CN1480454A

CN1480454A - 吡唑羧酸类内皮素受体拮抗剂

Info

Publication number: CN1480454A
Application number: CNA031127991A
Authority: CN
Inventors: 民吉; 吉民; 戴德哉; 华维一; 戴茵; 刘立刚; 黄敏
Original assignee: China Pharmaceutical University
Current assignee: China Pharmaceutical University
Priority date: 2003-01-30
Filing date: 2003-01-30
Publication date: 2004-03-10
Anticipated expiration: 2023-01-30
Also published as: CN1260215C

Abstract

通式为(I)的化合物及其盐类：其中，R₁，R₂，R₃为有机取代基。本发明所涉及的化合物具有内皮素受体拮抗活性，用于治疗心脑血管疾病及肿瘤、糖尿病、肾病、哮喘等疾病。

Description

吡唑羧酸类内皮素受体拮抗剂

技术领域

本发明涉及新颖的吡唑羧酸类内皮素受体拮抗剂及它们在治疗心脑血管疾病、肿瘤、糖尿病，肾病、哮喘中的应用。

背景技术

心脑血管疾病的死亡率居各类疾病之首，其最终死因绝大多数是心肌肥大、心力衰竭(心衰)、脑卒中及致死性心律失常。尤其近年来严重心衰的病死率居高不下，已形成国际医药界的一个难题。这些疾病目前均缺乏有效的治疗药物。

内皮素(ET)是1988年发现的已知最强的缩血管因子之一，ETs包括ET-1、ET-2及ET-3。哺乳动物主要有两种ET受体：ET_A和ET_B。主要表达于血管壁和平滑肌细胞的ET-1选择性的ET_A受体，介导了ET-1的缩血管作用和促细胞有丝分裂作用；ET_B受体对ET-1、ET-2和ET-3是非选择性的，表达于内皮细胞的ET_B受体介导一氧化氮(NO)和前列环素I₂(PGI₂)的释放引起血管舒张。而表达于平滑肌细胞，介导ET_B受体激活后的血管收缩。

ET广泛参与了高血压、心肌缺血、心肌肥大、充血性心衰、肾衰，哮喘和蛛网膜下腔出血引起的脑血管痉挛等多种疾病的病理过程，阻断内皮素的产生或拮抗其与受体的结合，可以用于治疗上述疾病。血管内皮细胞的通透性及细胞的跨膜移动，受到内皮素的调控。所以内皮素会影响肿瘤细胞对血管内皮的穿越，血管的新生及血脑屏障。研究认为，内皮素受体拮抗剂将会成为临床上用于治疗高血压，心衰、蛛网膜下腔出血、肿瘤、糖尿病，肾病及肾衰、哮喘等疾病的新型药物，尤其是用来治疗慢性充血性心衰，逆转心肌肥大，控制高血压及预防脑卒中。

发明内容

本发明的目的在于提供一类新的吡唑羧酸类内皮素受体拮抗剂。

本发明的另一目的在于提供通式(I)的化合物在制备治疗心脑血管疾病、肿瘤、糖尿病，肾病、哮喘、甲状腺亢进等疾病的药物中的应用。

本发明的目的可以通过以下措施来达到：

在内皮素受体拮抗剂最新研究的基础上，应用药物设计中的模拟，生物电子等排，结构拼合等基本原理，设计合成了具通式(I)的化合物，并进行了它们的生物活性研究。其中，特别有意义的是化合物I13(代号0213)、I14(代号0214)。

其中，R₁为C₁-C₆烷基及烯基，有一到四个碳原子间隔的羧酸及其酯类，有一到四个碳原子间隔的芳基及取代芳基，有一到四个碳原子间隔的杂环；R₂，R₃各自独立地为H或卤素。其中R₁可为C₁-C₄烷基，R₂，R₃可各自独立地为4-氯。其中R₁可为正丁基，R₂，R₃可各自独立地为4-氯(代号0213)。其中R₁可为一到二个碳原子间隔的羧酸及其酯类，R₂，R₃可为4-氯。其中R₁可为羧甲基，R₂，R₃可各自独立地为4-氯(代号0214)。本发明包含的通式(I)化合物可制成各种药物剂型及药物载体。本发明的通式(I)的化合物作为内皮素受体拮抗剂用于制备治疗心脑血管疾病、肺动脉高压、心衰、肿瘤、糖尿病、肾病、哮喘、甲状腺亢进的药物中的应用。

通式(I)的化合物可按Scheme 1或Scheme 2方法合成：

Scheme 1 Reagents and conditions：i，ArCH₂Cl，K₂CO₃/acetone；ii，Ar’CH₂Cl，K₂CO₃/DMF；iii，(CO₂Et)₂，NaOEt/EtOH，reflux；iv，85％NH₂NH₂H₂O/HOAc，reflux；v，R₁X，K₂CO₃/acetone，reflux；vi，NaOH/EtOH/H₂O.then 10％HCl.

a：R₁＝CH₃ b：R₁＝4-ClC₆H₄CH₂Scheme 2 Reagents and conditions：i，PhNHNH₂，HOAc，reflux；ii，85％NH₂NH₂·H₂O/HOAc，reflux；iii，CH₃lor 4-ClC₆H₄CH₂Cl，K₂CO₃/acetone，reflux；

2，4二取代苄基苯乙酮(3)与草酸二乙酯缩合生成化合物(4)，再与水合肼环合生成化合物(5)。但(7)与苯肼直接缩合则会生成两种同分异构体(8)和(9)。类似的同分异构体出现在对化合物(5)的烷基化反应中，例如对于化合物(10)的烃基化，使用活性高，位阻作用小的CH₃I作烷基化试剂，生成几乎等量的异构体(11a)与(12a)，而使用活性比之小，反应过程中位阻作用比之大的对-氯苄基氯作烃基化试剂，反应的选择性明显提高，超过90％的产物为异构体(11b)。可见，在化合物(5)的N-烃基化反应中，位阻效应起着重要作用，它导致了此取代反应的主要产物为A型结构。所分离纯化得到的部分此类异构体A或B型化合物的结构特征及理化常数如下：

Compd.	R₁	R₂	R₃	A or B	Yield(％)	Mp.(℃)
Compd.	R₁	R₂	R₃	A or B	Yield(％)	Mp.(℃)	11a	CH₃	H	4-Cl	A	46	139-140
12a	CH₃	H	4-Cl	B	41	98-99	11a	CH₃	H	4-Cl	A	46	139-140
12a	CH₃	H	4-Cl	B	41	98-99	11b	4-ClC₆H₄CH₂	H	4-Cl	A	89	124-126
12b	4-ClC₆H₄CH₂	H	4-Cl	B	9.6	117-118	11b	4-ClC₆H₄CH₂	H	4-Cl	A	89	124-126
12b	4-ClC₆H₄CH₂	H	4-Cl	B	9.6	117-118	8	Ph	4-Cl	4-Cl	A	3.4	121-122
9	Ph	4-Cl	4-Cl	B	39	137-138	8	Ph	4-Cl	4-Cl	A	3.4	121-122

通式(I)代表性化合物的理化常数加下：

^aYields refer to isolated products.

