CN1507897A - 一种用于治疗和预防乳腺增生的含积雪草提取物的药剂 - Google Patents
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Abstract
本发明属中药制剂技术领域。具体涉及一种用于治疗和预防乳腺增生的含积雪草提取物的中药制剂。本发明的制剂经药效学研究证实具有治疗和预防乳腺增生作用。
Description
技术领域
本发明属中药制剂技术领域。具体涉及一种用于治疗和预防乳腺增生的含积雪草提取物的药剂。
背景技术
积雪草Centella asiatiea(Z、)Urb.为伞形科植物的全草，别名落得打、崩大碗、马碲等，为多年生匍匐草本，广泛分布于长江流域以南各地。性甘、辛、凉，具有清热利湿，解毒消肿之功效。我国汉代即载入本草，《神农本草经》谓主治大热恶疮痈疽，皮肤赤，身热。《本草纲目》指出尚可捣敷热肿丹毒，治疗瘰痨鼠瘘。国外，马达加斯加的民间，长期以来就用积雪草治疗经久不愈的皮肤溃疡。现代研究表明，积雪草主含三萜皂甙，如积雪草甙(asiaticoside)、羟基积雪草甙(madecassoside)及多种游离三萜酸，如积雪酸和羟基积雪草酸。积雪草甙、羟基积雪草甙为积雪草主要活性成分。以这些成分为主的积雪草提取物制成的片剂和霜剂已在国内生产，用于促进伤口愈合和疤痕疙瘩的治疗等。近年来报道积雪草提取物有抗溃疡、增强记忆、镇静止痛、抗生育、抗菌、抗病毒等作用，临床报道用于治疗静脉功能不全、微血管病、肌肤粘连、硬皮病、疮疽增生和疙瘩等，但未见用于治疗和预防乳腺增生。
发明内容
本发明所要解决的技术问题在于进一步开发积雪草提取物的功能，设计其在制备治疗和预防乳腺增生药剂方面的应用。
本发明提供了一种用于治疗和预防乳腺增生的含积雪草提取物的药剂，该药剂是由积雪草提取物为活性成份与药用辅料组成的。
本发明的药剂中的活性成份为积雪草提取物，该提取物主要含有积雪草甙，羟基积雪草甙和积雪草酸等成份。
本发明的含积雪草提取物的药剂(积雪草总甙)在用于治疗和预防乳腺增生方面的主要药效学试验结果如下：
积雪草总甙的主要药效学试验
摘要：在应用苯甲酸雌二醇、孕酮制备实验性大鼠乳腺增生症后，以及造模的同时灌服积雪草总甙，观察积雪草总甙对实验性大鼠乳腺增生的治疗和预防作用，两试验均显示积雪草总甙显著降低雌二醇(E2)、孕酮(P)所致的大鼠乳腺增生症的发生率，抑制乳腺增生程度，降低血清E2含量，具有治疗和预防乳腺增生的作用。
1.积雪草总甙对实验性大鼠乳腺增生症的治疗试验
1.1.目的：
应用雌二醇和孕酮制备大鼠乳腺增生症模型，观察积雪草总甙对实验性大鼠乳腺增生的治疗作用，为临床试验提供可靠依据。
1.2.试验材料
1.2.1.药物
受试药：积雪草总甙(积雪草总甙)，淡黄色粉末，溶于水，由上海医工院药物制剂部提供。批号：0801-2。蒸馏水溶解稀释至所需浓度，0.4ml/100g灌胃给药。
阳性对照药：乳癖消，剂型：胶囊，辽宁省桓仁辽东制药厂产品。
苯甲酸雌二醇：灭菌油溶液，规格：2mg/ml，上海第九制药厂产品，批号：20000801。
黄体酮(孕酮)：灭菌油溶液，规格：10mg/ml，上海第九制药厂产品，批号：000404。
E2、P放免测试盒：天津德普生物技术和医学产品有限公司产品。
其它试剂均为市售商品。
1.2.2.试验动物
SD大鼠，成年雌性未孕，体重226±11g。由江苏省实验动物中心提供，苏动质：97001。
1.3.试验方法与结果
1.3.1.方法
SD雌性大鼠，成年未孕，体重226±11g，58只，随机分成7组：(1)空白对照组；(2)模型对照组；(3)阳性对照组(0.6g/kg乳癖消)；(4)高剂量组(8.84mg/kg)；(5).高中剂量组(5.20mg/kg)；(6)中低剂量组(3.06mg/kg)；(7)低剂量组(1.80mg/kg)。除空白对照组外各组均应用雌激素和孕酮制备大鼠乳腺增生模型：每日肌肉注射苯甲酸雌二醇0.5mg/kg×40天，继而改用4mg/kg黄体酮肌肉注射10天，空白对照组同时肌注等量生理盐水。