.77(m，1H)，4.30-4.50(m，4H)，3.86-4.02(m，2H)，3.63-3.79(m，7H)，2.92-3.04(m，3H)，2.67-2.84(m，6H)，2.36-2.46(m，5H)，1.97-2.05(m，1H)，1.82-1.90(m，2H)，1.69-1.79(m，2H)；MS m/z(C₃₈H₅₃N₁₃O₁₃S+H)⁺932.6；Anal.Calcd为C₃₈H₅₃N₁₃O₁₃S：N，19.54。发现：N，12.89(肽含量：66％)。

5.41实施例41：(3-(4-羟苯基)丙酰)-Gly-Gly-Gly-Gly-Gly-Gly-Pro-His -Ser-Cys-Asn-NH2

根据实施例1和2的程序用以下修饰制备这个化合物：N-末端的帽化利用3-(4-羟基-3，5-二碘代苯基)丙酸(3eq)、HBTU(3eq)、HOBT(3eq)和NMM(6eq)进行。分离出标题化合物为细小的白色粉未(17.1mg，16％)。NMR数据表明一种比例约70∶30的两种物质的混合物：¹H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ9.11(s，1H)，8.86，8.92(s，s，1H)，8.51，8.05-8.16(m，d，6H，J＝8.5Hz)，8.22-8.32(m，2H)7.87-7.98(m，2H)，7.34-7.39(m，2H)，7.11(s，1H)，7.08(s，1H)，6.98(app d，2H)，6.92(s，1H)，6.64(app d，2H)，5.11(bs，1H)，4.59-4.77(m，1H)，4.31-4.50(m，4H)，3.83-4.02(m，2H)，3.71-3.79(m，9H)，3.58-3.67(m，2H)，3.48-3.53(m，2H)，3.11-3.19(m，1H)，2.91-3.04(m，2H)，2.76-2.83(m，2H)，2.67-2.72(m，2H)，2.35-2.46(m，4H)，1.96-2.09(m，1H)，1.71-1.90(m，4H)；MS m/z(C₄₂H₅₉N₁₅O₁₅S+H)⁺1046.8；Anal.Calcd为C₄₂H₅₉N₁₅O₁₅S：N，20.08。发现：N，15.84(肽含量：79％)。

5.42实施例42：(3-(4-羟苯基)丙酰)-Ahp-Pro-His-Ser-Cys-Asn-NH2

根据实施例1和2的程序用以下修饰制备这个化合物：N-末端的帽化利用3-(4-羟苯基)丙酸(3eq)、HBTU(3eq)、HOBT(3eq)和NMM(6eq)进行。分离出标题化合物为细小的白色粉未(47.4mg，57％)。NMR数据表明一种比例约70∶30的两种物质的混合物：¹H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ8.98(m，1H)，8.21-8.44(m，2H)，7.98-8.14(m，2H)，7.71-7.77(m，1H)，7.40(s，1H)，7.35(m，1H)，7.09(d，2H，J＝9.8Hz)，6.95-6.98(m，2H)，6.92(s，1H)，6.62-6.54(m，2H)，4.62-4.79(m，4H)，4.28-4.50(m，8H)，3.47-3.70(m，4H)，3.12-3.19(m，1H)，2.90-3.03(m，3H)，2.76-2.83(m，2H)，2.65-2.70(m，2H)，2.40-2.46(m，2H)，2.25-2.30(m，3H)，1.72-2.08(m，4H)，1.14-1.50(m，7H)；MSm/z(C₃₇H₅₄N₁₀O₁₀S+H)⁺831.8；Anal.Calcd为C₃₇H₅₄N₁₀O₁₀S：N，16.86。发现：N，13.10(肽含量：78％)。

