CN1565530A - 一种治疗尿失禁的药物及其制备方法 - Google Patents

Abstract

一种治疗尿失禁的药物，它是由桑螵蛸、龙骨、人参、茯神、石菖蒲、远志、龟板、当归等原料制成的。本发明还涉及该治疗尿失禁的药物的制备方法。本发明为黄色浸膏粉，口服，成人日用量为6g(生药量)/60kg，本发明主治小便频数，或遗尿滑精，心神恍惚，健忘等症，具有调补心肾、固精止遗之功。

Description

一种治疗尿失禁的药物及其制备方法

                        技术领域

本发明涉及一种治疗尿失禁的药物，具体的说是涉及一种治疗尿失禁的中成药。本发明还涉及该治疗尿失禁的药物的制备方法。

                        背景技术

尿失禁是指尿液不能控制而不自主流出，可见于不同年龄，但以老年人、成年女性、小儿为多见。近20年来，世界范围内多次的老年人流行病学调查，得出结论为约30％的老年人患有不同程度的尿失禁，严重尿失禁约在6％左右，且有明显的性别差异，女性患病率高于男性。老年妇女应力性尿失禁患病率为29.0％，明显高于老年男性患病率11.9％(p＜0.01)。男女性老年人患病率均为农村高于城市。从事重体力劳动者患病率明显高于轻体力及脑力劳动者。多次分娩、特别是超过6胎以上者患病率明显高于分娩次数少者，且随末次分娩年龄的增高尿失禁患病率逐渐增高(p＜0.01)。随着年龄增长，老年人尿失禁患病率增长更显著。我国曾对石家庄市388例城市老年居民就尿失禁所作调查报道，尿失禁患病率为22.2％；对598名18岁以上自然人群成年女性进行尿失禁的流行病学调查，其中23.7％患有尿失禁，国外文献报道其发病率与上述调查结果相仿。

现代医学认为病理性尿频的原因繁多。尿失禁可分为4种类型：应力性尿失禁指在咳嗽、打喷嚏、用力(如体育锻炼和突然改变体位)时不随意排尿。紧迫性尿失禁是由于逼肌过度活跃和突然强烈的愿望引起的不随意排尿。反射性尿失禁是在脊髓反射活动并无排尿感觉的情况下出现排尿。溢流性尿失禁是在膀胱内压力超过尿道最大压力(但逼肌并不活跃)时引起的不随意排尿。治疗药物包括抗胆碱能药、钙离子通道拮抗剂、□-受体激动剂、前列腺素抑制剂、三环类抗抑郁药、α-受体激动剂、β-受体激动剂、神经原脱敏剂及雌激素等。但这些药物疗效都不甚肯定，而且副作用发生率也较高，常伴发恶心、呕吐、头晕、胃痛、便秘、消化不良和攻击行为、丘疹，甚至会损害肝肾功能。中医治疗采用按摩、点穴、穴位注射、针灸等方法治疗，药物治疗基本采用补肾缩尿的原则，但大多限于汤剂，针对本病特点的成药甚少，且存在服用量大的缺陷，中药抗利尿药即治疗虚淋的中成药在市场上少见。

                        发明内容

本发明要解决的技术问题是提出了一种主治小便频数，或遗尿滑精，心神恍惚，健忘等症，具有调补心肾、固精止遗之功的治疗尿失禁的药物。

本发明另一要解决的技术问题是提出该治疗尿失禁的药物的制备方法。

祖国医学认为，小便频数、遗尿，究其病因，大抵为下元虚寒、脾肺气虚、肝经湿热等所致。然其病因及病机之关键，却在于心肾不交。心为五脏之主，在五行属火，位居上而属阳，肾为水脏，位居下而属阴，从水火升降理论来说。位下以升为顺.位上以降为和。在正常生理情况下，心之君火下降温煦肾阳，使肾能行统摄水液之责，而肾中真水上济、使心阳得以滋润，并防其君火太过，以行其统领五脏之权，水火相济，心肾相交，五脏之生理功能得以正常运行。当肾气虚损时，统温水液失职，出现遗尿、滑精等症，又肾虚真水不能上济于心，使心之君火偏旺，扰动神明，故出现多梦、寐劣，妄施开合之令，又致遗尿频作。

本发明药物是由下述重量(份)配比的原料制成的：

桑螵蛸300～400  龙骨300～400  人参300～400  茯神300～400

石菖蒲300～400  远志300～400  龟板300～400  当归300～400

本发明要解决的技术问题还可以由以下技术方案来进一步达到，本发明药物的最佳重量(份)配比是：

桑螵蛸375g  龙骨375g  人参375g  茯神375g

石菖蒲375g  远志375g  龟板375g  当归375g

本发明要解决的技术问题还可以由以下技术方案来进一步达到，所述的药物剂型为药剂学所述的任何剂型。

本发明要解决的技术问题还可以由以下技术方案来进一步达到，本发明所说的药剂是口服制剂。

本发明另一要解决的技术问题是由以下技术方案来实现的，将上述各组分制成本发明药物的生产方法是：

人参、远志加60％乙醇加热回流二次，第一次2小时，第二次1小时，滤过，合并滤液，-0.09～-0.06Mpa和60～80℃条件下减压回收乙醇，并在50℃的温度下浓缩至相对密度为1.10～1.20的清膏，备用。

当归、石菖蒲提取挥发油，所得挥发油另器存放，用β-环糊精包合，备用；残留水液滤过，滤液在50℃的温度下浓缩至相对密度为1.10～1.20的清膏，备用。

当归、石菖蒲残留水液滤过后的药渣与桑螵蛸、龙骨、茯神、龟板四味药，加水煎煮二次，第一次2小时，第二次1小时，合并煎液，滤过，滤液放冷至60℃，边搅拌边加入0.1％壳聚糖澄清试剂，搅匀，静置24小时，取上清液，并在50℃的温度下浓缩至相对密度为1.10～1.20的清膏。

