CN1542141A - 用于检测和鉴定分枝杆菌的寡聚核苷酸 - Google Patents
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Abstract
本发明是用于检测和鉴定分枝杆菌的寡聚核苷酸。更具体地说,是用来鉴定非结核分枝杆菌的ITS(内转录间隔区)的核苷酸序列,这些非结核分枝杆菌包括:偶发分枝杆菌,龟分枝杆菌,脓肿分枝杆菌,牝牛分枝杆菌,变黄分枝杆菌,亚洲分枝杆菌,猪分枝杆菌,阿加普尔分枝杆菌和迪氏分枝杆菌。通过这些分枝杆菌的寡聚核苷酸引物或探针。本发明的寡聚核苷酸探针(结合到固相基质中),它们只能与特异的分枝杆菌中的ITS核苷酸序列进行杂交,因此它们能敏感地检测和鉴定特异的分枝杆菌。通过PCR放大,与上述探针有相同核苷酸序列的寡聚核苷酸引物也能检测和鉴定特异的分枝杆菌。应用这些依据分枝杆菌ITS制备的寡聚核苷酸引物或探针,便能够准确而有效地检测分枝杆菌,鉴别结核菌与NTM,和鉴定分枝杆菌的种类。
Description
本申请是中国专利申请第00808201.4号的分案申请,第00808201.4号的专利申请其申请日是2000年5月16日,发明名称是用于检测和鉴定分枝杆菌的寡聚核苷酸。
技术领域
本发明所涉及的是用于检测和鉴定分枝杆菌的寡聚核苷酸。更具体地说,本发明用来鉴定非结核分枝杆菌的ITS(Internal Transcribed SpacerRegion,内转录间隔区)的核苷酸序列,这些非结核分枝杆菌包括:偶发分枝杆菌(Mycobacterium fortuitum),龟分枝杆菌(Mycobacteriumchelonae),脓肿分枝杆菌(Mycobacterium abscessus),牝牛分枝杆菌(Mycobacterium vaccae),变黄分枝杆菌(Mycobacterium flavescens),亚洲分枝杆菌(Mycobacterium asiaticum),猪分枝杆菌(Mycobacteriumporcinum),阿加普尔分枝杆菌(Mycobacterium acapulcensis)和迪氏分枝杆菌(Mycobacterium diernhoferi)。通过这些分枝杆菌的寡聚核苷酸引物或探针。
背景技术
尽管结核病人数近年来稳步地减少,但每年仍有约8,000,000人患结核病,且有3,000,000患者死亡。在不发达国家,由于不适当的治疗和缺少用于治疗结核病的药物,使患耐药菌的慢性病人数增加。在20世纪80年代,甚至在发达国家,由于爱滋病的传播,也使患结核病的人数增加。因此在这种情况下,可以预测,在2001年将会有约12,000,000新结核病患者出现(《结核与肺病》J.P.Natain,M.C.Raviglione,和A.Kochi,73:311-321,1992;《全球疾病负担》《全球疾病与损伤的负担系列从书》第一卷,Murray CJL.和Lopez AD著,剑桥,马萨诸塞,哈佛大学出版社,1996,P349-350;《世界结核病计划:抗结核病药物的耐药性》世界卫生组织1997年报告)。
在20世纪50年代曾报道非结核病分枝杆菌(NTM)能使人致病。在1980年又有报道,鸟分枝杆菌(MAC)能引起爱滋病患者全身性疾病,从此,非结核分枝杆菌引起了人们的关注。非结核分枝杆菌所引起的疾病在临床症状和体症以及一般病理方面与结核病相似。非结核分枝杆菌广泛地分布于有生命的环境中,而且在临床实验样本中很难判断它们是否能致病。由于它们对于很多抗结核的药物具有耐药性,它们所引起的感染病很难治愈,复发率也高。非结核分枝杆菌所引起传染病应该用不同于结核病的方法治疗。因此需要建立准确而快速的检测和鉴定非结核分枝杆菌的方法。同时也需要建立准确而快速的检测和鉴别结核菌(TBcomplex)和NTM的方法以便于结核病的有效治疗。
到目前为止,已有很多用于诊断分枝杆菌感染和用于检测、鉴定分枝杆菌菌株的方法。其中,下面的方法目前仍在应用:
第一为微生物学方法,也就是,涂片、染色和培养试验。然而,这种方法不适于分枝杆菌,因为它们的繁殖周期长又需要很长的培养时间。象分枝杆菌这样的致病菌也能传染给培养室内的工作人员。
第二为PCR(聚合酶链式反应)方法。这种方法不仅对分枝杆菌有高敏感性和特异性,而且非常适用于需要长时间培养的分枝杆菌。特别是,这种方法不需要培养过程,但需要能用于放大的小量DNA,因此,只需要实验样品中的小量病原体DNA就足以检测和鉴定分枝杆菌。很多PCR实验需要彼此不同的靶DNA引导。IS6110和16S rRNA经常用作靶DNA(《spoligotyping(字典未收录)的用途,用于鉴别IS6110低拷贝量的结核分枝杆菌(丹麦培养)》Bauer J,Andersen AB,Kremer K和Miorner H,1999,《临床微生物学杂志》37:2602-2606;《以高密度DNA探针系列鉴定分枝杆菌和实验利福平抗药性》Troesch,A.,H.Nguyen,C.G.Miyada,S.Desvarenne,T.R.Gingeras,P.M.Kaplan,P.Cros and C.Mabilat,1999《临床微生物学杂志》37:49-55);
第三为物理化学方法。在实验中用HPLC(高效液相色谱),GC(气相色谱)或质谱来检测分枝杆菌的脂类成分。这种方法特异性好,但需要昂贵的设备。
第四为用血清学方法检测分枝杆菌成份。这种方法是基于带有抗体的胶乳颗粒或血细胞与分枝杆菌抗原的凝固反应或酶与抗体相连的酶联免疫反映。但这种方法只是在有限的位置上高度敏感,且很难区别是以前感染还是现在感染。
下一个检测分枝杆菌的方法是用插入了荧光素酶基因的分枝杆菌噬菌体L5感染分枝杆菌,然后检查介质中的荧光素所引起的发光现象(W.R.Jacobs,R.G.Barletta,R.Udani,J.Chan,G·Kalkut,G.Sosne,T.Kieser,G.J.Sarkis,G.F.Hatful,and B.R.Bloom.1993,《科学260》:819-822)
最后一个方法为通过寡聚核苷酸杂交来检测和鉴定分枝杆菌(A.Troesch,H.Nguyen,C.G.Miyada,S.Desvarenne,T.R.Gingeras,P.M.Kaplan,P·Cros和C.Mabilat.1999《临床微生物学杂志》37:49-55
除了上面提到的鸟分枝杆菌(MAC)外,偶发分枝杆菌,龟分枝杆菌,地分枝杆菌和牝牛分枝杆菌也称作非结核分枝杆菌。其中,龟分枝杆菌又分成龟分枝杆菌和脓肿分枝杆菌,目前还没有区分它们的方法。
发明内容
本发明的目的是为了解决上述分枝杆菌检测和鉴定方法中存在的问题,本发明意在提供作为PCR引物或探针的特异寡聚核苷酸。这些寡聚核苷酸用于检测分枝杆菌,鉴别结核菌(TB complex)和NTM以及准确而有效地鉴定分枝杆菌的种类。
为此本发明提供了一些分枝杆菌基因ITS(内转录间隔区)的DNA,列于SEQ ID NOs(序列辨认号码):1至9中。这些分枝杆菌包括,偶发分枝杆菌,龟分枝杆菌,脓肿分枝杆菌,牝牛分枝杆菌,变黄分枝杆菌,亚洲分枝杆菌,猪分枝杆菌,阿加普尔分枝杆菌和迪氏分枝杆菌。
本发明还提供了作为PCR引物或杂交探针的寡聚核苷酸,用来检测分枝杆菌的,列于SEQ ID NOs:10至14中;
用来鉴别结核菌和分枝杆菌中的NTB的,列于SEQ ID NOs:15至23中;
用于检测和鉴定MAC(鸟分枝杆菌)和胞内分枝杆菌的列于SEQ IDNOs:24至27中;
用于检测和鉴定偶发分枝杆菌的,列于SEQ ID NOs:28至38中;
用于检测和鉴定龟分枝杆菌的,列于SEQ ID NOs:39至46中;
用于检测和鉴定脓肿分枝杆菌的,列于SEQ ID NOs:47至52中;
用于检测和鉴定牝牛分枝杆菌的,列于SEQ ID NOs:53至64中;
用于检测和鉴定变黄分枝杆菌的,列于SEQ ID NOs:65至72中;
用于检测和鉴定戈氏分枝杆菌的,列于SEQ ID NOs:73至77中;
用于检测和鉴定地分枝杆菌的,列于SEQ ID NOs:78至100中;
用于检测和鉴定瘰疬分枝杆菌的,列于SEQ ID NOs:101至108中;
用于检测和鉴定堪萨斯分枝杆菌的,列于SEQ ID NOs:109至112中;
用于检测和鉴定斯氏分枝杆菌的,列于SEQ ID NOs:113至116中;
用于检测和鉴定海分枝杆菌和溃疡分枝杆菌的,列于SEQ ID NOs:117至119中:
用于检测和鉴定胃分枝杆菌的,列于SEQ ID NOs:120至123中;
用于检测和鉴定蟾分枝杆菌的,列于SEQ ID NOs:124至133中;
用于检测和鉴定日内瓦分枝杆菌的,列于SEQ ID NOs:134至141中;
用于检测和鉴定玛尔摩分枝杆菌的,列于SEO ID NOs:142至146中
用于检测和鉴定猿分枝杆菌的,列于SEQ ID NOs:147至153中;
用于检测和鉴定耻垢分枝杆菌的,列于SEQ ID NOs:154至165中;
用于检测和鉴定石氏分枝杆菌的,列于SEQ ID NOs:166至172中;
用于检测和鉴定哈瓦那分枝杆菌的,列于SEQ ID NOs:173至180中;
用于检测和鉴定鼻疽分枝杆菌的,列于SEQ ID NOs:181至189中;
用于检测和鉴定亚洲分枝杆菌的,列于SEQ ID NOs:190至193中;
用于检测和鉴定猪分枝杆菌的,列于SEO ID NOs:194至205中;
用于检测和鉴定阿加普尔分枝杆菌的,列于SEO ID NOs:206至215中;
用于检测和鉴定迪氏分枝杆菌的,列于SEQ ID NOs:216至227中;
用于检测和鉴定副结核分枝杆菌的,列于SEQ ID NOs:228至240种;
最后,用于检测酒精分枝杆菌的,列于SEQ ID NO:241
以往用PCR检测和鉴定分枝杆菌的方法,只能检测一或二个菌种。而本发明能检测和鉴定几乎所有的分枝杆菌,这是由于本发明的引物和探针是根据分枝杆菌的ITS的DNA序列设计的。ITS比16S rRNA有更多的多态区而且ITS也有保守区,因此作为一种靶DNA,它(ITS)能非常有效地鉴别基因型(Gurtler,V.,和V.A.Stanisich,1996,《一种用16S-23SrDNA间隔区分类和鉴定细菌的新方法》《微生物》142:3-16)
发明者对一些还没有对DNA测序的非结核分枝杆菌的ITS DNA序列进行测定,这些非结核分枝杆菌包括象偶发分枝杆菌,龟分枝杆菌,脓肿分枝杆菌,牝牛分枝杆菌,变黄分枝杆菌,亚洲分枝杆菌,猪分枝杆菌,阿家谱尔分枝杆菌和迪氏分枝杆菌。通过这些DNA序列设计引物或探针的寡聚核苷酸以检测和鉴定分枝杆菌。并且进一步参考基因库中的另一些分枝杆菌的DNA序列,并通过多序列对比和未成熟细胞检查(Multialignment and Blast)分析这些DNA序列,从而选择有特色的多态区,来设计用于检测和鉴定分枝杆菌的引物和探针的寡聚核苷酸。最后通过种特异性和属特异性PCR引物放大和特异杂交实验确证这些寡聚核苷酸对分枝杆菌的检测和鉴定效果。
也就是说,本发明的寡聚核苷酸探针(结合到固相基质中),它们只能与特异的分枝杆菌中的ITS核苷酸序列进行杂交,因此它们能敏感地检测和鉴定特异的分枝杆菌。通过PCR放大,与上述探针有相同核苷酸序列的寡聚核苷酸引物也能检测和鉴定特异的分枝杆菌。应用这些依据分枝杆菌ITS制备的寡聚核苷酸引物或探针,便能够准确而有效地检测分枝杆菌,鉴别结核菌与NTM,和鉴定分枝杆菌的种类。
附图说明
关于本发明的上述和其他方面的目的、其特点和优势是明显的,这可从下列的较实例和附图中得到详细阐述,其中,
图1为图解,图中为分枝杆菌ITS和通过PCR放大ITS的引物;
图2为PCR后的电泳结果照片,PCR用了几个分枝杆菌种株和一对用于ITS放大的引物,包括分枝杆菌中16SrRNA和23SrRNA的一部分;
图3为PCR后的电泳结果照片,PCR用了几个分枝杆菌种株和用于检测分枝杆菌的一对引物(ITSF和MYC2);
图4为多重PCR图解,多重PCR用于检测分枝杆菌,同时鉴别结核菌与NTM;
图5为多重PCR后的电泳结果照片,多重PCR采用了一对检测分枝杆菌的引物(ITS和MYC2)以及一对鉴别结合菌和NTM的引物(MTB2和MYC2);
图6为PCR后的电泳结果照片,PCR用了每一种分枝杆菌和每一对种特异性引物,这些引物是依据每一种NTM的多态区核苷酸序列设计的。
图7为PCR后的电泳结果照片,PCR用了几种分枝杆菌和一对种特异性引物,这些引物是根据每种NTM的多态区核苷酸序列设计的。
具体实施方式
下面将通过实施例介绍本发明的一些较好的例子和其参考附图。例1.分枝杆菌培养和基因组DNA分离
分枝杆菌标准菌种来源于KCTC(韩国模式菌种收藏)和ATCC(美国模式菌种收藏),临床菌种来源于韩国国家结核协会,国家Masan结核病医院以及Pusan国立大学医院的临床微生物学专家管理菌种的储藏和培养。例中所用的分枝杆菌和病原体列于表8中。
分枝杆菌DNA的提取过程如下:以Ogawa培养基培养分枝杆菌。然后将一铂环培养后的菌种置于微量离心管中,并与200μl的InstaGene基质(Bio-Rad Co.)混合,56℃孵育30分。再经过10分钟的涡流混合,混合物放于100℃,8分钟。再经过10分钟涡流混合后,将混合物于12,000rPM离心3分钟。取其上清放于另一试管中,并放于-20℃保存。在下面的PCR中,将用每个菌种的DNA溶液2μl。
例2.放大分枝杆菌ITS制造引物
分枝杆菌ITS及通过PCR放大ITS所用的引物列于图1中。依据分枝杆菌16SrRNA和23SrRNA保守区的几个片断来构建用于放大分枝杆菌ITS地引物。并通过多序列对比和未成熟细胞检查分析基因库分枝杆菌16SrRNA和23SrRNA的DNA序列。然后,通过16SrRNA和23SrRNA的一部分DNA设计引物,从而能选择性地放大约500bp的ITS区,这些引物的DNA序列列于SEQ ID NOs:242(IT SF)和243(ITSR)中。本例中所用的所有引物是通过Derkin-Elmer DNA合成仪(BioBasic,加拿大)制备,浓度达50nmol。
例3.PCR和产品鉴定
在PCR中使用例1中的2μl DNA溶液。反应液包括:500mM KCl,100mM Tris HCl(pH9.0),1%Triton X-100,0.2mM dNTP(dATP,dGTP,dTTP和dCTP),1.5mM MgCl2,1pmol引物,1μTag DNA聚合酶(Bio BasicInc.)。94℃变性5分钟后,溶液在94℃变性1分钟,60℃退火1分钟和72℃延长1分钟条件下循环30次。再进一步72℃延长10分钟,确保延长结束。反应完毕后,通过1.5%琼脂糖凝胶电泳鉴定PCR产物。象从GenBank(基因库)资料所预测的那样,通过16S rRNA和23S rRNA的保守区所制备的引物所放大的ITS为约500bP。
图2是PCR后的电泳结果照片。PCR采用了几个分枝杆菌种株和一对ITS放大引物,包括分枝杆菌16S rRNA和23S rRNA的一部分。图中,M是分子量标准,间隔100bP,C为对照组,泳道1至9分别是偶发分枝杆菌、龟分枝杆菌、胞内分枝杆菌、鸟分枝杆菌、结核分枝杆菌、田野分枝杆菌、堪萨斯分枝杆菌、戈氏分枝杆菌和结核分枝杆菌H37Rv。可以看到除对照C外,泳道1至9的所有分枝杆菌皆有ITS基因放大现象。