最终产品可经柱层析分离纯化或有机溶剂重结晶精制。

以本发明所包括的化合物作为活性成分制备药物剂型只需使用常规药物制剂技术。以片剂及胶囊较好。

本发明的化合物具很强的内皮素受体拮抗活性，用于治疗心血管疾病及肿瘤病人。剂量范围约为0.1-10mg/kg/日。

本发明的代表性化合物的内皮素受体结合实验结果如下：Tab 1化合物对ET-1结合实验的IC₅₀化合物 IC₅₀(nM)I 01 2800I 02 3000I 03 1200I 04 500I 05 1000I 06 1000I 07 800I 08 15I 09 61I 10 ＞1000I 11 ＞1000I 12 800I 13 18I 14 16I 15 ＞1000I 16 ＞1000I 17 ＞1000I 18 ＞1000I 19 ＞1000I 20 ＞1000I 21 89I 22 95I 23 ＞1000I 24 500I 25 ＞1000I 26 ＞1000I 27 ＞1000

0213的活性与美国在2001年11月FDA批准的Bosentan相近。Bosentan拮抗ET_AR

的IC₅₀为4.7nM，ET_BR为95nM。0213拮抗ET_AR的活性约一倍于Bosentan，拮

抗ET_BR的活性，二药相同。Bosentan对ET_AR/ET_BR的选择性为20.2。0213化

合物对ET_AR/ET_BR的选择性为36.2，强于Bosentan。

0213化合物对抗ET_AR及ET_BR的活性，与国外诸多著名制药公司正在研制的化合物活性相近。

表0213的拮抗ET_AR与ET_BR的活性与国外制药公司新化合物的IC₅₀比较

化合物 ET_AR ET_BR 选择性

0213 2.57 93 36.2

Bosentan 4.7 95 20.2

SB217242 1.1 100 90.9

A182086 94 1.3 72.3

BQ123 37 - 专一

TBC11251 1.4 - 专一1.内皮素受体拮抗剂0213对血管的ET_A及对支气管的ET_B受体的活性强度

1.1对抗内皮素-1(简称ET-1或ET)对血管活性的研究，ET对去内皮的胸主动脉收缩活性很强。77个化合物都进行拮抗ET收缩活性的研究定量研究，得到0213等9个化合物活性强的内皮素受体拮抗剂，其中0213的作用最强。

1.2收缩去内皮大鼠胸主动脉的ET受体为ET_A，由S6_C引起去内皮的大鼠主动脉环收缩活性是由ET_B受体所介导的。结果：0213化合物结抗ET_A受体的PA₂为8.52±0.26(X±SD，下同)。拮抗S6_C引起ET_B受体介导的支气管收缩的PA₂为6.56±0.20。拮抗ET_A的强度为ET_B的91.2倍。2.内皮素受体拮抗剂0213放射受体活性分析，拮抗ET的强度及分别研究对ET_A与ET_B的活性强度。

用¹²⁵I-ET-1竞争受体配基结合试验。在进行对ET_AR选择性作用时，加入ET_BR激动剂S6_C饱和对ET_BR的结合。进行ET_BR选择性时，加入ET_A选择性阻断剂PD156707，与ET_AR饱和结合。分别得到：0213对ET_AR的IC₅₀为2.57±1.41nM(n＝9)，对ET_BR的IC₅₀为93±34nM(n＝5)，二者的活性相差36倍。提示：0213是ET_AR及ET_BR的双重拮抗剂，拮抗ET_AR为主。3.内皮素受体拮抗剂0213实验治疗结扎大鼠冠状动脉引起的急性心衰

0213化合物(100mg/kg，po.)，大鼠1次给药1h后，乌拉坦1.2g/kg麻醉，开胸结扎左冠状动脉。测血流动力学：左室收缩功能：LV+dp/dtmax，LVSP；及左室舒张功能：LV-dp/dtmin，LVDP。观察120min。

0213给药后，急性心衰对LVSP，LV-dp/dtmin及LV+dp/dtmax的降低，均有明显的改善。急性心衰中ET的参与机制较少，但仍有明显药效，对心率减慢亦有(如图1，2，3)。4.内皮素受体拮抗剂0213慢性给药，对心梗后慢性充血性心衰大鼠的实验治疗

大鼠结扎左冠状动脉后，形成10d-70d的慢性充血性心衰的模型。0213设立30mg/kg/d及100mg/kg/d po给60天。给药从冠脉结扎后第11天开始，使心衰形成后再进行药物治疗。卡托普利20mg/kg/d，60天。大鼠在冠脉结扎后10天及70天，分别取血测ANP(心钠素)，比较左室、右室称重后与体重比及血流动力学。二组病理模型组对ANP及RV/BW，LV/BW的比较，10及70天的模型组的改变与假手术组相比均有十分显著的差别。在10天及70天之间，LV+dp/dtmax，LVSP，LVDP，舒张功能，收缩功能亦有明显差别，但血流动力学LV-dp/dtmin及LVDP，以及平均动脉血压(MPA)及HR未见明显差别。在病理模型的组织切片，梗死10天模型中，心肌间质有大量炎性细胞浸润，在70天模型中炎性细胞浸润明显减少。由于70d组中ANP明显增多及心肌重构更明显，提示在70d的心衰模型中，体液机制已充分启动，心肌重构及心衰的维持，与病理机制中体液因子相关。

4.1药物0213及卡托普利治疗慢性充血性大鼠心衰，对充血性心衰的心肌重构的消退。

以衰退心脏的心肌重量与体重的比值表示：左室/体重(LV/BW)，右室/体重(RV/BW)，全心/体重(LW/BW)。药物0213在30mg/kg及100mg/kg，po明显减轻左室心肌肥大，药效与卡托普利20mg/kg，po相仿。与假手术组比较：慢性心衰10天组(CHF10天)的心肌重量明显增加，提示心肌重构明显，^bp＜0.05，^cp＜0.01。CHF70天组中的心肌重构更加明显。与SO组比较，^cp＜0.01。与CHF10天比较，心肌重构更加重，^fp＜0.01。0213组使心肌重构明显消退，与CHF70天比较，两个剂量组均使消退，^hp＜0.05，或ⁱp＜0.01。参与药物为卡托普利亦有效。(如图4)

4..2对充血性心衰的血流动力学的疗效。

慢性衰竭心脏的收缩功能LV+dp/dtmax明显下降，舒张功能亦明显衰竭，LV-dp/dtmin及LVDP的上升均十分显著。药物0213及卡托普利组对衰竭心脏的血流动力学LV+dp/dtmax，LV-dp/dtmin及LVDP，均明显改善(见图5，6，7)。

4.3药物0213改善充血性心衰的血浆ET，ANP浓度的增高。药物0213剂量30及100mg/kg，po治疗，与梗死70天后的心衰大鼠比较，明显降低血浆中ET，ANP的浓度。(见图8)。

4.4药物治疗对慢性心衰大鼠病变心肌中prepro-ET-1及ANP的mRNA表达的改变。慢性心衰大鼠的左心室心肌的prepro-ET-1mRNA表达明显下降，及ANP的mRNA明显上升。(见图9，10)

慢性心衰大鼠的心肌中的mRNA表达明显增多。在心肌梗死10天及70天组，明显多于假手术组(SO)。与假手术组(SO)比较：^ap＞0.05，^bp＜0.05，^cp＜0.01。药物0213 100mg/Kg组，使mRNA表达明显降低。与梗死10天比较：^dp＞0.05，^cp＜0.05，^fp＜0.01；与梗死70天比较：^gp＞0.05，^hp＜0.05，ⁱp＜0.01。