将上述三种清膏合并，喷雾干燥，再与挥发油包合物混匀，加入0.5～5倍量辅料，混匀，制成临床上可接受的剂型。

实验目的

通过药效学试验验证本发明与临床功能主治有关的作用。

实验药物：

本发明为黄色浸膏粉，口服，成人日用量为6g(生药量)/60kg，由江苏中康新药指纹图谱开发有限公司提供。批号：020128-1。临用前用蒸馏水配成所需浓度；缩泉丸，广东华天宝药业有限公司，批号：20020302。临用前进行研磨，再用蒸馏水配成所需浓度；氢化可的松注射液，扬州制药有限公司，批号：20020601；戊巴比妥钠，北京通县育才化工厂，批号：950427；氯化钠(分析纯)，南京玖泰化学试剂厂，批号：20000303；印度墨汁，上海长江日用粘合材料厂，批号：881120；钠石灰，上海陆都化学试剂厂，批号：20010622；碳酸钠，南京化学试剂一厂，批号：01041339；碳酸氢纳，北京化工厂，批号：860523；高铁氰化钾，上海试剂总厂，批号：644-65；氰化钾，上海试剂总厂，批号：644-65；医药白凡士林，金陵石化公司化工一厂，批号：20011104；安定，江苏济川制药有限公司，批号：020224；ALT测试盒，中美合资宁波亚太生物技术有限公司，批号：20020527；TP测试盒，德国豪迈公司，批号：145；CHOL测试盒，日本日化公司，批号：033RIY；TG测试盒，上海申能-德赛诊断技术有限公司，批号：1703/4415；LDH测试盒，北京中生有限公司，批号：20020401；UREA测试盒，上海申能-德赛诊断技术有限公司，批号：1703/4415；CREA测试盒，日本和光纯药工业株式会社，批号：TR340。

实验动物：

SD大鼠、ICR小鼠，均由江宁青龙山动物繁殖场提供，生产许可证：SCXK(苏)2002-0018。

仪器：

752型紫外光栅分光光度计，上海精密科学仪器有限公司；LDZ5-2型离心机，北京医用离心机厂；2700型奥林帕斯血液生化仪，日本日立公司；FA/JA型电子天平，上海精密科学仪器有限公司；DK-型电热恒温水槽，上海精密实验设备有限公司；ZIL-2程控自主活动箱，医科院药研所；BCD-223L型华凌冷藏冷冻箱，中国雪柜实业有限公司。

实验条件：

给药前后，实验小鼠、大鼠均雌雄分笼用全价颗粒饲料喂养，自由饮水，室温23～27℃，湿度40～70％。

统计方法：

采用t检验法、X²检验法。

对水负荷大鼠尿量的影响

造模方法及分组给药

SD大鼠70只，180～210g，雄性。预先使之适应代谢笼的生活环境1日后，禁食不禁水15h，第2日灌胃给予50ml/kg 38℃温水，收集2小时的尿量。2h尿量达到所灌胃量的40％以上的大鼠则用于抗利尿实验。取适合抗利尿实验的大鼠50只随机分为5组，(1)空白对照组：生理盐水10ml/kg；(2)缩泉丸组：3.0g/kg；(3)本发明小剂量组：0.6g(生药量)/kg；(4)本发明中剂量组：1.2g(生药量)/kg；(5)本发明大剂量组：2.4g(生药量)/kg。除空白对照组每日灌胃给予生理盐水10ml/kg外，其余各组按剂量设计分别灌胃给予受试药物10ml/kg，共7日^[1]。

观测指标及方法

末次给药后30min，各组动物均灌胃给予12％的乙醇50ml/kg引起多尿状态。观察记录末次给药后0～1h、1～2h、2～4h、4～6h的尿量，计算各时间段尿量与灌胃乙醇的百分比(尿排出率)，结果统计并进行组间t检验。

实验结果

实验结果显示，给药后0～1h、1～2h缩泉丸组以及本发明各组大鼠的尿量明显减少，尿排出率降低，与空白对照组比较具有显著性差异(p＜0.01，p＜0.05)。表明本发明对给予水负荷的大鼠具有明显的抗利尿作用。见表1。

                     表1本发明对水负荷大鼠尿量的影响( X±S)

组别

                      动物                       给药后尿排出率(％)

           剂量

                      数

           (g/kg)                    0～1h            1～2h           2～4h           4～6h

                      (只)

空白

           -          10             49.17±13.50     17.31±7.84     12.45±5.05     11.83±5.40

对照组

缩泉丸组   3.0        10             33.79±17.08^*   10.42±6.17^*   12.20±10.16    6.90±5.55

本发明

           0.6        10             32.33±12.53^**  10.32±4.37^*   13.17±5.24     15.81±8.15

小剂量组

本发明

           1.2        9              32.56±9.06^**   9.48±4.75^*    13.99±4.90     6.23±8.88

中剂量组

本发明

           2.4        10             28.49±9.70^**   10.23±3.96^*   16.93±11.03    6.72±7.55

大剂量组

·p＜0.05，^**p＜0.01，与空白对照组比较(本发明中剂量组大鼠灌胃死亡1只)。

对氢化可的松所致肾阳虚大鼠模型的影响

1造模方法及分级给药

取雄性SD大鼠60只，180～230g，随机分为6组。(1)空白对照组：生理盐水10ml/kg；(2)模型组：生理盐水10ml/kg；(3)缩泉丸组：3.0g/kg；(4)本发明小剂量组：0.6g(生药量)/kg；(5)本发明中剂量组：1.2g(生药量)/kg；(6)本发明大剂量组：2.4g(生药量)/kg。除空白对照组每日皮下注射灭菌生理盐水0.4ml/100g外，其余各组均皮下注射0.5％氢化可的松0.4ml/100g，并按剂量设计同时分别灌胃给予生理盐水或受试药物10ml/kg，共11日^[2，4，5]。