例4.分枝杆菌ITS DNA序列测定
PCR产品鉴定后,分枝杆菌(其ITS的DNA没有测序)反应物将通过PCR放大,这些分枝杆菌包括:偶发分枝杆菌、龟分枝杆菌、脓性分枝杆菌、牝牛分枝杆菌、变黄分枝杆菌、亚洲分枝杆菌、猪分枝杆菌、阿加普尔分枝杆菌和迪氏分枝杆菌。PCR产品则直接用于测定ITS的DNA序列。
DNA的测定浓度为200μmol。DNA序列测定采用染料终止法,同时应用通用引物M13和DNA自动测序仪(Perkin-Elmer,ABI prim 377sequencer)。
序列鉴别号码(SEQ ID Nos)1至9分别指下列分枝杆菌ITS的DNA序列:偶发分枝杆菌、龟分枝杆菌、脓肿分枝杆菌、牝牛分枝杆菌、变黄分枝杆菌、亚洲分枝杆菌、猪分枝杆菌、阿加普尔分枝杆菌和迪氏分枝杆菌。
例5.寡聚核苷酸引物的设计及合成
每一个引物,大约20bp,依据例4中分枝杆菌的ITS的DNA序列设计,这些分枝杆菌包括:偶发分枝杆菌、龟分枝杆菌、脓肿分枝杆菌、牝牛分枝杆菌、变黄分枝杆菌、亚洲分枝杆菌、猪分枝杆菌、阿加普尔分枝杆菌和迪氏分枝杆菌。并且通过多序列对比和未成熟细胞检查,比GenBank(基因库)的其它分枝杆菌ITS的DNA序列比较。
根据需要,分枝杆菌ITS保守区DNA序列设计成检测分枝杆菌的引物或探针,而高多态区的DNA序列则设计成种特异性的引物或探针。表1至7描述了所设计的引物或探针以及它们的位置和序列鉴别号码。
表1
菌 种 | 探针名称 | ITS中的位置 | 序列鉴别号码 |
分枝杆菌 | MYC1MYC2MYC3MYC4MYC5 | (随菌种而不同) | 1011121314 |
结核菌 | MTB1MTB2MTB3MTB4MTB5MTB6MTB7MTB8MTB9 | 166-18565-8420-3941-6060-7981-100125-144139-158203-222 | 151617181920212223 |
鸟分枝杆菌一胞内分枝杆菌 | MAC1MAC2MAC3MAC4 | 241-260142-16192-111117-136 | 24252627 |
偶发分枝杆菌 | FOR1FOR2FOR3FOR4FOR5FOR6FOR7FOR8FOR9FOR10FOR11 | 40-5944-6364-8378-9789-108109-128114-133134-153157-176246-265289-308 | 2829303132333435363738 |
龟分枝杆菌 | CHE1CHE2CHE3CHE4CHE5CHE6CHE7CHE8 | 11-3029-4858-7778-97109-128132-151171-190246-265 | 3940414243444546 |
表2
菌 种 | 探针名称 | ITS中的位置 | 序列鉴别号码 |
脓肿分枝杆菌 | ABC1ABC2ABC3ABC4ABC5ABC6 | 37-5655-74247-266263-282270-289261-280 | 474849505152 |
牝牛分枝杆菌 | VZC1VAC2VAC3VAC4VAC5VAC6VAC7VAC8VAC9VAC10VAC11VAC12 | 18-3738-5758-77118-137138-157158-177178-197199-218219-238265-284298-317321-340 | 535455565758596061626364 |
变黄分枝杆菌 | FLA1FLA2FLA3FLA4FLA5FLA6FLA7FLA8 | 12-3132-5152-7172-91105-124125-144173-192278-297 | 6566676869707172 |
戈氏分枝杆菌 | COR1COR2COR3COR4COR5 | 84-103249-268216-235201-220223-242 | 7374757677 |
表3
菌 种 | 探针名称 | ITS中的位置 | 序列鉴别号码 |
地分枝杆菌 | TER1TER2TER3TER4TER5TER6TER7TER8TER9TER10TER11TER12TER13TER14TER15TER16TER17TER18TER19TER20TER21TER22TER23 | 178-197237-25624-4370-8989-108102-121122-141142-161162-181182-201202-221222-241238-257307-326322-341342-361362-381382-40112-2131-5052-7172-9182-101 | 78798081828384858687888990919293949596979899100 |
瘰疬分枝杆菌 | SC01SC02SC03SC04SC05SC06SC07SC08 | 118-137131-150210-22984-103152-171200-219221-240241-260 | 101102103104105106107108 |
堪萨斯分枝杆菌 | KAN1KAN2KAN3KAN4 | 35-54238-25783-102214-233 | 109110111112 |
表4
菌 种 | 探针名称 | ITS中的位置 | 序列鉴别号码 |
斯氏分枝杆菌(苏加分枝杆菌) | SZU1SZU2SZU3SZU4 | 124-143209-228227-246247-166 | 113114115116 |
海分枝杆菌和溃疡分枝杆菌 | MAR-ULC1MAR-ULC2MAR-ULC3 | 85-104128-147224-243 | 117118119 |
胃分枝杆菌 | GAS1GAS2GAS3GAS4 | 85-104145-164133-152239-258 | 120121122123 |
蟾分枝杆菌 | XEN1XEN2XEN3XEN4XEN5XEN6XEN7XEN8XEN9XEN10 | 190-2091-2021-4041-6061-8081-100121-140141-160201-220221-240 | 124125126127128129130131132133 |
日内瓦分枝杆菌 | GEN1GEN2GEN3GEN4GEN5GEN6GEN7GEN8 | 190-20985-104131-150147-166186-205206-225226-245240-265 | 134135136137138139140141 |
玛尔摩分枝杆菌 | MAL1MAL2MAL3MAL4MAL5 | 203-22229-48136-155222-241242-261 | 141143144145146 |
猿分枝杆菌 | SIM1SIM2SIM3SIM4SIM5SIM6SIM7 | 83-102129-148208-22722-4180-99136-155241-260 | 147148149150151152153 |
表5
菌 种 | 探针名称 | ITS中的位置 | 序列鉴别号码 |
耻垢分枝杆菌 | SMEG1SMEG2SMEG3SMEG4SMEG5SMEG6SMEG7SMEG8SMEG9SMEG10SMEG11SMEG12 | 17-3637-5657-7677-9697-116117-136137-156157-176177-196193-21261-80112-131 | 154155156157158159160161162163164165 |
石氏分枝杆菌 | SH11SH12SH13SH14SH15SH16SH17 | 89-10820-3970-8997-116135-154224-243244-263 | 166167168169170171172 |
哈瓦那分枝杆菌 | HAB1HAB2HAB3HAB4HAB5HAB6HAB7HAB8 | 86-10517-3651-7081-100134-153175-194200-219242-261 | 173174175176177178179180 |
产鼻疽分枝杆菌 | FAR1FAR2FAR3FAR4FAR5FAR6FAR7FAR8FAR9 | 122-141111-13022-4148-6776-95108-127114-133275-294295-314 | 181182183184185186187188189 |
表6
菌 种 | 探针名称 | ITS中的位置 | 序列鉴别号码 |
亚洲分枝杆菌 | ASI1ASI2ASI3ASI4 | 82-101145-164189-208274-293 | 190191192193 |
猪分枝杆菌 | POR1POR2POR3POR4POR5POR6POR7POR8POR9POR10POR11POR12 | 45-6413-3267-8691-110115-134137-156164-183194-213221-240273-292298-317325-344 | 194195196197198199200201202203204205 |
阿加普尔分枝杆菌 | ACA1ACA2ACA3ACA4ACA5ACA6ACA7ACA8ACA9ACA10 | 66-85112-131132-151178-197198-217219-238242-261262-281318-337350-369 | 206207208209210211212213214215 |
迪氏分枝杆菌 | DIE1DIE2DIE3DIE4DIE5DIE6DIE7DIE8DIE9DIE10DIE11DIE12 | 16-3536-5562-81103-122154-173175-194195-214232-251261-280282-301304-323344-363 | 216217218219220221222223224225226227 |
表7
菌 种 | 探针名称 | ITS中的位置 | 序列鉴别号码 |
副结核分枝杆菌 | PARA1PARA2PARA3PARA4PARA5PARA6PARA7PARA8PARA9PARA10PARA11PARA12PARA13 | 7-2630-4940-5950-6971-9083-102103-122135-154157-176178-197198-217219-238241-260 | 228229230231232233234235236237238239240 |
酒精分枝杆菌 | SP1 | 225-244 | 241 |
例6.用于检测分枝杆菌的引物的PCR结果
通过分枝杆菌保守区DNA序列所设计的属特异性引物,可用于检测分枝杆菌。依据270-350bp所组成的ITS序列所制备的引物当中,一对引物,ITSF(序列鉴别号242)和MYC2(序列鉴别号11)被用于PCR。结果得到时了分枝杆菌的约350bp的放大了的核苷酸,同时在金黄色葡萄球菌、尿肠球菌和粘质沙雷氏菌中没有放大现象。因此说明这种引物可用于检测分枝杆菌。
表3是PCR后电泳结果的照片,PCR采用了几个分枝杆菌种株和一对用于检测分枝杆菌的引物(ITSF和MYC2)。图中M为100bp梯度分子量标准;C为阴性对照;泳道1为脓肿分枝杆菌ATCC19977;泳道2为田野分枝杆菌ATCC27406;泳道3为亚洲分枝杆菌ATCC25276;泳道4为南非分枝杆菌ATCC33464;泳道5为鸟分枝杆菌ATCC25291;泳道6为牛分枝杆菌ATCC19210;泳道7为龟分枝杆菌ATCC35752;泳道8为变黄分枝杆菌ATCC14474;泳道9为偶发分枝杆菌ATCC6841;泳道10为戈氏分枝杆菌ATCC14470;泳道11为胞内分枝杆菌ATCC13950;泳道12为堪萨斯分枝杆菌ATCC12478;泳道13为草分枝杆菌ATCC354;泳道14为瘰疬分枝杆菌ATCC19981;泳道15为耻垢分枝杆菌ATCC21701;泳道16为斯氏分枝杆菌ATCC35799;泳道17为地分枝杆菌ATCC15755;泳道18为次要分枝杆菌ATCC23292;泳道19为结核分枝杆菌H37Rv;以及泳道20为牝牛分枝杆菌ATCC15483。从图中可见,除阴性对照外,从泳道1至20的所有分枝杆菌皆呈ITS放大现象。
表8为通过一对检测分枝杆菌的引物(ITSF和MYC2)的PCR结果。表中,+表示放大出现;-表示没有放大现象。可见,除分枝杆菌外的其它菌种皆无放大现象出现。
表8
菌种名称 | 结果 | 菌种名称 | 结果 |
结核分枝杆菌H37Rv | + | 草分枝杆菌ATCC354 | + |
牛分枝杆菌ATCC19210 | + | 嗜水气单胞菌 | - |
鸟分枝杆菌ATCC25291 | + | 洋葱伯克霍尔德氏菌 | - |
胞内分枝杆菌ATCC13950 | + | 稍白链霉菌 | - |
脓肿分枝杆菌ATCC19977 | + | 弗氏柠檬酸杆菌 | - |
龟分枝杆菌ATCC35752 | + | 产气肠杆菌 | - |
变黄分枝杆菌ATCC14474 | + | 阴沟肠杆菌 | - |
偶发分枝杆菌ATCC6841 | + | 粪肠球菌 | - |
胃分枝杆菌ATCC15754 | + | 屎肠球菌 | - |
日内瓦分枝杆菌ATCC51233 | + | 棉子糖肠球菌 | - |
戈氏分枝杆菌ATCC14470 | + | 大肠埃希氏菌 | - |
堪萨斯分枝杆菌ATCC12478 | + | 肺炎克雷伯氏菌 | - |
玛尔摩分枝杆菌ATCC29571 | + | 类志贺邻单胞菌 | - |
瘰疬分枝杆菌ATCC19981 | + | 奇异变形菌 | - |
猿分枝杆菌ATCC25275 | + | 普通变形菌 | - |
耻垢分枝杆菌ATCC21701 | + | 雷氏普罗威登斯菌 | - |
斯氏分枝杆菌ATCC35799 | + | 铜绿假单胞菌 | - |
地分枝杆菌ATCC15755 | + | 水生拉恩氏菌 | - |
牝牛分枝杆菌ATCC15483 | + | 沙门氏菌 | - |
蟾分枝杆菌ATCC19250 | + | 粘质沙雷氏菌 | - |
海分枝杆菌ATCC927 | + | 腐改希瓦氏菌 | - |
溃疡分枝杆菌ATCC19423 | + | 弗氏志贺氏菌 | - |
猪分枝杆菌ATCC33776 | + | 索氏志贺氏菌 | - |
亚洲分枝杆菌ATCC25276 | + | 表皮葡萄球菌 | - |
阿加普尔分枝杆菌ATCC14473 | + | 金黄色葡萄球菌 | - |
迪氏分枝杆菌ATCC19340 | + | 无乳链球菌 | - |
田野分枝杆菌ATCC27406 | + | 中间链球菌 | - |
南非分枝杆菌ATCC33464 | + | 肺炎链球菌 | - |
次要分枝杆菌ATCC23292 | + | 副溶血弧菌 | - |
例7.用于结核菌的引物的PCR结果
前面例子中制备的寡聚核苷酸引物,被用来鉴定每一个菌种,并且通过PCR放大实验证实了这些实验的可靠性。为了鉴定结核菌(TBCOMPLEX),采用了多重PCR,应用一对检测分枝杆菌的引物(ITSF和MYC2)和一对鉴别结核菌(TB COMPLEX)和NTM的引物(MTB2和MYC2,序列鉴别号:16和11)