造模至第50天结束，各组灌服0.4ml/100g的不同受试药，空白对照组、模型对照组灌服0.4ml/100g生理盐水，每日一次，连续40天后，在灌服受试药后1小时，40mg/kg戊巴比妥钠腹腔麻醉，眼眶取血，分离取血清测血清E2、P浓度(由江苏省人民医院临床检测中心放免室检测)；剪取胸部第二对乳房，游标卡尺精确测量乳房直径、乳房高度、乳头直径；再将左侧第二对乳房浸入10％福尔马林液中固定，石腊包埋切片，HE染色，镜下观察乳腺组织病理变化，根据乳腺组织的不同增生类型，分为：腺泡型增生、导管型增生、纤维型增生、混合型增生(含两种及以上增生类型的统归于此)，计算镜下乳腺增生率；根据镜下乳腺组织增生程度评分：正常(-)-1分，轻度增生(+)-2分，中度增生(++)-3分，重度增生(+++)-4分，计算平均增生程度。试验结束整理数据并作统计学处理(应用Killskal-Walls Test评定乳腺组织增生程度，应用四表格确切概率法统计处理乳腺增生率，其它数据应用方差分析法)。
1.3.3.结果见表
表1大体测量各受试组乳头直径、乳房直径和高度的结果显示，积雪草总甙高、高中、中低剂量组和乳癖消组乳头直径、乳房高度均与空白对照组相近或更低(P＞0.05，乳癖消组、高剂量积雪草总甙组乳房直径与空白对照组比较P＜0.05或0.001)，只有低剂量积雪草总甙组乳房直径显著高于空白对照组(P＜0.00)，呈一定的剂量相关性；与模型对照组比较，各受试药组乳头直径、乳房直径和高度均显著降低(除低剂量积雪草总甙组乳头直径P＞0.05外，其余P值均＜0.01或0.001)。
表1积雪草总甙对实验性大鼠乳腺增生症的治疗作用(大体测量，X)
乳房
组别 动物数 乳头直径
直径(mm)
空白对照组 9 1.17 2.93
模型对照组 8 1.42** 3.42***
乳癖消组 8 1.25# 2.64*###
高剂量积雪草总甙组 9 1.14### 2.63***###
高中剂量积雪草总甙组 8 1.23# 2.85###
中低剂量积雪草总甙组 8 1.24# 2.84###
低剂量积雪草总甙组 8 1.28 3.16**##△△△
与空白对照组比：*：p＜0.05，**：p＜0.01，***：p＜0.001；与模型对照组比：#：p＜0.05，##：p＜0.01，###：p＜0.001；与乳癖消组比：△△：P＜0.01，△△△：p＜O.01。
表2镜下对乳腺组织增生的观察显示，积雪草总甙各剂量组具有与阳性对照药乳癖消作用相似或更强的降低E2、P所致的乳腺增生症的发生率，抑制乳腺组织增生的作用，并且呈明显的剂量相关性。本试验中，空白对照组乳腺组织增生率达33.3％、平均乳腺增生程度为4.78±1.20分/个，高于高剂量积雪草总甙组，可能与长达三个月的试验，大鼠自身的成长或取样时正值此大鼠性周期中乳腺组织增生高峰有关。大体测量结果中空白对照组的乳房直径显著高于乳癖消组、高剂量积雪草总甙组，以及某些大鼠血清E2、P浓度高出平均值10倍左右可能都与此相关。
表2积雪草总甙对实验性大鼠乳腺增生症的治疗作用(镜下观察，
X)
乳房数 非乳腺增 乳腺增生
组别
(个) 生(个) 率(％)
空白对照组 9 6 33.3
模型对照组 8 0 100.0**
乳癖消组 8 6 25.0##
高剂量积雪草总 9 8 11.1###
甙组
高中剂量积雪草 8 5 37.5#
总甙组
中低剂量积雪草 8 3 62.5
总甙组
低剂量积雪草总 8 3 62.5
甙组
与空白对照组比：**：p＜0.01；与模型对照组比：#：p＜0.05，##：p＜0.01，###：p＜0.001
表3血清E2、P、E2/P值显示，积雪草总甙对实验性大鼠乳腺增生症中血清E2，增高的抑制作用，呈明显的正相关性，高剂量积雪草总甙血清E2浓度显著低于空白对照组(P＜0.05)，但血清P浓度也显著下降(与空白比P＜0.001)，E2/P比值显著升高(与空白对照比P＜0.05)；模型对照组血清E2值已恢复至正常，这可能与大鼠自身强大的调控自愈能力有关，但血清P浓度降低更明显，E2/P比值明显高于正常。乳癖消组血清E2、P、E2/P值与空白对照组相似，无显著性变化。
表3积雪草总甙治疗实验性大鼠乳腺增生症试验中对血清E2、P、E2/P值的影响(
X)
