CN1403477A - 具有促进3t3细胞转化功能的新的人蛋白及其编码序列 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一类新的具有促进3T3细胞转化功能的人蛋白,编码此多肽的多核苷酸和经重组技术产生该多肽的方法。本发明还公开了抗此多肽的拮抗剂及其治疗作用。本发明还公开了编码这类新的具有促进3T3细胞转化功能的人蛋白的多核苷酸的用途。
Description
技术领域
本发明属于生物技术领域,具体地说,本发明涉及新的编码具有促进3T3细胞转化功能的人蛋白的多核苷酸,以及此多核苷酸编码的多肽。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的用途和制备。
背景技术
人基因组学研究目前是国际上的热点,除人染色体DNA大规模测序,表达序列测序(EST)的方法外,还缺少从功能开始的筛选具有功能基因的高通量的方法。
癌症是危害人类健康的主要疾病之一。为了有效地治疗和预防肿瘤,目前人们已越来越关注肿瘤的基因治疗。因此,本领域迫切需要开发研究与癌细胞生长相关的人蛋白及其激动剂/抑制剂。
发明内容
本发明的目的是提供一类新的具有促进3T3细胞转化功能的人蛋白多肽以及其片段、类似物和衍生物。
本发明的另一目的是提供编码这些多肽的多核苷酸。
本发明的另一目的是提供生产这些多肽的方法以及该多肽和编码序列的用途。
在本发明的第一方面,提供新颖的分离出的具有促进3T3细胞转化功能的蛋白多肽,它包含具有选自下组的氨基酸序列的多肽:SEQ ID NO:2、5、8、11、14、17、20、23、26、29、32、35;或其保守性变异多肽、或其活性片段、或其活性衍生物。
较佳地,该多肽是具有选自下组的氨基酸序列的多肽:SEQ ID NO:2、5、8、11、14、17、20、23、26、29、32、35。
在本发明的第二方面,提供了一种分离的多核苷酸,它包含一核苷酸序列,该核苷酸序列与选自下组的一种核苷酸序列有至少85%相同性:(a)编码上述的具有促进3T3细胞转化功能的蛋白多肽的多核苷酸;(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸。较佳地,该多核苷酸编码的多肽具有选自下组的氨基酸序列:SEQ ID NO:2、5、8、11、14、17、20、23、26、29、32、35。更佳地,该多核苷酸的序列选自下组:SEQ ID NO:3、6、9、12、15、18、21、24、27、30、33、36的编码区序列或全长序列。
在本发明的第三方面,提供了含有上述多核苷酸的载体,以及被该载体转化或转导的宿主细胞或者被上述多核苷酸直接转化或转导的宿主细胞。
在本发明的第四方面,提供了制备具有促进3T3细胞转化功能的蛋白活性的多肽的制备方法,该方法包含:(a)在适合表达具有促进3T3细胞转化功能的蛋白的条件下,培养上述被转化或转导的宿主细胞;(b)从培养物中分离出具有促进3T3细胞转化功能的蛋白活性的多肽。
在本发明的第五方面,提供了与上述的具有促进3T3细胞转化功能的蛋白多肽特异性结合的抗体。还提供了可用于检测的核酸分子,它含有上述的多核苷酸中连续10个核苷酸至全长核苷酸,较佳地它含有连续的约10-800个核苷酸。
在本发明的第六方面,提供了一种药物组合物,它含有安全有效量的本发明的具有促进3T3细胞转化功能的蛋白多肽以及药学上可接受的载体。这些药物组合物可用于促进细胞的生长。本发明还提供了一种药物组合物,它含有安全有效量的针对本发明的具有促进3T3细胞转化功能的蛋白多肽的拮抗剂(如抗体)以及药学上可接受的载体。该药物组合物可治疗癌症以及细胞异常增殖等病症。
本发明的其它方面由于本文的技术的公开,对本领域的技术人员而言是显而易见的。
具体实施方式
3T3细胞是一种小鼠成纤维细胞(J.Cell.Biol.,17:299,1963)(也称为NIH/3T3细胞)。在癌症研究领域中,常将外源基因(尤其是人基因)引入3T3细胞,观察其对3T3细胞生长的影响情况。通常认为,对3T3细胞生长(或恶性转化)有影响的基因是癌症相关基因,其中对3T3细胞生长或转化有抑制作用的基因大多是抑癌基因,而对3T3细胞生长或转化有促进作用的基因大多是(原)癌基因。
本发明采用大规模cDNA克隆转染小鼠胚胎成纤维细胞3T3,在获得具有促进生长作用的基础上,经测序证明为新的基因,进一步得到全长cDNA克隆。DNA转染试验证明,本发明的具有促进3T3细胞转化功能的蛋白对3T3细胞具有促进克隆形成的作用,其促进率≥50%。
如本文所用,“分离的”是指物质从其原始环境中分离出来(如果是天然的物质,原始环境即是天然环境)。如活体细胞内的天然状态下的多聚核苷酸和多肽是没有分离纯化的,但同样的多聚核苷酸或多肽如从天然状态中同存在的其他物质中分开,则为分离纯化的。
如本文所用,“分离的具有促进3T3细胞转化功能的蛋白或多肽”是指具有促进3T3细胞转化功能的蛋白多肽基本上不含天然与其相关的其它蛋白、脂类、糖类或其它物质。本领域的技术人员能用标准的蛋白质纯化技术纯化具有促进3T3细胞转化功能的蛋白。基本上纯的多肽在非还原聚丙烯酰胺凝胶上能产生单一的主带。
本发明的多肽可以是重组多肽、天然多肽、合成多肽,优选重组多肽。本发明的多肽可以是天然纯化的产物,或是化学合成的产物,或使用重组技术从原核或真核宿主(例如,细菌、酵母、高等植物、昆虫和哺乳动物细胞)中产生。根据重组生产方案所用的宿主,本发明的多肽可以是糖基化的,或可以是非糖基化的。本发明的多肽还可包括或不包括起始的甲硫氨酸残基。
本发明还包括具有促进3T3细胞转化功能的人蛋白的片段、衍生物和类似物。如本文所用,术语“片段”、“衍生物”和“类似物”是指基本上保持本发明的天然具有促进3T3细胞转化功能的人蛋白相同的生物学功能或活性的多肽。本发明的多肽片段、衍生物或类似物可以是(i)有一个或多个保守或非保守性氨基酸残基(优选保守性氨基酸残基)被取代的多肽,而这样的取代的氨基酸残基可以是也可以不是由遗传密码编码的,或(ii)在一个或多个氨基酸残基中具有取代基团的多肽,或(iii)成熟多肽与另一个化合物(比如延长多肽半衰期的化合物,例如聚乙二醇)融合所形成的多肽,或(iV)附加的氨基酸序列融合到此多肽序列而形成的多肽(如前导序列或分泌序列或用来纯化此多肽的序列或蛋白原序列)。根据本文的教导,这些片段、衍生物和类似物属于本领域熟练技术人员公知的范围。
本发明的多核苷酸可以是DNA形式或RNA形式。DNA形式包括cDNA、基因组DNA或人工合成的DNA。DNA可以是单链的或是双链的。DNA可以是编码链或非编码链。以PP11646蛋白(在本申请中,蛋白质的命名采用其克隆编号)为例,编码成熟多肽的编码区序列可以与SEQ ID NO:3所示的编码区序列相同或者是简并的变异体。如本文所用,“简并的变异体”对于PP11646而言是指编码具有SEQ ID NO:2的蛋白质,但与SEQ ID NO:3所示的编码区序列有差别的核酸序列。再以PP11647蛋白(在本申请中,蛋白质的命名采用其克隆编号)为例,编码成熟多肽的编码区序列可以与SEQ ID NO:6所示的编码区序列相同或者是简并的变异体。如本文所用,“简并的变异体”对于PP11647而言是指编码具有SEQ ID NO:5的蛋白质,但与SEQ ID NO:6所示的编码区序列有差别的核酸序列。对于本发明其他具有促进3T3细胞转化功能的蛋白,依此类推。
编码成熟多肽的多核苷酸包括:只编码成熟多肽的编码序列;成熟多肽的编码序列和各种附加编码序列;成熟多肽的编码序列(和任选的附加编码序列)以及非编码序列。
术语“编码多肽的多核苷酸”可以是包括编码此多肽的多核苷酸,也可以是还包括附加编码和/或非编码序列的多核苷酸。
本发明还涉及上述多核苷酸的变异体,其编码与本发明有相同的氨基酸序列的多肽或多肽的片段、类似物和衍生物。此多核苷酸的变异体可以是天然发生的等位变异体或非天然发生的变异体。这些核苷酸变异体包括取代变异体、缺失变异体和插入变异体。如本领域所知的,等位变异体是一个多核苷酸的替换形式,它可能是一个或多个核苷酸的取代、缺失或插入,但不会从实质上改变其编码的多肽的功能。
本发明还涉及与上述的序列杂交且两个序列之间具有至少50%,较佳地至少70%,更佳地至少80%相同性的多核苷酸。本发明特别涉及在严格条件下与本发明所述多核苷酸可杂交的多核苷酸。在本发明中,“严格条件”是指:(1)在较低离子强度和较高温度下的杂交和洗脱,如0.2×SSC,0.1%SDS,60℃;或(2)杂交时加有变性剂,如50%(v/v)甲酰胺,0.1%小牛血清/0.1%Ficoll,42℃等;或(3)仅在两条序列之间的相同性至少在95%以上,更好是97%以上时才发生杂交。并且,可杂交的多核苷酸编码的多肽与SEQ IDNO:2所示的成熟多肽(以PP11646蛋白为例)有相同的生物学功能和活性。
本发明还涉及与上述的序列杂交的核酸片段。如本文所用,“核酸片段”的长度至少含15个核苷酸,较好是至少30个核苷酸,更好是至少50个核苷酸,最好是至少100个核苷酸以上。核酸片段可用于核酸的扩增技术(如PCR)以确定和/或分离编码具有促进3T3细胞转化功能的蛋白的多聚核苷酸。
本发明中的多肽和多核苷酸优选以分离的形式提供,更佳地被纯化至均质。
本发明的DNA序列能用几种方法获得。例如,用本领域熟知的杂交技术分离DNA。这些技术包括但不局限于:1)用探针与基因组或cDNA文库杂交以检出同源性核苷酸序列,和2)表达文库的抗体筛选以检出具有共同结构特征的克隆的DNA片段。
编码具有促进3T3细胞转化功能的蛋白的特异DNA片段序列产生也能用下列方法获得:1)从基因组DNA分离双链DNA序列;2)化学合成DNA序列以获得所需多肽的双链DNA。
当需要的多肽产物的整个氨基酸序列已知时,DNA序列的直接化学合成是经常选用的方法。如果所需的氨基酸的整个序列不清楚时,DNA序列的直接化学合成是不可能的,选用的方法是cDNA序列的分离。分离感兴趣的cDNA的标准方法是从高表达该基因的供体细胞分离mRNA并进行逆转录,形成质粒或噬菌体cDNA文库。提取mRNA的方法已有多种成熟的技术,试剂盒也可从商业途径获得(Qiagene)。而构建cDNA文库也是通常的方法(Sambrook,et al.,Molecular Cloning,A Laboratory Manual,Cold Spring HarborLaboratory.New York,1989)。还可得到商业供应的cDNA文库,如Clontech公司的不同cDNA文库。当结合使用聚合酶反应技术时,即使极少的表达产物也能克隆。
可用常规方法从这些cDNA文库中筛选本发明的基因。这些方法包括(但不限于):(1)DNA-DNA或DNA-RNA杂交;(2)标志基因的功能出现或丧失;(3)测定具有促进3T3细胞转化功能的蛋白的转录本的水平;(4)通过免疫学技术或测定生物学活性,来检测基因表达的蛋白产物。上述方法可单用,也可多种方法联合应用。
在第(1)种方法中,杂交所用的探针是与本发明的多核苷酸的任何一部分同源,其长度至少15个核苷酸,较好是至少30个核苷酸,更好是至少50个核苷酸,最好是至少100个核苷酸。此外,探针的长度通常在2kb之内,较佳地为1kb之内。此处所用的探针通常是在本发明的基因DNA序列信息的基础上化学合成的DNA序列。本发明的基因本身或者片段当然可以用作探针。DNA探针的标记可用放射性同位素,荧光素或酶(如碱性磷酸酶)等。
在第(4)种方法中,检测具有促进3T3细胞转化功能的蛋白基因表达的蛋白产物可用免疫学技术如Western印迹法,放射免疫沉淀法,酶联免疫吸附法(ELISA)等。
应用PCR技术扩增DNA/RNA的方法(Saiki,et al.Science 1985;230:1350-1354)被优选用于获得本发明的基因。特别是很难从文库中得到全长的cDNA时,可优选使用RACE法(RACE-cDNA末端快速扩增法),用于PCR的引物可根据本文所公开的本发明的序列信息适当地选择,并可用常规方法合成。可用常规方法如通过凝胶电泳分离和纯化扩增的DNA/RNA片段。
如上所述得到的本发明的基因,或者各种DNA片段等的核苷酸序列的测定可用常规方法如双脱氧链终止法(Sanger et al.PNAS,1977,74:5463-5467)。这类核苷酸序列测定也可用商业测序试剂盒等。为了获得全长的cDNA序列,测序需反复进行。有时需要测定多个克隆的cDNA序列,才能拼接成全长的cDNA序列。
本发明也涉及包含本发明多核苷酸的载体,以及用本发明的载体或具有促进3T3细胞转化功能的蛋白编码序列经基因工程产生的宿主细胞,以及经重组技术产生本发明所述多肽的方法。
通过常规的重组DNA技术(Science,1984;224:1431),可利用本发明的多聚核苷酸序列可用来表达或生产重组的具有促进3T3细胞转化功能的蛋白多肽。一般来说有以下步骤:
(1).用本发明的编码具有促进3T3细胞转化功能的人蛋白的多核苷酸(或变异体),或用含有该多核苷酸的重组表达载体转化或转导合适的宿主细胞;
(2).在合适的培养基中培养的宿主细胞;
(3).从培养基或细胞中分离、纯化蛋白质。
本发明中,具有促进3T3细胞转化功能的人蛋白多核苷酸序列可插入到重组表达载体中。术语“重组表达载体”指本领域熟知的细菌质粒、噬菌体、酵母质粒、植物细胞病毒、哺乳动物细胞病毒如腺病毒、逆转录病毒或其他载体。在本发明中适用的载体包括但不限于:在细菌中表达的基于T7的表达载体(Rosenberg,et al.Gene,1987,56:125);在哺乳动物细胞中表达的pMSXND表达载体(Lee and Nathans,J Bio Chem.263:3521,1988)和在昆虫细胞中表达的来源于杆状病毒的载体。总之,只要能在宿主体内复制和稳定,任何质粒和载体都可以用。表达载体的一个重要特征是通常含有复制起点、启动子、标记基因和翻译控制元件。
本领域的技术人员熟知的方法能用于构建含具有促进3T3细胞转化功能的人蛋白编码DNA序列和合适的转录/翻译控制信号的表达载体。这些方法包括体外重组DNA技术、DNA合成技术、体内重组技术等(Sambroook,et al)。所述的DNA序列可有效连接到表达载体中的适当启动子上,以指导mRNA合成。这些启动子的代表性例子有:大肠杆菌的lac或trp启动子;λ噬菌体PL启动子;真核启动子包括CMV立即早期启动子、早期和晚期SV40启动子和其他一些已知的可控制基因在原核或真核细胞或其病毒中表达的启动子。表达载体还包括翻译起始用的核糖体结合位点和转录终止子。
此外,表达载体优选地包含一个或多个选择性标记基因,以提供用于选择转化的宿主细胞的表型性状,如真核细胞培养用的二氢叶酸还原酶、新霉素抗性以及绿色荧光蛋白(GFP),或用于大肠杆菌的四环素或氨苄青霉素抗性。
包含上述的适当DNA序列以及适当启动子或者控制序列的载体,可以用于转化适当的宿主细胞,以使其能够表达蛋白质。
宿主细胞可以是原核细胞,如细菌细胞;或是低等真核细胞,如酵母细胞;或是高等真核细胞,如哺乳动物细胞。代表性例子有:大肠杆菌,链霉菌属;鼠伤寒沙门氏菌的细菌细胞;真菌细胞如酵母;植物细胞;果蝇S2或Sf9的昆虫细胞;CHO、COS或Bowes黑素瘤细胞的动物细胞等。
本发明的多核苷酸在高等真核细胞中表达时,如果在载体中插入增强子序列时将会使转录得到增强。增强子是DNA的顺式作用因子,通常大约有10到300个碱基对,作用于启动子以增强基因的转录。可举的例子包括在复制起始点晚期一侧的100到270个碱基对的SV40增强子、在复制起始点晚期一侧的多瘤增强子以及腺病毒增强子等。
本领域一般技术人员都清楚如何选择适当的载体、启动子、增强子和宿主细胞。
用重组DNA转化宿主细胞可用本领域技术人员熟知的常规技术进行。当宿主为原核生物如大肠杆菌时,能吸收DNA的感受态细胞可在指数生长期后收获,用CaCl2法处理,所用的步骤在本领域众所周知。可供选择的是用MgCl2。如果需要,转化也可用电穿孔的方法进行。当宿主是真核生物,可选用如下的DNA转染方法:磷酸钙共沉淀法,常规机械方法如显微注射、电穿孔、脂质体包装等。
获得的转化子可以用常规方法培养,表达本发明的基因所编码的多肽。根据所用的宿主细胞,培养中所用的培养基可选自各种常规培养基。在适于宿主细胞生长的条件下进行培养。当宿主细胞生长到适当的细胞密度后,用合适的方法(如温度转换或化学诱导)诱导选择的启动子,将细胞再培养一段时间。
在上面的方法中的重组多肽可包被于细胞内、细胞外或在细胞膜上表达或分泌到细胞外。如果需要,可利用其物理的、化学的和其它特性通过各种分离方法分离和纯化重组的蛋白。这些方法是本领域技术人员所熟知的。这些方法的例子包括但并不限于:常规的复性处理、用蛋白沉淀剂处理(盐析方法)、离心、渗透破菌、超处理、超离心、分子筛层析(凝胶过滤)、吸附层析、离子交换层析、高效液相层析(HPLC)和其它各种液相层析技术及这些方法的结合。
重组的具有促进3T3细胞转化功能的人蛋白或多肽有多方面的用途。这些用途包括(但不限于):直接做为药物治疗具有促进3T3细胞转化功能的蛋白功能低下或丧失所致的疾病,和用于筛选促进或对抗具有促进3T3细胞转化功能的蛋白功能的抗体、多肽或其它配体。例如,该抗体可用于治疗癌症或细胞异常增殖。用重组表达的本发明蛋白筛选多肽库可用于寻找有治疗价值的能抑制或刺激具有促进3T3细胞转化功能的人蛋白功能的多肽分子。
本发明也提供了筛选药物以鉴定提高(激动剂)或阻遏(拮抗剂)具有促进3T3细胞转化功能的人蛋白的药剂的方法。激动剂提高具有促进3T3细胞转化功能的人蛋白刺激细胞增殖等生物功能,而拮抗剂阻止和治疗与细胞过度增殖有关的紊乱如各种癌症。
具有促进3T3细胞转化功能的人蛋白的拮抗剂包括筛选出的抗体、化合物、受体缺失物和类似物等。具有促进3T3细胞转化功能的人蛋白的拮抗剂可以与具有促进3T3细胞转化功能的人蛋白结合并消除其功能,或是抑制具有促进3T3细胞转化功能的人蛋白的产生,或是与多肽的活性位点结合使多肽不能发挥生物学功能。具有促进3T3细胞转化功能的人蛋白的拮抗剂可用于治疗用途。
在筛选作为拮抗剂的化合物时,可以将具有促进3T3细胞转化功能的蛋白加入生物分析测定中,通过测定化合物影响具有促进3T3细胞转化功能的蛋白和其受体之间的相互作用来确定化合物是否是拮抗剂。用上述筛选化合物的同样方法,可以筛选出起拮抗剂作用的受体缺失物和类似物。
本发明蛋白的拮抗剂可直接用于疾病治疗,例如,各种恶性肿瘤、和细胞异常增殖等。
本发明的多肽,及其片段、衍生物、类似物或它们的细胞可以用来作为抗原以生产抗体。这些抗体可以是多克隆或单克隆抗体。多克隆抗体可以通过将此多肽直接注射动物的方法得到。制备单克隆抗体的技术包括杂交瘤技术,三瘤技术,人B-细胞杂交瘤技术,EBV-杂交瘤技术等。
可以将本发明的多肽和拮抗剂与合适的药物载体组合后使用。这些载体可以是水、葡萄糖、乙醇、盐类、缓冲液、甘油以及它们的组合。组合物包含安全有效量的多肽或拮抗剂以及不影响药物效果的载体和赋形剂。这些组合物可以作为药物用于疾病治疗。
本发明还提供含有一种或多种容器的药盒或试剂盒,容器中装有一种或多种本发明的药用组合物成分。与这些容器一起,可以有由制造、使用或销售药品或生物制品的政府管理机构所给出的指示性提示,该提示反映出生产、使用或销售的政府管理机构许可其在人体上施用。此外,本发明的多肽可以与其它的治疗化合物结合使用。