图4为多重PCR图解,多重PCR用于检测分枝杆菌,同时也用于鉴别结核菌(TB COMPLEX)和NTM。
图5为多重PCR后的电泳结果照片。多重PCR用一对引物(ITSF和MYC2)检测分枝杆菌,另一对引物(MTB2和MYC2)鉴别结核菌(TBCOMPLEX)和NTM。图中,M为100bp梯度的分子量标准;C为阴性对照;泳道1和2分别为结核菌(TB COMPLEX),结核分枝杆菌H37Rv和牛分枝杆菌;泳道3至10分别为鸟分枝杆菌、胞内分枝杆菌、偶发分枝杆菌、龟分枝杆菌、戈氏分枝杆菌、斯氏分枝杆菌、地分枝杆菌和瘰疬分枝杆菌ATCC19981。泳道1和2的结核菌,由于2次放大而形成2条带,这2次放大分别是由检测分枝杆菌的引物和鉴别结核菌引物引发。而在其它泳道的NTM菌株只形成一条带,这说明只有一次放大。
例8.用于鉴定NTM种株的引物的PCR结果
应用鉴定NTM种株的种特异性的引物进行PCR,这种引物依据每一菌株的多态区DNA序列制备。
每一个分枝杆菌应用一对引物进行PCR,其中第一个为有义链,第二个为反义链。具体如下:选用序列鉴别号16和21鉴定结核分枝杆菌H37Rv和牛分枝杆菌;序列鉴别号24和27鉴别鸟分枝杆菌和胞内分枝杆菌;序列鉴别号29和39鉴别偶发分枝杆菌;序列鉴别号41和44鉴别龟分枝杆菌;序列鉴别号48和49鉴别脓肿分枝杆菌;序列鉴别号55和63鉴别牝牛分枝杆菌;序列鉴别号66和72鉴别变黄分枝杆菌;序列鉴别号73和75鉴别戈氏分枝杆菌;序列鉴别号88和96鉴别地分枝杆菌;序列鉴别号102和103鉴别瘰疬分枝杆菌;序列鉴别号109和110鉴别堪萨斯分枝杆菌;序列鉴别号113和114鉴别斯氏分枝杆菌;序列鉴别号117和119鉴别海分枝杆菌和溃疡分枝杆菌;序列鉴别号120和123鉴别胃分枝杆菌;序列鉴别号128和132鉴别蟾分枝杆菌;序列鉴别号135和141鉴别日内瓦分枝杆菌;序列鉴别号143和145鉴别玛尔摩分枝杆菌;序列鉴别号147和149鉴别猿分枝杆菌以及序列鉴别号154和159鉴别耻垢分枝杆菌。PCR完成后,指每一个反应产物进行电泳分析。
图6为PCR后的电泳结果照片。PCR采用每一种分枝杆菌和每一对种特异的引物,这种引物依照每一个NTM的多态区核苷酸序列设计的。图中,M为100bp梯度分子量标准;C为阴性对照,泳道1和2分别为结核菌,结核分枝杆菌H37Rv和牛分枝杆菌ATCC19210;泳道3和4分别为鸟分枝杆菌ATCC25291和胞内分枝杆菌ATCC13950;泳道5为偶发性分枝杆菌ATCC6841;泳道6为龟分枝杆菌ATCC35752;泳道7为脓肿分枝杆菌ATCC19977;泳道8为牝牛分枝杆菌ATCC15483;泳道9为变黄分枝杆菌ATCC14474;泳道10为戈氏分枝杆菌ATCC14470;泳道11为地分枝杆菌ATCC15755;泳道12为瘰疬分枝杆菌ATCC19981;泳道13为堪萨斯分枝杆菌ATCC12478;泳道14为斯氏分枝杆菌ATCC35799;泳道15为海分枝杆菌ATCC927;泳道16为溃疡分枝杆菌ATCC19423;泳道17为胃分枝杆菌ATCC15754;泳道18为蟾分枝杆菌ATCC19250;泳道19为日内瓦分枝杆菌ATCC1233;泳道20为玛尔摩分枝杆菌ATCC29571;泳道21为猿分枝杆菌ATCC25275;以及泳道22为耻垢分枝杆菌ATCC21701。种特异放大现象可见于泳道1至22。
图7为PCR后的电泳结果照片。PCR采用几种分枝杆菌和一对依每一种NTM多态区核苷酸序列所设计的种特异性引物。图中,第一张照片采用一对对结核菌特异的引物(ITSF和MYC2),泳道1和2的结核分枝杆菌H37Rv和牛分枝杆菌呈放大现象;第二张照片采用一对对鸟分枝杆菌和胞内分枝杆菌特异的引物(MAC1和MAC4),泳道3和4的鸟分枝杆菌和胞内分枝杆菌呈放大现象;第三张照片采用一对对偶发分枝杆菌特异的引物(FOR2和FOR10),泳道5的偶发分枝杆菌呈放大现四张采用一对对龟分枝杆菌特异的引物(CHE3和CHE6),泳道6的龟分枝杆菌呈放大现象;第五张采用一对对戈氏分枝杆菌特异的引物(GOR1和GOR2),泳道7的戈氏分枝杆菌呈放大现象;第六张采用一对对斯氏分枝杆菌特异的引物(SZU1和SZU2),泳道8的斯氏分枝杆菌呈放大现象;第七张采用一对对瘰疬分枝杆菌特异的引物(SC01和SC02),泳道10的瘰疬分枝杆菌呈放大现象。泳道9为地分枝杆菌,与上述的种特异引物比较,无放大现象出现。
因此,采用每一对种特异性引物时,PCR可以检测和特异性地鉴定每一种株的分枝杆菌。
如上所述,首先测定非结核分枝杆菌的ITS(内转录间隔区)的DNA序列,然后在通过这些DNA序列,设计寡聚核苷酸引物或探针,来检测和鉴定分枝杆菌,这些非结核分枝杆菌包括:偶发分枝杆菌、龟分枝杆菌、脓肿分枝杆菌、牝牛分枝杆菌、变黄分杆枝菌、亚洲分枝杆菌、猪分枝杆菌、阿加普尔分枝杆菌和迪氏分枝杆菌。所以应用PCR引物或杂交探针,可以检测分枝杆菌,鉴别结核菌和NTM以及快速而有效地鉴定分枝杆菌种株。这种检测和鉴别方法能有效地诊断复杂的感染,因此能够准确地治疗分枝杆菌感染,包括结核病。
通过这些目前被认为是最实用和有效的例子来阐述本发明时,应该注意到本发明的权力要求不限于这些例子。恰恰相反,本发明不仅覆盖附加权力要求的范围和宗旨,还覆盖对它们的各种修改和相同的构思。
序列表
<110>KIM,Jeong Joon;SJ HIGHTECH Co.,Ltd.
KIM,Cheol Min
PARK,Hee Kyung
<120>(Oligonucleotide for detection and identification of Mycobacteria)
用于检测和检定分枝杆菌的寡聚核苷酸
<130>PP05020/PCT
<150>KR 10-1999-0019631
<151>1999-05-29
<150>KR 10-1999-0019632
<151>1999-05-29
<150>KR 10-1999-0019633
<151>1999-05-29
<150>KR 10-1999-0019634
<151>1999-05-29
<150>KR 10-1999-0019635
<151>1999-05-29
<150>KR 10-2000-0018189
<151>2000-04-07
<160>243
<170>KopatentIn 1.71
<210>1
<211>386
<212>DNA
<213>(Mycobacterium fortuitum)偶发分枝杆菌
<400>1
aggagcacca cgaaaagggt tgagacactg ggtcttaccc gagccgtgag gaaccggttg 60
cctgtagtgg gcacggtttg gtgcacaaca aacttttttg actgccagac acactattgg 120
gctttgagac aacaggcccg tgcccctttt ggggggtggc atccggttgc gggtgtcggc 180
gtgttgttgc ctcactttgg tggtggggtg tggtgtttga tttgtggata gtggttgcga 240
gcatctagca cgcagaatcg tgtggtctca ctccttgtgg gtggggctgg ttttgtgtgt 300
tgatgtgcaa tttcttttga aactcatttt tggtttttgt gttgtaagtg tttaagggcg 360
catggtggat gccttggcag gatcca 386
<210>2
<211>338
<212>DNA
<213>(Mycobacterium chelonae)龟分枝杆菌
<400>2
aggagcacca tttcccagcc gaatgagctt gggaacataa agcgagtttc tgtagtggtt 60
actcgcttgg tgaatatgtt ttataaatcc tgtccacccc gtggataggt agtcggcaaa 120
acgtcggact gtcaatagaa ttgaaacgct ggcacactgt tgggtcctga ggcaacacat 180
tgtgttgtca ccctgcttgg tggtggggtg tggtctttga cttatggata gtggttgcga 240
gcatctaaca aacctcgctc gtttacgagt gaggttagtt tttgcaattt attagctaag 300
ttcttaaggg cacatggtgg atgccttggc aggatcca 338
<210>3
<211>317
<212>DNA
<213>(Mycobacterium abscesslus)脓肿分枝杆菌
<400>3
aaggagcacc atttcccagt cgaatgaact agggaacata aagtaggcat ctgtagtgga 60
tatctacttg gtgaatatgt tttgtaaatc ctgtccaccc cgtggatggg tagtcggcaa 120
aacgtcggac tgtcataaga attgaaacgc tggcacactg ttgggtcccg aggcaacacg 180
ttgtgttgtc accctgcttg gtggtggggt gtggactttg acttctgaat agtggttgcg 240
agcatctaaa catagcctcg ctcgttttcg agtggggctg gtttttgcaa ttttattagc 300
taagttctta agggcgc 317
<210>4
<211>429
<212>DNA
<213>(Mycobacterium vaccae)牝牛分枝杆菌
<400>4
aaggagcacc acgagaatca ggcccgccca catcgtgtgg gggttcggtg atctgatcga 60
ttcgttggat ggcctttcat ctgtagtgga tgggggtctg gtgcacatga caaacttggc 120
cgagccggta gggaatgccg gcgagggaaa tcatcagaca cactattggg ctttgagaca 180
acaagcccgt gccccttttt ttgggggtgg ctctgcgttg gcagggtcgg cgtgttgttg 240
ccccgctttg gtggtggggt gtggtgtttg attogtggat agtggttgcg agcatctgaa 300
tgcacagcgc ttgtggtgtt gtgtgttcgg tgtaatgcaa atttttctga tactcgcatg 360
cagtcccttt ttgggggtgt gtgtgggtga ctcatttttt ggttttgtgt tgtaagtgtt 420
taagggcgc 429
<210>5
<211>379
<212>DNA
<213>(Mycobacterium flavescens)变黄分枝杆菌
<400>5
aaggagcacc atttattgtt cccccgtccc cacgtgtgtg ggatcagtgc ggttgggaga 60
tcagtgccgg gcctgtagtg ggtttccggt gggtgcacaa caaacgtgag aagtggtgtg 120
ggaacactgc tttgaggaat catcagacac actattgggc tttgaggcaa caggcccgtt 180
gtttccctgg ccactgtgtg tggtgggggg tctggtgtcg ccctgtcttt ggtggtgggg 240
tgtggtgttt gattcggtgga tagtggttgc gagcatctga acaggtggct cccttttggg 300
ggttgcttgt tttgataatg caatttttta ttcttccgag aatatttttc tgttttgtgt 360
tgtaagtgtt taagggcgc 379
<210>6
<211>364
<212>DNA
<213>(Mycobacterium asiaticum)亚洲分枝杆菌
<400>6
tggatccgac gaagtcgtaa caaggtagcc gtaccggaag gtgcggctgg atcacctcct 60
ttctaaggag caocacgaga gcatcccaat tggtgggatg caggccgtgt ggagttctcg 120
tctgtagtgg acgagggctg ggtgcacaac aacaagcaag ccagacacac tattgggtcc 180
tgagacaaca ctcgggcgct agcacgaagt gttgtccctc catcttggtg gtggggtgtg 240
gtgtttgaga actggatagt ggttgcgagc atcaactgat cgcgtcgccg ttcgcggtgg 300
cgtgttcttt tgtgcaattt taaattcttt ggtttttgta gtgtttgtaa gtgtctaagg 360
gcgc 364
<210>7
<211>402
<212>DNA
<213>(Mycobacterium porcinum)猪分枝杆菌
<400>7
aaggagcacc gattcgattc ccccgccgtc cgcgtagtcg tgggcagtag tgcggttggg 60
atatttcagc caggacctgt agtgggtgtc tggtgggtgc aaatgacaaa cgttgagccg 120
gcgcgggaaa gcgttggtga tggaaotgct gaacacacta ttgggctttg agacaacagg 180
cccgtgcccc tttcgggggg tggcattccg ttgggagtgt cggcgtgttg ttgctccgct 240
ttggtggtgg ggtgtggtgt ttgatttgtg gatagtggtt gcgagcatct agcacgcagt 300
gtggctgggg gccttcgggt ttccggtctt gttgtgtgtt gatgtgcaat ttcttttgaa 360
actcattttt ggtttttgtg ttgtaagtgt ttaagggcgc at 402
<210>8
<211>459
<212>DNA
<213>(Hycobacterium acapulcensis)阿加普尔分枝杆菌
<400>8
aaggagcacc agttattttc ccccgccccc acgcctgtgg gatcagttgc ggttgggata 60
tttagtgcca gcacctgtag tgggtgtttc ggccggtgca cagcaaacgt tgatcgtctg 120
gtggggaaag ccgggcgtga aagattgcca gacacactat tgggctttga gacaacaagc 180
