RU2530601C2 - Ингибитор образования цинк-зависимых димеров бета-амилоида - Google Patents
Ингибитор образования цинк-зависимых димеров бета-амилоида Download PDFInfo
- Publication number
- RU2530601C2 RU2530601C2 RU2012142334/15A RU2012142334A RU2530601C2 RU 2530601 C2 RU2530601 C2 RU 2530601C2 RU 2012142334/15 A RU2012142334/15 A RU 2012142334/15A RU 2012142334 A RU2012142334 A RU 2012142334A RU 2530601 C2 RU2530601 C2 RU 2530601C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- amyloid
- zinc
- beta
- chip
- enalaprilat
- Prior art date
Links
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
- A61K31/401—Proline; Derivatives thereof, e.g. captopril
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/55—Protease inhibitors
- A61K38/556—Angiotensin converting enzyme inhibitors
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Public Health (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- Neurology (AREA)
- Vascular Medicine (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Hospice & Palliative Care (AREA)
- Immunology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Psychiatry (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Abstract
Настоящее изобретение относится к использованию эналаприлата, водорастворимого вещества на основе дипептида [L-аланил]-[L-пролин], в области медицины. Предложно применение эналаприлата в качестве средства для ингибирования образования цинк-зависимых димеров бета-амилоида. Технический результат заключается в ингибировании образования цинк-зависимых димеров бета-амилоида. 3 ил., 1 табл.
Description
Область техники, к которой относится изобретение
Изобретение относится к использованию эналаприлата для ингибирования цинк-индуцированных димеров бета-амилоида.
Уровень техники
Избыточное накопление бета-амилоида в тканях организма человека в виде внеклеточных надмолекулярных ансамблей - амилоидных бляшек - является одним из главных нейроморфологических признаков ряда нейродегенеративных патологий, включающих, например, болезнь Пика, синдром Дауна [1]. Одним из признанных путей поиска средств лечения таких заболеваний является поиск ингибиторов образования водорастворимых олигомеров бета-амилоида [2]. Необходимым условием образования агрегатов является димеризация мономеров бета-амилоида [3, 4, 5]. Ионы цинка играют критическую роль при агрегировании бета-амилоида in vivo [6]. В настоящее время для моделирования олигомеризации бета-амилоида в отсутствии ионов двухвалентных металлов широко используются оптические биосенсоры [7]. Однако в условиях экспериментов с использованием оптических биосенсоров ионы цинка вызывают необратимую полимеризацию бета-амилоида на поверхности оптического чипа, что приводит этот чип в негодность и, соответственно, не позволяет проводить исследования по скринингу потенциальных ингибиторов цинк-зависимой олигомеризации бета-амилоида.
Сущность изобретения
Настоящее изобретение относится к использованию эналаприлата для ингибирования цинк-индуцированных димеров бета-амилоида. Недавно нами было установлено, что домен 1-16 бета-амилоида является молекулярной детерминантой цинк-зависимой димеризации бета-амилоида [[8, 9]. Эти данные позволили разработать модельную систему цинк-зависимой димеризации бета-амилоида на основе использования биосенсорной системы, в которой иммобилизованный на поверхности оптического чипа фрагмент 1-16 бета-амилоида образует устойчивые цинк-связанные димеры с синтетическим аналогом участка 1-16 бета-амилоида, присутствующим наряду с ионами цинка в качестве водорастворимого аналита в проточной буферной системе при физиологических значениях pH. Таким образом, данная система является моделью цинк-зависимой димеризации бета-амилоида и предоставляет возможность в режиме реального времени оценить способность различных водорастворимых веществ препятствовать образованию цинк-связанных димеров участка 1-16 бета-амилоида. В настоящем изобретении с помощью этой системы было найдено, что эналаприлат является ингибитором цинк-зависимой димеризации бета-амилоида.
Технический результат
Технический результат, достигаемый при использовании патентуемого изобретения, заключается в ингибировании цинк-зависимой димеризации бета-амилоида.
