CN1313297A

CN1313297A - 具有抑制癌细胞生长功能的新的人蛋白及其编码序列

Info

Publication number: CN1313297A
Application number: CN00111948A
Authority: CN
Inventors: 顾健人; 杨胜利
Original assignee: Shanghai Cancer Institute
Current assignee: Shanghai Cancer Institute
Priority date: 2000-03-09
Filing date: 2000-03-09
Publication date: 2001-09-19
Anticipated expiration: 2020-03-09
Also published as: CN1169954C

Abstract

本发明公开了一类新的具有抑癌功能的人蛋白,编码此多肽的多核苷酸和经重组技术产生该多肽的方法。本发明还公开了此多肽用于治疗多种疾病如癌症等的方法。本发明还公开了抗此多肽的拮抗剂及其治疗作用。本发明还公开了编码这类新的具有抑癌功能的人蛋白的多核苷酸的用途。

Description

具有抑制癌细胞生长功能的新的人蛋白及其编码序列

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明涉及新的编码具有抑癌功能的人蛋白的多核苷酸，以及此多核苷酸编码的多肽。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的用途和制备。

人基因组学研究目前是国际上的热点，除人染色体DNA大规模测序，表达序列测序(EST)的方法外，还缺少从功能开始的筛选具有功能基因的高通量的方法。

癌症是危害人类健康的主要疾病之一。为了有效地治疗和预防肿瘤，目前人们已越来越关注肿瘤的基因治疗。因此，本领域迫切需要开发研究具有抑癌功能的人蛋白及其激动剂/抑制剂。

本发明的目的是提供一类新的具有抑癌功能的人蛋白多肽以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一目的是提供编码这些多肽的多核苷酸。

本发明的另一目的是提供生产这些多肽的方法以及该多肽和编码序列的用途。

在本发明的第一方面，提供新颖的分离出的具有抑癌功能的蛋白多肽，它包含具有选自下组的氨基酸序列的多肽：SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:8、SEQ IDNO:11、SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:17、SEQ ID NO:20、SEQ ID NO:23、SEQ ID NO:26；或其保守性变异多肽、或其活性片段、或其活性衍生物。

较佳地，该多肽是具有选自下组的氨基酸序列的多肽：SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:11、SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:17、SEQ ID NO:20、SEQ IDNO:23、SEQ ID NO:26。

在本发明的第二方面，提供了一种分离的多核苷酸，它包含一核苷酸序列，该核苷酸序列与选自下组的一种核苷酸序列有至少85％相同性：(a)编码上述的具有抑癌功能的蛋白多肽的多核苷酸；(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸。较佳地，该多核苷酸编码的多肽具有选自下组的氨基酸序列：SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:8、SEQ IDNO:11、SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:17、SEQ ID NO:20、SEQ ID NO:23、SEQ ID NO:26。更佳地，该多核苷酸的序列选自下组：SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:9、SEQID NO:12、SEQ ID NO:15、SEQ ID NO:18、SEQ ID NO:21、SEQ ID NO:24、SEQ ID NO:27的编码区序列或全长序列。

在本发明的第三方面，提供了含有上述多核苷酸的载体，以及被该载体转化或转导的宿主细胞或者被上述多核苷酸直接转化或转导的宿主细胞。

在本发明的第四方面，提供了制备具有具有抑癌功能的蛋白活性的多肽的制备方法，该方法包含：(a)在适合表达具有抑癌功能的蛋白的条件下，培养上述被转化或转导的宿主细胞；(b)从培养物中分离出具有具有抑癌功能的蛋白活性的多肽。

在本发明的第五方面，提供了与上述的具有抑癌功能的蛋白多肽特异性结合的抗体。还提供了可用于检测的核酸分子，它含有上述的多核苷酸中连续的10-800个核苷酸。

在本发明的第六方面，提供了一种药物组合物，它含有安全有效量的本发明的具有抑癌功能的蛋白多肽以及药学上可接受的载体。这些药物组合物可治疗癌症以及细胞异常增殖等病症。

本发明的其它方面由于本文的技术的公开，对本领域的技术人员而言是显而易见的。

本发明采用大规模cDNA克隆转染癌细胞，在获得具有抑癌作用的基础上，经测序证明为新的基因，进一步得到全长cDNA克隆。DNA转染试验证明，本发明的具有抑癌功能的蛋白对癌细胞(肝癌细胞)具有抑制克隆形成的作用，其抑制率在50％或50％以上。

如本文所用，“分离的”是指物质从其原始环境中分离出来(如果是天然的物质，原始环境即是天然环境)。如活体细胞内的天然状态下的多聚核苷酸和多肽是没有分离纯化的，但同样的多聚核苷酸或多肽如从天然状态中同存在的其他物质中分开，则为分离纯化的。

如本文所用，“分离的具有抑癌功能的蛋白或多肽”是指具有抑癌功能的蛋白多肽基本上不含天然与其相关的其它蛋白、脂类、糖类或其它物质。本领域的技术人员能用标准的蛋白质纯化技术纯化具有抑癌功能的蛋白。基本上纯的多肽在非还原聚丙烯酰胺凝胶上能产生单一的主带。具有抑癌功能的蛋白多肽的纯度能用氨基酸序列分析。

本发明的多肽可以是重组多肽、天然多肽、合成多肽，优选重组多肽。本发明的多肽可以是天然纯化的产物，或是化学合成的产物，或使用重组技术从原核或真核宿主(例如，细菌、酵母、高等植物、昆虫和哺乳动物细胞)中产生。根据重组生产方案所用的宿主，本发明的多肽可以是糖基化的，或可以是非糖基化的。本发明的多肽还可包括或不包括起始的甲硫氨酸残基。

本发明还包括具有抑癌功能的人蛋白的片段、衍生物和类似物。如本文所用，术语“片段”、“衍生物”和“类似物”是指基本上保持本发明的天然具有抑癌功能的人蛋白相同的生物学功能或活性的多肽。本发明的多肽片段、衍生物或类似物可以是(ⅰ)有一个或多个保守或非保守性氨基酸残基(优选保守性氨基酸残基)被取代的多肽，而这样的取代的氨基酸残基可以是也可以不是由遗传密码编码的，或(ⅱ)在一个或多个氨基酸残基中具有取代基团的多肽，或(ⅲ)成熟多肽与另一个化合物(比如延长多肽半衰期的化合物，例如聚乙二醇)融合所形成的多肽，或(ⅳ)附加的氨基酸序列融合到此多肽序列而形成的多肽(如前导序列或分泌序列或用来纯化此多肽的序列或蛋白原序列)。根据本文的教导，这些片段、衍生物和类似物属于本领域熟练技术人员公知的范围。