ccgtcgcctc tttgtcccga gtgtgggata tcggagaagg agcaccacga gacctgttgc 240
ccgcccacat cgtgtgggag ttcggtgact caggcgattc gggggttggt tgtggttgtc 300
gccctgcttt ggtggtgggg tgtggtgttt gatttgtgga tagtggttgc gagcatctga 360
acgcagagac ctgtgtgggt ttttgtgttc tgataatgca atttttattc ttccgagaat 420
attttttgat ctgttttgtg tgtaagtgtt taagggcgc 459
<210>9
<211>418
<212>DNA
<213>(Mycobacterium diernhoferi)迪氏分枝杆菌
<400>9
aaggagcacc acgagacctg ttgcccgccc acatcgtgtg ggagttcggt gactcaggcg 60
attcgttgga tggcctcaca cetgtagtgg gtgggggtct ggtgcacaac aaactttgag 120
aaactgccag acacactatt gggctttgag acaacaggcc ctgcggtgcc ggactcgttg 180
gagtcctggt tgccggccgc gagtcccgga agcgattctg gttcggaegg tgtctgttgt 240
tgctccatct ttggtggtgg ggtgtggtgt ttgatttgtg gatagtggtt gcgagcatct 300
agcacgcaag aggagtctgg gtttccttcg ggagcccggg tttttgttgt gtgtgtttga 360
tgtgcaattt ttttcttcta tttggtttta tctgtgttgt aagtgtttaa gggcgcat 418
<210>10
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>sequence of probe or primer for detecting Mycobacteria
<400>10
tggtggggtg tggtgtttga 20
<210>11
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacter)
用于检测分枝杆菌的探针或引物序列
<400>11
tggatagtgg ttgcgagcat 20
<210>12
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacteria)
用于检测分枝杆菌的探针或引物序列
<400>12
ccatcttggt ggtggggtgt 20
<210>13
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacteria)
用于检测分枝杆菌的探针或引物序列
<400>13
cacactattg ggccctgagg 20
<210>14
<211>10
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacteria)
用于检测分枝杆菌的探针或引物序列
<400>14
aaggagcacc 10
<210>15
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting TB complex)
用于检测结核菌的探针或引物序列
<400>15
cactcggact tgttccaggt 20
<210>16
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting TB complex)
用于检测结核菌的探针或引物序列
<400>16
tggtggggcg taggccgtga 20
<210>17
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence ofprobe or primer for detecting TB complex)
用于检测结核菌的探针或引物序列
<400>17
ccccaactgg tggggcgtag 20
<210>18
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting TB complex)
用于检测结核菌的探针或引物序列
<400>18
ccgtgagggg ttcttgtctg 20
<210>19
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting TB complex)
用于检测结核菌的探针或引物序列
<400>19
gtagtgggcg agagccgggt 20
<210>20
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting TB complex)
用于检测结核菌的探针或引物序列
<400>20
catgacaaca aagttggcca 20
<210>21
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting TB complex)
用于检测结核菌的探针或引物序列
<400>21
caacactcgg acttgttcca 20
<210>22
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting TB complex)
用于检测结核菌的探针或引物序列
<400>22
gttccaggtg ttgtcccacc 20
<210>23
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting TB complex)
用于检测结核菌的探针或引物序列
<400>23
cgagcatcaa tggatacgct 20
<210>24
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium avium complex(MAC))
用于检测鸟分枝杆菌的探针或引物序列
<400>24
gttcatcgaa atgtgtaatt 20
<210>25
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium avium complex(MAC))
用于检测鸟分枝杆菌的探针或引物序列
<400>25
gtgtggagtc cctccatctt 20
<210>26
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium avium complex(MAC))
用于检测鸟分枝杆菌的探针或引物序列
<400>26
aaatgattgc cagacacact 20
<210>27
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Hycobacterium avium complex(MAC))
用于检测鸟分枝杆菌的探针或引物序列
<400>27
ccctgagaca acactcggtc 20
<210>28
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for deteoting Hycobacteritm fortuitum)
用于检测偶发分枝杆菌的探针或引物序列
<400>28
cgagccgtga ggaaccggtt 20
<210>29
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium fortuitum)
用于检测偶发分枝杆菌的探针或引物序列
<400>29
ccgtgaggaa ccggttgcct 20
<210>30
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence ofprobe or primer for detecting Mycobacterium fortuitum)
用于检测偶发分枝杆菌的探针或引物序列
<400>30
gtagtgggca cggtttggtg 20
<210>31
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium fortuitum)
用于检测偶发分枝杆菌的探针或引物序列
<400>31
ttggtgcaca acaaactttt 20
<210>32
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium fortuitum)
用于检测偶发分枝杆菌的探针或引物序列
<400>32
caaacttttt tgactgccag 20
<210>33
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacteriutm fortuitum)
用于检测偶发分枝杆菌的探针或引物序列
<400>33
acacactatt gggctttgag 20
<210>34
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacteriutm fortuitum)
用于检测偶发分枝杆菌的探针或引物序列
<400>34
ctattgggct ttgagacaac 20
<210>35
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacteriutm fortuitum)
用于检测偶发分枝杆菌的探针或引物序列
<400>35
aggcccgtgc cccttttggg 20
<210>36
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacteriutm fortuitum)
用于检测偶发分枝杆菌的探针或引物序列
<400>36
tggcatccgg ttgcgggtgt 20
<210>37
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacteriutm fortuitum)
用于检测偶发分枝杆菌的探针或引物序列
<400>37
tagcacgcag aatcgtgtgg 20
<210>38
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacteriutm fortuitum)
用于检测偶发分枝杆菌的探针或引物序列
<400>38
ggttttgtgt gttgatgtgc 20
<210>39
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium chelonae)
用于检测龟分枝杆菌的探针或引物序列
<400>39
tttcccagcc gaatgagctt 20
<210>40
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium chelonae)
用于检测龟分枝杆菌的探针或引物序列
<400>40
ttgggaacat aaagcgagtt 20
<210>41
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium chelonae)
用于检测龟分枝杆菌的探针或引物序列
<400>41
gttactcgct tggtgaatat 20
<210>42
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium chelonae)
用于检测龟分枝杆菌的探针或引物序列
<400>42
gttttataaa tcctgtccac 20
<210>43
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium chelonae)
用于检测龟分枝杆菌的探针或引物序列
<400>43
gtagtcggca aaacgtcgga 20
<210>44
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium chelonae)
用于检测龟分枝杆菌的探针或引物序列
<400>44
tcaatagaat tgaaacgctg 20
<210>45
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium chelonae)
用于检测龟分枝杆菌的探针或引物序列
<400>45
ggcaacacat tgtgttgtca 20
<210>46
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium chelonae)
用于检测龟分枝杆菌的探针或引物序列
<400>46
taacaaacct cgctcgttta 20
<210>47
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium abscessus)
用于检测脓肿分枝杆菌的探针或引物序列
<400>47
cataaagtag gcatctgtag 20
<210>48
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium abscessus)
用于检测脓肿分枝杆菌的探针或引物序列
<400>48
agtggatatc tacttggtga 20
<210>49
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium abscessus)
用于检测脓肿分枝杆菌的探针或引物序列
<400>49
taaacatagc ctcgctcgtt 20
<210>50
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium abscessus)
用于检测脓肿分枝杆菌的探针或引物序列
<400>50
cgttttcgag tggggctggt 20
<210>51
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium abscessus)
用于检测脓肿分枝杆菌的探针或引物序列
<400>51
gagtggggct ggtttttgca 20
<210>52
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium abscessus)
