CN1471914A - 防治由sars病毒引起的非典型肺炎的药物和应用及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种防治由SARS病毒引起的非典型肺炎的药物和应用及其制备方法，其中的有效活性成分包括白头翁素，尤其公开了该白头翁素化合物在预防和治疗由SARS病毒引起的非典型肺炎中的应用。本发明提供的该药物中的有效成分白头翁素可从含有白头翁素或其前体的天然植物中分离提取，也可化学合成，本发明还提供了从中草药制备白头翁素提取液的方法。该药物可制成口服剂、注射剂和外用制剂，特别是包括可被透皮吸收的流浸膏剂、硬膏剂、栓剂、擦剂、涂布剂等的多种外用剂型。

Description

防治由SARS病毒引起的非典型肺炎的药物和应用及其制备方法

技术领域：本发明涉及制药领域，具体地是涉及一种以白头翁素为有效成分用于防治由SARS病毒引起的非典型肺炎的药物和应用及其制备方法，它是予防和治疗由SARS病毒引起的非典型肺炎或严重急性呼吸综合症的药物，同时涉及该药物的应用及其制备方法，特别是白头翁素在予防和治疗由SARS病毒引起的非典型肺炎或严重急性呼吸综合症中的应用。

技术背景：医学界把肺炎按病因分为″细菌性肺炎″、″病毒性肺炎″以及由支原体、衣原体、军团杆菌感染引起的非典型肺炎；细菌性肺炎是临床最常见的肺炎，常见病原菌有肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、卡他莫拉菌等，其诱因多为上呼吸道感染、受凉，临床症状多为发烧、头疼、剧烈咳嗽、咳痰、初为白粘痰，2-3天后可出现黄脓痰，有时可出现铁锈色痰，化验白细胞增高，中性粒细胞可达80％以上，X光片可呈现大片状或斑片状的实变性阴影，痰液中可培养出病原菌。细菌性肺炎使用青霉素类、头孢菌素类抗生素即可得到有效控制；病毒性肺炎是由流感病毒、副流感病毒、腺病毒等引起的肺炎，其中以流感病毒肺炎最为严重。病毒性肺炎常继发于上呼吸道感染，多见于婴幼儿。病毒性肺炎起病可急可缓，症状有头疼、乏力、发热、咳嗽等，1-2天后呼吸增快，症状加重，两肺可闻湿罗音，重症患者会出现呼吸衰竭及休克；非典型肺炎是相对于经典的″大叶性肺炎″而言，因早年发现这种肺炎时其病原体尚未完全明确，临床症状也不够典型，所以称非典型肺炎，以前只把支原体肺炎称为非典型肺炎，现在一般把由衣原体、支原体和军团杆菌等介于病毒和细菌之间的微生物，以及2002年11月在广州发生的SARS病毒感染人体肺部后形成的肺炎称为非典型肺炎；同细菌性肺炎相比，2002年11月在广州发生的非典型肺炎持续时间长，有的出现黄疸、肾功能损害、呼吸困难、紫疳、昏迷等肺外表现。痰液中一般很难培养出病原菌，需要做血清学检查，而且在发病初期由于抗体还未形成，结果多为阴性，只有在患病一段时间后血清抗体才能由阴转阳，

因而非典型肺炎血清学检查在临床上只有诊断意义，治疗意义不大。非典型肺炎早期表现为乏力，头疼，食欲下降，继而出现气促、呼吸加速和明显的呼吸道窘迫症状，呼吸困难，呼吸频率＞30次/分钟。38度以上的高烧、畏寒、咳嗽、全身肌肉关节酸痛，咳少量白粘痰或带有血丝痰，肺部罗音或有肺实变体征之一以上，胸部X光片可见两肺不同程度的片状、斑片状浸润性阴影或呈网状样改变并在48小时内病灶进展＞50％，血常规化验白细胞一般正常或偏低，抗菌药物治疗无明显效果。具有很强的传染性，主要是通过飞沫和接触传染，人群密集的地方往往是传染致病的高危地带；这个肺炎与一般肺炎不一样，首先病人高烧、干咳，并没有一般流感的流涕、咽痛等症状，也没有通常感冒常见的白色或黄色痰液，偶尔病人痰中带血丝，个别病人出现呼吸窘迫综合症。一般情况下，患者发烧时白细胞会升高，而此次非典型肺炎病人白细胞正常或下降；特别是X光胸片特点与临床状况分离，一般是肺炎先有很重的临床表现，后在X光胸片上可以看到肺部有阴影变化，但此次则是在临床症状还不严重时，X光片已显示病人有絮状阴影，并呈快速发展趋势，香港病例连续胸部X线检查显示进行性肺泡腔病变，2例病人死于进行性呼吸衰竭，他们的肺脏组织学分析显示累及所有肺区域的弥漫性肺泡损害、没有肺炎支原体、肺炎衣原体或嗜肺军团菌感染的证据，发热和随后快速进展的呼吸功能受损是症状和体征的主要组成部分，通常高烧时患者应用抗生素会有明显效果，但非典型肺炎抗生素大多无效，约有7％的病人需做人工呼吸，非典型肺炎第一代的传播期在4-5天，第二代10天左右，非典型肺炎是一种很特殊的病变，主要表现是肺的纤维化和玻璃样变，这就需要比较早地使用皮质激素，这跟一般的治疗方法不一样，在病理变化方面，早期的要用″非创伤性″的空气，能够使病人发展成″低氧血症″，这也有它的特殊性；2002年11月在广东发现的并在中国部分省市和世界27个国家迅速蔓延的非典型肺炎，病原体已由世界卫生组织在科赫原则已经得到满足的情况下于2003年4月16日正式确认是冠状病毒的变种并把这种新病毒命名为SARS病毒；非典型肺炎的冠状病毒的基因序列有29727个核苷，SARS病毒感染人体后形成机体免疫抑制，侵入人体深部引起肺部损伤为先导的全身多器官损害的非典型肺炎，冠状病毒以核糖核酸为基因，这一特征使变异非常迅猛，非典型肺炎的死亡率在3％-5％之间，中国疾病予防控制中心病毒病予防控制所发现的″新衣原体样因子″与SARS病毒有可能同时感染或相继感染人体形成非典型肺炎，发现于1965年的冠状病毒是RNA病毒，冠状病毒属(Coronavirus)是冠状病毒科(Coronaviridae)中的一个属，其成员包括三个组：第一组有犬冠状病毒、猫冠状病毒、猫传染性腹膜炎病毒、人冠状病毒229E、可传播胃肠炎病毒等；第二组有牛冠状病毒、人冠状病毒oc43、小鼠肝炎病毒等；第三组包括传染性支气管炎病毒、火鸡冠状病毒和大鼠冠状病毒。以上病毒中，人冠状病毒引起人类普通感冒，冠状病毒病毒颗粒多为园形，椭圆形或轻度多形性，直径为60-220rm，表面有多个稀疏的棒状突起，长约20nm，电镜负染照片示病毒颗粒形似王冠，病毒颗粒内有由病毒RNA和蛋白质组成的核心，外面有脂质双层膜，冠状病毒在世界各地普遍存在、在温带地区感染多发于冬春季，在美国，冠状病毒OC43和229E两个病毒株每2-3年引起一次大的流行，229E株的感染一般倾向于波及全美国，而OC43株限于一些局部地区，受冠状病毒感染者约半数出现症状，再感染常见，可能是因抗体水平快速降低，冠状病毒呼吸道感染通过呼吸道飞沫传播；引起人类感染的冠状病毒主要有人冠状病毒229E和OC43，以往认为这些病毒只引起儿童的上呼吸道感染，主要为普通感冒，而且普通感冒病人的10％-30％由冠状病毒引起，冠状病毒感染造成的普通感冒潜伏期为2-5天，病程持续6-7天，主要临床症状包括不适、鼻咽、头痛、咽痛及咳嗽，可有发热、声音嘶哑、胸腹痛等，偶可引起小儿哮喘突然发作以及成人慢性支气管炎加重；国外对志愿者的研究表明，此病毒除引起成人普通感冒以外，还可引起无症状感染，但国外一些教科书指出，冠状病毒偶可引起严重的下呼吸道感染，曾有人观察到，海军陆战队新兵中发生冠状病毒感染时，约1/3的病例发生肺炎和胸膜反应，对成人慢性肺部疾病或哮喘病人进行的6项研究都显示，冠状病毒感染与呼吸系统症状的加重相关，有人对疑有病毒感染性疾病病人的14000对双份血清进行包括冠状病毒在内的病毒抗体检测，结果发现30例病人有急性冠状病毒OC43感染，其中8例(包括4例成人)患有肺炎，其中3例同时还有其它病毒感染，4例病人有神经系统症状，1例病人有重症心肌炎；由此可见，冠状病毒可在各年令组引起严重下呼吸感染及其它系统疾病。对冠状病毒感染，尚无特异性抗病毒疗法，而且关于冠状病毒感染抗病毒治疗的文献报告也很少。有一项在志愿者中进行的研究表明，在用冠状病毒攻击前或攻击后，鼻内使用dA干扰素，与给予安慰剂的对照相比，可使感冒的发生率、症状和体征的严重程度以及病毒的复制都减少，也有研究者提出，将干扰素与抗病毒药合用，有可能提高疗效。SARS病毒的遗传构成与已知的动物或人类冠状病毒都并不十分接近，尽管SARS病毒与引起普通感冒的病毒同属冠状病毒家族，但它与普通感冒病毒相差很大，遗传学研究表明，SARS病毒与鼠肝炎病毒和禽传染性支气管炎病毒有相似之处：这两种病毒都来自冠状病毒家族的不同分支。目前在临床上治疗非典型肺炎经常使用大环内脂类，如：红霉素、阿齐霉素、罗红霉素、克拉霉素等，氟喹诺酮类，如：氧氟沙星、环丙沙星、莫西沙星等，β-内酰胺类、四环素类等。但这些药物并不是治疗SARS病毒引起的非典型肺炎的特效药，同时也没有予防SARS病毒引起的非典礼肺炎的药物。