药物组合物可以以方便的方式给药,如通过局部、静脉内、腹膜内、肌内、皮下、鼻内或皮内的给药途径。具有促进3T3细胞转化功能的蛋白或其特异性抗体,可按有效地治疗和/或预防具体的适应症的量来给药。施用于患者的具有促进3T3细胞转化功能的蛋白的量和剂量范围将取决于许多因素,如给药方式、待治疗者的健康条件和诊断医生的判断。
具有促进3T3细胞转化功能的人蛋白的多聚核苷酸也可用于多种治疗目的。基因治疗技术可用于治疗由于具有促进3T3细胞转化功能的蛋白的无表达或异常/无活性的具有促进3T3细胞转化功能的蛋白的表达所致的细胞发育或代谢异常。重组的基因治疗载体(如病毒载体)可设计成表达变异的具有促进3T3细胞转化功能的蛋白,以抑制内源性的具有促进3T3细胞转化功能的蛋白活性。例如,一种变异的具有促进3T3细胞转化功能的蛋白可以是缩短的、缺失了信号传导功能域的具有促进3T3细胞转化功能的蛋白,虽可与下游的底物结合,但缺乏信号传导活性。因此重组的基因治疗载体可用于治疗具有促进3T3细胞转化功能的蛋白表达或活性异常所致的疾病。来源于病毒的表达载体如逆转录病毒、腺病毒、腺病毒相关病毒、单纯疱疹病毒、细小病毒等可用于将具有促进3T3细胞转化功能的蛋白基因转移至细胞内。构建携带具有促进3T3细胞转化功能的蛋白基因的重组病毒载体的方法可见于已有文献(Sambrook,et al.)。另外重组具有促进3T3细胞转化功能的人蛋白基因可包装到脂质体中转移至细胞内。
抑制具有促进3T3细胞转化功能的人蛋白mRNA的寡聚核苷酸(包括反义RNA和DNA)以及核酶也在本发明的范围之内。核酶是一种能特异性分解特定RNA的酶样RNA分子,其作用机制是核酶分子与互补的靶RNA特异性杂交后进行核酸内切作用。反义的RNA和DNA及核酶可用已有的任何RNA或DNA合成技术获得,如固相磷酸酰胺化学合成法合成寡核苷酸的技术已广泛应用。反义RNA分子可通过编码该RNA的DNA序列在体外或体内转录获得。这种DNA序列已整合到载体的RNA聚合酶启动子的下游。为了增加核酸分子的稳定性,可用多种方法对其进行修饰,如增加两侧的序列长度,核糖核苷之间的连接应用磷酸硫酯键或肽键而非磷酸二酯键。
多聚核苷酸导入组织或细胞内的方法包括:将多聚核苷酸直接注入到体内组织中;或在体外通过载体(如病毒、噬菌体或质粒等)先将多聚核苷酸导入细胞中,再将细胞移植到体内等。由于本发明蛋白具有促进3T3细胞转化的功能,因此本发明蛋白编码序列的反义序列,可被引入细胞以抑制细胞的异常增殖(如癌变)。
本发明还提供了针对具有促进3T3细胞转化功能的人蛋白抗原决定簇的抗体。这些抗体包括(但不限于):多克隆抗体、单克隆抗体、嵌合抗体、单链抗体、Fab片段和Fab表达文库产生的片段。
抗具有促进3T3细胞转化功能的人蛋白的抗体可用于免疫组织化学技术中,检测活检标本中的具有促进3T3细胞转化功能的人蛋白。
与具有促进3T3细胞转化功能的人蛋白结合的单克隆抗体也可用放射性同位素标记,注入体内可跟踪其位置和分布。这种放射性标记的抗体可作为一种非创伤性诊断方法用于肿瘤细胞的定位和判断是否有转移。
本发明中的抗体可用于治疗或预防与具有促进3T3细胞转化功能的人蛋白相关的疾病。给予适当剂量的抗体可以阻断具有促进3T3细胞转化功能的人蛋白的产生或活性,从而抑制癌细胞的生长和/或细胞的异常增殖。
抗体也可用于设计针对体内某一特殊部位的免疫毒素。如具有促进3T3细胞转化功能的人蛋白高亲和性的单克隆抗体可与细菌或植物毒素(如白喉毒素,蓖麻蛋白,红豆碱等)共价结合。一种通常的方法是用巯基交联剂如SPDP,攻击抗体的氨基,通过二硫键的交换,将毒素结合于抗体上,这种杂交抗体可用于杀灭有关的阳性细胞(如癌细胞)。
多克隆抗体的生产可用具有促进3T3细胞转化功能的人蛋白或多肽免疫动物,如家兔,小鼠,大鼠等。多种佐剂可用于增强免疫反应,包括但不限于弗氏佐剂等。
具有促进3T3细胞转化功能的人蛋白单克隆抗体可用杂交瘤技术生产(Kohler andMilstein.Nature,1975,256:495-497)。将人恒定区和非人源的可变区结合的嵌合抗体可用已有的技术生产(Morrison et al,PNAS,1985,81:6851)。而已有的生产单链抗体的技术(U.S.Pat No.4946778)也可用于生产抗具有促进3T3细胞转化功能的人蛋白的单链抗体。
能与具有促进3T3细胞转化功能的人蛋白结合的多肽分子可通过筛选由各种可能组合的氨基酸结合于固相物组成的随机多肽库而获得。筛选时,必须对具有促进3T3细胞转化功能的人蛋白分子进行标记。
本发明还涉及定量和定位检测具有促进3T3细胞转化功能的人蛋白水平的诊断试验方法。这些试验为本领域所熟知,且包括FISH测定和放射免疫测定。试验中所检测的具有促进3T3细胞转化功能的蛋白水平,可以用作解释具有促进3T3细胞转化功能的蛋白在各种疾病中的重要性和用于诊断具有促进3T3细胞转化功能的蛋白起作用的疾病。
具有促进3T3细胞转化功能的蛋白的多聚核苷酸可用于具有促进3T3细胞转化功能的蛋白相关疾病的诊断和治疗。在诊断方面,具有促进3T3细胞转化功能的蛋白的多聚核苷酸可用于检测具有促进3T3细胞转化功能的蛋白的表达与否或在疾病状态下具有促进3T3细胞转化功能的蛋白的异常表达。如具有促进3T3细胞转化功能的蛋白DNA序列可用于对活检标本的杂交以判断具有促进3T3细胞转化功能的蛋白的表达异常。杂交技术包括Southern印迹法,Northern印迹法、原位杂交等。这些技术方法都是公开的成熟技术,相关的试剂盒都可从商业途径得到。本发明的多核苷酸的一部分或全部可作为探针固定在微阵列(Microarray)或DNA芯片(即基因芯片)上,用于分析组织中基因的差异表达分析和基因诊断。用具有促进3T3细胞转化功能的蛋白特异的引物进行RNA-聚合酶链反应(RT-PCR)体外扩增也可检测具有促进3T3细胞转化功能的蛋白的转录产物。
检测具有促进3T3细胞转化功能的蛋白基因的突变也可用于诊断具有促进3T3细胞转化功能的蛋白相关的疾病。具有促进3T3细胞转化功能的蛋白突变的形式包括与正常野生型具有促进3T3细胞转化功能的蛋白DNA序列相比的点突变、易位、缺失、重组和其它任何异常等。可用已有的技术如Southern印迹法、DNA序列分析、PCR和原位杂交检测突变。另外,突变有可能影响蛋白的表达,因此用Northern印迹法、Western印迹法可间接判断基因有无突变。
本发明的序列对染色体鉴定也是有价值的。这些序列会特异性地针对某条人染色体具体位置且并可以与其杂交。目前,需要鉴定染色体上的各基因的具体位点。然而现在只有很少的基于实际序列数据(重复多态性)的染色体标记物可用于标记染色体位置。为了将这些序列与疾病相关基因相关联。第一步就是将本发明DNA序列定位于染色体上。
简而言之,根据cDNA制备PCR引物(优选15-35bp),可以将序列定位于染色体上。然后,将这些引物用于PCR筛选含各条人染色体的体细胞杂合细胞。只有那些含有相应于引物的人基因的杂合细胞会产生扩增的片段。
体细胞杂合细胞的PCR定位法,是将DNA定位到具体染色体的快捷方法。使用本发明的的寡核苷酸引物,通过类似方法,可利用一组来自特定染色体的片段或大量基因组克隆而实现亚定位。可用于染色体定位的其它类似策略包括原位杂交、用标记的流式分选的染色体预筛选和杂交预选,从而构建染色体特异的cDNA库。
将cDNA克隆与中期染色体进行荧光原位杂交(FISH),可以在一个步骤中精确地进行染色体定位。此技术的综述,参见Verma等,Human Chromosomes:a Manual of BasicTechniques,Pergamon Press,New York(1988)。
一旦序列被定位到准确的染色体位置,此序列在染色体上的物理位置就可以与基因图数据相关联。这些数据可见于例如,V.Mckusick,Mendelian Inheritance in Man(可通过与Johns Hopkins University Welch Medical Library联机获得)。然后可通过连锁分析,确定基因与业已定位到染色体区域上的疾病之间的关系。
接着,需要测定患病和未患病个体间的cDNA或基因组序列差异。如果在一些或所有的患病个体中观察到某突变,而该突变在任何正常个体中未观察到,则该突变可能是疾病的病因。比较患病和未患病个体,通常涉及首先寻找染色体中结构的变化,如从染色体水平可见的或用基于cDNA序列的PCR可检测的缺失或易位。
本发明的具有促进3T3细胞转化功能的蛋白核苷酸全长序列或其片段通常可以用PCR扩增法、重组法或人工合成的方法获得。对于PCR扩增法,可根据本发明所公开的有关核苷酸序列,尤其是开放阅读框序列来设计引物,并用市售的cDNA库或按本领域技术人员已知的常规方法所制备的cDNA库作为模板,扩增而得有关序列。当序列较长时,常常需要进行两次或多次PCR扩增,然后再将各次扩增出的片段按正确次序拼接在一起。
一旦获得了有关的序列,就可以用重组法来大批量地获得有关序列。这通常是将其克隆入载体,再转入细胞,然后通过常规方法从增殖后的宿主细胞中分离得到有关序列。
此外,还可用人工合成的方法来合成有关序列,尤其是片段长度较短时。通常,通过先合成多个小片段,然后再进行连接可获得序列很长的片段。
目前,已经可以完全通过化学合成来编码本发明蛋白(或其片段,或其衍生物)的DNA序列。然后可将该DNA序列引入本领域中的各种DNA分子(如载体)和细胞中。此外,还可通过化学合成将突变引入本发明蛋白序列中。
此外,由于本发明的具有促进3T3细胞转化功能的蛋白具有源自人的天然氨基酸序列,因此,与来源于其他物种的同族蛋白相比,预计在施用于人时将具有更高的活性和/或更低的副作用(例如在人体内的免疫原性更低或没有)。
下面结合具体实施例,进一步阐述本发明。应理解,这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法,通常按照常规条件如Sambrook等人,分子克隆:实验室手册(New York:Cold Spring Harbor LaboratoryPress,1989)中所述的条件,或按照制造厂商所建议的条件。注意,在核苷酸和氨基酸组合序列中,(1)给出的是起始和终止编码子第一个核苷酸的位置,(2)分子量单位是道尔顿。
实施例1:cDNA基因的获得及对小鼠NIH/3T3细胞克隆形成的促进作用
PP11646、PP11647、PP12994、PP13187、PP13850和PP14296是通过用常规方法构建人胎盘cDNA文库获得的;FP852、FP938、FP1047、FP2025、FP2461和FP3059是通过用常规方法构建人胎儿cDNA文库获得的。取3、6、9月龄的胎盘组织(PP克隆)或胎儿组织(FP克隆),用Trizol试剂(GIBCO BRL公司)按厂方说明书提取总RNA,用mRNA提纯试剂盒(Pharmacia公司)提取mRNA。用pCMV-script TMXR cDNA文库构建试剂盒(Stratagene公司)构建上述mRNA的cDNA文库。其中反转录酶改用MMLV-RT-Superscript II(GIBCO BRL),反转录反应在42℃进行。转化XL 10-Gold感受细胞,获得了1×106cfu/μg滴度的cDNA文库。第一轮随机挑取cDNA克隆,其后以高丰度cDNA克隆和已证明有抑癌细胞生长功能的cDNA克隆为探针,杂交筛选cDNA文库,挑取弱阳性及阴性克隆。用Qiagen 96孔板质粒抽提试剂盒,按厂家说明书进行质粒DNA的提取。质粒DNA和空载体同时转染小鼠NIH/3T3细胞。100ng DNA酒精沉淀干燥后,加6μl H2O溶解,待转染。每份DNA样品中加0.74μl脂质体及9.3μl无血清培液,混匀后,室温放置10分钟。每管中加150μl无血清培液,均分加入3孔生长于96孔板的小鼠NIH/3T3细胞中,37℃放置2小时,每孔再加50ul无血清培液,37℃24小时。每孔换100μl全培液,37℃24小时,换含G418的全培液100μl,37℃24-48小时,边观察,边换G418浓度不等的培液。约2-3次后,直到镜检细胞有克隆形成,计数。发现上述克隆有促进3T3细胞克隆形成作用,结果如下表所示。
cDNA克隆转染细胞(3T3)克隆形成情况
cDNA克隆名称 | cDNA克隆数(三个重复) | 空载体克隆数(三个重复) | ||||
PP11646 | 32 | 36 | 23 | 13 | 12 | 15 |
PP11647 | 38 | 44 | 35 | 13 | 12 | 15 |
PP12994 | 30 | 34 | 35 | 13 | 12 | 15 |
PP13187 | 39 | 39 | 37 | 13 | 12 | 15 |
PP13850 | 31 | 25 | 28 | 13 | 12 | 15 |
PP14296 | 20 | 24 | 22 | 13 | 12 | 15 |
FP852 | 79 | 86 | 93 | 13 | 12 | 15 |
FP938 | 67 | 59 | 50 | 13 | 12 | 15 |
FP1047 | 78 | 80 | 69 | 13 | 12 | 15 |
FP2025 | 79 | 81 | 75 | 13 | 12 | 15 |
FP2461 | 83 | 54 | 63 | 13 | 12 | 15 |
FP3059 | 27 | 31 | 25 | 13 | 12 | 15 |
对cDNA克隆采用双脱氧终止法,在ABI377 DNA自动测序仪上测定其一端近500bp的核苷酸序列。分析后,确定为新基因克隆,进行另一端测序,仍未获得全长cDNA序列,设计引物,再次进行测序,直到获得全长序列(SEQ ID NO:1、4、7、10、13、16、19、22、25、28、31、34)。
实施例2:从胎盘或胎儿cDNA中PCR获得全长基因和重组蛋白的表达
取3、6、9月龄的胎盘组织或胎儿组织,用Trizol试剂(GIBCO BRL公司)按厂方说明书提取总RNA,用mRNA提纯试剂盒(Pharmacia公司)提取mRNA。用MMLV-RT-Superscript II(GIBCO BRL),反转录酶在42℃进行反转录反应,获得胎盘或胎儿cDNA。利用各个基因的特异引物(如下表所示),按97℃3’1个循环。94℃30″60℃30″72℃1’35个循环,72℃10′1个循环进行PCR扩增,获得含有完整开放阅读框序列的各蛋白基因的扩增产物。扩增产物经测序验证,与实施例1测得的序列相符,随后用常规技术将扩增产物转入宿主细胞,获得重组蛋白(SEQ ID NO:2、5、8、11、14、17、20、23、26、29、32、35)。
基因特异引物
克隆名称 | 特异引物1(5’→3′) | 特异引物2(5′→3’) |
PP11646 | (45)CAGAGTGAGGGAAGGATG | CAGAGTCGTCGGAGTTTA(1351) |
PP11647 | (120)AGTGGTGCTCGGATGTGG | ATCGGCAGTGACTTAGTGG(2093) |
PP12994 | (706)GGAGAATTGAAGCGAATG | AAAGCACGGACAGTAAGA(1767) |
PP13187 | (777)ACCTGAAAGAGGGAAGACG | ACCAGCAGTGTTGAACCT(1784) |
PP13850 | (159)TTACAATGGCTTTGGAGGA | CTTTGGTATTTGAGGCTGACC(2790) |
PP14296 | (263)GGGTCACCACGGATGTCT | CACAAGGGACGTTATTTGAAC(1887) |
FP852 | (65)CCTCTTCTGCCCAACACT | ACAAAGGAACCCACTTAC(996) |
FP938 | (103)GGAAAGAGGGAAGTCGTG | GTCAATATGCTTACGGTAGT(2421) |
FP1047 | (84)GGAAGACAAGCACAAGTATGAG | ATAGCGTCGAAAGTTGTTGT(1982) |
FP2025 | (132)AGCGTCGTGTCTGTAGCG | CGAGGAGGAGGTTGGAAC(1694) |
FP2461 | (9)CTTCGCGGATGATGTGAG | GAGGTTTGGGTGGAACGA(2225) |
FP3059 | (50)GCAAGTCCCTTCCATCTA | ACATCCTCTGACTCCCTTT(1865) |
实施例3:cDNA克隆序列分析
1.PP11646
A:核苷酸序列(SEQ ID NO:1)长度:1527个碱基
1 GTTTTCCCAG AGTGTTTTTT GGTTTCTGAA AGGCTGAACA CAGGCAGAGT GAGGGAAGGA
61 TGAAGTCTAC AGGCCATTGT GATGCAGCCC TTCCAGCAGG TGTGACAGAT TATATAAGGA121 CCATCTGGAA AAGAAACATG CTGCCTGTTG TCTGGAAACC TTCCACTGAC ACCTTCAGAT181 CAGCAATGTC TTATTTTTCA TTTTACCGCC CATCTGCATG TGCTTGTTTC GTCAGTATGC241 AACATGCTTC AACAGTGGCA TCTACTTAAT CTGGACTCTT TTGGTTGTAG TGGGAATTGG301 ATCCGTCTAC TTCCATGCAA CCCTTAGTTT CTTGGGTCAG ATGCTTGATG AACTTGCAGT361 CCTTTGGGTT CTGATGTGTG CTTTGGCCAT GTGGTTCCCC AGAAGGTATC TACCAAAGAT421 CTTTCGGAAT GACCGGGGTA GGTTCAAGGT GGTGGTCAGT GTCCTGTCTG CGGTTACGAC481 GTGCCTGGCA TTTGTCAAGC CTGCCATCAA CAACATCTCT CTGATGACCC TGGGAGTTCC541 TTGCACTGCA CTGCTCATCG CAGAGCTAAA GAGGCATGAG AGGAACCAGC GAAGGAGACA601 CAGGAAAGGT GGCCAGCAAG GAGGTGGAGA CAAGGTCTGA CGATGAGTGA CTCTCTGGAC661 CCCCGTGCAG GTGTGACAAC ATGCGTGTGT TTAAGCTGGG CCTCTTCTCG GGCCTCTGGT721 GGACCCTGGC CCTGTTCTGC TGGATCAGTG ACCGAGCTTT CTGCGAGCTG CTGTCATCCT781 TCAACTTCCC CTACCTGCAC TGCATGTGGT GGACGGTCAG ATGGTTCAGA AGCCACTGAA841 AGCACACTTT GTAAAAAGCT GAATTGACTC CAGGGAGCAG GCTTAGCCGG AACGAAAGGC901 CTGATTGTCA TGCTTAGCAG GACTATTTAA GAACATTCTA AAACGGGTCC CAAATTGCTG 961 AAGATTTATC ATCCTGCTAT TCCAGGGATT GTTGGTAATC TTCATCCTTT CCTAATTAGA1021 AGAGGCCCCT GGGCTGCAAC TACAGTCAGC AAGGCACATC CTCATCTGCC TTGCTGCCTA1081 CCTGGGCTGT GTATGCTTTG CCTACTTTGA TGCTGCCTCA GAGATTCCTG AGCAAGGCCC1141 TGTCATCAAG TTCTGGCCCA ATGAGAAATG GGCCTTCATT GGTGTCCCCT ATGTGTCCCT1201 CCTGTGTGCC AACAAGAAAT CATCAGTCAA GATCACGTGA TGGCAAGATG GTGGCTGGCT1261 TCTCTGCTTA TCGCCCCTCA TGCAGTGGGC TTCCTTTGCT AGGAAGACAG CCAAGGGAGT1321 TCGAATAGTT GGGGTCTCAG CAGCCTCAAA TCTACAGAGA AGAAGAATTA TGGCATGAAC1381 ATTCCCACAG ACCCACCATC TTTAAGACTT GACCTCTGTA AGTTTACCAA AGGGCTCCTC1441 ACAATTGTGG TGGGGGTTCT GGTTCAAAAT TTGGAGCAAA CATGAAGTTT TTGGAAACGT1501 TAAAAAAAAA AAAAAAAAAA AAAAAAAB:核苷酸序列(SEQ ID NO:2)长度:140个氨基酸
