CN1565611A - 一种治疗肩周炎的中药组合物及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种治疗肩周炎的中药组合物及其制备方法和质量控制方法。该组合物主要由姜黄、羌活、当归、赤芍、海桐皮、白术、甘草组成。该中药组合物制备时采用煎煮、乙醇提取方法，达到使有效药物的充分发挥，同时本发明还提供了对该组合物进行成分鉴别、含量测定的质量控制方法。本组合物有很好的祛风湿、温经止痛、活血通络作用。

Description

一种治疗肩周炎的中药组合物及其制备方法

发明领域

本发明涉及一种中药组合物，特别涉及用于治疗肩周炎的中药组合物，同时涉及该组合物的制备方法和质量控制方法。

背景技术

肩周炎是一项常见的肩部疾患，以肩痛和活动受限为特征的常见病，为中老年人多发病，并且有较高的发病率。男女发病率相同，其发病率为72％，患者表现肩关节疼痛和肩关节功能障碍，虽不危及生命，然而病程长，病人苦不堪言，若不积极治疗，后期可造成关节僵硬，部分功能丧失，影响正常的生活和工作。据不完全统计当前中老年占人口总数的14.4％。急需治疗肩周炎的新药。

目前，西医对本病治疗效果尚不十分理想。大多以镇痛药来缓解症状，作用时间短，不易根治，停药后易复发，而且易产生副作用。而中医对治疗肩周炎临床用药大多数为汤剂，服用携带不方便。目前治疗该病市场仅一种祛裨舒肩丸的水丸，它吸收较慢，所以不适于中老年人服用。

发明内容

本发明的一个目的在于公开一种新的治疗肩周炎的中药组合物；本发明的一个目的在于公开一种新的治疗肩周炎的中药组合物按照中药制剂工艺，可以制备成临床可接受的药物剂型的制备方法；本发明目的还在于公开一种新的中药组合物的质量控制方法。

本发明药物组合物的原料药组成及配比如下(按重量份)：

姜  黄  420-520重量份        羌  活  100-170重量份

当  归  190-260重量份        赤  芍  190-260重量份

海桐皮  190-260重量份        白  术  190-260重量份

甘  草  100-170重量份。

所述姜黄优选片姜黄。

本药物组合物的制备方法：

以上七味用药材量5-7倍乙醇提取1-3次，每次1-2小时，滤过，收集滤液，减压浓缩，50-60℃相对密度1.10-1.15清膏①；残渣加7-9倍热水煎煮1-3次，每次1-2小时，滤过，收集滤液，减压浓缩至约1600体积份；待冷至室温，加入乙醇使含醇量为65-80％，搅匀，沉淀，静置使沉淀；取上清液减压浓缩至50-60℃相对密度为1.25-1.30清膏②；将清膏①、②混合，经过常规工序直接或加入药学上可接受的赋型剂制成临床可接受的剂型，如片剂、胶囊、颗粒剂等固体制剂及口服液体制剂等。所述体积份/重量份相对应ml/g。

本组合物制成药剂的质量控制方法包括鉴别和/或含量测定。

鉴别方法包括下列方法中的一种和/或几种：

a.取本组合物制剂0.5g研细，加60-90℃石油醚5ml，时时振摇，约25-35分钟，滤过，滤液浓缩至约1ml，作为供试品液；另取片姜黄，当归对照药材各0.1g，分别加石油醚5ml，时时振摇，约25-35分钟，滤过，滤液加石油醚至5ml，作为片姜黄，当归对照药材溶液，照薄层色谱法，中国药典2000版一部(附录VIB)试验，吸取上述三种溶液各4ul，分别点于同一高效GF254薄层板上，以9-11∶0.7-0.9环己烷-醋酸乙酯为展开剂，展开，取出晾干，置紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与当归对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；喷以1％香草醛硫酸溶液，100-110℃加热3-6分钟至斑点显色清晰；日光下检视供试品色谱中，在与片姜黄对照药材色谱相应位置上，显相同颜色斑点；b.取本组合物制剂0.5g，研细，加乙醇5ml，时时振摇，约8-12分钟，滤过，滤液为供试品溶液；另取芍药苷对照品，加乙醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法，中国药典2000版一部(附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各4ul，分别点于同一高效硅胶G薄层板上，以55-65∶3-5∶3-6∶7-9醋酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水为展开剂，展开，取出晾干，喷以4-7％香草醛硫酸溶液，100-110℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药品色谱相应位置上，显相同颜色斑点；c.取本组合物制剂1g，研细，加40ml乙醚回流脱脂1-1.5小时，滤过，残渣加甲醇30ml回流提取1-1.5小时，滤过，滤液减压蒸干加水40ml溶解，用正丁醇萃取2-4次，合并正丁醇液用水洗涤2-4次，每次20ml，收集正丁醇液减压蒸干加1ml甲醇为供试品溶液；另取甘草酸铵对照品加甲醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法，中国药典2000版一部(附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各1ul，分别点于同一高效GF₂₅₄薄层板上，以4-6∶1-4∶1-2正丁醇-20％氨水-甲醇为展开剂，展开，取出晾干，置紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药品色谱相应位置上，显相同颜色斑点；

含量测定：照高效液相色法测定，色谱条件与系统适用性试验，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱；70-78∶23-33甲醇∶水为流动相，检测波长为315nm；理论板数按异欧前胡素计算应不低于2000；对照品溶液的制备，取异欧前胡素对照品加入甲醇制成每1ml含0.00212mg的溶液，既得；供试品溶液的制备，取装量差异项下的内容物0.22克，精密称定；置三角烧杯中，加入水15ml，超声处理15-25分钟；置分液漏斗中，加正己烷萃取3-5次，每次15ml，合并萃取液，减压浓缩至干，加入甲醇使温热溶解，移至25ml量瓶中，加甲醇稀至刻度，摇匀，用微孔滤膜过滤，得滤液；作为供试品溶液；测定法，分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10ul，注入液相色谱仪测定，既得；本组合物制剂每单位量以异欧前胡素(C₁₆H₁₄O₄)计含量不得低于1.48-1.60mg。

所述每单位量是指相当原药材13.4g的成品药剂量。

本发明组合物能够温经止痛、活血通络，具有明显的祛风湿作用，能对肉芽肿的形成产生很好的抑制作用，抗炎，镇痛，活血作用显著。本发明组合物制剂口服剂量是安全可靠，服用方便，而且有助于药物在体内吸收，使其充分发挥疗效，很适合中老年性疾患服用。

