CN1530102A - 含有α-硫辛酸、氨溴索和/或血管紧张素转化酶(ACE)抑制剂的药物制剂及其治疗神经变性疾病的用途 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种药物组合物在预防和治疗神经变性疾病中的用途(例如缺血或出血性中风，局灶或全局性缺血，肌萎缩性侧索硬化(ALS)，阿尔茨海默氏病，帕金森氏病，亨廷顿舞蹈症，多发性硬化)。有效药剂的组合物包括至少两种下述物质：α－硫辛酸；氨溴索以及一个或几个血管紧张素转化酶(ACE)抑制剂。在本发明所基于的实验中我们惊奇的发现，对变性损伤特别敏感的神经细胞比其它中枢神经系统(CNS)细胞具有更少的固有游离巯基基团。这就说明了游离巯基基团含量的降低与发生变性后的那些细胞损伤具有某种不确定的联系。通过应用α－硫辛酸、氨溴索和/或ACE抑制剂的组合物，可使神经变性损伤后的受损率降低40到45％。

Description

含有α-硫辛酸、氨溴索和/或血管紧张素转化酶 (ACE)抑制剂的药物制剂及其治疗神经变性疾病的用途

技术领域

本发明涉及一种含有α-硫辛酸、氨溴索和/或ACE抑制剂(血管紧张素转化酶抑制剂)的药物制剂。此外，本发明涉及一种药物制剂用于治疗中枢神经系统(CNS)的衰退疾病，这些疾病例如，缺血或出血性中风，局灶或全局性缺血，肌萎缩性侧索硬化(ALS)，阿尔茨海默氏病，帕金森氏病，亨廷顿舞蹈症，(脑脊髓)多发性硬化，由老年性或与年老相关的痴呆的神经衰退、外伤和常染色体显性神经垂体尿崩症(ADNDI)导致的神经变性。本发明还包括一种根据本发明的制剂的用途，用于预防和治疗由心脏和心血管损伤导致的大脑缺血。上述各种疾病的临床适应症都会导致CNS特定区域的功能丧失，并且对大部分病例来说，还会导致不可逆的精神和肉体上的残疾。对神经变性疾病中细胞巯基态进行调节性干涉的目的，一方面在于将损伤的发生降到最低，另一方面在于防止半影区内在细胞损伤不很严重的情况下出现的损伤。

背景技术

细胞的巯基/二硫化物态是进行生物代谢最为重要的基本前提条件之一。特别是对于蛋白质的功能，它在很大程度上受到巯基/二硫化物基团的氧化和还原的影响。

受几种不同的酶控制的二硫化物基团的断裂以及巯基的生成这种代谢过程的维持和正常功能，从细胞的多重生物功能来说，是细胞变异性的必要条件，尤其是对于细胞的生长和分化过程十分必要，这其中包括细胞程序性死亡及细胞保护和细胞去污的机制。这种代谢系统的紊乱以及巯基浓度的变化都会导致细胞功能的严重紊乱，这种紊乱仅能够在个别病人中受到局部限制；通常，这种紊乱会对大部分相关组织产生不利影响，甚至会波及到邻近组织或整个机体。

在神经变性疾病的发生和发展过程中，至今仍没有对细胞中被扰乱的巯基/二硫化物态所产生的作用进行充分的探究。因此，急需阐明巯基态和神经变性疾病病理生理学之间的关系，尤其是旨在寻找到能够治疗中枢神经系统疾病和损伤的强力有效药物，对于这一点但至今还没有等效的药物介入治疗。

在局部缺血后产生神经变性的过程中，除了内皮损伤以外(血脑屏障的屏蔽功能发生变化)，内皮保护机制中的抑制作用发挥了至关重要的作用，因为在局部缺血发生后，多种酶和再生系统就受到了抑制[1，2]。这一作用尤其在多次灌注期间有所体现。