发明概述：针对目前予防和治疗SARS病毒引起的非典型肺炎尚无特效的治疗药物的现状，本发明的主要目的是：提供防治由SARS病毒引起的非典型肺炎的药物和应用及其制备方法，这是一种可用于予防和治疗SARS病毒引起的非典型肺炎的药物，其有效成分包括有化合物白头翁素。白头翁素可以通过化学合成方法得到，尤其可以来自天然中草药原料分离提取；在2-3月广州非典型肺炎蔓延时广东医院一些医生自愿试用以白头翁素为主要成分的药物，临床治疗中证明以该化合物为有效活性成分制备出的外敷药物对于予防和治疗SARS病毒引起的非典型肺炎有十分显著和快速的疗效，降温快，肺部x片阴影消散快，呼吸急促迅速解除，不会产生呼吸窘迫，并且无毒、对敷贴位置的皮肤长时间敷贴无刺激性，本发明进而提出了白头翁素或含有白头翁素的天然提取物在予防和治疗SARS病毒引起的非典型肺炎方面的用途；本发明还提出了以该化合物白头翁素为有效成分的用于予防和治疗SARS病毒引起的非典型肺炎的最有效和最快捷的药物剂型，尤其是外用剂，提供了予防和治疗SARS病毒引起的非典型肺炎的最佳给药方式，本发明还提供了一种予防和治疗SARS病毒引起的非典型肺炎的天然药物，其中的有效成分为来自天然中草药的白头翁素提取液；本发明同时提供了该药物的一种制备方法，尤其是从天然药用植物中提取和制备白头翁素的方法，通过本发明提供的方法可使原料药中所含的具有强烈毒副作用的原白头翁素转化成为无刺激性的白头翁素，实现该药物的工业化生产。

发明详述：本发明提供的防治由SARS病毒引起的非典型肺炎的药物，其中包括有效治疗量的白头翁素。

所述的白头翁素来自含有该化合物成分或其前体的任何天然植物或中草药的分离提取物，所述的天然植物或中草药包括：毛茛科植物的毛茛、马蹄叶、石龙芮、打破碗花花、白头翁、竹节香附、回回蒜，选自威灵仙、山木通、棉团铁线莲、东北铁线莲、锥花铁线莲、铁线莲、毛蕊铁线莲、柱果铁线莲、毛柱铁线莲的威灵仙和打破碗花花的变种秋牡丹；禾本科植物的白茅根、含有毛茛甙的毛茛科铁筷子属植物；及银莲花族的银莲花属植物、獐耳细辛属植物、毛茛族中的水毛茛族植物、翠雀花族中聚叶花亭乌头；当然，启头翁素可以为化学合成产物。所述治疗有效量的白头翁素来自使用有机溶剂、水、动、植物油、酿造醋或无机酸作浸提剂对原料药进行浸提而得到的白头翁素提取液；其中还可包括任何能与该白头翁素化合物配伍而起辅助治疗作用的中药提取物；其包括口服剂、注射剂和外用剂型，其中，外用剂型包括可被透皮吸收的流浸膏剂、硬膏剂、栓剂、擦剂、涂布剂；防治由SARS病毒引起的非典型肺炎的药物的应用，它除了能予防和治疗SARS病毒引起的非典型肺炎外，还能够治疗肺部炎症的疾病还包括支气管炎、哮喘、肺气肿、肺炎球菌肺炎、金黄色葡萄球菌肺炎、其它革兰阴性杆菌肺炎、厌氧菌肺炎、支原体肺炎、克雷白杆菌肺炎、以及其他由流感病毒、副流感病毒、呼吸道合胞病毒和腺病毒引起的病毒性肺炎、肺曲菌病、肺隐球菌病、肺放线菌病、肺念珠菌病、肺结核、肺炎球菌肺炎、金黄色葡萄球菌肺炎、其它革兰阴性杆菌肺炎、厌氧菌肺炎、克雷白杆菌肺炎、肺曲菌病、肺隐球菌病、肺放线菌病、肺念珠菌病等肺部疾病，所述非典型肺炎症包括由SARS病毒引起的非典型肺炎以及由衣原体、支原体、军团杆菌引起的非典型肺炎，支气管炎、哮喘、肺气肿，以及其他由流感病毒、副流感病毒、呼吸道合胞病毒、腺病毒引起的病毒性肺炎，以及其他由流感病毒、副流感病毒、呼吸道合胞病毒和腺病毒引起的病毒性肺炎、肺曲菌病、肺隐球菌病、肺放线菌病、肺念珠菌病、肺结核，肺炎球菌肺炎、金黄色葡萄球菌肺炎、其它革兰阴性杆菌肺炎、厌氧菌肺炎、克雷白杆菌肺炎，肺曲菌病、肺隐球菌病、肺放线菌病、肺念珠菌病等肺部疾病；白头翁素作为有效成分的药物在予防和治疗由SARS病毒引起的非典型肺炎疾病及由SARS病毒引起的非典型肺炎引起的各种并发症如心、肝、肾并发症中的用途。这种防治由SARS病毒引起的非典型肺炎的药物的制备方法，包括使用有机溶剂、水、动、植物油、酿造醋或无机酸作浸提剂，对含有毛茛甙的任何天然植物或中草药在密封条件下进行浸提，浸提包括冷浸和热浸，收集提取液，所用有机溶剂包括甲醇、乙醇、丙二醇、甘油、氯仿，或其混合物；本发明可以用30-50％浓度的乙醇作浸提剂，冷浸8个月以上，也可以将其加热至沸点后加入原料药继续加热至沸点，密封浸提6个月以上；本发明还可以使用95％浓度的乙醇浸提已粉碎了的原料药，制备药物软膏；本发明也可以将含有白头翁素的药物采用常规方法涂覆在纱布或无纺布上，无纺布面积约为100平方厘米，无纺布厚度应能吸附50毫升毛茛提取液，约含25毫克白头翁素。比较具体地说：本发明用中药威灵仙饮片、或白头翁饮片提取液浓缩，制成予防SARS病毒引起的非典型肺炎的牙膏或含片，用中药威灵仙饮片，或白头翁饮片制成口服液或饮料。

