CN1692905A - 治疗高血脂症的组合物 - Google Patents

Abstract

本发明提供一种新的治疗高脂血症的药物组合物，其特征是含有有效量的阿昔莫司(Acipimox)和氟伐他汀(Fluvastatin)钠，重量比为(5～30)∶1，优选重量比为(5～15)∶1，进一步优选重量比为10∶1。其降脂作用明显优于相同剂量的单方，表明两药合用有协同作用，同时又无明显的毒性作用。

Description

治疗高血脂症的组合物

所属技术领域

本发明涉及治疗高血脂症的新的组合物，特别是含有阿昔莫司(Acipimox)和氟伐他汀(Fluvastatin)盐及药用辅料的组合物。

背景技术

随着医药科学的不断发展，人们认识到胆固醇、脂肪等含量过高是发生心血管疾病的基本病因，高血脂是发生冠心病及高血压的主要危险因素。因此，人们开始把血脂调节药的开发作为防治心血管疾病的重点。自20世纪80年代末起，降血脂药物大量推出，其中他汀类药物受到人们好评，其临床疗效之佳是其它各类调节血脂药物所不能相比的。十多年来，几个国际大规模冠心病防治试验的完成，证实他汀类药物可以降低冠心病的发病率和死亡率，而且能使已经形成的动脉粥样硬化斑块发展减缓，甚至减退，从而打破了冠心病不可逆转的传统观念，由“他汀”引发的一场血脂革命正在全球兴起。目前，医药界对调脂药在防治心血管疾病方面的作用充满信心，调脂疗法将成为21世纪预防心血管疾病的主要方法。

氟伐他汀(fluvastatin)是第一个全合成的羟甲戊二酰辅酶A(HMG-CoA)还原酶抑制剂类调血脂新药，无需代谢转化而直接具有药理活性。本品在体内竞争性地抑制胆固醇合成过程中的限速酶羟甲戊二酰辅酶A还原酶，使胆固醇的合成减少，继而使低密度脂蛋白受体合成增加，从而加强了由受体介导的低密度脂蛋白胆固醇的分解和清除，本品还抑制极低密度脂蛋白胆固醇的合成从而减少低密度脂蛋白胆固醇的生成。以上主要作用部位在肝脏，结果使血胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇水平降低，由此对动脉粥样硬化和冠心病的防治产生作用。本品还可中度降低血甘油三酯水平和轻度升高血高密度脂蛋白胆固醇水平。临床主要用于治疗高胆固醇血症和混合型高脂血症，最大降脂作用在4周内达到。经大量临床研究证实，本品具有优良的效益/风险比率，毒性低，副作用少而轻微，患者耐受性良好，是安全有效的降脂药物。上市的是其钠盐。

阿昔莫司(Acipimox)是一种人工合成的烟酸衍生物，能抑制脂肪组织的分解，减少游离脂肪酸自脂肪组织释放，从而降低甘油三酯(TG)在肝脏中的合成，并通过抑制极低密度脂蛋白(VLDL)和低密度脂蛋白(LDL)的合成，使血清中甘油三酯(TG)和总胆固醇(TC)的浓度下降。本品还可抑制肝脏脂肪酶的活性，减少高密度脂蛋白(HDL)的分解。该药口服吸收迅速，药后2小时内血药浓度即达峰值，半衰期为2小时。该药不与血浆蛋白结合，不被代谢，主要以原形经尿排出。在临床上，阿昔莫司可有效治疗高甘油三酯症(IV型)、高胆固醇血症(IIa型)及高甘油三酯合并高胆固醇血症(IIb型)，是一种安全、有效、耐受性好的调血脂药。

目前，该领域的研究趋势是将两种不同作用机制的调血脂药制成复方制剂，从而使降脂作用更加全面，同时还可发挥协同作用，增强疗效，减少毒副作用。

美国专利US5260305A公开了HMG-CoA还原酶抑制剂普伐他汀和烟酸及其衍生物的组合物，具体公开了规格为普伐他汀5mg、10mg、20mg、40mg和阿昔莫司750mg的组合物的制备，但没有公开其有益效果及最佳配比的药理实验数据。

中国专利申请CN1425374A公开了阿昔莫司和洛伐他汀组合物，公开的比例是阿昔莫司和洛伐他汀的重量比为25～50∶1，优选的比例是25∶1或37.5∶1，但没有涉及阿昔莫司和氟伐他汀复方的最佳配比及相应药理实验数据。

发明目的

本发明的目的是通过一系列科学的筛选实验，提供一种新的治疗高脂血症的药物组合物，其优点是作用全面和增强、毒副作用低和使用方便。本药物含有特定比例的阿昔莫司和氟伐他汀盐，由于两药作用机制不同，组成组合物后降脂作用将更加全面，并且两药合用有协同作用，其降脂作用明显优于相同剂量的单方；此外，通过合理选择组合物中氟伐他汀盐的用量，使组合物在有效降低血脂水平的同时又无明显的毒副作用，同时本组合物一日只需用药一次，用药方便，这将大大提高患者的顺应性。

发明内容

本发明的组合物由阿昔莫司和氟伐他汀盐以及药用辅料组成，其中阿昔莫司和以游离酸计的氟伐他汀盐的重量比为5～40∶1，优选的比例的是5～15∶1，进一步优选的比例的是10∶1。该组合物的药物制剂的剂型，包括片剂、胶囊、颗粒剂、丸剂、滴丸等固体制剂，可以按照本领域公知的一般制剂方法制备，阿昔莫司含量相当于在将组合物给药时约200～750mg的日剂量，氟伐他汀盐含量以游离酸计相当于5～40mg的日剂量。氟伐他汀盐包括钠盐、钾盐等碱金属盐或镁、钙等碱土金属盐，优选钠盐。