本发明的多核苷酸可以是DNA形式或RNA形式。DNA形式包括cDNA、基因组DNA或人工合成的DNA。DNA可以是单链的或是双链的。DNA可以是编码链或非编码链。以PP6蛋白(在本申请中，蛋白质的命名采用其克隆编号)(在本申请中，蛋白质的命名采用其克隆编号)为例，编码成熟多肽的编码区序列可以与SEQ ID NO:3所示的编码区序列相同或者是简并的变异体。如本文所用，“简并的变异体”在本发明中是指编码具有SEQ ID NO:2的蛋白质，但与SEQ ID NO:3所示的编码区序列有差别的核酸序列。以PP208蛋白(在本申请中，蛋白质的命名采用其克隆编号)(在本申请中，蛋白质的命名采用其克隆编号)为例，编码成熟多肽的编码区序列可以与SEQ ID NO:6所示的编码区序列相同或者是简并的变异体。如本文所用，“简并的变异体”在本发明中是指编码具有SEQ ID NO:5的蛋白质，但与SEQ ID NO:6所示的编码区序列有差别的核酸序列。对于其他具有抑癌功能的蛋白，可依此类推。对于其他具有抑癌功能的蛋白，可依此类推。

编码成熟多肽的多核苷酸包括：只编码成熟多肽的编码序列；成熟多肽的编码序列和各种附加编码序列；成熟多肽的编码序列(和任选的附加编码序列)以及非编码序列。

术语“编码多肽的多核苷酸”可以是包括编码此多肽的多核苷酸，也可以是还包括附加编码和/或非编码序列的多核苷酸。

本发明还涉及上述多核苷酸的变异体，其编码与本发明有相同的氨基酸序列的多肽或多肽的片段、类似物和衍生物。此多核苷酸的变异体可以是天然发生的等位变异体或非天然发生的变异体。这些核苷酸变异体包括取代变异体、缺失变异体和插入变异体。如本领域所知的，等位变异体是一个多核苷酸的替换形式，它可能是一个或多个核苷酸的取代、缺失或插入，但不会从实质上改变其编码的多肽的功能。

本发明还涉及与上述的序列杂交且两个序列之间具有至少50％，较佳地至少70％，更佳地至少80％相同性的多核苷酸。本发明特别涉及在严格条件下与本发明所述多核苷酸可杂交的多核苷酸。在本发明中，“严格条件”是指：(1)在较低离子强度和较高温度下的杂交和洗脱，如0.2×SSC,0.1％SDS,60℃；或(2)杂交时加有变性剂，如50％(v/v)甲酰胺，0.1％小牛血清/0.1％Ficoll,42℃等；或(3)仅在两条序列之间的相同性至少在95％以上，更好是97％以上时才发生杂交。并且，可杂交的多核苷酸编码的多肽与SEQ IDNO:2所示的成熟多肽有相同的生物学功能和活性。

本发明还涉及与上述的序列杂交的核酸片段。如本文所用，“核酸片段”的长度至少含15个核苷酸，较好是至少30个核苷酸，更好是至少50个核苷酸，最好是至少100个核苷酸以上。核酸片段可用于核酸的扩增技术(如PCR)以确定和/或分离编码具有抑癌功能的蛋白的多聚核苷酸。

本发明中的多肽和多核苷酸优选以分离的形式提供，更佳地被纯化至均质。

本发明的DNA序列能用几种方法获得。例如，用本领域熟知的杂交技术分离DNA。这些技术包括但不局限于：1)用探针与基因组或cDNA文库杂交以检出同源性核苷酸序列，和2)表达文库的抗体筛选以检出具有共同结构特征的克隆的DNA片段。

编码具有抑癌功能的蛋白的特异DNA片段序列产生也能用下列方法获得：1)从基因组DNA分离双链DNA序列；2)化学合成DNA序列以获得所需多肽的双链DNA。

上述提到的方法中，分离基因组DNA最不常用。当需要的多肽产物的整个氨基酸序列已知时，DNA序列的直接化学合成是经常选用的方法。如果所需的氨基酸的整个序列不清楚时，DNA序列的直接化学合成是不可能的，选用的方法是cDNA序列的分离。分离感兴趣的cDNA的标准方法是从高表达该基因的供体细胞分离mRNA并进行逆转录，形成质粒或噬菌体cDNA文库。提取mRNA的方法已有多种成熟的技术，试剂盒也可从商业途径获得(Qiagene)。而构建cDNA文库也是通常的方法(Sambrook,et al.,Molecular Cloning,A Laboratory Manual,Cold Spring Harbor Laboratory.New York,1989)。还可得到商业供应的cDNA文库，如Clontech公司的不同cDNA文库。当结合使用聚合酶反应技术时，即使极少的表达产物也能克隆。

可用常规方法从这些cDNA文库中筛选本发明的基因。这些方法包括(但不限于)：(1)DNA-DNA或DNA-RNA杂交；(2)标志基因的功能出现或丧失；(3)测定具有抑癌功能的蛋白的转录本的水平；(4)通过免疫学技术或测定生物学活性，来检测基因表达的蛋白产物。上述方法可单用，也可多种方法联合应用。

在第(1)种方法中，杂交所用的探针是与本发明的多核苷酸的任何一部分同源，其长度至少15个核苷酸，较好是至少30个核苷酸，更好是至少50个核苷酸，最好是至少100个核苷酸。此外，探针的长度通常在2kb之内，较佳地为1kb之内。此处所用的探针通常是在本发明的基因DNA序列信息的基础上化学合成的DNA序列。本发明的基因本身或者片段当然可以用作探针。DNA探针的标记可用放射性同位素，荧光素或酶(如碱性磷酸酶)等。

在第(4)种方法中，检测具有抑癌功能的蛋白基因表达的蛋白产物可用免疫学技术如Western印迹法，放射免疫沉淀法，酶联免疫吸附法(ELISA)等。

应用PCR技术扩增DNA/RNA的方法(Saiki,et al.Science1985；230:1350-1354)被优选用于获得本发明的基因。特别是很难从文库中得到全长的cDNA时，可优选使用RACE法(RACE-cDNA末端快速扩增法)，用于PCR的引物可根据本文所公开的本发明的序列信息适当地选择，并可用常规方法合成。可用常规方法如通过凝胶电泳分离和纯化扩增的DNA/RNA片段。

如上所述得到的本发明的基因，或者各种DNA片段等的核苷酸序列的测定可用常规方法如双脱氧链终止法(Sanger et al.PNAS,1977,74:5463-5467)。这类核苷酸序列测定也可用商业测序试剂盒等。为了获得全长的cDNA序列，测序需反复进行。有时需要测定多个克隆的cDNA序列，才能拼接成全长的cDNA序列。

本发明也涉及包含本发明的多核苷酸的载体，以及用本发明的载体或具有抑癌功能的蛋白编码序列经基因工程产生的宿主细胞，以及经重组技术产生本发明所述多肽的方法。

通过常规的重组DNA技术，可利用本发明的多聚核苷酸序列可用来表达或生产重组的具有抑癌功能的蛋白多肽(Science,1984；224:1431)。一般来说有以下步骤：

(1)．用本发明的编码具有抑癌功能的人蛋白的多核苷酸(或变异体)，或用含有该多核苷酸的重组表达载体转化或转导合适的宿主细胞；

(2)．在合适的培养基中培养的宿主细胞；

(3)．从培养基或细胞中分离、纯化蛋白质。

本发明中，具有抑癌功能的人蛋白多核苷酸序列可插入到重组表达载体中。术语“重组表达载体”指本领域熟知的细菌质粒、噬菌体、酵母质粒、植物细胞病毒、哺乳动物细胞病毒如腺病毒、逆转录病毒或其他载体。在本发明中适用的载体包括但不限于：在细菌中表达的基于T7的表达载体(Rosenberg,et al.Gene,1987,56:125)；在哺乳动物细胞中表达的pMSXND表达载体(Lee and Nathans,J Bio Chem.263:3521,1988)和在昆虫细胞中表达的来源于杆状病毒的载体。总之，只要能在宿主体内复制和稳定，任何质粒和载体都可以用。表达载体的一个重要特征是通常含有复制起点、启动子、标记基因和翻译控制元件。