白头翁素可以来自任何含有毛茛甙和原白头翁素的天然中草药的提取物，适合的天然中草药原料可包括毛茛科植物、禾本科植物等。其中，毛茛科植物包括：毛茛、马蹄叶、石龙芮、打破碗花花、白头翁、竹节香附、回回蒜等、选自威灵仙中含有白头翁素的威灵仙、山木通、棉团铁线莲、东北铁线莲、锥花铁线莲、铁线莲、毛蕊铁线莲、柱果铁线莲、毛柱铁线莲等九种，和打破碗花花的变种秋牡丹等；禾本科植物中的白茅根、含有毛茛甙的毛茛科铁筷子属植物、银莲花族的银莲花属植物、獐耳细辛属植物、毛茛族中的水毛茛族植物、翠雀花族中聚叶花亭乌头。

在本发明以前的公开报导中，上述天然原料药中都含有毛茛甙或原白头翁素，经临床实验证实具有一定的抗癌活性，对肿瘤有抑制作用，但原白头翁素有强烈的刺激性和毒性，如使这些植物长时间与皮肤接触可引起炎症，如出现红肿和水泡等。作为白头翁素的前体，毛茛甙酶解脱去糖成为原白头翁素，原白头翁素经聚合可成为二聚体白头翁素，部分原料药本身亦含有白头翁素(多为原料药在放置过程中产生)，并已发现白头翁素对于葡萄球菌、链球菌、白喉杆菌、结核杆菌、大肠杆菌等有抑制作用，主要作为抑菌成分使用，所以在本发明以前，上述含有原白头翁素或白头翁素的天然原料药均被用于抗肿瘤和抗菌消炎的临床治疗，也有报导提到这类植物中的如威灵仙在临床被用于祛风湿、活血止痛。

本发明人在长期的研究探索中发现，包括上述原料在内的一些含有原白头翁素的天然中草药无论是内服还是外用，均对人体有刺激作用，表现在内服可引发剧烈胃肠炎和中毒症状，引起恶心，呕吐和下泻，甚至刺激肾脏产生血尿、蛋白尿；与皮肤接触可引起炎症如红肿和水泡，但该成分有很强的抗菌作用；在这类原料药中加入水或有机溶剂，并长期放置(或加热长期放置)，或加乙醚、丙酮、硫酸使原白头翁素两分子叠合，上述毒副作用则消失，但对于非典型肺炎的予防和治疗却具有特效，经鉴定原料中原白头翁素的化学结构在此过程中被提取出来同时发生了改变，即使原白头翁素两分子叠合而聚合成了无刺激性的白头翁素；在此研究结果的基础上，本发明提出了以白头翁素为主要活性成分用于予防和治疗SARS病毒引起的非典型肺炎的药物，其中，所用的白头翁素主要是从含有毛茛甙的鲜毛茛中分离提取的结晶体，或是从鲜毛茛中用乙醇提取的白头翁素提取液，还可以是化学合成产物；也可以从含毛茛甙和白头翁素的其它药物中提取白头翁素。

在本发明以前，由中国卫生部疾病控制司组织专家制定的非典型肺炎的防治技术方案的推荐治疗方案为：

(一)一般性治疗：

体息，适当补充液体及维生素，避免用力和剧烈咳嗽。密切观察病情变化(多数病人在发病后14天内都可能属于进展期)；定期复查胸片(早期复查间隔时间不超过三天)、心、肝、肾功能等；每天检测体表血氧饱和度。

(二)对症治疗：

1、有发热超过38.5度者，全身酸痛明显者，可使用解热镇痛药；高热者给予冰敷、酒精擦浴等物理降温措施。

2、咳嗽、咳痰者给予镇咳、祛痰药。

3、有心、肝、肾等器官功能损害，应该作相应的处理。

4、气促明显、轻度低氧血症者应早给予持续鼻导管吸氧。

儿童忌用阿斯匹林，因该药有可能引起Reye综合症。

(三)治疗上早期应用大环内脂类、氟喹诺酮类、β-内酰胺类、四环素类等，如果痰培养或临床上提示有耐药球菌感染，可选用(去甲)万古霉素等。

(四)糖皮质激素的应用：建议应用激素的指标为：①有严重中毒症状；②达到重症病例标准者。应有规律使用，具体剂量根据病情来调整；儿童慎用。

(五)可选用中药辅助治疗，治疗原则为：温病，卫、气、营血和三焦辨证论治。

(六)可选用抗病毒药物。

(七)可选用增强免疫功能的药物。

(八)重症病人的处理和治疗：

1、有明显呼吸困难或达到重症病例诊断标准要进行监护。

2、可使用无创正压通气首选鼻罩CPAP的方法，常用的压力水平为4-10cmH2O；应选择适当的罩，并应持续应用(包括睡眠时间)，暂停时间不超过30分钟，直到病情缓解。推荐使用无创正压通气的标准：呼吸次数＞30次/分；吸氧3-5升/分条件下，SaO2＜93％。

3、严重呼吸困难和低氧血症，吸氧5升/分条件下，SaO2＜90％或氧合指数＜200mmHg，经过无创正压通气治疗后无改善，或不能耐受无创正压通气治疗者，应该及时考虑进行有创的正压通气治疗。

4、一旦出现休克或MODS，应及时作相应的处理，如果处理有困难或条件不足，应及时请有关专家会诊。

二、非典型肺炎出院诊断参考标准

同时具备下列三个条件：

1、未用退热药物，体温正常七天以上；

2、呼吸系统症状明显改善；

3、胸部影象学有明显吸收。

由卫生部推荐的治疗方案来看，治疗非典型肺炎的过程是十分复杂的。

在本发明之后，SARS病毒引起的非典型肺炎的予防特别是治疗将变得十分简单，高效、方便，快速，安全。

对SARS病毒引起的非典型肺炎的治疗与现有技术相比，本发明提供的白头翁素提取液在胸部敷贴或使用白头翁素制成的药物在胸部病灶区域透皮吸收给药对SARS病毒引起的非典型肺炎的予防和治疗效果极为显著，不吃药，不打针，不输液，不手术，不吸氧、不住院，仅通过外敷治疗，如用白头翁素提取液透皮湿敷3-6次即可治愈。