不论对于患者患有中风这种情况，还对于出现其他神经变性疾病的情况来说，例如具有急性或慢性过程的疾病，比如帕金森氏病、阿尔茨海默氏病[3]、衰老过程、出血性中风[6]、兴奋毒性[7]、ALS以及外伤[8]，讨论了由于缺乏保护或再生系统或再生系统受到抑制而产生的神经性损伤。但现在还不能阐明其中产生真正影响的是什么。然而，如果组成这些内源性保护系统中的部分成分有缺陷，或是仅在较小的范围内出现(如锥体细胞所示的实例)，那么都将产生严重的后果。

缺乏细胞保护机制尤其会致使脂质发生过氧化，其结果是细胞膜的完整性丧失。细胞膜包覆的蛋白质也会受到这种机制的影响。例如在局部缺血的情况下，谷氨酸转运蛋白的功能将会受到影响[8]，其功能是将已经被释放的谷氨酸运回到细胞中，以此来防止这种神经递质分子在细胞外达到毒性浓度。

直到现在a-硫辛酸用作治疗外周糖尿病性多神经病中感觉错乱的辅药，仅取得了一般的成果(糖尿病学1995；38：1425-1433；糖尿病研究临床实践.1995；29：19-26；糖尿病护理1999；22：1296-1301；药物代谢评论1997；29：1025-1054；DE 43 43 592 C2)。此外，在德国专利DE 44 47 599 C2和欧洲专利EP 0 530446 B1中已经对a-硫辛酸在治疗其它神经紊乱例如耳鸣和突然性耳聋中的用途给予了保护。

在出现糖尿病症状的期间，细胞的保护机制不仅基于影响蛋白的糖依赖性修饰(蛋白质糖基化)，以及减少毒性酮体的生成，而且还基于α-硫辛酸的功能及其作为抗氧化剂的代谢产物[9]。

在欧洲专利EP0812590 A2和EP0427247 B1中揭示了α-硫辛酸作为外周细胞保护剂、镇痛剂以及抗炎药物的用途。

氨溴索(反-4-(2-氨基-3，5-二溴苄氨基)环己烷盐酸盐)可用于几种不同的给药形式中，作为治疗肺和支气管疾病中溶解粘液的药物(WO96/33704；GB 2,239,242；WO 01/05378)。此外，从德国专利DE3530761中可以了解到氨溴索用作抗尿酸过多的用途。氨溴索作为溶解粘液药剂的效果是基于它对支气管细胞表面活性剂产物的刺激作用，特别也基于它的自由基清除作用[10]。上述物质的抗氧化活性主要从肺部的细胞[11]以及感染肌体的结构[12]中检出。此外我们知道，谷胱甘肽代谢的调节酶直接受到加入的大剂量氨溴索的影响[13]。

血管紧张素转化酶(ACE)抑制剂用于治疗广谱心血管疾病是非常成功的。这类物质分别通过抑制血管紧张素I转化为血管紧张素II，和通过对激肽代谢的影响，来发挥降低血压的作用。对于影响细胞间氧化还原过程，必须区分出含有巯基的ACE抑制剂例如卡托普利(1-[(2S)-3-巯基-2-甲基-丙酰基-]L-脯氨酸)的作用，以及不含有巯基的ACE抑制剂例如依纳普利(1-{N-[(S)1-乙氧羰基-3-苯丙基-]L-丙氨酰基-}L-脯氨酸)的作用。前者作为自由基清除剂直接参与反应，因此具有抗氧化的作用，后者是不含有SH基团的抑制剂，也就基本上不能发挥此作用。然而，这两组物质的共同特性是他们通过对谷胱甘肽还原酶、谷胱甘肽过氧化物酶以及超氧化物岐化酶的调节，来影响谷胱甘肽氧化还原循环(《美国生理学和调节完整比较生理学杂志》，2000；278：572-577)。