5.43实施例43：Ac-Tyr-Ahp-Pro-His-Ser-Cys-Asn-NH2

根据实施例1和2的程序用以下修饰制备这个化合物：最终的氨基酸偶联用Ac-Tyr(3-碘代)-OH(3eq)、HBTU(3eq)、HOBT(3eq)和NMM(6eq)进行。分离出标题化合物为细小的白色粉未(40.9mg，46％)。NMR数据表明一种比例约80∶20的两种物质的混合物：¹H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ8.97(m，1H)，8.21-8.44(m，2H)，8.06-8.14(m，1H)，7.97-7.99(m，2H)，7.85-7.87(m，1H)，7.40(s，1H)，7.35(s，1H)，7.09(d，2H，J＝9.7Hz)，6.98-7.00(m，2H)，6.92(s，1H)，6.61-6.64(m，2H)，4.59-4.66(m，2H)，4.25-4.50(m，6H)，3.59-3.71(m，2H)，3.48-3.55(m，2H)，3.12-3.19(m，1H)，2.95-3.10(m，3H)，2.76-2.83(m，3H)，2.57-2.65(m，1H)，2.38-2.46(m，2H)，2.24-2.27(m，2H)，1.80-2.10(m，1H)，1.84-1.89(m，2H)，1.76(s，3H)，1.45-1.49(m，2H)，1.15-1.35(m，6H)；MS m/z(C₃₉H₅₇N₁₁O₁₁S+H)⁺888.8；Anal.Calcd为C₃₉H₅₇N₁₁O₁₁S：N，17.35。发现：N，13.81(肽含量：80％)。

5.44实施例44：DOTA-In-β-Ala-Pro-His-Ser-Cys-Asn-NH2

根据实施例1和2的程序用以下修饰制备这个化合物：最终的酰胺偶联用DOTA-tris(t-丁基酯)(3eq)、HBTU(3eq)、HOBT(3eq)和NMM(6eq)进行。向0.1M AcOH(aq.)(0.5mL)中纯化的肽DOTA化合物(22.0mg，0.022mmol)添加溶于1.0mL 0.2MHCl(aq.)中的氯化铟(48.6mg，0.22mmol)，并在室温下搅拌2小时。根据实施例2的程序纯化合成物。分离出标题化合物为细小的白色粉未(40.9mg，46％)。NMR数据表明一种比例约70∶20∶10的三种物质的混合物：¹H NMR(300MHz，D20)δ8.69-8.90(m，1H)，7.39-7.55(m，1H)，4.53-4.64(m，3H)，4.39-4.48(m，1H)，3.88-3.96(m，5H)，3.24-3.68(m，28H)，3.00-3.02(m，3H)，2.69-2.94(m，9H)，2.24-2.43(m，2H)，1.84-2.10(m，5H)；MS m/z(C₄₀H₆₁InN₁₄O₁₅S+H)⁺11245.8；Anal.Calcd为C₄₀H₆₁InN₁₄O₁₅S：N，17.43。发现：N，12.42(肽含量：71％)。

5.45实施例45：乙酰-Pro-His-Ser-Cys-Asn-Gly-Gly-Gly-Gly-Gly-Gly- Lys-NH2

根据实施例1和2的程序制备这个化合物。分离出标题化合物为细小的白色粉未(15.4mg，10％)。NMR数据表明一种比例约75∶25的两种物质的混合物：¹H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ8.95-8.97(m，1H)，8.43和8.02(d，1H，J＝7.6Hz)，8.11-8.31(m，9H)，7.84-7.86(m，1H)，7.62(bs，3H)，7.44(bs1H)，7.34-7.39(m，1H)，7.29(s，1H)，7.05(s，1H)，7.00(s，1H)，4.51-4.79(m，3H)，4.25-4.48(m，4H)，4.12-4.19(m，2H)，3.74(m，10H)，3.11-3：21(m，2H)，2.94-3.03(m，2H)，2.73-2.82(m，5H)，2.34-2.39(m，1H)，2.00(s，3H)，1.67-1.89(m，5H)，1.46-1.57(m，3H)，1.24-1.34(m，2H)；MSm/z(C₄₁H₆₅N₁₇O₁₅S+H)⁺1068.7；Anal.calcd为C₄₁H₆₅N₁₇O₁₅S：N，22.29。发现：N，15.33(肽含量：69％)。

5.46实施例46：乙酰-Pro-His-Ser-Cys-Asn-Ava-Tyr-NH2

根据实施例1和2的程序制备这个化合物。分离出标题化合物为细小的白色粉未(56.5mg，44％)。NMR数据表明一种比例约75∶25的两种物质的混合物：¹H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ9.13(bs，1H)，8.96-8.97(m，1H)，8.20-8.30(m，2H)，8.13(d，1H，J＝7.8)，7.96-8.04(m，1H)，7.82(d，1H，J＝8.5Hz)，7.57-7.61(m，1H)，7.39(s，1H)，7.34(bs，1H)，6.93-7.01(m，4H)，6.61-6.64(m，2H)，4.62-4.80(m，1H)，4.25-4.50(m，5H)，3.15-3.20(m，1H)，2.95-3.01(m，3H)，2.75-2.87(m，4H)，2.58-2.66(m，1H)，2.36-2.49(m，2H)，2.00-2.02(m，5H)，1.69-1.88(m，3H)，1.35-1.37(m，2H)，1.25-1.28(m，2H)；MSm/z(C₃₇H₅₃N₁₁O₁₁S+H)⁺860.7；Anal.calcd为C₃₇H₅₃N₁₁O₁₁S：N，17.92。发现：N，14.34(肽含量：80％)。

5.47实施例47：乙酰-Pro-His-Ser-Cys-Asn-Ahp-Tyr-NH2

根据实施例1和2的程序制备这个化合物。分离出标题化合物(49.5mg，37％)为细小的白色粉未。NMR数据表明一种比例约80∶20的两种物质的混合物：¹H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ9.12(bs，1H)，8.97-8.98(m，1H)，8.26-8.29(m，1H)，8.42和8.21(d，1H，J＝7.6Hz)，8.13和7.95(d，1H，J＝7.8Hz)，7.81(d，1H，J＝8.5Hz)，7.57-7.60(m，1H)，7.39(s，1H)，7.33(bs，2H)，6.99-7.01(appd，2H)，6.96(s，1H)，6.93(s，1H)，6.61-6.64(app d，2H)，4.60-4.79(m，1H)，4.26-4.53(m，5H)，3.11-3.21(m，1H)，2.94-3.04(m，3H)，2.73-2.88(m，3H)，2.58-2.65(m，1H)，2.39-2.49(m，2H)，2.00-2.04(m，5H)，1.70-1.91(m，3H)，1.28-1.40(m，4H)，1.05-1.20(m，4H)；MS m/z(C₃₉H₅₇N₁₁O₁₁S+H)⁺888.8；Anal.calcd为C₃₉H₅₇N₁₁O₁₁S：N，17.35。发现：N，13.84(肽含量：80％)。

5.48实施例48：3-(4-羟苯基)丙酰基-bAla-Pro-His-Ser-Cys-Asn-NH2

根据实施例1和2的程序用以下修饰制备这个化合物：N-末端的帽化利用3-(4-羟苯基)丙酸(3eq)、HBTU(3eq)、HOBT(3eq)和NMM(6eq)进行。分离出标题化合物为细小的白色粉未(61.1mg，53％)。NMR数据表明一种比例约75∶25的两种物质的混合物：¹H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ8.97(bs，1H)，8.22-8.29(m，2H)，8.10-8.13(m，1H)，7.97和8.41(d，1H，J＝7.2Hz)，7.80(appt，1H)，7.34-7.39(m，2H)，7.08(d，2H，J＝9.8Hz)，6.92-6.98(m，3H)，6.63-6.66(appd，2H)，4.60-4.77(m，1H)，4.27-4.50(m，5H)，3.65-3.71(m，3H)，3.39-3.49(m，3H)，3.11-3.29(m，4H)，2.94-3.04(m，1H)，2.76-2.83(m，2H)，2.37-2.46(m，3H)，2.26-2.31(m，2H)，1.97-2.08(m，1H)，1.72-1.87(m，3H)；MSm/z(C₃₃H₄₆N₁₀O₁₀S+H)⁺775.7；Anal.calcd为C₃₃H₄₆N₁₀O₁₀S：N，18.08。发现：N，12.76(肽含量：71％)。

5.49实施例49：8-(4-氟苯基氨基)辛二酰-β-Ala-Pro-His-Ser-Cys-Asn-NH2

根据实施例1和2的程序用以下修饰制备这个化合物：N-末端的帽化利用8-(4-氟苯基氨基)辛二酸(3eq)、HBTU(3eq)、HOBT(3eq)和NMM(6eq)进行。分离标题化合物为细小的白色粉未(70.8mg，53％)。NMR数据表明一种比例约70∶30的两种物质的混合物：¹H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ8.97(s，1H)，8.22-8.28(m，3H)，8.11-8.14(m，1H)，7.96-7.99和8.40-8.43(m，1H)，7.74-7.80(m，1H)，7.34-7.39(m，2H)，7.24-7.29(m，2H)，7.08-7.16(m，4H)，6.92(bs，1H)，4.29-4.50(m，7H)，4.22(d，2H，J＝5.9Hz)，3.63-3.69(m，2H)，3.44-3.52(m，2H)，3.16-3.26(m，3H)，2.97-3.02(m，1H)，2.76-2.83(m，2H)，2.38-2.49(m，3H)，1.99-2.13(m，5H)，1.72-1.89(m，3H)，1.42-1.54(m，4H)，1.20-1.24(m，4H)；MS m/z(C₃₄H₄₇N₁₁O₁₁S+H)⁺818.6；Anal.Calcd为C₃₉H₅₆FN₁₁O₁₀S：N，17.31。发现：N，11.72(肽含量：68％)。