本领域的技术人员熟知的方法能用于构建含具有抑癌功能的人蛋白编码DNA序列和合适的转录/翻译控制信号的表达载体。这些方法包括体外重组DNA技术、DNA合成技术、体内重组技术等(Sambroook,et al.Molecular Cloning,a Laboratory Manual,coldSpring Harbor Laboratory.New York,1989)。所述的DNA序列可有效连接到表达载体中的适当启动子上，以指导mRNA合成。这些启动子的代表性例子有：大肠杆菌的lac或trp启动子；λ噬菌体PL启动子；真核启动子包括CMV立即早期启动子、HSV胸苷激酶启动子、早期和晚期SV40启动子、反转录病毒的LTRs和其他一些已知的可控制基因在原核或真核细胞或其病毒中表达的启动子。表达载体还包括翻译起始用的核糖体结合位点和转录终止子。

此外，表达载体优选地包含一个或多个选择性标记基因，以提供用于选择转化的宿主细胞的表型性状，如真核细胞培养用的二氢叶酸还原酶、新霉素抗性以及绿色荧光蛋白(GFP)，或用于大肠杆菌的四环素或氨苄青霉素抗性。

包含上述的适当DNA序列以及适当启动子或者控制序列的载体，可以用于转化适当的宿主细胞，以使其能够表达蛋白质。

宿主细胞可以是原核细胞，如细菌细胞；或是低等真核细胞，如酵母细胞；或是高等真核细胞，如哺乳动物细胞。代表性例子有：大肠杆菌，链霉菌属；鼠伤寒沙门氏菌的细菌细胞；真菌细胞如酵母；植物细胞；果蝇S2或Sf9的昆虫细胞；CHO、COS或Bowes黑素瘤细胞的动物细胞等。

本发明的多核苷酸在高等真核细胞中表达时，如果在载体中插入增强子序列时将会使转录得到增强。增强子是DNA的顺式作用因子，通常大约有10到300个碱基对，作用于启动子以增强基因的转录。可举的例子包括在复制起始点晚期一侧的100到270个碱基对的SV40增强子、在复制起始点晚期一侧的多瘤增强子以及腺病毒增强子等。

本领域一般技术人员都清楚如何选择适当的载体、启动子、增强子和宿主细胞。

用重组DNA转化宿主细胞可用本领域技术人员熟知的常规技术进行。当宿主为原核生物如大肠杆菌时，能吸收DNA的感受态细胞可在指数生长期后收获，用CaCl₂法处理，所用的步骤在本领域众所周知。可供选择的是用MgCl₂。如果需要，转化也可用电穿孔的方法进行。当宿主是真核生物，可选用如下的DNA转染方法：磷酸钙共沉淀法，常规机械方法如显微注射、电穿孔、脂质体包装等。

获得的转化子可以用常规方法培养，表达本发明的基因所编码的多肽。根据所用的宿主细胞，培养中所用的培养基可选自各种常规培养基。在适于宿主细胞生长的条件下进行培养。当宿主细胞生长到适当的细胞密度后，用合适的方法(如温度转换或化学诱导)诱导选择的启动子，将细胞再培养一段时间。

在上面的方法中的重组多肽可包被于细胞内、细胞外或在细胞膜上表达或分泌到细胞外。如果需要，可利用其物理的、化学的和其它特性通过各种分离方法分离和纯化重组的蛋白。这些方法是本领域技术人员所熟知的。这些方法的例子包括但并不限于：常规的复性处理、用蛋白沉淀剂处理(盐析方法)、离心、渗透破菌、超处理、超离心、分子筛层析(凝胶过滤)、吸附层析、离子交换层析、高效液相层析(HPLC)和其它各种液相层析技术及这些方法的结合。

重组的具有抑癌功能的人蛋白或多肽有多方面的用途。这些用途包括(但不限于)：直接做为药物治疗具有抑癌功能的蛋白功能低下或丧失所致的疾病，和用于筛选促进或对抗具有抑癌功能的蛋白功能的抗体、多肽或其它配体。例如，抗体可用于激活或抑制具有抑癌功能的人蛋白的功能。用表达的重组具有抑癌功能的人蛋白筛选多肽库可用于寻找有治疗价值的能抑制或刺激具有抑癌功能的人蛋白功能的多肽分子。

本发明也提供了筛选药物以鉴定提高(激动剂)或阻遏(拮抗剂)具有抑癌功能的人蛋白的药剂的方法。激动剂提高具有抑癌功能的人蛋白刺激细胞增殖等生物功能，而拮抗剂阻止和治疗与细胞过度增殖有关的紊乱如各种癌症。例如，能在药物的存在下，将哺乳动物细胞或表达具有抑癌功能的人蛋白的膜制剂与标记的具有抑癌功能的人蛋白一起培养。然后测定药物提高或阻遏此相互作用的能力。

具有抑癌功能的人蛋白的拮抗剂包括筛选出的抗体、化合物、受体缺失物和类似物等。具有抑癌功能的人蛋白的拮抗剂可以与具有抑癌功能的人蛋白结合并消除其功能，或是抑制具有抑癌功能的人蛋白的产生，或是与多肽的活性位点结合使多肽不能发挥生物学功能。具有抑癌功能的人蛋白的拮抗剂可用于治疗用途。

在筛选作为拮抗剂的化合物时，可以将具有抑癌功能的蛋白加入生物分析测定中，通过测定化合物影响具有抑癌功能的蛋白和其受体之间的相互作用来确定化合物是否是拮抗剂。用上述筛选化合物的同样方法，可以筛选出起拮抗剂作用的受体缺失物和类似物。

本发明的多肽可直接用于疾病治疗，例如，各种恶性肿瘤、和细胞异常增殖等。

本发明的多肽，及其片段、衍生物、类似物或它们的细胞可以用来作为抗原以生产抗体。这些抗体可以是多克隆或单克隆抗体。多克隆抗体可以通过将此多肽直接注射动物的方法得到。制备单克隆抗体的技术包括杂交瘤技术，三瘤技术，人B-细胞杂交瘤技术，EBV-杂交瘤技术等。

可以将本发明的多肽和拮抗剂与合适的药物载体组合后使用。这些载体可以是水、葡萄糖、乙醇、盐类、缓冲液、甘油以及它们的组合。组合物包含安全有效量的多肽或拮抗剂以及不影响药物效果的载体和赋形剂。这些组合物可以作为药物用于疾病治疗。

本发明还提供含有一种或多种容器的药盒或试剂盒，容器中装有一种或多种本发明的药用组合物成分。与这些容器一起，可以有由制造、使用或销售药品或生物制品的政府管理机构所给出的指示性提示，该提示反映出生产、使用或销售的政府管理机构许可其在人体上施用。此外，本发明的多肽可以与其它的治疗化合物结合使用。

