CN1650947A - 一种银杏叶提取物的组合物 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种银杏叶提取物的组合物,属于利用银杏叶提取物制成对人体有保健作用的组合物这一技术领域。含有银杏叶提取物,维生素C,茶多酚,药用辅料,其重量比为银杏叶提取物∶维生素C∶茶多酚=1∶0.50-0.70∶0.35-0.66。本发明与现有技术相比更加能发挥三种组分的协同作用,效果优于上述单一组分,并且无毒副作用。
Description
技术领域
本发明所要保护的技术领域属于利用银杏叶提取物制成对人体有保健作用的组合物这一技术领域。
背景技术
银杏叶的提取物具有增加脑血管流量,降低脑血管阻力,改善脑血管循环等功能,其主要功能成分为银杏黄酮甙和银杏苦内酯,它具有消除氧自由基,防止过氧化脂质引起的损伤,改善血液流变学,降低体内过氧化脂质和提高超氧化物歧化酶的活力等作用。其中的还原性羟基官能团,可直接发挥抗氧化作用。可以保护脑细胞免受缺血损害;扩张冠状动脉,防止心绞痛及心肌梗塞,抑制血栓形成,清除有害的氧化自由基。
维生素C为抗体及胶原形成,组织修补(包括某些氧化还原作用),苯丙氨酸、酪氨酸、叶酸的代谢,铁、碳水化合物的利用,脂肪、蛋白质的合成,维持免疫功能,羟化5-羟色胺,保持血管的完整,促进非血红素铁吸收等所必需。
生物体在代谢过程中不断有自由基产生,而自由基化学性质非常活泼,能损伤膜结构以及多糖、蛋白质和核酸等生物大分子并导致功能障碍,即表现为机体的逐渐衰老。由于茶多酚的化学结构中含有多个羟基,这些羟基是十分活跃的化合物,它能有效地阻断体内的自由基连锁反应,使自由基形成受到抑制,故生物膜和不饱和脂肪酸不会发生脂质过多氧化,由此产生抗衰作用。目前,国内外学者对茶多酚的大量研究表明,茶多酚具有增强机体抵抗力、抗氧化、防癌、抗肿瘤、抗辐射、抑菌、抗病毒、降血糖和血脂、预防心血管疾病、抗衰老等多种天然生物活性。
中国专利文献公开了申请号为93102087.5,发明名称为“一种银杏茶及制作方法”的技术方案,它提供了一种饮用方便,口感好的银杏茶。它的技术方案是将银杏叶(干的)或者银杏叶原液和已制成的茶叶混匀而成。但茶叶中含有一定量的咖啡因及其他杂质,银杏叶原液中也含其他杂质,这两种物质混匀,有效成份偏低,同时由于各种杂质同时存在,即影响药物的生理吸收,同时大量杂质的存在对人体也存在一定的不利因素。
中国专利文献公开银杏维生素C泡腾片(申请号:0011257.0),它是主要用于防治心、脑血管疾病。它是将银杏叶提取物加入β-环糊精中,从而使银杏叶提取物不容易被氧化。而维生素C的药理作用在该技术方案中并没有表现出来。
发明内容
本发明所要解决的技术问题就是提供一种较现有技术更能体现对人体有益作用、效果优于上述单一组分的银杏叶提取物组合物。
本发明的技术解决方案是:一种银杏叶提取物的组合物,含有银杏叶提取物,维生素C,茶多酚,其重量比为银杏叶提取物∶维生素C∶茶多酚=1∶0.50-0.70∶0.35-0.66。
本发明优选的重量比为:银杏叶提取物∶维生素C∶茶多酚=1∶0.59-0.61∶0.39-0.55。
本发明最优选的总量比是银杏叶提取物∶维生素C∶茶多酚=1∶0.6∶0.39-0.41。
将上述组合物依照通常的制药方法添加如淀粉或食用纤维素药用辅料后制备成各种胶囊、片剂、颗粒等剂型,其中以胶囊剂型最佳。本发明推荐每天服用两次,每天服用银杏叶提取物总量为180毫克的成型后组合物。
所使用的银杏叶提取物符合《中国药典》2002年增补版之规定,维生素C符合《中国药典》2000年版之规定,茶多酚符合QB2154-1995之规定,淀粉符合GB2760-1996之规定。
本发明与现有技术相比更加能发挥三种组分的协同作用,效果优于上述单一组分,并且无毒副作用。本发明经湖南省疾病预防控制中心及湖北省疾病预防控制中心确证,具有缓解体力疲劳,降血脂、增强免疫力、安全无毒副作用特点。