本发明药物的治疗机理在于白头翁素通过在SARS病毒引起的非典型肺炎病人的胸部部位向肺部深处靶向透皮给药，利用白头翁素十分强大的透皮吸收功能和显著的全身广谱抗菌消炎、广谱抗病毒、消除肺部水肿、清除肺泡之间粘连的作用，使肺部不再充血、出血、消除肺部水肿，修复弥漫性肺泡损伤，增强机体免疫能力，白头翁素十分强大的透皮吸收能力和显著、强烈的抗炎作用可以直接穿透病毒的蛋白质外壳攻击外壳包裹着的带有遗传信息的核酸，在很短时间内杀灭导致非典型肺炎的SARS病毒。

发明人委托中科院上海药物研究所植物化学研究室已完成从毛莨中分离提取白头翁素标准品的工作，对所得白头翁素进行全面的波谱测定，包括核磁共振碳谱、核磁共振氢谱，质谱，红外光谱和紫外光谱，及X-衍射结构测定，得到的分子相对构型确认为白头翁素，与文献记载相符；对所得白头翁素的含量测定，经高效液相归一法测定，白头翁素标准品的纯度达到98％以上。

中科院上海药物研究所免疫药理研究室提供的白头翁素对T、B细胞淋巴细胞功能影响作用的研究(实验报告)：

T、B细胞淋巴细胞增殖反应实验

1、摘要：

白头翁素是具有消炎祛痛功效的一种商品名称为“胡三帖”(湿巾)外用药的主要有效成分；为了探讨白头翁素抗炎作用的机理，我们首先观察了其对机体免疫系统的主要炎症反应细胞(T、B淋巴细胞)功能的影响作用。在有丝分裂原诱导的T、B细胞淋巴细胞增殖反应的实验中，白头翁素对T、B细胞淋巴细胞的增值反应显示了有强烈的免疫抑制效应(抗炎作用)；并显示了它在体外实验系统中对淋巴细胞的存活率有明显的抑制效应，直接对淋巴细胞具有杀伤作用。

这一实验研究结果提示了外用“胡三帖”(湿巾)的主要有效成分白头翁素经皮肤吸收后，可能通过影响局部组织的炎性淋巴细胞功能，降低淋巴细胞活性和抑制淋巴细胞炎性反应，以达到其消炎祛痛的功效。

2、实验目的：

无任是有菌性炎症和无菌性炎症的病因如何，在炎症反应的组织中都存在有炎性淋巴细胞的浸润、炎性因子的分泌，导致组织的损伤和破坏，以及疼痛等症状，是机体各组织发生炎性病理反应的基础形式。从病理学和免疫学的研究角度出发，我们在对白头翁素的抗炎机理的研究时，首先采用体外实验的检测系统，运用有丝分裂原诱导的T、B细胞淋巴细胞增殖反应这一实验方法，检测它对正常淋巴细胞的功能发挥是否有影响作用；T、B淋巴细胞是机体免疫(炎性)反应的主要作用细胞。如药物能使淋巴细胞增殖反应的功能增强时，即表现为有免疫增强的活性作用，也就具有促进炎性反应的作用；如能抑制淋巴细胞的反应，即表现为具有免疫抑制活性作用，也就是说其具有抗炎的活性作用；炎症与疼痛，以及抗炎作用的发挥与疼痛的缓解在生理和和病理学上都有着不可分割的因果关系和密切的关联性，具有免疫抑制活性(抗炎)作用的药物就有可能被用于多种炎性疾病所致的疼痛的治疗，如各类组织的炎症、关节炎和类风湿关节炎等等；所以通过检测白头翁素在对淋巴细胞增殖反应中的影响作用，有助于我们了解它产生的抗炎止痛功效的药理学作用机理。

3、实验结果和讨论：

一、白头翁素对小鼠全脾淋巴细胞的存活率有明显的抑制作用，直接对淋巴细胞具有杀伤作用。在终浓度从0.001ug/ml到10ug/ml的实验范围里都有明显的降低淋巴细胞存活率的作用。

二、白头翁素在终浓度从0.1ug/ml到100ug/ml的实验范围里有明显、强烈的抑制ConA诱导的小鼠T淋巴细胞增值反应的作用。

三、白头翁素在终浓度从1ug/ml到100ug/ml的实验范围里具有明显、强烈的抑制LPS诱导的小鼠B淋巴细胞增值反应的作用。

白头翁素对多种无菌性炎症所致的组织疼痛和功能障碍有治疗作用，以上的实验研究结果提示了白头翁素在用于治疗颈椎病等无菌性炎症时经皮肤吸收后，可能通过影响局部组织的炎性淋巴细胞功能，降低淋巴细胞活性和抑制淋巴细胞炎性反应，以达到其消炎祛痛的功效。白头翁素因为具有免疫抑制活性作用，即使SARS病毒发生变异，白头翁素也对SARS病毒变异后引起的疾病有予防和治疗作用。SARS病毒引起的非典型肺炎在炎症反应的组织中都存在有炎性淋巴细胞的浸润、炎性因子的分泌，导致肺部组织的损害以及炎性淋巴细胞随肺微血管漫延到各脏器造成心、肝、肾等脏器衰竭。由于白头翁素在有丝分裂原诱导的T、B细胞淋巴细胞增殖反应的实验中，白头翁素对T、B细胞淋巴细胞的增殖反应显示了强烈的免疫抑制效应(抗炎作用)，并显示了它在体外实验系统中对淋巴细胞的存活率有明显的抑制效应，直接对淋巴细胞具有杀伤作用。由于无任是有菌性炎症和无菌性炎症的病因如何，在炎症反应的组织中都存在有炎性淋巴细胞的浸润、炎性因子的分泌。由于SARS病毒引起的炎症是无菌性炎症，那末白头翁素从药理学作用机理上来讲就是治疗SARS病毒引起的非典型肺炎的特效药。

2003年2-3月我们用以白头翁素为主要成分的胡三帖湿巾在广东省患上非典型肺炎的多名医生中作的自愿试验表明，胡三帖敷贴在肺部后体温降温快，x片显示肺纹理和絮状斑状阴影消散快，气促气喘现象消失快，病人很快恢复了健康。这些病人本身是医务工作者，认为“胡三帖”对非典型肺炎的疗效十分罕见。中国科学院上海药物研究所：″外用白头翁素抗炎活性作用的药效学研究″

1、基本原理

关节炎的共同特征是局部关节呈进行性发展的慢性炎症过程，主要包括类风湿关节炎、骨关节炎、强直性脊椎炎等多种骨关节疾病。炎症的过程上分复杂，但不论病因如何在炎症反应的组织中都存在有炎性淋巴细胞的浸润、炎性因子的分泌等现象，所以炎症和免疫是密切相关不可分割的过程。为了更好地评价白头翁素药效，我们对从炎症和免疫两个方面进行了综合观察。

2、实验目的

确定白头翁素是具有消炎祛痛功效的主要有效成分；本实验根据抗炎药效学研究的常规要求，选择了二甲苯诱发小鼠耳肿胀；角叉菜胶诱发的大鼠足肿胀；淋巴细胞增殖反应；淋巴细胞以及巨噬细胞产生细胞因子等主要药效学评价指标，对白头翁素的抗炎作用以及作用机理进行了初步评价。

实验结论：

1、二甲苯诱导的小鼠耳片水肿和角叉菜胶诱导的大鼠肿胀均为急性非特异性的炎症模型，主要表现为局部的充血，水肿及渗出等病理反应过程；本实验结果表明白头翁素0.1-5mg/ml显著抑制二甲苯诱导的小鼠耳片水肿和白头翁素0.125-2mg/ml显著抑制角叉菜胶诱导的大鼠足肿胀，且均呈明显的剂量依赖性关系，说明白头翁素具有明显的抗炎作用；