组别 动物数 E2(pmol/L) P(nmol/L) E2/P
空白对照组 9 137.3 50.8 3.43
模型对照组 8 104.4 25.7 18.16
乳癖消组 8 105.7 46.6 6.46
高剂量积雪草总 9 77.6** 8.4*** 37.88*
甙组
高中剂量积雪草 8 123.5 29.2 16.66
总甙组
中低剂量积雪草 8 144.2 34.7 25.55
总甙组
与空白对照组比：*：p＜0.05，**：p＜0.01，***：p＜0.001
通常认为乳腺增生与体内雌激素水平过高，孕酮水平过低，或两者比例失调，E2/P比值增高密切相关。积雪草总甙显著抑制E2、P所致的大鼠乳腺增生症的发生率，抑制乳腺组织增生，降低血清E2浓度。但未见其对血清P浓度，E2/P比值增高的调节改善作用，其作用机制有待进一步研究。
1.4.结论
积雪草总甙显著抑制实验性大鼠乳腺增生症的乳头、乳房增大，降低乳腺增生症的发生率和乳腺组织的增生程度，降低血清E2含量，具有治疗乳腺增生症的作用。
2.积雪草总甙对实验性大鼠乳腺增生症的预防试验
2.1.目的应用苯甲酸E，和P制备大鼠乳腺增生症的同时灌服积雪草总甙，观察积雪草总甙对实验性大鼠乳腺增生的作用，为临床试验提供可靠依据。
2.2.试验材料
2.2.1.药物同1.2.1。
2.2.2.试验动物
SD大鼠，成年雌性未孕，体重24l±15g。由江苏省实验动物中心提供，苏动质：97001。
2.3.试验方法与结果
2.3.1.剂量设置与分组，同“积雪草总甙对实验性大鼠乳腺增生症的治疗试验”。
2.3.2.方法
SD雌性大鼠，成年未孕，体重241±15g，60只，随机分成7组：
(1)空白对照组；(2)模型对照组；(3)阳性对照组(0.6g/kg乳癖消)；(4)高剂量组(8.84mg/kg积雪草总甙)；(5)高中剂量组(5.20mg/kg积雪草总甙)；(6)中低剂量组(3.06mg/kg积雪草总甙)；(7)低剂量组(1.80mg/kg积雪草总甙)。除空白对照组外各组应用苯甲酸E2和P复制大鼠乳腺增生症模型：每日肌肉注射0.5mg/kg苯甲酸E2，40天，继而改用4mg/kg黄体酮肌肉注射10天。空白对照组同时肌注等量生理盐水。在造模的同时，空白对照组、模型对照组灌服生理盐水0.4ml/100g，其余5组灌服0.4ml/100g不同受试药。试验至第51天，停肌肉注射性激素，灌服受试药后1小时，40mg/kg戊巴比妥钠腹腔麻醉，眼眶取血，分离血清测血清E2、P浓度(由江苏省人民医院临床检测中心放免室检测)；剪取胸部第二对乳房，游标卡尺精确测量乳房直径、乳房高度、乳头直径；再将左侧第二对乳房浸入10％福尔马林液中固定，石腊包埋切片，HE染色，镜下观察乳腺组织的病理变化，按组织的不同增生类型分为：腺泡型增生、导管型增生、纤维型增生、混合型增生(含两种及以上增生类型的统归于此)，计算镜下乳腺增生率；根据乳腺增生程度评分：正常(-)-1分，轻度增生(+)-2分，中度增生(++)-3分，重度增生(+++)-4分，评判增生程度。试验结束整理数据并作统计学处理(应用Kruskal-Walls Test评定乳腺组织增生程度，应用四表格确切概率法统计处理乳腺增生率，其它数据应用方差分析法)。
2.3.3.结果，结果见表。
表4大体测量各受试组乳头直径、乳房直径和高度的结果显示，模型对照组乳头直径、乳房直径和高度均显著高于空白对照组(P＜0.01、P＜0.001)。积雪草总甙各剂量组乳头直径、乳房直径和高度较模型对照组显著降低(与模型对照组比P＜0.01、P＜0.001或P＜0.05)；与空白对照组乳房直径和高度相近(P＞0.05)，高剂量组甚至低于空白对照组，呈一定的剂量相关性。0.6g/kg乳癖消具有同样抑制乳房、乳头增生的作用，但明显弱于积雪草总甙组。
表4积雪草总甙对实验性大鼠乳腺增生的预防作用(大体测量，X)
乳房
乳头直径
组别 动物数 直径 高度
(mm)
(mm) (mm)
空白对照组 10 1.13 2.94 1.20
模型对照组 8 1.77*** 3.51** 2.02***
乳癖消组 8 1.58*** 2.82## 1.60***##