Пример осуществления изобретения
Для определения ингибирующего эффекта эналаприлата на образование цинк-связанных димеров бета-амилоида была задействована экспериментальная модель in vitro цинк-зависимой димеризации бета-амилоида на основе оптического биосенсора поверхностного плазмонного резонанса «BIAcore Т100» (GE Healthcare, США). В качестве оптического чипа, на поверхности которого впоследствии должен находиться иммобилизованный синтетический аналог участка 1-16 бета-амилоида, был использован оптический четырехканальный чип «СМ5» с гидрофильной карбоксиметилированной декстрановой матрицей. Все анализы на этом термостатированном чипе проводились при температуре 25°C. Иммобилизация синтетического пептида Acetyl-DAEFRHDSGYEVHHQKGGGGC-Amide («Aβ1-16-G4-C»), содержащего на своем N-конце фрагмент 1-16 бета-амилоида, на поверхность чипа «СМ5» проводилась в соответствии с протоколом формирования тиольной связи, описанном в «Sensor surface handbook)) (GE Healthcare, США). Пептид был иммобилизован посредством образования тиольной связи в 10 мМ растворе ацетата натрия (pH 4.5). Для регенерации был использован буфер «HBS», содержащий 10 мМ HEPES, 3 мМ EDTA, 0.005% Р20 и 150 мМ NaCl (pH 7.4). Рабочий буфер содержал 50 мМ HEPES (pH 6.8) и 100 мкМ ионов цинка. Перед использованием все буферные растворы фильтровались (0.45 мкм, nylon). Скорость потока при иммобилизации составляла 5 мкл/мин. Карбоксиметилированная декстрановая матрица была активирована инъекцией смеси (1:1) растворов 1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)-carbodiimide (EDC) и N-hydroxysuccinimide (NHS): 30 мкл, 400 мМ EDC, 100 мМ NHS, а затем инъекцией раствора 80 мМ 2-(2-pyridinyldithio)-ethaneamine (PDEA) в 0.1 М борате натрия (pH 8.5). Далее раствор пептида «Aβ1-16-G4-C» (0.05 мг/мл в 0.1 М натрий-ацетатном буфере, pH 4.0, содержащем 1 М NaCl был введен в активированный канал чипа. Непрореагировавшие дисульфидные группы на поверхности чипа «СМ5>> были нейтрализованы с помощью раствора 50 мМ цистеина в 0.1 М натрий-ацетатном буфере (pH 4.0). Уровень сигнала иммобилизованного лиганда «Aβ1-16-G4-C)) составил 1023 RU. В контрольном канале чипа процедура иммобилизации была проведена аналогично за исключением этапа активации поверхности. Сенсограмма процесса иммобилизации приведена на рис. 1.
Для проведения экспериментов по оценке ингибирующего эффекта различных соединений на образование цинк-связанных димеров домена 1-16 бета-амилоида было приготовлено несколько рабочих буферов (таблица 1). С учетом тестируемых соединений образцы водорастворимого аналита «Аβ1-16» были приготовлены в соответствующем рабочем буфере. Каждый аналит (общий объем 25 мкл) затем был пропущен над поверхностью чипа при скорости 5 мкл/мин в течение 300 секунд. Далее поверхность чипа подвергалась прохождению рабочего буфера в отсутствии аналита в течение 300 секунд и чип был регенерирован регенерационным буфером (20 мкл). Сигнал из контрольного канала чипа (без иммобилизованного лиганда) вычитался из сигнала, соответствующего каналу с иммобилизованным лигандом.
В качестве контроля образцы водорастворимого аналита «Аβ1-16» были приготовлены в рабочих буферах №1 и №2 (см. табл.1). Ранее уже было показано, что в отсутствие ионов цинка взаимодействие аналита «Аβ1-16» с иммобилизованным «Аβ1-16-G4-C» не наблюдается, тогда как в присутствии ионов цинка на поверхности оптического чипа регистрируется димеризация с участием иммобилизованного «Aβ1-16-G4-C» и аналита «Аβ1-16» [10]. Исходя из данной предпосылки в качестве рабочего буфера, содержащего тестируемые соединения, был использован буфер №2.