2、炎症反应的组织中都存在有炎性淋巴细胞的浸润、炎性因子的分泌等现象，为了探讨白头翁素的抗炎作用的机理，我们测定了白头翁素对丝裂原诱导的淋巴细胞增值的影响和白头翁素对SAC、ConA刺激的脾脏淋巴细胞因子释放的影响；由结果可见，1-100ug/ml白头翁素具有明显降低淋巴细胞存活率的作用，1-100ug/ml白头翁素对丝裂原诱导的淋巴细胞增值具有强烈的抑制作用，白头翁素对SAC、ConA刺激的脾脏淋巴细胞细胞因子释放均有明显的抑制作用；白头翁素经皮肤吸收后，可以抑制二甲苯诱导的小鼠耳片水肿和角叉菜胶诱导的大鼠足肿胀，说明具有明显的抗炎作用，它的抗炎作用机理可能是通过影响局部组织的炎性淋巴细胞的功能，降低淋巴细胞活性，以致细胞因子的释放和阻断淋巴细胞的炎性反应来达到消炎镇痛的目的；非典型肺炎在SARS病毒严重侵蚀肺泡发生急性肺损伤时可产生急性呼吸衰竭，由于广泛的微血管内皮和肺泡上皮的损伤，肺微血管的通透性增高，造成间质肺水肿以至肺泡型肺水肿，肺内灶性不张和实变，通气/血流失调和肺内分流，引起难以纠正的缺氧，晚期引起多脏器衰竭。中科院上海药物研究所″外用白头翁素抗炎活性作用的药效学研究″证实外用白头翁素显著抑制二甲苯诱导的小鼠耳片水肿和外用白头翁素显著抑制角叉菜胶诱导的大鼠足肿胀，由此可证明，当SARS病毒侵犯肺泡和微血管造成间质肺水肿和肺泡型肺水肿，白头翁素可以消除肺部水肿。白头翁素对丝裂原诱导的淋巴细胞增殖具有强烈的抑制作用和明显降低淋巴细胞存活率的作用，

可以证明白头翁素有效清除肺部炎症，纠正缺氧，使呼吸不再窘迫，白头翁素直接对SARS病毒有杀灭作用，控制病毒随肺微血管向多脏器漫延，不再威胁生命；

根据本发明提供的药物，其中的主要活性治疗成分为白头翁素，同时还可包括药剂学上可接受的辅剂，辅剂的使用与否或选择的种类取决于药物的最终剂型，按照常规制药方法，本发明可制成口服剂、注射剂和外用制剂。其中，外用剂型包括可被透皮吸收的流浸膏剂、硬膏剂、栓剂、擦剂、涂布剂等多种剂型；该药物中的制备可以直接使用合成的或从天然原料中提取分离出的白头翁素，也可以上述天然药为原料按照已经公开的方法进行提取操作，例如科学出版社出版的《中草药成分化学》(1977)，226页中记载的方法，使用得到的提取液制成药剂(其中的主要成分为白头翁素)，研究和试验都证明，白头翁素具有很好的稳定性，不受多种中草药配伍及所含化学成份的影响而独立稳定地发挥对非典型肺炎的治疗作用，白头翁素的稳定性还表现在：白头翁素提取液在各种严酷环境如高温、低温、霉变、腐烂发臭时，其对非典型肺炎高效快速的治愈作用不会衰减，

根据本发明优选的实施方案，该治疗SARS病毒引起的非典型肺炎的天然药物，其中的有效成分包括了以含有白头翁素或其前体的任何天然植物或中草药为原料，使用有机溶剂、水、动、植物油、酿造醋或无机酸作浸提剂进行浸提而得到的提取液。所以，除采用上述方法制备该药物外，本发明还进一步提供了一种制备方法，其包括采用有机溶剂、水、动、植物油、酿造醋或无机酸作浸提剂，对含有白头翁素或其前体的任何天然植物或中草药在密封条件下进行浸提，提取液经过滤、澄清等精制过程，得到白头翁素提取液；本发明提供的制备方法，包括冷浸和热浸方法，使用原料有毛茛科植物其包括：毛茛、马蹄叶、石龙芮、打破碗花花、白头翁、竹节香附、回回蒜等、选自威灵仙中含有白头翁素的威灵仙、山木通、棉团铁线莲、东北铁线莲、锥花铁线莲、铁线莲、毛蕊铁线莲、柱果铁线莲、毛柱铁线莲等九种，和打破碗花花的变种秋牡丹等；及禾本科植物白茅根、含有毛茛甙的毛茛科铁筷子属植物、银莲花族的银莲花属植物、獐耳细辛属植物、毛茛族中的水毛茛族植物、翠雀花族中聚叶花亭乌头等，也可使用中药饮片，如白头翁饮片、威灵仙饮片等；所用有机溶剂包括乙醇、甲醇、丙二醇、甘油、氯仿、或其混合物等；本发明所说的冷浸方法，是指将原料药在常温下用浸提剂进行浸提，得到白头翁素提取液，也可采用热浸方法，即，将原料药加入被加热了的浸提剂中进行浸提。本发明提供的制备方法的特征之一就在于通过有效的处理方法将原料药中的原白头翁素的结构发生改变，经聚合转化成白头翁素，制成具有抗病毒和抗菌消炎作用，尤其对非典型肺炎有特效治疗作用的白头翁素提取液。从实际生产考虑，优选的方案可以是采用约30-50％浓度的乙醇，冷浸12个月以上，或将其加热至沸点后加入原料药继续加热至沸点，密封浸提6个月以上。根据本发明的制备方法，提取时可选择原料药的有效部位，如取鲜毛茛全草或全草与根粉碎后放入提取罐，按比例加入浸提剂，密封完成浸提，使原料中的原白头翁素被提取出后充分聚合而转化成白头翁素溶于溶剂中，然后经压汁、去渣、过滤和澄清等步骤，得到黄色透明的澄清液，即为白头翁素提取液(其中的白头翁素可通过常规方法进行检测)。

如以上所述，本发明该优选方案的特征就在于摸索并提出了使原料药中的原白头翁素在一定条件下被转化成为白头翁素的方法，即使原料药与适当和适量的浸提剂一起密封久放的过程，浸提剂的选择如以上所列举，甲醇可以是30％左右浓度的热甲醇或冷甲醇，植物油可以是例如麻油、茶油、花生油等，优选使用乙醇、甲醇或水，原料药可以使用一种或多种混合提取，例如：按重量比计算，选新鲜毛茛∶乙醇约为1∶1的比例，取鲜毛茛全草、根或仅用全草，粉碎后装入容器内，将适度浓度例如40％左右的乙醇加热后倒入装有鲜毛茛的容器内继续加热，密封存放，使毛茛中的原白头翁素充分聚合成白头翁素溶于溶剂中，然后压汁，去渣，过滤，澄清，收取黄色透明澄清液即得白头翁素提取液；也可以按重量比计算，选新鲜毛茛∶乙醇约为1∶1的比例，取鲜毛茛全草，根或仅用全草，粉碎后装入容器内，用冷浸法将适度浓度例如40％的乙醇或30％左右浓度的甲醇直接倒入该装有鲜毛茛的容器内，密封久放，使毛茛中的原白头翁素充分聚合成白头翁素溶于溶剂中，然后压汁，去渣，过滤，澄清，取黄色透明澄清液即得白头翁素提取液；也可以使用中药饮片提取，如用中药威灵仙饮片、白头翁饮片，用乙醇热浸法或冷浸法提取白头翁素提取液，则按重量比计算，乙醇∶药材约3∶1的比例，用适度浓度例如40％的乙醇热浸法或冷浸法浸渍三至六个月，每日搅拌一次，使含于中药威灵仙或白头翁中的白头翁素充分溶解于乙醇中，过滤澄清即得棕色白头翁素提取液；若用水作溶剂，则按重量比计算，新鲜毛茛粉细∶水约1∶1，加适量防腐剂(食品级)，采用冷浸法或热浸法将水直接倒入装有鲜毛茛粉细的容器内，密封存放，使毛茛中的原白头翁素充分聚合成白头翁素溶于溶剂中，然后压汁，去渣，过滤，澄清，收取黄色透明澄清液即得白头翁素提取液。