本发明的组合物在制成固体制剂，如片剂或胶囊时，为达到持久的治疗效果，优选地将有效量的阿昔莫司制成缓释部分，再与有效量的氟伐他汀盐共同制成缓释制剂，如缓释片、缓释胶囊等。相应地，可药用的辅料包括稀释剂，如淀粉、乳糖、甘露醇、预胶化淀粉、糊精、微晶纤维素；崩解剂，如羧甲基淀粉钠、羟丙基淀粉、低取代羟丙基纤维素、羧甲基纤维素钠；缓释剂，如乙基纤维素、羟丙基甲基纤维素-4M、羟丙基甲基纤维素-15M；优特奇RS-100、RL100、RS30D、RL30D、NE30D，以及苏丽丝(Surelease，乙基纤维素的水分散体)粘合剂，如聚乙烯吡咯烷酮，交联聚乙烯吡咯烷酮，润滑剂，如硬脂酸镁、滑石粉、微粉硅胶等。

本发明的组合物通过药理方面的研究工作，表明当采用本发明的组合物，尤其是采用优选的配比时，与单独应用有效量的阿昔莫司或氟伐他汀盐相比，本发明的组合物给出令人吃惊的更好效果，同时毒性没有增加，因而安全剂量范围大，疗效持续时间长，综合效果好，使用方便。本发明的组合物可以每日1～2次给药，优选为每日1次。

本发明中氟伐他汀可以为任何一种可以药用的盐，即合适的氟伐他汀生理可接受的盐，包括衍生自无机的和有机的碱所形成的盐，为钠盐、钙盐、钾盐、镁盐、锌盐、铁盐；也可以为任何一种氟伐他汀可以药用的酯，即合适的氟伐他汀生理可接受的酯，包括衍生自脂肪醇、芳香醇、杂环醇所形成的酯，为甲酯、乙酯、烯丙酯、苯酯。

具体实施方式

现通过如下实例进一步说明本发明的内容，但本发明的应用范围不限于下列实例。

实例1

a、阿昔莫司                        200g

   空白丸芯                        250g

   7％PVP溶液(溶剂为90％乙醇)      200g

制备工艺：将阿昔莫司过120目筛，处方量称取，倒入下料斗中。开造粒包衣机，入风压力0.5bar，入风温度30℃，喷枪压力(CYL)3bar，雾化压力(CAP1)0.8bar，倒入空白丸芯，造粒，下料速度4rpm，蠕泵12％，转盘转速145rpm，喷7％PVP溶液(溶剂为90％乙醇)。造粒结束，50℃烘干，出料。

b、氟伐他汀钠                      10g(以氟伐他汀游离酸计)

   空白丸芯                        30g

   7％PVP溶液(溶剂为90％乙醇)      30g

制备工艺：将氟伐他汀钠过120目筛，处方量称取，倒入下料斗中。开造粒包衣机，入风压力0.5bar，入风温度30℃，CYL：3bar，CAP1：0.8bar，倒入空白丸芯，造粒，下料速度4rpm，蠕泵6％，转盘转速160rpm，喷7％PVP溶液(溶剂为90％乙醇)。造粒结束，45℃烘干，出料。

c、将a和b制得的小丸采用硬胶囊药物填充机按照每两粒胶囊中含阿昔莫司与氟伐他汀(以游离酸计)的量分别为200mg和10mg进行填充，即可。

实例2

a、阿昔莫司                        200g

   乳糖                            30g

   羧甲基淀粉钠                    30g

   微晶纤维素                      18g

   6％PVP的无水乙醇溶液            100g

   硬脂酸镁                        2g

制备工艺：阿昔莫司过100目筛，乳糖、羧甲基淀粉钠、微晶纤维素过80目筛，称取处方量的阿昔莫司和乳糖、羧甲基淀粉钠、微晶纤维素混合均匀，加入6％PVP无水乙醇溶液适量制粒，60℃干燥，16目筛整干颗粒，干颗粒中加入处方量的硬脂酸镁。

b、氟伐他汀钠                    20g(以氟伐他汀游离酸计)

   羟丙基纤维素                  30g

   预胶化淀粉                    20g

   6％PVP的无水乙醇溶液          30g

   山榆酸甘油酯                  1g

制备工艺：氟伐他汀钠过100目筛，羟丙基纤维素、预胶化淀粉过80目筛，称取处方量的氟伐他汀钠和羟丙基纤维素、预胶化淀粉混合均匀，加入6％PVP的无水乙醇溶液适量制粒，60℃干燥，16目筛整干颗粒，干颗粒中加入处方量的山榆酸甘油酯。

c、将上述a，b两种组分采用双层压片机冲压片即得双层片，每片含阿昔莫司与氟伐他汀(以游离酸计)的量分别为200mg和20mg。

实例3

a、阿昔莫司                      200g

   乳糖                          30g

   羧甲基淀粉钠                  30g

   微晶纤维素                    18g

   6％PVP的无水乙醇溶液          100g

   硬脂酸镁                      2g

制备工艺：阿昔莫司过100目筛，乳糖、羧甲基淀粉钠、微晶纤维素过80目筛，称取处方量的阿昔莫司和乳糖、羧甲基淀粉钠、微晶纤维素混合均匀，加入6％PVP无水乙醇溶液适量制粒，60℃干燥，16目筛整干颗粒，干颗粒中加入处方量的硬脂酸镁。

b、氟伐他汀钠                    30g(以氟伐他汀游离酸计30g)