1 MCLFRQYATC FNSGIYLIWT LLVVVGIGSV YFHATLSFLG QMLDELAVLW VLMCALAMWF
61 PRRYLPKIFR NDRGRFKVVV SVLSAVTTCL AFVKPAINNI SLMTLGVPCT ALLIAELKRH
121 ERNQRRRHRK GGQQGGGDKVC.核苷酸及氨基酸组合序列(SEQ ID NO:3)克隆号和蛋白名称:PP11646起始编码子:218 ATG 终止编码子:638 TGA 蛋白质分子量:15863.161 G TTT TCC CAG AGT GTT TTT TGG TTT CTG AAA GGC TGA ACA CAG GCA 4647 GAG TGA GGG AAG GAT GAA GTC TAC AGG CCA TTG TGA TGC AGC CCT TCC 9495 AGC AGG TGT GAC AGA TTA TAT AAG GAC CAT CTG GAA AAG AAA CAT GCT 142143 GCC TGT TGT CTG GAA ACC TTC CAC TGA CAC CTT CAG ATC AGC AAT GTC 190191 TTA TTT TTC ATT TTA CCG CCC ATC TGC ATG TGC TTG TTT CGT CAG TAT 2381 Met Cys Leu Phe Arg Gln Tyr 7239 GCA ACA TGC TTC AAC AGT GGC ATC TAC TTA ATC TGG ACT CTT TTG GTT 2868 Ala Thr Cys Phe Asn Ser Gly Ile Tyr Leu Ile Trp Thr Leu Leu Val 23287 GTA GTG GGA ATT GGA TCC GTC TAC TTC CAT GCA ACC CTT AGT TTC TTG 33424 Val Val Gly Ile Gly Ser Val Tyr Phe His Ala Thr Leu Ser Phe Leu 39335 GGT CAG ATG CTT GAT GAA CTT GCA GTC CTT TGG GTT CTG ATG TGT GCT 38240 Gly Gln Met Leu Asp Glu Leu Ala Val Leu Trp Val Leu Met Cys Ala 55383 TTG GCC ATG TGG TTC CCC AGA AGG TAT CTA CCA AAG ATC TTT CGG AAT 43056 Leu Ala Met Trp Phe Pro Arg Arg Tyr Leu Pro Lys Ile Phe Arg Asn 71431 GAC CGG GGT AGG TTC AAG GTG GTG GTC AGT GTC CTG TCT GCG GTT ACG 47872 Asp Arg Gly Arg Phe Lys Val Val Val Ser Val Leu Ser Ala Val Thr 87479 ACG TGC CTG GCA TTT GTC AAG CCT GCC ATC AAC AAC ATC TCT CTG ATG 52688 Thr Cys Leu Ala Phe Val Lys Pro Ala Ile Asn Asn Ile Ser Leu Met 103527 ACC CTG GGA GTT CCT TGC ACT GCA CTG CTC ATC GCA GAG CTA AAG AGG 574104 Thr Leu Gly Val Pro Cys Thr Ala Leu Leu Ile Ala Glu Leu Lys Arg 119575 CAT GAG AGG AAC CAG CGA AGG AGA CAC AGG AAA GGT GGC CAG CAA GGA 622120 His Glu Arg Asn Gln Arg Arg Arg His Arg Lys Gly Gly Gln Gln Gly 135623 GGT GGA GAC AAG GTC TGA CGA TGA GTG ACT CTC TGG ACC CCC GTG CAG 670136 Gly Gly Asp Lys Val *** 141671 GTG TGA CAA CAT GCG TGT GTT TAA GCT GGG CCT CTT CTC GGG CCT CTG 718719 GTG GAC CCT GGC CCT GTT CTG CTG GAT CAG TGA CCG AGC TTT CTG CGA 766767 GCT GCT GTC ATC CTT CAA CTT CCC CTA CCT GCA CTG CAT GTG GTG GAC 814815 GGT CAG ATG GTT CAG AAG CCA CTG AAA GCA CAC TTT GTA AAA AGC TGA 862863 ATT GAC TCC AGG GAG CAG GCT TAG CCG GAA CGA AAG GCC TGA TTG TCA 910911 TGC TTA GCA GGA CTA TTT AAG AAC ATT CTA AAA CGG GTC CCA AAT TGC 958 959 TGA AGA TTT ATC ATC CTG CTA TTC CAG GGA TTG TTG GTA ATC TTC ATC 10061007 CTT TCC TAA TTA GAA GAG GCC CCT GGG CTG CAA CTA CAG TCA GCA AGG 10541055 CAC ATC CTC ATC TGC CTT GCT GCC TAC CTG GGC TGT GTA TGC TTT GCC 11021103 TAC TTT GAT GCT GCC TCA GAG ATT CCT GAG CAA GGC CCT GTC ATC AAG 11501151 TTC TGG CCC AAT GAG AAA TGG GCC TTC ATT GGT GTC CCC TAT GTG TCC 11981199 CTC CTG TGT GCC AAC AAG AAA TCA TCA GTC AAG ATC ACG TGA TGG CAA 12461247 GAT GGT GGC TGG CTT CTC TGC TTA TCG CCC CTC ATG CAG TGG GCT TCC 12941295 TTT GCT AGG AAG ACA GCC AAG GGA GTT CGA ATA GTT GGG GTC TCA GCA 13421343 GCC TCA AAT CTA CAG AGA AGA AGA ATT ATG GCA TGA ACA TTC CCA CAG 13901391 ACC CAC CAT CTT TAA GAC TTG ACC TCT GTA AGT TTA CCA AAG GGC TCC 14381439 TCA CAA TTG TGG TGG GGG TTC TGG TTC AAA ATT TGG AGC AAA CAT GAA 14861487 GTT TTT GGA AAC GTT AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AA 15272.PP11647A:核苷酸序列(SEQ ID NO:4)长度:2240个碱基1 GAGCACCCCG GCCTCCTCTC TGGGGGCCCA GAGGACTGTC TGATCGCCGG TAGATTTGCA61 TGGAGCCAGC TCTTCACCTG AGGCAGGGAA GGAGGGTGAG GAATTGAAAC CCCAAGCACA121 GTGGTGCTCG GATGTGGGTG ACGTGTTCTG GGGGTACACT CGTGCGGCAC GCGTCCTCAC181 GGAGGGGCCC ACCTCCAGAG TGACATGGTC TGGGGGTACA CTCACACGGC AGCTGCCCTG241 CCCTCACAGG GGGACCCACC TCCATAGTGA CGTGGTCTGG GGGTACACTT CCACAGCAGC301 CATCCTCACG GGGTGGGCCC CCCTCCAGAG TGACGTGGTC TGGGGGTCCA CTCACACGGT361 GGCCGTCCTC ATGGGAGTGG GCCCCCCCCT GCAGAGGGAC CGAGCAGTGC TCCGGAGCTG421 GTGCCTGTCG TTACTCTTGG TAATGTTGTG CCATTTTTCA GCCACAATAA GAGCCACTTA481 AACTGGAACT CTTGTCTGAA TCCTCTGTGC TCCGACAGCG CTCCCACCTG ACGTTTCAAT541 AATTCTTAGG CTAGTCAGGA AGCCCCCGTG GTACTTCTAT TATTTTATAC TAAGAAACCC601 TGCCAGGGCC CACGCAATTG ACAGAGACCA CAAAAGGCTT GTTCGTCTGA GGACTGAAGA661 GAGCCGACCT GCCATGCAAA AGAAGGCCTT CGGGGGGAGA GTTCACAGAG CACAGTGCGA721 GCGAGTGGCG AGGTGATGCG GCTTGAAACA GTGAGCAAGG GCAACAGAGG ATCGCTTTGA781 AATGTAGTTT TCTGCTGCTC TCAAGGTTCA TTTCATTTCT AGAAAAAAAT CCCATAAGGG841 AGTTTTTGTA AATCGAAATA TCAGTAATTT CGTTGGAAAA AAAATAGCTA TTCTCAAGCC901 TCAAAATGGA CAGCTATGTG TAGTGAGACC CCCCCACAGC TCAGACGCGA TCCCCCTTGT961 TTCCGTGGAG GCCGCCCGCT ACCCCGACAC ATCCCAAAAG GTGTTTCCAG CACAGGTGGC1021 CCACGTCCTC CACTCTGGCA GCCGCTGTGC TTGCCAGTGG CACATAAGCT GCACTCACGG1081 CAGACACACC GTCTGGATTT GGGTAACTCG ACCAGGGACA CACAAACTTG CAAGGAGGAG1141 TGAGACCGGC GTCCATGGGA GGCAGCACGT GACAGCAGTG ACCCACTGGG ACCTGAGAGA1201 GGAGGTGGCT TCCTGAGAAT CGCTGGCAAC CGGCACCTGG GAGCCCGCTT TGGGGGAGAC1261 CCCGATCTGT GTCCCCAGAG CCAGTCCACT GCCTGGACTG GTTGTGGAGA AACTCCATTG1321 TCCTACTGGC TGGGGCAGGG CGTGGGGTTG CAGGGCAGAA GGAGCAAGGG ACAGGAGTGT1381 GGATCGTGGT TCAGATGGTG CCCCTGGGGC CCAAGCTGGA AAGGGCAGGA TGAGGAGCCA1441 GGGGCAGGGT GGGCCTGGGG CCTGGCGGAG GATGGAGAGC TGGAGTGCAG AGCCTGCTGG1501 ACCAGGGCAG GGCCGCCTTG GGTCCCCCTG TGAGGCAGCC GAGCAAGCGA GCTTTGAGAA1561 GACAGTGATA GGAGTGGGGC AAGCACGGGC AGCCCTTTCT GAAGAGGAGC ACAGAGTCTG1621 GGAGGCTGCA GCGGGAGTTG GAGGACTAGA GCAGTGGGGC TGCTGGGAAG CAGGGGTCAC1681 GGGGGGTTGG GGGGGGCGTG TGTTCCGGCC CCGCCGGGGC TTAAGTTCCA TGCGTTCGAT1741 TCCTCGCTTG CCGCTGCCGC CCGCAGCCCT CATCTCTTGG GCGCTGGGGA AGAAACTCGT1801 TGGCGGGTGT TCTGTGGCAT CCCAGGGGGT GGAGGGACGA GCAGCTTCGG GGGCATGTCC1861 TCGTGTATCC TGTGGAGGAC CCTGACCCCG CACCCCACCC TCGAGGCCAG AAATCGGTTG1921 CCTCTGGGGA CCTGAGAAGC GAGACCACTC GCGCCCCTGA CTTGCAAAGT TGGGGTCTTT1981 ATTGGCCTCC GGGATTCTGC TCGTGGCGGT TTCTCCAGGC TGGTGATGGG CAAGCCGGGT2041 GTACCAAGTC CAGGATGCAC ATGAGGAGCG TTTGTAGCCG TCACTGAATC ACCTCATGAC2101 TAGCGGGGCA GGCCTCTAAT TCACCGCAGG AGGATCACTT GAACCTGGGA GGCAGAGGTT 2161 ACAGTGAGCC GAGATCGCAT CACTGCACTC CAGCCTGGGT AACAGAGCAA GACTCTGTCT2221 CAAAAAAAAA AAAAAAAAAAB:核苷酸序列(SEQ ID NO:5) 长度:151个氨基酸
1 MRSQGQGGPG AWRRMESWSA EPAGPGQGRL GSPCEAAEQA SFEKTVIGVG QARAALSEEE
61 HRVWEAAAGV GGLEQWGCWE AGVTGGWGGR VFRPRRGLSS MRSIPRLPLP PAALISWALG
121 KKLVGGCSVA SQGVEGRAAS GACPRVSCGG PC.核苷酸及氨基酸组合序列(SEQ ID NO:6)克隆号和蛋白名称:PP11647起始编码子:1430 ATG 终止编码子:1883 TGA 蛋白质分子量:15536.721 G AGC ACC CCG GCC TCC TCT CTG GGG GCC CAG AGG ACT GTC TGA TCG 4647 CCG GTA GAT TTG CAT GGA GCC AGC TCT TCA CCT GAG GCA GGG AAG GAG 9495 GGT GAG GAA TTG AAA CCC CAA GCA CAG TGG TGC TCG GAT GTG GGT GAC 142143 GTG TTC TGG GGG TAC ACT CGT GCG GCA CGC GTC CTC ACG GAG GGG CCC 190191 ACC TCC AGA GTG ACA TGG TCT GGG GGT ACA CTC ACA CGG CAG CTG CCC 238239 TGC CCT CAC AGG GGG ACC CAC CTC CAT AGT GAC GTG GTC TGG GGG TAC 286287 ACT TCC ACA GCA GCC ATC CTC ACG GGG TGG GCC CCC CTC CAG AGT GAC 334335 GTG GTC TGG GGG TCC ACT CAC ACG GTG GCC GTC CTC ATG GGA GTG GGC 382383 CCC CCC CTG CAG AGG GAC CGA GCA GTG CTC CGG AGC TGG TGC CTG TCG 430431 TTA CTC TTG GTA ATG TTG TGC CAT TTT TCA GCC ACA ATA AGA GCC ACT 478479 TAA ACT GGA ACT CTT GTC TGA ATC CTC TGT GCT CCG ACA GCG CTC CCA 526527 CCT GAC GTT TCA ATA ATT CTT AGG CTA GTC AGG AAG CCC CCG TGG TAC 574575 TTC TAT TAT TTT ATA CTA AGA AAC CCT GCC AGG GCC CAC GCA ATT GAC 622623 AGA GAC CAC AAA AGG CTT GTT CGT CTG AGG ACT GAA GAG AGC CGA CCT 670671 GCC ATG CAA AAG AAG GCC TTC GGG GGG AGA GTT CAC AGA GCA CAG TGC 718719 GAG CGA GTG GCG AGG TGA TGC GGC TTG AAA CAG TGA GCA AGG GCA ACA 766767 GAG GAT CGC TTT GAA ATG TAG TTT TCT GCT GCT CTC AAG GTT CAT TTC 814815 ATT TCT AGA AAA AAA TCC CAT AAG GGA GTT TTT GTA AAT CGA AAT ATC 862863 AGT AAT TTC GTT GGA AAA AAA ATA GCT ATT CTC AAG CCT CAA