需要说明的是，本发明通过使用适当的浸提剂按照要求操作，目的在于提取出原料中所含有的原白头翁素和白头翁素，并使提取出的原白头翁素完全聚合成白头翁素，得到白头翁素提取液，经调节成需要浓度即可供治疗使用，或加工成需要的剂型，所以浸提剂与原料药的加入比例在制备过程中不需要严格限定。

根据本发明的优选实施方案，提取的白头翁素或白头翁素提取液与一种或多种中草药或化学药混合时，白头翁素的稳定性不受多种与之配伍的中草药及所含化学成份的影响而独立稳定地发挥对SARS病毒引起的非典型肺炎的治疗作用；长时间放置试验表明，本发明药物中白头翁素的稳定性在5年以上，根据本发明的实施方案，工业生产中可以依据实际情况，选择生产的方法，即可以选择事先合成或精制的白头翁素化合物为原料，也可使用从所述原料中提取的白头翁素提取液，提取方法除以上所述外，还可以选用渗漉法，提取罐强制循环工艺，或超临界萃取技术、或动态提取技术、或中草药有效成份分离提取技术提取，也可使用蒸馏法。

本发明还提供了治疗非典型肺炎的药物组合物，其包括治疗有效量的上述白头翁素化合物，和药剂学上可接受的辅剂(如果需要的话)，按照常规制药方法，制成口服剂、注射剂和外用制剂。其中，外用剂型包括可被透皮吸收的流浸膏剂、硬膏剂、栓剂、擦剂、涂布剂等多种剂型。例如，使用约30-40％浓度左右的乙醇按照本发明方法得到的白头翁素提取液即为流剂，可用于涂擦患部或以纱布吸附后敷贴于患部，若用乙醇作防腐剂，按重量比计算，新鲜毛茛极细∶乙醇大约3∶1的比例，将浓度为95％的乙醇直接倒入装有鲜毛茛粉细的容器内充分拌匀，密封长时间存放或加热存放，使鲜毛茛中的原白头翁素充分聚合成白头翁素，即得白头翁素软膏。用威灵仙饮片、白头翁饮片、或两者混合，同样方法提取，提取液经煎煮，浓缩，精制成中药浓缩颗粒剂(需要的话可加入适当的添加剂)，主要成份为白头翁素，可口服或外用于治疗SARS病毒引起的非典型肺炎疾病。

临床使用：配制每50毫升白头翁素药液或白头翁素提取液中约含白头翁素25毫克，每天只需用纱布吸附约50毫升白头翁素提取液在SARS病毒引起的非典礼肺炎的疾病病变位置或胸部区域透皮敷贴1-2次，敷贴面积约为100cm2，每次6-8小时，一星期为一疗程，一疗程内治愈率就高达90％以上，短时间即有退烧作用和止喘作用，一次敷贴就有显著疗效，部分病人3-5次敷贴即可治愈，无红肿、起泡、流水、过敏、疼痛等副作用，安全范围极大，毒性极小。白头翁素药液或提取液可制作流浸膏剂，硬膏剂，栓剂，擦剂，涂布剂等多种外用剂型，白头翁素还可制作口服片剂，注射剂等，亦可制成滴丸、口服液、药酒等。

本发明提供的药物或药物组合物中还可包括任何能与该化合物配伍而起辅助治疗的中药提取物：所述中药可以选自五香血藤、大血藤、山枝茶、岩五加、夜关门根、铁筷子、路边金等。

应该理解的是，本发明的主要特征就在于发现和提出了白头翁素以及含有白头翁素的药物成分在治疗SARS病毒引起的非典型肺炎中的用途，同时通过有效的手段促使原料中所含的原白头翁素发生聚合，改变了化学结构，成为白头翁素，由于实现了从原白头翁素向白头翁素的转化，消除了原白头翁素对肌体特别是对皮肤的刺激性，利用白头翁素对各种炎症细胞特别是SARS病毒的直接杀伤作用和白头翁素透皮吸收功能，通过外敷治疗的最佳给药方式，高效快速方便地治疗SARS病毒引起的非典型肺炎的传染性疾病，即本发明通过含有白头翁素的药物的研究和应用，实现了对SARS病毒引起的非典型肺炎的特效治疗，经我们在2003年2-3月在广东部分患了非典型肺炎的医务工作者自愿临床试验证明，本发明药物在治疗非典型肺炎疗效极为显著，病人很快退烧，气促气喘消失，肺X片阴影消散，确实具有迅速杀灭SARS病毒之功效；使用本发明作为活性成分的白头翁素提取液制成的“胡三帖”湿巾在贵阳医学院做了毒性试验：

1、急性毒性：

胡三帖(观音露)腹腔注射给药时，豚鼠的最大耐受量为266g/kg，未能引起动物中毒或死亡；胡三帖(观音露)豚鼠皮肤给药，给药面积约为动物体表面积的10％，未能引起动物中毒或死亡。表明胡三帖(观音露)临床皮肤给药毒性极小，安全范围极大。

2、长期毒性

胡三帖(观音露)连续皮肤给药4周，未能引起豚鼠体重、内脏系数、血象、肝功能、肾功能、内脏器官以及皮肤的异常和病理改变。表明胡三帖(观音露)连续皮肤给药28天，也具有很大的安全性。

3、皮肤刺激性：胡三帖(观音露)一次及多次皮肤刺激，均未能引起皮肤刺激反应。表明胡三帖(观音露)属无刺激性物质。此外，胡三帖(观音露)不妨碍皮肤伤口愈合，多次用药未能引起皮肤病理改变。

4、过敏反应：胡三帖(观音露)豚鼠皮肤过敏试验，未能引起过敏反应。表明胡三帖(观音露)属非致敏物质。

试验结果提示：胡三帖(观音露)皮肤给药毒性极小，安全范围极大，无刺激性，无致敏性。

药效学实验结论：

1、镇痛作用：胡三帖(观音露)对甲醛致痛、醋酸致痛、热源致痛等均有明显的镇痛作用，其可减少疼痛反应、延长痛反应潜伏时间、提高痛阈值。试验结果表明，胡三帖(观音露)对化学性和物理性疼痛均有明显的镇痛效果。

2、抗炎作用：胡三帖(观音露)对中效致炎物质引起的足肿胀，长效致炎物质引起的耳壳肿胀均有明显的抑制作用。

3、解痉作用：胡三帖(观音露)对乙酰胆碱兴奋状态下的豚鼠肠肌有明显松弛作用。

动物实验结果提示：胡三帖(观音露)具有明显的镇痛、抗炎、消肿及一定的解痉作用。

胡三帖主要成分是毛茛提取液，毛茛的主要成分是原白头翁素和白头翁素；原白头翁素经加热或久置转变为白头翁素。胡三帖具有抗炎、消肿、解痉作用，也具有清热解毒、舒筋活络、消肿止痛之功效。与中国科学院上海药物研究所免疫药理研究室″白头翁素对T、B细胞淋巴细胞功能影响作用的研究″及″外用白头翁素抗炎活性作用的药效学研究″相一致，只是上海药物研究所是从免疫学的抗炎作用来研究白头翁素，其实验结果层次更高，也更具有说服力。