用于检测脓肿分枝杆菌的探针或引物序列
<400>52
ctcgttttcg agtggggctg 20
<210>53
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacteriutm vaccae)
用于检测牝牛分枝杆菌的探针或引物序列
<400>53
tcaggcccgc ccacatcgtg 20
<210>54
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacteriutm vaccae)
用于检测脓肿分枝杆菌的探针或引物序列
<400>54
tgggggttcg gtgatetgat 20
<210>55
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacteriutm vaccae)
用于检测脓肿分枝杆菌的探针或引物序列
<400>55
cgattcgttg gatggccttt 20
<210>56
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacteriutm vaccae)
用于检测脓肿分枝杆菌的探针或引物序列
<400>56
ggccgagccg gtagggaatg 20
<210>57
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacteriutm vaccae)
用于检测脓肿分枝杆菌的探针或引物序列
<400>57
ccggcgaggg aaatcatcag 20
<210>58
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacteriutm vaccae)
用于检测脓肿分枝杆菌的探针或引物序列
<400>58
acacactatt gggctttgag 20
<210>59
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacteriutm vaccae)
用于检测脓肿分枝杆菌的探针或引物序列
<400>59
acaacaagcc cgtgcccctt 20
<210>60
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacteriutm vaccae)
用于检测脓肿分枝杆菌的探针或引物序列
<400>60
ttttgggggt ggctctgcgt 20
<210>61
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacteriutm vaccae)
用于检测脓肿分枝杆菌的探针或引物序列
<400>61
tggcagggtc ggcgtgttgt 20
<210>62
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacteriutm vaccae)
用于检测脓肿分枝杆菌的探针或引物序列
<400>62
tgtttgattc gtggatagtg 20
<210>63
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primcr for detecting Mycobacteriutm vaccae)
用于检测脓肿分枝杆菌的探针或引物序列
<400>63
gaatgcacag cgcttgtggt 20
<210>54
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacteriutm vaccae)
用于检测脓肿分枝杆菌的探针或引物序列
<400>64
gtgtgttcgg tgtaatgcaa 20
<210>65
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium flavescens
(用于检测变黄分枝杆菌的探针或引物序列)
<400>65
tttattgttc ccccgtcccc 20
<210>66
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>sequence of probe or pnmer for detecting Mycobacterium flavescens
(用于检测变黄分枝杆菌的探针或引物序列)
<400>66
acgtgtgtgg gatcagtgcg 20
<210>67
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium flavescens
(用于检测变黄分枝杆菌的探针或引物序列)
<400>67
gttgggagat cagtgccggg 20
<210>68
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium flavescens
(用于检测变黄分枝杆菌的探针或引物序列)
<400>68
cctgtagtgg gtttccggtg 20
<210>69
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium flavescens
(用于检测变黄分枝杆菌的探针或引物序列)
<400>69
cgtgagaagt ggtgtgggaa 20
<210>70
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium flavescens)
用于检测变黄分枝杆菌的探针或引物序列
<400>70
cactgctttg aggaatcatc 20
<210>71
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium flavescens
(用于检测变黄分枝杆菌的探针或引物序列)
<400>71
ggcccgttgt ttccctggcc 20
<210>72
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium flavescens
(用于检测变黄分枝杆菌的探针或引物序列)
<400>72
tgaacaggtg gctccctttt 20
<210>73
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium gordonae
(用于检测戈氏分枝杆菌的探针或引物序列)
<400>73
cgacaacaag ctaagccaga 20
<210>74
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium gordonae)
用于检测戈氏分枝杆菌的探针或引物序列
<400>74
tgttcttttt gtgcaatttt 20
<210>75
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium gordonae)
用于检测戈氏分枝杆菌的探针或引物序列
<400>75
gcatcaaaat gtatgcgttg 20
<210>76
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium gordonae)
用于检测戈氏分枝杆菌的探针或引物序列
<400>76
aaaatgtatg cgttgtcgtt 20
<210>77
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium gordonae)
用于检测戈氏分枝杆菌的探针或引物序列
<400>77
cggcaacgtg ttctttttgt 20
<210>78
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacteriutm terrae)
用于检测地分枝杆菌的探针或引物序列
<400>78
ttgagttgtg gatagtggtt 20
<210>79
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacteriutm terrae)
用于检测地分枝杆菌的探针或引物序列
<400>79
gtcgagtgtt tagagagtaa 20
<210>80
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacteriutm terrae)
用于检测地分枝杆菌的探针或引物序列
<400>80
cgcactgggc gcattccgag 20
<210>81
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacteriutm terrae)
用于检测地分枝杆菌的探针或引物序列
<400>81
gtgggggctg ggtgcacaac 20
<210>82
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacteriutm terrae)
用于检测地分枝杆菌的探针或引物序列
<400>82
caacgttgaa aacaagatcg 20
<210>83
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacteriutm terrae)
用于检测地分枝杆菌的探针或引物序列
<400>83
aattacgaac aacaacaagc 20
<210>84
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacteriutm terrae)
用于检测地分枝杆菌的探针或引物序列
<400>84
ttgcgagatc atcaactgcc 20
<210>85
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacteriutm terrae)
用于检测地分枝杆菌的探针或引物序列
<400>85
aggagtcctt gggggtttct 20
<210>86
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacteriutm terrae)
用于检测地分枝杆菌的探针或引物序列
<400>86
ggtggccggc ttttgtgctg 20
<210>87
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacteriutm terrae)
用于检测地分枝杆菌的探针或引物序列
<400>87
ggcacactgt tgggtcctga 20
<210>88
<211>20
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium terrae)
用于检测地分枝杆菌的探针或引物序列
<400>88
ggcaacaggc ccgtttgtgc 20
<210>89
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacteriutm terrae)
用于检测地分枝杆菌的探针或引物序列
<400>89
ccccgggtgg gggtgggtgt 20
<210>90
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacteriutm terrae)
用于检测地分枝杆菌的探针或引物序列
<400>90
gtgttgttgt cgcctcacac 20
<210>91
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacteriutm terrae)
用于检测地分枝杆菌的探针或引物序列
<400>91
taacaagcag atttttggtc 20
<210>92
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacteriutm terrae)
用于检测地分枝杆菌的探针或引物序列
<400>92
tggtctgttt gttttgcaat 20
<210>93
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacteriutm terrae)
用于检测地分枝杆菌的探针或引物序列
<400>93
ttttgtttct tggtttttgt 20
<210>94
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacteriutm terrae)
用于检测地分枝杆菌的探针或引物序列
<400>94
gtttgtaagt gtttaagggc 20
<210>95
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacteriutm terrae)
用于检测地分枝杆菌的探针或引物序列
<400>95
gcatggtgga tgccttggca 20
<210>96
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacteriutm terrae)
用于检测地分枝杆菌的探针或引物序列
<400>96
ctttttcccc cgtgcctcac 20
<210>97
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacteriutm terrae)
用于检测地分枝杆菌的探针或引物序列
<400>97
atgggtgagg gtttttgcgg 20
<210>98
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacteriutm terrae)
用于检测地分枝杆菌的探针或引物序列
<400>98
ttgggacagt gtttgccggt 20
<210>99
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacteriutm terrae)
用于检测地分枝杆菌的探针或引物序列
<400>99
gcctgtagtg ggtggccggt 20
<210>100
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacteriutm terrae)
用于检测地分枝杆菌的探针或引物序列
<400>100
ggtggccggt ggtgcagagg 20
<210>101
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium scrofluceum
(用于检测瘰疬分枝杆菌的探针或引物序列)
<400>101
cctgaggcaa cactcggctc 20