Prepro-ET-1的mRNA表达，在梗死10天组与假手术组比较明显增多，^cp＜0.01，70天组亦增多，^bp＜0.05。0213100mg/Kg组po使Prepro-ET-1的mRNA表达明显下调。与假手术组(SO)比较：^ap＞0.05，^bp＜0.05，^cp＜0.01。与梗死10天比较：^dp＞0.05，^ep＜0.05，^fp＜0.01；与梗死70天比较：^gp＞0.05，^hp＜0.05，ⁱp＜0.01。

小结提示内皮素拮抗剂0213可用于治疗急性、慢性心衰，疗效优良。5.药物0213对肺动脉高压的治疗作用明显。明显改善肺动脉高压大鼠的右室收缩压(相当于肺动脉血压)及消退右室心肌重构，降低血浆中ET-1及prepro-ET-1等指标。6.药物0213对甲状腺素致心肌病及心血管病变的改善。

由多次剂量L-甲状腺素造成心肌病的心血管功能异常，药物0213具有明显的改善作用。

①药物0213消退L-甲状腺素致心肌重构的30.6％(p＜0.01)。

②降低心肌病模型的血浆中ET-1浓度43.6％(p＜0.01)。

③病变心肌中基因Kv1.4，Kv4.2，及Kv4.3的mRNA下调显著，药物0213治疗明显上调到正常。

④药物0213使心肌病的电镜下心肌病损明显改善。

⑤甲状腺素性心肌病中iNOS活性增高，药物0213使降低82.5％(p＜0.01)。此心肌病中eNOS活性下降，药物0213使eNOS活性提高87.2％，p＜0.01)。

⑥甲状腺素性心肌病中cNOS极明显下调，药物0213使100％上调，完全恢复至正常，(p＜0.01)。iNOS的mRNA在心肌病中明显上调，药物0213使iNOSmRNA的表达100％上调，p＜0.01，完全恢复正常。

⑦甲状腺素性心肌病的心肌中NO明显下降，药物0213使上升68％，(p＜0.01)。

⑧甲状腺素性心肌病中心肌细胞的凋亡率达97.5％(p＜0.01)。心肌病的心肌细胞的异倍体率达13.5％，经药物0213治疗后使异倍体完全消失。

⑨药物0213治疗，明显改善由甲状腺素造成的血管病变。

小结内皮素拮抗剂0213对甲状腺素大剂量造成的心肌病几血管病变，有明显的治疗作用，提示内皮素拮抗剂0213可用于治疗心肌病，及甲状腺功能亢进症。7.药物0214治疗高血压

对DOCA加饮用盐水引起的高血压，药物0214的急性iv给药及慢性灌胃，均使DOCA高血压模型中血压明显降低。

国外的文献中，已经报道许多有关内皮素受体拮抗剂治疗左心衰竭(心衰)，肺动脉高压，支气管哮喘，蛛网膜下腔出血，等实验研究及临床研究。目前，FDA首先批准了Bosentan治疗肺动脉高压。肺动脉高压的肺动脉壁肥大及引起右心衰弱，均有内皮素机制的参与。0213对左心衰竭及肺动脉高压均有疗效。0213对由内皮素增多所致的病症有效，如心肌病及甲状腺素亢进症。以上是新内皮素拮抗剂0213化合物的生物活性举例。

附图说明图1是本发明药物0213明显改善大鼠急性心衰(AHF)LVSP的实验治疗图。图2是本发明药物0213明显改善大鼠急性心衰(AHF)的LV+dp/dt_max的实验治疗图。图3是本发明药物0213明显改善大鼠急性心衰(AHF)的LV-dp/dt_min的实验治疗图。图4是本发明药物0213说明药物治疗慢性心衰大鼠使心肌重构消退的实验治疗图。图5是本发明药物0213药物明显改善衰竭心脏的LV+dp/dt_max的实验治疗图。图6是本发明药物0213药物明显改善衰竭心脏的LV-dp/dt_min的实验治疗图。图7是本发明药物0213药物明显改善衰竭心脏的LVDP的实验治疗图。图8是本发明药物0213药物降低心衰大鼠中ET及ANP的实验治疗图。图9是本发明药物0213治疗慢性心衰大鼠改善ANP mRNA表达的实验治疗图。图10是本发明药物0213治疗慢性心衰大鼠改善preproET-1mRNA表达实验治疗图。

具体实施方式

下面的实施例可以使本专业技术人员更全面的理解本发明，但不可以以任何方式限制本发明。

实施例4-苄氧基-2-羟基苯乙酮

将5g(0.033mol)2，4-二羟基苯乙酮溶于150ml丙酮中，加入6.5g(0.05mol)K₂CO₃，3g KI，0.1g TBAB，在搅拌下慢慢滴入4.9g(0.039mol)苄基氯，于室温反应0.5hr，再回流反应2hr，冷至室温，过滤，滤液蒸干，残余用无水乙醇重结晶得到白色针晶5.6g，收率70％。4-(对-氯苄氧基)-2-羟基苯乙酮

将7.6g(0.05mol)2，4-二羟基苯乙酮溶于150ml丙酮中，加入7g(0.05mol)K₂CO₃，3g KI，0.1g TBAB在搅拌下慢慢滴入7.7g(0.05mol)对-氯苄基氯，于室温反应0.5hr，再回流反应3hr，冷至室温，过滤，滤液蒸干，残余用无水乙醇重结晶得到白色针晶10.4g，收率75％。2，4-二(对-氯苄氧基)苯乙酮

将15.2g(0.1mol)2，4-二羟基苯乙酮与40g(0.25mol)对-氯苄基氯，55g(0.4mol)K₂CO₃，混合在70ml DMF中，于50℃反应6hr，冷至室温，反应液倒入冰水中，析出的固体用无水乙醇重结晶得24g白色晶体，收率60％。1-苄氧基-4-(对-氯苄氧基)苯乙酮

将5g(0.018mol)4-(对-氯苄氧基)-2-羟基苯乙酮与3g(0.025mol)苄基氯，5g(0.036mol)K₂C0₃在50ml DMF中于50℃反应5hr，冷至室温，倒入冰水中，析出的固体用无水乙醇重结晶得3.6g浅棕色针晶，收率56％。2，4-二(对-氯苄氧基)苯甲酰甲基草酸二乙酯

将23g(0.057mol)2，4-二(对-氯苄氧基)苯乙酮溶于80mlTHF中，在50℃下滴入溶有13ml(0.09mol)草酸二乙酯的由18g(0.078mol)金属钠制成的100ml乙醇钠溶液，滴毕，升温至回流反应8hr，冷却，倒入含有浓HCl的500ml水中，析出的固体过滤，用乙醇洗涤，干燥得到28g土黄色固体，收率98％。3-(2，4-二(对-氯苄氧基)苯基)吡唑-5-羧酸乙酯