На рис. 2 приведены сенсограммы связывания водорастворимого синтетического аналога участка 1-16 бета-амилоида, Acetyl-DAEFRHDSGYEVHHQK-Amide («Аβ1-16»), с иммобилизованным пептидом «Aβ1-16-G4-C» в присутствии эналаприлата, лизиноприла и каптоприла, а также в их отсутствие. На рис. 3 показана гистограмма (на основании вышеуказанных сенсограмм) уровней сигналов оптического биосенсора, на чипе которого иммобилизован пептид «Aβ1-16-G4-C», а в качестве водорастворимого аналита использовался пептид «Аβ1-16» в присутствии ионов цинка (100 мкМ) при pH pH 6.8 в зависимости от наличия в пробе аналита эналаприлата, каптоприла или лизиноприла. В отсутствие этих веществ уровень сигнала (76 RU) максимальный и соответствует образованию цинк-связанного димера пептидов «Aβ1-16» и «Aβ1-16-G4-C». Наличие эналаприлата в пробе аналита резко снижает количество димеров, что отражается на уменьшении сигнала оптического биосенсора до 10 RU, что по техническим рекомендациям производителя данного прибора находится за порогом достоверности измерений и указывает на отсутствие образования димеров. В то же время остальные протестированные соединения, лизиноприл и каптоприл, которые по своей химической структуре и физико-химическим свойствам являются аналогами эналаприлата [11], показали отсутствие значимого влияния на ингибирование образования димеров бета-амилоида. Полученные данные свидетельствуют, что эналаприлат является специфическим ингибитором образования цинк-зависимых димеров бета-амилоида.
Список использованной литературы
[1] С.И. Гаврилова. Фармакотерапия болезни Альцгеймера. Пульс, Москва, 2007.
[2] Е. Karran, М. Mercken, В.De Strooper, The amyloid cascade hypothesis for Alzheimer's disease: an appraisal for the development of therapeutics, Nat Rev Drug Discov 10 (2011) 698-712.
[3] M.T. Fodero-Tavoletti, V.L. Villemagne, C.C. Rowe, C.L. Masters, K.J. Barnham, R. Cappai, Amyloid-β: The seeds of darkness, The International Journal of Biochemistry & amp; Cell Biology 43 (2011) 1247-1251.
[4] M.E. Larson, S.E. Lesne, Soluble Abeta oligomer production and toxicity, J Neurochem 120 Suppl 1 (2012) 125-139.
[5] G. Shankar, S. Li, T. Mehta, A. Garcia-Munoz, N. Shepardson, I. Smith, F. Brett, M. Farrell, M. Rowan, C. Lemere, C. Regan, D. Walsh, B. Sabatini, D. Selkoe, Amyloid-beta protein dimers isolated directly from Alzheimer's brains impair synaptic plasticity and memory, Nat Med 14 (2008) 837-842.
[6] A.I. Bush, The Metal Theory of Alzheimer's Disease, Journal of Alzheimer's Disease (2012).
[7] X.R. Cheng, V.W. Sze Hung, S. Scarano, M. Mascini, M. Minunni, K. Kerman, Label-free methods for probing the interaction of clioquinol with amyloid-[small beta], Analytical Methods 4 (2012) 2228-2232.
[8] Y. Miller, B. Ma, R. Nussinov, Zinc ions promote Alzheimer Abeta aggregation via population shift of polymorphic states, Proc Natl Acad Sci U S A 107 (2010) 9490-9495.
[9] P.O. Tsvetkov, A.A. Kulikova, A.V. Golovin, Y.V. Tkachev, A.I. Archakov, S.A. Kozin, A.A. Makarov, Minimal Zn(2+) binding site of amyloid-beta, Biophys J 99 (2010) L84-86.
[10] S.A. Kozin, Y.V. Mezentsev, A.A. Kulikova, M.I. Indeykina, A.V. Golovin, A.S. Ivanov, P.O. Tsvetkov, A.A. Makarov, Zinc-induced dimerization of the amyloid-beta metal-binding domain 1-16 is mediated by residues 11-14, Mol Biosyst 7 (2011) 1053-1055.
[11] P.A. Todd, R.C. Heel, Enalapril. A review of its pharmacodynamic and pharmacokinetic properties, and therapeutic use in hypertension and congestive heart failure, Drugs 31 (1986) 198-248.