观测指标及方法

(1)对大鼠体重增长率以及尿量的影响

实验第10日，给药前30min，大鼠称重，计算体重增长率，灌胃30ml/kg生理盐水负荷。30min后，挤压大鼠下腹部使其排尽尿液，然后给药10ml/kg，空白对照组给相应生理盐水，立即放入代谢笼中。分别收集给药后连续0～1h、1～2h、2～4h、4～6h的尿量。收集完毕放回饲养笼。

(2)对大鼠总蛋白(TP)、乳酸脱氢酶(LDH)、尿素(Urea)、肌酐(Crea)等有关血液生化指标的影响

实验第11日，将动物称重，眼眶取血5ml左右，置于37□水浴箱中1h，3000rpm，离心15min后吸取上清液做生化指标检测。

(3)对大鼠胸腺、肾上腺、前列腺及精囊腺、睾丸及附睾等有关脏器系数的影响

眼眶取血后脱颈椎处死大鼠后取胸腺、肾、肾上腺、前列腺及精囊腺、睾丸及附睾、膀胱并称重。计算脏器系数。

各组结果模型组与空白对照组进行组间t检验，给药组与模型组进行组间t检验。

实验结果

(1)对大鼠体重增长率以及尿量的影响

造模后模型组体重下降，体重增长率与空白对照组比较具有显著性差异(p＜0.01)。而本发明各组体重有所增长，体重增长率与模型组比较有显著性差异(p＜0.05)。表明本发明具有抵抗肾阳虚大鼠模型体重下降的作用。

造模后模型组大鼠排尿量增多，其在0～1h、1～2h的排尿量明显增多，与空白对照组比较有显著性差异(p＜0.01)；缩泉丸组以及本发明三个剂量组给药后尿量与模型组比较有不同程度的下降，其中缩泉丸组在给药后0～1h、1～2h、4～6h的排尿量明显减少，本发明小剂量给药后0～1h尿量明显降低，本发明中剂量组给药后0～1h、1～2h、4～6h尿量显著降低，本发明大剂量组药后0～1h、1～2h尿量明显降低，与模型组比较有显著性差异(p＜0.05，p＜0.01)。表明本发明对肾阳虚大鼠模型尿量增多的症状有显著改善。

结果见表2、表3。

      表2本发明对肾阳虚大鼠体重增长率的影响( X±S)

                               动物

组别            剂量(g/kg)

                                         体重增长率(％)

                               数

空白对照组      -              10        19.2±3.9

模型组          -              10        -7.1±10.8^□□

缩泉丸组        3.0            10        0.5±4.7

本发明小剂量组  0.6            10        4.5±7.32^*

本发明中剂量组  1.2            10        2.0±6.3^*

本发明大剂量组  2.4            10        7.5±18.2^*

^*p＜0.05，与模型组比较；^□□p＜0.01，与空白对照组比较。

                表3本发明对肾阳虚大鼠尿量的影响( X±S)

组别         剂量       动物数          给药后不同时间内的尿量(ml/100g体重)

             (g/kg)     (只)     0～1h           1～2h           2～4h        4～6h

空白对照组   -          10       0.21±0.23      0.18±0.21      0.43±0.40   0.43±0.35

模型组       -          10       1.55±1.01^□□   0.82±0.43^□□    0.53±0.16   0.60±0.57

缩泉丸组     3.0        10       0.61±0.37^*    0.16±0.28^**   0.52±0.28   0.19±0.22^*

本发明

             0.6        10       0.76±0.37^*    0.40±0.48      0.89±0.67   0.55±0.40

小剂量组

本发明

             1.2        10       0.70±0.19^*    0.49±0.22^*    0.63±0.18   0.37±0.13^*

中剂量组

本发明

             2.4        10       0.56±0.24^**   0.32±0.24^**   0.56±0.37   0.39±0.32

大剂量组

p＜0.05，^**p＜0.01，与模型组比较；^□□p＜0.01，与空白对照组比较。

(2)对大鼠血液生化指标的影响

大鼠造模后总蛋白(TP)水平下降，模型组总蛋白(TP)指标与空白对照组比较有显著性差异(p＜0.01)，而缩泉丸、本发明小、大剂量组与模型组相比较总蛋白(TP)水平略有回升，但无显著性差异；

大鼠造模后甘油三酯(TG)、乳酸脱氢酶(LDH)、尿素(Urea)、肌酐(Crea)水平上升，本发明低、中、高三个剂量组与模型组相比TG、LDH、Urea、Crea水平降低，其中本发明小剂量组Urea，中剂量组LDH，大剂量组LDH、Urea水平与模型组相比较有显著性差异(p＜0.05，p＜0.01)。

结果提示，大鼠造模后，可能出现一定的代谢紊乱情况。经本发明灌服后，乳酸脱氢酶、尿素水平显著下降。本发明对此现象有一定的改善。结果见表4。

               表4本发明对肾阳虚大鼠血液生化指标的影响( X±S)

                            动物

                剂量

                                       ALT        TP        CHOL        TG          LDH        Urea       Crea

组别

                            数

                (g/kg)                 (u/L)      (g/L)     (mmol/L)    (mmol/L)    (u/L)      (mmol/L)   (□mol/L)

                            (只)