   羟丙基纤维素                  50g

   预胶化淀粉                    40g

   6％PVP的无水乙醇溶液          50g

   山榆酸甘油酯                  2g

制备工艺：氟伐他汀钠过100目筛，羟丙基纤维素、预胶化淀粉过80目筛，称取处方量的氟伐他汀钠和羟丙基纤维素、预胶化淀粉混合均匀，加入6％PVP的无水乙醇溶液适量制粒，60℃干燥，16目筛整干颗粒，干颗粒中加入处方量的山榆酸甘油酯。

c、将上述a，b两种组分采用双层压片机冲压片即得双层片，每片含阿昔莫司与氟伐他汀(以游离酸计)的量分别为200mg和30mg。

实例4

a、阿昔莫司                      200g

   乳糖                          30g

   羧甲基淀粉钠                  30g

   微晶纤维素                    18g

   6％PVP的无水乙醇溶液          100g

   硬脂酸镁                      2g

制备工艺：阿昔莫司过100目筛，乳糖、羧甲基淀粉钠、微晶纤维素过80目筛，称取处方量的阿昔莫司和乳糖、羧甲基淀粉钠、微晶纤维素混合均匀，加入6％PVP无水乙醇溶液适量制粒，60℃干燥，16目筛整干颗粒，干颗粒中加入处方量的硬脂酸镁。

b、氟伐他汀钠                    40g(以氟伐他汀游离酸计)

   羟丙基纤维素                  75g

   预胶化淀粉                    60g

   6％PVP的无水乙醇溶液          50g

   山榆酸甘油酯                  2g

制备工艺：氟伐他汀钠过100目筛，羟丙基纤维素、预胶化淀粉过80目筛，称取处方量的氟伐他汀钠和羟丙基纤维素、预胶化淀粉混合均匀，加入6％PVP的无水乙醇溶液适量制粒，60℃干燥，16目筛整干颗粒，干颗粒中加入处方量山榆酸甘油酯。

c、将上述a，b两种组分采用双层压片机冲压片即得双层片，每片含阿昔莫司与氟伐他汀(以游离酸计)的量分别为200mg和40mg。

实例5

a、阿昔莫司                    300g

   羟丙基甲基纤维素-4M         40g

   微晶纤维素                  30g

   8％PVP的无水乙醇溶液        150g

   硬酯酸镁                    2g

制备工艺：阿昔莫司过100目筛，羟丙基纤维素-4M、微晶纤维素过80目筛，称取处方量的阿昔莫司和羟丙基纤维素-4M、微晶纤维素混合均匀，加入8％PVP无水乙醇溶液适量制粒，60℃干燥，16目筛整干颗粒，干颗粒中加入处方量的硬脂酸镁。

b、氟伐他汀钠                  20g(以氟伐他汀游离酸计)

   羧甲基纤维素钠              30g

   乳糖                        20g

   6％PVP的95％乙醇溶液        50g

   硬酯酸镁                    2g

制备工艺：氟伐他汀钠过100目筛，羧甲基纤维素钠、乳糖过80目筛，称取处方量的氟伐他汀钠和羧甲基纤维素钠、乳糖混合均匀，加入6％PVP的95％乙醇溶液适量制粒，60℃干燥，16目筛整干颗粒，干颗粒中加入处方量的硬脂酸镁。

c、将上述a，b两种组分采用双层压片机冲压即得双层片，每片含阿昔莫司与氟伐他汀(以游离酸计)的量分别为300mg和20mg。

实例6

a、阿昔莫司                    300g

   空白丸芯                    250g

   7％PVP溶液(溶剂为90％乙醇)  200g

制备工艺：将阿昔莫司过120目筛，处方量称取，倒入下料斗中。开造粒包衣机，入风压力0.5bar，入风温度30℃，CYL：3bar，CAP1：0.8bar，倒入空白丸芯，造粒，下料速度4rpm，蠕泵12％，转盘转速145rpm，喷7％PVP溶液(溶剂为90％乙醇)。造粒结束，50℃烘干，出料。

b、a中制得的含阿昔莫司小丸

   Surelease                   90g

   滑石粉                      1g

   纯水                        50g

制备工艺：将a中制得的含阿昔莫司小丸倒入转盘，开造粒包衣机，入风压力1.0bar，入风温度30℃，CYL：3bar，CAP1：1.5bar，蠕泵5％，转盘转速180rpm，喷入Surelease的纯水溶液。包衣结束，50℃烘干，出料。

c、按照实例1中b的要求制得氟伐他汀钠小丸，与本例b中制得的阿昔莫司小丸采用硬胶囊药物填充机按照每两粒胶囊中含阿昔莫司与氟伐他汀(以游离酸计)的量分别为300mg和10mg进行填充，即可。