在德国专利DE4420102A1中，α-硫辛酸与不同的药物组合，用于提高现有药物对心血管疾病和由糖尿病引起的疾病的治疗作用这一用途已经受到保护。除了α-硫辛酸与钙离子拮抗剂的组合以外(这种组合不属于目前描述的新型物质组合)，这篇专利的权利要求限制在这些用途范围内。在德国专利DE4420102 A1中，已对α-硫辛酸和钙离子拮抗剂的组合物专门用于治疗神经退化性疾病的方案提出保护。德国专利DE 4420102 A1主权利要求的主题是，不同的α-硫辛酸立体异构体区分为作为特定的有效制剂以及特定的药物配方。

发明内容

与其相反，本发明要求保护的全新物质组合和药物，以它们为基础减缓神经损伤的进程，这种损伤是导致神经变性疾病的病因以及这种疾病产生的后果。新型神经保护药物的制造是以能够对中枢神经系统(CNS)细胞的巯基/二硫化物态产生正面影响的物质为基础的。由于目前还没有预防和治疗神经变性疾病的有效药物(不论是治疗还是缓解症状)，因此当前记叙的发明潜在的发掘了药物的巨大潜力。

毫无疑问，本发明基于的是下述新发现：神经元具有较低含量的游离(还原)巯基基团，这个事实由于某种原因不利地影响了他们对于神经变性损伤的易损性。令人惊奇的是，有一种组合物能够显著的降低变性病变/损伤后的脑损伤，该组合物是两种或两种以上下述物质的组合：α-硫辛酸及其盐和异构体、氨溴索及其盐和前药、以及至少一种ACE抑制剂。潜在的，发现了一种有发展前景的建议，用于预防和治疗神经变性疾病，该疾病到目前还不能被处理，或者只能进行不充分的治疗。

在形成本发明的研究框架下，我们能够发现令人惊奇的事实，那就是细胞间巯基/二硫化物的代谢在神经变性疾病的发病机理中扮演了十分重要的角色。本发明的实验可以说明，极易损的CNS神经细胞(神经元)得到了较少量的游离巯基，因此与其它非神经细胞(例如星形细胞和神经胶质细胞)相比，其受到的损伤要小。这一点可从图1a、b所示的组织化学荧光照片，或从图2a、b所示的神经水平图中清楚地看到。此外，基于上述发现，巯基反应化合物作为神经变性过程中的保护机制的重要角色可以通过两种或多种下列物质对细胞巯基/二硫化物态的受控的影响进行说明，这些物质包括：α-硫辛酸、其盐和异构体、以及谷胱甘肽代谢调谐剂(氨溴索及其盐和前药以及一种ACE抑制剂)。

令人惊奇的是，通过组合两种或两种以上下述物质：α-硫辛酸及其盐和异构体、溴氨索及其盐和前药、以及至少一种ACE抑制剂，就能够在所述的试验中成功并显著的提高神经变性损伤后神经元的存活力。与这些结果相反的是，单独应用上述任何一种物质都没有效果。在目前的实验中，我们测定了变性神经元的比率，这是一种临床相关性极好的参数。

因此，本发明是关于含有两种或两种以上下述物质的药物制剂：α-硫辛酸及其盐和异构体，溴氨索及其盐和前药，以及至少一种血管紧张素转化酶(ACE)抑制剂，可选择与药学上可接受的常用载体、添加剂和辅料合用。

本发明还涉及这种药物制剂在预防和治疗神经变性疾病中的用途，所述药物制剂中含有两种或两种以上的下述物质：α-硫辛酸及其盐和异构体，溴氨索及其盐和前药，以及至少一种血管紧张素转化酶(ACE)抑制剂，可选择与药学上可接受的常用载体、添加剂和辅料合用。

因此，α-硫辛酸、氨溴索和/或ACE抑制剂对紊乱的巯基代谢的纠正获得了对于预防和治疗多种疾病的根本上的重要性，这些疾病有不同的起因，然而，特别是对于神经变性疾病的预防和治疗方法。在不囿于某种理论的前提下，可认为此处描述的化合物所发挥的作用来源于它们的巯基稳定功效，通过这种功效，利用本发明中的药剂新组合和目标组合，令人惊讶地引入神经协同作用。与之相反，单独应用一种物质则基本上没有效果。