                                       61.59      73.38     1.64        1.34        1743.7     7.15       92.90

空白对照组       -          10

                                       ±8.78     ±4.30    ±0.31      ±0.80      ±469.0    ±1.49     ±30.33

                                       55.48      63.56^□□  1.47        1.85        1947.0     7.51       103.00

模型组           -          9

                                       ±30.18    ±2.81    ±0.29      ±0.83      ±330.1    ±1.15     ±35.88

                                       77.20      64.18     1.50        1.84        1952.9     7.68       98.88

缩泉丸组         3.0        8

                                       ±59.83    ±2.98    ±0.33      ±0.77      ±343.0    ±1.11     ±33.68

                                       62.50      64.01     1.46        1.32        1872.6     6.15^*     99.38

本发明小剂量组   0.6        8

                                       ±58.24    ±8.48    ±0.20      ±0.55      ±319.1    ±1.19     ±31.91

                                       53.05      59.86     1.27        1.25        1465.1^**  7.46       75.50

本发明中剂量组   1.2       8

                                       ±38.31    ±7.29    ±0.20      ±0.42      ±273.1    ±2.47     ±26.89

                                       41.39      63.87     1.50        1.51        1382.9^**  5.94^**    74.57

本发明大剂量组   2.4       7

                                       ±10.66    ±4.19    ±0.11      ±0.48      ±307.4    ±0.94     ±20.08

^*p＜0.05，^**p＜0.01与模型组比较；^□□p＜0.01，与空白对照组比较。

注：造模过程中部分动物死亡以及取血液过程中由于部分血液样本被破坏，未检验出相关指标。样本数目有所减少。

(3)对大鼠体重、血液生化指标以及有关脏器系数的影响

造模后模型组大鼠各脏器系数与对照组比较均有不同程度的降低，其中胸腺、肾上腺、前列腺及精囊腺、睾丸及附睾脏器系数明显降低，与对照组比较有显著性差异(p＜0.01)；与模型组相比，缩泉丸组大鼠肾上腺、前列腺及精囊腺、睾丸及附睾脏器系数增加，本发明小剂量组胸腺、睾丸及附睾脏器系数增加，本发明中、大剂量组胸腺、肾上腺、前列腺及精囊腺、睾丸及附睾脏器系数增加，且与模型组比较有显著性差异(p＜0.05，p＜0.01)。表明本发明对氢可致肾阳虚大鼠脏器萎缩有一定的对抗作用。结果见表5。

               表5本发明对肾阳虚大鼠脏器系数(g/100g)的影响( X±S)

                          动物

                剂量

                                           脏器系数(g/100g体重)

                          数

组别                                                                     前列腺

                                                                                   睾丸

               (g/kg)     (只)       胸腺     肾      肾上腺    膀胱     及精囊

                                                                                   及附睾

                                                                         腺

                                     0.129    0.72    0.021     0.038    0.544     1.507

空白

               -          10

对照组                               ±0.059  ±0.084 ±0.002   ±0.020  ±0.140   ±0.144

                                     0.058^□□ 0.678   0.014^□□ 0.034    0.337^□□ 1.187^□□

模型组         -          10

                                     ±0.028  ±0.172 ±0.004   ±0.004  ±0.162   ±0.317

                                     0.079    0.758   0.020^**  0.033    0.523^*   1.5^*

缩泉丸组       3          9

                                     ±0.035  ±0.090 ±0.003   ±0.011  ±0.202   ±0.272

本发明                               0.095^*  0.745   0.019     0.035    0.435     1.496^*

               0.6        9

小剂量组

                                    ±0.036   ±0.086 ±0.009  ±0.013   ±0.039   ±0.256

本发明                              0.086^*   0.775   0.025^*  0.041     0.474^*   1.575^**

               1.2        10

中剂量组                            ±0.027   ±0.09  ±0.014  ±0.018   ±0.089   ±0.225

本发明                              0.090^*   0.692   0.019^*  0.030     0.537^*   1.511^*

               2.4        7

大剂量组                            ±0.027   ±0.123 ±0.007  ±0.009   ±0.141   ±0.269

^*p＜0.05，^**p＜0.01，与模型组比较；^□□p＜0.01，与空白对照组比较。

注：造模过程中部分动物死亡，样本数目有所减少。

对氢化可的松所致肾阳虚小鼠模型常压缺氧存活时间的影响

1.造模方法及分组给药

ICR小鼠90只，体重18～22g，雄性。随机分为6组，每组15只：分别为(1)空白对照组：生理盐水20ml/kg；(2)模型组：生理盐水20ml/kg；(3)缩泉丸组：6.0g/kg；(4)本发明小剂量组：1.2g(生药量)/kg；(5)本发明中剂量组：2.4g(生药量)/kg；(6)本发明大剂量组：4.8g(生药量)/kg。各组按20ml/kg每日灌胃给药1次，连续给7日。给药第1日开始，空白对照组每日皮下注射灭菌生理盐水0.05ml/10g，其余各组皮下注射0.5％氢化可的松0.05ml/10g，连续7日^[4，6]。

2.观测指标及方法

末次给药后30min，将各组小鼠单独置于125ml广口瓶中(内装5g钠石灰，瓶口用凡士林密封)，观察记录小鼠在常压缺氧状态下的存活时间，结果进行组间t检验。

3.实验结果

小鼠造模后其常压缺氧存活时间明显缩短，模型组常压缺氧存活时间与空白对照组比较具有显著性差异(p＜0.01)。缩泉丸组以及本发明三个剂量组能明显延长小鼠常压缺氧存活时间，与模型组比较有显著性差异(p＜0.01，p＜0.05)。显示本发明具有延长肾阳虚小鼠常压缺氧存活时间的作用。结果见表6。

      表6本发明对肾阳虚小鼠常压缺氧存活时间的影响( X±S)

            剂量        动物数

组别

                                        常压缺氧存活时间(min)

            (g/kg)      (只)

