CN1701785A - 含有脂溶性维生素c和二棕榈羟基脯氨酸的纳米粒子及其化妆品组成物 - Google Patents

含有脂溶性维生素c和二棕榈羟基脯氨酸的纳米粒子及其化妆品组成物 Download PDF

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Abstract

本发明是一种含有脂溶性维生素C和二棕榈羟基脯氨酸的纳米粒子及其化妆品组成物，在纳米粒子中含有0.1～30％的脂溶性维生素C和0.1～30％的二棕榈羟基脯氨酸，二者对皮肤抗老化有明显效果，纳米粒子的粒径为5～50nm，具有较高的皮肤渗透能力，在护肤霜、护肤乳液、精华液、润肤水中添加至含量1～20％的本发明的纳米粒子，不仅保持原化妆品功能，而且对于皮肤抗老化、美白、增加弹性具有显著效果。

Description

含有脂溶性维生素C和二棕榈羟基脯氨酸的纳米粒子及其化妆品组成物
技术领域：本发明涉及一种日用化妆品，进一步说涉及一种含有脂溶性维生素C和二棕榈羟基脯氨酸的化妆品。
背景技术：人的皮肤因为暴露在紫外线、吸烟、减肥、高温、沐浴、心理紧张或随着时间的流逝，必然不知不觉地出现皱纹、失去弹性、皮肤松弛和水分失去等现象，经历所谓的老化过程，皮肤无法避免这些现象的理由很复杂。老化的很多原因中重要原因是皮肤内的真皮分解，就是皮肤深处的结构丧失活性的变化。随着细胞逐渐分解，外皮失去本来的弹性而逐渐松弛，其起因是胶原蛋白数量的变化。
胶原蛋白是通过真皮的纤维质形成三维结合的蛋白质，纤维原细胞是生成胶原蛋白的细胞，把胶原蛋白纤维在其结构之内连接并交叉结合，使其形成更强、更稳定的中心细胞，起着调节胶原蛋白纤维收缩作用的功能。随着时间的流逝，互相作用的细胞数结构的致密性减少，其组织的三维结构也逐渐分解，而使胶原蛋白纤维引起收缩作用的纤维原细胞的能力下降，致使皮肤逐渐失去弹性。这些细胞功能的减少引起皮肤内胶原蛋白的减少，其结果细胞功能下降，这就是所谓的老化。
为了防止这样的皮肤老化现象，曾进行过胶原蛋白作为化妆材料通过皮肤吸收的研究，但因为由高分子组成的胶原蛋白本身特性和亲水性特性，皮肤渗透几乎不可能。所以众多研究人员选择把胶原蛋白通过注射剂向皮肤内供给的方法，该方法存在着每次都需要烦琐的施术和昂贵的费用及注射的胶原蛋白通过体内吸收一段时间之后才能再次施术等缺点。比胶原蛋白更容易渗透到皮肤内本身拥有优越的胶原蛋白合成能力，或作为辅助方法促进纤维原细胞合成功能的物质方面的研究比较活跃，而且提供了各种方法。各种蛋白质中最接近老化的蛋白质一胶原蛋白特征性构成的氨基酸-脯氨酸的研究非常多。
脯氨酸可以说是胶原蛋白的构成氨基酸中重要的合成物质，是唯一在胶原蛋白发现的特征性氨基酸。胶原蛋白一般是氨基乙酸×X×Y结构，这是X位为脯氨酸、Y位为羟基脯氨酸组成的重复性序列。这样的脯氨酸对动物细胞的生长是必需的因素，其衍生物是高血压抑制剂、甘油三酸酯分解剂、血管紧缩素II拮抗剂等医药用品，正进行多方而研究，作为化妆材料对防皱效果等方面也有研究发表。
在脯氨酸通过羟基脯氨酸及氨基乙酸的结合成为胶原蛋白的生理活性过程中，维生素C的作用是非常重要的，对维生素C的抗老化及皮肤美白用途的研究正在进行。维生素C有着极强的抗氧化能力、胶原蛋白合成能力等很多优点，但因为对热和光不稳定，实际上作为化妆材料，有很多制约。