药物组合物可以以方便的方式给药，如通过局部、静脉内、腹膜内、肌内、皮下、鼻内或皮内的给药途径。具有抑癌功能的蛋白以有效地治疗和/或预防具体的适应症的量来给药。施用于患者的具有抑癌功能的蛋白的量和剂量范围将取决于许多因素，如给药方式、待治疗者的健康条件和诊断医生的判断。

具有抑癌功能的人蛋白的多聚核苷酸也可用于多种治疗目的。基因治疗技术可用于治疗由于具有抑癌功能的蛋白的无表达或异常/无活性的具有抑癌功能的蛋白的表达所致的细胞增殖、发育或代谢异常。重组的基因治疗载体(如病毒载体)可设计成表达变异的具有抑癌功能的蛋白，以抑制内源性的具有抑癌功能的蛋白活性。例如，一种变异的具有抑癌功能的蛋白可以是缩短的、缺失了信号传导功能域的具有抑癌功能的蛋白，虽可与下游的底物结合，但缺乏信号传导活性。因此重组的基因治疗载体可用于治疗具有抑癌功能的蛋白表达或活性异常所致的疾病。来源于病毒的表达载体如逆转录病毒、腺病毒、腺病毒相关病毒、单纯疱疹病毒、细小病毒等可用于将具有抑癌功能的蛋白基因转移至细胞内。构建携带具有抑癌功能的蛋白基因的重组病毒载体的方法可见于已有文献(Sambrook,et al.)。另外重组具有抑癌功能的人蛋白基因可包装到脂质体中转移至细胞内。

抑制具有抑癌功能的人蛋白mRNA的寡聚核苷酸(包括反义RNA和DNA)以及核酶也在本发明的范围之内。核酶是一种能特异性分解特定RNA的酶样RNA分子，其作用机制是核酶分子与互补的靶RNA特异性杂交后进行核酸内切作用。反义的RNA和DNA及核酶可用已有的任何RNA或DNA合成技术获得，如固相磷酸酰胺化学合成法合成寡核苷酸的技术已广泛应用。反义RNA分子可通过编码该RNA的DNA序列在体外或体内转录获得。这种DNA序列已整合到载体的RNA聚合酶启动子的下游。为了增加核酸分子的稳定性，可用多种方法对其进行修饰，如增加两侧的序列长度，核糖核苷之间的连接应用磷酸硫酯键或肽键而非磷酸二酯键。

多聚核苷酸导入组织或细胞内的方法包括：将多聚核苷酸直接注入到体内组织中；或在体外通过载体(如病毒、噬菌体或质粒等)先将多聚核苷酸导入细胞中，再将细胞移植到体内等。

本发明的多肽还可用作肽谱分析，例如，多肽可用物理的、化学或酶进行特异性切割，并进行一维或二维或三维的凝胶电泳分析。

本发明还提供了针对具有抑癌功能的人蛋白抗原决定簇的抗体。这些抗体包括(但不限于)：多克隆抗体、单克隆抗体、嵌合抗体、单链抗体、Fab片段和Fab表达文库产生的片段。

抗具有抑癌功能的人蛋白的抗体可用于免疫组织化学技术中，检测活检标本中的具有抑癌功能的人蛋白。

与具有抑癌功能的人蛋白结合的单克隆抗体也可用放射性同位素标记，注入体内可跟踪其位置和分布。这种放射性标记的抗体可作为一种非创伤性诊断方法用于肿瘤细胞的定位和判断是否有转移。

本发明中的抗体可用于治疗或预防与具有抑癌功能的人蛋白相关的疾病。给予适当剂量的抗体可以刺激或阻断具有抑癌功能的人蛋白的产生或活性。

抗体也可用于设计针对体内某一特殊部位的免疫毒素。如具有抑癌功能的人蛋白高亲和性的单克隆抗体可与细菌或植物毒素(如白喉毒素，蓖麻蛋白，红豆碱等)共价结合。一种通常的方法是用巯基交联剂如SPDP，攻击抗体的氨基，通过二硫键的交换，将毒素结合于抗体上，这种杂交抗体可用于杀灭具有抑癌功能的人蛋白阳性的细胞。

多克隆抗体的生产可用具有抑癌功能的人蛋白或多肽免疫动物，如家兔，小鼠，大鼠等。多种佐剂可用于增强免疫反应，包括但不限于弗氏佐剂等。

具有抑癌功能的人蛋白单克隆抗体可用杂交瘤技术生产(Kohler and Milstein.Nature,1975,256:495-497)。将人恒定区和非人源的可变区结合的嵌合抗体可用已有的技术生产(Morrison et al,PNAS,1985,81:6851)。而已有的生产单链抗体的技术(U.S.PatNo.4946778)也可用于生产抗具有抑癌功能的人蛋白的单链抗体。

能与具有抑癌功能的人蛋白结合的多肽分子可通过筛选由各种可能组合的氨基酸结合于固相物组成的随机多肽库而获得。筛选时，必须对具有抑癌功能的人蛋白分子进行标记。

本发明还涉及定量和定位检测具有抑癌功能的人蛋白水平的诊断试验方法。这些试验是本领域所熟知的，且包括FISH测定和放射免疫测定。试验中所检测的具有抑癌功能的人蛋白水平，可以用作解释具有抑癌功能的人蛋白在各种疾病中的重要性和用于诊断具有抑癌功能的蛋白起作用的疾病。

具有抑癌功能的蛋白的多聚核苷酸可用于具有抑癌功能的蛋白相关疾病的诊断和治疗。在诊断方面，具有抑癌功能的蛋白的多聚核苷酸可用于检测具有抑癌功能的蛋白的表达与否或在疾病状态下具有抑癌功能的蛋白的异常表达。如具有抑癌功能的蛋白DNA序列可用于对活检标本的杂交以判断具有抑癌功能的蛋白的表达异常。杂交技术包括Southern印迹法，Northern印迹法、原位杂交等。这些技术方法都是公开的成熟技术，相关的试剂盒都可从商业途径得到。本发明的多核苷酸的一部分或全部可作为探针固定在微阵列(Microarray)或DNA芯片(又称为“基因芯片”)上，用于分析组织中基因的差异表达分析和基因诊断。用具有抑癌功能的蛋白特异的引物进行RNA-聚合酶链反应(RT-PCR)体外扩增也可检测具有抑癌功能的蛋白的转录产物。

检测具有抑癌功能的蛋白基因的突变也可用于诊断具有抑癌功能的蛋白相关的疾病。具有抑癌功能的蛋白突变的形式包括与正常野生型具有抑癌功能的蛋白DNA序列相比的点突变、易位、缺失、重组和其它任何异常等。可用已有的技术如Southern印迹法、DNA序列分析、PCR和原位杂交检测突变。另外，突变有可能影响蛋白的表达，因此用Northern印迹法、Western印迹法可间接判断基因有无突变。

本发明的序列对染色体鉴定也是有价值的。该序列会特异性地针对某条人染色体具体位置且并可以与其杂交。目前，需要鉴定染色体上的各基因的具体位点。现在，只有很少的基于实际序列数据(重复多态性)的染色体标记物可用于标记染色体位置。根据本发明，为了将这些序列与疾病相关基因相关联，其重要的第一步就是将这些DNA序列定位于染色体上。