AAT GGA 910911 CAG CTA TGT GTA GTG AGA CCC CCC CAC AGC TCA GAC GCG ATC CCC CTT 958959 GTT TCC GTG GAG GCC GCC CGC TAC CCC GAC ACA TCC CAA AAG GTG TTT 10061007 CCA GCA CAG GTG GCC CAC GTC CTC CAC TCT GGC AGC CGC TGT GCT TGC 10541055 CAG TGG CAC ATA AGC TGC ACT CAC GGC AGA CAC ACC GTC TGG ATT TGG 11021103 GTA ACT CGA CCA GGG ACA CAC AAA CTT GCA AGG AGG AGT GAG ACC GGC 11501151 GTC CAT GGG AGG CAG CAC GTG ACA GCA GTG ACC CAC TGG GAC CTG AGA 11981199 GAG GAG GTG GCT TCC TGA GAA TCG CTG GCA ACC GGC ACC TGG GAG CCC 12461247 GCT TTG GGG GAG ACC CCG ATC TGT GTC CCC AGA GCC AGT CCA CTG CCT 12941295 GGA CTG GTT GTG GAG AAA CTC CAT TGT CCT ACT GGC TGG GGC AGG GCG 13421343 TGG GGT TGC AGG GCA GAA GGA GCA AGG GAC AGG AGT GTG GAT CGT GGT 13901391 TCA GAT GGT GCC CCT GGG GCC CAA GCT GGA AAG GGC AGG ATG AGG AGC 14381 Met Arg Ser 31439 CAG GGG CAG GGT GGG CCT GGG GCC TGG CGG AGG ATG GAG AGC TGG AGT 14864 Gln Gly Gln Gly Gly Pro Gly Ala Trp Arg Arg Met Glu Ser Trp Ser 191487 GCA GAG CCT GCT GGA CCA GGG CAG GGC CGC CTT GGG TCC CCC TGT GAG 153420 Ala Glu Pro Ala Gly Pro Gly Gln Gly Arg Leu Gly Ser Pro Cys Glu 351535 GCA GCC GAG CAA GCG AGC TTT GAG AAG ACA GTG ATA GGA GTG GGG CAA 158236 Ala Ala Glu Gln Ala Ser Phe Glu Lys Thr Val Ile Gly Val Gly Gln 511583 GCA CGG GCA GCC CTT TCT GAA GAG GAG CAC AGA GTC TGG GAG GCT GCA 163052 Ala Arg Ala Ala Leu Ser Glu Glu Glu His Arg Val Trp Glu Ala Ala 671631 GCG GGA GTT GGA GGA CTA GAG CAG TGG GGC TGC TGG GAA GCA GGG GTC 167868 Ala Gly Val Gly Gly Leu Glu Gln Trp Gly Cys Trp Glu Ala Gly Val 831679 ACG GGG GGT TGG GGG GGG CGT GTG TTC CGG CCC CGC CGG GGC TTA AGT 172684 Thr Gly Gly Trp Gly Gly Arg Val Phe Arg Pro Arg Arg Gly Leu Ser 991727 TCC ATG CGT TCG ATT CCT CGC TTG CCG CTG CCG CCC GCA GCC CTC ATC 1774100 Ser Met Arg Ser lle Pro Arg Leu Pro Leu Pro Pro Ala Ala Leu Ile 1151775 TCT TGG GCG CTG GGG AAG AAA CTC GTT GGC GGG TGT TCT GTG GCA TCC 1822116 Ser Trp Ala Leu Gly Lys Lys Leu Val Gly Gly Cys Ser Val Ala Ser 1311823 CAG GGG GTG GAG GGA CGA GCA GCT TCG GGG GCA TGT CCT CGT GTA TCC 1870132 Gln Gly Val Glu Gly Arg Ala Ala Ser Gly Ala Cys Pro Arg Val Ser 1471871 TGT GGA GGA CCC TGA CCC CGC ACC CCA CCC TCG AGG CCA GAA ATC GGT 1918148 Cys Gly Gly Pro *** 1521919 TGC CTC TGG GGA CCT GAG AAG CGA GAC CAC TCG CGC CCC TGA CTT GCA 19661967 AAG TTG GGG TCT TTA TTG GCC TCC GGG ATT CTG CTC GTG GCG GTT TCT 20142015 CCA GGC TGG TGA TGG GCA AGC CGG GTG TAC CAA GTC CAG GAT GCA CAT 20622063 GAG GAG CGT TTG TAG CCG TCA CTG AAT CAC CTC ATG ACT AGC GGG GCA 21102111 GGC CTC TAA TTC ACC GCA GGA GGA TCA 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TGCAGCCTGC CAGAGGCCCA ATGCTGGAAT GGCACCATCA TTCACATCAG2581 AACTGCAGCC CCTGGAAAAG AAGAGACAGC CATAGACGAG GAGCCAGAGT GGGGGCAGAC2641 TGGCCATTTT TATTTTGAAG TTCCTGGGAG AAATGGATGG TGGAAGGGTG GCGAATGTTC2701 AAATTCATAT GTGTGGTAGT GATTCTTGGA AAGAATTTGA GGTCCCCAAA GGTGTATTTT2761 TGGGCAAATG AAACCATAAA CTCCGACTGG CTTCTGTAGA TGCCAAAGGG CTCTTTTTCA2821 GCTAACCCTG GGAAGGCTCT GTGGGAGGGA GGTCGGAGCC AGCTGTTTCT CGATCTTTGG2881 TATATCTTTG GATCTTATTT GTACATTAAT GATATTAACA CTCCAGTGGG GGGTGGGGAG2941 TCCCTGATGC TAGGGCTGGG TGGGTGGAGT TTGAAGACTC TTGGGAAAGC CTCTCCTGGG3001 GCCACTGTTG GGGGTGGGAG TGAGCCCACC ACAGAGGCCA CAGGCAGGCC CCCACTTCAG3061 GCCCAAGGCC TGGGGCGGGG GGAACAGTCA CTGGGTCTCA GATTCTGAGA CTGTTGTTTA3121 GCTTACCTTT CTGCTAGGAT TGGCTTCCCG CAGAGGGCAG GGCCCATCCT AAGCAGCTTC3181 CAAGTCCCAC AAAGGTGGCT TGTGGGAGGA TTTGGAAGGA GCTGCATTGT GGGCGGGGAG3241 TGTGTGGGTT GGGTTCGTAC CAGCAAGTAG ACTAGGAACT GAGCCCAGGA AAGGGGGATG3301 TTTTCCTGGT GTTTGGATGG TCAGCTGGGA GTGTCCATCA TCAGGGGAAG ATCAAACACA3361 GGTGCACTCA GCTGCCCAGG GCCTCTGGGA CACTTGCCTT GACTTGCAAC TTGCCTTGAA3421 CATCACGATC AAAGCAGCAG GTGCTGTGGT CTCTCAAAAT TGATTTTTAT TTGACTCTGT3481 GGCTCTAAGA CTGCCTTGAA CCGCCTGAGG CCTATGCATC TGAACAAGTG GGTCTCTCCC3541 TTGAGCACCA GGAGTGGGTG CCAGCCGGCC CCGAGGATTC CCAGCACCCC ACCTATGGTC3601 TTGCCAGCAT AGGCTTGCTA GTTCCTTCTT GGTCAGAGGT AGCTTGCAGA GGGGGGAGGC3661 CAAGGGTTTT GTCTAAGCTG TGCCCTGCCA CCTGGCAGGA GGCCCACTCA CTGCCCAAGT3721 CATGGCAACA GGCTGGAGCA GCCCAGGAGA TGGGCCTAAA ATGTTCTGGA TCCCTTGGGT3781 CCTAGTGTTA TGTTCCAGTC TGCCCACCTG TGCTCAGGAT GCAGCCCTGG GATCCAGCAC3841 CCATGGAAGC TTCTGCTGGG ATGGTGTCAC CTATGGGTTT TGAACCAGTG TGGTATGGTC3901 CTTGGGAGCT CTGCTCTGAG CTTGCCACAC TGCTGAGAGC ACCCACTGTC CTGACCAGAG3961 TCTCAGTGGT CCTGACCCCC AATGTGGGCA GGGGCTGGGC AGGAGGGTGG GGTCTGCTGT4021 GGGTTCAGAG GACCCCACCT CCTGGCTGGT TTACCTGCTG CTGCCCATTT TCTCTGGGTA4081 CTGCTGGCAG AGGACTTTAG CCTACCCCTG AAGAGCCTGT CCATGTCATT TTCCTACTGC4141 CATAGATACC CTAAGCCCAG GGCCCCTTGA GGCCCAGACT CAGCCTGCCC ACTGGTGCCG4201 GAGACGGAGT GGAGTGGGCC TGGATCCGAG GGATGCTACC TCTCCCTTTC CCACTTGAGG4261 ACCCTGGGGA GAGATGGGGG CGGGGAAAAT GGAGGTATGA ATTTGGGGTA AGAGGAAGTG4321 AGATCTCCGC TTGCAGGTCA GCCCCTGCCT TGCAGGGCGG GCTGGCTTGA CTCAGGCCCT4381 GTGAGATAGA GGGCCCAGCC CAGCCCCACC CACAGATCCC CTGCTCCTGT TGTGTTCTGT4441 TGTAAATCAT TTGGCGAGAC TGTATTTTAG TAACTGCTGC CTAACTTCCC TGTGTTCTAT4501 TTGAGAGGCG CCTGTCTGGA TAAAGTTGTC TTGAAATTTA AAAAAAAAAA AAAAAAAB:核苷酸序列(SEQ ID NO:14)长度:249个氨基酸
1 MGPQHPCFSA SPWKEPHNRD TARTLQFPQS CHGATLRDRD GDRAARFART CIAGPRLPFL
61 LSHAKASLPS LRQSLAGDHD LRGPPGSCHG GCTPPHPPEE TWAQSHAWCP QPQRWPWVSS
121 LIFVAWQGSA PLRASKPWSE ESVGRLGTAK EVRTHETGEA FQSLHLHRVK LPVEAAAQEV
181 GIAISILEGS VDLRGHPSPV SGCGARDCLH AGCWGGNASS PCLGRSRSCS SRDPRPRQHG
241 PGTSPGPARC.核苷酸及氨基酸组合序列(SEQ ID NO:15)克隆号和蛋白名称:PP13850起始编码子:435 ATG 终止编码子:1182 TGA 蛋白质分子量:56794.621 GC AGG GAA CTA GTT CGA GTT TTT TTT TTT TTT TTT TTT TTT TTT TTT 4748 TTT TTT TTT TTT TTT TTT TTT TTT TTT TTT TAA AAA ACA ACT GTG TTT 9596 AAT GAC AAT CCT CAG TTT AAA AAA AAA AAA GAA GAA GAA GGT TTA TAC 143144 ACA CTG TAC ACA CAT TTA CAA TGG CTT TGG AGG ATA GCA GTG CTG CGA 191192 AAA GGG CTT CAG GAG GAT CCG GCC TGG GAC AGG ATT GAG GTA TGT TGC 239240 AGC CTC CAG GGC CTG GGG TCT CCT GCA TGA AGA ATA CCC CTC CCC ATT 287288 TGA CTG TGA ACT TTT TGG CCT GGA TTC TGG AGA ACA GAT TTC CAG GAT 335336 TGT CAG CCA GAA GGC AGA CAG ATG CAG GCA CCT ACC AAG ACC TGA CCT 383384 CAG GAA GTG GCC CTG CCC TAC AGC CCA GTT GCT CAG CCA GGG CTG AAG 431432 GCC ATG GGG CCC CAG CAC CCT TGC TTC AGT GCC AGC CCC TGG AAG GAA 4791 Met Gly Pro Gln His Pro Cys Phe Ser Ala Ser Pro Trp Lys Glu 15480 CCT CAC AAC AGG GAT ACA GCA AGG ACA CTC CAG TTC CCC CAG TCC TGC 52716 Pro His Asn Arg Asp Thr Ala Arg Thr Leu Gln Phe Pro Gln Ser Cys 31528 CAT GGT GCT ACC CTG AGG GAC AGG GAT GGA GAC AGG GCA GCC AGG TTT 57532 His Gly Ala Thr Leu Arg Asp Arg Asp Gly Asp Arg Ala Ala Arg Phe 47576 GCC AGG ACC TGC ATA GCG GGC CCA AGA CTG CCC TTC CTC TTA AGT CAT 62348 Ala Arg Thr Cys Ile Ala Gly Pro Arg Leu Pro Phe Leu Leu Sar His 63624 GCC AAA GCC TCC CTG CCC AGT CTG AGA CAG TCG CTG GCA GGT GAC CAC 67164 Ala Lys Ala Ser Leu Pro Ser Leu Arg Gln Ser Leu Ala Gly Asp His 79672 GAC CTG CGT GGC CCT CCC GGC AGT TGT CAT GGT GGT TGT ACC CCA CCC 71980 Asp Leu Arg Gly Pro Pro Gly Ser Cys His Gly Gly Cys Thr Pro Pro 95720 CAT CCC CCT GAG GAG ACA TGG GCT CAG TCC CAT GCC TGG TGC CCA CAG 76796 His Pro Pro Glu Glu Thr Trp Ala Gln Ser His Ala Trp Cys Pro Gln 111768 CCA CAA AGA TGG CCA TGG GTC TCT AGC CTG ATA TTC GTG GCC TGG CAG 815112 Pro Gln Arg Trp Pro Trp Val Ser Ser Leu Ile Phe Val Ala Trp Gln 127 816 GGG TCA GCA CCC CTG AGG GCA TCC AAG CCA TGG TCA GAG GAA AGT GTT 863128 Gly Ser Ala Pro Leu Arg Ala Ser Lys Pro Trp Ser Glu Glu Ser Val 143864 GGC AGG CTC GGC ACA GCC AAA GAA GTC AGG ACC CAC GAG ACG GGG GAA 911144 Gly Arg Leu Gly Thr Ala Lys Glu Val Arg Thr His Glu Thr Gly Glu 159912 GCC TTC CAG AGC CTT CAC CTT CAC AGG GTC AAA CTT CCA GTA GAG GCG 959160 Ala Phe Gln Ser Leu His Leu His Arg Val Lys Leu Pro Val Glu Ala 175960 GCC GCG CAG GAA GTA GGC ATA GCC ATC AGC ATC CTG GAA GGC AGC GTC 1007176 Ala Ala Gln Glu Val Gly Ile Ala Ile Ser Ile Leu Glu Gly Ser Val 1911008 GAT CTC AGA GGG CAC CCC TCT CCA GTC AGT GGC TGC GGG GCA CGG GAC 1055192 Asp Leu Arg Gly His Pro Ser Pro Val Ser Gly Cys Gly Ala Arg Asp 2071056 TGT CTA CAC GCC GGG TGC TGG GGT GGA AAC GCC AGT AGT CCC TGC CTC 1103208 Cys Leu His Ala Gly Cys Trp Gly Gly Asn Ala Ser Ser Pro Cys Leu 2231104 GGA AGA AGT AGA TCT TGT TCT TCT CGG GAC CCC AGA CCA AGG CAG CAT 1151224 Gly Arg Ser Arg Ser Cys Ser Ser Arg Asp Pro Arg Pro Arg Gln His 2391152 GGA CCG GGA ACC TCA CCA GGC CCA GCT CGG TGA GGG GTG CGG GGC CCA 1199240 