高剂量积雪草总甙组 9 1.50***# 2.42***###△△ 1.10###△△
高中剂量积雪草总甙 7 1.47***# 2.69 1.22###△△
组
中低剂量积雪草总甙 9 1.44***## 2.83## 1.19###△△
组
低剂量积雪草总甙组 9 1.35**### 2.72###△ 1.29###
与空白对照比：***：p＜0.001；与模型对照比：##：p＜0.01，###：p＜0.001；
与乳癖消组比：△P＜0.05，△△P＜0.01，△△△：p＜0.001
表5镜下对乳腺组织增生的观察显示，积雪草总甙各剂量组具有与阳性对照药乳癖消相似的降低E2、P所致的乳腺增生率(与模型对照组比高、中低、低剂量组P＜0.05)和乳腺组织增生程度的作用(与模型对照组比高、高中、中低剂量组P＜0.05或P＜0.01)。积雪草总甙各剂量组和乳癖消组与空白对照组比较无显著性差异。空白对照组中有2只大鼠乳腺组织亦呈增生性变化，可能与其性周期变化有关，血清E2、P测定数据中也有个别大鼠血清E2、P值高出平均值10倍左右，可能也与其相关。
表5积雪草总甙对实验性大鼠乳腺组织增生的预防作用(镜下观察，X)
乳房数 乳腺增生病变类型 非乳腺 乳腺增生 乳腺组织增生
组别
(个) 腺泡型 导管型 混合型 增生 率(％) 程度(分/个)
空白对照组 10 0 0 2 8 20.0 4.50
模型对照组 8 2 0 6 0 100.0** 6.63**
乳癖消组 8 0 0 4 4 50.0 6.13
高剂量积雪草总 9 1 0 3 5 44.4# 5.00#
甙组
高中剂量积雪草 7 0 0 4 3 57.1 5.29#
总甙组
中低剂量积雪草 9 1 0 3 5 44.4# 5.00#
总甙组
低剂量积雪草总 9 0 0 4 5 44.4# 5.44
甙组
与空白对照组比：*：p＜0.05，**：p＜0.01；与模型对照组比：#：p＜0.05
表6血清E2、P、E2/P比值结果显示，积雪草总甙明显抑制实验性大鼠乳腺增生症中E2的增高，呈明显的剂量相关性，高剂量积雪草总甙血清E2浓度显著低于模型对照组(P＜0.05)，血清P浓度同时下降，因此E2/P比值与模型对照组同样表现为增高，但从本次试验结果中可看出，E2/P比值随积雪草总甙剂量的增加而呈下降趋势。
表6积雪草总甙预防实验性大鼠乳腺增生症试验中对血清E2、P，E2/P值的影响(
X)
组别 动物数 E2(pmol/L) P(nmol/L) E2/P
空白对照组 10 142.5 44.1 4.19
模型对照组 8 617.0** 46.7 13.42***
乳癖消组 8 394.9** 28.1 17.99***
高剂量积雪草总甙组 9 268.7**# 31.7 14.45**
高中剂量积雪草总甙组 7 388.8*** 30.0 15.39**
中低剂量积雪草总甙组 9 507.7*** 24.4 29.56**
低剂量积雪草总甙组 9 552.1*** 36.1 21.20**
与空白对照组比：*：p＜0.05，**：p＜0.01，***：p＜0.001；与模型对照组比：#：p＜0.05
以上结果显示，在应用E2、P复制大鼠乳腺增生症的同时灌服积雪草总甙，可显著减轻或完全抑制E2、P所致的大鼠乳头、乳房增大；降低乳腺增生症的发生率和乳腺组织增生程度；抑制血清E2浓度的升高，但对血清P、E2/P比值有一定的调节改善趋势，其作用机制有待进一步研究。
2.4.结论
应用E2、P复制大鼠乳腺增生症的同时灌服积雪草总甙，显著抑制E2、P所致大鼠的乳头、乳房增大，降低乳腺增生症发生率和乳腺组织增生程度，降低血清E2浓度。具有预防乳腺增生的作用。
上述结果表明本发明的含积雪草提取物的药剂具有治疗和预防乳腺增生的作用。按常规方法制备各种制剂，包括普通片、咀嚼片、泡腾片、硬胶囊、滴丸、栓剂、颗粒剂、口服液和缓释片等。
具体实施方式
实施例1 普通片
处方
积雪草总甙 2-100mg
淀粉 50mg
乳糖 20mg
硬脂酸镁 2％
制备方法：常规法。
实施例2 咀嚼片
处方
积雪草总甙 2-100mg
淀粉 350mg
可可粉 350mg
糖粉 350mg
10％明胶溶液 Q.S.