简而言之，根据cDNA制备PCR引物(优选15-35bp)，可以将序列定位于染色体上。然后，将这些引物用于PCR筛选含各条人染色体的体细胞杂合细胞。只有那些含有相应于引物的人基因的杂合细胞会产生扩增的片段。

体细胞杂合细胞的PCR定位法，是将DNA定位到具体染色体的快捷方法。使用本发明的的寡核苷酸引物，通过类似方法，可利用一组来自特定染色体的片段或大量基因组克隆而实现亚定位。可用于染色体定位的其它类似策略包括原位杂交、用标记的流式分选的染色体预筛选和杂交预选，从而构建染色体特异的cDNA库。

将cDNA克隆与中期染色体进行荧光原位杂交(FISH)，可以在一个步骤中精确地进行染色体定位。此技术的综述，参见Verma等，Human Chromosomes:a Manual of BasicTechniques,Pergamon Press,New York(1988)。

一旦序列被定位到准确的染色体位置，此序列在染色体上的物理位置就可以与基因图数据相关联。这些数据可见于例如，V.Mckusick,Mendelian Inheritance in Man(可通过与Johns Hopkins University Welch Medical Library联机获得)。然后可通过连锁分析，确定基因与业已定位到染色体区域上的疾病之间的关系。

接着，需要测定患病和未患病个体间的cDNA或基因组序列差异。如果在一些或所有的患病个体中观察到某突变，而该突变在任何正常个体中未观察到，则该突变可能是疾病的病因。比较患病和未患病个体，通常涉及首先寻找染色体中结构的变化，如从染色体水平可见的或用基于cDNA序列的PCR可检测的缺失或易位。根据目前的物理作图和基因定位技术的分辨能力，被精确定位至与疾病有关的染色体区域的cDNA，可以是50至500个潜在致病基因间之一种(假定1兆碱基作图分辨能力和每20kb对应于一个基因)。

本发明的具有抑癌功能的蛋白核苷酸全长序列或其片段通常可以用PCR扩增法、重组法或人工合成的方法获得。对于PCR扩增法，可根据本发明所公开的有关核苷酸序列，尤其是开放阅读框序列来设计引物，并用市售的cDNA库或按本领域技术人员已知的常规方法所制备的cDNA库作为模板，扩增而得有关序列。当序列较长时，常常需要进行两次或多次PCR扩增，然后再将各次扩增出的片段按正确次序拼接在一起。

一旦获得了有关的序列，就可以用重组法来大批量地获得有关序列。这通常是将其克隆入载体，再转入细胞，然后通过常规方法从增殖后的宿主细胞中分离得到有关序列。

此外，还可用人工合成的方法来合成有关序列，尤其是片段长度较短时。通常，通过先合成多个小片段，然后再进行连接可获得序列很长的片段。

目前，已经可以完全通过化学合成来编码本发明蛋白(或其片段，或其衍生物)的DNA序列。然后可将该DNA序列引入本领域中的各种DNA分子(如载体)和细胞中。此外，还可通过化学合成将突变引入本发明蛋白序列中。

此外，由于本发明的具有抑癌功能的蛋白具有源自人的天然氨基酸序列，因此，与来源于其他物种的同族蛋白相比，预计在施用于人时将具有更高的活性和/或更低的副作用(例如在人体内的免疫原性更低或没有)。

下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件如Sambrook等人，分子克隆：实验室手册(New York:Cold Spring Harbor LaboratoryPress,1989)中所述的条件，或按照制造厂商所建议的条件。

实施例1：cDNA基因的获得及对癌细胞克隆形成的抑制作用

PP6,PP208,PP451,PP624,PP722,PP902,PP1628,PP1650,PP2672是通过用常规方法构建人胎盘cDNA文库获得的。取3、6、10月龄的胎盘组织，用Trizol试剂(GIBCO BRL公司)按厂方说明书提取总RNA，用mRNA提纯试剂盒(pharmacia公司)提取mRNA。用pCMV-script TMXR cDNA文库构建试剂盒(Stratagene公司)构建上述mRNA的cDNA文库。其中反转录酶改用MMLV-RT-SuperscriptⅡ(GIBCO BRL)，反转录反应在42℃进行。转化XL10-Gold感受细胞，获得了1×10⁶cfu/μgcDNA滴度的cDNA文库。第一轮随机挑取cDNA克隆，其后以高丰度cDNA克隆和已证明有抑癌细胞生长功能的cDNA克隆为探针，杂交筛选cDNA文库，挑取弱阳性及阴性克隆。用Qiagen96孔板质粒抽提试剂盒，按厂家说明书进行质粒DNA的提取。质粒DNA和空载体同时转染肝癌细胞系7721。100ng DNA酒精沉淀干燥后，加6μl H₂O溶解，待转染。每份DNA样品中加0.74μl脂质体及9.3μl无血清培液，混匀后，室温放置10分钟。每管中加150μl无血清培液，均分加入3孔生长于96孔板的7721细胞中，37℃放置2小时，每孔再加50μl无血清培液，37℃24小时。每孔换100μl全培液，37℃24小时，换含G418的全培液100μl,37℃24～48小时，边观察，边换G418浓度不等的培液。约2～3次后，直到镜检细胞有克隆形成，计数。发现上述克隆有抑制细胞克隆形成作用，结果如下表所示。

cDNA克隆转染细胞(7721)克隆形成情况

cDNA克隆名称	CDNA克隆数(三个重复)	空载体克隆数(三个重复)
cDNA克隆名称	CDNA克隆数(三个重复)	空载体克隆数(三个重复)	PP6PP208PP451PP624PP722PP902PP1628PP1650PP2672	1 0 137 40 4526 39 293 1 118 19 2228 26 2426 20 3018 22 240 0 1	50 26 3127 31 2625 23 3021 30 4221 18 1957 54 4022 25 1322 25 1312 23 28

对cDNA克隆采用双脱氧终止法，在ABI377 DNA自动测序仪上测定其一端近500bp的核苷酸序列。分析后，确定为新基因克隆，进行另一端测序，仍未获得全长cDNA序列，设计引物，再次进行测序，直到获得全长序列。

实施例2：从胎盘cDNA中PCR获得基因克隆：

取3、6、10月龄的人胎盘组织，用Trizol试剂(GIBCO BRL公司)按厂方说明书提取总RNA，用mRNA提纯试剂盒(pharmacia公司)提取mRNA。用MMLV-RT-SuperscriptⅡ(GIBCO BRL)反转录酶在42℃进行反转录反应，获得胎盘cDNA。利用各个基因的转异引物(如下表所示)，按90℃3’1个循环。94℃30″60℃30″ 72℃1′35个循环，72℃10′1个循环进行PCR扩增，获得含有完整开放阅读框序列的各蛋白基因的扩增产物。扩增产物经测序验证，与实施例1测得的序列相符，随后用常规技术将扩增产物转入宿主细胞，以获得重组蛋白。