将25g(0.05mol)上述制备的2，4-二(对-氯苄氧基)苯甲酰甲基草酸二乙酯溶于200ml冰乙酸中，慢慢滴入3.6g(0.06mol)85％的水合肼，滴毕，回流反应8hr，冷至室温，析出白色针晶，过滤，用HOAc重结晶无水乙醇洗涤，干燥得白色粉末状固体19.2g，收率77％，mp：177-179(℃。¹HNMR(CDCl₃)δ1.32(3H，t，-CO₂CH₂CH₃)，4.28(2H，q，-CO₂CH₂CH₃)，5.12(2H，s，4-OCH₂Ar)，5.24(2H，s，2-OCH₂Ar)，6.68(1H，d，J＝9.0，5-H)，6.79(1H，s，3-H)，7.03(1H，s，4’-H of pyrazole)，7.40-7.59(8H，m，-ArH)，7.71(1H，d，J＝8.6，6-H)，8.20(1H，s，-NH).3-(2-苄氧基-4-(对-氯苄氧基)苯基)吡唑-5-羧酸乙酯

参照3-(2，4-二(对-氯苄氧基)苯基)-吡唑-5-羧酸乙酯的制备方法，得白色固体，收率72％，mp：137-138℃。3-(2-苄氧基-4-(对-氯苄氧基)苯基)吡唑-5-羧酸(I01)

将2g(4.3mmol)上述化合物溶于15mlTHF中，加入25ml甲醇及10ml 10％KOH，回流反应2hr，冷至室温，用10％HCl调节pH＝3，加入适量水稀释，得到的固体过滤，用DMF-EtOH重结晶得到无色颗粒状固体1.0g，收率53％。mp：239-241℃.Anal.C₂₄H₁₉ClN₂O₄·0.5H₂O.Calcd：C，64.94；H，4.51；N，6.31.Found：C，65.26；H，4.31；N.6.43.IR(KBr)ν3249，2866，1712，1614，1580，1493，1455，1410，1276，1301，1279，1239，1170，1058，1005，962，807，754，700cm^-1；¹HNMR(CDCl₃+DMSO-d₆)δ5.06(2H，s，4-OCH₂Ar)，5.20(2H，s，2-OCH₂Ph)，6.66(1H，d，J＝8.6，5-H)，6.70(1H，d，J＝2.0，3-H)，7.10(1H，s，4’-H of pyrazole)，7.34-7.45(9H，m，-PhH and ArH)，7.66(1H，d，J＝8.6，6-H).MS(EI)m/e：434(M⁺+1)，343，125，91(100).1-乙基-3-(2-苄氧基-4-(对-氯苄氧基)苯基)吡唑-5-羧酸乙酯

将1g(2mmol)3-(2-苄氧基-4-(对-氯苄氧基)苯基)吡唑-5-羧酸乙酯溶于20ml丙酮中，加入2g(14mmol)K₂CO₃及1ml溴乙烷，回流反应2hr，冷至室温，过滤，蒸去适量的丙酮，加入甲醇，析出无色针晶0.76g，收率75％，mp：130-131℃。1-乙基-3-(2，4-二(对-氯苄氧基)苯基)吡唑-5-羧酸乙酯

参照化合物1-乙基-3-(2-苄氧基-4-(对-氯苄氧基)苯基)吡唑-5-羧酸乙酯的制备方法，得白色针晶，收率81％，mp：95-96℃。¹H-NMR(CDCl₃+DMSO-d₆)δ1.34(3H，t，-CO₂CH₂CH₃)，1.46(3H，t，-NCH₂CH₃)，4.30(2H，q，-CO₂CH₂CH₃)，4.62(2H，q，-NCH₂CH₃)，5.01(2H，s，4-OCH₂Ar)，5.06(2H，s，2-OCH₂Ar)，6.58(1H，d，J＝2.1，3-H)，6.62(1H，dd，J＝2.1 and 9.0，5-H)，7.21(1H，s，4’-H of pyrazole)，7.28-7.51(8H，m，-ArH)，7.92(1H，d，J＝9.0，6-H).1-甲基-3-(2-苄氧基-4-(对-氯苄氧基)苯基)吡唑-5-羧酸(I02)

参照化合物I03的制备，得白色晶体，收率61％。mp：203-204℃.Anal.C₂₅H₂₁ClN₂O₄.Calcd：C，66.89；H，4.68；N，6.24.Found：C，66.67；H，4.68；N，6.48.IR(KBr)ν3029，2913，1696，1612，1586，1539，1489，1451，1283，1249，1184，1108，1013，810，767，700cm^-1；¹HNMR(CDCl₃+DMSO-d₆)δ4.20(3H，s，-NCH₃)，5.03(2H，s，-OCH₂-)，5.17(2H，s，-OCH₂-)，6.61(1H，dd，J＝2.4 and 8.7，5-H)，6.63(1H，d，J＝2.3，3-H)，7.30(1H，s，4’-H ofpyrazole)，7.31-7.46(9H，m，-ArH and PhH)，7.86(1H，d，J＝8.8，6-H).MS(EI)m/e：448(M⁺+1)，403，357，125，91(100).1-乙基-3-(2-苄氧基-4-(对-氯苄氧基)苯基)吡唑-5-羧酸(I03)

将0.55g(1mmol)上述化合物1-乙基-3-(2-苄氧基-4-(对-氯苄氧基)苯基)吡唑-5-羧酸乙酯溶于15ml THF及10ml MeOH中，加入10ml10％NaOH，回流反应0.5hr，冷至室温，用10％HCl调节pH＝3，得到的固体用无水乙醇重结晶得白色针晶0.35g，收率64％。mp：200-201℃.Anal.C₂₆H₂₃ClN₂O₄.Calcd：C，67.46；H，4.97；N，6.05.Found：C，67.35；H，5.05；N，6.20.IR(KBr)ν2979，1694，1612，1587，1536，1451，1301，1281，1237，1183，1110，1060，1013，810，768，700cm^-1；¹HNMR(CDCl₃+DMSO-d₆)δ1.52(3H，t，-NCH₂CH₃)，4.69(2H，q，-NCH₂CH₃)，5.05(2H，s，4-OCH₂Ar)，5.18(2H，s，2-OCH₂Ph)，6.65-6.67(2H，m，3-H and 5-H)，7.26-7.47(10H，m，-ArH，PhH and 4’-H of pyrazole)，7.96(1H，d，J＝9.1，6-H). MS(EI)m/e：462(M⁺+1)，417，337，125，91(100).1-丙基-3-(2-苄氧基-4-(对-氯苄氧基)苯基)吡唑-5-羧酸(I04)

参照化合物I03的制备，得白色晶体，收率50％。mp：182-184℃.Anal.C₂₇H₂₅ClN₂O₄.Calcd：C，68.00；H，5.25；N，5.88.Found：C，68.27；H，5.05；N，5.81.IR(KBr)v3438，3032，2966，1693，1614，1585，1535，1453，1376，1290，1175，1126，1062，1015，810，739cm^-1；¹HNMR(CDCl₃+DMSO-d₆)δ0.96(3H，t，-NCH₂CH₂CH₃)，1.91(2H，6，-NCH₂CH₂CH₃)，4.56(2H，t，-NCH₂CH₂CH₃)，5.03(2H，s，4-OCH₂Ar)，5.16(2H，s，2-OCH₂Ph)，6.62(1H，dd，J＝2.2 and 9.2，5-H)，6.64(1H，d，J＝2.1，3-H)，7.31-7.46(10H，m，-ArH，PhH and 4’-H of pyrazole)，7.91(1H，d，J＝9.1，6-H). MS(ED m/e：476(M⁺+1)，431，351，125，91(100).1-丁基-3-(2-苄氧基-4-(对-氯苄氧基)苯基)吡唑-5-羧酸(I05)