<210>102
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium scrofluceum
(用于检测瘰疬分枝杆菌的探针或引物序列)
<400>102
tcggctcgtt ctgagtggtg 20
<210>103
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium scrofluceum
(用于检测瘰疬分枝杆菌的探针或引物序列)
<400>103
taaacggatg cgtggccgaa 20
<210>104
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium scrofluceum
(用于检测瘰疬分枝杆菌的探针或引物序列)
<400>104
caacagcaaa tgattgccag 20
<210>105
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium scrofluceum
(用于检测瘰疬分枝杆菌的探针或引物序列)
<400>105
ccctccatct tggtggtggg 20
<210>106
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium scrofluceum
(用于检测瘰疬分枝杆菌的探针或引物序列)
<400>106
tgcgagcatc taaacggatg 20
<210>107
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium scrofluceum
(用于检测瘰疬分枝杆菌的探针或引物序列)
<400>107
gtggccgaac ggtggcgtgt 20
<210>108
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium kansasii)
用于检测堪萨斯分枝杆菌的探针或引物序列
<400>108
tcgttgaaat gtgtaatttc 20
<210>109
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium kansasii)
用于检测堪萨斯分枝杆菌的探针或引物序列
<400>109
gtggggtgca agccgtgagg 20
<210>110
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence ofprobe or primer for detecting Mycobacterium kansasii)
用于检测堪萨斯分枝杆菌的探针或引物序列
<400>110
gcgtgttctt ttgtgcaatt 20
<210>111
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium kansasii)
用于检测堪萨斯分枝杆菌的探针或引物序列
<400>111
gcaactgtaa atgaatcacc 20
<210>112
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium szulgai)
用于检测斯氏分枝杆菌的探针或引物序列
<400>112
ctggatgcgc tgccgttcgt 20
<210>113
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium szulgai)
用于检测斯氏分枝杆菌的探针或引物序列
<400>113
aacactcagg cttggccaga 20
<210>114
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium szulgai)
用于检测斯氏分枝杆菌的探针或引物序列
<400>114
caattggatg cgctgccctc 20
<210>115
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium szulgai)
用于检测斯氏分枝杆菌的探针或引物序列
<400>115
tcgtggtggc gtgttctttt 20
<210>116
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium szulgai)
用于检测斯氏分枝杆菌的探针或引物序列
<400>116
gtgcaatttt aattctttgg 20
<210>117
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium marinum and
Mycobacterium ulcerans
(用于检测海分枝杆菌和溃疡分枝杆菌的探针或引物序列)
<400>117
aacaacaagc aagccagaca 20
<210>118
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium marinum and
Mycobacterium ulcerans
(用于检测海分枝杆菌和溃疡分枝杆菌的探针或引物序列)
<400>118
atctctgttg gtttcgggat 20
<210>119
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium mainum and
Mycobacterium ulcerans
(用于检测海分枝杆菌和溃疡分枝杆菌的探针或引物序列)
<400>119
ccttttggtg gcgtgttctg 20
<210>120
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium gastri)
用于检测胃分枝杆菌的探针或引物序列
<400>120
aacagcaagc aagccagaca 20
<210>121
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium gastri)
用于检测胃分枝杆菌的探针或引物序列
<400>121
ctcgtccaag agtgttgtcc 20
<210>122
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium gastri)
用于检测胃分枝杆菌的探针或引物序列
<400>122
gcttgtcttg gactcgtcca 20
<210>123
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium gastri)
用于检测胃分枝杆菌的探针或引物序列
<400>123
cagggtagcg tgttcttttg 20
<210>124
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium xenopi)
用于检测蟾分枝杆菌的探针或引物序列
<400>124
catctggcaa agactgtggt 20
<210>125
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium xenopi)
用于检测蟾分枝杆菌的探针或引物序列
<400>125
agggagcacc gtaaacgcat 20
<210>126
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium xenopi)
用于检测蟾分枝杆菌的探针或引物序列
<400>126
cccgcgtggg gtggggtgtg 20
<210>127
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium xenopi)
用于检测蟾分枝杆菌的探针或引物序列
<400>127
ggttcggcgt gttgtggcgt 20
<210>128
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium xenopi)
用于检测蟾分枝杆菌的探针或引物序列
<400>128
cgggccgagg tgttgggcag 20
<210>129
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium xenopi)
用于检测蟾分枝杆菌的探针或引物序
<400>129
caggcagtaa ccgccggcac 20
<210>130
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium xenopi)
用于检测蟾分枝杆菌的探针或引物序列
<400>130
caggcagtaa ccgccggcac 20
<210>131
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium xenopi)
用于检测蟾分枝杆菌的探针或引物序列
<400>131
tccgcgtggt ggcggggtgt 20
<210>132
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium xenopi)
用于检测蟾分枝杆菌的探针或引物序列
<400>132
agactgtggt aagcggtttt 20
<210>133
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium xenopi)
用于检测蟾分枝杆菌的探针或引物序列
<400>133
tgttgagtgt tttctggtgt 20
<211>134
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacteritm genavense)
用于检测日内瓦分枝杆菌的探针或引物序列
<400>134
cattgaatag tggttgcgag 20
<211>135
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacteritm genavense)
用于检测日内瓦分枝杆菌的探针或引物序列
<400>135
aacaacaggc aategccgga 20
<211>136
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacteritm genavense)
用于检测日内瓦分枝杆菌的探针或引物序列
<400>136
tcggccgact gaggtcgacg 20
<211>137
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacteritm genavense)
用于检测日内瓦分枝杆菌的探针或引物序列
<400>137
gacgtggtgt ccctccatct 20
<211>138
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacteritm genavense)
用于检测日内瓦分枝杆菌的探针或引物序列
<400>138
ttgagcattg aatagtggtt 20
<211>139
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacteritm genavense)
用于检测日内瓦分枝杆菌的探针或引物序列
<400>139
gcgagcatct agacggatgc 20
<211>140
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacteritm genavense)
用于检测日内瓦分枝杆菌的探针或引物序列
<400>140
gttccccagt ggtgcgcgtt 20
<211>141
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacteritm genavense)
用于检测日内瓦分枝杆菌的探针或引物序列
<400>141
cgtcaaaaat gtgtaatttt 20
<211>142
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium almoense)
用于检测玛尔摩分枝杆菌的探针或引物序列
<400>142
agcatctaaa cggatgcgct 20
<210>143
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium almoense)
用于检测玛尔摩分枝杆菌的探针或引物序列
<400>143
tggtggggtg caagccgtga 20
<210>144
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium almoense)
用于检测玛尔摩分枝杆菌的探针或引物序列
<400>144
ccagtccgcg tggtgtcccc 20
<210>145
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium almoense)
用于检测玛尔摩分枝杆菌的探针或引物序列
<400>145
tgcccgtaga cgcgtattcg 20
<210>146
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium almoense)
用于检测玛尔摩分枝杆菌的探针或引物序列
<400>146
tttgtgtaat ttcttctttg 20
<210>147
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium simiae)
用于检测猿分枝杆菌的探针或引物序列
<400>147
acaacaacag gcaatcgcca 20
<210>148
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium simiae)
用于检测猿分枝杆菌的探针或引物序列
<400>148
actcggccga cttcggttga 20
<210>149
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium simiae)
用于检测猿分枝杆菌的探针或引物序列
<400>149
gagcatctaa atgaacgcgt 20
<210>150
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium simiae)
用于检测猿分枝杆菌的探针或引物序列
<400>150
tccaattggt ggggtgtgag 20