基因特异引物序列

克隆名称	特异引物1(5′→3′)	特异引物2(5′→3′)
克隆名称	特异引物1(5′→3′)	特异引物2(5′→3′)	PP6PP208PP451PP624PP722PP902PP1628PP1650PP2672	CTTCCCCTCCTGGTGCAGCCATTGAACCTCAATGCCAGCACCGTCCTCTTTGTCATCAGCCTGGCTCGCGCAAAAGGAGAATGTGCCCCCAGGCTCCCCATCCCACTGACTGCTTTCCGCCCCTCTCCTAAAGCCTGACGGCACTTGGGGTTTCTGGGAATTCTGTGACAGGGTCCAACAGGGCAGCCGTTGCCCTGTTCTTGGTGA	CCAAAGCAAACCCAACCCTCGTGGTACCCCAAGTTGCCCAGGAGGCCTGGGCAACATGTCTGCAAGGGTTGACAAAGGGCAGTGGCTCGCTATGGCTGAGTGTATCTGGGTGGGCCACCTGCAGCCGACGGACTAGTTGAGGCAAGATGGCAGGGGATCACACCGGGGAAAAGCCCTACTGGTGTCACACCAGCAATCAGTGTGGCGA

实施例3：cDNA克隆序列分析

1．PP6A：核苷酸序列：(SEQ ID NO:1)长度：2104bp1 GTGAAACAGG GTGAGTCTGG ACATTCTGCA GTCAGCCACT GTTCTTGGCT51 TCCAACCAAA AGCAAAACTA AGGCAAGGCA GAGCACAGAG GGTGCTCAGG101 CAGAAGCTGC TTCCCCTCCT GGTGCAGCCA TTAGCTGCTG TAGTATCTGT151 GACCTGTCAG AACCTGCTTC CTTCATTTTG GGAATATTTG ACCAACCTCA201 GAGCAATTGC TGTTACGAGC TAAGGAGGTC AAAGAGCAAT GTCCAGTCTT251 CCCATTCTGT CCAAGTCAGA TTTATCGACC ATGTTTCGGA AAAAGGTGAG301 CCTCAGGGAT AGTTTGTCAA TGGCTGAGCT AATCACAAAG GTGCCTGGGC351 AGGAATACTG GCACCAGCCA AATTTGCATT ACTTGTTCTG AGCAATTGAG401 CTTTGTTTGA AGAATGGGAG GGGATAAAGA AGATAACTGA TCATTTTCTC451 AGGTGACTGA CCTGGTGATT AGGAGCAGCC TTCTTGGATG CAGTTAGGCA501 AAGTCTGAAT GTCTTCCCTT CTCCCCCCAC CGCTCTCTCC TGCCACCCCA551 GGAGCAACAT ATAAAAATGT GTAGCTCCAG GCATGAAAGT AGCTTCTGTC601 TACACAATGC AGGTCAAAGA GAAGGAACTG ACCAGGTGTC CAGGCACCAA651 AATACCAGGC TGGTCTAGCC CCAACTCTCC TTCTCACATG CCCACGTTCA701 CGCAACTAAC TCACAGGGTT TTGGGGAAGA CTAAGACGGA GTGAATGTAA751 AACCCACTCC CTTCTGCCCA CGTTCACATG GTCCATGCTG AGGGAATTCA801 GAAAAGGAGA CAGACCCGGG GGGGTGCGTC AGTCAAGGCA AGTTTCTCGA851 AGGAAGGAAG CAGAACTCAG GAGGACATGG ACTGGAACAG TCAGGGCAAT 901 TTCAGGCTGT GACAAAGCTG GAACGGACGA CTGTAGCAGG AGCAGGAGTC951 ACTGACATTC TAGGCCAGGC CAGGGCTAAG CCAGAGAACC TATTAATAGT1001 AATCCACAAA TAGATATGGG GCACCTCCTA GGAACTCTCC TTGTTCCAAG1051 CGTCGTACCT CGTGTGATCC TTAGCGGCTC TCTGAAGCAG ACAGAAGAGG1101 GCCAGCCATC TTTCTTCCAC CTTTGAGGCT TGGGAAGGGT GAGACTTGCT1151 GGTGACTTAC AACTCCATCA AAGGGGCATG GTGAAATAAG GGCCTGGGCT1201 CCTGACTTCT GGGCTAGGGC TCTTCCAAAG GCAGAGTCTG GAGAGGCCTG1251 GCTGTGGCCA GACCATGGGG CAAGTGGCTA GAGGGGCGAG TAGACAGCAG1301 AGGCAGCTGT GGCCCCCGGG ATTAGCACTG GGGGACCGGA TGGGGGAGGG1351 AGGCCTCACT TTGTTCTATC TGAGCAGCTT CCTCGGCAGT CATGGGACTG1401 ATTGAGACCA CGCGAGGGCT CCTCCCGGGG GCAGGAGGGA CTCAGAGGCT1451 GCCCCGTTGT CTGGGGGTGG CCCTGGCGAA GGAGCTCATC TTCACGGGCC1501 GACGACTGAG TGGAACTGAG GCCCACGTAC TGGGGCTGGT GAATCACGCT1551 GTGGCCCAGA ACGAGGAGGG GGACGCCGCC TACCAGCGGG CACGAGCACT1601 GGCCCAGGAG ATCCTGCCCC AGGCCCCCAT TGCCGTGCGG CTGGGCAAAG1651 TAGCCATTGA CCGAGGAACG GAGGTGGACA TTGCATCTGG GATGGCCATT1701 GAAGGGATGT GCTATGCCCA GAATATTCCA ACCCGGGACC GGCTAGAGGG1751 CATGGCAGCC TTCAGGGAGA AGCGGACTCC CAAATTTGTT GGCAAATGAC1801 CCCCATTTTA ACCTTCAGCA TGGGAGATGC ATGCCCTGAA GAGCAGGATC1851 CAGAAGGAAG ATTTGTGGCC AGATTGCCTT CATCATTTCA CCTCTCCAGA1901 CTTCCATTTC TTCACAAGGA TGATGATGGA AATAAAATGA CTGGCGTGAT1951 GCCTGGAACC AAGGTGCTGA TCCTACCACC TACTGCTACC TTCCTTAGCT2001 TCACCCTGGC TAGAAATAAT CACGAGGGTT GGGTTTGCTT TGGAAAATGC2051 CTGTCTCTCT ACTTGAATGA TAAAGAATTA AATTAGAAAA AAAAAAAAAA2101 AAAAB：氨基酸序列：(SEQ ID NO:2)长度：135个氨基酸1 MGLIETTRGL LPGAGGTQRL PRCLGVALAK ELIFTGRRLS GTEAHVLGLV51 NHAVAQNEEG DAAYQRARAL AQEILPQAPI AVRLGKVAID RGTEVDIASG101 MAIEGMCYAQ NIPTRDRLEG MAAFREKRTP KFVGKC：核苷酸及氨基酸组合序列(SEQ ID NO:3)克隆号和蛋白质名称：PP6起始编码子：1392 ATG 终止编码子：1799 TGA蛋白质分子量：14435.951 GT GAA ACA GGG TGA GTC TGG ACA TTC TGC AGT CAG CCA CTG TTC TTG 4748 GCT TCC AAC CAA AAG CAA AAC TAA GGC AAG GCA GAG CAC AGA GGG TGC 9596 TCA GGC AGA AGC TGC TTC CCC TCC TGG TGC AGC CAT TAG CTG CTG TAG 143144 TAT CTG TGA CCT GTC AGA ACC TGC TTC CTT CAT TTT GGG AAT ATT TGA 191192 CCA ACC TCA GAG CAA TTG CTG TTA CGA GCT AAG GAG GTC AAA GAG CAA 239240 TGT CCA GTC TTC CCA TTC TGT CCA AGT CAG ATT TAT CGA CCA TGT TTC 287288 GGA AAA AGG TGA