550实施例50：m-dPEG-β-Ala-His-Ser-Cys-Asn-NH2

根据实施例1和2的程序用以下修饰制备这个化合物：利用NHS-m-dPEGTM(Quanta Biodesign，1.9eq)和TEA(9eq)对N末端进行帽化。分离出标题化合物为细小的白色粉未(38mg，21％)：¹H NMR(300MHz，D20)δ8.58(d，1H，J＝1.2Hz)，7.28(d，1H，J＝0.8Hz)，4.75-4.61(m，2H)，4.53(t，1H，J＝6.2Hz)，4.44(t，1H，J＝5.6Hz)，4.34-4.29(dd，1H，J＝5.1Hz，3.6Hz)，3.82(t，2H，J＝5.4Hz)，3.71(t，2H，J＝6.1Hz)，3.64-3.61(m，44H)，3.58-3.54(m，4H)，3.40(t，2H，J＝6.7Hz)，3.63-3.69(m，2H)，3.44-3.52(m，2H)，3.16-3.26(m，3H)，2.97-3.02(m，1H)，3.32(s，3H)，3.25(d，1H，J＝5.9Hz)，3.18(d，1H，J＝8.4Hz)，2.90(d，2H，J＝6.2Hz)，2.83-2.56(m，3H)，2.46(t，2H，J＝6.1Hz)，2.25-2.15(m，1H)，1.92-1.87(m，1H)，1.83-1.76(m，1H)；MSm/z(C₅₀H₈₈N₁₀O₂₁S+H)⁺1198.1。

5.51实施例51：DTPA与PHSCN结合

树脂(Rink Amide AM树脂)的溶液联合PHSCN(143mg，0.36mmol/g，0.051mmol)、p-SCN-苯甲基DTPA(66mg，0.103mmol)、NNM(120L，2.1mmol)，在无水DMF(2mL)中用氮气在室温下轻轻地搅动7小时，过滤反应混合物并用DMF洗涤一次。再重复这个步骤两次。用DMF洗涤树脂三次，用甲醇洗涤三次和用二氯甲烷洗涤三次。产生的树脂结合化合物用TFA/TIS/水(95∶2.5∶2.5，每100mg树脂1mL)处理，用氮气搅动1小时。过滤反应混合物，树脂用TFA/TIS/水洗涤一次，和用二氯甲烷洗涤三次。在真空中除去溶剂，得到的残余物用醚粉化三次。根据实施例2的程序将产生的白色粉未进行prepHPLC纯化，得到15.5mg(0.014mmol，27.7％)期望的产物：¹H NMR(300MHz，D2O)δ8.66(s，1H)，7.40-7.31(m，5H)，4.97-4.92(dd，J＝4.92，5.31Hz，1H)，4.87-4.83(m，2H)，4.77-4.72(m，1H)，4.65-4.56(m，2H)，4.00-3.97(m，4H)，3.91-3.71(m，10H)，3.49-3.20(m，6H)，3.03-2.97(m，2H)，2.92-2.73(m，4H)，2.38(m，1H)，2.20(m，2H)，2.04-1.85(m，2H)；MS m/z(C₄₃H₆₁N₁₃O₁₇S₂+H)⁺1096.8。

5.52实施例：In3⁺ 螯合到DTPA-PHSCN

将DTPA-PHSCN(20mg，0.018mmol)溶于1mL 0.1M Ac0H(aq)溶液中，将InCl₃(40mg，0.18mmol)溶于2mL 0.02MHCl溶液中。混合这两个溶液并在室温下温育一小时。减压蒸发溶剂，产生的白色粉未根据实施例2的程序进行prepHPLC纯化，得到7.1mg(0.00588mmol，32.6％)期望的产物：¹HNMR(300MHz，D2O)δ8.66(s，1H)，7.41-7.31(m，5H)，4.97-4.92(dd，J＝4.86，5.46Hz，1H)，4.86-4.84(m，2H)，4.76-4.72(dd，J＝5.43，2.88Hz，1H)，4.61-4.57(m，2H)，4.04(d，J＝17.22Hz，1H)，3.90(d，J＝5.82Hz，2H)，3.81-3.60(m，5H)，3.50-3.19(m，10H)，3.14-2.73(m，8H)，2.39(m，1H)，2.16(m，1H)，2.04-1.91(m，2H)；MS m/z(C₄₃H₅₈InN₁₃O₁₇S₂+H)⁺1208.8；Anal.calcd为C₄₃H₅₈InN₁₃O₁₇S₂：N，15.07。发现：N，11.58(肽含量：76.8％)。