<210>151
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium simiae)
用于检测猿分枝杆菌的探针或引物序列
<400>151
tgcacaacaa caggcaatcg 20
<210>152
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium simiae)
用于检测猿分枝杆菌的探针或引物序列
<400>152
cgacttcggt tgaagtggtg 20
<210>153
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium simiae)
用于检测猿分枝杆菌的探针或引物序列
<400>153
tacgtgttcg ttttgtgtaa 20
<210>154
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium smegmatis)
用于检测耻垢分枝杆菌的探针或引物序列
<400>154
gacactctcc gttggggagg 20
<210>155
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium smegmatis)
用于检测耻垢分枝杆菌的探针或引物序列
<400>155
gtgtgagccg tgaggagctg 20
<210>156
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for deteting Mycobacterium smegmatis)
用于检测耻垢分枝杆菌的探针或引物序列
<400>156
gagcgctgta gtggcgccgg 20
<210>157
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium smegmatis)
用于检测耻垢分枝杆菌的探针或引物序列
<400>157
cttggtgcac agcaaacgtt 20
<210>158
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium smegmatis)
用于检测耻垢分枝杆菌的探针或引物序列
<400>158
gagatgcggt gtgggaaacg 20
<210>159
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium smegmatis)
用于检测耻垢分枝杆菌的探针或引物序列
<400>159
ctgtttcgat ggactgccag 20
<210>160
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequenee)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium smegmatis)
用于检测耻垢分枝杆菌的探针或引物序列
<400>160
acacactatt gggccctgag 20
<210>161
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium smegmatis)
用于检测耻垢分枝杆菌的探针或引物序列
<400>161
acaacaggcc cgcgttcccg 20
<210>162
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium smegmatis)
用于检测耻垢分枝杆菌的探针或引物序列
<400>162
tcccgttggg ggcggggggt 20
<210>163
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium smegmatis)
用于检测耻垢分枝杆菌的探针或引物序列
<400>163
gggtgtgttg ttgccctgct 20
<210>164
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium smegmatis)
用于检测耻垢分枝杆菌的探针或引物序列
<400>164
gctgtagtgg cgccggcttg 20
<210>165
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium smegmatis)
用于检测耻垢分枝杆菌的探针或引物序列
<400>165
aaacgctgtt tcgatggact 20
<210>166
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacteritm shimoidei)
用于检测石氏分枝杆菌的探针或引物序列
<400>166
aacaacaagc gagaagccga 20
<210>167
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacteritm shimoidei)
用于检测石氏分枝杆菌的探针或引物序列
<400>167
ggcttccgca gtgggcggaa 20
<210>168
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacteritm shimoidei)
用于检测石氏分枝杆菌的探针或引物序列
<400>168
gggcgcgggc tgggtgcaca 20
<210>169
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacteritm shimoidei)
用于检测石氏分枝杆菌的探针或引物序列
<400>169
gcgagaagcc gagcacactg 20
<210>170
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacteritm shimoidei)
用于检测石氏分枝杆菌的探针或引物序列
<400>170
cccgggccct ttggggttgg 20
<210>171
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacteritm shimoidei)
用于检测石氏分枝杆菌的探针或引物序列
<400>171
aagcaaaact tggttgtttt 20
<210>172
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacteritm shimoidei)
用于检测石氏分枝杆菌的探针或引物序列
<400>172
gtttgtcgag ttgttttctt 20
<210>173
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium habana)
用于检测哈瓦那分枝杆菌的探针或引物序列
<400>173
aacaacaggc aatcgccaga 20
<210>174
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium habana)
用于检测哈瓦那分枝杆菌的探针或引物序列
<400>174
aacactccaa ttgggtgggg 20
<210>175
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium habana)
用于检测哈瓦那分枝杆菌的探针或引物序列
<400>175
ggttctcgtc tgtagtggac 20
<210>176
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium habana)
用于检测哈瓦那分枝杆菌的探针或引物序列
<400>176
tgcacaacaa caggcaatcg 20
<210>177
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium habana)
用于检测哈瓦那分枝杆菌的探针或引物序列
<400>177
ggccgacttc ggttgaagtg 20
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<210>178
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium habana)
用于检测哈瓦那分枝杆菌的探针或引物序列
<400>178
ggggtgtggt gtttgagtat 20
<210>179
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium habana)
用于检测哈瓦那分枝杆菌的探针或引物序列
<400>179
gagcatctaa atgaacgcgt 20
<210>180
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium habana)
用于检测哈瓦那分枝杆菌的探针或引物序列
<400>180
tacgtgttcg ttttgtgtaa 20
<210>181
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium farcinogen
(用于检测产鼻疽分枝杆菌的探针或引物序列)
<400>181
gttggtgatg gactgccaga 20
<210>182
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium farcinogen
(用于检测产鼻疽分枝杆菌的探针或引物序列)
<400>182
cgcgggaaag cgttggtgat 20
<210>183
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium farcinogen
(用于检测产鼻疽分枝杆菌的探针或引物序列)
<400>183
cgatgtcgtg ggcagtagtg 20
<210>184
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium farcinogen
(用于检测产鼻疽分枝杆菌的探针或引物序列)
<400>184
ggatatttca gccagcatct 20
<210>185
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium farcinogen
(用于检测产鼻疽分枝杆菌的探针或引物序列)
<400>185
tgtctggtgg gtgcaaatga 20
<210>186
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium farcinogen
(用于检测产鼻疽分枝杆菌的探针或引物序列)
<400>186
cggcgcggga aagcgttggt 20
<210>187
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium farcinogen
(用于检测产鼻疽分枝杆菌的探针或引物序列)
<400>187
gggaaagcgt tggtgatgga 20
<210>188
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium farcinogen
(用于检测产鼻疽分枝杆菌的探针或引物序列)
<400>188
tctagcacgc agagtgtggc 20
<210>189
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium farcinogen
(用于检测产鼻疽分枝杆菌的探针或引物序列)
<400>189
tgggggcctt cgggtttctt 20
<210>190
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium asiaticum)
用于检测亚洲分枝杆菌的探针或引物序列
<400>190
catcccaatt ggtgggatgc 20
<210>191
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium asiaticum)
用于检测亚洲分枝杆菌的探针或引物序列
<400>191
cacaacaaca agcaagccag 20
<210>192
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium asiaticum)
用于检测亚洲分枝杆菌的探针或引物序列
<400>192
cactcgggcg ctagcacgaa 20
<210>193
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium asiaticum)
用于检测亚洲分枝杆菌的探针或引物序列
<400>193
aactgatcgc gtcgccgttc 20
<210>194
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium porcinum)
用于检测猪分枝杆菌的探针或引物序列
<400>194
cagtagtgcg gttgggatat 20
<210>195
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium porcinum)
用于检测猪分枝杆菌的探针或引物序列
<400>195
ttcgattccc ccgccgtccg 20
<210>196
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium porcinum)
用于检测猪分枝杆菌的探针或引物序列
<400>196
cagccaggac ctgtagtggg 20
<210>197
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium porcinum)
用于检测猪分枝杆菌的探针或引物序列
<400>197
tggtgggtgc aaatgacaaa 20
<210>198
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium porcinum)
用于检测猪分枝杆菌的探针或引物序列
<400>198
gagccggcgc gggaaagcgt 20
<210>199
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobactenum porcinum)
用于检测猪分枝杆菌的探针或引物序列
<400>199