GCC TCA GGG ATA GTT TGT CAA TGG CTG AGC TAA TCA 335336 CAA AGG TGC CTG GGC AGG AAT ACT GGC ACC AGC CAA ATT TGC ATT ACT 383384 TGT TCT GAG CAA TTG AGC TTT GTT TGA AGA ATG GGA GGG GAT AAA GAA 431432 GAT AAC TGA TCA TTT TCT CAG GTG ACT GAC CTG GTG ATT AGG AGC AGC 479480 CTT CTT GGA TGC AGT TAG GCA AAG TCT GAA TGT CTT CCC TTC TCC CCC 527528 CAC CGC TCT CTC CTG CCA CCC CAG GAG CAA CAT ATA AAA ATG TGT AGC 575576 TCC AGG CAT GAA AGT AGC TTC TGT CTA CAC AAT GCA GGT CAA AGA GAA 623624 GGA ACT GAC CAG GTG TCC AGG CAC CAA AAT ACC AGG CTG GTC TAG CCC 671672 CAA CTC TCC TTC TCA CAT GCC CAC GTT CAC GCA ACT AAC TCA CAG GGT 719 720 TTT GGG GAA GAC TAA GAC GGA GTG AAT GTA AAA CCC ACT CCC TTC TGC 767768 CCA CGT TCA CAT GGT CCA TGC TGA GGG AAT TCA GAA AAG GAG ACA GAC 815816 CCG GGG GGG TGC GTC AGT CAA GGC AAG TTT CTC GAA GGA AGG AAG CAG 853864 AAC TCA GGA GGA CAT GGA CTG GAA CAG TCA GGG CAA TTT CAG GCT GTG 911912 ACA AAG CTG GAA CGG ACG ACT GTA GCA GGA GCA GGA GTC ACT GAC ATT 959960 CTA GGC CAG GCC AGG GCT AAG CCA GAG AAC CTA TTA ATA GTA ATC CAC 10071008 AAA TAG ATA TGG GGC ACC TCC TAG GAA CTC TCC TTG TTC CAA GCG TCG 10551056 TAC CTC GTG TGA TCC TTA GCG GCT CTC TGA AGC AGA CAG AAG AGG GCC 11031104 AGC CAT CTT TCT TCC ACC TTT GAG GCT TGG GAA GGG TGA GAC TTG CTG 11511152 GTG ACT TAC AAC TCC ATC AAA GGG GCA TGG TGA AAT AAG GGC CTG GGC 11991200 TCC TGA CTT CTG GGC TAG GGC TCT TCC AAA GGC AGA GTC TGG AGA GGC 12471248 CTG GCT GTG GCC AGA CCA TGG GGC AAG TGG CTA GAG GGG CGA GTA GAC 12951296 AGC AGA GGC AGC TGT GGC CCC CGG GAT TAG CAC TGG GGG ACC GGA TGG 13431344 GGG AGG GAG GCC TCA CTT TGT TCT ATC TGA GCA GCT TCC TCG GCA GTC 13911392 ATG GGA CTG ATT GAG ACC ACG CGA GGG CTC CTC CCG GGG GCA GGA GGG 14391 Met Gly Leu Ile Glu Thr Thr Arg Gly Leu Leu Pro Gly Ala Gly Gly 161440 ACT CAG AGG CTG CCC CGT TGT CTG GGG GTG GCC CTG GCG AAG GAG CTC 148717 Thr Gln Arg Leu Pro Arg Cys Leu Gly Val Ala Leu Ala Lys Glu Leu 321488 ATC TTC ACG GGC CGA CGA CTG AGT GGA ACT GAG GCC CAC GTA CTG GGG 153533 Ile Phe Thr Gly Arg Arg Leu Ser Gly Thr Glu Ala His Val Leu Gly 481536 CTG GTG AAT CAC GCT GTG GCC CAG AAC GAG GAG GGG GAC GCC GCC TAC 158349 Leu Val Asn His Ala Val Ala Gln Asn Glu Glu Gly Asp Ala Ala Tyr 641584 CAG CGG GCA CGA GCA CTG GCC CAG GAG ATC CTG CCC CAG GCC CCC ATT 163165 Gln Arg Ala Arg Ala Leu Ala Gln Glu Ile Leu Pro Gln Ala Pro Ile 801632 GCC GTG CGG CTG GGC AAA GTA GCC ATT GAC CGA GGA ACG GAG GTG GAC 167981 Ala Val Arg Leu Gly Lys Val Ala Ile Asp Arg Gly Thr Glu Val Asp 961680 ATT GCA TCT GGG ATG GCC ATT GAA GGG ATG TGC TAT GCC CAG AAT ATT 172797 Ile Ala Ser Gly Met Ala Ile Glu Gly Met Cys Tyr Ala Gln Asn Ile 1121728 CCA ACC CGG GAC CGG CTA GAG GGC ATG GCA GCC TTC AGG GAG AAG CGG 1775113 Pro Thr Arg Asp Arg Leu Glu Gly Met Ala Ala Phe Arg Glu Lys Arg 1281776 ACT CCC AAA TTT GTT GGC AAA TGA CCC CCA TTT TAA CCT TCA GCA TGG 1823129 Thr Pro Lys Phe Val Gly Lys *** 1361824 GAG ATG CAT GCC CTG AAG AGC AGG ATC CAG AAG GAA GAT TTG TGG CCA 18711872 GAT TGC CTT CAT CAT TTC ACC TCT CCA GAC TTC CAT TTC TTC ACA AGG 19191920 ATG ATG ATG GAA ATA AAA TGA CTG GCG TGA TGC CTG GAA CCA AGG TGC 19671968 TGA TCC TAC CAC CTA CTG CTA CCT TCC TTA GCT TCA CCC TGG CTA GAA 20152016 ATA ATC ACG AGG GTT GGG TTT GCT TTG GAA AAT GCC TGT CTC TCT ACT 20632064 TGA ATG ATA AAG AAT TAA ATT AGA AAA AAA AAA AAA AAA AA 2104

D:Blastp结果Query=PP6蛋白(135个氨基酸)>SP IN:045106 045106 caenorhabditis elegans.f56b3.5蛋白(片段).5/1999

长度=281

分值=131bits(326)，预期值=3e-30

相同性=66/128(51％)，相似性=93/128(72％)，缺口=5/128(3％)Query:1 MGLIETTRGLLPGAGGTQRLPRCLGVALAKELIFTGRRLSGTEAHVLGLVNHAVAQNEEG 60

MGL+ET L+PGAGG+QRL R +GVA AKELI+T L+G +A LG+VNH V NSbjct:158 MGLVETKWALIPGAGGSQRLYRIVGVAKAKELIYTAEVLNGADAAKLGVVNHVVEANP-- 215Query:61 DAAYQRARALAQEILPQAPIAVRLGKVAIDRGTEVDIASGMAIEGMCYAQNIPTRDRLEG 120