与此有关的已有专利，美国专利4,564,686，将维生素C用磷酸酯化而改善维生素C的稳定性，由此增加皮肤内胶原蛋白的合成量，开对维生素E及提高稳定性的化合物公开发表，但在皮肤渗透能力方面有所质疑。而法国专利87,121,832，是对脯氨酸、羟基脯氨酸和/或胶原蛋白的水解生成物的氨基酸组成的防老化化妆材料组成物公开发表，但上述专利只不过是氨基乙酸等胶原蛋白的水解生成物的各种氨基酸及羟基脯氨酸等所组成胶原蛋白的氨基酸混合使用而期望获得协同效果，而对皮肤渗透方面的效果如何只字不提。而欧洲专利2,683,038在羟基脯氨酸用棕榈酸酯化，使其拥有亲油性而改善皮肤渗透效果之后，对羟基脯氨酸的防皱效果进行技术公开，但上述专利对其皮肤渗透方面效果如何没有具体提及。
如上述，为了增加皮肤内胶原蛋白合成量、恢复皮肤弹性效果，在化妆品材料中将脯氨酸衍生物或者维生素C衍生物作为活性成分的技术是有的，但是同时把脯氨酸和维生素C衍生物包含在化妆材料，产生出上述显著效果的技术至今没有，而且同时考虑皮肤渗透力的技术至今没有发表过。为了使皮肤有效地吸收活性成分，将活性成分制成直径10～200nm的纳米粒子使其纯化，并使纳米粒子成为化妆品材料中的有效成分，促进皮肤渗透力的技术作为表皮吸收材料，最近深受关注。
发明内容：本发明目的是在获得通过胶原蛋白合成性能的优秀皮肤防皱效果及美白效果的同时，提供具有优秀的皮肤吸收能力的化妆品材料组成物。
为了完成上述的技术课题，本发明不仅具有抗老化的肌肤重塑因子材料二棕榈羟基脯氨酸，及胶原蛋白合成时必需的生体物质维生素C衍生物-稳定的脂溶性维生素C，而且把这些成分制成纳米粒子，达到最大限度地获得皮肤渗透效果，皮肤抗老化和美白、增加皮肤弹性方面效果等的化妆品材料的目的。
本发明是有关含有脂溶性维生素C(Ascorbyl tetra iso palmitate)和二棕榈羟基脯氨酸(Di palmitoyl hydroxy proline；DPHP)的粒径5～50nm纳米粒子及含有这些物质的化妆品材料组成物，详细说明如下：本发明将脂溶性维生素C和二棕榈羟基脯氨酸的纳米粒子，包含在护肤霜、精华液、润肤水、乳液等各种化妆品材料组成物为特征，是具有皮肤内胶原蛋白合成性能及皮肤吸收力的皮肤抗老化、美白及增强弹性的化妆材料组成物。
本发明纳米粒子的特征是，按重量百分比配制：饱和卵磷脂(Lecithin)1.0～5.0％，乙醇1.0～10.0％，三癸酸/辛酸甘油脂1.0～10.0％，脂溶性维生素C0.1～30.0％，二棕榈羟基脯氨酸0.1～30.0％，2、6二叔丁基对甲酚(BHT)0.1～0.5％、甘油10.0～50.0％及蒸馏水余量，上述纳米粒子在化妆品材料组成物中含量为1～20.0％。
纳米粒子按照活性成分组成，以脂质体或者纳米乳剂的两种形态制成。脂质体内部有亲水性空间，外部有封闭的双重脂质膜可以粘贴脂溶性成分或者可以结合阳电荷及阴电荷物质。纳米乳剂是以单分子层形成的小囊，在稳定性、流动学特性、均匀性、表面积等方面，与普通乳剂有不同的物理化学特性，内部包含活性成分，可以把活性成分有效地渗透到皮肤。
本发明针对前述的已有技术缺点，将脂溶性维生素C和二棕榈羟基脯氨酸混合使用，可以取得最优秀的胶原蛋白合成性能，二棕榈羟基脯氨酸具有肌肤重塑因子功能，将两种成分制成纳米粒子，该纳米粒子即使在化妆品中少量使用也具有良好的渗透性，可根据化妆品应用范围，选定用量，使之成为具有胶原蛋白合成性能及皮肤吸收能力的最有效的化妆品材料组成物。
本发明的有益效果：本发明混合使用脂溶性维生素C及二棕榈羟基脯氨酸，显著提高皮肤内胶原蛋白的合成性能的效果，而且适当比例混合上述两种成分和饱和卵磷脂、乙醇等，制成粒径5～50nm纳米粒子使其稳定，使得脂溶性维生素C及二棕榈羟基脯氨酸的皮肤渗透力显著提高。本发明的含有纳米粒子的化妆材料组成物有优秀的皮肤生皱抑制能力和皮肤美白效果等特征。这种化妆品对美容产业是非常有用的发明。