下面实验例用于进一步说明本发明。

实验例1本发明组合物制剂(肩痛颗粒)与功能主治有关药效学试验

根据新药临床前药效学研究指导原则，进行肩痛颗粒与治疗作用有关的主要药效学试验研究。以大鼠佐剂性足肿模型、大鼠角叉菜胶足肿模型、小鼠热板模型、小鼠扭体模型及大鼠肉芽肿模型，观察肩痛颗粒的祛风湿、温经止痛、活血通络作用，为其临床应用提供试验数据。

试验材料：1)、药物：肩痛颗粒浸膏(下称肩痛颗粒)：由本院中药二室提供，批号：990712，含量：3.3g生药/g膏重，1.3g膏重/ml。临床用量为：40.2g生药/天。祛痹舒肩丸(浓缩丸)：广东汕头市中药厂出品，批号：9804033，作为本研究的对照药物。临床日用量为15g/天。消炎痛原料药：由天津市新新制药厂惠供。阿司匹林原料药：由天津市新新制药厂惠供。肩痛颗粒及祛痹舒肩丸以蒸馏水配置，消炎痛及阿斯匹林以0.5％CMC-Na配置，现用现配。

以下中药剂量表示均为：g生药/kg。给药体积：大鼠为1ml/100g体重，小鼠为0.2ml/10g体重。

2)、试剂：角叉菜胶，SIGMA出品。福氏完全佐剂(Freund’s Adjuvant(complete)，LIFE TECHNOLOGIES)：含结核杆菌0.5mg/ml。

3)、动物：wistar大鼠，昆明种小鼠，由本院动物室提供，津实动设施013号，二级。

试验方法：根据中药药效学试验指导原则和该药功能主治“祛风除湿，散寒化瘀”，选用以下抗炎镇痛试验模型进行试验：1.大鼠佐剂性足肿模型，2.大鼠角叉菜胶足肿模型，3.小鼠热板模型，4.小鼠扭体模型，5.大鼠肉芽肿模型。足容积测量方法为药理学试验方法学(第二版)p716所载“毛细管放大法”。

1、对佐剂性关节炎的抑制作用^[：

a)、对佐剂性原发足肿的影响：雄性Wistar大鼠70只，体重180g左右，随机分为6组，模型对照组，阿斯匹林200mg/kg组，祛痹舒肩丸3g/kg组，肩痛颗粒1、3、10g/kg组。动物先分别给予药物，模型组给予生理盐水，连续给药3天，于最末一天给药后1h，每鼠左后足跖皮内注射Freund’s完全佐剂0.05ml致炎。并于致炎后23、47小时给予药物。分别观察致炎前，致炎后4、8、12、24、48h大鼠左后足体积，观察药物对佐剂性关节炎原发足肿的影响。b)、对佐剂性继发足肿的影响：雄性Wistar大鼠70只，体重180g左右，每鼠左后足跖皮内注射Freund’s完全佐剂0.05ml致炎。于致炎后第19天按体重随机分为6组，模型对照组，阿斯匹林200mg/kg组，祛痹舒肩丸3g/kg组，肩痛颗粒1、3、10g/kg组，分别给予药物，模型组给予生理盐水，连续给药7天，分别观察每天给药后1h大鼠右后足体积，观察药物对佐剂性继发足肿的影响。

2、对角叉菜胶致大鼠足肿的影响：雄性大鼠70只，150~180g，随机分为6组，模型对照组，消炎痛10mg/kg组，祛痹舒肩丸3g/kg组，肩痛颗粒1、3、10g/kg组，分别给予药物，模型组给予生理盐水，连续给药3天，于最末一天给药后1h，于大鼠左后足跖腱膜下注射1％角叉菜胶生理盐水溶液0.1ml致炎。分别于致炎后1，2，3，4，5，6小时测量大鼠左后足容积，以致炎前后足容积的差值为肿胀度，评定药效。

3、对小鼠热板痛阈的影响：雌性小鼠18～20g，禁食过夜后，将小鼠放于55℃的金属板上，以舔后足作为痛反应指标，记录反应潜伏期(s)，作为痛域，选用痛域在5~30s的小鼠，以痛域为指标随机分为6组，模型对照组，消炎痛10mg/kg组，祛痹舒肩丸3g/kg组，肩痛颗粒1、3、10g/kg组，分别给予药物，模型组给予生理盐水，给药后1h，再次测定小鼠痛域，观察给药前后小鼠痛域的变化，以确定药效。

4、对小鼠扭体的影响：小鼠60只，18～20g，雌雄兼用，禁食过夜后，按体重随机分为5组，模型对照组，祛痹舒肩丸3g/kg组，肩痛颗粒1、3、10g/kg组，分别给予药物，模型组给予生理盐水，给药后1h，腹腔注射0.6％醋酸0.2ml/只，测定20分钟内小鼠的扭体数，观察给药后小鼠扭体数的变化，以确定药效。

5、对棉球肉芽肿形成的影响：雄性大鼠150±30g，乙醚浅麻醉，无菌操作，经上腹部切口将两个灭菌脱脂棉球(约30mg，高压灭菌，各加入氨苄青霉素1mg/0.1ml/个，50℃烘干，称重)分别植入大鼠两侧腋窝部皮下，棉球形状和植入部位相一致。

术后过夜，随机分为5组，模型对照组，祛痹舒肩丸3g/kg组，肩痛颗粒1、3、10g/kg组，分别给予药物，模型组给予生理盐水，连续给药7天，于第八天处死大鼠取出棉球，70℃，24小时，烘干，称重，减去原棉球重量即得肉芽重量，指标以mg肉芽肿/100g体重表示，并计算抑制率。

6、统计方法：试验结果表示为 X(均值)±SD(标准差)。给药前后比较，采用配对t-test，组间比较采用非配对t-test。

结果：1、对佐剂性关节炎的抑制作用：a)、对佐剂性原发足肿的影响：各给药组致炎前后足肿胀度(足容积的差值)见表1，图1，由表可见，模型组大鼠足跖皮内给予福氏完全佐剂后足容积明显增大，在12~24小时之间达到最高值，并可维持至致炎后48小时，而在致炎前1小时给予肩痛颗粒1、3、10g/kg，可明显降低足肿胀度最大值，使足肿胀度-时间曲线下面积明显减小，减轻佐剂致大鼠足肿胀的程度，与模型组相比具有显著性差异(p＜0.05，0.01)。祛痹舒肩丸3g/kg，阿斯匹林200mg/kg也表现出对佐剂致大鼠足肿的抑制作用(p＜0.01)。

              表1、肩痛颗粒对佐剂性原发足肿的影响( X±SD)

               足肿胀度(＝给药后足容积-给药前足容积，ml)

组别             n     致炎后4h      8h              12h           24h           48h

模  型  组       11    0.41±0.17    0.80±0.16      0.94±0.16    1.03±0.19    0.98±0.14