有关本发明的具体实施方案和功效通过实施例进一步说明，

实施例1：于四至九月采取新鲜毛茛全草及根或仅用全草，粉细，称100斤装入陶瓷容器或塑料桶，40％浓度的乙醇100斤加热至沸点，然后倒入装有鲜毛茛容器内继续加热至沸点密封存放半年以上，使原白头翁素充分聚合成白头翁素溶于溶剂中，压汁，去渣，过滤，澄清，取黄色透明澄清液即得白头翁素提取液，常规方法检测，提取物的有效成分中白头翁素含量约为90％左右，用乙醇调配至每50毫升提取液中含25毫克白头翁素，即制成外敷剂，供外用治疗。每次敷贴6-8小时。每天1-2次，一星期为一疗程。或用乙醇冷浸法经一年以上久置后提取白头翁素提取液。

实施例2：毛茛科植物：新鲜毛茛、马蹄叶、石龙芮、打破碗花花、白头翁、威灵仙九种及白茅根、竹节香附、回回蒜、打破碗花花的变种秋牡丹混合后的全草及根，采用用高温乙醇溶解浸提法或冷浸久置法获得白头翁素提取液，按照实施例1的方法制成外敷剂或擦剂(也可用这些植物干品提取)。

实施例3：威灵仙饮片，或威灵仙与白头翁饮片用乙醇浸提法提取获得白头翁素提取液，按乙醇∶药饮片＝3∶1的比例，用40％浓度的乙醇浸提法浸渍三个月，每日搅拌一次，使含于中药威灵仙或白头翁中的白头翁素充分溶解于乙醇中，过滤澄清即得棕色白头翁素提取液，亦可经浓缩精制和造粒制成中药浓缩颗粒剂。威灵仙提取液可制成防非典型肺炎的口服液或牙膏。

实施例4：浓度为40％的乙醇300公斤，中药威灵仙饮片100公斤，用乙醇在常温下冷浸法浸渍六个月，每日搅拌一次，使含于中药威灵仙中的白头翁素充分溶解于乙醇中，过滤澄清即得棕色白头翁素提取液，亦可经浓缩精制和造粒制成中药浓缩颗粒剂。

本实施例也可使用白头翁饮片或中药威灵仙与白头翁饮片两者混合，用乙醇常温冷浸法提取白头翁素提取液，

实施例5：用水作溶剂，新鲜毛茛粉细100公斤，水100公斤，加食品防腐剂苯甲酸钠50克，采用热浸法或冷浸法将水直接倒入装有鲜毛茛粉细的容器内，密封存放8-12月以上，使毛茛中的原白头翁素充分聚合成白头翁素溶于溶剂中，然后压汁，去渣，过滤，澄清，取黄色透明澄清液即得白头翁素提取液，作为原料供下一步的制药使用。

实施例6：用乙醇作防腐剂，用新鲜毛茛粉细100公斤，浓度为95％的乙醇33公斤直接倒入装有鲜毛茛粉极细的容器内充分搅拌均匀，密封，加热或常温存放8-12月以上，使鲜毛茛中的原白头翁素充分聚合成白头翁素，并视提取物的粘稠度加入适量凡士林调和均匀，即成为白头翁素软膏。

实施例7：参照科学出版社出版的《中草药成分化学》(1977)，226页中记载的方法，以白头翁全草为原料进行水蒸汽蒸馏，蒸馏液经乙醚萃取的萃取液再用乙醇精制，制成白头翁素晶体(或外购)，该白头翁素晶体用40％左右的乙醇溶解成每100毫升50毫克的白头翁素药液，进一步制成外用敷贴剂或涂布剂。

实施例8：使用实施例1得到的白头翁素提取液，配成每50毫升含白头翁素约25毫克的药液，用无纺布浸泡后制成面积在100cm2的湿巾。

实施例9：称取白头翁素粉末加入到羊毛脂中，搅拌调配成每50毫升含白头翁素25毫克的软膏，治疗时每次外敷时间6-8小时。

以毛茛提取液(白头翁素)为主要成份的胡三帖药效学试验

使用实施例1的外敷剂(商品名″观音露″)进行以下试验：

一、甲醛法镇痛试验

18～22g小鼠80只，雌雄各半，随机分5组：高浓度组、中浓度组、低浓度组(分别按照12.5毫克/25毫升、8.75毫克/25毫升、6.25毫克/25毫升给予观音露)、杜冷丁组(25mg/kg)、对照组(给予等量的25％乙醇)。除杜冷丁组动物腹腔注射给药外，其余组动物均于左右后足涂抹药物。药后15分钟，每鼠右后足皮下注射2.5％甲醛0.03ml，并再涂药1次，随即观察15分钟内小鼠舔右后足的次数。

结果：高浓度的观音露对甲醛致痛有明显的镇痛作用，小鼠舔右后足次数明显减少，与对照组比较，p＜0.05，见表1。

表1“观音露”对舔足反应的抑制作用( X±SD)

组别   动物数  舔后足次数     P值   抑制率(％)

对照组   16    15.68±4.13

高浓度组 16    9.13±6.20   ＜0.05    42

中浓度组 16    12.44±7.20  ＞0.05    21

低浓度组 16    13.79±5.33  ＞0.05    12

杜冷丁组 16    0.00±0.00   ＜0.001   100

二、热板法镇痛试验

用55℃热板筛选出痛反应正常的雌性小鼠64只，体重18-22克，随机分为4组：观音露高浓度组、低浓度组、杜冷丁组、对照组，给药方式和药量与甲醛法镇痛试验相同，除杜冷丁组动物腹腔注射给药外，其余组动物均于腹部和左右足涂抹药物，药后30、60、90分钟，将小鼠置于55℃热板上，分别测定每鼠痛反应潜伏时间。

结果：观音露高浓度对热板致痛有明显的镇痛作用，小鼠痛反应潜伏时间明显延长，小鼠痛阈提高百分率明显增加，与对照组比较，p＜0.05，结果见表2和表3。

表2观音露对痛反应潜伏时间的影响( X±SD)

组别    动物数                 痛反应潜伏时间(秒)

                    药前       药后30分     药后60分      药后90分

对照组    16    29.33±4.12  30.13±5.19  29.69±7.33   29.21±8.18

高浓度组  16    28.46±3.49  31.33±7.21  45.49±9.47   47.34±10.29

P                            ＞0.05       ＜0.05        ＜0.05

低浓度组  16    30.12±5.03  31.78±6.32  35.26±7.79   36.30±9.74

P                            ＞0.05       ＞0.05        ＞0.05

杜冷丁组  16    30.08±4.92  49.86±5.23  54.29±9.27   58.31±11.23

P                            ＜0.01       ＜0.001       ＜0.001

表3观音露对痛阈提高百分率的影响

组别      动物数      痛阈提高百分率(％)

