CN1528813A - 糖蛋白的生产方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及糖蛋白的生产方法，包括如下步骤：第一步在蛋白和多糖原料中，加入蒸馏水搅拌均匀，待完全溶解后加入有机溶剂，其中蛋白和多糖按1∶1重量使用，原料用量占总体积1.5％～4％，蒸馏水用量为总体积5％～20％；有机溶剂为总体积80％～95％；调整温度40℃～70℃；第二步反应完毕，取出产物，透析24～48小时；第三步透析后的溶液离心10～15min，除去不溶解部分，冷冻干燥或真空干燥；本发明采用有机相反应介质控制蛋白—多糖之间发生美拉德反应，通过控制其水分活度，提高反应效率，缩短反应时间；不必再将产物过柱纯化除去未反应的蛋白以及多糖，并且产物颜色呈乳白色，可以广泛应用于各类食品中。

Description

糖蛋白的生产方法

(一)技术领域

本发明涉及蛋白-多糖共价复合物生产技术领域，具体是指一种蛋白-多糖高分子复合物的制备方法。

(二)背景技术

蛋白质属于高分子并且具备两亲结构，所以具有独特的表面活性，但是在工业应用中却有很大的局限性，因为蛋白质遇热、有机溶剂等不稳定并且易受到蛋白分解。所以，若想加宽蛋白质在食品行业中的应用，就必须修饰蛋白质使其达到一种稳定的状态。通过有控制地使其自发地发生美拉德反应，使蛋白质的ε-氨基基团与多糖的还原性羰基末端反应得到的交联物其乳化性能优于目前商业乳化剂。以美拉德反应引起的蛋白-多糖交联物应用到添加剂行业可作为乳化剂，防腐剂以及抗氧化剂。

国外对于蛋白-多糖共轭物的研究迄今为止只有近十年的时间，现有制备方法只有两种：一种是以将BrCN活化后的多糖与蛋白质偶合制得可溶性的蛋白-葡聚糖共价交联物。此法由于交联剂有剧毒所以不适于在食品行业中应用；另外是将蛋白-多糖按一定比例混合后冷冻干燥，所制得的粉状物放置在干燥器中，底部有KI或KBr饱和溶液来维持一定的相对湿度，在一定温度下储存一段时间，就可以有效地制备得到交联物。用干法反应制备糖蛋白复合物，反应时间长，一般需要几天～几周；固相反应物之间接触不均匀、不充分，反应受到限制，交联率低、并且反应产物性能比较不稳定；且反应后所得产品是糖蛋白复合物、未反应物和除复合物以外的其它美拉德反应产物，所以一般需要通过凝胶色谱柱等手段进行纯化，实验操作繁琐，且杂质难除净。另外美拉德反应本身属于褐变反应，所以干法反应所得产物颜色深，极大地限制了其在食品行业中的应用。

(三)发明内容

本发明为了解决上述技术中存在的不足，提供了一种糖蛋白的生产方法，该法具有反应时间短、性能稳定、得率高、所得产物没有产生褐变等优点。

本发明所述的糖蛋白的生产方法包括如下步骤：

第一步在蛋白和多糖原料中，加入蒸馏水搅拌均匀，待完全溶解后加入有机溶剂，其中蛋白和多糖按1∶1重量使用，原料用量占总体积1.5％～4％，蒸馏水用量为总体积5％～20％；有机溶剂为总体积80％～95％；调整温度40℃～70℃，开始反应。