选择的实验条件基本上满足临床情况[14，15]。所有被测化合物都是临床上已经认可的药物。因而，单一物质已经成功的通过了安全清除测试。所有的单一物质以及它们的组合物都是没有神经毒性的。

根据本发明，对具有如权利要求1所述特征的药物组合物提出保护。换言之：本发明包括了两种或两种以上的上述有效药物的组合，同时也包括全部三种有效药物的组合。从属权利要求2到9是优选的实施方案。权利要求10请求保护本发明制剂在一个指征中的应用。从属权利要求11和12是这些应用的优选实施方案。

根据本发明所述的药物组合物的成分之一可以是α-硫辛酸。本发明所用的术语“α-硫辛酸”可以理解为包括纯α-硫辛酸物质(该物质的化学名根据命名法应为(R)-5-(1，2-二硫戊环-3-基)戊酸)及其盐；然而，就目前的情形来看，只有药学上可接受的盐是适用的。术语“α-硫辛酸”也同样可以理解为包含其立体异构体、两种异构体的混合物以及外消旋混合物。也可以认为术语“α-硫辛酸”是包含任何一种α-硫辛酸的代谢物，其中包括所述酸的氧化和还原形式。同时也可以将上述α-硫辛酸物质组合使用。

谷胱甘肽代谢的效应物之一和可用于本发明的药品组合物的成分是具有通式I的氨溴索。

可直接使用上述结构的氨溴索，或优选使用其盐和/或其前药形式的物质。只能使用药学上可接受的盐。在本发明的范围内，术语“氨溴索的前药”可以认为是包含所有能够使用和/或给予的作为所述化合物前体的物质，以及在体内能够转化(“激活”)为活性药物的物质，例如当受到某种酶的作用时。

作为谷胱甘肽代谢中的第二个效应物和本发明药物组合物中的另一个可以想到的组分，使用了一种血管紧张素转化酶(ACE)抑制剂(或可以用几种抑制剂)。所有本身已知的血管紧张素转化酶抑制剂均可以使用。例如依那普利、卡托普利、赖索普利(lisopril)、雷米普利和螺普利，但本发明并不仅限于这些物质。与此同时，可以使用多个分子变体，这些变体可主要以其药物代谢动力学进行区分，同时具有相似的药物作用动力学全貌。

从得到的结果来看，分子中的游离巯基基团不是产生治疗效果的前提条件，因为当使用不含巯基基团的ACE抑制剂时，也能够得到相似的试验数据。根据本发明，优选使用下述化合物：

A)1-[(2S)-3-巯基-2-甲基丙酰基-]L-脯氨酸(卡托普利)，具有通式II所示的结构

B)1-{N²-[(S)-1-羧基-3-苯丙基]L-赖氨酰-}L-脯氨酸(赖诺普利)具有通式III所示的结构

C)1-{N-[(S)-1-乙氧羰基-3-苯丙基-]L-丙氨酰-}L-脯氨酸(依那普利)，具有通式IV所示的结构

D)(2S，3aS，6aS)-1-{(S)-N-[(S)-1-乙氧羰基-3-苯丙基-]丙氨酰-}-八氢环戊基[b]-吡咯-2-羧酸(雷米普利)，具有通式V所示的结构

还包括例如被取代、修饰或置换的脯氨酸化合物：

E)

螺普利(8S)-7-{(S)-N-[(S)-1-乙氧羰基-3-苯丙基-]丙氨酰-}-1，4-二硫杂-7-氮杂螺[4，4]壬烷-8-羧酸；

咪达普利(4S)-3-{N-[(S)-1-乙氧羰基-3-苯丙基-]L-丙氨酰-}1-甲基-2-氧代-4-咪唑烷羧酸；

莫昔普利(3S)-2-{N-[(S)-1-乙氧羰基-3-苯丙基-]L-丙氨酰-}1，2，3，4-四氢-6，7-二甲氧基-3-异喹啉羧酸。

就上述化合物的给药来讲，用于某人的优选药用剂量取决于所使用的化合物。

在本发明所述的药物组合物中，上述各组物质可以包含在每一个期望的组合物中。本发明的优选例子是含有下述物质的组合药物制剂：α-硫辛酸、其盐、立体异构体或代谢产物，以及氨溴索、其盐或其前药的组合；或是包含α-硫辛酸、其盐、立体异构体或代谢产物，以及一个或几个血管紧张素转化酶抑制剂的组合；再或是含有一个或几个血管紧张素转化酶抑制剂，以及氨溴索、其盐或其前药的组合；或是含有α-硫辛酸、其盐、立体异构体或代谢产物，以及氨溴索、其盐或其前药，与一个或几个血管紧张素转化酶抑制剂的组合。

本发明组合物中上述组分的含量可以在一个比较宽泛的范围内变化，这主要由本领域技术人员根据被给予组合物的病人情况来确定。疾病类型及其严重程度、病人的状态、体重以及患者的代谢参数、给药途径的选择，这些都是给药剂量的重要参考变量。α-硫辛酸、其盐或异构体的治疗有效量—与本发明药物组合物中含有的其它成分的有效剂量一样—是由患者的状况决定，并且决定性地取决于本领域用药的常用剂量，以及患者的相关参数，例如上述参数。

在本发明的优选实施方案中，用于患者的人类用药的药物组合物中含有的α-硫辛酸的量为30到1200mg/天，优选200到600mg/天。上述剂量是每天给药的量，可以每日单剂量或多剂量的方式给予患者，最优选每日至多三剂量。用于患者的人类用药的药物组合物中，氨溴索的剂量优选为7.5到90mg/天，尤其优选60到75mg/天，所述剂量也是每日所用的剂量，其可分别以每日单剂量或多剂量的方式给予患者，最优选每日至多三剂量。用于人类用药的ACE抑制剂的剂量为1到50mg/天，尤其优选5到20mg/天，所述剂量也是每日所用的剂量，其可分别以每日单剂量或多剂量的方式给予患者，最优选每日至多三剂量。

此外，药物组合物中还可含有常用的载体、添加剂和/或辅料，这取决于用药部位、给药形式或其它要求。这些物质可以包含例如水性溶剂、稳定剂、悬浮剂、分散剂、润湿剂、分解质(此处指用于口服给药组合物的片剂形式中)、及食品添加剂。

本发明药物组合物可以由本领域已知的方法制成任意剂型。例如，优选剂型包括有：含有有机和/或无机溶剂的溶液剂、颗粒剂、气雾剂、粉剂、悬浮剂、乳剂、片剂(也可选用为咀嚼的片剂)和/或包衣片剂，能够延缓或延迟有效药物释放的片剂、胶囊剂以及透过皮肤给药的系统。在这些剂型中，本发明药物组合物的组份可以存在于单一的制剂形式中，也可以存在于各自独立的制剂形式中。

本发明使用的组合制剂可以常规的药理给药形式给予患者，作预防或治疗用。可能的给药形式有：片剂(耐胃液片、包衣片)、粉剂、颗粒剂、胶囊剂、溶液剂、乳液、悬浮剂、气雾剂、透皮给药系统、能够使一种或全部有效药物延缓或延迟释放的给药形式，或是能够不延迟药物释放的给药形式。各组分可分别以独立的制剂形式给药。此外，也可以将这些各自独立的制剂以单一的剂型施用，其中符合特定病患的单一成分的浓度用量分可以下述形式给予：片剂(耐胃液片、包衣片)、粉剂、颗粒剂、胶囊剂、溶液剂、乳剂、悬浮剂、气雾剂、透皮给药系统、对一种或所有有效药剂具有延缓或延迟释放效果的给药形式或是能够不延迟药物释放的给药形式。