阿斯匹林200mg/kg 11    0.28±0.18    0.52±0.16^**   0.60±0.11^** 0.75±0.16^** 0.62±0.15^**

祛痹舒肩丸3g/kg  12    0.28±0.15    0.45±0.15^**   0.59±0.15^** 0.70±0.14^** 0.72±0.20^**

肩痛颗粒1g/kg    12    0.34±0.07    0.50±0.19^**   0.58±0.20^** 0.69±0.15^** 0.78±0.19^*

肩痛颗粒3g/kg    12    0.24±0.10^*  0.47±0.16^**   0.62±0.20^** 0.72±0.16^** 0.70±0.15^**

肩痛颗粒10g/kg   12    0.26±0.12^*  0.51±0.16^**   0.57±0.13^** 0.55±0.13^** 0.50±0.11^**

*，**与模型组相比p＜0.05，0.01

B)、对佐剂性继发足肿的影响：各给药组给药前后足肿胀度(足容积的差值)见表2，图2，由表可见，在试验期间模型组大鼠右后足肿胀明显，足容积未见明显变化(p＞0.05)，而给予肩痛颗粒1、3、10g/kg，连续给予7天，可明显降低足肿胀度，不仅与给药前相比具有统计学差异，而且与模型组相比也具有统计学差异(p＜0.05，0.01)，对佐剂致大鼠继发足肿具有明显的抑制作用。祛痹舒肩丸3g/kg，阿斯匹林200mg/kg也表现出对佐剂致大鼠足肿的抑制作用(p＜0.05，0.01)。

          表2、肩痛颗粒对佐剂性继发足肿的治疗作用( X±SD)

                                    足容积(ml)

组别      n   给药前      给药后1h           2d              3d               4d               5d               6d               7d

模型组    11  2.15±0.22  2.18±0.19      2.22±0.13       2.22±0.08       2.22±0.13       2.19±0.13       2.20±0.13       2.18±0.13

                          (0.04±0.08)    (0.08±0.13)     (0.07±0.20)     (0.07±0.14)     (0.04±0.16)     (0.05±0.19)     (0.03±0.28)

阿斯匹林  11  2.12±0.16  2.05±0.15      1.97±0.19^*     1.87±0.12^**    1.87±0.20^**    1.86±0.14^**    1.89±0.15^**    1.87±0.13^**

200mg/kg                  (-0.06±0.14)^# (-0.15±0.16)^## (-0.25±0.15)^## (-0.25±0.18)^## (-0.26±0.22)^## (-0.23±0.17)^## (-0.25±0.20)^#

祛痹舒肩丸12  2.14±0.20  2.08±0.16      1.95±0.21^**    1.86±0.18^**    1.86±0.16^**    1.89±0.17^**    1.90±0.16^**    1.92±0.16^**

3g/kg                     (-0.06±0.17)   (-0.18±0.16)^## (-0.28±0.10)^## (-0.28±0.14)^## (-0.25±0.16)^## (-0.24±0.13)^## (-0.22±0.13)^#

肩痛颗粒  12  2.18±0.23  2.13±0.22^*    2.03±0.20^**    2.02±0.20^*     2.03±0.23^*     1.99±0.21^**    2.03±0.20       2.05±0.18^*

1g/kg                     (-0.05±0.08)^# (-0.15±0.13)^## (-0.16±0.20)^#  (-0.15±0.21)^## (-0.19±0.20)^## (-0.15±0.23)^#  (-0.13±0.21)

肩痛颗粒  12  2.18±0.25  2.09±0.20      1.93±0.18^**    1.84±0.17^**    1.88±0.14^**     1.93±0.11^**    1.90±0.16^**    1.83±0.14^**

3g/kg                     (-0.09±0.16)^# (-0.25±0.12)^## (-0.34±0.14)^## (-0.30±0.13)^## (-0.25±0.16)^## (-0.28±0.21)^## (-0.35±0.20)^##

肩痛颗粒  12  2.16±0.22  2.08±0.20^*    1.96±0.19^**    1.82±0.20^**    1.78±0.16^**    1.78±0.15^**    1.74±0.14^**    1.80±0.15^**

10g/kg                    (-0.08±0.11)^# (-0.20±0.12)^## (-0.34±0.11)^## (-0.38±0.12)^## (-0.38±0.12)^## (-0.42±0.20)^## (-0.36±0.18)^##

括号内数值为给药后与给药前足容积的差值

*，**与药前值相比p＜0.05，0.01  #，##与模型组相比p＜0.05，0.01

2、角叉菜胶致大鼠足肿的影响：

各给药组致炎前后足肿胀度(足容积的差值)见表3，图3，由表可见，模型组大鼠足跖皮下给予角叉菜胶后足容积明显增大，在3小时左右达到最高值，并可维持至致炎后6小时，而在致炎前1小时给予肩痛颗粒1、3、10g/kg，可明显降低足肿胀度最大值，使足肿胀度-时间曲线下面积明显减小，减轻角叉菜胶致大鼠足肿胀的程度，与模型组相比具有显著性差异(p＜0.01)。祛痹舒肩丸3g/kg，阿斯匹林200mg/kg也表现出对角叉菜胶致大鼠足肿的抑制作用(p＜0.05，0.01)。

            表3、肩痛颗粒对角叉菜胶致大鼠足肿的影响(X±SD)

组别              n   致炎后1h       2h            3h            4h            5h            6h

模型组            11  0.30±0.19    0.54±0.16    0.66±0.12    0.65±0.15    0.61±0.18    0.65±0.22

消炎痛10mg/kg组   11  0.14±0.12^*  0.19±0.09^** 0.26±0.10^** 0.23±0.08^** 0.22±0.10^** 0.18±0.07^**

祛痹舒肩丸g/kg组  12  0.13±0.15^*  0.27±0.13^** 0.25±0.15^** 0.22±0.10^** 0.23±0.12^** 0.24±0.16^**

肩痛颗粒1.0g/kg组 12  0.24±0.15    0.34±0.14^** 0.34±0.12^** 0.28±0.10^** 0.34±0.11^** 0.29±0.08^**

肩痛颗粒3.0g/kg组 12  0.09±0.08^** 0.26±0.12^** 0.27±0.15^** 0.26±0.14^** 0.26±0.15^** 0.22±0.16^**

肩痛颗粒10g/kg组  12  0.10±0.12^** 0.26±0.13^** 0.29±0.14^** 0.25±0.12^** 0.24±0.08^** 0.21±0.08^**