具体实施方式
以下用正交试验取得最佳配方,通过实施例对本发明作出进一步的描述,但它们不是对本发明的限定。
胶囊剂的制备方法:
1、将银杏叶提取物、维生素C、茶多酚、淀粉或纤维素类,过80目筛,备用;
2、按配方量称取银杏叶提取物、维生素、茶多酚、淀粉或纤维素类,放入混匀机进行混均;
3、混合好的物料在自动胶囊灌装机上灌装;
4、对灌装好的胶囊在胶囊抛光机上抛光;
5、将抛光好的胶囊用聚烯烃塑料瓶进行封装。
上述工艺的要求与现有技术中胶囊剂制备工艺的要求和条件一致
所使用的银杏叶为上海杏林制药有限公司生产的银杏叶提取物,银杏总黄酮含量大于24%,符合《中国药典》2002年增补版之规定,维生素C为华北制药总厂生产,符合《中国药典》2000年版之规定、茶多酚为黄山歙县茶叶生物碱厂生产,符合QB2154-1995之规定、淀粉符合BG2760-1996之规定。
按下表的配制比例制成胶囊:其中银杏叶提取物的重量为450克,混合后的组合物制成粒重为260毫克的胶囊10000粒。
实施例序号 | 维生素C(克) | 茶多酚(克) | 淀粉(克) |
1 | 200 | 150 | 1800 |
2 | 225 | 160 | 1765 |
3 | 243 | 165 | 1742 |
4 | 265 | 176 | 1709 |
5 | 270 | 180 | 1700 |
6 | 275 | 250 | 1625 |
7 | 295 | 270 | 1585 |
8 | 315 | 297 | 1538 |
9 | 338 | 360 | 1452 |
一、实施例安全性、毒理性试验
(1)急性口服试验
试验方法为:选用体重为18-22g的健康昆明种小鼠,雌雄各半。取样品按21500mg/kg.bw剂量,间隔4小时分两次经口灌胃,每次灌胃体积为0.2ml/10g.bw。灌胃后连续观察两周,记录中毒表现及死亡情况。
标准为:《保健食品检验与评价技术规范》中的急性毒性分级标准。
表1实施例1-9与对照组1、2对小鼠的急性毒性试验
实施例序号 | 动物数 | 途经 | 剂量(mg/kg.bw) | 死亡数(只) |
1 | 20 | 经口 | 21500 | 0 |
2 | 20 | 经口 | 21500 | 0 |
3 | 20 | 经口 | 21500 | 0 |
4 | 20 | 经口 | 21500 | 0 |
5 | 20 | 经口 | 21500 | 0 |
6 | 20 | 经口 | 21500 | 0 |
7 | 20 | 经口 | 21500 | 0 |
8 | 20 | 经口 | 21500 | 0 |
9 | 20 | 经口 | 21500 | 2 |
对照样1 | 20 | 经口 | 21500 | 0 |
对照样2 | 20 | 经口 | 21500 | 0 |
对照样1、2是指按照申请号为93102087.5、0011257.0的最优选的实施方式分别配制的样品,按照同样条件喂养。
表1显示,实施例1-8及对照样1、2对小鼠均无毒,实施例9对小鼠有一定的毒性。
二、保健功能试验
(1)用1-8号实施例经口服给予小鼠30天,同时与服用空白样小鼠进行对比,测量试验组与对照组的负重游泳时间、运动后小鼠血乳酸曲线下面积。
负重游泳试验方法:末次给小鼠受试物30min后,置于游泳箱中游泳,水深约30cm,水温25℃±0.5℃,鼠尾根部负荷5%体重的铅皮。记录小鼠自游泳开始至死亡的时间,作为小鼠负重游泳时间。
末次给予受试物30min后从内眦静脉丛采血20μl,然后不负重在温度为30℃的水中游泳10min,分别于运动后0min和20min同上采血20μl,测定血乳酸,计算血乳酸曲线下面积。
表2空白、实施例1-8、对照组1、2抗疲劳功能试验结果
实施例序号 | 负重游泳时间 | 运动后小鼠血乳酸曲线下面积(p) |