Gly Pro Gly Thr Ser Pro Gly Pro Ala Arg *** 2501200 GGA CTG GCT TTT CAC CGT CGT ACA CCC AGT ACT GAG CAC CTT GGA AGA 12471248 ACC AAA TGT GGC CCT GGG CAT CCT CGA AGG CAG CGT CCA CAG GGC TGG 12951296 GCA GTC CCT GCC AGT GGC GAG AGG CCA ATG CTG GGT AGC CGG GCT GCA 13431344 GCT GGC CCC CAC GGA GGC GCC ACA CAA AGC CCG CTT TGA AGA AAA AGA 13911392 GCT CGC CTC GGA TGG TGG AGA CCG CGT CAA AGG AGG CCT CAC AGG CAT 14391440 CTG GCG GGG CGT CTG GCT CCA GCG GTG CAA TCT CAT TGG TGT CTA TCC 14871488 CAG CCT GGG GGC CCA GGG CTG GGG TCC TGG AGG TGA CAG TGG GCC AGG 15351536 GCT GGC CAT ATA GGT GTT GAA CGC CCC TGC AGT CAT CTG GGC TGA GAC 15831584 TCA GTG GGT AGC GAA AGG TGT AGA AGC GGA CAT CAG GGC CTT GGC TGC 16311632 TGT TGT GTG CTG CAG CCC CAG CAC GTG GCC AAA TTC ATG GGC TGC CAC 16791680 CTG GAG CAG GTC TGT GCC CTG GTC ATC CCC GAT AGT CCA GGT CTC ATC 17271728 ATA GTC GAA GTG GAC ATC CCC TTC TCG GTG AGT CTT GGG GAA GAA GGC 17751776 ATG GGC CAG GAT GCC CCC AGG CCC ATC AAA CGG CAG GTC GTC CCC ATG 18231824 CCA GTA CCT GGC GAA GTC GAT CAT GAT GTC AGC ACG GCC CTC GTG CAC 18711872 CTC AGT AAA GGT GAG TGG CGT CAC ATC GCT CCA TAC CTT TAG GGC CTC 19191920 TGC CAT CGT CTG CCG CAC CTG CTC CTG CAC CAA CTG CCA TGG GAA CCG 19671968 AAG GAT CCT GTA GGT GAG GTC CGT CTT CTC CCA GCG CCC GCC AGA AAG 20152016 CAC GAA CCT CTT CTG TCG GTT GCG GGC ACT CAG CCC ATC AGA TGG GTC 20632064 GGG CAC GCC ACA GCG GGG AGG CCT GAG GCT GCT GGC AGG CCG GGG GGC 21112112 TTC CTG CGT GGC AGG GGC AGG TGC CGG GCT ACT GGG CAG GGC TGC ATG 21592160 CCA GGC TGT GGC CCC CTC CTC TCG GCA TGG AGG TGG TGG ACG TCC GGC 22072208 GGC AGA GCC CGG GCC AGC AGC GGC GGC GGC TGG AGC AGC AGC AGC AGC 22552256 ATC GGG GGC AGG AGG GCG CCG GCG GCG CGC TGC GGA GCC AGG CGG CCG 23032304 GAG CCA TCC GCC CCG GGG CTG GAA ATA TGA GGG GCT CAT GTC AGG GCA 23512352 CGT ACT GAA CAG AGC TGG ATT CTC TTT TCT TTT TTG TCC AGC ACA ACA 23992400 CCA TGG AGT CTC TGT TAG AGC GAG GTG AGA AGC TAG ATG ACT TGG TGT 24472448 CCA AAT CCG AGG TGC TGG GAA CAC AGT CTA AAG CCT TCT ATA AAA CTG 24952496 CCC GGA AAC AAA ACT CAT GCT GTG CCA TCA TGT GAT GCA GCC TGC CAG 25432544 AGG CCC AAT GCT GGA ATG GCA CCA TCA TTC ACA TCA GAA CTG CAG CCC 25912592 CTG GAA AAG AAG AGA CAG CCA TAG ACG AGG AGC CAG AGT GGG GGC AGA 26392640 CTG GCC ATT TTT ATT TTG AAG TTC CTG GGA GAA ATG GAT GGT GGA AGG 26872688 GTG GCG AAT GTT CAA ATT CAT ATG TGT GGT AGT GAT TCT TGG AAA GAA 27352736 TTT GAG GTC CCC AAA GGT GTA TTT TTG GGC AAA TGA AAC CAT AAA CTC 27832784 CGA CTG GCT TCT GTA GAT GCC AAA GGG CTC TTT TTC AGC TAA CCC TGG 28312832 GAA GGC TCT GTG GGA GGG AGG TCG GAG CCA GCT GTT TCT CGA TCT TTG 28792880 GTA TAT CTT TGG ATC TTA TTT GTA CAT TAA TGA TAT TAA CAC TCC AGT 29272928 GGG GGG TGG GGA GTC CCT GAT GCT AGG GCT GGG TGG GTG GAG TTT GAA 29752976 GAC TCT TGG GAA AGC CTC TCC TGG GGC CAC TGT TGG GGG TGG GAG TGA 30233024 GCC CAC CAC AGA GGC CAC AGG CAG GCC CCC ACT TCA GGC CCA AGG CCT 30713072 GGG GCG GGG GGA ACA GTC ACT GGG TCT CAG ATT CTG AGA CTG TTG TTT 31193120 AGC TTA CCT TTC TGC TAG GAT TGG CTT CCC GCA GAG GGC AGG GCC CAT 31673168 CCT AAG CAG CTT CCA AGT CCC ACA AAG GTG GCT TGT GGG AGG ATT TGG 32153216 AAG GAG CTG CAT TGT GGG CGG GGA GTG TGT GGG TTG GGT TCG TAC CAG 32633264 CAA GTA GAC TAG GAA CTG AGC CCA GGA AAG GGG GAT GTT TTC CTG GTG 33113312 TTT GGA TGG TCA GCT GGG AGT GTC CAT CAT CAG GGG AAG ATC AAA CAC 33593360 AGG TGC ACT CAG CTG CCC AGG GCC TCT GGG ACA CTT GCC TTG ACT TGC 34073408 AAC TTG CCT TGA ACA TCA CGA TCA AAG CAG CAG GTG CTG TGG TCT CTC 34553456 AAA ATT GAT TTT TAT TTG ACT CTG TGG CTC TAA GAC TGC CTT GAA CCG 35033504 CCT GAG GCC TAT GCA TCT GAA CAA GTG GGT CTC TCC CTT GAG CAC CAG 35513552 GAG TGG GTG CCA GCC GGC CCC GAG GAT TCC CAG CAC CCC ACC TAT GGT 35993600 CTT GCC AGC ATA GGC TTG CTA GTT CCT TCT TGG TCA GAG GTA GCT TGC 36473648 AGA GGG GGG AGG CCA AGG GTT TTG TCT AAG CTG TGC CCT GCC ACC TGG 36953696 CAG GAG GCC CAC TCA CTG CCC AAG TCA TGG CAA CAG GCT GGA GCA GCC 37433744 CAG GAG ATG GGC CTA AAA TGT TCT GGA TCC CTT GGG TCC TAG TGT TAT 37913792 GTT CCA GTC TGC CCA CCT GTG CTC AGG ATG CAG CCC TGG GAT CCA GCA 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GTT CTA TTT GAG AGG CGC 45114512 CTG TCT GGA TAA AGT TGT CTT GAA ATT TAA AAA AAA AAA AAA AAA A 45576. PP14296A:核苷酸序列(SEQ ID NO:16)长度:1944个碱基1 GGGCTGCAGA GCAGCTACTC TGAGGAATAT CTGAGGAACC TCCTTTGCAG GAAGAAGCTG61 GGAAGCAGCT ACCACACCTC CAAGCATGGC TTCCTGTCCT GGGCCCGCGT CTGCTTGAGA121 CACTGCATCT ACACTCCACA GCCAGGATTC CATCTCCCGC TGAAGCTGGT GCTTTCAGCT181 ACACTGACAG GGACGGCCAT TTACCAGGTG GCCCTGCTGC TGCTGGTGGG CGTGGTACCC241 ACTATCCAGA AGGTGAGGGC AGGGGTCACC ACGGATGTCT CCTACCTGCT GGCCGGCTTT301 GGAATCGTGC TCTCCGAGGA CAAGCAGGAG GTGGTGGAGC TGGTGAAGCA CCATCTGTGG361 GCTCTGGAAG TGTGCTACAT CTCAGCCTTG GTCTTGTCCT GCTTACTCAC CTTCCTGGTC421 CTGATGCGCT CACTGGTGAC ACACAGGACC AACCTTCGAG CTCTGCACCG AGGAGCTGCC481 CTGGATTTGA GTCCCTTGCA TCGGAGTCCC CATCCCTCCC GCCAAGCCAT ATTCTGTTGG541 ATGAGCTTCA GTGCCTACCA GACAGCCTTT ATCTGCCTTG GGCTCCTGGT GCAGCAGATC601 ATCTTCTTCC TGGGAACCAC GGCCCTGGCC TTCCTGGTGC TCATGCCTGT GCTCCATGGC 661 AGGAACCTCC TGCTCTTCCG TTCCCTGGAG TCCTCGTGGC CCTTCTGGCT GACTTTGGCC721 CTGGCTGTGA TCCTGCAGAA CATGGCAGCC CATTGGGTCT TCCTGGAGAC TCATGATGGA781 CACCCACAGC TGACCAACCG GCGAGTGCTC TATGCAGCCA CCTTTCTTCT CTTCCCCCTC841 AATGTGCTGG TGGGTGCCAT AGTGGCCACC TGGCGAGTGC TCCTCTCTGC CCTCTACAAC901 GCCATCCACC TTGGCCAGAT GGACCTCAGC CTGCTGCCAC CGAGAGCCGC CACTCTCGAC961 CCCGGCTTAC TACACGTACC GAAACTTCTT GAAGATTGAA GTCAGCCAGT CGCATCCAGC1021 CATGACAGCC TTCTGCTCCC TGCTCCTGCA AGCGCAGAGC CTCCTACCCA GGACCATGGC1081 AGCCCCCCAG GACAGCCTCA GACCAGGGGA GGAAGACGAA GGGATGCAGC TGCTACAGAC1141 AAAGGACTCC ATGGCCAAGG GAGCTAGCCC GGGGCCAGCC GCGGCAGGGC TCGCTGGGGT1201 CTGGCCTACA CGCTGCTGCA CAACCCAACC CTGCAGGTCT TCCGCAAGAC GGCCCTGTTG1261 GGTGCCAATG GTGCCCAGCC CTGAGGGCAG GGAAGGTCAA CCCACCTGCC CATCTGTGCT1321 GAGGCATGTT CCTGCCTACC ATCCTCCTCC CTCCCCGGCT CTCCTCCCAG CATCACACCA1381 GCCATGCAGC CAGCAGGTCC TCCGGATCAC TGTGGTTGGG TGGAGGTCTG TCTGCACTGG1441 GAGCCTCAGG AGGGCTCTGC TCCACCCACT TGGCTATGGG AGAGCCAGCA GGGGTTCTGG1501 AGAAAGAAAC TGGTGGGTTA GGGCCTTGGT CCAGGAGCCA GTTGAGCCAG GGCAGCCACA1561 TCCAGGCGTC TCCCTACCCT GGCTCTGCCA TCAGCCTTGA AGGGCCTCGA TGAAGCCTTC1621 TCTGGAACCA CTCCAGCCCA GCTCCACCTC AGCCTTGGCC TTCACGCTGT GGAAGCAGCC1681 AAGGCACTTC CTCACCCCCT CAGCGCCACG GACCTCTCTG GGGAGTGGCC GGAAAGCTCC1741 CGGGCCTCTG GCCTGCAGGG CAGCCCAAGT CATGACTCAG ACCAGGTCCC ACACTGAGCT1801 GCCCACACTC GAGAGCCAGA TATTTTTGTA GTTTTTATGC CTTTGGCTAT TATGAAAAAG1861 GTTAGTGTGT TCCCTGCAAT AAACTTGTTC CTGAGAAAAA AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA1921 AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA AAACB:核苷酸序列(SEQ ID NO:17)长度:192个氨基酸
1 MTAFCSLLLQ AQSLLPRTMA APQDSLRPGE EDEGMQLLQT KDSMAKGASP GPAAAGLAGV
61 WPTRCCTTQP CRSSARRPCW VPMVPSPEGR EGQPTCPSVL RHVPAYHPPP SPALLPASHQ
121 PCSQQVLRIT VVGWRSVCTG SLRRALLHPL GYGRASRGSG ERNWWVRALV QEPVEPGQPH
181 PGVSLPWLCH QPC.核苷酸及氨基酸组合序列(SEQ ID NO:18)克隆号和蛋白名称:PP14296起始编码子:1022 ATG 终止编码子:1598 TGA 蛋白质分子量:20726.801 G GGC TGC AGA GCA GCT ACT CTG AGG AAT ATC TGA GGA ACC TCC TTT 4647 GCA GGA AGA AGC TGG GAA GCA GCT ACC ACA CCT CCA AGC ATG GCT TCC 9495 TGT CCT GGG CCC GCG TCT GCT TGA GAC ACT GCA TCT ACA CTC CAC AGC 142143 CAG GAT TCC ATC TCC CGC TGA AGC TGG TGC TTT CAG CTA CAC TGA CAG 190191 GGA CGG CCA TTT ACC AGG TGG CCC TGC TGC TGC TGG TGG GCG TGG TAC 238239 CCA CTA TCC AGA AGG TGA GGG CAG GGG TCA CCA CGG ATG TCT CCT ACC 286287 TGC TGG CCG GCT TTG GAA TCG TGC TCT CCG AGG ACA AGC AGG AGG TGG 334335 TGG AGC TGG TGA AGC ACC ATC TGT GGG CTC TGG AAG TGT GCT ACA TCT 382383 CAG CCC TGG TCT TGT CCT GCT TAC TCA CCT TCC TGG TCC TGA TGC GCT 430431 CAC TGG TGA CAC ACA GGA CCA ACC TTC GAG CTC TGC ACC GAG GAG CTG 478479 CCC TGG ATT TGA GTC CCT TGC ATC GGA GTC CCC ATC CCT CCC GCC AAG 526527 CCA TAT TCT GTT GGA TGA GCT TCA GTG CCT ACC AGA CAG CCT TTA TCT 574575 GCC TTG GGC TCC TGG TGC AGC AGA TCA TCT TCT TCC TGG GAA CCA CGG 622623 CCC TGG CCT TCC TGG TGC TCA TGC CTG TGC TCC ATG GCA GGA ACC TCC 670671 TGC TCT TCC GTT CCC TGG AGT CCT CGT GGC CCT TCT GGC TGA CTT TGG 718719 CCC TGG CTG TGA TCC TGC AGA ACA TGG CAG CCC ATT GGG TCT TCC TGG 766767 AGA CTC ATG ATG GAC ACC CAC AGC TGA CCA ACC GGC GAG TGC TCT ATG 814815 CAG CCA CCT TTC TTC TCT TCC CCC TCA ATG TGC TGG TGG GTG CCA TAG 862863 TGG