空白对照组   -          15              11.63±2.11

模型组       -          12              9.65±1.09^□□

缩泉丸组     6.0        14              10.85±1.30^*

本发明

             1.2        14              11.01±1.39^*

小剂量组

本发明

             2.4        15              11.08±1.03^**

中剂量组

本发明

             4.8        13              11.09±0.84^**

大剂量组

^*p＜0.05，^**p＜0.01，与模型组比较；^□□p＜0.01，与空白对照组比较。

注：造模过程中部分动物死亡，样本数目有所减少。

对氢化可的松所致肾阳虚小鼠模型耐寒作用的影响

1.造模方法及分组给药

ICR小鼠120只，体重17～22g，雄性。随机分为6组：分别为(1)空白对照组：生理盐水20ml/kg；(2)模型组：生理盐水20ml/kg；(3)缩泉丸组：6.0g/kg；(4)本发明小剂量组：1.2g(生药量)/kg；(5)本发明中剂量组：2.4g(生药量)/kg；(6)本发明大剂量组：4.8g(生药量)/kg。各组按20ml/kg每日灌胃给药1次，连续给7日。给药第1日开始，空白对照组每日皮下注射灭菌生理盐水0.05ml/10g，其余各组皮下注射0.5％氢化可的松0.05ml/10g，连续7日^[4，6]。

2.观测指标及方法

末次给药后30min，将小鼠置于零下15±1□冰箱中观察，待模型组小鼠死亡半数以上时，全部取出记录各组小鼠死亡数，以各组存活率进行组间x²检验。

3.实验结果

小鼠造模后其耐寒能力明显下降，模型组小鼠死亡数明显增多，与空白对照组比较具有显著性差异(p＜0.01)。缩泉丸组以及本发明三个剂量组能不同程度降低死亡率，其中本发明大剂量组与模型组比较有显著性差异(p＜0.05)。显示本发明对氢化可的松致肾阳虚小鼠的耐寒能力有一定的增强作用。结果见表7。

       表7本发明对肾阳虚小鼠耐寒作用的影响( X±S)

                                 动物

                   剂量

                                              死亡数

组别

                                 数

                  (g/kg)

                                              (只)

                                 (只)

空白对照组        -              20           6

模型组            -              20           18^□□

缩泉丸组          6.0            20           14

本发明小剂量组    1.2            20           16

本发明中剂量组    2.4            20           13

本发明大剂量组    4.8            20           12^*

p＜0.05，与模型组比较；□□p＜0.01，与空白对照组比较。

对氢化可的松所致肾阳虚小鼠模型体重、体温及游泳时间的影响

1.造模方法及分组给药

ICR小鼠90只，体重18～22g，雄性。随机分为6组，每组15只，分别为：(1)空白对照组：生理盐水20ml/kg；(2)模型组：生理盐水20ml/kg；(3)缩泉丸组：6.0g/kg；(4)本发明小剂量组：1.2g(生药量)/kg；(5)本发明中剂量组：2.4g(生药量)/kg；(6)本发明大剂量组：4.8g(生药量)/kg。各组按20m1/kg每日灌胃给药1次，连续给7日。给药第1日开始，空白对照组每日皮下注射灭菌生理盐水0.05ml/10g，其余各组皮下注射0.5％氢化可的松0.05ml/10g，连续7日^[4，6]。

2.观测指标及方法

末次给药后30min，测定小鼠体重、体温以及游泳存活时间(水温：26±1℃)，结果进行组间t检验。

3.实验结果

小鼠造模后其体重增加率明显降低，体温下降，游泳时间缩短，模型组体重增加率、体温以及游泳时间与空白对照组比较具有显著性差异(p＜0.01)。缩泉丸组以及本发明三个剂量组小鼠体重增长率以及体温明显回升，本发明大剂量组小鼠游泳时间明显回升，与模型组比较有显著性差异(p＜0.05，p＜0.01)。显示本发明对氢化可的松致肾阳虚小鼠体重及体温下降、游泳时间缩短有明显的抵抗作用。结果见表8。

表8本发明对肾阳虚小鼠体重增长率、体温、游泳时间的影响( X±S)

             剂量      动物数      体重增长率      体温          游泳时间

组别

             (g/kg)    (只)        (％)            (℃)          (min)

空白

              -        15          23.52±7.25      36.7±0.4    15.92±3.43

对照组

                                                    36.1±0.5^□

模型组       -         12          3.14±6.28^{□□    □}                      6.70±2.59^□□

缩泉丸组     6.0       15          16.99±8.82^**   36.6±0.3^** 6.35±2.39

本发明

             1.2       13          16.46±8.70^**   36.6±0.5^*  6.94±2.15

小剂量组

本发明

             2.4       13          19.29±10.66^**  36.6±0.6^*  7.56±2.32

中剂量组

本发明

             4.8       13          18.36±10.17^**  36.9±0.6^** 9.92±3.54^*

大剂量组

□□p＜0.01，与空白对照组比较；^*p＜0.05，^**p＜0.01，与模型组比较。

注：造模过程中部分动物死亡，样本数目有所减少。

对氢化可的松所致肾阳虚小鼠模型碳粒廓清率的影响

1.造模方法及分组给药

ICR小鼠90只，18～22g，雄性。随机分为6组，每组15只。分别为(1)空白对照组：生理盐水20ml/kg；(2)模型组：生理盐水20ml/kg；(3)缩泉丸组：6.0g/kg；(4)本发明小剂量组：1.2g(生药量)/kg；(5)本发明中剂量组：2.4g(生药量)/kg；(6)本发明大剂量组：4.8g(生药量)/kg。各组按20ml/kg每日灌胃给药1次，连续给7日。给药第1日开始，空白对照组每日皮下注射灭菌生理盐水0.05ml/10g，其余各组皮下注射0.5％氢化可的松0.05ml/10g，连续7日^{[4，7， 8]}。2.观测指标及方法

末次给药后30min，尾静脉注射25％的印度墨汁0.1ml/10g，于2min和10min分别眼眶取血20μl，加入盛有2ml的碳酸钠溶液(浓度1mg/ml)试管中，在680nm出测吸光度值OD_2min和OD_10min，将采完血液的小鼠处死，取肝、脾脏称重。按下列公式计算廓清指数k及吞噬指数a。结果进行组间t检验。