附图说明：
图1是实施例1纳米粒子显微照片；
图2是实施例1纳米粒子粒径分布图。
具体实施方式：
本发明方法制造的纳米粒子及其化妆品所使用的材料均为市售商品。
实施例1：纳米粒子的制造方法
以下述表1所示的材料，按重量百分比在有搅拌的容器里，搅拌混合并经高压细微均质器三次细碎之后脱泡，取得含有脂溶性维生素C和二棕榈羟基脯氨酸的纳米粒子。按上述重量百分比任选一重量数均可获得本发明的纳米粒子组合物，该纳米粒子组合物中饱和卵磷脂、乙醇、三癸酸/辛酸甘油酯、BHT甘油组分为常用化妆品组分，具有护肤、润肤效果，可单独使用。
表1 纳米粒子的组成
    成分     含量(重量百分比)
    饱和卵磷脂     1.0～5.0％
    乙醇     1.0～10.0％
    三癸酸/辛酸甘油脂     1.0～10.0％
    脂溶性维生素C     0.1～30.0％
    二棕榈羟基脯氨酸(DPHP)     0.1～30.0％
    2、6二叔丁基甲酚(BHT)     0.1～0.5％
    甘油     10.0～50.0％
    蒸馏水     余量
图1是本发明的纳米粒子利用冷冻显微切片机观察到的显微照片。
按照上述组成的本发明的纳米粒子以脂质体或纳米乳剂存在的。脂质体和纳米乳剂两者在其结构上都含有亲水性和亲油性成分，是活性成分有效地渗透到皮肤的最适合的状态。
图2是本发明生产的纳米粒子大小及分布以Malvem Zetasizer 1000 HS粒径测定仪测定并显示的图表。按照图2，显示出本发明可以取得5～50nm的纳米粒子。
实验例1～4：胶原蛋白合成效果实验
本实验是间接比较防皱效果的胶原蛋白合成性能试验。本实验是按照常规细胞培养和测定方法进行。在细胞没有毒性的浓度范围有选择的实施。
纤维原细胞的分离及培养，通过新生儿的包皮环切术取得的皮肤，利用手术剪刀除去脂肪之后，取得2～4mm大小的皮肤切片。在此注入I型胶原酶溶液，在37℃温度中放置12小时之后，完全除去胶原酶溶液。自真皮除去表皮并用手术刀细切真皮之后在培养基培养纤维原细胞。本实验使用3-7次继代培养的纤维原细胞。
人体纤维细胞的培养液是采用美国Gibco BRL制造的DMEM培养基，在DMEM培养基中加入谷氨酸盐0.48mg/ml青霉素100lu/ml，10％的脱敏胎儿血清，在6室培养皿中分别加入配制的培养液，每个培养皿植入纤维原细胞为5×105个，培养时间以达到细胞体积增加至79～80％为止，每个细胞里的DPHP以二甲亚砜处理，调整DPHP浓度；其它物质成分以蒸馏水处理，调整其它物质成分浓度，每个实验以不同的浓度处理细胞并培养两天之后，把细胞培养基和细胞分别冷藏保存。
细胞萃取物(Cell extract)则放入少量丁二酶-1.4丁二醇聚酯(PBS)之后，利用细胞刮刀刮出，倒入1mol/L NaOH100μl和蒸馏水400μl放置一天，进行蛋白质分析，培养基进行胶原蛋白分析，使用可与可溶性胶原结合的生物染色剂进行着色，生物染色剂为bio color公司的分析纯Sircolcollagen。
首先利用0.5mol/L醋酸或醋酸盐的缓冲液100μl进行空白实验之后，在加入标准胶原蛋白和amicon公司的centricon 10浓缩培养基的各试管中添加1.0ml Sircol dye reagent生物染色剂后混合10分钟，在5000转/分以上的离心机分离10分钟，除去溶解产物，在此添加1.0ml Sircol Alkali Reagent碱试剂轻轻混合之后，在540nm进行分光测定。