5.53实施例53：乙酰-Pro-His-Ser-Cys-Asn-Gly-Gly-Gly-Gly-Lys-NH2

根据实施例1和2的程序制备这个化合物。分离出标题化合物为细小的白色粉未(101mg，70％)：¹H NMR(300MHz，D20)δ8.57(d，J＝1.32Hz，1H)，7.26(s，1H)，4.73-4.72(m，2H)，4.52(t，J＝6.24，1H)，4.43(t，J＝5.25Hz，1H)，4.27(m，2H)，3.94-3.91(m，8H)，3.81(t，J＝5.40Hz，2H)，3.57(t，J＝6.78Hz，1H)，3.31-3.24(dd，J＝15.57，5.67Hz，1H)，3.18-3.09(dd，J＝15.6，8.64Hz，2H)，2.96-2.83(m，4H)，2.80-2.73(m，2H)，2.20-2.16(m，1H)，2.05(s，3H)，1.94-1.57(m，6H)，1.42-1.34(m，2H)；MS m/z(C₃₇H₅₉N₁₅O₁₃S+H)⁺954.9。

5.54实施例54：乙酰-Pro-His-Ser-Cys-Asn-Gly-Gly-Lys(原卟啉)-NH2

根据实施例2和3的程序用以下修饰制备这个化合物：为在赖氨酸上解除ivDde的保护用2％肼处理重复10次，在赖氨酸上的酰胺形成用原卟啉IX(2eq)、PyBOP(2eq)和NMM(6eq)进行。分离出标题化合物为细的暗红色粉未(7.6mg，5.49μM，8.6％)；MS m/z(C₆₇H₈₅N₁₇O₁4S+H)⁺1385.6。

5.55实施例55：Ac-Tyr-β-Ala-Pro-His-Ser-Cys-Asn-NH2

根据实施例1和2的程序从Rink amide AM树脂制备这个化合物，分离出白色蓬松的固体；ES MS m/z(M+H)⁺832，(M+Na)⁺854。

5.56实施例56：Ac-Pro-His-Ser-Cys-Asn-β-Ala-Tyr-NH2

根据实施例1和2的程序从Rink amide AM树脂制备这个化合物，分离出白色蓬松的固体；ES MS m/z(M+H)⁺832，(M+Na)⁺854。

5.57实施例57：Ac-Pro-His-Ser-Cys-Asn-Gly-Gly-Lys-NH2

根据实施例1和2的程序从Rink amide AM树脂制备这个化合物，分离出白色蓬松的固体；ES MS m/z(M+H)⁺840。

5.58实施例58：Ac-Pro-His-Ser-Cys-Asn-Gly-Gly-Lys(生物素)-NH2

根据实施例1和2的程序从Rink amide AM树脂制备这个化合物，分离出白色蓬松的固体；ES MS m/z(M+H)⁺1066.5。

最后，应当注意到，存在着实施本发明的替换性方法。因此，当前的实施方式应被认为是说明性的而非限制的，本发明不应被限于此处给出的细节，但可在附随的权利要求的范围和等同意义内进行修改。此处引用的全部出版物和专利文献全文引人作参考。

Claims (74)

1.式(1)的化合物：

或其药学上可接受的盐，溶剂化物，水合物或N-氧化物，其中：

j和k独立地是0或1；

p和q独立地是0和100之间且包括0和100的整数；

r和s独立地是0或1；

R¹是酰基、取代的酰基、酰基螯合物、烃基、取代的烃基、环烃基、取代的环烃基、亚氨基或取代的亚氨基；

R²是C₁-C₆烃基，其有至少一个氢原子被取代基取代，所述取代基选自-NR⁶R⁷、-OR⁸、-CO₂R⁹、-S(O)_zR¹⁰、-P(OR¹¹)OR¹²、芳基和取代的芳基；