硬脂酸镁 12mg
制备方法：取总甙、淀粉可可粉、糖粉混匀，用10％明胶溶液湿润制成软材，制粒，压片。
实施例3 泡腾片
处方
积雪草总甙 2-100mg
酒石酸 450mg
硫酸氢钠 650mg
糖粉 1600mg
阿司巴甜 10mg
氯化钠 Q.S.
色素 Q.S.
水性润滑剂 Q.S.
制备方法：取总甙，酒石酸分别过80目筛混合，以95％醇和适量色素混匀制成软材，过12目筛制粒，于50℃干燥，备用，另取硫酸氢钠，糖粉，阿司巴甜水溶液适量制成软材，过12目筛制湿粒.于50℃干燥，与上述干粒混合，整粒，加润滑剂，混匀，压片，片重约3g。
实施例4 硬胶囊
处方
积雪草总甙 2-100mg
乳糖 50-150mg
微粉硅胶 Q.S.
制备方法：将药物与辅料混匀，填充大小适宜的胶囊中即得。
实施例5 滴丸
处方
积雪草总甙 1份
聚乙二醇-6000 1-10份
制备方法：聚乙二醇6000至油浴上加热熔化，加1份积雪草总甙使溶解，滴至液体石蜡中冷却，即成丸。
实施例6 栓剂
处方
积雪草总甙 2-100mg
混合硬脂酸甘油脂至 1.7g
制备方法：常规法
实施例7 颗粒剂
处方
积雪草总甙 2-100mg
甘露醇 500mg
乳糖 500mg
制备方法：混匀后，干法制颗粒。
实施例8 口服液
处方
积雪草总甙 2-100mg
甜叶菊甙 Q.S.
蒸馏水 至5-10ml
实施例9 缓释片
处方
积雪草总甙 6-300mg
羟丙基甲基纤维素 150-200mg
硬脂酸镁 适量
制备方法：取积雪草总甙、羟丙基甲基纤维素混匀，制粒，整粒，压片。
Claims (2)
1.一种用于治疗和预防乳腺增生的含积雪草提取物的药剂，其特征在于该药剂包括积雪草提取物为活性成份与药用辅料组成的。
2.一种含积雪草提取物用于治疗和预防乳腺增生的药物制剂的制备，将积雪草提取物和药用辅料按配比称取物料，以常规方法制成普通片、咀嚼片、泡腾片、硬胶囊、滴丸、栓剂、颗粒剂、口服液和缓释片。
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| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CNA021550573A CN1507897A (zh) | 2002-12-20 | 2002-12-20 | 一种用于治疗和预防乳腺增生的含积雪草提取物的药剂 |
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| CNA021550573A CN1507897A (zh) | 2002-12-20 | 2002-12-20 | 一种用于治疗和预防乳腺增生的含积雪草提取物的药剂 |
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Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102641274A (zh) * | 2011-02-17 | 2012-08-22 | 苏州迪星生物医药科技有限公司 | 羟基积雪草酸的新用途 |
| CN102641273A (zh) * | 2011-02-17 | 2012-08-22 | 苏州迪星生物医药科技有限公司 | 积雪草酸及其衍生物的新用途 |
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2002
- 2002-12-20 CN CNA021550573A patent/CN1507897A/zh active Pending
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C02 | Deemed withdrawal of patent application after publication (patent law 2001) | ||
| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |