CN1443570A - 胸腺素α1用于制备治疗烧伤和烫伤药物的用途 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及医药技术领域，是胸腺素α1(Tα1)用于制备治疗烧伤或烫伤药物的新用途－Tα1外用制剂。Tα1是一种具有免疫功能的多肽，目前Tα1临床上均将其作为一种免疫增强剂，用于病毒性肝炎、恶性肿瘤、免疫缺陷疾病的辅助治疗。本发明将Tα1用于治疗皮肤烧伤和烫伤，经药效学动物实验，Tα1能有效促进烧、烫伤创面的生长愈合，故可用于制备治疗烧伤和烫伤的药物。
Description
技术领域：
本发明涉及医药技术领域，是胸腺素α1(Tα1)的一种新用途——用于制备治疗烧伤或烫伤外用制剂药物的用途。
背景技术：
胸腺素α1(thymosinα1，简称Tα1)是一种具有免疫功能的多肽，其氨基酸序列为Ser-Asp-Ala-Ala-Val-Asp-Thr-Ser-Ser-Glu-Ile-Thr-Thr-Lys-Asp-Leu-Lys-Glu-Lys-Lys-Glu-Val-Val-Glu-Glu-Ala-Glu-Asn(Goldstein A L，Low T L，McAdoo M，McClureJ，Thurman G B，Rossio J，Lai C Y，Chang D，Wang S S，Harvey C，Ramel A H，Meienhofer.J.Thymosin alpha 1：isolation and sequence analysis of an immunological active thymicpeptide.Proc Natl Acad Sci USA，1977，74(2)：725～729)。目前临床上均将Tα1作为一种免疫增强剂，用于病毒性肝炎、恶性肿瘤、免疫缺陷疾病的辅助治疗。
发明内容：
本发明将Tα1局部应用于烧伤、烫伤创面，药效学研究显示Tα1能有效促进烧伤、烫伤创面的愈合，从而开辟了Tα1的新用途。
药效学动物实验：选用约15公斤重的小白猪作为实验动物，麻醉后用恒温电烫仪75±2℃，烫10秒钟，在猪表皮建立数处直径为2.5cm的深II°烫伤模型。清创后分别于创面给予40、80和160μgTα1的微球制剂，同时涂抹抗感染药SD-Ag霜以防感染，纱布包扎，另以只涂SD-Ag霜而未给Tα1的创面作为对照。分别于用药后第9和第13天，麻醉下切取愈合创面组织，按常规将组织固定取材、包埋、制片、HE染色和免疫组化染色观察(GSP法)，同时对真皮组织标本进行细胞周期测定。
创面组织病理观察结果
1.皮肤病理变化结果
用药后9天，可见对照创面的真皮浅层有明显的肉芽组织增生，深层仍有大片变性坏死细胞，而Tα1治疗的皮肤浅层结缔组织仅有少量肉芽增生改变，皮肤深层结缔组织内有血管增生，开始向正常皮肤的组织结构转变，深层细胞变性坏死也较对照组少。用药后13天，Tα1治疗的创面真皮浅层有少量肉芽组织，主要组织形态恢复接近正常，其深层组织形态也接近正常；而对照创面皮肤浅层仍有肉芽组织增生且深层皮细胞结构不清，仍有部分变性坏死。说明Tα1对烧伤和烫伤创面的愈合具有促进作用。
2.免疫组化分析结果
用药后9天，免疫组化分析结果：(1)Tα1治疗的创面成纤维细胞及细胞周基质表现出I型胶原强阳性结果，而对照创面为阴性；(2)Tα1治疗的创面表皮基底层上皮细胞增殖细胞核抗原(PCNA)呈强阳性，成纤维细胞和血管壁细胞也见阳性反应，而对照创面的表皮基底层PCNA表达呈阴性；(3)Tα1治疗的创面表皮细胞角蛋白(CK)呈阳性，而对照创面的表皮仅见少数基底层细胞呈弱阳性；(4)Tα1治疗的创面血管内皮细胞血管内皮生长因子(VEGF)表达呈强阳性，而对照创面未见有明显VEGF呈阳性结果。说明Tα1能促进与烧伤和烫伤创面组织修复有关的蛋白的表达，从而促进创面的修复。
3.细胞周期DNA合成分析结果
用药后9天，剂量为40μg和160μg的Tα1治疗的真皮组织S期细胞明显增加，分别达44.56％和74.66％，而对照创面仅为22.71％。说明Tα1能刺激细胞增殖，对DNA复制及染色体修复有一定的促进作用。
由上可见，在Tα1的作用下，组织修复的各种因素如表皮血管生长增强、胶原表达增强及细胞核抗原表达提高，细胞DNA合成也明显增加，说明Tα1具有促进烧伤和烫伤创面的组织修复的作用，所以Tα1可用于制备治疗烧伤和烫伤的药物。
具体实施方式：
实施例1：Tα1微球治疗烫伤表皮
制备Tα1微球：以Tween 80乳化剂(上海化学试剂公司)，将3mg Tα1乳化于10ml含10％PLGA(山东省医疗器械研究所)的二氯甲烷溶液中，控制制备温度为15±2℃，得Tα1乳剂；在搅拌下将制备好的乳剂缓缓滴入2％PVA(聚乙烯醇，上海化学试剂公司)的水溶液中，搅拌速度为800rpm；搅拌10分钟后，再向此体系中倾入500ml蒸馏水，继续搅拌，使有机溶媒挥干形成含药微球。离心收集微球，用60ml蒸馏水洗3次，冷冻干燥，得到10mg微球。
动物实验：选用15kg左右的小白猪作为实验动物，麻醉后用恒温电烫仪75±2℃烫10秒，在猪表皮建立直径为2.5cm的深II°烫伤模型，清创后分别给予含Tα1 40、80和160μg的微球，同时涂抹抗感染药SD-Ag霜，纱布包扎，并以只涂抹SD-Ag霜而未给Tα1微球的创面作为对照。实验结果为：使用了Tα1微球的创面在第9天起就开始愈合，到第19天创面已基本愈合，而没有用药的创面直到第19天也没有明显的愈合。说明Tα1微球敷于创面对治疗烧伤创面是有效的。
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