实例7

a、阿昔莫司                    300g

   空白丸芯                    300g

   7％PVP溶液(溶剂为90％乙醇)  200g

制备工艺：将阿昔莫司过120目筛，处方量称取，倒入下料斗中。开造粒包衣机，入风压力0.5bar，入风温度30℃，CYL：3bar，CAP1：0.8bar，倒入空白丸芯，造粒，下料速度4rpm，蠕泵12％，转盘转速145rpm，喷入7％PVP溶液(溶剂为90％乙醇)。造粒结束，50℃烘干，出料。

b、a中制得的含阿昔莫司小丸

   乙基纤维素                  40g

   硬脂酸                      70g

   聚乙二醇-6000               6g

   滑石粉                        12g

   95％乙醇                      1000g

制备工艺：将a中制得的含阿昔莫司小丸倒入下料斗中。开造粒包衣机，入风温度30℃，入风压力0.5bar，入风温度30℃，CYL：3bar，CAP1：1.0bar，蠕泵6％，转盘转速175rpm，喷入乙基纤维素、硬脂酸和聚乙二醇-6000的95％乙醇溶液。包衣结束，50℃烘干，出料。

c、氟伐他汀钠                    30g(以氟伐他汀游离酸计)

   空白丸芯                      90g

   7％PVP溶液(溶剂为90％乙醇)    30g

制备工艺：将氟伐他汀钠过120目筛，处方量称取，倒入下料斗中，开造粒包衣机，入风压力0.5bar，入风温度30℃，CYL：3bar，CAP1：0.8bar，倒入空白丸芯，造粒。下料速度4rpm，蠕泵12％，转盘转速120rpm，喷入7％PVP溶液(溶剂为90％乙醇)。造粒结束，45℃烘干，出料。

d、将b与c制得的小丸采用硬胶囊药物填充机按照每两粒胶囊中含阿昔莫司与氟伐他汀(以游离酸计)的量分别为300mg和30mg进行填充，即可。

实例8

a、阿昔莫司                      400g

   甘露醇                        10g

   乳糖                          40g

   微晶纤维素                    20g

   6％PVP的95％乙醇溶液          120g

   硬酯酸镁                      2g

制备工艺：阿昔莫司过100目筛，甘露醇、乳糖、微晶纤维素过80目筛，称取处方量的阿昔莫司和甘露醇、乳糖、微晶纤维素混合均匀，加入6％PVP的95％乙醇溶液适量制粒，60℃干燥，16目筛整干颗粒，干颗粒中加入处方量的硬脂酸镁。

b、氟伐他汀钠                    10g(以氟伐他汀游离酸计)

   预胶化淀粉                    50g

   甘露醇                    50g

   乳糖                      40g

   6％PVP的95％乙醇溶液      100g

   微粉硅胶                  5g

制备工艺：氟伐他汀钠过100目筛，预胶化淀粉、甘露醇、乳糖过80目筛，称取处方量的氟伐他汀钠和预胶化淀粉、甘露醇、乳糖混合均匀，加入6％PVP的95％乙醇溶液适量制粒，60℃干燥，16目筛整干颗粒，干颗粒中加入处方量的硬脂酸镁。

c、将上述a，b两种组分采用双层压片机冲压即得双层片，每片含阿昔莫司与氟伐他汀(以游离酸计)的量分别为400mg和10mg。

实例9

a、阿昔莫司                  400g

   乳糖                      30g

   羟丙基甲基纤维素-15M      20g

   8％PVP的95％乙醇溶液      150g

   山榆酸甘油酯              2g

制备工艺：阿昔莫司过100目筛，乳糖、羟丙基甲基纤维素-15M过80目筛，称取处方量的阿昔莫司和乳糖、羟丙基甲基纤维素-15M混合均匀，加入8％PVP的95％乙醇溶液适量制粒，60℃干燥，16目筛整干颗粒，干颗粒中加入处方量的山榆酸甘油酯。

b、氟伐他汀钠                20g(以氟伐他汀游离酸计)

   羟丙基纤维素              75g

   糊精                      70g

   6％PVP的95％乙醇溶液      50g

   滑石粉                    2g

制备工艺：氟伐他汀钠过100目筛，羟丙基纤维素、糊精过80目筛，称取处方量的氟伐他汀钠和羟丙基纤维素、糊精混合均匀，加入6％PVP的95％乙醇溶液适量制粒，60℃干燥，16目筛整干颗粒，干颗粒中加入处方量的滑石粉。

c、将上述a，b两种组分采用双层压片机冲压即得双层片，每片含阿昔莫司与氟伐他汀(以游离酸计)的量分别为400mg和20mg。

实例10阿昔莫司和氟伐他汀钠复方治疗大鼠高血脂症的复方筛选

摘要：

本试验的目的在于通过筛选确定毒性低、作用强、使用方便的阿昔莫司和氟伐他汀钠复方制剂的组成。采用高脂饲料诱发大鼠高脂血症模型，给模型大鼠连续灌服阿昔莫司(100～400mg/kg)和(或)氟伐他汀钠(5～40mg/kg，以游离酸计，下述氟伐他汀钠的剂量均以氟伐他汀游离酸计)14天。结果发现，阿昔莫司和氟伐他汀钠伍用对高脂饲料所致的大鼠高脂血症有明显的治疗作用，降脂效果与两种药物的剂量相关，阿昔莫司200～400mg/kg与氟伐他汀钠10～40mg/kg组成的复方可不同程度地降低大鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇水平(LDL-C)，升高高密度脂蛋白胆固醇水平(HDL-C)。其中阿昔莫司300mg/kg和氟伐他汀钠30mg/kg联合用药组效果最显著，对TC和LDL-C水平均表现出协同作用，并且对高血脂模型大鼠血清中丙氨酸氨基转移酶和肌酸激酶的水平影响较小，优选阿昔莫司300mg/kg和氟伐他汀钠30mg/kg组成的复方。在本实验剂量范围内，联合用药组对与肝脏和肌肉毒性相关的血清酶活性无明显影响。