*，**与模型组相比p＜0.05，0.01

3、对小鼠热板痛阈的影响：各组给药前后热板痛阈见表4，由表可见，给药前各给药组小鼠痛域无明显差别，给予生理盐水1小时后模型组与给药前相比未见明显差异(p＞0.05)，而在给予肩痛颗粒1、3、10g/kg1小时后，小鼠热板反应时间明显延长，痛阈明显升高，与给药前相比具有显著性差异(p＜0.05，0.01)。祛痹舒肩丸3g/kg，消炎痛10mg/kg也表现出对小鼠热板痛阈的升高作用(p＜0.01)。

       表4、肩痛颗粒对小鼠热板痛阈的影响( X±SD，n＝12)

                   药前值(s)    药后值(s)        差值

模型组             14.7±5.2    13.8±5.3        -1.0±4.7

消炎痛10mg/kg      14.8±5.8    32.7±15.4^**    17.9±10.6^##

祛痹舒肩丸3g/kg    15.5±5.7    28.3±10.9^**    12.8±9.3^##

肩痛颗粒1g/kg      15.7±6.4    29.1±18.1^*     13.4±19.7^#

肩痛颗粒3g/kg      15.3±6.6    29.2±14.0^**    13.9±8.9^##

肩痛颗粒10g/kg     15.7±6.5    39.0±16.2^**    23.2±13.9^#

*，**与药前值相比p＜0.05，0.01  #，##与模型组相比p＜0.05，0.01

4、对小鼠扭体试验的影响：结果见表5，由表可见，给予生理盐水1小时后腹腔注射0.6％醋酸0.2ml/只，模型组动物出现频繁的扭体反应，而在给予肩痛颗粒1、3、10g/kg，动物扭体数明显降低，且有剂量关系，与模型组相比具有显著性差异(p＜0.05，0.01)。祛痹舒肩丸3g/kg，也表现出对小鼠扭体数的降低作用(p＜0.05)。

表5、肩痛颗粒对小鼠扭体试验的影响( X±SD，n＝12)

组别                                  扭体数

模型组                                31±14

祛痹舒肩丸g/kg组                      19±9*

肩痛颗粒1.0g/kg组                     21±11

肩痛颗粒3.0g/kg组                     18±15*

肩痛颗粒10g/kg组                      12±7**

*，**与模型组相比p＜0.05，0.01

5、对棉球肉芽肿形成的影响：各给药组棉球重量见表6，由表可见，连续给予肩痛颗粒1、3、10g/kg 7天，抑制棉球肉芽的生长，抑制率分别为4.3，10.1，14.5％，其中10g生药/kg组肉芽重量与模型组相比具有统计学差异(p＜0.05，0.01)。祛痹舒肩丸3g/kg也表现出对大鼠棉球肉芽肿形成的抑制作用。

表6、肩痛颗粒对大鼠棉球肉芽肿形成的影响( X±SD)

                                               肉芽        抑制率

            剂量         n       体重(g)   (mg/100g体重)    (％)

模型组      -            14      193±27      69±11         -

祛痹舒肩丸 3g生药/kg    13      189±19      61±11         11.6

            1g生药/kg    14      191±21      66±11         4.3

肩痛颗粒    3g生药/kg    14      191±22      62±10         10.1

            10g生药/kg   13      187±16      59±9*         14.5

*，**与模型组相比p＜0.05，0.01

结论：口服灌胃给予肩痛颗粒1、3、10g生药/kg对大鼠佐剂性关节炎具有明显的抑制作用，不仅可以抑制佐剂致大鼠原发性足肿，还可以抑制由佐剂引起的继发性足肿胀。其对角叉菜胶致大鼠足肿也具有明显的抑制作用。肩痛颗粒对小鼠热板痛阈具有明显的升高作用，能明显的剂量依赖性的抑制醋酸致小鼠扭体，能明显抑制棉球肉芽的生长。以上结果证明肩痛颗粒具有明显的祛风湿、温经止痛、活血通络的作用，为其临床治疗肩周炎提供了试验证据。

实验例2肩痛颗粒对佐剂致大鼠继发性足肿的影响

根据新药临床前药效学研究指导原则，进一步研究了肩痛颗粒对佐剂致大鼠继发性足肿的影响，为其临床应用提供试验数据。

试验材料：1)、药物：肩痛颗粒浸膏(下称肩痛颗粒)：由本院中药二室提供，批号：011227，含量：3.3g生药/g膏重，1.3g膏重/ml。临床用量为：40.2g生药/天。祛痹舒肩丸(浓缩丸)：广东汕头市中药厂出品，批号：200004011，作为本研究的对照药物。临床日用量为15g/天。肩痛颗粒及祛痹舒肩丸以0.5％CMC-Na配置，消炎痛及阿斯匹林以0.5％CMC-Na配置，现用现配。

以下中药剂量表示均为：g生药/kg。给药体积：大鼠为1ml/100g体重。

2)、试剂：

福氏完全佐剂：含灭活卡介苗10mg/ml。

3)、动物：

wistar大鼠，由本院动物室提供，津实动设施013号，二级。

试验方法：

1、对佐剂性继发足肿的影响：

雄性Wistar大鼠60只，体重180g左右，每鼠左后足跖皮内注射Freund’s完全佐剂0.1ml致炎。于致炎后第8天按体重随机分为5组，模型对照组，祛痹舒肩丸3g/kg组，肩痛颗粒1、3、10g/kg组，分别给予药物，模型组给予0.5％CMC，连续给药23天，分别测量每天给药后1h大鼠右后足体积，并观察动物其他部位如前肢和尾巴的病变，评价药物对佐剂性继发足肿的影响。

2、统计方法：

试验结果表示为 X(均值)±SD(标准差)。组间比较采用非配对t-test。结果：对佐剂性继发足肿的影响：各给药组给药前后足肿胀度(足容积的差值)见表7，图4。

由表可见，在试验期间模型组大鼠右后足明显肿胀，且肿胀达到高峰后，未见肿胀度有减小趋势，在试验期间足容积持续肿胀。试验期间观察到模型组动物前肢也出现肿胀、变形，尾部出现明显结节。给予肩痛颗粒1、3、10g/kg，连续给予23天，可明显降低对侧足肿胀度峰值，且在试验期间保持低肿胀度，与模型组相比具有统计学差异(p＜0.05，0.01)，对佐剂致大鼠继发足肿具有明显的抑制作用。祛痹舒肩丸3g/kg，也表现出对佐剂致大鼠足肿的抑制作用(p＜0.05，0.01)。

        表7、肩痛颗粒对佐剂性继发足肿的影响之一( X±SD，n＝12)

                                给    药    后    (ml)

组别          给药前        1d              2d              3d              4d              5d              6d              7d              8d              9d              10d             11d