CCA CCT GGC GAG TGC TCC TCT CTG CCC TCT ACA ACG CCA TCC ACC 910911 TTG GCC AGA TGG ACC TCA GCC TGC TGC CAC CGA GAG CCG CCA CTC TCG 958 959 ACC CCG GCT TAC TAC ACG TAC CGA AAC TTC TTG AAG ATT GAA GTC AGC 10061007 CAG TCG CAT CCA GCC ATG ACA GCC TTC TGC TCC CTG CTC CTG CAA GCG 10541 Met Thr Ala Phe Cys Ser Leu Leu Leu Gln Ala 111055 CAG AGC CTC CTA CCC AGG ACC ATG GCA GCC CCC CAG GAC AGC CTC AGA 110212 Gln Ser Leu Leu Pro Arg Thr Met Ala Ala Pro Gln Asp Ser Leu Arg 271103 CCA GGG GAG GAA GAC GAA GGG ATG CAG CTG CTA CAG ACA AAG GAC TCC 115028 Pro Gly Glu Glu Asp Glu Gly Met Gln Leu Leu Gln Thr Lys Asp Ser 431151 ATG GCC AAG GGA GCT AGC CCG GGG CCA GCC GCG GCA GGG CTC GCT GGG 119844 Met Ala Lys Gly Ala Ser Pro Gly Pro Ala Ala Ala Gly Leu Ala Gly 591199 GTC TGG CCT ACA CGC TGC TGC ACA ACC CAA CCC TGC AGG TCT TCC GCA 124660 Val Trp Pro Thr Arg Cys Cys Thr Thr Gln Pro Cys Arg Ser Ser Ala 751247 AGA CGG CCC TGT TGG GTG CCA ATG GTG CCC AGC CCT GAG GGC AGG GAA 129476 Arg Arg Pro Cys Trp Val Pro Met Val Pro Ser Pro Glu Gly Arg Glu 911295 GGT CAA CCC ACC TGC CCA TCT GTG CTG AGG CAT GTT CCT GCC TAC CAT 134292 Gly Gln Pro Thr Cys Pro Ser Val Leu Arg His Val Pro Ala Tyr His 1071343 CCT CCT CCC TCC CCG GCT CTC CTC CCA GCA TCA CAC CAG CCA TGC AGC 1390108 Pro Pro Pro Ser Pro Ala Leu Leu Pro Ala Ser His Gln Pro Cys Ser 1231391 CAG CAG GTC CTC CGG ATC ACT GTG GTT GGG TGG AGG TCT GTC TGC ACT 1438124 Gln Gln Val Leu Arg Ile Thr Val Val Gly Trp Arg Ser Val Cys Thr 1391439 GGG AGC CTC AGG AGG GCT CTG CTC CAC CCA CTT GGC TAT GGG AGA GCC 1486140 Gly Ser Leu Arg Arg Ala Leu Leu His Pro Leu Gly Tyr Gly Arg Ala 1551487 AGC AGG GGT TCT GGA GAA AGA AAC TGG TGG GTT AGG GCC TTG GTC CAG 1534156 Ser Arg Gly Ser Gly Glu Arg Asn Trp Trp Val Arg Ala Leu Val Gln 1711535 GAG CCA GTT GAG CCA GGG CAG CCA CAT CCA GGC GTC TCC CTA CCC TGG 1582172 Glu Pro Val Glu Pro Gly Gln Pro His Pro Gly Val Ser Leu Pro Trp 1871583 CTC TGC CAT CAG CCT TGA AGG GCC TCG ATG AAG CCT TCT CTG GAA CCA 1630188 Leu Cys His Gln Pro *** 1931631 CTC CAG CCC AGC TCC ACC TCA GCC TTG GCC TTC ACG CTG TGG AAG CAG 16781679 CCA AGG CAC TTC CTC ACC CCC TCA GCG CCA CGG ACC TCT CTG GGG AGT 17261727 GGC CGG AAA GCT CCC GGG CCT CTG GCC TGC AGG GCA GCC CAA GTC ATG 17741775 ACT CAG ACC AGG TCC CAC ACT GAG CTG CCC ACA CTC GAG AGC CAG ATA 18221823 TTT TTG TAG TTT TTA TGC CTT TGG CTA TTA TGA AAA AGG TTA GTG TGT 18701871 TCC CTG CAA TAA ACT TGT TCC TGA GAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA 19181919 AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AC 19447. FP852A:核苷酸序列(SEQ ID NO:19)长度:1188个碱基1 GAGCACATCT CCACTGTCCC TGGCAGGATT GTGGGAGGCT TCACAACCCC TGCTTTCCTG61 ACTTCCTCTT CTGCCCAACA CTGGGTGCCC CTTCCCAGTT TCCCAGCAGG GGCTTCATGG121 GCCACCGTCA GTGGGTCTGG GCCTGCCAGA GTCGTCTTGC TCTTCCTCTT GCTTCTAGGC181 AACCACACTT GGCAAGTTAA ATGTCCCAAG CACCTTGTCT CCCTTCCCAA GAACAAACCA241 TTTCTGTGCA CATCCTTGGA GGCGAGATGA GCTCCTTGCA GAGGGCCAGA GTAAGTGCAA301 GTCATGGAGT GCAGGCAGAG GGGTCCATGG CTTCCCCAGC CCAGGGAGGG TATCAGTATC361 ATTCATTCTC TCTCCCCTCA CTGGTATGGG TTCAGAGCAA TGCCTAGGGC CCCTCTCTGC421 TCCCCTGCCT AGTGGGGTGG TAGTGGCTAC CTCTCAGCCC CAATAGTCCC TGCTCCTCTT481 AGAATCTTCA CCAAGTGGCA GGCCACCTCT GGGCAGGACC ACCTGCGTCT GGCACCCAGG541 AGGTGAGGCA GACACCATGG TTAGGTGATA GGGTCTGAAC CCAGTTGGGG AGACAGAGGG 601 GTTCAGACTT GGGAAGAATC TGTCAGTGTG CATGGAGTGA GGTGTGTGTG TGTGGATGGA661 TGTGCACGTG TGCATGCTTT TTTTCTTTTT GCCGTGAGGA CAGTTGAATT TGGGGCATTT721 TTCTACAAGA AGCAGTCAGC CTTCTCTCCC CCATAAGGAC TGGCTGTAAC CTTAAGCCCA781 TCAAAGTTAC TTCCAGCCTG GAGAGAACCT CACCAAACAG CTGGTGTGGC CTGAGGGTGG841 CCATGGTGGG AAATGGGCAT GAGAATAAAT ACCTCCCCAA ATTCAATCTG AGCCCAGCAG901 GAGAGGATGG TAGGGTTGCC AGGGCTCAGA AGTGCAAGCT GATTACTCAC CCCACCCTGC961 CTCGCCGCAC CTTTCCTTTG TTTCCTTGGG TGAATGCAGG AGCAGCAGTG GCTGCCCTTC1021 CCACCTGGAC AGTGGTGTGT GTAGAAAGCC AGCTGGATGT TTGTGGTGGG GCCTCATGGT1081 GCCTAGGAGG AGATAAAGAT GAGGAGGTTT TTCCTTATTG TATAAATGAA TATTTGTATG1141 ATTAAATTAA CACACACACC AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA AAAAAAAAB:核苷酸序列(SEQ ID NO:20)长度:100个氨基酸
1 MVGNGHENKY LPKFNLSPAG EDGRVARAQK CKLITHPTLP RRTFPLFPWV NAGAAVAALP
61 TWTVVCVESQ LDVCGGASWC LGGDKDEEVF PYCINEYLYDC.核苷酸及氨基酸组合序列(SEQ ID NO:21)克隆号和蛋白名称:FP852起始编码子:843ATG 终止编码子:1143 TAA 蛋白质分子量:11015.031 GA GCA CAT CTC CAC TGT CCC TGG CAG GAT TGT GGG AGG CTT CAC AAC 4748 CCC TGC TTT CCT GAC TTC CTC TTC TGC CCA ACA CTG GGT GCC CCT TCC 9596 CAG TTT CCC AGC AGG GGC TTC ATG GGC CAC CGT CAG TGG GTC TGG GCC 143144 TGC CAG AGT CGT CTT GCT CTT CCT CTT GCT TCT AGG CAA CCA CAC TTG 191192 GCA AGT TAA ATG TCC CAA GCA CCT TGT CTC CCT TCC CAA GAA CAA ACC 239240 ATT TCT GTG CAC ATC CTT GGA GGC GAG ATG AGC TCC TTG CAG AGG GCC 287288 AGA GTA AGT GCA AGT CAT GGA GTG CAG GCA GAG GGG TCC ATG GCT TCC 335336 CCA GCC CAG GGA GGG TAT CAG TAT CAT TCA TTC TCT CTC CCC TCA CTG 383384 GTA TGG GTT CAG AGC AAT GCC TAG GGC CCC TCT CTG CTC CCC TGC CTA 431432 GTG GGG TGG TAG TGG CTA CCT CTC AGC CCC AAT AGT CCC TGC TCC TCT 479480 TAG AAT CTT CAC CAA GTG GCA GGC CAC CTC TGG GCA GGA CCA CCT GCG 527528 TCT GGC ACC CAG GAG GTG AGG CAG ACA CCA TGG TTA GGT GAT AGG GTC 575576 TGA ACC CAG TTG GGG 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1 MLKLAPWCLS FVTTPMFLVA MRKELASRME RWSGKQPICI KACREPKISD LVRRRVLPMQ 61 VQSRETPLHQ LYSAAFSKQK LQSAPTKKPA LPFGDLPMGY QHLHTQLQYE CISPFYRRLG121 SSRRTCLRTG KWSGRAPSCI PICGKIENIT APKTQGLRWP WQAAIYRRTS GVHDGSLHKG181 AWFLVCSGAL VNERTVVVAA HCVTDLGKVT MIKTADLKVV LGKFYRDDDR DEKTIQSLQI241 SAIILHPNYD PILLDADIAI LKLLDKARIS TRVQPICLAA SRDLSTSFQE SHITVAGWNV301 LADVRSPGFK NDTLRSGVVS VVDSLLCEEQ HEDHGIPVSV TDNMFCASWE PTAPSDICTA361 ETGGIAAVSF PGRASPEPRW HLMGLVSWSY DKTCSHRLST AFTKVLPFKD WIERNMKC.核苷酸及氨基酸组合序列(SEQ ID NO:24)克隆号和蛋白名称:FP938起始编码子:845 ATG 终止编码子:2096 TGA 蛋白质分子量:46700.661 G CAA GAG AGT ACA CAG TCA TTA ATG AAG CCT GCC CTG GAG CAG AGT 4647 GGA ATA TCA TGT GTC GGG AGT GCT GTG AAT ATG ATC AGA TTG AGT GCG 9495 TCT GCC CCG GAA AGA GGG AAG TCG TGG GTT ATA CCA TCC CTT GCT GCA 142143 GGA ATG AGG AGA ATG AGT GTG ACT CCT GCC TGA TCC ACC CAG GTT GTA 190191 CCA TCT TTG AAA ACT GCA AGA GCT GCC GAA ATG GCT CAT GGG GGG GTA 238239 CCT TGG ATG ACT TCT ATG TGA AGG GGT TCT ACT GTG CAG AGT GCC GAG 286287 CAG GCT GGT ACG 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CAGTACGCGG AGAAGAAGGC CAAGAAGCCT GCACTGGTGG CCAAGTCCTC CATCCTGCTG1741 GATGTCAAGC CTTGGGATGA TGAGACGGAC ATGGCTCAGC TGGAGGCCTG TGTGCGCTCT1801 ATCCAGCTGG ACGGGCTGGT CTGGGGGGCT TCCAAGCTGG TGCCCGTGGG CTACGGTATC1861 CGGAAGCTAC AGATTCAGTG TGTGGTGGGA GGACGACAAG GTGGGGACAG ACTTGCTGGA1921 GGAGGAGATC ACCAAGTTTG AGGAGCACGT GCAGAGTGTC GATATCGCAG CTTTCAACAA1981 GATCTGAAGC CTGAGTGTGT GTACGTGCGC GCGTGCGTGA GGCCCTGCCA CGATTAAAGA2041 CTGAGACCGG CAAAAAAAAA AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA2101 AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA AAAAAAAAAT TCB:核苷酸序列(SEQ ID NO:26) 长度:632个氨基酸1 MRSGKASCTL ETVWEDKHKY EEAERRFYEH EATQAAASAQ QLPAEGPAMN GPGQDDPEDA61 DEAEAPDGGS RRDPRKSQDS RKPLQKKRKR SPKSGLGPAD LALLGLSAER VWLDKSLFDQ121 AESSYRQKLA DVAAQAAWPP ALAPWGLCTH GNQVACHHVT WGIWVNKSSF DQAERAFVEW181 SQALLLAPEG SRRQGTPNTG QQVAVPDLAH QPSPPVNGQP PLGSLQALVR EVWLEKPRYD241 AAERGFYEAL FDGHPPGKVR LQERAGLAEG ARRGRRDRRG RNILGNKRAG LRRADGEAPS301 ALPYCYFLQK DAEAPWLSKP AYDSAECRHH AAEALRVAWC LEAASLSHRP GPRSGLSVSS361 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1 MVTSPSHHPS HPSRRLVPFA QFIAAQSLPD GFLVLGSSLF LFLKGNALSV CSRESPGSKK
61 DDRSVAAVFL GHESSGDTTT RPARGLYDNL SLPSCLPPAL PECPEEMGAE SLGLLKPPVP