1 试验目的

通过筛选确定阿昔莫司和氟伐他汀钠复方制剂的组成，以达到复方制剂毒副作用低、作用全面和增强、使用方便之目的。

2 受试药物

2.1 烟酸衍生物

药品名称：阿昔莫司(Acipimox)

批    号：0207002

纯    度：大于99.7％

生产单位：鲁南制药股份有限公司

保存条件：阴凉干燥处保存，有效期1年半。

配制方法：临用前用1％羧甲基纤维素钠(CMC)混匀，配成试验所需浓度。

2.2 他汀类药物

药品名称：氟伐他汀钠(fluvastatin sodium)

批    号：0307001

纯    度：大于99.0％

提供单位：山东新时代药业有限公司

保存条件：阴凉干燥处保存，有效期2年。

配制方法：临用前用1％CMC混匀，配成试验所需浓度。

3 动物

3.1 品系和来源

Wistar大鼠，军事医学科学院医学实验动物中心繁殖，实验动物质量许可证号为医动字D01-3039。

3.2 体重和性别

年龄9周～10周，体重180-220g，雄性。

3.3 饲养条件

动物实验室空气定时排风、光照良好，常温。每笼饲养5只动物，饲以本院实验动物中心专门为大鼠配制的膨化饲料，自由饮水。动物实验条件合格证号为医动字D01-2051。试验开始前，观察动物进食、活动及粪便等1周，选择健康动物进入试验。

4 大鼠高脂血症模型制备^[1]

大鼠高脂血症模型采用高脂饲料致高脂血症法。高脂饲料配方如下：基础饲料86.3％、胆固醇3％、猪油10％、甲基硫氧嘧啶0.2％、猪胆盐0.5％，保证各成分混合均匀。连续2周。给药期间隔天给予高脂饲料。

5 阿昔莫司和氟伐他汀钠对正常大鼠血脂水平的影响

5.1 剂量设置依据

临床上阿昔莫司的剂量为250mg/次(按人体重60kg计算，上述剂量为4.2mg/kg)，2～3次/日，每日量最大不超过1200mg^[2]。按体表面积为单位的剂量等效原则推算，上述人常用剂量换算成大鼠剂量约为50mg/kg/day。结合文献报道^[3]，将本试验中阿昔莫司的剂量设定为100、200、300、400mg/kg。

临床上氟伐他汀钠的剂量为20mg/次，按人体重60kg计算，上述剂量为0.33mg/kg，1次/日，每日量最大不超过80mg^[4]。按体表面积为单位的剂量等效原则推算，上述人常用剂量换算成大鼠剂量约为0.85mg/kg。参考文献报道^[5-12]，将本试验中氟伐他汀钠的剂量设定为5、10、20、30、40mg/kg。

5.2 组别设置

依据上述剂量设置，按血清总胆固醇水平均衡原则，将正常动物随机分为：(1)正常对照组；(2)阿昔莫司100mg/kg组；(3)阿昔莫司200mg/kg组；(4)阿昔莫司300mg/kg组；(5)阿昔莫司400mg/kg组；(6)氟伐他汀钠5mg/kg组；(7)氟伐他汀钠10mg/kg组；(8)氟伐他汀钠20mg/kg组；(9)氟伐他汀钠30mg/kg组；(10)氟伐他汀钠40mg/kg组；(11)阿昔莫司200mg/kg和氟伐他汀钠10mg/kg组；(12)阿昔莫司200mg/kg和氟伐他汀钠20mg/kg组；(13)阿昔莫司200mg/kg和氟伐他汀钠30mg/kg组；(14)阿昔莫司200mg/kg和氟伐他汀钠40mg/kg组；(15)阿昔莫司300mg/kg和氟伐他汀钠10mg/kg组；(16)阿昔莫司300mg/kg和氟伐他汀钠20mg/kg组；(17)阿昔莫司300mg/kg和氟伐他汀钠30mg/kg组；(18)阿昔莫司400mg/kg和氟伐他汀钠10mg/kg组；(19)阿昔莫司400mg/kg和氟伐他汀钠20mg/kg组。每组10只。

5.3 给药

临床拟用的给药途径为口服，故本试验采用灌胃法给药，连续灌胃4天。灌胃均在动物进食后进行。每天1次。给药体积为0.3ml/100g体重。

5.4 检测指标

血清化学指标包括总胆固醇(TC)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、肌酸激酶(CK)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-L)。其中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、肌酸激酶(CK)检测试剂采用北京中生生物工程高技术公司产品，用SABA/18全自动生化分析仪测定；其余试剂采用日本罗氏试剂公司产品，用日立7020自动生化分析仪测定。测定方法参照试剂说明书取血样前禁食16小时。