本发明药物组合物可以各种任意的给药途径给予患者。并不限于下述实例：口服、口腔内、肺、鼻、经皮、静脉、皮下、皮内、肌内、直肠、阴道或鞘内给药，任选的加入本领域已知的载体、辅料和添加剂，也可与食品添加剂组合。各组分可分别以独立的制剂形式给药。此外，也可以将这些各自独立的制剂以单一的剂型给药，其中根据特定的病例其浓缩的单独组分可以下述系统的方式给予：例如口服、口腔内、肺、鼻、经皮、静脉、皮下、皮内、肌内、直肠、阴道或鞘内给药，可任选加入本领域已知的载体、辅料和添加剂，也可与食品添加剂组合。各成分可以单一制剂的形式使用。此外，那些单一的制剂可以一种模式给药，其中符合特定病患的独立成分的浓度量以系统的给药方式使用，例如口服、口腔内、肺、鼻、经皮、静脉、皮下、皮内、肌内、直肠、阴道或鞘内给药，可任选加入本领域已知的载体、辅料和添加剂，也可与食品添加剂组合。

本发明的药用组合物，其中包含两种或两种以上的前面详述的组分，在本发明的含义中，特别适合用于预防和治疗中枢神经系统(CNS)变性疾病。对这样的病例可用各自独立的制剂同时进行治疗、也可按独立的时间段实施间歇治疗。有利的是，本发明药物组合物可以用于预防和治疗下述疾病：局部缺血和出血性中风、肌萎缩性侧索硬化、阿尔茨海默氏病、帕金森氏病、亨廷顿舞蹈症，(脑脊髓)多发性硬化、老年人、痴呆、颅脑外伤和常染色体显性神经垂体尿崩症(ADNDI)中出现的神经变性。在另外的实施方案中，本发明药物组合物也可以用于预防和治疗由心脏和心血管损伤导致的脑局部缺血。

本发明的实施例和附图进一步描述了本发明药物组合物及其在预防和治疗CNS变性疾病中的用途，其中药物组合物包含两种或两种以上下述物质的组合：α-硫辛酸、氨溴索以及血管紧张素转化酶抑制剂。所提供的实施例仅作为对本发明优选实施方案的说明，并不对本发明形成任何限制。

附图说明

图1a和1b显示的是器官特异(organotypical)海马切片组织的化学荧光照片，其中b图为CMTMR荧光(红色)和NT荧光(绿色)两种信号叠加的效果。

图2a和2b显示的是神经水平图，其中b图为CMTMR荧光(红色)和NT荧光(绿色)两种信号叠加的效果。

图3显示了α-硫辛酸(10μg/ml)、氨溴索(10μM)和依那普利(20μg/ml)组合物(以下称为“鸡尾酒”)对OGD后神经细胞生存的作用。

在图4a到c显示的是将鸡尾酒产生的神经保护作用与OGD后的标准损伤以及应用单一物质产生的作用进行比较。

具体实施方式

实施例1：

实施例1阐述了一个全新且令人惊叹的发现，根据这一发现，在正常的生理条件下，神经细胞比非神经细胞具有更少的游离巯基基团。5-[和6]-(((氯甲基-)苯甲酰基-)氨基-)四甲基若丹明(CMTMR)荧光染色用来标记游离的巯基基团。CMTMR中的活性的氯甲基基团与蛋白质的游离巯基基团进行反应，而与细胞类型无关，所以在UV区域进行特定的激发后，就可使其可见。

图1显示的是器官特异(organotypical)海马组织切片的图像。令人惊讶的是，正是那些海马结构中明显易损的神经元(锥体细胞)，显示出含量较低的游离巯基基团，因此几乎检测不到。

图1b和2b清楚明白的说明了这一点。这些图中显示了双标记结果。除了对游离巯基基团进行特定标记外(CMTMR)，也将神经追踪(NT)作为对神经的标记。图2a显示了CMTMR荧光(红色)和NT荧光(绿色)。这两种荧光信号不共同出现在局部细胞中，这就说明了NT和CMTMR可大量定位在各种不同类型的细胞中，例如分别出现在神经细胞或非神经细胞中。图1b和2b显示了两种信号的叠加图像。