                  药后30分    药后60分    药后90分

对照组     16         3          1           0

高浓度组   16         10         60          66

低浓度组   16         6          17          21

杜冷丁组   16         66         80          94

三、抗大鼠足肿胀试验

大鼠40只，200～250g，雌雄兼用，随机分为4组：高浓度组、低浓度组(12.5毫克/25毫升、6.25毫克/25毫升)、肤轻松组、对照组(给予等量25％乙醇)，除肤轻松组动物给予0.025％肤轻松软膏外，其余组动物均于左右后足涂抹药物，于每鼠右后足足跖皮下注射1％角叉菜胶0.1ml，随即给右后足涂抹药物，分别于给药后2、3、4、5小时测量每鼠左右后足足跖周长，以两足周长差作为肿胀度，每次测量后分别再给大鼠右后足涂抹药物。

结果：高浓度观音露对大鼠足肿胀有明显的抑制作用，与对照组比较，P＜0.05。见表4。

表4观音露对足肿胀的抑制作用( X±SD)

组别      动物数   肿胀度(cm)

                2小时       3小时       4小时       5小时

对照组    10  1.44±0.21  1.48±0.13  1.47±0.19  1.45±0.13

高浓度组  10  1.24±0.23  1.01±0.17  0.97±0.21  0.92±0.18

P值             ＞0.05      ＜0.05      ＜0.05      ＜0.05

低浓度组  10  1.37±0.19  1.36±0.21  1.39±0.24  1.40±0.14

^*P值           ＞0.05      ＞0.05      ＞0.05      ＞0.05

肤轻松组  10  0.91±0.20  0.92±0.13  0.90±0.18  0.92±0.24

P值             ＜0.01      ＜0.01      ＜0.01      ＜0.01

四、豚鼠离体肠肌试验

豚鼠4只，300～350g，雌雄各2只，处死后立即取出回肠，放入充氧的冷Tyrode′s液中，冲净后将肠管剪成2～2.5cm的肠段。将两肠段两端穿线接扎，

一端系于通气钩上，放入恒温麦氏浴槽中，另一端系于拉力换能器上，连接记录仪。分别记录加入观音露、乙酰胆碱(10-9)和阿托品(0.05％)后肠肌的收缩和舒张情况。

结果：“观音露”高浓度对乙酰胆碱兴奋状态下的肠肌有明显松弛作用。

Claims (14)

1、一种防治由SARS病毒引起的非典型肺炎的药物，其特征在于：其中包括有效治疗量的白头翁素。

2、按照权利要求1所述的防治由SARS病毒引起的非典型肺炎的药物，其特征在于：所述的白头翁素来自含有该化合物成分或其前体的任何天然植物或中草药的分离提取物。

3、按照权利要求1、2所述的防治由SARS病毒引起的非典型肺炎的药物，其特征在于：所述的天然植物或中草药包括：毛茛科植物的毛茛、马蹄叶、石龙芮、打破碗花花、白头翁、竹节香附、回回蒜，选自威灵仙、山木通、棉团铁线莲、东北铁线莲、锥花铁线莲、铁线莲、毛蕊铁线莲、柱果铁线莲、毛柱铁线莲的威灵仙和打破碗花花的变种秋牡丹；禾本科植物的白茅根、含有毛茛甙的毛茛科铁筷子属植物；及银莲花族的银莲花属植物、獐耳细辛属植物、毛茛族中的水毛茛族植物、翠雀花族中聚叶花亭乌头。

4、按照权利要求1所述的防治由SARS病毒引起的非典型肺炎的药物，其特征在于：白头翁素为化学合成产物。

5、按照权利要求2、3所述的防治由SARS病毒引起的非典型肺炎的药物，其特征在于：所述治疗有效量的白头翁素来自使用有机溶剂、水、动、植物油、酿造醋或无机酸作浸提剂对原料药进行浸提而得到的白头翁素提取液。

6、按照权利要求1-5所述的防治由SARS病毒引起的非典型肺炎的药物，其特征在于：其中还可包括任何能与该白头翁素化合物配伍而起辅助治疗作用的中药提取物。

7、按照权利要求1-6所述的防治由SARS病毒引起的非典型肺炎的药物，其特征在于：其包括口服剂、注射剂和外用剂型，其中，外用剂型包括可被透皮吸收的流浸膏剂、硬膏剂、栓剂、擦剂、涂布剂。

8、防治由SARS病毒引起的非典型肺炎的药物的应用，其特征在于：它除了能予防和治疗SARS病毒引起的非典型肺炎外，还能够治疗肺部炎症的疾病还包括支气管炎、哮喘、肺气肿、肺炎球菌肺炎、金黄色葡萄球菌肺炎、其它革兰阴性杆菌肺炎、厌氧菌肺炎、支原体肺炎、克雷白杆菌肺炎、以及其他由流感病毒、副流感病毒、呼吸道合胞病毒和腺病毒引起的病毒性肺炎、肺曲菌病、肺隐球菌病、肺放线菌病、肺念珠菌病、肺结核、肺炎球菌肺炎、金黄色葡萄球菌肺炎、其它革兰阴性杆菌肺炎、厌氧菌肺炎、克雷白杆菌肺炎、肺曲菌病、肺隐球菌病、肺放线菌病、肺念珠菌病等肺部疾病，所述非典型肺炎症包括由SARS病毒引起的非典型肺炎以及由衣原体、支原体、军团杆菌引起的非典型肺炎，支气管炎、哮喘、肺气肿，以及其他由流感病毒、副流感病毒、呼吸道合胞病毒、腺病毒引起的病毒性肺炎，以及其他由流感病毒、副流感病毒、呼吸道合胞病毒和腺病毒引起的病毒性肺炎、肺曲菌病、肺隐球菌病、肺放线菌病、肺念珠菌病、肺结核，肺炎球菌肺炎、金黄色葡萄球菌肺炎、其它革兰阴性杆菌肺炎、厌氧菌肺炎、克雷白杆菌肺炎，肺曲菌病、肺隐球菌病、肺放线菌病、肺念珠菌病等肺部疾病。

9、按照权利要求8所述的防治由SARS病毒引起的非典型肺炎的药物的应用，其特征在于：白头翁素作为有效成分的药物在予防和治疗由SARS病毒引起的非典型肺炎疾病及由SARS病毒引起的非典型肺炎引起的各种并发症如心、肝、肾并发症中的用途。

10、防治由SARS病毒引起的非典型肺炎的药物的制备方法，其特征在于：包括使用有机溶剂、水、动、植物油、酿造醋或无机酸作浸提剂，对含有毛茛甙的任何天然植物或中草药在密封条件下进行浸提，浸提包括冷浸和热浸，收集提取液，所用有机溶剂包括甲醇、乙醇、丙二醇、甘油、氯仿，或其混合物。

11、按照权利要求10防治由SARS病毒引起的非典型肺炎的药物的制备方法，其特征在于：用30-50％浓度的乙醇作浸提剂，冷浸8个月以上，也可以将其加热至沸点后加入原料药继续加热至沸点，密封浸提6个月以上。

12、按照权利要求10、11防治由SARS病毒引起的非典型肺炎的药物的制备方法，其特征在于：使用95％浓度的乙醇浸提已粉碎了的原料药，制备药物软膏。

13、按照权利要求10、11防治由SARS病毒引起的非典型肺炎的药物的制备方法，其特征在于：将含有白头翁素的药物采用常规方法涂覆在纱布或无纺布上，无纺布面积约为100平方厘米，无纺布厚度应能吸附50毫升毛茛提取液，约含25毫克白头翁素。

14、按照权利要求10、11防治由SARS病毒引起的非典型肺炎的药物的制备方法，其特征在于：用中药威灵仙饮片、或白头翁饮片提取液浓缩，制成予防SARS病毒引起的非典型肺炎的牙膏或含片，用中药威灵仙饮片，或白头翁饮片制成口服液或饮料。