R⁶、R⁷、R⁸、R⁹、R¹⁰、R¹¹和R¹²独立地选自氢、酰基、取代的酰基、酰基螯合物、烃基、取代的烃基、环烃基、取代的环烃基、亚氨基和取代的亚氨基；

X¹是-NH(C＝C)_gCO-、-NH(CH₂)_hCO-或-NHCH(CH₃)CO-；

g和h独立地是1、2、3、4、5或6

X₂是

或

X₃是

X₄是

或

l是1到4的整数；

X₅是

或；

R¹³是氢、烃基、取代的烃基、酰基、取代的酰基、芳烃基、取代的芳烃基、芳基、取代的芳基或-S(O)_xR¹⁴；

n是从1到5的整数；

R¹⁴是烃基、取代的烃基、酰基、取代的酰基、芳烃基、取代的芳烃基、芳基或取代的芳基；

y和x独立地是0、1或2；

X₆是

m是1、2、3或4中的整数；

X₇是-NH(C＝C)_dCO-、-NH(CH₂)_eCO-或-NHCH(CH₃)CO-；

d和e独立地是1、2、3、4、5或6；

R³是C₁-C₆烃基，其有至少一个氢原子被取代基取代，所述取代基选自-NR¹⁵R¹⁶、-OR¹⁷、-CO₂R¹⁸、-S(O)_nR¹⁹、-P(OR²⁰)OR²¹、芳基和取代的芳基；