空白 | 351±111 | 381.83±38.71 |
1 | 359±111 | 375.29±37.70 |
2 | 425±105 | 368.15±32.58 |
3 | 456±112 | 364.02±28.65 |
4 | 491±105 | 358.15±32.15 |
5 | 498±106 | 354.05±33.84 |
6 | 495±102 | 355.12±28.65 |
7 | 491±114 | 363.15±24.56 |
8 | 492±104 | 364.18±31.25 |
对照样1 | 362±106 | 375.45±21.36 |
对照样2 | 396±104 | 370.54±25.42 |
上述试验数据表明,实施例4、5、6缓解体力疲劳的功能较实施例1-3、7-8、对照组1、2强。
(3)用2-8号实施例经口服给予小鼠30天,测量试验组的半数溶血值、抗体生成细胞数、单核一巨噬细胞碳廓清、迟发反应能力是否明显提高。
半数溶血值的试验方法:取羊血,用生理盐水洗涤3次,每只鼠经腹腔注射2%(V/V,用生理盐水配制)压积RBC0.2ml进行免疫。5天后,摘除眼球取血于离心管内,放置约1小时,将凝固血与管壁剥离,使血清充分析出,2000rpm离心10min,收集血清。用SA缓冲液将血清稀释为200倍,取1mlL置试管内,依次加入10%压积RBC0.5ml,补体1ml。另设不加血清的对照管。置30℃恒温水浴中保温30min后,冰浴终止反应,2000 rpm离心10min,取上清1ml,加都氏试剂至4ml于另一试管中,充分混匀,放置10min后,于540nm处以对照管作空白,分别测定各管光密度值。溶血素的量以半数溶血值表示,按下式计算:半数溶血值=样品光密度值/SRBC半数溶血时的光密度值×稀释倍数。
抗体生成细胞试验方法:取羊血,用生理盐水洗涤3次,每次离心10min(2000r/min),将压积SRBC用生理盐水配成2%的细胞悬液,每鼠经腹腔注射0.2ml。将免疫后4天的小鼠处死,取脾,轻轻撕碎,用Hanks液制成细胞悬液,200目筛网过滤,洗涤、离心2次,最后将细胞悬浮在5mlHanks液中,将表层培养基加热溶解后与等量的pH7.4、2倍浓度的Hanks液混合,分装小试管,每管0.5ml,再向管内加入用SA液配制的10%SRBC50μl、20μl脾细胞悬液,迅速混匀后倾倒于已刷薄层琼脂糖的玻片上,待琼脂糖凝固后将玻片水平扣放在玻片架上,放入二氧化碳培养箱中温育1.5小时,然后用SA液稀释的补体(1∶10)加入到玻片凹槽内,继续温育1.5小时后计数溶血空斑数。
小鼠碳廓清实验方法:小鼠尾静脉注射以生理盐水稀释4倍的印度墨汁,每10g体重注射0.1mL,墨汁注入后立即计时,于注入墨汁后第2、10min,分别从内眦静脉丛取血20μl加入到2ml碳酸钠溶液中,摇匀,以碳酸钠溶液作空白对照,用722型分光光度计在600nm波长处比色测光密度值(OD)。将小鼠处死,取肝、脾,称重,计算吞噬指数。
小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验方法:小鼠腹腔注射20%压积的鸡红细胞(200rpm,10min)悬液1ml,间隔30min,颈椎脱臼处死,取腹腔巨噬细胞洗液1ml,滴于载玻片上,放入垫有湿纱布的搪瓷盒内,置37℃孵箱温育30min。孵毕,于生理盐水中漂洗,以除去未贴片细胞。晾干,以甲醇∶丙酮(1∶1)固定,4%(V/V)Giemsa-磷酸缓冲液染色,再用蒸馏水漂洗晾干。油镜下计数,每片计数100个巨噬细胞,按下式计算吞噬率和吞噬指数:
吞噬率%=吞噬鸡红细胞的巨噬细胞数/计数的巨噬细胞×100
吞噬指数=被吞噬鸡红细胞总数/计数的巨噬细胞数