参照化合物I03的制备，得白色晶体，收率88％。mp：170-172℃-Anal.C₂₈H₂₇ClN₂O₄.Calcd：C，68.50；H，5.50；N，5.71.Found：C，68.68；H，5.56；N，5.75.IR(KBr)ν2961，1693，1614，1540，1448，1288，1175，1125，1062，1015，812cm^-1；¹HNMR(CDCl₃+DMSO-d₆)δ0.93(3H，t，-CH₂CH₃)，1.37(2H，6，-N(CH₂)₂CH₂CH₃)，1.85(2H，5，-NCH₂CH₂CH₂CH₃)，4.60(2H，t，-NCH₂(CH₂)₂CH₃)，5.01(2H，s，4-OCH₂Ar)，5.16(2H，s，2-OCH₂Ph)，6.59-6.63(2H，m，3-H and 5-H)，7.29(1H，s，4’-H of pyrazole)，7.30-7.44(9H，m，-ArH and PhH)，7.89(1H，d，J＝9.2，6-H). MS(EI)m/e：490(M⁺+1)，445，365，125，91(100).1-(3-羧基丙基)-3-(2-苄氧基-4-(对-氯苄氧基)苯基)吡唑-5-羧酸(I06)

参照化合物I03的制备，得白色晶体，收率75％。mp：202-203℃.Anal.C₂₈H₂₅ClN₂O₆.Calcd：C，64.55；H，4.80；N，5.38.Found：C，64.75；H，4.82；N，5.36.IR(KBr)ν3062，2937，1710，1692，1583，1540，1450，1292，1240，1171，1102，1016，810，768cm^-1；¹HNMR(CDCl₃+DMSO-d₆)δ2.21(2H，p，-NCH₂CH₂CH₂CO₂H)，2.35(2H，t，-N(CH₂)₂CH₂CO₂H)，4.67(2H，t，-NCH₂-)，5.02(2H，s，-OCH₂Ar)，5.16(2H，s，-OCH₂Ph)，6.59-6.63(2H，m，3-H and 5-H)，7.30-7.43(10H，m，-ArH，PhH and H of pyrazole)，7.89(1H，d，J＝9.2，6-H).MS(EI)m/e：520(M⁺+1)，476，351，125(100)，91.1-苄基-3-(2-苄氧基-4-(对-氯苄氧基)苯基)吡唑-5-羧酸(I07)

参照化合物I03的制备，得白色晶体，收率75％。mp：217-218℃.Anal.C₃₁H₂₅ClN₂O₄.Calcd：C，70.92；H，4.77；N，5.34.Found：C，70.86；H，4.67；N，5.28.IR(KBr)ν3031，2952.1691，1610，1582，1535，1452，1381，1295，1272，1183，1095，1012，822，768，717cm^-1；¹HNMR(CDCl₃+DMSO-d₆)δ5.05(2H，s，-OCH₂Ar)，5.18(2H，s，-OCH₂Ph)，5.81(2H，s，-NCH₂Ph)，6.64-6.66(2H，m，3-H and 4-H)，7.26-7.46(1 0H，rn，-ArH，PhH and4’-H of pyrazole)，7.99(1H，d，J＝9.3，6-H).MS(EI)m/e：524(M⁺+1)，433，125，91(100).1-(4-氯苄基)-3-(2-苄氧基-4-(对-氯苄氧基)苯基)吡唑-5-羧酸(I08)

参照化合物I03的制备，得白色晶体，收率51％。mp：211-212℃.Anal.C₃₁H₂₄Cl₂N₂O₄.Calcd：C，66.67；H，4.30；N，5.02.Found：C，66.47；H，4.36；N，5.19.IR(KBr)ν3027，1693，1613，1583，1492，1450，1292，1173，1092，1072，1016，810，696cm^-1；¹HNMR(CDCl₃+DMSO-d₆)δ5.02(2H，s，-OCH₂Ar)，5.16(2H，s，-OCH₂Ph)，5.77(2H，s，-NCH₂Ar)，6.59-6.63(2H，m，3-H and 4-H)，7.23-7.43(14H，m，-ArH，PhH and4’-H of pyrazole)，7.92(1H，d，J＝9.0，6-H).MS(EI)m/e：558(m⁺+1)，433，125，91(100).3-(2，4-二(对-氯苄氧基)苯基)吡唑-5-羧酸(I09)

参照化合物I01的制备方法，得无色晶体，收率82％。mp：236-238℃.Anal.C₂₄H₁₈Cl₂N₂O₄.Calcd：C，61.41；H，3.84；N，5.97.Found：C，61.40；H，3.90；N，6.29.IR(KBr)ν3235，2896，1713，1614，1580，1492，1453，1408，1376，1279，1239，1171，1061，1005，963，801cm^-1；¹HNMR(CDCl₃+DMSO-d₆)δ2.65(1 H，br，-NH)，5.06(2H，s，-OCH₂Ar)，5.15(2H，s，-OCH₂Ar)，6.65(1H，d，J＝2.3，3-H)，6.67(1H，d，J＝2.4 and 9.2，5-H)，7.09(1H，s，4’-H of pyrazole)，7.32-7.41(8H，m，-ArH)，7.65(1H，d，J＝9.3，6-H).MS(EI)m/e：468(M⁺+1)，423，125(100).1-甲基-3-(2，4-二(对-氯苄氧基)苯基)吡唑-5-羧酸(I10)

参照化合物I03的制备方法，得白色晶体，收率71％。mp：205-206℃.Anal.C₂₅H₂₀Cl₂N₂O₄.Calcd：C，61.98；H，4.13；N，5.79.Found：C，62.21；H，4.18；N，6.05.IR(KBr)ν1694，1615，1584，1539，1492，1450，1368，1293，1182，1116，1014，808，767cm^-1；¹HNMR(CDCl₃+DMSO-d₆)δ4.21(3H，s，-NCH₃)，5.02(2H，s，-OCH₂Ar)，5.12(2H，s，-OCH₂Ar)，6.57(1H，d，J＝2.4，3-H)，6.63(1H，d，J＝2.4 and 8.6，5-H)，7.28(1H，s，4’-H of pyrazole)，7.30-7.38(8H，m，-ArH)，7.86(1H，d，J＝8.6，6-H). MS(EI)m/e：482(M⁺+1)，437，357，313，125(100).1-乙基-3-(2，4-二(对-氯苄氧基)苯基)吡唑-5-羧酸(I11)

参照化合物I03的制备方法，得白色晶体，收率90％。mp：192-193℃.Anal.C₂₆H₂₂Cl₂N₂O₄.Calcd：C，62.78；H，4.43；N，5.63.Found：C，63.24；H，4.58；N，5.95.IR(KBr)ν2982，2877，1693，1578，1537，1492，1455，1408，1277，1182，1088，1054，1014，815cm^-1；¹HNMR(CDCl₃+DMSO-d₆)δ1.43(3H，t，-NCH₂CH₃)，4.59(2H，q，-NCH₂CH₃)，5.04(2H，s，-OCH₂Ar)，5.13(2H，s，-OCH₂Ar)，6.57-6.66(2H，m，3-H and5-H)，7.20(1H，s，4’-H of pyrazole)，7.27-7.45(8H，m，-ArH)，7.85(1H，d，J＝9.0，6-H).MS(EI)m/e：496(M⁺+1)，423，371，327，125(100).1-丙基-3-(2，4-二(对-氯苄氧基)苯基)吡唑-5-羧酸(I12)