№ | Состав рабочих буферов |
1 | 50 мМ HEPES, pH 6.8 |
2 | 50 мМ HEPES, 100 мкМ ZnCl2, pH 6.8 |
3 | 50 мМ HEPES, 100 мкМ ZnCl2, 100 мкМ эналаприлат, pH 6.8 |
4 | 50 мМ HEPES, 100 мкМ ZnCl2, 100 мкМ каптоприл. pH 6.8 |
5 | 50 мМ HEPES, 100 мкМ ZnCl2, 100 мкМ лизиноприл, pH 6.8 |
Claims (1)
- Применение эналаприлата в качестве средства для ингибирования образования водорастворимых цинк-зависимых димеров бета-амилоида.
Priority Applications (4)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2012142334/15A RU2530601C2 (ru) | 2012-10-05 | 2012-10-05 | Ингибитор образования цинк-зависимых димеров бета-амилоида |
DE102013110890.3A DE102013110890A1 (de) | 2012-10-05 | 2013-10-01 | Verwendung von Enalaprilat zur Behandlung Neurodegenerativer Krankheiten |
GB1317550.0A GB2508702A (en) | 2012-10-05 | 2013-10-03 | Enalaprilat in the treatment of neurodegenerative diseases |
FR1359664A FR2996456A1 (fr) | 2012-10-05 | 2013-10-04 | Utilisation de l'enalaprilate dans le traitement des maladies neurodegeneratives |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2012142334/15A RU2530601C2 (ru) | 2012-10-05 | 2012-10-05 | Ингибитор образования цинк-зависимых димеров бета-амилоида |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2012142334A RU2012142334A (ru) | 2014-04-10 |
RU2530601C2 true RU2530601C2 (ru) | 2014-10-10 |
Family
ID=49630167
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2012142334/15A RU2530601C2 (ru) | 2012-10-05 | 2012-10-05 | Ингибитор образования цинк-зависимых димеров бета-амилоида |
Country Status (4)
Country | Link |
---|---|
DE (1) | DE102013110890A1 (ru) |
FR (1) | FR2996456A1 (ru) |
GB (1) | GB2508702A (ru) |
RU (1) | RU2530601C2 (ru) |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2285525C2 (ru) * | 2001-05-28 | 2006-10-20 | Зерумверк Бернбург Аг | Лекарственное средство, содержащее эффектор метаболизма глутатиона вместе с альфа-липоевой кислотой, для терапии при пересадке почек |
RU2305679C2 (ru) * | 2001-12-14 | 2007-09-10 | Ф.Хоффманн-Ля Рош Аг | Пролекарства на основе d-пролина |
Family Cites Families (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5098889A (en) * | 1990-09-17 | 1992-03-24 | E. R. Squibb & Sons, Inc. | Method for preventing or inhibiting loss of cognitive function employing a combination of an ace inhibitor and a drug that acts at serotonin receptors |
DE10303229B4 (de) * | 2003-01-28 | 2007-07-26 | Keyneurotek Ag | Ambroxol und Inhibitoren des Angiotensin Converting-Enzyms (ACE) umfassende Arzneimittel Arzneimittel-Zubereitung und ihre Verwendung zur Behandlung von neurodegenerativen Erkrankungen |
WO2005011736A1 (ja) * | 2003-07-30 | 2005-02-10 | Tohoku Techno Arch Co., Ltd. | アルツハイマー病の予防および/または治療剤 |
-
2012
- 2012-10-05 RU RU2012142334/15A patent/RU2530601C2/ru not_active IP Right Cessation
-
2013
- 2013-10-01 DE DE102013110890.3A patent/DE102013110890A1/de not_active Withdrawn
- 2013-10-03 GB GB1317550.0A patent/GB2508702A/en not_active Withdrawn
- 2013-10-04 FR FR1359664A patent/FR2996456A1/fr active Pending
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2285525C2 (ru) * | 2001-05-28 | 2006-10-20 | Зерумверк Бернбург Аг | Лекарственное средство, содержащее эффектор метаболизма глутатиона вместе с альфа-липоевой кислотой, для терапии при пересадке почек |
RU2305679C2 (ru) * | 2001-12-14 | 2007-09-10 | Ф.Хоффманн-Ля Рош Аг | Пролекарства на основе d-пролина |
Non-Patent Citations (3)
Title |
---|