R⁴和R⁵独立地是氢、烃基或取代的烃基；和

R¹⁵、R¹⁶、R¹⁷、R¹⁸、R¹⁹、R²⁰和R²¹独立地选自氢、酰基、取代的酰基、酰基螯合物、烃基、取代的烃基、环烃基、取代的环烃基、亚氨基和取代的亚氨基；

附带条件为当R⁴和R⁵是氢以及r和s是0时R¹不是乙酰基。

2.权利要求1的化合物，其中当R⁴和R⁵是氢时R¹不是乙酰基。

3.权利要求1的化合物，其中r或s的至少一个是1。

4.权利要求1的化合物，其中s是1和r是0。

5.权利要求1的化合物，其中s是0和r是1。

6.权利要求1的化合物，其中R¹是酰基、取代的酰基、酰基螯合物、亚氨基或取代的亚氨基。

7.权利要求1的化合物，其中R²是C₁-C₆烃基，其有至少一个氢原子被选自-NR⁶R⁷、-OR⁸和-CO₂R⁹的取代基取代。

8.权利要求7的化合物，其中R⁶、R⁷、R⁸和R⁹独立地选自氢、酰基、取代的酰基、酰基螯合物、亚氨基或取代的亚氨基。

9.权利要求1的化合物，其中X₁是-NH(CH₂)_hCO-。

10.权利要求1的化合物，其中R³是C₁-C₆烃基，其有至少一个氢原子被选自-NR¹⁵R¹⁶、-OR¹⁷和-CO₂R¹⁸的取代基取代。

11.权利要求1的化合物，其中R¹⁵、R¹⁶、R¹⁷和R¹⁸独立地选自氢、酰基、取代的酰基、酰基螯合物、亚氨基或取代的亚氨基。

12.权利要求1的化合物，其中：

R¹是酰基或取代的酰基；

R²是C₁-C₄烃基，其有至少一个氢原子被选自-NR⁶R⁷、芳基和取代的芳基的取代基取代；

R⁶和R⁷独立地选自氢、酰基和取代的酰基；

X₁是-NH(CH₂)_hCO-；

X₂是

X₄是

X₅是

R¹³是氢、酰基、取代的酰基、烃基或取代的烃基；

X₆是

X₇是-NH(CH₂)_eCO-；

R³是C₁-C₄烃基，其有至少一个氢原子被选自-NR¹⁵R¹⁶、芳基和取代的芳基的取代基取代；

R¹⁵和R¹⁶独立地选自氢、酰基和取代的酰基；和

R⁴和R⁵是氢。

13.权利要求12的化合物，其中：

s是0和r是1；

k是1；

R¹是乙酰基；

R¹³是氢；

e是1；和

R³是-(CH₂)₄NH₂。

14.权利要求13的化合物，其中q是2、4或6。

15.权利要求12的化合物，其中

s是0和r是1；

k是1；

R¹是乙酰基；

R¹³是氢；

e是2、4或6；和

R³是-(CH₂)₄NHCO(CH₂)₂-Ph-(4-OH)。

16.权利要求15的化合物，其中q是1。

17.权利要求12的化合物，其中：

s是0和r是1；

k是1；

R¹是乙酰基；

R¹³是氢；

e是2、4或6；和

R³是-CH₂-Ph-(4-OH)。

18.权利要求17的化合物，其中q是1。

19.权利要求12的化合物，其中

s是0和r是1；

k是1；

R¹是乙酰基；

R¹³是甲基；

e是1；和

R³是-(CH₂)₄NH₂。

20.权利要求19的化合物，其中q是2。

21.权利要求12的化合物，其中：

s是1和r是0；

j是1；

R¹是乙酰基；

R¹³是氢；

h是1；和

R²是-CH₂-Ph-(4-OH)。

22.权利要求21的化合物，其中p是2、4或6。

23.权利要求12的化合物，其中

s是1和r是0；

j是1；

R¹是乙酰基；

R¹³是氢；

h是2、4或6；和

R²是-CH₂-Ph-(4-OH)。

24.权利要求23的化合物，其中p是1。

25.权利要求12的化合物，其中：

s是1和r是0；

j是0；

R¹是-CO(CH₂)₂-Ph-(4-OH)；

R¹³是氢；和

h是1。

26.权利要求25的化合物，其中p是2、4或6。

27.权利要求12的化合物，其中：

s是1和r是0；

j是0；

R¹是-CO(CH₂)₂-Ph-(4-OH)；

R¹³是氢；和

h是2、4或6。

28.权利要求27的化合物，其中p是1。

29.权利要求12的化合物，其中：

s是0和r是0；

R¹是-(CH₂)₂-Ph-(4-OH)；和

R¹³是氢。

30.权利要求12的化合物，其中：

s是0和r是0；

R¹是-COPh-(4-F)；和

R¹³是氢。

31.权利要求12的化合物，其中：

s是0和r是1；

k是1；

R¹是乙酰基；

R¹³是甲基或氢；

e是1；和

R³是-(CH₂)₄NHCOPh-(4-F)。

32.权利要求31的化合物，其中q是2。

33.权利要求12的化合物，其中：

s是0和r是1；

k是1；

R¹是乙酰基；

R¹³是氢；

e是1；和

R³是-(CH₂)₄NH-8-[4′-氟苯甲基氨基]辛二酰或-(CH₂)₄NHCOCH₂F。

34.权利要求33的化合物，其中q是2。

35.权利要求12的化合物，其中：

s是1和r是0；

j是0；

R¹是8-[4′-氟苯甲基氨基]辛二酰或-COCH₂F；

R¹³是氢；和

h是2。

36.权利要求35的化合物，其中p是1。

37.权利要求12的化合物，其中

s是0和r是1；

k是1；

R¹是乙酰基；

R¹³是氢；和

R³是-CH₂Ph-(3-I，4-OH)或-CH₂Ph-(3，5-二碘，4-OH)。

38.权利要求37的化合物，其中q是0。

39.权利要求37的化合物，其中q是1和e是2。

40.权利要求37的化合物，其中q是1和e是1。

41.权利要求12的化合物，其中