6 阿昔莫司和氟伐他汀钠对高脂血症大鼠血脂水平的影响

6.1 剂量设置依据

同5.1正常大鼠实验。

6.2 组别设置

依据上述剂量设置，按血清总胆固醇水平均衡原则，将模型大鼠随机分为：(1)正常对照组；(2)模型对照组；(3)阿昔莫司100mg/kg组；(4)阿昔莫司200mg/kg组；(5)阿昔莫司300mg/kg组；(6)阿昔莫司400mg/kg组；(7)氟伐他汀钠5mg/kg组；(8)氟伐他汀钠10mg/kg组；(9)氟伐他汀钠20mg/kg组；(10)氟伐他汀钠30mg/kg组；(11)氟伐他汀钠40mg/kg组；(12)阿昔莫司200mg/kg和氟伐他汀钠10mg/kg组；(13)阿昔莫司200mg/kg和氟伐他汀钠20mg/kg组；(14)阿昔莫司200mg/kg和氟伐他汀钠30mg/kg组；(15)阿昔莫司200mg/kg和氟伐他汀钠40mg/kg组；(16)阿昔莫司300mg/kg和氟伐他汀钠10mg/kg组；(17)阿昔莫司300mg/kg和氟伐他汀钠20mg/kg组；(18)阿昔莫司300mg/kg和氟伐他汀钠30mg/kg组；(19)阿昔莫司400mg/kg和氟伐他汀钠10mg/kg组；(20)阿昔莫司400mg/kg和氟伐他汀钠20mg/kg组。每组10只。

6.3 给药

临床拟用的给药途径为口服，故本试验采用灌胃法给药，连续灌胃14天。灌胃均在动物进食后进行。每天1次。给药体积为0.3ml/100g体重。

6.4 检测指标

同5.4正常大鼠实验。

7 阿昔莫司和氟伐他汀钠复方不同组分相互影响试验

7.1 组别设置

从疗效较显著的阿昔莫司和氟伐他汀钠剂量组中，确定阿昔莫司和氟伐他汀钠复方的剂量：(1)正常对照组；(2)模型对照组；(3)阿昔莫司300mg/kg；(4)氟伐他汀钠30mg/kg；(5)阿昔莫司300mg/kg和氟伐他汀钠30mg/kg组复方组。每组10只。分组前测定血清总胆固醇水平，按均衡原则随机分组。每组10只。

7.2 给药和检测指标

同前述6.3和5.4。

8 试验结果

8.1 阿昔莫司和氟伐他汀钠对正常大鼠血脂水平的影响

正常大鼠给药4天后，阿昔莫司、氟伐他汀钠和联合用药组的总胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇均有所降低，高密度脂蛋白胆固醇水平有所升高，给药后血清甘油三酯略有下降。其中，阿昔莫司200mg/kg与氟伐他汀钠40mg/kg、阿昔莫司300mg/kg与氟伐他汀钠20mg/kg和阿昔莫司300mg/kg与氟伐他汀钠30mg/kg三个联用组总胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇与正常对照组比较有显著下降，见表1。

                    表1  阿昔莫司和氟伐他汀钠及复方对正常大鼠血脂的影响

组别	血清总胆固醇(mmol/L)	血清甘油三酯(mmol/L)	低密度脂蛋白胆固醇(mmol/L)	高密度脂蛋白胆固醇(mmol/L)
					正常对照组阿昔莫司100mg/kg阿昔莫司200mg/kg阿昔莫司300mg/kg阿昔莫司400mg/kg氟伐他汀钠5mg/kg氟伐他汀钠10mg/kg氟伐他汀钠20mg/kg氟伐他汀钠30mg/kg氟伐他汀钠40mg/kg阿200+氟10mg/kg阿200+氟20mg/kg阿200+氟30mg/kg阿200+氟40mg/kg阿300+氟10mg/kg阿300+氟20mg/kg	1.72±0.361.54±0.361.49±0.491.41±0.25*1.36±0.35*1.52±0.311.53±0.621.43±0.501.13±0.27*1.37±0.33*1.46±0.491.41±0.411.36±0.36*1.33±0.33*1.45±0.291.39±0.29*	0.65±0.140.67±0.200.69±0.150.59±0.170.53±0.170.63±0.190.60±0.160.56±0.200.55±0.210.58±0.130.66±0.160.68±0.190.65±0.170.55±0.180.59±0.190.57±0.19	0.41±0.140.39±0.120.35±0.180.32±0.140.28±0.140.42±0.130.38±0.100.35±0.130.32±0.140.28±0.09*0.33±0.150.30±0.120.28±0.120.26±0.12*0.31±0.140.27±0.13*	1.08±0.141.07±0.191.17±0.201.20±0.171.22±0.11*1.07±0.171.12±0.201.18±0.191.21±0.191.22±0.13*1.19±0.161.21±0.141.19±0.221.24±0.211.22±0.151.20±0.20

阿300+氟30mg/kg阿400+氟10mg/kg阿400+氟20mg/kg

1.34±0.31*1.49±0.351.41±0.42

0.54±0.170.58±0.190.56±0.16

0.28±0.10*0.29±0.130.30±0.11

1.23±0.13*1.03±0.171.11±0.21

注：1、与正常对照组比较，^*P＜0.05   2、阿代表阿昔莫司，氟代表氟伐他汀钠，下同。

8.2 阿昔莫司和氟伐他汀钠对模型大鼠血脂水平的影响

大鼠饲以高脂饲料14天后分组给药。阿昔莫司的剂量范围为100～400mg/kg，氟伐他汀钠的剂量范围为5～40mg/kg，组成联合用药组。给药14天后，与模型对照组比较，阿昔莫司和氟伐他汀钠各剂量组血清总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇均有不同程度的下降，高密度脂蛋白胆固醇水平均有所升高。其中阿昔莫司300mg/kg与氟伐他汀钠30mg/kg联用组大鼠血清总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇水平显著降低，高密度脂蛋白胆固醇水平显著升高。与相同剂量的单方比较，阿昔莫司和氟伐他汀钠各联合用药组上述指标均有相应的变化，其中阿昔莫司300mg/kg与氟伐他汀钠30mg/kg联用组大鼠血清总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇水平下降程度十分显著，表现出协同作用。