对小鼠迟发型变态反应的影响试验方法:小鼠腹腔注射2%(v/v)SRBC(0.2ml/每鼠),于注射后24小时测量左后足跖部厚度,同一部位测量三次,取平均值。以攻击前后足跖厚度差值(足跖肿胀度)来表示迟发型变态反应程度。
表3实施例2-8的增强免疫力功能试验
实施例序号 | 半数溶血值 | 抗体生成细胞数 | 单核一巨噬细胞碳廓清的影响 | 注射后24h足跖肿胀度(mm) |
2 | 132.6±19.5 | 18.08±5.31 | 6.45±1.63 | 0.386±0.120 |
3 | 134.5±20.4 | 19.25±5.12 | 6.62±1.32 | 0.411±0.103 |
4 | 135.4±24.3 | 22.13±4.35 | 7.14±1.52 | 0.453±0.112 |
5 | 145.7±24.1 | 22.86±4.31 | 7.25±1.32 | 0.513±0.102 |
6 | 136.5±20.5 | 20.86±4.06 | 6.85±1.05 | 0.485±0.105 |
7 | 132.6±20.7 | 19.45±3.55 | 6.44±1.42 | 0.451±0.112 |
8 | 128.7±19.7 | 18.13±4.49 | 5.08±1.36 | 0.423±0.120 |
上述试验结果表明,各实施例具有较好的增强免疫力功能。
三、对比试验
(1)用实施例4、5、6口服给予小鼠30天分别与只含银杏叶的提取物450克的胶囊(对照组4)、只含维生素C 270克的胶囊(对照组5)、只含茶多酚180克的胶囊(对照组6)进行对比,测量试验组与对照组的半数溶血值、运动后小鼠血乳酸曲线下面积(p)。
表4实施例4-6和只含单一银杏叶提取物、维生素c、茶多酚功能测试试验结果
实施例 | 半数溶血值 | 运动后小鼠血乳酸曲线下面积(p) |
4 | 135.4±24.3 | 358.15±32.15 |
5 | 145.7±24.1 | 354.05±33.84 |
6 | 136.5±20.5 | 355.12±28.65 |
对照组(4) | 127.65±18.7 | 372.45±24.36 |
对照组(5) | 128.5±18.4 | 374.83±35.61 |
对照组(6) | 126.5±18.2 | 376.83±38.01 |
试验表明:实施例4、5、6的保健功能明显优于只含银杏叶的提取物、维生素C、茶多酚的对照组。为了解本专利与申请号为93102087.5和申请号为0011257.0的两个专利的对自由基的清除反应效果,我们设计了试验研究了三个产品对Fe2+/Fe3+诱致的突触体脂质过氧化产生的脂质自由基的清除反应,三者均有清除脂质自由基的作用,清除50%自由基所需的申请号为93102087.5和申请号为0011257.0的产品及本专利产品的浓度分别为0.38、0.11和0.0056mg/ml,当三者浓度分别提高到0.79、0.23和0.023mg/ml时,抑制率达100%。
Claims (5)
1、一种银杏叶提取物的组合物,含有银杏叶提取物,维生素C,茶多酚,药用辅料,其特征在于其重量比为银杏叶提取物∶维生素C∶茶多酚=1∶0.50-0.70∶0.35-0.66。
2、根据权利要求1所述的一种银杏叶提取物的组合物,其特征在于:其重量比为:银杏叶提取物∶维生素C∶茶多酚=1∶0.59-0.61∶0.39-0.55。
3、根据权利要求2所述的一种银杏叶提取物的组合物,其特征在于:其重量比为银杏叶提取物∶维生素C∶茶多酚=1∶0.6∶0.39-0.41。
4、根据权利要求1所述的一种银杏叶提取物的组合物,其特征在于:可添加的药用辅料为淀粉、乳糖、食用纤维素类。
5、根据权利要求1所述的一种银杏叶提取物的组合物,其特征在于:其剂型为胶囊剂。
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