$K=\frac{{\log \mathrm{OD}}_{2\min }-{\log \mathrm{OD}}_{10\min }}{T_{10}-t_2}$

3.实验结果

造模后小鼠碳粒廓清指数及吞噬指数明显下降，模型组与空白对照组比较有显著性差异(p＜0.01)，表明造模后小鼠单核巨噬细胞的吞噬功能减弱；缩泉丸组以及本发明三个剂量组的碳率廓清指数及吞噬指数，本发明三个剂量组吞噬指数明显回升，与模型组比较有显著性差异(p＜0.05，p＜0.01)。表明本发明对氢可致肾阳虚小鼠单核巨噬细胞的吞噬功能低下有一定的增强作用。见表9。

        表9本发明对肾阳虚小鼠碳粒廓清率的影响( X±S)

             剂量        动物数

组别

                                        廓清指数k       吞噬指数a

             (g/kg)      (只)

空白对照组   -           15             0.038±0.009     6.093±0.836

模型组       -           13             0.024±0.011^□□ 4.859±1.379^□□

缩泉丸组     6.0         14             0.034±0.008^*   5.362±0.642

本发明

             1.2         15             0.034±0.008^**  6.056±1.119^*

小剂量组

本发明

             2.4         14             0.036±0.010^**  5.908±0.705^*

中剂量组

本发明

             4.8         15             0.038±0.011^**  6.350±1.788^*

大剂量组

p＜0.01，与空白对照组比较；^*p＜0.05，^**p＜0.01与模型组比较。

注：造模过程中部分动物死亡，样本数目有所减少。

对氢化可的松所致肾阳虚小鼠模型血清溶血素的影响

1.造模方法及分组给药

ICR小鼠90只，18～22g，雄性。随机分为6组，每组15只。分别为(1)空白对照组：生理盐水20ml/kg；(2)模型组：生理盐水20ml/kg；(3)缩泉丸组：6.0g/kg；(4)本发明小剂量组：1.2g(生药量)/kg；(5)本发明中剂量组：2.4g(生药量)/kg；(6)本发明大剂量组：4.8g(生药量)/kg。各组按20ml/kg每日灌胃给药1次，连续给12日。给药第1日开始，空白对照组每日皮下注射灭菌生理盐水0.05ml/10g，其余各组皮下注射0.5％氢化可的松0.05ml/10g，连续7日。第8日腹腔注射20％绵羊红细胞(SRBC)0.2ml/只，连续4日^[1，7，9]。

2.观测指标及方法

末次灌胃给药后30min，小鼠眼眶取血，分离血清50μl，用生理盐水稀释500倍。取稀释血清1ml，加入5％绵羊红细胞0.5ml以及10％补体(新鲜豚鼠混合血清经SRBC＜10∶1＞于4℃吸收30min后置于-20℃备用)1ml，混匀后置于37℃恒温水浴中30min，然后移至冰浴中终止反应。1500rpm离心5min，取上清液加都氏试剂(碳酸氢钠1.0g、高铁氰化钾0.2g、氰化钾0.05g加入蒸馏水1000ml)3ml，放置10min后，于540nm处测吸收度值，以下列公式计算各管半数溶血值。

SRBC半数溶血时的吸收度值：取5％SRBC0.25ml加都氏液至4ml，比色读取吸收光度值。结果进行组间t检验。

3.实验结果

造模后小鼠半数溶血值下降，模型组与空白对照组比较有显著性差异(p＜0.01)，表明小鼠经氢可造模后血清血溶素水平明显下降；缩泉丸以及本发明小剂量组半数溶血值明显回升，与模型组比较有显著性差异(p＜0.01)。表明小剂量本发明对氢可致肾阳虚小鼠血清血溶素水平下降有一定的治疗作用。见表10。

   表10本发明对肾阳虚小鼠血清血溶素水平的影响( X±S)

             剂量          动物数

组别

                                          半数溶血值(HC₅₀)

             (g/kg)        (只)

空白对照组     -           15             456.01±20.06

模型组         -           14             435.73±6.56^□□

缩泉丸组      6.0          14             457.20±18.29^**

本发明

              1.2          15             451.31±13.34^**

小剂量组

本发明

              2.4          15             441.08±10.30

中剂量组

本发明

                4.8      14       431.77±10.95

大剂量组

^□□p＜0.01，与空白对照组比较：^**p＜0.01，与模型组比较。

注：造模过程中部分动物死亡及样本被破坏，样本数目有所减少。

本发明对小鼠协同戊巴比妥钠催眠作用的影响

1.造模方法及分组给药

ICR小鼠60只，雌雄各半，取10只预试验备用。50只随机分为5组。(1)空白对照组：生理盐水20ml/kg；(2)安定组：0.01g/kg；(3)本发明小剂量组：1.2g(生药量)/kg；(4)本发明中剂量组：2.4g(生药量)/kg；(5)本发明大剂量组：4.8g(生药量)/kg。空白对照组与本发明三个剂量组分别灌胃给予生理盐水和药物20ml/kg，连续7日。安定组最后一次给药^[3，4]。

2.观测指标及方法

最后一日给药前，取未处理的10只小鼠进行预试验，摸出戊巴比妥钠阈剂量，即使小鼠能够100％入睡的剂量，以翻正反射消失为入睡时间，从翻正反射消失至恢复时间为睡眠时间。然后开始给药，给药后30min，腹腔注射阈剂量戊巴比妥钠(90mg/kg)。观察记录每只小鼠睡眠时间。结果进行t检验。

3.实验结果

实验结果显示，安定组以及本发明三个剂量组能明显延长小鼠睡眠时间，与空白对照组比较具有显著性差异(p＜0.05，p＜0.01)。且本发明各组随剂量加大小鼠睡眠时间延长。表明本发明具有延长小鼠戊巴比妥钠阈剂量睡眠时间的作用，显示本发明有较好的镇静催眠作用。结果见表11。

       表11本发明对小鼠睡眠时间的影响( X±S)