实施例2：

物质组合对神经变性后神经细胞生存的影响

为了检测可与巯基反应的物质的神经保护作用，我们对器官特异(organotypical)海马组织切片实施短暂性缺血的处理过程[14-16]，这一过程按照我实验室的标准进行。通过这样的步骤获得了三维培养外植体，其对后续的临床试验具有较高的预测价值。在那些含有神经细胞和非神经细胞的组织培养物中，仍然保留着大量极复杂的胞间连接。这对整个CNS的功能是非常重要的。脑组织培养物出现了导致神经细胞凋亡的变性情况，作为实际的临床情形的模拟。

组织切片(375μm)由鼠海马组织制备(P7)。那些切片培养物的培养是在孔径为0.02μm的膜嵌入物上进行的。培养10到12天后(于孵化器中，37℃；3.3％CO₂；相对空气湿度98％)，组织培养物的重建过程完成，然后通过对组织切片实施短暂的氧/葡糖糖缺失来模拟与临床相关的神经变性状况。各物质的作用以标准损伤变化的形式来衡量(载体应用)。

图3显示了α-硫辛酸(10μg/ml)、氨溴索(10μM)和依那普利(20μg/ml)组合物(以下称为“鸡尾酒”)对OGD后神经细胞生存的作用。分别定量度量当应用鸡尾酒和不应用鸡尾酒时标准OGD后的神经损伤，同时度量应用鸡尾酒自身后的损伤(任意的物质毒性)。表1概括了相应的随机试验的统计参数。用受损的表面面积百分比来表示损伤程度。我们将每一个组织切片的受损表面积与总表面积相比就可以得到上述百分比数据。

                               表1

特异度            数量      平均值      中值      SEM

OGD对照            7        12.45       12.8      1.59

OGD对照+

鸡尾酒             7        6.69        7.73      2.1

鸡尾酒无OGD        5        0.42        0.08      0.23

令人惊叹的是，通过使用本发明组合物可以明显和显著的降低神经损伤(其中组合物是在权利要求中请求保护的)，其包含前面详述的具体组分。定量的神经保护作用值达到了约40到45％。该试验同时还表明了，在没有变性状况出现的情况下，实验用组合物确实对神经细胞没有损伤。这对于该物质或组合物临床应用于治疗和预防神经变性疾病是一个基本的前提条件。

实施例3：

本发明请求保护的组合物的联合效果和单一组份作用的比较

在这些实验过程中我们检测到，应用单一物质不能产生明显的神经保护作用。这些实验是基于实施例2中描述的方案。在图4a到c显示的上述实验过程中，将鸡尾酒产生的神经保护作用与OGD后的标准损伤以及应用单一物质产生的作用进行比较。从所有的实验中我们都可以清楚的得知，没有任何一种被单独测试的物质能够降低神经变性后出现的损伤，而鸡尾酒却可以提供显著的保护作用。表2a到c显示了相关的统计参数。

                           表2a)

特异度        数量        平均值     中值     SEM

OGD对照        9          11.70      10.8     1.71

OGD对照+

鸡尾酒         9          7.86       5.53     2.18

OGD对照+

α-硫辛酸      9          14.82      13.54    3.40

                           表2b)

特异度        数量        平均值     中值     SEM

OGD对照        9          13 .37     11.99    1.22

OGD对照+

鸡尾酒         9          9.91       8.65     1.57

OGD对照+

氨溴素         9          10.79      8.32     1.88

                           表2c)

特异度        数量        平均值     中值     SEM

OGD对照        11         13.98      12.27    1.63

OGD对照+

鸡尾酒         11         9.62       7.57     1.95

OGD对照+

依那普利       10         11.23      8.70     1.76

与鸡尾酒(包含α-硫辛酸、氨溴索和ACE抑制剂的组合物)形成对比的是，不论是α-硫辛酸、氨溴索还是ACE抑制剂，如果单独使用，都不能在短暂OGD后显著降低神经损伤。