空白对照组                  0.04±0.16      0.08±0.18      0.24±0.17      0.28±0.15      0.33±0.16      0.36±0.10      0.43±0.19      0.55±0.24      0.73±0.37      0.85±0.60      1.00±0.69

            (1.41±0.16)    (1.45±0.14)    (1.49±0.15)    (1.65±0.16)    (1.69±0.15)    (1.74±0.14)    (1.77±0.14)    (1.84±0.14)    (1.96±0.14)    (2.14±0.30)    (2.26±0.59)    (2.42±0.70)

祛痹舒肩丸                  -0.04±0.19     -0.01±0.09     0.14±0.13      0.13±0.11#     0.18±0.20      0.33±0.25      0.30±0.36      0.42±0.49      0.38±0.58      0.40±0.70      0.43±0.58#

3g/kg       (1.52±0.10)    (1.48±0.16)    (1.50±0.11)    (1.66±0.13)    (1.65±0.13)    (1.69±0.18)    (1.85±0.23)    (1.81±0.35)    (1.94±0.45)    (1.90±0.56)    (1.92±0.68)    (1.94±0.54)

肩痛颗粒                    0.07±0.10      0.18±0.10      0.18±0.10      0.28±0.15      0.38±0.39      0.53±0.53      0.56±0.48      0.56±0.40      0.75±0.60      0.63±0.53      0.58±0.55

1g/kg       (1.40±0.12)    (1.47±0.12)    (1.58±0.11)    (1.58±0.11)    (1.68±0.21)    (1.78±0.44)    (1.93±0.56)    (1.96±0.53)    (1.96±0.42)    (2.15±0.63)    (2.03±0.55)    (1.98±0.56)

肩痛颗粒                    0.06±0.10      0.16±0.11      0.24±0.17      0.25±0.18      0.33±0.24      0.45±0.41      0.69±0.61      0.80±0.66      0.80±0.69      0.65±0.49      0.61±0.48

3g/kg       (1.39±0.14)    (1.45±0.12)    (1.55±0.11)    (1.63±0.10)    (1.63±0.08)    (1.71±0.17)    (1.83±0.35)    (2.08±0.56)    (2.18±0.62)    (2.18±0.62)    (2.03±0.43)    (2.00±0.43)

肩痛颗粒                    0.08±0.10      0.06±0.12      0.15±0.11      0.16±0.10#     0.23±0.20      0.37±0.35      0.35±0.43      0.43±0.40      0.51±0.45      0.63±0.50      0.55±0.46

10g/kg      (1.43±0.12)    (1.52±0.07)    (1.49±0.09)    (1.58±0.12)    (1.60±0.10)    (1.67±0.18)    (1.80±0.33)    (1.79±0.41)    (1.86±0.42)    (1.95±0.43)    (1.96±0.49)    (1.99±0.44)

表中数据为足肿胀度，即药后值与药前值得差值，括号内数值为实测足容积的值与模型组相比#，p＜0.05，##，p＜0.01

             表7、肩痛颗粒对佐剂性继发足肿的影响之二( X±SD，n＝12)

                                       给      药      后      (ml)

组别       12d           13d            14d           15d           16d           17d           18d           19d           20d           21d           22d           23d

空白对照组 1.01±0.58    1.10±0.54     1.07±0.54    1.03±0.48    1.18±0.57    1.16±0.57    1.14±0.53    1.06±0.51    1.05±0.49    1.04±0.48    1.06±0.44    1.07±0.52

           (2.43±0.60)  (2.51±0.56)   (2.48±0.55)  (2.44±0.45)  (2.59±0.52)  (2.57±0.50)  (2.55±0.46)  (2.47±0.44)  (2.46±0.43)  (2.45±0.41)  (2.47±0.39)  (2.48±0.43)

祛痹舒肩丸 0.35±0.50##  0.39±0.48##   0.53±0.44#   0.47±0.53#   0.41±0.54##  0.35±0.53##  0.42±0.47##  0.56±0.56#   0.42±0.46##  0.36±0.53##  0.44±0.57##  0.50±0.47##

3g/kg      (1.87±0.46)  (1.91±0.45)   (2.04±0.44)  (1.98±0.51)  (1.93±0.53)  (1.86±0.52)  (1.94±0.46)  (2.08±0.56)  (1.94±0.45)  (1.88±0.52)  (1.96±0.56)  (2.02±0.46)

肩痛颗粒   0.55±0.60    0.63±0.73     0.64±0.62    0.66±0.69    0.60±0.65#   0.68±0.72    0.62±0.65#   0.84±0.80    0.81±0.72    0.76±0.74    0.70±0.78    0.61±0.71

1g/kg      (1.95±0.61)  (2.03±0.74)   (2.04±0.62)  (2.06±0.66)  (2.00±0.63)  (2.08±0.71)  (2.02±0.66)  (2.24±0.82)  (2.21±0.70)  (2.16±0.72)  (2.10±0.75)  (2.01±0.70)

肩痛颗粒   0.58±0.55    0.56±0.55#    0.48±0.56#   0.43±0.50##  0.53±0.53##  0.65±0.68    0.75±0.75    0.66±0.60    0.49±0.55#   0.59±0.62    0.60±0.71    0.63±0.50#

3g/kg      (1.97±0.51)  (1.95±0.51)   (1.87±0.54)  (1.81±0.49)  (1.91±0.51)  (2.04±0.65)  (2.14±0.71)  (2.05±0.58)  (1.88±0.52)  (1.98±0.57)  (1.98±0.67)  (2.01±0.48)

肩痛颗粒   0.45±0.42#   0.45±0.45##   0.40±0.52##  0.45±0.51##  0.63±0.60#   0.60±0.56#   0.72±0.61    0.58±0.67    0.53±0.64#   0.58±0.62    0.54±0.60#   0.47±0.63#

10g/kg     (1.88±0.38)  (1.88±0.43)   (1.84±0.50)  (1.88±0.50)  (2.06±0.61)  (2.04±0.59)  (2.15±0.62)  (2.01±0.67)  (1.97±0.65)  (2.02±0.62)  (1.98±0.61)  (1.90±0.63)

表中数据为足肿胀度，即药后值与药前值得差值，括号内数值为实测足容积的值与模型组相比#，p＜0.05，##，p＜0.01

结论：口服灌胃给予肩痛颗粒1、3、10g生药/kg对大鼠佐剂性继发性关节炎具有明显的抑制作用，可以明显抑制佐剂致大鼠对侧足的继发性足肿胀。

附图说明

图1肩痛颗粒对佐剂性原发足肿的影响；

图2肩痛颗粒对佐剂性继发足肿的治疗作用；

图3肩痛颗粒对角叉菜胶致大鼠足肿的影响；

图4肩痛颗粒对佐剂性继发足肿的影响。

下述实施例均能实现上述实验例的效果。

实施例1 颗粒剂

片姜黄  466g    羌  活  140g    当  归  233g    赤  芍  233g

海桐皮  233g    白  术  233g    甘  草  140g

以上七味用乙醇提取两次(5，5倍)，每次1小时，滤过，收集滤液，减压浓缩，相对密度1.10-1.15(50-60℃)清膏(1)。残渣加热水煎煮两次(8，8倍)，每次1小时，滤过，收集滤液，减压浓缩至约1600ml。待冷至室温，加入乙醇使含醇量为70％，搅匀，沉淀，静置使沉淀。取上清液减压浓缩至相对密度为1.25-1.30(50-60℃)清膏(2)。将清膏(1)(2)混合，加入适量糊精和甜味剂，混匀，干燥，制成(无糖型)1000g，即得。功能与主治：风除湿，散寒活血，通络止痛。用于肩痹(肩周炎)，风寒湿痹症者。症见：肩部明显疼痛，肩不能抬举，肩部怕冷，得暖痛减等症。用法与用量：水冲服，一次1袋，一日三次。每袋装8克。

实施例2 片剂

片姜黄 480g    羌  活 160g    当  归 245g  赤  芍 255g

海桐皮 245g    白  术 245g    甘  草 160g

以上七味用药材量6倍乙醇提取3次，每次1.5，滤过，收集滤液，减压浓缩，50-60℃相对密度1.10-1.15清膏①；残渣加8倍热水煎煮3，每次1小时，滤过，收集滤液，减压浓缩至约1600ml冷至室温，加入乙醇使含醇量为75，搅匀，沉淀，静置使沉淀；取上清液减压浓缩至50-60℃相对密度为1.25-1.30清膏②；将清膏①、②混合，加入适量糊精和甜味剂，混匀，干燥，制成(无糖型)1000g，加入赋形剂，压片(制粒压片机一次完成)。每片重0.5克。用法及用量：每次2-4片，每天3次。

实施例3 胶囊剂

片姜黄430g    羌活120g    当归210g    赤芍210g

海桐皮210g    白术210g    甘草120g

以上七味用药材量6倍乙醇提取3次，每次1.5，滤过，收集滤液，减压浓缩，50-60℃相对密度1.10-1.15清膏①；残渣加8倍热水煎煮3，每次1小时，滤过，收集滤液，减压浓缩至约1600ml冷至室温，加入乙醇使含醇量为75，搅匀，沉淀，静置使沉淀；取上清液减压浓缩至50-60℃相对密度为1.25-1.30清膏②；将清膏①、②混合，加入适量糊精和甜味剂，混匀，干燥，制成(无糖型)1000g，经常规制成胶囊剂。

实施例4 颗粒剂的质量控制方法

鉴别：a.取本品0.5g研细，加60-90℃石油醚5ml，时时振摇，约30分钟，滤过，滤液浓缩至约1ml，作为供试品液；另取片姜黄，当归对照药材各0.1g，分别加石油醚5ml，时时振摇，约30分钟，滤过，滤液加石油醚至5ml，作为片姜黄，当归对照药材溶液，照薄层色谱法，中国药典2000版一部(附录VIB)试验，吸取上述三种溶液各4ul，分别点于同一高效GF254薄层板上，以10∶0.8环己烷-醋酸乙酯为展开剂，展开，取出晾干，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与当归对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；喷以1％香草醛硫酸溶液，105℃加热3-4分钟至斑点显色清晰；日光下检视供试品色谱中，在与片姜黄对照药材色谱相应位置上，显相同颜色斑点；b.取本品0.5g，研细，加乙醇5ml，时时振摇，约10分钟，滤过，滤液为供试品溶液；另取芍药苷对照品，加乙醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法，中国药典2000版一部(附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各4ul，分别点于同一高效硅胶G薄层板上，以60∶4∶4∶8醋酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水为展开剂，展开，取出晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药品色谱相应位置上，显相同颜色斑点；c.取本品1g，研细，加40ml乙醚回流脱脂1小时，滤过，残渣加甲醇30ml回流提取1小时，滤过，滤液减压蒸干加水40ml溶解，用正丁醇萃取三次，每次20，20，20ml，合并正丁醇液用水洗涤三次，每次20ml，收集正丁醇液减压蒸干加1ml甲醇为供试品溶液；另取甘草酸铵对照品加甲醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法，中国药典2000版一部(附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各1ul，分别点于同一高效GF₂₅₄薄层板上，以5∶2∶1正丁醇-20％氨水-甲醇为展开剂，展开，取出晾干，置254nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药品色谱相应位置上，显相同颜色斑点；

含量测定：照高效液相色法测定，色谱条件与系统适用性试验，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的250×4.6mm色谱柱；72∶28甲醇∶水为流动相，检测波长为315nm；理论板数按异欧前胡素计算应不低于2000；对照品溶液的制备，取异欧前胡素对照品加入甲醇制成每1ml含0.00212mg的溶液，既得；供试品溶液的制备，取装量差异项下的内容物0.22克，精密称定；置三角烧杯中，加入水15ml，超声处理20分钟；置分液漏斗中，加正己烷萃取四次，每次15ml，合并萃取液，减压浓缩至干，加入甲醇使温热溶解，移至25ml量瓶中，加甲醇稀至刻度，摇匀，用微孔滤膜过滤，得滤液；作为供试品溶液；测定法，分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10ul，注入液相色谱仪测定，既得；本品以异欧前胡素(C₁₆H₁₄O₄)计含量不得低于1.52mg/袋。

Claims (14)

1、一种治疗肩周炎的中药组合物，其特征在于该中药组合物是由下述原料药制成的：

姜  黄  420-520重量份            羌活  100-170重量份

当  归  190-260重量份            赤芍  190-260重量份

海桐皮  190-260重量份            白术  190-260重量份

甘  草  100-170重量份。

2、如权利要求1所述的中药组合物，其特征在于该中药组合物是由下述原料药制成的：

姜  黄  466重量份                羌活  140重量份

当  归  233重量份                赤芍  233重量份

海桐皮  233重量份                白术  233重量份

甘  草  140重量份。

3、如权利要求1所述的中药组合物，其特征在于该中药组合物是由下述原料药制成的：

姜  黄  480重量份                羌活  160重量份

当  归  245重量份                赤芍  255重量份

海桐皮  245重量份                白术  245重量份

甘  草  160重量份。

4、如权利要求1-3所述的中药组合物，其特征在于该中药组合物中姜黄优选片姜黄。

5、如权利要求4所述的中药组合物固体制剂的制备方法，其特征在于该方法为：以上七味用药材量5-7倍乙醇提取1-3次，每次1-2小时，滤过，收集滤液，减压浓缩，50-60℃相对密度1.10-1.15清膏①；残渣加7-9倍热水煎煮1-3次，每次1-2小时，滤过，收集滤液，减压浓缩至约1600体积份；待冷至室温，加入乙醇使含醇量为65-80％，搅匀，沉淀，静置使沉淀；取上清液减压浓缩至50-60℃相对密度为1.25-1.30清膏②；将清膏①、②混合，经过常规工序直接或加入药学上可接受的赋型剂制成片剂、胶囊、颗粒剂中的任一种。

6、如权利要求5所述的中药组合物的制备方法，其特征在于颗粒剂的制备方法为：

以上七味用药材量5倍乙醇提取2次，每次1小时，滤过，收集滤液，减压浓缩，50-60℃相对密度1.10-1.15清膏①；残渣加8倍热水煎煮2次，每次1小时，滤过，收集滤液，减压浓缩至约1600体积份；待冷至室温，加入乙醇使含醇量为70％，搅匀，沉淀，静置使沉淀；取上清液减压浓缩至50-60℃相对密度为1.25-1.30清膏②；将清膏①、②混合，加入适量糊精和甜味剂，混匀，干燥，制成1000重量份，即得。

7、如利要求4所述的中药组合物制剂的质量控制方法，其特征在于该方法中的鉴别方法包括如下鉴别中的一种或几种：

a.取本组合物制剂0.5g研细，加60-90℃石油醚5ml，时时振摇，约25-35分钟，滤过，滤液浓缩至约1ml，作为供试品液；另取片姜黄，当归对照药材各0.1g，分别加石油醚5ml，时时振摇，约25-35分钟，滤过，滤液加石油醚至5ml，作为片姜黄，当归对照药材溶液，照薄层色谱法，吸取上述三种溶液各4ul，分别点于同一高效GF254薄层板上，以9-11∶0.7-0.9环己烷-醋酸乙酯为展开剂，展开，取出晾干，置紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与当归对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；喷以1％香草醛硫酸溶液，100-110℃加热3-6分钟至斑点显色清晰；日光下检视供试品色谱中，在与片姜黄对照药材色谱相应位置上，显相同颜色斑点；b.取本组合物制剂0.5g，研细，加乙醇5ml，时时振摇，约8-12分钟，滤过，滤液为供试品溶液；另取芍药苷对照品，加乙醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法，吸取上述两种溶液各4ul，分别点于同一高效硅胶G薄层板上，以55-65∶3-5∶3-6∶7-9醋酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水为展开剂，展开，取出晾干，喷以4-7％香草醛硫酸溶液，100-110℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药品色谱相应位置上，显相同颜色斑点；c.取本组合物制剂1g，研细，加40ml乙醚回流脱脂1-1.5小时，滤过，残渣加甲醇30ml回流提取1-1.5小时，滤过，滤液减压蒸干加水40ml溶解，用正丁醇萃取2-4次，合并正丁醇液用水洗涤2-4次，每次20ml，收集正丁醇液减压蒸干加1ml甲醇为供试品溶液；另取甘草酸铵对照品加甲醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法，试验，吸取上述两种溶液各1ul，分别点于同一高效GF₂₅₄薄层板上，以4-6∶1-4∶1-2正丁醇-20％氨水-甲醇为展开剂，展开，取出晾干，置紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药品色谱相应位置上，显相同颜色斑点。

8、如利要求7所述的中药组合物制剂的质量控制方法，其特征在于颗粒剂的鉴别方法包括如下鉴别中的一种或几种：

a.取本品0.5g研细，加60-90℃石油醚5ml，时时振摇，约30分钟，滤过，滤液浓缩至约1ml，作为供试品液；另取片姜黄，当归对照药材各0.1g，分别加石油醚5ml，时时振摇，约30分钟，滤过，滤液加石油醚至5ml，作为片姜黄，当归对照药材溶液，照薄层色谱法，吸取上述三种溶液各4ul，分别点于同一高效GF254薄层板上，以10∶0.8环己烷-醋酸乙酯为展开剂，展开，取出晾干，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与当归对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；喷以1％香草醛硫酸溶液，105℃加热3-4分钟至斑点显色清晰；日光下检视供试品色谱中，在与片姜黄对照药材色谱相应位置上，显相同颜色斑点；b.取本品0.5g，研细，加乙醇5ml，时时振摇，约10分钟，滤过，滤液为供试品溶液；另取芍药苷对照品，加乙醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法，吸取上述两种溶液各4ul，分别点于同一高效硅胶G薄层板上，以60∶4∶4∶8醋酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水为展开剂，展开，取出晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药品色谱相应位置上，显相同颜色斑点；c.取本品1g，研细，加40ml乙醚回流脱脂1小时，滤过，残渣加甲醇30ml回流提取1小时，滤过，滤液减压蒸干加水40ml溶解，用正丁醇萃取三次，每次20，20，20ml，合并正丁醇液用水洗涤三次，每次20ml，收集正丁醇液减压蒸干加1ml甲醇为供试品溶液；另取甘草酸铵对照品加甲醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法，吸取上述两种溶液各1ul，分别点于同一高效GF₂₅₄薄层板上，以5∶2∶1正丁醇-20％氨水-甲醇为展开剂，展开，取出晾干，置254nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药品色谱相应位置上，显相同颜色斑点。

9、如利要求4所述的中药组合物制剂的质量控制方法，其特征在于该方法中的含量测定方法为：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱；70-78∶23-33甲醇∶水为流动相，检测波长为315nm；理论板数按异欧前胡素计算应不低于2000；对照品溶液的制备，取异欧前胡素对照品加入甲醇制成每1ml含0.00212mg的溶液，既得；供试品溶液的制备，取装量差异项下的内容物0.22克，精密称定；置三角烧杯中，加入水15ml，超声处理15-25分钟；置分液漏斗中，加正己烷萃取3-5次，每次15ml，合并萃取液，减压浓缩至干，加入甲醇使温热溶解，移至25ml量瓶中，加甲醇稀至刻度，摇匀，用微孔滤膜过滤，得滤液；作为供试品溶液；测定法，分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10ul，注入液相色谱仪测定，既得；本组合物制剂每单位量以异欧前胡素计含量不得低于1.48-1.60mg。