gtgatggaac tgctgaacac 20
<210>200
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium porcinum)
用于检测猪分枝杆菌的探针或引物序列
<400>200
ggctttgaga caacaggccc 20
<210>201
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium porcinum)
用于检测猪分枝杆菌的探针或引物序列
<400>201
cggggggtgg cattccgttg 20
<210>194
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium porcinum)
用于检测猪分枝杆菌的探针或引物序列
<400>202
cggcgtgttg ttgctccgct 20
<210>203
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium porcinum)
用于检测猪分枝杆菌的探针或引物序列
<400>203
tagtggttge gagcatctag 20
<210>204
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium porcinum)
用于检测猪分枝杆菌的探针或引物序列
<400>204
agtgtggctg ggggccttcg 20
<210>205
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>(sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium porcinum)
用于检测猪分枝杆菌的探针或引物序列
<400>205
ggtcttgttg tgtgttgatg 20
<210>206
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium acapulcensis
(用于检测阿加普尔分枝杆菌的探针或引物序列)
<400>206
tgccagcacc tgtagtgggt 20
<210>207
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium acapulcensis
(用于检测阿加普尔分枝杆菌的探针或引物序列)
<400>207
gatcgtctgg tggggaaagc 20
<210>206
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium acapulcensis
(用于检测阿加普尔分枝杆菌的探针或引物序列)
<400>208
cgggcgtgaa agattgccag 20
<210>209
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium acapulcensis
(用于检测阿加普尔分枝杆菌的探针或引物序列)
<400>209
agcccgtcgc ctctttgtcc 20
<210>210
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium acapulcensis
(用于检测阿加普尔分枝杆菌的探针或引物序列)
<400>210
cgagtgtggg atatcggaga 20
<210>211
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium acapulcensis
(用于检测阿加普尔分枝杆菌的探针或引物序列)
<400>211
ggagcaccac gagacctgtt 20
<210>212
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium acapulcensis
(用于检测阿加普尔分枝杆菌的探针或引物序列)
<400>212
cgcccacatc gtgtgggagt 20
<210>213
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium acapulcensis
(用于检测阿加普尔分枝杆菌的探针或引物序列)
<400>213
tcggtgactc aggcgattcg 20
<210>214
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium acapulcensis
(用于检测阿加普尔分枝杆菌的探针或引物序列)
<400>214
gggtgtggtg tttgatttgt 20
<210>215
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium acapulcensis
(用于检测阿加普尔分枝杆菌的探针或引物序列)
<400>215
cgagcatctg aacgcagaga 20
<210>216
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium diernhoferi
(用于检测迪氏分枝杆菌的探针或引物序列)
<400>216
acctgttgcc cgcccacatc 20
<210>217
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium diernhoferi
(用于检测迪氏分枝杆菌的探针或引物序列)
<400>217
gtgtgggagt tcggtgactc 20
<210>218
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium diernhoferi
(用于检测迪氏分枝杆菌的探针或引物序列)
<400>218
ttcgttggat ggcctcacac 20
<210>219
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium diernhoferi
(用于检测迪氏分枝杆菌的探针或引物序列)
<400>219
tgcacaacaa actttgagaa 20
<210>220
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium diernhoferi
(用于检测迪氏分枝杆菌的探针或引物序列)
<400>220
acaggccctg cggtgccgga 20
<210>221
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium diernhoferi
(用于检测迪氏分枝杆菌的探针或引物序列)
<400>221
tcgttggagt cctggttgcc 20
<210>222
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium diernhoferi
(用于检测迪氏分枝杆菌的探针或引物序列)
<400>222
ggccgcgagt cccggaagcg 20
<210>223
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium diernhoferi
(用于检测迪氏分枝杆菌的探针或引物序列)
<400>223
gtctgttgtt gctccatctt 20
<210>224
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium diernhoferi
(用于检测迪氏分枝杆菌的探针或引物序列)
<400>224
ggtgtggtgt ttgatttgtg 20
<210>225
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium diernhoferi
(用于检测迪氏分枝杆菌的探针或引物序列)
<400>225
atagtggttg cgagcatcta 20
<210>226
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium diernhoferi
(用于检测迪氏分枝杆菌的探针或引物序列)
<400>226
acgcaagagg agtctgggtt 20
<210>227
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium diernhoferi
(用于检测迪氏分枝杆菌的探针或引物序列)
<400>227
ttgttgtgtg tgtttgatgt 20
<210>228
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium paratuberculosis
(用于检测副结核分枝杆菌的探针或引物序列)
<400>228
gagcaccacg aaaagcaccc 20
<210>228
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium paratuberculosis
(用于检测副结核分枝杆菌的探针或引物序列)
<400>229
ctggtggggt gcgagccgtg 20
<210>230
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium paratuberculosis
(用于检测副结核分枝杆菌的探针或引物序列)
<400>230
gcgagccgtg aggggttccc 20
<210>231
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium paratuberculosis
(用于检测副结核分枝杆菌的探针或引物序列)
<400>231
aggggttccc gtctgtagtg 20
<210>232
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium paratuberculosis
(用于检测副结核分枝杆菌的探针或引物序列)
<400>232
acgggggccg ggtgcgcaac 20
<210>233
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium paratuberculosis
(用于检测副结核分枝杆菌的探针或引物序列)
<400>233
caaatgattg ccagacacac 20
<210>234
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium paratuberculosis
(用于检测副结核分枝杆菌的探针或引物序列)
<400>234
tattgggcct gagacaacac 20
<210>235
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium paratuberculosis
(用于检测副结核分枝杆菌的探针或引物序列)
<400>235
cggtccgtcc gtgtggagtc 20
<210>236
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium paratuberculosis
(用于检测副结核分枝杆菌的探针或引物序列)
<400>236
tccatcttgg tggtggggtg 20
<210>237
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium paratuberculosis
(用于检测副结核分枝杆菌的探针或引物序列)
<400>237
ggtgtttgag tattggatag 20
<210>238
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium paratuberculosis
(用于检测副结核分枝杆菌的探针或引物序列)
<400>238
tggttgcgag catctagatg 20
<210>239
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium paratuberculosis
(用于检测副结核分枝杆菌的探针或引物序列)
<400>239
gcgcatggtc tccgtggccg 20
<210>240
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>sequence of probe or primer for detecting Mycobacterium paratuberculosis
(用于检测副结核分枝杆菌的探针或引物序列)
<400>240
gttcatcgaa atgtgtaatt 20
<210>241
<211>20
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>sequence of probe or primer for detecting Mcobacteria sp
(用于检测酒精分枝杆菌的探针或引物序列)
<400>241
aaaagctgtt gtttgacggt 20
<210>242
<211>25
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>sequence of primer for amplifying Mycobacteria ITS selected from the sequence of
16SrRNA in Mycobacteria
(用于放大从分枝杆菌16S rRNA序列中选择出来的分枝杆菌ITS的引物序列)
<400>242
tggatccgac gaagtcgtaa caagg 25
<210>243
<211>25
<212>DNA
<213>(Artificial Sequence)人工序列
<220>
<223>sequence of primer for amplifying Mycobacteria ITS selected from the sequence of
23S rRNA in Mvcobacteria
(用于放大从分枝杆菌23S rRNA序列中选择出来的分枝杆菌ITS的引物序列)
<400>243
tggatcctgc caaggcatcc accat 25
Claims (1)
1.一种用于检测和鉴定分枝杆菌的寡聚核苷酸,其特征是检测和鉴定鸟分枝杆菌MAC和胞内分枝杆菌的寡聚核苷酸序列列于序列鉴别号24至27中的任一序列鉴别号中。
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