参照化合物I03的制备方法，得白色晶体，收率83％。mp：184-186℃.Anal.C₂₇H₂₄Cl₂N₂O₄.Calcd：C，63.41；H，4.70；N，5.48.Found：C，63.52；H，4.75；N，5.73.IR(KBr)ν2966，2935，1692，1614，1584，1539，1491，1452，1376，1286，1178，1123，1087，1061，1014，810，767cm^-1；¹HNMR(CDCl₃+DMSO-d₆)δ0.96(3H，t，-N(CH₂)₂CH₃)，1.93(2H，h，-NCH₂CH₂CH₃)，4.58(2H，t，-NCH₂CH₂CH₃)，5.05(2H，s，-OCH₂Ar)，5.14(2H，s，-OCH₂Ar)，6.60(1H，d，J＝2.3，3-H)，6.65(1H，dd，J＝2.3 and 8.6，5-H)，7.29(1H，s，4’-H of pyrazole)，7.34-7.41(8H，m，-ArH)，7.89(1H，d，J＝8.5，6-H).MS(EI)m/e：510(M⁺+1)，466，385，125(100).1-丁基-3-(2，4-二(对-氯苄氧基)苯基)吡唑-5-羧酸(I13)

参照化合物I03的制备方法，得白色晶体，收率78％。mp：164-165℃.Anal0C₂₈H₂₆Cl₂N₂O₄.Calcd：C，64.00；H，4.95；N，5.33.Found：C，63.62；H，5.13；N，5.40.IR(KBr)ν2960，2872，1692，1614，1583，1492，1451，1375，1283，1179，1120，1090，1015，810cm^-1；¹HNMR(CDCl₃+DMSO-d₆)δ0.93(3H，t，-N(CH₂)₃CH₃)，1.34(2H，h，-NCH₂CH₂CH₂CH₃)，1.84(2H，p，-NCH₂CH₂CH₂CH₃)，4.57(2H，t，-NCH₂(CH₂)₂CH₃)，5.00(2H，s，-OCH₂Ar)，5.09(2H，s，-OCH₂Ar)，6.56-6.62(2H，m，3-H and 5-H)，7.23(1H，s，4’-H of pyrazole)，7.30-7.45(8H，m，-ArH)，7.87(1H，d，J＝9.0，6-H).MS(EI)m/e：524(M⁺+1)，480，399，355，125(100).1-羧甲基-3-(2，4-二(对-氯苄氧基)苯基)吡唑-5-羧酸(I14)

参照化合物I03的制备方法，得白色晶体，收率33％。mp：210-212℃.Anal.C₂₆H₂₀Cl₂N₂O₆.Calcd：C，59.20；H，3.80；N，5.31.Found：C，59.17；H，3.92；N，5.72.IR(KBr)ν2952，1735，1695，1614，1583，1492，1450，1408，1292，1257，1176，1092，1015，830，806cm^-1；¹HNMR(CDCl₃+DMSO-d₆)δ5.02(2H，s，-OCH₂Ar)，5.12(2H，s，-OCH₂Ar)，5.34(2H，s，-NCH₂CO₂H)，6.58(1H，d，J＝2.0，3-H)，6.61(1H，dd，J＝2.0 and8.5，5-H)，7.32-7.39(9H，m，-ArH and 4’-H of pyrazole)，7.87(1H，d，J＝8.4，6-H).MS(EI)m/e：526(M⁺+1)，482，401，357，125(100).1-(3-羧基丙基)-3-(2，4-二(对-氯苄氧基)苯基)吡唑-5-羧酸(I15)

参照化合物I03的制备方法，得白色晶体，收率63％。mp：202-204℃.Anal.C₂₈H₂₄Cl₂N₂O₆.Calcd：C，60.54；H，4.32；N，5.05.Found：C，60.53；H，4.53；N，5.31.IR(KBr)ν3036，2930，1691，1613，1583，1537，1492，1452，1288，1232，1171，1097，1016，811cm^-1；¹HNMR(CDCl₃+DMSO-d₆)δ2.20(2H，p，-NCH₂CH₂CH₂CO₂H)，2.34(2H，t，-N(CH₂)₂CH₂CO₂H)，4.66(2H，t，-NCH₂(CH₂)₂CO₂H)，5.02(2H，s，-OCH₂Ar)，5.11(2H，s，-OCH₂Ar)，6.57(1H，d，J＝2.2，3-H)，6.62(1H，dd，J＝2.2and 8.7，5-H)，7.27(1H，s，4’-H of pyrazole)，7.31-7.39(8H，m，-ArH)，7.87(1H，d，J＝8.5，6-H).MS(ED m/e：554(M⁺+1)，510，430，385，125(100).1-(2-溴乙基)-3-(2，4-二(对-氯苄氧基)苯基)吡唑-5-羧酸(I16)

参照化合物I03的制备方法，得白色晶体，收率71％。mp：190-191℃.Anal.C₂₆H₂₁BrCl₂N₂O₄.Calcd：C，54.17；H，3.65；N，4.86.Found：C，54.07；H，3.43；N，4.88.IR(KBr)ν3027，2952，2874，1693，1614，1585，1492，1452，1407，1294，1178，1091，1014，807，766cm^-1；¹HNMR(CDCl₃+DMSO-d₆)δ4.04(2H，t，-CH₂Br)，4.77(2H，t，-NCH₂-)，5.03(2H，s，-OCH₂Ar)，5.12(2H，s，-OCH₂Ar)，6.59(1H，d，J＝2.4，3-H)，6.63(1H，dd，J＝2.4 and 8.4，5-H)，7.30(1H，s，4’-H ofpyrazole)，7.32-7.36(8H，m，-ArH)，7.86(1H，d，J＝8.6，6-H). MS(EI)m/e：574(M⁺+1)，494，422，369，125(100).1-(2-吡咯烷-1-基)乙基-3-(2，4-二(对-氯苄氧基)苯基)吡唑-5-羧酸(I17)

参照化合物I03的制备方法，得白色晶体，收率88％。mp：227-228℃.Anal.C₃₀H₁₉Cl₂N₃O₄.Calcd：C，63.60；H，5.12；N，7.42.Found：C，63.47；H，5.33；N，7.49.IR(KBr)ν3655，3395，1610，1581，1533，1493，1453，1405，1376，1297，1183，1088，1012，814，789cm^-1；¹HNMR(CDCl₃+DMSO-d₆)δ1.46-2.07(4H，br，-CH₂(CH₂)₂CH₂-of pyrrolidine)，2.20(4H，br，-CH₂(CH₂)₂CH₂- of pyrrolidine)，3.71(2H，t，-NC H ₂CH₂-pyrrolidine)，5.07(2H，s，-OCH₂Ar)，5.20(2H，s，-OCH₂Ar)，5.26(2H，t，-NCH₂C H ₂-pyrrolidine)，6.60(1H，d，J＝2.1，3-H)，6.67(1H，dd，J＝2.3 and 8.6，5-H)，7.28(1H，s，4’-H of pyrazole)，7.34-7.44(8H，m，-ArH)，7.86(1H，d，J＝8.6，6-H).MS(EI)m/e：565(M⁺+1)，125，97，84(100).1-烯丙基-3-(2，4-二(对-氯苄氧基)苯基)吡唑-5-羧酸(I18)