10、如利要求9所述的中药组合物制剂的质量控制方法，其特征在于颗粒剂的含量测定方法为：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的250×4.6mm色谱柱；72∶28甲醇∶水为流动相，检测波长为315nm；理论板数按异欧前胡素计算应不低于2000；对照品溶液的制备，取异欧前胡素对照品加入甲醇制成每1ml含0.00212mg的溶液，既得；供试品溶液的制备，取装量差异项下的内容物0.22克，精密称定；置三角烧杯中，加入水15ml，超声处理20分钟；置分液漏斗中，加正己烷萃取四次，每次15ml，合并萃取液，减压浓缩至干，加入甲醇使温热溶解，移至25ml量瓶中，加甲醇稀至刻度，摇匀，用微孔滤膜过滤，得滤液；作为供试品溶液；测定法，分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10ul，注入液相色谱仪测定，既得；本品以异欧前胡素计含量不得低于1.52mg/袋。

11、如权利要求4所述的中药组合物制剂的质量控制方法，其特征在于该方法包括以下步骤：

鉴别：a.取本组合物制剂0.5g研细，加60-90℃石油醚5ml，时时振摇，约25-35分钟，滤过，滤液浓缩至约1ml，作为供试品液；另取片姜黄，当归对照药材各0.1g，分别加石油醚5ml，时时振摇，约25-35分钟，滤过，滤液加石油醚至5ml，作为片姜黄，当归对照药材溶液，照薄层色谱法，吸取上述三种溶液各4ul，分别点于同一高效GF254薄层板上，以9-11∶0.7-0.9环己烷-醋酸乙酯为展开剂，展开，取出晾干，置紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与当归对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；喷以1％香草醛硫酸溶液，100-110℃加热3-6分钟至斑点显色清晰；日光下检视供试品色谱中，在与片姜黄对照药材色谱相应位置上，显相同颜色斑点；b.取本组合物制剂0.5g，研细，加乙醇5ml，时时振摇，约8-12分钟，滤过，滤液为供试品溶液；另取芍药苷对照品，加乙醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法，吸取上述两种溶液各4ul，分别点于同一高效硅胶G薄层板上，以55-65∶3-5∶3-6∶7-9醋酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水为展开剂，展开，取出晾干，喷以4-7％香草醛硫酸溶液，100-110℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药品色谱相应位置上，显相同颜色斑点；c.取本组合物制剂1g，研细，加40ml乙醚回流脱脂1-1.5小时，滤过，残渣加甲醇30ml回流提取1-1.5小时，滤过，滤液减压蒸干加水40ml溶解，用正丁醇萃取2-4次，合并正丁醇液用水洗涤2-4次，每次20ml，收集正丁醇液减压蒸干加1ml甲醇为供试品溶液；另取甘草酸铵对照品加甲醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法，试验，吸取上述两种溶液各1ul，分别点于同一高效GF₂₅₄薄层板上，以4-6∶1-4∶1-2正丁醇-20％氨水-甲醇为展开剂，展开，取出晾干，置紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药品色谱相应位置上，显相同颜色斑点；

含量测定：照高效液相色法测定，色谱条件与系统适用性试验，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱；70-78∶23-33甲醇∶水为流动相，检测波长为315nm；理论板数按异欧前胡素计算应不低于2000；对照品溶液的制备，取异欧前胡素对照品加入甲醇制成每1ml含0.00212mg的溶液，既得；供试品溶液的制备，取装量差异项下的内容物0.22克，精密称定；置三角烧杯中，加入水15ml，超声处理15-25分钟；置分液漏斗中，加正己烷萃取3-5次，每次15ml，合并萃取液，减压浓缩至干，加入甲醇使温热溶解，移至25ml量瓶中，加甲醇稀至刻度，摇匀，用微孔滤膜过滤，得滤液；作为供试品溶液；测定法，分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10ul，注入液相色谱仪测定，既得；本组合物制剂每单位量以异欧前胡素计含量不得低于1.48-1.60mg。

12、如权利要求11所述的中药组合物制剂的质量控制方法，其特征在于颗粒剂方法包括以下步骤：

鉴别：a.取本品0.5g研细，加60-90℃石油醚5ml，时时振摇，约30分钟，滤过，滤液浓缩至约1ml，作为供试品液；另取片姜黄，当归对照药材各0.1g，分别加石油醚5ml，时时振摇，约30分钟，滤过，滤液加石油醚至5ml，作为片姜黄，当归对照药材溶液，照薄层色谱法，吸取上述三种溶液各4ul，分别点于同一高效GF254薄层板上，以10∶0.8环己烷-醋酸乙酯为展开剂，展开，取出晾干，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与当归对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；喷以1％香草醛硫酸溶液，105℃加热3-4分钟至斑点显色清晰；日光下检视供试品色谱中，在与片姜黄对照药材色谱相应位置上，显相同颜色斑点；b.取本品0.5g，研细，加乙醇5ml，时时振摇，约10分钟，滤过，滤液为供试品溶液；另取芍药苷对照品，加乙醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法，吸取上述两种溶液各4ul，分别点于同一高效硅胶G薄层板上，以60∶4∶4∶8醋酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水为展开剂，展开，取出晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药品色谱相应位置上，显相同颜色斑点；c.取本品1g，研细，加40ml乙醚回流脱脂1小时，滤过，残渣加甲醇30ml回流提取1小时，滤过，滤液减压蒸干加水40ml溶解，用正丁醇萃取三次，每次20，20，20ml，合并正丁醇液用水洗涤三次，每次20ml，收集正丁醇液减压蒸干加1ml甲醇为供试品溶液；另取甘草酸铵对照品加甲醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法，吸取上述两种溶液各1ul，分别点于同一高效GF₂₅₄薄层板上，以5∶2∶1正丁醇-20％氨水-甲醇为展开剂，展开，取出晾干，置254nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药品色谱相应位置上，显相同颜色斑点；

含量测定：照高效液相色法测定，色谱条件与系统适用性试验，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的250×4.6mm色谱柱；72∶28甲醇∶水为流动相，检测波长为315nm；理论板数按异欧前胡素计算应不低于2000；对照品溶液的制备，取异欧前胡素对照品加入甲醇制成每1ml含0.00212mg的溶液，既得；供试品溶液的制备，取装量差异项下的内容物0.22克，精密称定；置三角烧杯中，加入水15ml，超声处理20分钟；置分液漏斗中，加正己烷萃取四次，每次15ml，合并萃取液，减压浓缩至干，加入甲醇使温热溶解，移至25ml量瓶中，加甲醇稀至刻度，摇匀，用微孔滤膜过滤，得滤液；作为供试品溶液；测定法，分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10ul，注入液相色谱仪测定，既得；本品以异欧前胡素计含量不得低于1.52mg/袋。

13、如权利要求4所述的中药组合物在制备具有祛风湿、温经止痛、活血通络作用的药物中的应用。

14、如权利要求13所述的应用，其特征在于制备治疗肩周炎药物中的应用。

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