              剂量        动物数        睡眠时间

组别

              (g/kg)      (只)          (min)

空白对照组     -          10            19.85±3.53

安定组         0.01       10            30.19±5.75^**

本发明

               1.2        10            23.03±2.67^*

小剂量组

本发明

               2.4        10            24.90±3.11^**

中剂量组

本发明

               4.8        10            24.93±3.56^**

大剂量组

^*p＜0.05，^**p＜0.01，与空白对照组比较。

1.本发明对水负荷大鼠尿量的影响实验结果显示，给药后0～1h、1～2h本发明0.6、1.2、2.4g(生药量)/kg三个剂量组大鼠的尿量明显减少，尿排出率降低，空白对照组比较具有显著性差异(p＜0.01，p＜0.05)。表明本发明对给予水负荷的大鼠具有明显的抗利尿作用。

2.本发明对氢可致肾阳虚大鼠的影响实验结果显示，本发明0.6、1.2、2.4g(生药量)/kg三个剂量组能拮抗氢化可的松引起的肾阳虚大鼠体重下降，与模型组比较具有显著性差异(p＜0.05)。本发明能明显拮抗氢可致肾阳虚大鼠尿量增多的症状，本发明小剂量组药后0～1h、本发明中剂量组药后0～1h、1～2h、2～4h、大剂量组药后0～1h、1～2h尿量与模型组比较有显著性差异(p＜0.05，0.01)。生化指标检测显示，大鼠造模后总蛋白(TP)水平下降，其模型组总蛋白(TP)指标与空白对照组比较有显著性差异(p＜0.01)，而缩泉丸、本发明小、大剂量组与模型组相比较总蛋白(TP)水平略有回升，但无显著性差异；大鼠造模后甘油三酯(TG)、乳酸脱氢酶(LDH)、尿素(Urea)、肌酐(Crea)水平上升，其中本发明小剂量组Urea，中剂量组LDH，大剂量组LDH、Urea水平降低，且与模型组相比较有显著性差异(p＜0.05，p＜0.01)。结果提示，大鼠造模后，可能出现一定的代谢紊乱情况。经本发明灌服后，乳酸脱氢酶、尿素水平显著下降。本发明对此现象有一定的改善。有关脏器系数结果显示，本发明小剂量组胸腺、睾丸及附睾脏器系数增加，本发明中、大剂量组胸腺、肾上腺、前列腺及精囊腺、睾丸及附睾脏器系数增加，且与模型组比较有显著性差异(p＜0.05，p＜0.01)。表明本发明对肾阳虚大鼠胸腺、肾上腺、前列腺及精囊腺、睾丸及附睾等脏器萎缩有一定的抵抗作用。

3.本发明对氢可致肾阳虚小鼠耐缺氧作用的实验结果显示，小鼠造模后其常压缺氧存活时间明显缩短，模型组常压缺氧存活时间与空白对照组比较具有显著性差异(p＜0.01)。本发明1.2、2.4、4.8g(生药量)/kg三个剂量组能明显延长小鼠常压缺氧存活时间，与模型组比较有显著性差异(p＜0.01，p＜0.05)。显示本发明具有延长肾阳虚小鼠常压缺氧存活时间的作用。

4.本发明对氢可致肾阳虚小鼠耐寒作用的影响实验结果显示，小鼠造模后其耐寒能力明显下降，模型组小鼠死亡数明显增多，与空白对照组比较具有显著性差异(p＜0.01)。缩泉丸组以及本发明1.2、2.4、4.8g(生药量)/kg三个剂量组能不同程度降低模型死亡率，其中本发明大剂量组与模型组比较有显著性差异(p＜0.05)。显示本发明对氢化可的松致肾阳虚小鼠耐寒能力有一定的增强作用。

5.本发明对氢可致肾阳虚小鼠体重、体温及游泳时间的影响实验结果显示，小鼠造模后其体重增加率明显降低，体温下降，游泳时间缩短，模型组体重增加率、体温以及游泳时间与空白对照组比较具有显著性差异(p＜0.01)。本发明1.2、2.4、4.8g(生药量)/kg三个剂量组小鼠体重增长率以及体温明显回升，本发明大剂量组小鼠游泳时间明显回升，与模型组比较有显著性差异(p＜0.05，p＜0.01)。显示本发明对氢可致肾阳虚小鼠体重及体温下降、游泳时间缩短有一定的抵抗作用。

6.本发明对氢化可的松所致肾阳虚小鼠模型碳粒廓清率的影响实验结果显示，造模后小鼠碳粒廓清指数及吞噬指数明显下降，模型组与空白对照组比较有显著性差异(p＜0.01)，表明造模后小鼠单核巨噬细胞的吞噬功能减弱；缩泉丸组以及本发明小、大剂量组的碳率廓清指数及吞噬指数，本发明中剂量组吞噬指数明显回升，与模型组比较有显著性差异(p＜0.05，p＜0.01)。表明本发明对氢可致肾阳虚小鼠单核巨噬细胞的吞噬功能低下有一定的增强作用。

7.本发明对氢化可的松所致肾阳虚小鼠模型血清溶血素的影响实验结果显示，造模后小鼠半数溶血值下降，模型组与空白对照组比较有显著性差异(p＜0.01)，表明小鼠经氢可造模后血清血溶素水平明显下降；缩泉丸以及本发明小剂量组半数溶血值明显回升，与模型组比较有显著性差异(p＜0.01)。表明小剂量本发明对氢可致肾阳虚小鼠血清血溶素水平下降有一定的治疗作用。

8.本发明对小鼠协同戊巴比妥钠催眠作用的影响实验结果显示，本发明1.2、2.4、4.8g(生药量)/kg三个剂量组能明显延长小鼠睡眠持续时间，与空白对照组比较具有显著性差异(p＜0.05，p＜0.01)。且本发明各组随剂量加大小鼠睡眠时间延长。表明本发明具有延长小鼠戊巴比妥钠阈剂量睡眠时间的作用，显示本发明有较好的镇静催眠作用。