参照化合物I03的制备方法，得白色晶体，收率75％。mp：190-192℃.Ahal.C₂₇H₂₂Cl₂N₂O₄.Calcd：C，63.65；H，4.32；N，5.50.Found：C，63.51；H，4.26；N，5.57.IR(KBr)ν2877，1692，1610，1578，1536，1492，1456，1408，1275，1182，1093，1014，938，813cm^-1；¹HNMR(CDCl₃+DMSO-d₆)δ5.02(2H，s，-OCH₂Ar)，5.11(2H，s，-OCH₂Ar)，5.09-5.18(2H，m，-CH＝CH₂)，5.23(2H，d，J＝5.58，-NCH₂CH＝CH₂)，6.08(1H，m，-CH＝CH₂)，6.58(1H，d，J＝2.3，3-H)，6.62(1H，dd，J＝2.3 and 8.5，5-H)，7.29(1H，s，4’-Hof pyrazole)，7.31-7.38(8H，m，-ArH)，7.87(1H，d，J＝8.4，6-H).MS(EI)m/e：508(M⁺+1)，464，383，125(100).1-苯基-3-(2，4-二(对-氯苄氧基)苯基)吡唑-5-羧酸(I19)

参照化合物I03的制备方法，得白色晶体，收率66％。mp：206-208℃.Anal.C₃₀H₂₂Cl₂N₂O₄.Calcd：C，66.06；H，4.04；N，5.14.Found：C，65.67；H，4.45；N，5.13.IR(KBr)ν2919，1697，1617，1555，1492，1451，1372，1311，1230，1181，1127，1015，812，776，694cm^-1；¹HNMR(CDCl₃)δ5.05(2H，s，-OCH₂Ar)，5.16(2H，s，-OCH₂Ar)，6.64-6.66(2H，m，3-H and 5-H)，7.28-7.55(9H，m，ArH and 4’-H of pyrazole)，7.98(1H，d，J＝8.1，6-H).MS(EI)m/e：544(M⁺+1)，500，375，125(100).1-苄基-3-(2，4-二(对-氯苄氧基)苯基)吡唑-5-羧酸(I20)

参照化合物I03的制备方法，得白色晶体，收率87％。mp：187-188℃.Anal.C₃₁H₂₄Cl₂N₂O₄·0.5H₂O.Calcd：C，65.49；H，4.40；N，4.93.Found：C，65.11；H，4.24；N，5.09.IR(KBr)ν3030，2948，2867，1695，1612，1582，1541，1493，1450，1282，1178，1095，1015，811，722cm^-1；¹HNMR(CDC1₃+DMSO-d₆)δ5.03(2H，s，-OCH₂Ar)，5.11(2H，s，-OCH₂Ar)，5.82(2H，s，-NCH₂Ph)，6.58(1H，d，J＝2.3，3-H)，6.62(1H，dd，J＝2.3and 8.6，5-H)，7.22-7.38(14H，m，-PhH，ArH and 4’-H of pyrazole)，7.91(1H，d，J＝8.5，6-H).MS(EI)m/e：558(M⁺+1)，467，433，389，125(100)，91.1-(4-氯苄基)-3-(2，4-二(对-氯苄氧基)苯基)吡唑-5-羧酸(I21)

参照化合物I03的制备方法，得白色晶体，收率98％。mp：233-234℃.Anal.C₃₁H₂₃Cl₃N₂O₄.Calcd：C，62.68；H，3.88；N，4.72.Fourd：C，63.03；H，3.94；N，5.07.IR(KBr)ν3031，2954，1692，1614，1586，1492，1454，1408，1279，1184，1093，1015，811，748 cm^-1；¹HNMR(CDCl₃+DMSO-d₆)δ5.03(2H，s，-OCH₂Ar)，5.11(2H，s，-OCH₂Ar)，5.77(2H，s，-NCH₂Ar)，6.58(1H，d，J＝2.3，3-H)，6.62(1H，dd，J＝2.3and 8.5，5-H)，7.24-7.41(13H，m，-ArH and 4’-H of pyrazole)，7.90(1H，d，J＝8.5，6-H).MS(EI)m/e：592(M⁺+1)，467，125(100)，91.1-苄基-3-(2，4-二(对氟苄氧基)苯基)吡唑-5-羧酸(I22)

参照化合物I03的制备方法，得白色晶体，收率68％。mp：203-204℃.Anal.C₃₁H₂₄F₂N₂O₄.Calcd：C，70.71；H，4.59；N，5.32.Found：C，70.29；H，4.12；N，5.97.1-苄基-3-(2，4-二(邻碘苄氧基)苯基)吡唑-5-羧酸(I23)

参照化合物I03的制备方法，得白色晶体，收率82％。mp：197-198℃.Anal.C₃₁H₂₄I₂N₂O₄.Calcd：C，50.16；H，3.26；N，3.77.Found：C，50.58；H，3.77；N，4.12.1-乙基-3-(2-邻溴苄氧基，4-对碘苄氧基)苯基-吡唑-5-羧酸(I24)

参照化合物I03的制备方法，得白色晶体，收率84％。mp：200-201℃.Anal.C₂₆H₂₂Cl₂N₂O₄.Calcd：C，49.31；H，3.50；N，4.42.Found：C，49.80；H，3.78；N，4.88.1-乙基-3-(2-邻氯苄氧基，4-对溴苄氧基)苯基-吡唑-5-羧酸(I25)

参照化合物I03的制备方法，得白色晶体，收率79％。mp：198-199℃.Anal.C₂₆H₂₂Cl₂N₂O₄.Calcd：C，57.63；H，4.09；N，5.17.Found：C，58.01；H，4.41；N，5.45.1-甲基-5-(2-苄氧基-4-(4-氯苄氧基)苯基)吡唑-3-羧酸(I26)

参照化合物I 03的制备方法，得白色晶体，收率89％。mp：148-150℃.Anal.C₂₅H₂₁ClN₂O₄.Calcd：C，66.89；H，4.68；N，6.24.Found：C，66.53；H，4.98；N，6.46.IR(KBr)ν3029，2897，1693，1615，1580，1556，1491，1452，1372，1306，1250，1173，1117，1012，807，731，694cm^-1；¹HNMR(CDCl₃+DMSO-d₆)δ3.72(3H，s，-NCH3)，5.11(2H，s，-OCH₂Ar)，5.12(2H，s，-OCH₂Ar)，6.65(1H，s，4’-H ofpyrazole)，6.68(1H，dd，J＝2.1and 8.5，5-H)，6.80(1H，d，J＝2.1，3-H)，7.19(1H，d，J＝8.4，6-H)，7.26-7.33(5H，m，-PhH)，7.37-7.46(4H，m，-ArH).MS(EI)m/e：448(M⁺+1)，404，125，91(100).1-苯基-5-(2，4-二(4-氯苄氧基)苯基)吡唑-3-羧酸(I27)