PARVATHY S. et al. Alzheimer's amyloid precursor protein alpha-secretase is inhibited by hydroxamic acid-based zinc metalloprotease inhibitors: similarities to the angiotensin converting enzyme secretase. Biochemistry 1998 Feb 10; 37(6): 1680-5 Реферат [он-лайн] [найдено 2013-11-08] (Найдено из базы данных Pubmed PMID: 9484239). YAMADA K. et al. Effect of a centrally active angiotensin-converting enzyme inhibitor, perindopril, on cognitive performance in a mouse model of Alzheimer’s disease. Brain Res. 2010 Sep. 17; 1352:176-86 Реферат [он-лайн] [найдено 2013-11-08] (Найдено из базы данных Pubmed PMID: 20627092). * |
ZOU K. et al. A beta42-toAbeta40- and angiotensin-converting activities in different domains of angiotensin-converting enzyme. J.Biol. Chem. 2009 Nov 13; 284(46):31914-20 Реферат [он-лайн] [найдено 2013-11-08] (Найдено из базы данных Pubmed PMID: 19773553) * |
ЭНЦИКЛОПЕДИЯ ЛЕКАРСТВ М., РЛС 2001 с.1036-1037, статьи "эналаприлат", "энам", "энап" . * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
DE102013110890A1 (de) | 2014-04-10 |
GB2508702A (en) | 2014-06-11 |
FR2996456A1 (fr) | 2014-04-11 |
GB201317550D0 (en) | 2013-11-20 |
RU2012142334A (ru) | 2014-04-10 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP7301741B2 (ja) | 補体活性のモジュレータ | |
Grabbe et al. | Functional roles of ubiquitin-like domain (ULD) and ubiquitin-binding domain (UBD) containing proteins | |
JP6134268B2 (ja) | 創傷治癒を促進するためのグランザイムb阻害剤組成物、方法および使用 | |
US20210077572A1 (en) | Modulators of complement activity | |
EP2632938B1 (fr) | Compose peptidique utile pour l'inhibition de la formation de plaques amyloïdes | |
BR112020010916A2 (pt) | moduladores da atividade do complemento | |
US20210292385A1 (en) | Stabilized BCL9 Peptides for Treatment of Aberrant WNT Signaling | |
Vasconcelos et al. | 3D chitosan scaffolds impair NLRP3 inflammasome response in macrophages | |
AU2017281980B2 (en) | Wnt inhibitors for use in the treatment of fibrosis | |
Meyers et al. | Acute AT1R blockade prevents isoproterenol-induced injury in mdx hearts | |
Shen et al. | FPS-ZM1 alleviates neuroinflammation in focal cerebral ischemia rats via blocking ligand/RAGE/DIAPH1 pathway | |
RU2530601C2 (ru) | Ингибитор образования цинк-зависимых димеров бета-амилоида | |
McMillan et al. | Endogenous mas‐related G‐protein‐coupled receptor X1 activates and sensitizes TRPA1 in a human model of peripheral nerves | |
JPWO2006129662A1 (ja) | エンドトキシン試験法 | |
WO2017117386A1 (en) | Methods of treating cancer using network brakes | |
CN106413744B (zh) | 用于在出血性疾病治疗中改善止血的人凝血酶原和活化的因子x的组合物 | |
KR20140012093A (ko) | 누공성 크론병의 치료 | |
JP6397122B2 (ja) | 血管新生関連疾患を治療するためのペプチドの使用 | |
Zhang et al. | Expression of N-Terminal Cysteine Aβ42 and Conjugation to Generate Fluorescent and Biotinylated Aβ42 | |
Sahajpal et al. | Deranged metabolic profile and identification of biomarkers in the vitreous humour of patients with proliferative diabetic retinopathy | |
US8895511B2 (en) | Use of sarcoplasmic CA2+-ATPase type 2 protein for diagnosing and treating learning or mental disorders | |
US10828275B2 (en) | Selective targeting of procoagulant platelets | |
Yang et al. | m6A methyltransferase METTL3 contributes to sympathetic hyperactivity post-MI via promoting TRAF6-dependent mitochondrial ROS production | |
US11541101B1 (en) | LEMD3 antagonizes TGF-beta-driven Smad2/3 transcription in a stiffness-dependent fashion in both the nucleus and cytosol | |
RU2778811C2 (ru) | Модуляторы активности комплемента |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20201006 |