                   具体实施方式

下面的实施例可以使本专业技术人员更全面地理解本发明，但不以任何方式限制本发明。

1、一种治疗尿失禁的药物，它是由以下原料制成的：

桑螵蛸300  龙骨370  人参309  茯神320

石菖蒲350  远志400  龟板380  当归375

人参、远志加60％乙醇加热回流二次，第一次2小时，第二次1小时，滤过，合并滤液，-0.09～-0.06Mpa和70℃条件下减压回收乙醇，并在50℃的温度下浓缩至相对密度为1.10的清膏，备用。

当归、石菖蒲提取挥发油，所得挥发油另器存放，用β-环糊精包合，备用；残留水液滤过，滤液在50℃的温度下浓缩至相对密度为1.20的清膏，备用。

当归、石菖蒲残留水液滤过后的药渣与桑螵蛸、龙骨、茯神、龟板四味药，加水煎煮二次，第一次2小时，第二次1小时，合并煎液，滤过，滤液放冷至60℃，边搅拌边加入0.1％壳聚糖澄清试剂，搅匀，静置24小时，取上清液，并在50℃的温度下浓缩至相对密度为1.15的清膏。

将上述三种清膏合并，喷雾干燥，再与挥发油包合物混匀，加入5倍量辅料，制粒，整粒，包装，即得颗粒剂。

2、一种治疗尿失禁的药物，它是由以下原料制成的：

桑螵蛸375  龙骨400  人参320  茯神350

石菖蒲335  远志375  龟板380  当归365

制成1000粒

人参、远志加60％乙醇加热回流二次，第一次2小时，第二次1小时，滤过，合并滤液，-0.09～-0.06Mpa和60℃条件下减压回收乙醇，并在50℃的温度下浓缩至相对密度为1.20的清膏，备用。

当归、石菖蒲提取挥发油，所得挥发油另器存放，用β-环糊精包合，备用；残留水液滤过，滤液在50℃的温度下浓缩至相对密度为1.15的清膏，备用。

当归、石菖蒲残留水液滤过后的药渣与桑螵蛸、龙骨、茯神、龟板四味药，加水煎煮二次，第一次2小时，第二次1小时，合并煎液，滤过，滤液放冷至60℃，边搅拌边加入0.1％壳聚糖澄清试剂，搅匀，静置24小时，取上清液，并在50℃的温度下浓缩至相对密度为1.20的清膏。

将上述三种清膏合并，喷雾干燥，再与挥发油包合物混匀，加入1倍量辅料，制粒，整粒，将颗粒装入胶囊得胶囊剂。

3、一种治疗尿失禁的药物，它是由以下原料制成的：

桑螵蛸375g  龙骨375g  人参375g  茯神375g

石菖蒲375g  远志375g  龟板375g  当归375g

制成1000粒

人参、远志加60％乙醇加热回流二次，第一次2小时，第二次1小时，滤过，合并滤液，-0.09～-0.06Mpa和80℃条件下减压回收乙醇，并在50℃的温度下浓缩至相对密度为1.15的清膏，备用。

当归、石菖蒲提取挥发油，所得挥发油另器存放，用β-环糊精包合，备用；残留水液滤过，滤液在50℃的温度下浓缩至相对密度为1.10的清膏，备用。

当归、石菖蒲残留水液滤过后的药渣与桑螵蛸、龙骨、茯神、龟板四味药，加水煎煮二次，第一次2小时，第二次1小时，合并煎液，滤过，滤液放冷至60℃，边搅拌边加入0.1％壳聚糖澄清试剂，搅匀，静置24小时，取上清液，并在50℃的温度下浓缩至相对密度为1.20的清膏。

将上述三种清膏合并，喷雾干燥，再与挥发油包合物混匀，加入2倍量辅料，制粒，将颗粒压制成片，包衣，即得片剂。

Claims (5)

1.一种治疗尿失禁的药物，其特征在于它是由下述重量(份)配比的原料制成的：

桑螵蛸300～400    龙骨300～400    人参300～400    茯神300～400

石菖蒲300～400    远志300～400    龟板300～400    当归300～400

2.据权利要求1所述的治疗尿失禁的药物，其特征在于其中各原料的重量配比是：

桑螵蛸375g    龙骨375g    人参375g    茯神375g

石菖蒲375g    远志375g    龟板375g    当归375g

3.据权利要求1或2所述的治疗尿失禁的药物，其特征在于本发明所述的药物剂型为药剂学所述的任何剂型。

4.据权利要求3所述的治疗尿失禁的药物，其特征在于本发明所说的药剂是口服制剂。

5.权利要求3所述的治疗尿失禁的药物制剂的生产方法是：

人参、远志加60％乙醇加热回流二次，第一次2小时，第二次1小时，滤过，合并滤液，-0.09～-0.06Mpa和60～80℃条件下减压回收乙醇，并在50℃的温度下浓缩至相对密度为1.10～1.20的清膏，备用。

当归、石菖蒲提取挥发油，所得挥发油另器存放，用β-环糊精包合，备用；残留水液滤过，滤液在50℃的温度下浓缩至相对密度为1.10～1.20的清膏，备用。

当归、石菖蒲残留水液滤过后的药渣与桑螵蛸、龙骨、茯神、龟板四味药，加水煎煮二次，第一次2小时，第二次1小时，合并煎液，滤过，滤液放冷至60℃，边搅拌边加入0.1％壳聚糖澄清试剂，搅匀，静置24小时，取上清液，并在50℃的温度下浓缩至相对密度为1.10～1.20的清膏。

将上述三种清膏合并，喷雾干燥，再与挥发油包合物混匀，加入0.5～5倍量辅料，混匀，制成临床上可接受的剂型。