s是1和r是0；

j是1；

R¹是乙酰基；

R¹³是氢；和

R²是-CH₂Ph-(3-I，4-OH)或-CH₂Ph-(3，5-二碘，4-OH)。

42.权利要求41的化合物，其中p是0。

43.权利要求12的化合物，其中

s是0和r是0；

R¹是-CO(CH₂)₂Ph(4-OH，3，5二-碘)；和

R¹³是氢。

44.权利要求12的化合物，其中

s是1和r是0；

j是0；

R¹是-CO(CH₂)₂Ph(4-OH，3，5二-碘)；

h是2；和

R¹³是氢。

45.权利要求44的化合物，其中p是1。

46.权利要求12的化合物，其中

s是1和r是0；

j是1；

R¹是乙酰基；

R²是-CH₂-Ph(4-OH，3，5二-碘)；

h是2；和

R¹³是氢。

47.权利要求46的化合物，其中p是1。

48.权利要求12的化合物，其中

s是0和r是1；

R³是-(CH₂)₄NHCO(CH₂)₂-Ph(4-OH，3，5二-碘)；

e是1；和

R¹³是氢。

49.权利要求48的化合物，其中q是2。

50.权利要求1的化合物，其中：

R¹是酰基螯合物；

R²、R⁶、R⁷、X₁、X₂、X₄、X₅、R¹³、X₆、X₇、R³、R¹⁵、R¹⁶、R⁴和R⁵如权利要求12中所定义。

51.权利要求50的化合物，其中

s是1和r是0；

j是0；

R¹是DOTA-In；

h是2；和

R¹³是氢。

52.权利要求51的化合物，其中p是1。

53.权利要求50的化合物，其中

s是0和r是0；

R¹是DPTA或DPTA-In；和

R¹³是氢。

54.式(III)的化合物：

或其药学上可接受的盐，溶剂化物，水合物或N-氧化物，其中：

R²⁰是酰基、取代的酰基、烃基、取代的烃基、环烃基、取代的环烃基、亚氨基、取代的亚氨基或诊断剂；

R²¹是C₁-C₆烃基，其有至少一个氢原子被选自-NHR²²的取代基取代；

R²²是氢、酰基、取代的酰基、烃基、取代的烃基或诊断剂；和

j、k、p、q、r、s、R²、X₁、X₂、X₃、X₄、X₅、X₆、X₇、R⁴和R⁵如权利要求1中所定义；

附带条件是R²⁰和R²²的至少一个是诊断剂。

55.权利要求54的化合物，其中R²、X₁、X₂、X₃、X₄、X₅、X₆、X₇、R⁴和R⁵如权利要求12中所定义。

56.权利要求55的化合物，其中R²⁰是荧光剂。

57.权利要求56的化合物，其中R²⁰是5/6羧基荧光素，s是1，r是0，j是0，e是2和p是1。

58.权利要求55的化合物，其中R²²是荧光剂。

59.权利要求58的化合物，其中R²¹是(CH₂)₄NH-，R²²是-5/6羧基荧光素，s是0，r是1，k是1，e是1和q是2。

60.权利要求55的化合物，其中R²¹是(CH₂)₄NH-，R²²是生物素，s是0，r是1，k是1，e是1和q是2。

61.式(IV)的化合物：

或其药学上可接受的盐，溶剂化物，水合物或N-氧化物，其中：

R²³是酰基、取代的酰基、烃基、取代的烃基、环烃基、取代的环烃基、亚氨基、取代的亚氨基或聚乙二醇化剂；

R²⁴是C₁-C₆烃基，其有至少一个氢原子被选自-NHR²⁸的取代基取代，其中R²⁸是氢、酰基、取代的酰基、烃基、取代的烃基或聚乙二醇化剂；和

j、k、p、q、r、s、R²、X₁、X₂、X₃、X₄、X₅、X₆、X₇、R⁴和R⁵如权利要求1中所定义；

附带条件是R²³或R²⁸的至少一个是聚乙二醇化剂。

62.权利要求61的化合物，其中R²、X₁、X₂、X₃、X₄、X₅、X₆、X₇、R⁴和R⁵如权利要求12中所定义。

63.权利要求62的化合物，其中R²³是m-dPEG，s是1，r是0，j是0，h是2，和p是1。

64.式(V)的化合物：

或其药学上可接受的盐，溶剂化物，水合物或N-氧化物，其中：

R²⁹是C₁-C₆烃基，其有至少一个氢原子被-NHR³²取代；

R³⁰是酰基、取代的酰基、烃基、取代的烃基或治疗剂。

R³¹是氢、烃基、取代的烃基或治疗剂；

R³²是氢、酰基、取代的酰基、烃基、取代的烃基或治疗剂；和

j、k、p、q、r、s、R²、X₁、X₂、X₃、X₄、X₅、X₆、X₇、R⁴和R⁵如权利要求1中所定义；

附带条件是R³⁰、R³¹和R³²的至少一个是治疗剂。

65.权利要求64的化合物，其中R²、X₁、X₂、X₃、X₄、X₅、X₆、X₇和R⁴如权利要求12中所定义。

66.权利要求65的化合物，其中R¹³是甲基或乙酰基，s是0，r是0，R³⁰是乙酰基和R³¹是治疗剂。

67.权利要求66的化合物，其中所述治疗剂是阿霉素。

68.权利要求65的化合物，其中R¹³是甲基或氢，s是0，r是1，k是1，e是1，q是2，R³⁰是乙酰基，R³¹是氢，R²⁹是-(CH₂)₄NHR³²。

69.权利要求68的化合物，其中R³²是-CO(CH₂)₃-阿霉素。

70.权利要求68的化合物，其中R³²是原卟啉。

71.药物组合物，其包含权利要求1的化合物和药学上可接受的载体。

72.在病人中治疗或预防癌症的方法，包括向需要这种治疗或预防的病人施用治疗有效量的权利要求1的化合物。

73.在病人中治疗或预防癌症的方法，包括向需要这种治疗或预防的病人施用治疗有效量的权利要求71的药物组合物。

74.在病人中检测癌症的方法，包括向需要这种检测的病人施用诊断有效量的权利要求71的药物组合物。