                           表2  阿昔莫司和氟伐他汀钠及复方对模型大鼠血脂的影响

组别	血清总胆固醇(mmol/L)	血清甘油三酯(mmol/L)	低密度脂蛋白胆固醇(mmol/L)	高密度脂蛋白胆固醇(mmol/L)
					正常对照组模型对照组阿昔莫司100mg/kg阿昔莫司200mg/kg阿昔莫司300mg/kg阿昔莫司400mg/kg氟伐他汀钠5mg/kg氟伐他汀钠10mg/kg氟伐他汀钠20mg/kg氟伐他汀钠30mg/kg氟伐他汀钠40mg/kg阿200+氟10mg/kg阿200+氟20mg/kg阿200+氟30mg/kg阿200+氟40mg/kg阿300+氟10mg/kg阿300+氟20mg/kg	1.69±0.5612.04±3.45###11.08±0.9410.14±1.619.35±1.27*9.26±1.02*12.09±3.0111.32±3.199.40±1.27*9.29±1.67*9.25±1.58*9.77±1.508.98±1.49*7.34±1.54**7.12±1.13***8.44±1.98*6.66±1.61***	0.59±0.152.55±0.96###2.42±0.762.51±1.061.86±0.26*1.78±0.45*2.53±0.802.39±0.942.21±0.792.00±0.591.83±0.36*2.51±1.012.29±0.911.96±0.381.81±0.43*2.05±0.321.76±0.58*	0.29±0.158.94±1.61###8.74±1.647.66±0.85*7.60±0.99*7.42±1.34*8.66±1.548.42±1.458.07±0.557.48±1.30*7.19±0.18*7.43±1.37*6.71±0.98**6.13±1.10***6.12±1.07**6.86±0.73**6.72±1.02**	1.11±0.163.53±0.88###3.65±1.133.71±1.094.02±0.614.33±0.67*3.72±1.153.77±1.033.76±0.983.85±0.914.09±1.343.89±0.663.93±0.594.07±0.534.26±0.624.18±0.584.11±0.65

阿300+氟30mg/kg阿400+氟10mg/kg阿400+氟20mg/kg

5.41±1.35***7.92±1.52**6.27±1.73***

1.71±0.68*1.83±0.521.73±0.38*

5.56±0.90***6.46±0.90***6.11±0.72***

4.34±0.56*4.11±0.644.21±1.08

注：与正常对照组比较，###P＜0.001；与模型对照组比较，^*P＜0.05，^**P＜0.01，^***P＜0.001

8.3 阿昔莫司和氟伐他汀钠对模型大鼠血清酶活性的影响

本实验通过测定用药14天后高血脂模型大鼠血清中丙氨酸氨基转移酶和肌酸激酶的水平，来评价阿昔莫司和氟伐他汀钠及复方对模型大鼠肝脏功能和骨骼肌组织的影响。结果表明，与模型对照组相比，阿昔莫司各剂量(100～400mg/kg)组模型大鼠血清丙氨酸氨基转移酶和肌酸激酶水平均无显著差异(P＞0.05)；氟伐他汀钠各剂量(5～40mg/kg)组模型大鼠血清中上述指标亦未见显著差异(P＞0.05)，氟伐他汀钠和阿昔莫司各联合用药组大鼠血清丙氨酸氨基转移酶和血清肌酸激酶均无明显变化(P＞0.05)，见表3。

表3  阿昔莫司和氟伐他汀钠及复方对模型大鼠血清丙氨酸氨基转移酶和肌酸激酶的影响

组别	丙氨酸氨基转移酶(nmol.s-1/L)	肌酸激酶(U/L)
			正常对照组模型对照组阿昔莫司100mg/kg阿昔莫司200mg/kg阿昔莫司300mg/kg阿昔莫司400mg/kg氟伐他汀钠5mg/kg氟伐他汀钠10mg/kg氟伐他汀钠20mg/kg氟伐他汀钠30mg/kg氟伐他汀钠40mg/kg阿200+氟10mg/kg阿200+氟20mg/kg阿200+氟30mg/kg阿200+氟40mg/kg阿300+氟10mg/kg阿300+氟20mg/kg阿300+氟30mg/kg阿400+氟10mg/kg阿400+氟20mg/kg	620.3±142.9656.6±125.8626.8±111.0623.2±104.3625.0±109.4621.6±95.5618.6±127.5624.8±143.1620.3±80.9646.3±94.7676.9±101.7628.1±97.5625.5±99.1630.6±105.5688.5±121.7637.6±120.0626.3±108.9616.3±131.8626.0±127.1631.2±133.6	371.5±133.5380.7±115.9367.3±102.1368.9±134.4379.0±111.0384.4±94.2368.4±139.4372.9±97.6366.3±98.2398.3±97.3427.8±77.9360.3±111.2374.8±103.5381.8±112.9414.3±125.3376.3±128.0378.2±108.3372.1±117.3376.8±120.1389.9±112.5

8.4 阿昔莫司和氟伐他汀钠复方中不同组分相互影响试验

高血脂模型大鼠连续给药14天后，与模型对照组相比，阿昔莫司300mg/kg和氟伐他汀钠30mg/kg联合用药组均能明显降低模型大鼠血清中总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇水平以及明显升高高密度脂蛋白胆固醇水平。