第二步  反应完毕，取出产物，透析24～48小时。

第三步  透析后的溶液离心10～15min，除去不溶解部分，冷冻干燥或真空干燥；

所述蛋白包括大豆蛋白、小麦面筋蛋白、β-乳球蛋白其中一种或一种以上混合物；

所述多糖包括葡聚糖、半乳甘露聚糖、壳聚糖其中一种或一种以上混合物；

所述有机溶剂为乙醇、丙二醇、或甘油。

本发明与现有技术相比的优点是：不同的蛋白其构象不同以及多糖的链长等对产物的性能与得率有一定的影响。本发明采用有机相反应介质控制蛋白-多糖之间发生美拉德反应，主要目的是控制其水分活度，提高反应效率，缩短反应时间；采用有机相反应方法不必再将产物过柱纯化除去未反应的蛋白以及多糖，并且产物颜色呈乳白色，可以广泛应用于各类食品中；本发明的反应时间为6h～24h，而干热反应的时间为几天～几周，从而节省了能量，提高了产率。

(四)具体实施方式

实施例1

第一步  取0.75克大豆蛋白粉，加入5ml水，溶解，再加入0.75克葡聚糖，搅拌溶解。

第二步  完全溶解的样品液中加入95ml乙醇，调整温度60℃，开始反应。

第三步  反应24h的反应液取出，4℃透析24h.

第四步  透析液离心15min，取上清液，冷冻干燥。

实施例2

第一步  配制95％乙醇100ml，搅拌均匀。

第二步  取1.5g β-乳球蛋白和1.5g葡聚糖缓慢加入乙醇溶液中，成均一悬浮液，调整温度50℃，开始反应。

第三步  反应12h的反应液取出，4℃透析24h.

第四步  透析液离心10min，取上清液，冷冻干燥。

实施例3

第一步  取2.0克大豆蛋白粉，加入5ml水，溶解，再加入2.0克半乳甘露聚糖，搅拌溶解。

第二步  完全溶解的样品液中加入20ml乙醇，调整温度60℃，开始反应。

第三步  反应9h的反应液取出，4℃透析48h。

第四步  透析液离心10min，取上清液，真空干燥。

实施例4

第一步  取1.5克大豆蛋白粉，加入5ml水，溶解，再加入1.5克葡聚糖，搅拌溶解。

第二步  完全溶解的样品液中加入45ml乙醇，调整温度50℃，开始反应。

第三步  反应6h的反应液取出，4℃透析24h.

第四步  透析液离心10min，取上清液，冷冻干燥。

实施例5

第一步  取0.75克大豆蛋白粉，加入5ml水，溶解，再加入0.75克壳聚糖，搅拌溶解。

第二步  完全溶解的样品液中加入95ml甘油，调整温度40℃，开始反应。

第三步  反应24h的反应液取出，4℃透析48h.。

第四步  透析液离心15min，取上清液，冷冻干燥。

实施例6

第一步  取1.75克大豆蛋白粉，加入5ml水，溶解，再加入1.75克葡聚糖，搅拌溶解。

第二步  完全溶解的样品液中缓慢加入20ml乙醇，调整温度70℃，开始反应。

第三步  反应6h的反应液取出，4℃透析24h.

第四步  透析液离心15min，取上清液，真空干燥。

综上所述，本发明制备糖蛋白复合物反应时间一般为6小时，最长不超过24小时，反应产物均匀、性能稳定，得率一般在60～70％，所得产物颜色为乳白色粉末。

Claims (1)

1、一种糖蛋白的生产方法，其特征在于包括如下步骤：

第一步在蛋白和多糖原料中，加入蒸馏水搅拌均匀，待完全溶解后加入有机溶剂，其中蛋白和多糖按1∶1重量使用，原料用量占总体积1.5％～4％，蒸馏水用量为总体积5％～20％；有机溶剂为总体积80％～95％；调整温度40℃～70℃；

第二步反应完毕，取出产物，透析24～48小时；

第三步透析后的溶液离心10～15min，除去不溶解部分，冷冻干燥或真空干燥；

所述蛋白包括大豆蛋白、小麦面筋蛋白、β-乳球蛋白其中一种或一种以上混合物；

所述多糖包括葡聚糖、半乳甘露聚糖、壳聚糖其中一种或一种以上混合物；

所述有机溶剂为乙醇、丙二醇、或甘油。