再以蛋白质量增加胶原蛋白分析值计算胶原蛋白生成量增加率，。实验结果以只处理DMEM培养基为对照样，分析与此对照样相比较时胶原蛋白生成量的增加率。
表2
各实验样的胶原合成率(％)
  项目   实验例1  实验例2   实验例3   实验例4   备注
脂溶性维生素C   0.01％  -   0.005％   0.003
二棕榈羟基脯氨酸   -  0.01％   0.005％   0.003
胶原蛋白合成率(％)   43  52   73   57
上述试验结果，混合使用脂溶性维生素C或二棕榈羟基脯氨酸时的胶原蛋白合成率，比单独使用增加更加明显，即实验例1、2结果和实验例3、4的结果相比较，混合使用脂溶性维生素C和二棕榈羟基脯氨酸时，即使是少量其效果比上述两种成分中单独使用其中一个时更加显著。
实验例5
表皮吸收效果实验
表3 为比较例及实验例5的制剂组成
表3
   原料名    比较例    实验例5
油相   鲸蜡硬脂醇(cetosteary alcohol)    1.0(重量％下同)     1.0
  单硬脂酸甘油脂    0.7     0.7
  液体石蜡    10.0     10.0
  硬脂酸    1.4     1.4
  吐温-60(Twin 60)    1.5     1.5
  DPHP    1.5     -
  脂溶性维生素C    2.0     -
水相   甘油    6.0     6.0
  丙烯酸聚合物(卡波)    0.14     0.14
  甲基安息香酸酚酯    0.20     0.20
  三乙醇胺    0.10     0.10
  EDTA    0.05     0.05
纳米粒子   纳米粒子(二棕榈羟基脯氨酸15％)(脂溶性维生素C20％)    - 10.0
香料   香料    0.10     0.10
  蒸馏水    余量(100％)     余量(100％)
利用上述表3组成的比较例制剂和实验例5制剂实施表皮吸收实验。表皮吸收以无毛天竺鼠皮肤为其对象，以1cm2面积划分之后，各制剂准确称量0.5g，并使其避免受到污染，涂于无毛天竺鼠表皮上，30分钟之后，利用胶布剥离方法(tape stripping)，分四次进行实验。皮肤表面的二棕榈羟基脯氨酸浓度以高压液相色谱(HPLC)进行分析。其结果，如下表4。
表4
皮肤表面的二棕榈羟基脯氨酸含量(％)
    区分                       次数
    1次     2次     3次     4次
  比较例     81.0     11.4     7.6     0.0
  实验例5     43.5     21.4     16.8     14.7
实验结果，比较例没有加工成纳米粒子的二棕榈羟基脯氨酸主要在皮肤表面存在，几乎不产生皮肤渗透；而在实验例5制剂，产生大部分皮肤渗透。即，通过二棕榈羟基脯氨酸、脂溶性维生素C和饱和卵磷脂、乙醇等适当组成并混合而制造的本发明的纳米粒子，皮肤吸收能力显著上升。
以下实施例是在常规化妆品配方中添加本发明的纳米粒子，添加量以在重量百分比范围任意值选择均可获得效果良好的护肤化妆品。
实施例2：含有纳米粒子的护肤霜
表5
护肤霜制型的组成
            成分     含量(重量百分比)
   山梨醇硬脂酸盐/或椰油蔗糖脂     4.00％
   硬脂酸     1.50％
   坚果油(Macadamia nut Oil)     6.00％
   硅油     1.00％
   甘油     8.00％
