CN1632579A - 鲎试剂检测用的血液前处理法 - Google Patents
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Abstract
一种鲎试剂检测用的血液前处理法是一种将曲拉通X-100原液、氢氧化钾、二(2-羟乙基)替甘氨酸、Ethyleneimineploymer、氯化钙及polybrene等配制成血液处理液,与血清或血浆混合均匀,于37℃恒温水浴8~15min的方法。鲎试剂检测用的血液前处理法能够有效地除去血液样品中的干扰物质,减少鲎试剂与内毒素反应的干扰作用,提供了一种操作简便且快速的去除血液中干扰因子的前处理方法。
Description
技术领域
本发明涉及一种鲎试剂检测用的血液前处理法。
背景技术
血液在心血管系统内是由有形物质(红细胞、白细胞、血小板)及液体状血浆组成的,由于其组成比较复杂,其中的许多物质尤其是高等动物的血浆或血清对鲎试剂与内毒素的反应有很强的干扰作用,因此在对这类样品的内毒素进行检测时,必须将其中的干扰物质除去。目前作为除去血液中的干扰因子的前处理方法主要有稀释加热法、氯仿提取法、高氯酸法或新高氯酸法等,前两种方法由于内毒素回收率低、假阳性等问题的存在,因此在测定时需要探讨;高氯酸法或新高氯酸法虽然其内毒素的回收率较好,但其操作比较繁琐,配套设备也较多。
发明内容
本发明的目的在于提供一种设备要求低、操作简便且快速,从而有利于用户的鲎试剂检测用的血液前处理法。
一种鲎试剂检测用的血液前处理法,其特征在于按以下步骤进行:(1)用精密移液管吸取曲拉通X-100原液于烧杯中;(2)用分析天平分别称取氢氧化钾、二(2-羟乙基)替甘氨酸、Ethyleneimineploymer、氯化钙、polybrene至上述烧杯中;(3)加少量水溶解后转移至容量瓶中,用水润洗烧杯2~3次,把润洗液同样转移至容量瓶中,再加水定容至刻度线,振荡容量瓶混匀,即得到所要的血液处理液;(4)取血浆或血清,按1∶1.5~2的体积量加入血液处理液,混合均匀后,于37℃恒温水浴8~15min。其中,所制得的血液处理液中各组分含量为:0.08~0.5%曲拉通X-100、0.05~0.7mol/L氢氧化钾、0.01~0.1mol/L二(2-羟乙基)替甘氨酸、0.03~0.1%Ethyleneimineploymer、0.01~0.08mol/L氯化钙及0.1~0.8%polybrene。
本发明的优点在于:一是能够有效地除去血液样品中的干扰物质;二是对设备的要求较低,操作简便;三是检测细菌内毒素时所需时间较短,有利于节省时间,提高效率。
具体实施方式
本发明是这样实现的:用精密移液管吸取曲拉通X-100原液0.45ml至250ml的烧杯中:用分析天平分别称取氢氧化钾1.96g、二(2-羟乙基)替甘氨酸0.59g、Ethyleneimineploymer0.072g、氯化钙11.2g、polybrene0.43g至以上250ml烧杯中;加少量水溶解后转移至100ml容量瓶中,用水润洗烧杯2~3次,把润洗液同样转移至容量瓶中,再加水定容至刻度线,振荡容量瓶混匀,即得到所要的血液处理液;取100μL血浆或血清,加入150μL血液处理液,混合均匀后,于37℃恒温水浴10min;加入鲎试剂进行实验。
本发明为临床诊断革兰氏阴性细菌感染提供了一种更精密、准确、快速的新方法,具有较大的推广应用价值。
Claims (2)
1.一种鲎试剂检测用的血液前处理法,其特征在于按以下步骤进行:
(1)用精密移液管吸取曲拉通X-100原液于烧杯中;
(2)用分析天平分别称取氢氧化钾、二(2-羟乙基)替甘氨酸、Ethyleneimineploymer、氯化钙、polybrene于上述烧杯中;
(3)加少量水溶解后转移至容量瓶中,用水润洗烧杯2~3次,把润洗液同样转移至容量瓶中,再加水定容至刻度线,振荡容量瓶混匀,即得到所要的血液处理液;
(4)取血浆或血清,按1∶1.5~2的体积量加入血液处理液,混合均匀后,于37℃恒温水浴8~15min。
2.根据权利要求1所述的鲎试剂检测用的血液前处理法,其特征在于所制得的血液处理液中各组分含量为:0.08~0.5%曲拉通X-100、0.05~0.7mol/L氢氧化钾、0.01~0.1mol/L二(2-羟乙基)替甘氨酸、0.03~0.1%Ethyleneimineploymer、0.01~0.08mol/L氯化钙及0.1~0.8%polybrene。
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