121 SGSCIALWC.核苷酸及氨基酸组合序列(SEQ ID NO:30)克隆号和蛋白名称:FP2025起始编码子:1209 ATG 终止编码子:1593 TAA 蛋白质分子量:1351l.681 GG TGG ATT TTT GCT CTA TTT TTA ACA GAA GCA TAG GAC CGT AAA GAT 4748 GTG TCA TGA AAC CCC AAG TGT CCC AAA GCC TCG GGG CCC ACA GGA GCA 9596 TCG GGA AGT GAG GCA GTG CGC TCA TCC TGA CGG AGC AGC GTC GTG TCT 143144 GTA GCG GGG AGG GAG GCT GGC CCA GGG GCC CGG CAT GTT CCT GAA GCG 191192 TTC ACA GGG TTT TGA GAC CTT CAC AGC CCC ATC AAT GTG CTG GCC CAT 239240 GTG GCA TGG ATG GGG TAG TCT CTC TGG GCA AAT GAG AGG CCC AAG GAG 287288 AGA CCA AGC CAC CAA AGG GCT CAA GAC AAA GTC ACT GTT CCT TCC CCA 335336 GGA AGG TGG GGC AGA GGC AAG ATC TAT CGG ACA TTT CAA AGT TTC AGG 383384 CAG GAG CTC CTA GAG GAC TTG GTG GCT TTG CCA GCC CAG GGG CCT CTG 431432 AAG GCA GCC CCC AGA CCC TTG TAG CAG GGC TGT CCA TCC CCA GGG AGC 479480 AGC TGG CCA CCT CCT CCT GCC TCG AAG AAG TGA CCA GGG GCC AAT CTG 527528 CTC CCA CCT CCC GTC CAG GAC AGG GTG AAC ATT TGA CCT CAC TGT CCC 575 576 CTG CCC GGC TGA GTC CCT GAT GTC TGA CTG TGC CAC CCA GCA GCT GCC 623624 AGG GTC TCT CAC CAT GTG GAC CCT GCC CTA GCT GCA GCC TGC ACC TCC 671672 TGT CAA AAG TGC AGA CTC GCA GGT TCC ACC CCA AAC CAC AGA ATG GGA 719720 ATG CCT GGG AGC CCA CCC CTG CTG TGG GCT CTC AGC GGG GCT TTG GGG 767768 GTG ATC ATC CCA AAC ACA TTT CTC TGG ATG ACG CAG GCA GCA TTG GAG 815816 CAT GAG CCG TGG GGA GGA CAG TCG TGA GCA CAC CAG CTG TGA GGC CCG 863864 GTT TCC ATG CCT AAC CCC CGG ACT CTA CCC CTG GGT CCT GGG GCG TAC 911912 CGC TAA AAG GGT CCT GGC CTT TGG GAC TGA TCA TTT TGA GGC CCT TTT 959960 ACA AAG AAA TGG GGG AGA AGA AAT AGC TGG GCT TCC CTC AAA TCT TTT 10071008 TAA TGT GCA GTA TTT TTT TGT TCA AGA CCA GCT CTT GTT TTA TGA GGC 10551056 TCC TTC CAT TAC CTT TCT TGG GCT GAA TGC AAA ACA AAT ACA GCC ACA 11031104 TTC AAG TCT TCC AAG GAA GTA GAA AAC TCT TTG AAT GGT ATC TTA AGA 11511152 TCC TTA AGC TCT TGC TGA ACT TCC TTT TTC AAT GAA AAG AAG GAC CAT 11991200 CAT CCT AGG ATG GTC ACC AGC CCA AGC CAC CAC CCC AGC CAC CCA TCC 12471 Met Val Thr Ser Pro Ser His His Pro Ser His Pro Ser 131248 AGG AGG TTG GTT CCT TTT GCC CAG TTC ATA GCA GCT CAG TCC TTA CCA 129514 Arg Arg Leu Val Pro Phe Ala Gln Phe Ile Ala Ala Gln Ser Leu Pro 291296 GAT GGA TTC TTG GTG TTG GGA AGC AGC CTC TTT TTA TTC CTG AAA GGC 134330 Asp Gly Phe Leu Val Leu Gly Ser Ser Leu Phe Leu Phe Leu Lys Gly 451344 AAT GCC CTG TCC GTT TGC AGT AGA GAA TCC CCA GGG AGC AAG AAA GAT 139146 Asn Ala Leu Ser Val Cys Ser Arg Glu Ser Pro Gly Ser Lys Lys Asp 611392 GAC AGA AGT GTG GCT GCC GTG TTT CTA GGT CAT GAG AGC TCT GGC GAT 143962 Asp Arg Ser Val Ala Ala Val Phe Leu Gly His Glu Ser Ser Gly Asp 771440 ACT ACC ACA AGG CCT GCA CGT GGA CTC TAT GAT AAC TTG AGT CTT CCA 148778 Thr Thr Thr Arg Pro Ala Arg Gly Leu Tyr Asp Asn Leu Ser Leu Pro 931488 TCA TGT TTG CCA CCA GCC CTC CCT GAG TGC CCA GAG GAG ATG GGG GCA 153594 Ser Cys Leu Pro Pro Ala Leu Pro Glu Cys Pro Glu Glu Met Gly Ala 1091536 GAG TCA CTT GGC CTA CTA AAG CCT CCT GTT CCT TCT GGC TCA TGC ATT 1583110 Glu Ser Leu Gly Leu Leu Lys Pro Pro Val Pro Ser Gly Ser Cys Ile 1251584 GCT TTG TGG TAA GAG AAA GGA AGT CTT TAG AAC AGC GCC TGG GAA TCA 1631126 Ala Leu Trp *** 1291632 GCC CTT CTC CCT ACT GAG TCC CCA GTC CTG TCC CTT CCC TGA CTC GCT 16791680 CCT CCT CCA ACC TTG GTT TCT ATA GCT GCA TTT TTT TTT TTT TTT TTT 17271728 TTT TGA GAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AA 175611. 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1 MGNRTCTRIL KAYTIYRPDE GYCQAQAPVA AVLLMHMPAE QAFWCLVQIC DKYLPGYYSA
61 GLEAIQLDGE IFFALLRRAS PLAHRHLRRQ RIDPVLYMTE WFMCIFARTL PWASVLRVWD
121 MFFCEGVKII FRVALVLLRH TLGSVEKLRS CQGMYETMEQ LRNLPQQCMQ EDFLVHEVTN
181 LPVTEALIER ENAAQLKKWR ETRGELQYRP SRRLHGSRAI HEERRRQQPP LGPLLQPPQP
241 PWPQEPRLPG SWRGPSPPPP VRRASAGPAP GPVVTAEGLH PSLPSPTGNS TPLGSSKETR
301 KQEKERQKQE KERQKQEKER EKERQKQEKE REKQEKEREK QEKERQKQEK KAQGRKLSLR
361 RKADGPPGPH DGGDRPSAEA RQDAYFC.核苷酸及氨基酸组合序列(SEQ ID NO:33)克隆号和蛋白名称:FP2461起始编码子:431 ATG 终止编码子:1589 TGA 蛋白质分子量:44755.131 G TGG AGT CCT TGG CGG ATG ATG TGA GCT CCA TGG GCT CAG ATT CAG 4647 AGA TAA ACG GGC TGG CCC TGC GCA AGA CGG ACA AGT ATG GCT TCC TTG 9495 GGG GCA GCC AGT ACT CGG GCA GCC TAG AGA GCT CCA TTC CCG TGG ACG 142143 TGG CTC GGC AGC GGG AGC TCA AAT GGC TGG ACA TGT TCA GTA ACT GGG 190191 ATA AGT GGC TGT CAC GGC GAC TCC AGA AGG TGA AGC TGC GCT GCC GGA 238239 AGG GGA TCC CCT CCT CTC TCA GAG CCA AAG CCT GGC AGT ACC TGT CTA 286287 ATA GCA AGG AAC TTC TGG AGC AGA ACC CAG GAA AGT TTG AGG AGC TGG 334335 AAC GGG CTC CTG GGG ACC CCA AGT GGC TGG ATG TGA TTG AGA AGG ACC 382383 TGC ACC GCC AGT TCC CTT TCC ACG AGA TGT TTG CTG CTC GAG GGG GGC 430 431 ATG GGC AAC AGG ACC TGT ACC CGA ATC CTG AAG GCC TAC ACC ATC TAC 4781 Met Gly Asn Arg Thr Cys Thr Arg Ile Leu Lys Ala Tyr Thr Ile Tyr 16479 CGG CCT GAC GAG GGT TAC TGC CAG GCC CAG GCC CCC GTG GCT GCG GTC 52617 Arg Pro Asp Glu Gly Tyr Cys Gln Ala Gln Ala Pro Val Ala Ala Val 32527 CTG CTC ATG CAC ATG CCT GCG GAG CAA GCC TTT TGG TGC CTG GTG CAG 57433 Leu Leu Met His Met Pro Ala Glu Gln Ala Phe Trp Cys Leu Val Gln 48575 ATC TGC GAC AAG TAC CTC CCA GGT TAC TAC AGT GCA GGG CTG GAG GCC 62249 Ile Cys Asp Lys Tyr Leu Pro Gly Tyr Tyr Ser Ala Gly Leu Glu Ala 64623 ATT CAG CTG GAC GGG GAG ATC TTT TTT GCA CTC CTG CGC CGG GCC TCC 67065 Ile Gln Leu Asp Gly Glu Ile Phe Phe Ala Leu Leu Arg Arg Ala Ser 80671 CCG CTG GCG CAT CGC CAC CTG CGG CGG CAG CGC ATT GAC CCT GTG CTC 71881 Pro Leu Ala His Arg His Leu Arg Arg Gln Arg Ile Asp Pro Val Leu 96719 TAC ATG ACG GAG TGG TTC ATG TGC ATC TTC GCC CGC ACC CTG CCC TGG 76697 Tyr Met Thr Glu Trp Phe Met Cys Ile Phe Ala Arg Thr Leu Pro Trp 112767 GCG TCG GTG CTG CGT GTC TGG GAC ATG TTT TTC TGT GAA GGC GTT AAG 814113 Ala Ser Val Leu Arg Val Trp Asp Met Phe Phe Cys Glu Gly Val Lys 128815 ATC ATC TTC CGG GTG GCC CTG GTC CTG CTG CGC CAC ACG CTG GGC TCA 862129 Ile Ile Phe Arg Val Ala Leu Val Leu Leu Arg His Thr Leu Gly Ser 144863 GTG GAG AAG CTG CGC TCC TGC CAA GGC ATG TAT GAG ACC ATG GAG CAG 910145 Val Glu Lys Leu Arg Ser Cys Gln Gly Met Tyr Glu Thr Met Glu Gln 160911 CTG CGT AAC CTG CCC CAG CAG TGC ATG CAG GAA GAC TTC CTG GTG CAT 958161 Leu Arg Asn Leu Pro Gln Gln Cys Met Gln Glu Asp Phe Leu Val His 176959 GAG GTG ACC AAT CTG CCG GTG ACA GAA GCA CTG ATT GAG CGG GAG AAT 1006177 Glu Val Thr Asn Leu Pro Val Thr Glu Ala Leu Ile Glu Arg Glu Asn 1921007 GCA GCC CAG CTC AAG AAG TGG CGG GAA ACG CGG GGG GAG CTG CAG TAT 1054193 Ala Ala Gln Leu Lys Lys Trp Arg Glu Thr Arg Gly Glu Leu Gln Tyr 2081055 CGG CCC TCA CGG CGA CTG CAT GGG TCC CGG GCC ATC CAC GAG GAG CGC 1102209 Arg Pro Ser Arg Arg Leu His Gly Ser Arg Ala Ile His Glu Glu Arg 2241103 CGG CGG CAA CAG CCA CCC CTG GGC CCC CTC CTC CAG CCT CCT CAG CCT 1150225 Arg Arg Gln Gln Pro Pro Leu Gly Pro Leu Leu Gln Pro Pro Gln Pro 2401151 CCC TGG CCT CAA GAG CCG AGG CTC CCG GGC AGC TGG AGG GGC CCG TCC 1198241 Pro Trp Pro Gln Glu Pro Arg Leu Pro Gly Ser Trp Arg Gly Pro Ser 2561199 CCG CCG CCC CCC GTC CGC AGA GCC AGT GCT GGG CCT GCC CCA GGG CCT 1246257 Pro Pro Pro Pro Val Arg Arg Ala Ser Ala Gly Pro Ala Pro Gly Pro 2721247 GTG GTC ACT GCT GAG GGA CTG CAT CCA TCC CTT CCC TCA CCC ACT GGC 1294273 Val Val Thr Ala Glu Gly Leu His Pro Ser Leu Pro Ser Pro Thr Gly 2881295 AAT AGC ACC CCC TTG GGT TCC AGC AAG GAG ACC CGG AAG CAG GAG AAG 1342289 Asn Ser Thr Pro Leu Gly Ser Ser Lys Glu Thr Arg Lys Gln Glu Lys 3041343 GAG CGG CAG AAA CAG GAG AAG GAG CGG CAG AAA CAG GAG AAG GAG CGG 1390305 Glu Arg Gln Lys Gln Glu Lys Glu Arg Gln Lys Gln Glu Lys Glu Arg 3201391 GAG AAG GAG CGG CAG AAG CAG GAG AAA GAG CGA GAG AAG CAG GAA AAG 1438321 Glu Lys Glu Arg Gln Lys Gln Glu Lys Glu Arg Glu Lys Gln Glu Lys 3361439 GAG CGA GAG AAG CAG GAG AAG GAG CGG CAG AAG CAG GAG AAG AAG GCT 1486337 Glu Arg Glu Lys Gln Glu Lys Glu Arg Gln Lys Gln Glu Lys Lys Ala 3521487 CAA GGC CGG AAG CTT TCG CTG CGT CGA AAG GCA GAT GGG CCC CCA GGC 1534 353 Gln Gly Arg Lys Leu Ser Leu Arg Arg Lys Ala Asp Gly Pro Pro Gly 3681535 CCC CAT GAT GGT GGG GAC AGG CCC TCA GCC GAG GCC CGG CAG GAC GCT 1582369 Pro His Asp Gly Gly Asp Arg Pro Ser Ala Glu Ala Arg Gln Asp Ala 3841583 TAC TTC TGA CCT CTG CCC TGG GGC TGG ACT GCA TGG CCC CCC TCT TTC 1630385 Tyr Phe *** 3871631 CCT CAG CCA AGA ACA GGC CTG GCC CAA GGT GCC ACC CTC TAG CAC CTT 16781679 GTC AGG CTG TCC CTT GCT GGG GAA AGT GGC TTG GTT CCC CAT CTC CTC 17261727 GCC AGC TGC TGA TCC CTA CAC GGG CAG GAC AGA TGG GCA GCT GCA AAT 17741775 GAG TCT GGA GCC TCT CAT CTC CCA TGA GGC TCA GCT GGG GTC TCT GTC 18221823 GCT CCT GCC CCA GTT CCC TCT GGG TCC CCT CCT AGG TGC TGT CCT GAA 18701871 TGG CCC GTT GTC ATC CCA GGG GTG ACT CCT GGT GAT GGG AGT CAG CAG 19181919 TTT CAG ATT CTT ACA CTC CAT AGC TCC CCT TAC CAT GAG GTG GAG CTG 19661967 GCT TCC TTT TCC CTG TCT TCA GCC CTC CCC TGT CTC CCC CAC TTC CTG 20142015 GCC AGG GCT CTC ATT CTG GAC CTG TGT TGT AAT TGT GTA CAG AGG ATG 20622063 GCG TTG GCC TGG GGT GGG GGT GCT CGC TTT GTC TTC TGT CCT TTG GTT 21102111 CTC CTT CCA TAA TGC TCC TGT ACC CAG TTT ATT TAA GGG GAC ATG CAC 21582159 TGG AAT AGG AAA TGT CCC CCA TCT CCC TTC CTG CAC CCT GCT GTG CTC 22062207 CCT CCA AAC CCA CCT TGC TCT GTG TTC TCA GGC CCC CCT GCT TTT