与相同剂量的单方相比，阿昔莫司300mg/kg和氟伐他汀钠30mg/kg联合用药组明显降低模型大鼠血清中总胆固醇及低密度脂蛋白胆固醇水平，下降程度十分显著，表现出协同作用。见表4。

综合上述试验结果，优选阿昔莫司300mg/kg和氟伐他汀钠30mg/kg组成的复方。

表4  阿昔莫司和氟伐他汀钠复方中不同组分治疗大鼠高脂血症的效果

组别	血清总胆固醇(mmol/L)	血清甘油三酯(mmol/L)	低密度脂蛋白胆固醇(mmol/L)	高密度脂蛋白胆固醇(mmol/L)
					正常对照组模型对照组阿昔莫司300mg/kg氟伐他汀钠30mg/kg阿300+氟30mg/kg	1.64±0.4511.87±2.14###9.24±1.86*9.15±2.52*5.29±1.95***，！！！，@@	0.52±0.182.45±0.79###1.79±0.33*1.91±0.651.65±0.55*	0.27±0.118.52±1.22###7.48±0.83*7.01±1.55*5.44±1.47***！！，@	1.08±0.273.43±0.43###4.09±0.57*3.75±0.734.21±0.61*

注：与正常对照组比较，###P＜0.001，##P＜0.01，#P＜0.05

    与模型对照组比较，^*P＜0.05，^**P＜0.01，^***P＜0.001

    与阿昔莫司300mg/kg组比较，！！！P＜0.001，！！P＜0.01

    与氟伐他汀钠30mg/kg组比较，@P＜0.05，@@P＜0.01，@@@P＜0.001

9 结论

阿昔莫司和氟伐他汀钠伍用对高脂饲料所致的大鼠高脂血症有明显的治疗作用，降脂效果与两种药物的剂量相关，阿昔莫司200～400mg/kg与氟伐他汀钠10～40mg/kg组成的复方可不同程度地降低大鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇水平(LDL-C)，升高高密度脂蛋白胆固醇水平(HDL-C)。其中阿昔莫司300mg/kg和氟伐他汀钠30mg/kg联合用药组效果最显著，对TC和LDL-C水平均表现出协同作用，并且对高血脂模型大鼠血清中丙氨酸氨基转移酶和肌酸激酶的水平影响较小，优选阿昔莫司300mg/kg和氟伐他汀钠30mg/kg组成的复方。在本实验剂量范围内，联合用药组对与肝脏和肌肉毒性相关的血清酶活性无明显影响。此外，目前阿昔莫司单方的临床用法为3次/日，本实验证明，阿昔莫司1次/日仍有显著的降血脂作用，且毒性小，这为阿昔莫司和氟伐他汀钠组成复方后一日仅用药1次提供了可靠的实验依据，这必将大大方便患者服用，提高患者的顺应性。

参考文献

[1]徐叔云，卞如濂，陈修主编，药理学实验方法学(第三版)，人民卫生出版社出版，2002年1月，1201-1202

[2]OLBETAM(acipimox)说明书(Pharmacia，New Zealand)

[3]Scand.J.Clin.Lab.Invest.，1990，50(2)：203-208

[4]氟伐他汀，中华人民共和国药典2000年版二部，临床用药须知，293-294

[5]South China Journal of Cardiovascular Disease，2001，7(3)：208-210

[6]首都医科大学学报，2000，21(3)：201-203

[7]J.Cardiovasc.Pharmacol.，2003，42(1)：55-62

[8]Int.J.Pharm.，2001，229(1-2)：75-86

[9]Atherosclerosis 2001，154(1)：87-96

[10]Biol.Pharm.Bull.，2000，23(5)：570-574

[11]Br.J.Pharmacol.1996，119(6)：1269-1275

[12]Biochim.Biophys.Acta.，1995，1259(1)：99-104

Claims (9)

1、一种治疗高血脂症的组合物，其特征在于所述的组合物包括：

(1)第一个活性成分，它是阿昔莫司(Acipimox)；

(2)第二个活性成分，它选自氟伐他汀(Fluvastatin)、或其可药用的盐、酯或溶剂化物；

(3)一种或多种其它可药用的活性成分或者非活性成分。

2、按照权利要求1所述的组合物，其特征在于所述的氟伐他汀可以药用的盐为合适的氟伐他汀生理可接受的盐，包括衍生自无机的和有机的碱所形成的盐，为钠盐、钙盐、钾盐、镁盐、锌盐、铁盐。

3、按照权利要求1所述的组合物，其特征在于所述的氟伐他汀可以药用的酯为合适的氟伐他汀生理可接受的酯，包括衍生自脂肪醇、芳香醇、杂环醇所形成的酯，为甲酯、乙酯、烯丙酯、苯酯。

4、按照权利要求1～2所述的组合物，其特征是第二个活性成分为氟伐他汀钠。

5、按照权利要求4所述的组合物，其特征是阿昔莫司和氟伐他汀钠的重量比是：(5～40)∶1。

6、按照权利要求4所述的组合物，其特征是优选阿昔莫司和氟伐他汀钠的重量比是：(5～15)∶1。

7、按照权利要求4所述的组合物，其特征是进一步优选阿昔莫司和氟伐他汀钠的重量比是：10∶1。

8、按照权利要求1～7所述的组合物制成的医疗用制剂。

9、按照权利要求8所述的医疗用制剂为片剂、胶囊剂、颗粒剂、丸剂、滴丸。