   丙烯酸聚合物(卡波)     0.36％
   纳米粒子     1-20％
   香料     0.10％
   蒸馏水     余量(合计为100％)
上述表5的成分中，将油相成分与溶解于蒸馏水的水相成分，在70～75℃下充分、均匀混合，采用普通均质混合(Homo Mixer)的乳化设备。乳化的混合物冷却之后，在40℃温度下投入香料和纳米粒子，充分搅拌、混合之后，再冷却、脱泡而制出作为化妆品材料的护肤霜剂型。
实施例3：含有纳米粒子的护肤液生产
表6
护肤乳液制型的组成
           成分     含量(重量百分比)
    聚甘油-3-甲基葡萄糖双硬脂酸     2.00％
    硬脂酸     0.50％
    葵花油     8.00％
    异三十烷     4.00％
    硅油     1.00％
    甘油     5.00％
    丙烯酸聚合物(卡波)     0.20％
    纳米粒子     1-20％
    香料     0.10％
    蒸馏水     余量(合计为100％)
上述表6的成分中，溶解于油的成分为油相成分、溶解于蒸馏水的成分为水相成分，在70～75℃下采用普通均质混合的乳化设备(Homo Mixer)。乳化的混合物冷却之后，在40℃下加入香料和纳米粒子，充分搅拌、混合之后，再冷却、脱泡而制造出作为化妆品材料的护肤乳液制剂。
实施例4：含有纳米粒子的精华液生产
表7
精华液制剂的组成
            成分     含量(重量百分比)
    芦芭胶(Lubragel)     15.0％
    丙烯酸聚合物(卡波)     0.40％
    聚乙二醇-1500(PFG-1500)     3.00％
    甘油     7.00％
    纳米粒子     1-20％
    蒸馏水     余量(合计为100％)
上述表7的成分逐步加入到蒸馏水中并搅拌，然后添加纳米粒子，搅拌均匀制成悬浊液状的精华液化妆品材料。
实施例5：含有纳米粒子的润肤水生产
表8
润肤水剂型的组成
    成分     含量(重量百分比)
    纳米粒子     1-50％
    蒸馏水     余量
把上述实施例1制造的纳米粒子重量百分比1.0～50.0％添加在蒸馏水重量百分比40～99％均匀混合，制成悬浊液状的润肤水。

Claims (3)

1、一种含有脂溶性维生素C和二棕榈羟基脯氨酸的纳米粒子及其化妆品组成物，其特征在于：在纳米粒子中以重量百分比计：
饱和卵磷脂                   1.0～5.0％
乙醇                         1.0～10.0％
三癸酸/辛酸甘油酯            1.0～10.0％
脂溶性维生素C                0.1～30.0％
二棕榈羟基脯氨酸             0.1～30.0％
2、6二叔丁基甲酚             0.1～0.5％
甘油                         10.0～50.0％
蒸馏水                       余量。
2、根据权利要求1所述的含有脂溶性维生素C和二棕榈羟基脯氨酸的纳米粒子及其化妆品组成物，其特征在于：所述的纳米粒子粒径为5～50nm。
3、根据权利要求1所述的含有脂溶性维生素C和二棕榈羟基脯氨酸的纳米粒子及其化妆品组成物，其特征在于：所述的化妆品中含有1～20％的纳米粒子。
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