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11.Teramoto，S.等，《氨溴索对采集自患有或没有慢性阻塞性肺部疾病患者支气管肺泡灌洗细胞的活性氧组分的自发或刺激性生殖的影响》Pharmacology，1999.59(3)：135-141页

12.Gibbs，B.F.等，《氨溴索抑制人类白细胞和肥大细胞中组氨、白三烯和细胞活素的释放》Inflamm Res，1999.48(2)：86-93页

13.Jablonka，S.等，《氨溴索对狗肺切除术后肺部和血浆过氧化进程的影响》Arch Vet Pol，1992.32(1-2)：57-66页

14.Stoppini，L.，P.A.Buchs和D.Muller，《一种神经组织器官特异培养物的一种简单培养方法》J Neurosci Methods，1991.37(2)：173-182页

15.Breder，J.等，《器官特异海马趾切片培养物作为一种抗缺血损伤神经保护药物研究的体外模型》Schriften des Forschungszentrums Jülich，1999.3

16.Striggow，F.等，《低浓度蛋白酶凝血酶是海马神经保护抗缺血的内源性介质，但高浓度会引起变性》Proc Natl Acad Sci USA，2000.97(5)：2264-2269页。

Claims (12)

1.药物组合物，其中含有两种或两种以上的下述物质：α-硫辛酸及其盐和异构体，氨溴索及其盐和前药，以及血管紧张素转化酶(ACE)抑制剂，可选择与常用的药学上可接受的载体、添加剂和辅料混合。

2.根据权利要求1所述的药物组合物，其中包含α-硫辛酸或其盐或其异构体，和氨溴索或其盐或其前药的组合。

3.根据权利要求1所述的药物组合物，其中包含α-硫辛酸或其盐或其异构体，和至少一个血管紧张素转化酶抑制剂的组合。

4.根据权利要求1所述的药物组合物，其中包含氨溴索或其盐或其前药，和至少一个血管紧张素转化酶抑制剂的组合。

5.根据权利要求1到4任意一项所述的药物组合物，其中包含α-硫辛酸或其盐或其异构体，和氨溴索或其盐或其前药，以及至少一个血管紧张素转化酶抑制剂的组合。

6.根据权利要求1到5任意一项所述的药物组合物，其中还包含一种或几种已知的载体、辅料和/或添加剂。

7.根据权利要求1到6任意一项所述的药物组合物，其中含有α-硫辛酸或其盐或其异构体，其含量范围是30到1200mg/天，优选范围是200到600mg/天；和/或氨溴索或其盐或其前药，其含量范围是7.5到90mg/天，优选范围是60到75mg/天；和/或至少一个血管紧张素转化酶抑制剂，其含量范围是1到50mg/天，优选范围是5到20mg/天。

8.根据权利要求1到7任意一项所述的药物组合物，其中组合物用于口服、口腔内、肺、鼻、经皮、静脉、皮下、皮内、肌内、直肠、阴道和鞘内给药。

9.根据权利要求1到7任意一项所述的药物组合物，其中组合物的形式为：片剂、粉剂、颗粒剂、胶囊剂、溶液剂、乳剂、悬浮剂、气雾剂、经皮给药系统、栓剂，以及能够延缓单一药物或所有有效药物释放的给药形式。

10.根据权利要求1到9的一种或几种药物组合物用于预防和治疗神经变性疾病的用途。

11.根据权利要求10所述的用途，其中用于预防和治疗下述疾病：缺血或出血性中风，肌萎缩性侧索硬化，阿尔茨海默氏病，帕金森氏病，亨廷顿舞蹈症，(脑脊髓)多发性硬化，老年人、痴呆、颅脑外伤和常染色体显性神经垂体尿崩症中出现的神经变性。

12.根据权利要求10所述的用途，其中用于预防和治疗由心脏和心血管损伤导致的脑缺血。

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