参照化合物I03的制备方法，得白色晶体，收率67％。mp：205-206℃.Anal.C₃₀H₂₂Cl₂N₂O₄·0.5H₂O.Calcd：C，67.15；H，3.97；N，5.05.Found：C，67.13；H，4.23；N，5.53.IR(KBr)ν3067，2922，2872，1705，1614，1585，1538，1493，1445，1374，1298，1243，1180，1117，1069，1013，801，767cm^-1；¹HNMR(CDCl₃)δ4.67(2H，s，-OCH₂Ar)，5.01(2H，s，-OCH₂Ar)，6.41(1H，d，J＝2.2，3-H)，6.61(1H，dd，J＝2.2and 8.5，5-H)，6.86(1H，d，J＝8.4，6-H)，7.02(1H，s，4’-H of pyrazole)，7.23-7.40(13H，m，-PhH and ArH).MS(EI)m/e：544(M⁺+1)，125(100).1-苯基-3-(2，4-二(对-氯苄氧基)苯基)吡唑-5-羧酸乙酯(8)和1-苯基-5-(2，4-二(对-氯苄氧基)苯基)吡唑-3-羧酸乙酯(9)

将1.5g(3mmol)2，4-二(对-氯苄氧基)苯甲酰甲基草酸二乙酯溶于20ml HOAc中，慢慢滴入0.4g(3.5mrnol)苯肼，滴毕回流反应10hr，冷至室温，反应液倒入冰水中，用氯仿3×10ml提取，无水硫酸镁干燥，蒸去氯仿，残余快速柱层析(洗脱液为石油醚∶乙酸乙酯＝1∶1(v/v))分得化合物8为白色针晶0.06g，收率3.4％，mp：121-122℃，¹HNMR(CDCl₃)δ1.24(3H，t，-CO₂CH₂CH₃)，4.22(2H，q，-CO₂CH₂CH₃)，5.04(2H，s，-OCH₂Ar)，5.13(2H，s，-OCH₂Ar)，6.63-6.66(2H，m，3-H and 5-H)，7.36-7.49(14H，m，-PhH，ArH and 4’-H of pyrazole)，8.01(1H，d，J＝8.8，6-H).化合物9为白色针晶约0.7g，收率39％，mp：137-138℃，¹HNMR(CDCl₃)δ1.42(3H，t，-CO₂CH₂CH₃)，4.44(2H，q，-CO₂CH₂CH₃)，4.65(2H，s，-OCH₂Ar)，4.98(2H，s，-OCH₂Ar)，6.38(1H，d，J＝2.3，3-H)，6.58(1H，dd，J＝2.3and 8.4，5-H)，6.83(1H，d，J＝8.4，6-H)，6.95(1H，s，4’-H ofpyrazole)，7.19-7.37(13H，m，-PhH and ArH).1-甲基-3-(2-苄氧基-4-(对-氯苄氧基)苯基)吡唑-5-羧酸乙酯(11a)和1-甲基-5-(2-苄氧基-4-(对-氯苄氧基)苯基)吡唑-3-羧酸乙酯(12a)

将0.8g(1.7mmol)3-(2-苄氧基-4-(对-氯苄氧基)苯基)吡唑-5-羧酸乙酯和1mlCH₃l，3g K₂CO₃，混合于25ml丙酮中回流反应2hr，冷至室温，过滤，蒸去丙酮，残余快速柱层析(洗脱液为石油醚∶乙酸乙酯＝4∶1(v/v))分得化合物11a为白色晶体0.38g，收率46％，mp：139-140℃，¹HNMR(CDCl₃)δ1.34(3H，t，-CO₂CH₂CH₃)，4.21(3H，s，-NCH₃)，4.30(2H，q，-CO₂CH₂CH₃)，5.03(2H，s，-OCH₂-)，5.14(2H，s，-OCH₂-)，6.63(1H，dd，J＝2.4and 8.8，5-H)，6.64(1H，d，J＝2.4，3-H)，7.29(1H，s，4’-H ofpyrazole)，7.33-7.47(9H，m，-PhH and ArH)，7.91(1H，d，J＝8.8，6-H).化合物12a为白色晶体0.34g，收率41％，mp：124-126℃。¹HNMR(CDCl₃)δ 1.41(3H，t，-CO₂CH₂CH₃)，3.76(3H，s，-NCH₃)，4.42(2H，q，-CO₂CH₂CH₃)，5.04(2H，s，-OCH₂-)，5.05(2H，s，-OCH₂-)，6.62(1H，dd，J＝2.4and 8.4，5-H)，6.68(1H，d，J＝2.3，3-H)，6.77(1H，s，4’-H ofpyrazole)，7.17(1H，d，J＝8.3，6-H)，7.21-7.37(9H，m，-PhH and ArH).1-(4-氯苄基)-3-(2-苄氧基-4-(4-氯苄氧基)苯基)吡唑-5-羧酸乙酯(11b)和1-(4-氯苄基)-5-(2-苄氧基-4-(4-氯苄氧基)苯基)吡唑-3-羧酸乙酯(12b)

参照化合物11a和12a的制备方法，得化合物11b为白色针晶，收率89％，mpl24-126℃，¹HNMR(CDC1₃)δ1.28(3H，t，-CO₂CH₂CH₃)，4.24(2H，q，-CO₂CH₂CH₃)，5.04(2H，s，-OCH₂-)，5.14(2H，s，-OCH₂-)，5.74(2H，s，1-NCH2Ar)，6.62-6.65(2H，m，3-H and 5-H)，7.23-7.46(14H，m，-PhH，ArH and 4’-H of pyrazole)，7.97(1H，d，J＝8.3，6-H).化合物12b为白色针晶，收率9.6％，mp117-118℃，¹HNMR(CDCl₃)δ1.41(3H，t，-CO₂CH₂CH₃)，4.43(2H，q，-CO₂CH₂CH₃)，4.95(2H，s，-OCH₂-)，5.02(2H，s，-OCH₂-)，5.23(2H，s，-NCH₂Ar)，6.53(1H，dd，J＝2.4 and 8.4，5-H)，6.62(1H，d，J＝2.3，3-H)，6.79(1H，s，4’-H of pyrazole)，6.97(1H，d，J＝8.4，6-H)，6.81-7.33(13H，m，-PhH and ArH).

Claims

1.式(I)所包括的化合物及其盐类：

其中，R₁为C₁-C₆烷基及烯基，或有一到四个碳原子间隔的羧酸及其酯类，或有一到四个碳原子间隔的芳基及取代芳基，或有一到四个碳原子间隔的杂环；R₂，R₃各自独立地为H或卤素。

2.按照权利要求1所述的化合物，其中R₁为C₁-C₄烷基，R₂，R₃各自独立地为4-氯。

3.按照权利要求2所述的化合物，其中R₁为正丁基，R₂，R₃各自独立地为4-氯。

4.按照权利要求1所述的化合物，其中R₁为一到二个碳原子间隔的羧酸及其酯类，R₂，R₃各自独立地为4-氯。

5.按照权利要求4所述的化合物，其中R₁为羧甲基，R₂，R₃各自独立地为4-氯。

6.按照权利要求1所述的化合物，包含有通式(I)化合物的各种药物剂型及药物载体。

7.通式(I)的化合物作为内皮素受体拮抗剂用于制备治疗心脑血管疾病的药物中的应用。

8.通式(I)的化合物作为内皮素受体拮抗剂用于制备治疗肿瘤的药物中的应用。

9.通式(I)的化合物作为内皮素受体拮抗剂用于制备治疗糖尿病肾病的药物中的应用。

10.通式(I)的化合物作为内皮素受体拮抗剂用于制备治疗哮喘的药物中的应用。

11.通式(I)的化合物作为内皮素受体拮抗剂用于制备治疗甲状腺亢进的药物中的应用。