GTC 22542255 TCA CCA GGA CCC ATA CCT TTC ACC TTG TTC CCT TCC ACC CCT CCA GTT 23022303 AGT CCC TAT CTG GGT AAG GGT CTT CCC TTG AGC TCC AGG GGG TGG AAC 23502351 CCA ATG TTT ACA TTC TCT TCT GTC TCT GCC CCC ACC CCA TGC AGC GCT 23982399 TTG AGG AAT TGG AAA AGA ACC TGC TGT TGT ACC TGG AAA AAA AAA AAA 24462447 AAA AAA 245212.FP3059A:核苷酸序列(SEQ ID NO:34)长度:1951个碱基1 GACTCATTTC AGCATTAACT CAAAAGTTCA ATGTCTCAAC TGAGTCAAGG CAAGTCCCTT61 CCATCTACAA GCCTGTAAAA TTAAAAAAGT TATTTACTTC TGAGATACAT TGGGGATATG121 GGCATTGGGT AAACATTCAT GTTCCAAAAG GGAGAAATTG GCCAAAAGAA AGGGACTACA181 GGCTGCATAC AAGTCCAAAA CCCAGCAGGG CAGTCATTAA ATCTTAAAGC TCTAAGGTAG241 TCTCCTTTGA CTCCATGTCC CATTTCCAGG GCACGCTGGT GCGAGGGGTG TGCCACCCCA301 GGCCTTGGGC CACTCTGCCC CTGTATCTCT GCAGGGTGCA GCTCTTGTGG CTGCTGTCAC361 AGGTTGTTGA GTGCCTGCTG CTTTTCTATG TGCAGAGTGC AAGCTCCCAG TGGATCTACC421 ATCCTGGGGC CTGGAGGACA GTGGCCCCCT TCCTTCCCAT GGGTCCACTA GGAAGTGCCC481 CACTGGAGAC TCTGTGTGGG GCCTCCAGCC CACATTCCCC CCCTGCACTG CCTTAGTAGA541 GGTTCTCTGT GAGGTAACTG CCCCTGTGAT AGGCTTCCTC CTGGGCACCC AGGCTTTTCC601 ATACATCCTC TGAAATCTAG GTGGAGGCTC CTAAGCCTCC TTCACTTTTA CATTCTGTGT661 GGCTGCAGGT TTAACACTAC ACGGAAGCTG CCAAGGCTTA TGGCTTGCAC TCTCTGGAGC721 TGTAATGGCA GCCCAAGTTG TACCTGGACC CGTTTTAGCT GAGGCTGAAC CCAGAGTGGC781 CGAGATGTGG GGAGCAGTGT CCCAAGGCTG TGCAGGGCAC TGGGCCCTGG GTTTGGTCCA841 TGAAACCATT CTTTCCTCCT GGGCCTCTGA GCTTGTGATG GGAGGGGCTT CTTTGGAGGT901 CTCTGGGATG CCTTTGAGGC CTTTTCCCCA TTGTCTTTGG ATATTAGCAC TTGGCTCTGT961 TTCAGTTGTG CAAATTTCTC TAGTAAGCGG TAGCTCCAGA GTGTGCTTGA ATTTATTTCC1021 TGAAAAAGCT GTTTCTTTCT CTACCACTTG ACCAGGCTGC AAATTTTTTT AAATGTTTAC1081 ACTCTGCTTT CCTTTTAAAT GTAAATTCCA ACTTTAGGTC ATTTCTTCTG CCCGCATCTG1141 TGTGTAGGTT GTTAGAAGCA GCCAGGCCAC ATCTTGAATG CTTTGCTGCC TAGAAATATC1201 TTCTGCCAGA TACCTTGAGT CATCACTCTC AAGCTCAAAC TTCCACAGAT CCCTAAGGCA1261 TGAACAGGAT GCAGTCAAGT GTTTGCTAAG GCATAACACA TGTGACTTTT GCTGTAGTTC1321 CAAATAAGTT TCTCATTTCC ATCTGAGACT TCATCAGCCT GTCCTTCACT GTCCATATCA1381 CTATTAGCAT TTTGGTCACA GCCATTTAAC CAGTCTCTAA GAGGTTCCAA ACTTTCCTTC1441 ATCTTCCTCT CTTCTTGTGA GCCTTTCAAG ATCTTCCAAC TTCTGCCTGT AACCCAGTTG1501 CAAAGTTGCT TCCACATTTT CAGATATCTT TATAGAAATA TCTTTCTCCC TGGTACCAAG1561 TTTCTGTATT AGGCCATTCT TGCACTCCTG TAAAAAAATA CCTGGGGCCA GGCATGGTGG1621 CTATAATCCC AGCACTTTGA GGGGCCGAGG CGGGTGGATC ACCTGAGGTC AGGAGTTTGA1681 GACGAGCCTG GCCAGCATGG AGAAACCCTG TGTCTACCGA AAACACAAAA TTAGCTGGGC1741 ACAGTGGTGC ATGACTGTGG TCCCAGCTAC TCGAGAGGCT GAGGCACAAA AATGGCTTGA1801 ACCTGGGATG TGGAGGTTGC GGTGAGCTGA GATTGCGCCA CTGCACTGTA GGAGACTGAG1861 GGAAATCTGT CTGAAAGAAA GAAAGACAGA AAGAAAGAAA AAGAAAGAAA GAGAAAGAGA1921 AGAGAAAGAA AAGAAAAAAA AAAAAAAAAA AB:核苷酸序列(SEQ ID NO:35)长度:108个氨基酸
1 MAAQVVPGPV LAEAEPRVAE MWGAVSQGCA GHWALGLVHE TILSSWASEL VMGGASLEVS
61 GMPLRPFPHC LWILALGSVS VVQISLVSGS SRVCLNLFPE KAVSFSTTC.核苷酸及氨基酸组合序列(SEQ ID NO:36)克隆号和蛋白名称:FP3059起始编码子:725 ATG 终止编码子:1049 TGA 蛋白质分子量:11272.511 G ACT CAT TTC AGC ATT AAC TCA AAA GTT CAA TGT CTC AAC TGA GTC 4647 AAG GCA AGT CCC TTC CAT CTA CAA GCC TGT AAA ATT AAA AAA GTT ATT 9495 TAC TTC TGA GAT ACA TTG GGG ATA TGG GCA TTG GGT AAA CAT TCA TGT 142143 TCC AAA AGG GAG AAA TTG GCC AAA AGA AAG GGA CTA CAG GCT GCA TAC 190191 AAG TCC AAA ACC CAG CAG GGC AGT CAT TAA ATC TTA AAG CTC TAA GGT 238239 AGT CTC CTT TGA CTC CAT GTC CCA TTT CCA GGG CAC GCT GGT GCG AGG 286287 GGT GTG CCA CCC CAG GCC TTG GGC CAC TCT GCC CCT GTA TCT CTG CAG 334335 GGT GCA GCT CTT GTG GCT GCT GTC ACA GGT TGT TGA GTG CCT GCT GCT 382383 TTT CTA TGT GCA GAG TGC AAG CTC CCA GTG GAT CTA CCA TCC TGG GGC 430431 CTG GAG GAC AGT GGC CCC CTT CCT TCC CAT GGG TCC ACT AGG AAG TGC 478479 CCC ACT GGA GAC TCT GTG TGG GGC CTC CAG CCC ACA TTC CCC CCC TGC 526527 ACT GCC TTA GTA GAG GTT CTC TGT GAG GTA ACT GCC CCT GTG ATA GGC 574575 TTC CTC CTG GGC ACC CAG GCT TTT CCA TAC ATC CTC TGA AAT CTA GGT 622623 GGA GGC TCC TAA GCC TCC TTC ACT TTT ACA TTC TGT GTG GCT GCA GGT 670671 TTA ACA CTA CAC GGA AGC TGC CAA GGC TTA TGG CTT GCA CTC TCT GGA 718719 GCT GTA ATG GCA GCC CAA GTT GTA CCT GGA CCC GTT TTA GCT GAG GCT 7661 Met Ala Ala Gln Val Val Pro Gly Pro Val Leu Ala Glu Ala 14767 GAA CCC AGA GTG GCC GAG ATG TGG GGA GCA GTG TCC CAA GGC TGT GCA 81415 Glu Pro Arg Val Ala Glu Met Trp Gly Ala Val Ser Gln Gly Cys Ala 30815 GGG CAC TGG GCC CTG GGT TTG GTC CAT GAA ACC ATT CTT TCC TCC TGG 86231 Gly His Trp Ala Leu Gly Leu Val His Glu Thr Ile Leu Ser Ser Trp 46863 GCC TCT GAG CTT GTG ATG GGA GGG GCT TCT TTG GAG GTC TCT GGG ATG 91047 Ala Ser Glu Leu Val Met Gly Gly Ala Ser Leu Glu Val Ser Gly Met 62911 CCT TTG AGG CCT TTT CCC CAT TGT CTT TGG ATA TTA GCA CTT GGC TCT 95863 Pro Leu Arg Pro Phe Pro His Cys Leu Trp Ile Leu Ala Leu Gly Ser 78959 GTT TCA GTT GTG CAA ATT TCT CTA GTA AGC GGT AGC TCC AGA GTG TGC 100679 Val Ser Val Val Gln Ile Ser Leu Val Ser Gly Ser Ser Arg Val Cys 941007 TTG AAT TTA TTT CCT GAA AAA GCT GTT TCT TTC TCT ACC ACT TGA CCA 105495 Leu Asn Leu Phe Pro Glu Lys Ala Val Ser Phe Ser Thr Thr *** 1091055 GGC TGC AAA TTT TTT TAA ATG TTT ACA CTC TGC TTT CCT TTT AAA TGT 11021103 AAA TTC CAA CTT TAG GTC ATT TCT TCT GCC CGC ATC TGT GTG TAG GTT 11501151 GTT AGA AGC AGC CAG GCC ACA TCT TGA ATG CTT TGC TGC CTA GAA ATA 11981199 TCT TCT GCC AGA TAC CTT GAG TCA TCA CTC TCA AGC TCA AAC TTC CAC 12461247 AGA TCC CTA AGG CAT GAA CAG GAT GCA GTC AAG TGT TTG CTA AGG CAT 12941295 AAC ACA TGT GAC TTT TGC TGT AGT TCC AAA TAA GTT TCT CAT TTC CAT 13421343 CTG AGA CTT CAT CAG CCT GTC CTT CAC TGT CCA TAT CAC TAT TAG CAT 13901391 TTT GGT CAC AGC CAT TTA ACC AGT CTC TAA GAG GTT CCA AAC TTT CCT 14381439 TCA TCT TCC TCT CTT CTT GTG AGC CTT TCA AGA TCT TCC AAC TTC TGC 14861487 CTG TAA CCC AGT TGC AAA GTT GCT TCC ACA TTT TCA GAT ATC TTT ATA 15341535 GAA ATA TCT TTC TCC CTG GTA CCA AGT TTC TGT ATT AGG CCA TTC TTG 15821583 CAC TCC TGT AAA AAA ATA CCT GGG GCC AGG CAT GGT GGC TAT AAT CCC 16301631 AGC ACT TTG AGG GGC CGA GGC GGG TGG ATC ACC TGA GGT CAG GAG TTT 16781679 GAG ACG AGC CTG GCC AGC ATG GAG AAA CCC TGT GTC TAC CGA AAA CAC 17261727 AAA ATT AGC TGG GCA CAG TGG TGC ATG ACT GTG GTC CCA GCT ACT CGA 17741775 GAG GCT GAG GCA CAA AAA TGG CTT GAA CCT GGG ATG TGG AGG TTG CGG 18221823 TGA GCT GAG ATT GCG CCA CTG CAC TGT AGG AGA CTG AGG GAA ATC TGT 18701871 CTG AAA GAA AGA AAG ACA GAA AGA AAG AAA AAG AAA GAA AGA GAA AGA 19181919 GAA GAG AAA GAA AAG AAA AAA AAA AAA AAA AAA 1951
Claims (10)
1.一种分离的具有促进3T3细胞转化功能的人蛋白,其特征在于,它包含具有选自下组的氨基酸序列的多肽:SEQ ID NO:2、5、8、11、14、17、20、23、26、29、32、35;
或其保守性变异多肽、或其活性片段、或其活性衍生物。
2.如权利要求1所述的多肽,其特征在于,该多肽是具有选自下组的氨基酸序列的多肽:SEQ ID NO:2、5、8、11、14、17、20、23、26、29、32、35。
3.一种分离的多核苷酸,其特征在于,它包含一核苷酸序列,该核苷酸序列与选自下组的一种核苷酸序列有至少85%相同性:
(a)编码如权利要求1和2所述多肽的多核苷酸;
(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸。
4.如权利要求3所述的多核苷酸,其特征在于,该多核苷酸编码的多肽具有选自下组的氨基酸序列:SFQ ID NO:2、5、8、11、14、17、20、23、26、29、32、35。
5.如权利要求3所述的多核苷酸,其特征在于,该多核苷酸的序列选自下组:
SEQ ID NO:3、6、9、12、15、18、21、24、27、30、33、36的编码区序列或全长序列。
6.一种载体,其特征在于,它含有权利要求3所述的多核苷酸。
7.一种遗传工程化的宿主细胞,其特征在于,它是选自下组的一种宿主细胞:
(a)用权利要求6所述的载体转化或转导的宿主细胞;
(b)用权利要求3所述的多核苷酸转化或转导的宿主细胞。
8.一种具有促进3T3细胞转化功能的人蛋白活性的多肽的制备方法,其特征在于,该方法包含:
(a)在适合表达具有促进3T3细胞转化功能的人蛋白的条件下,培养权利要求7所述的宿主细胞;
(b)从培养物中分离出具有促进3T3细胞转化功能的人蛋白活性的多肽。
9.一种能与权利要求1所述的具有促进3T3细胞转化功能的人蛋白特异性结合的抗体。
10.一种核酸分子,它含有权利要求3所述的多核苷酸中连续的10-800个核苷酸。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN01126725A CN1403477A (zh) | 2001-09-12 | 2001-09-12 | 具有促进3t3细胞转化功能的新的人蛋白及其编码序列 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN01126725A CN1403477A (zh) | 2001-09-12 | 2001-09-12 | 具有促进3t3细胞转化功能的新的人蛋白及其编码序列 |
Publications (1)
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---|---|
CN1403477A true CN1403477A (zh) | 2003-03-19 |
Family
ID=4666732
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN01126725A Pending CN1403477A (zh) | 2001-09-12 | 2001-09-12 | 具有促进3t3细胞转化功能的新的人蛋白及其编码序列 |
Country Status (1)
Country | Link |
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CN (1) | CN1403477A (zh) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN110938129A (zh) * | 2019-11-08 | 2020-03-31 | 上海交通大学 | 一种生物活性多肽sklvpvgygirkl及其制备方法和应用 |
-
2001
- 2001-09-12 CN CN01126725A patent/CN1403477A/zh active Pending
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN110938129A (zh) * | 2019-11-08 | 2020-03-31 | 上海交通大学 | 一种生物活性多肽sklvpvgygirkl及其制备方法和应用 |
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