+++ +A++I+P+ PIAV+L K+AI+ G++ DI S +++E CYAQ + ++DRLEGSbjct:216 ---IEKSLEIARKIIPRGPIAVKLAKLAINLGSQTDITSALSVEQQCYAQIVHSKDRLEG 272Query:121 MAAFREKR 128

MAAF EKRSbjct:273 MAAFAEKR 2802．PP208A：核苷酸序列：(SEQ ID N0:4)长度：1587bp1 TGGCTCAACA ATGCCTTCCA GGATGTGGAG TCAGAGAACG TCAACGTGGT51 GAAGCGGCTG TTCAAGATCC AGAACCTCAA TGCCAGCACC GTCCGCACGG101 TGATGGTGGC CGACTGCAGC CGCTTCGACA GCCCTGACCT GCTGCTGGAA151 GCCGGTGACC CGGCCACGTC CCCCTGCCGC ATCTTTGACC TGGGCAGCGA201 CAACGAGGAG GTGGTGGCTG GCCCGGCCCC CGCCCACGCC AAGGAGGGCT251 TGCGGCACTT TCTGGACCGC GTGCTGGAGG GGCGGGCGCA GCACAGCTGT301 CGGAGCGCAT GCTAGAGACC AAGGTGCCGA GCTGCTGGCC CAGGGCACAC351 CAAGCCACCC GAGCGCAGTG CCACAGGCGC CAAGAGCAAG TACCTCATCT401 TCACCACTGG CTGCCTCACC TACTCCCCAC ACCAGATCGG CATCAAGCAG451 ATCCTGCCAC ACCAGATGAC CACGGCAGGG CCCCGTGCTG GGTGAGGGCC501 GGGGCTCCGA TGCCTTCTTC GACGCGCTGG ACCACGTCAT AGACATACAC551 GGACACATCA TCGGCATGGG CCTGTCGCCC GACAACAGGT ACCTGTACGT601 GAACAGCCGC GCCTGGCCCA ACGGTGCGGT GGTGGCCGAC CCCATGCAGC651 CGCCACCAAT CGCGGAGGAG ATTGACCTGC TGGTGTTCGA CCTCAAGACC701 ATGCGGGAGG TGAGGCGGGC TCTGCGTGCG CACCGCGCCT ACACGCCCAA751 CGACGAGTGC TTCTTCATCT TCCTGGACGT CAGCAGGGAC TTCGTGGCCA801 GCGGGGCGGA GGACCGGCAC GGCTACATCT GGGACCGCCA CTACAACATC851 TGTCTGGCCA GGCTGCGGCA CGAGGATGTG GTCAACTCAG TGGTCTTCAG901 TCCCCAGGAG CAGGAGCTGC TGCTCACGGC CAGCGACGAC GCCACCATCA951 AAGCCTGGCG CTCCCCACGC ACCATGCGCG TCCTCCAGGC ACCTCGCCCA1001 CGGCCTCGCA CCTTCTTCTC CTGGCTTGCC AGCCAGAGGC GCTGAGGTGT1051 GCTGGGTGCA CTGGACCACC GGGACCCCTT GAGGACATCG CCAGGCTCTG1101 TGGCTTTTTC CCGAGCGGGA GAGGTGGAGA TGCTTATAGC AGTTACGCCT1151 TAGGAAGGGG ACAACCAGGC CCCGCCACAC GCTCACACAC AAACCTGCTC1201 ACGCAGCTGT GATGCTTGGC ACGGGGTGGC CAGTGCAGAT GGAGCCCAAG1251 GCCCCCTCGG CCTCCTGGGC AACTTGGGGT ACACAGGATA CTGGGGGTGC1301 CGCTCCTCAC TCAACCCCAG GCTAGGGGTA CACCTGACCC AGCTGGCCTC1351 GGCCCGGGGC ACCTTCGGCT GGTCCTGTGG GGCCCTGGAC GGTGGCCCAG1401 TGGTGGCAGG GGCTGCTCCT GGCTGTGGTT GTGCGCCCGG GGCTTGGGAG1451 CGGCCGGTCA CGCTGCTGTG GGCCCGAGTG TGTTGCATGT CCACGCACCA1501 CCCGTTCAGG GCCCTGAATA AACAGTTGGC AACAGCCCAA AAAAAAAAAA1551 AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA AAAAAAB：氨基酸序列：PP208(SEQ ID NO:5)长度：159个氨基酸1 MGLSPDNRYL YVNSRAWPNG AVVADPMQPP PIAEEIDLLV FDLKTMREVR51 RALRAHRAYT PNDECFFIFL DVSRDFVASG AEDRHGYIWD RHYNICLARL101 RHEDVVNSVV FSPQEQELLL TASDDATIKA WRSPRTMRVL QAPRPRPRTF151 FSWLASQRRC：核苷酸及氨基酸组合序列(SEQ ID NO:6)克隆号和蛋白质名称：PP208起始编码子：566 ATG 终止编码子：1045 TGA蛋白质分子量：18544.091 T GGC TCA ACA ATG CCT TCC AGG ATG TGG AGT CAG AGA ACG TCA ACG 4647 TGG TGA AGC GGC TGT TCA AGA TCC AGA ACC TCA ATG CCA GCA CCG TCC 9495 GCA CGG TGA TGG TGG CCG ACT GCA GCC GCT TCG ACA GCC CTG ACC TGC 142143 TGC TGG AAG CCG GTG ACC CGG CCA CGT CCC CCT GCC GCA TCT TTG ACC 190191 TGG GCA GCG ACA ACG AGG AGG TGG TGG CTG GCC CGG CCC CCG CCC ACG 238239 CCA AGG AGG GCT TGC GGC ACT TTC TGG ACC GCG TGC TGG AGG GGC GGG 286287 CGC AGC ACA GCT GTC GGA GCG CAT GCT AGA GAC CAA GGT GCC GAG CTG 334335 CTG GCC CAG GGC ACA CCA AGC CAC CCG AGC GCA GTG CCA CAG GCG CCA 382383 AGA GCA AGT ACC TCA TCT TCA CCA CTG GCT GCC TCA CCT ACT CCC CAC 430431 ACC AGA TCG GCA TCA AGC AGA TCC TGC CAC ACC AGA TGA CCA CGG CAG 478479 GGC CCC GTG CTG GGT GAG GGC CGG GGC TCC GAT GCC TTC TTC GAC GCG 526527 CTG GAC CAC GTC ATA GAC ATA CAC GGA CAC ATC ATC GGC ATG GGC CTG 5741 Met Gly Leu 3575 TCG CCC GAC AAC AGG TAC CTG TAC GTG AAC AGC CGC GCC TGG CCC AAC 6224 Ser Pro Asp Ash Arg Tyr Leu Tyr Val Asn Ser Arg Ala Trp Pro Asn 19623 GGT GCG GTG GTG GCC GAC CCC ATG CAG CCG CCA CCA ATC GCG GAG GAG 67020 Gly Ala Val Val Ala Asp Pro Met Gln Pro Pro Pro Ile Ala Glu Glu 35671 ATT GAC CTG CTG GTG TTC GAC CTC AAG ACC ATG CGG GAG GTG AGG CGG 71836 Ile Asp Leu Leu Val Phe Asp Leu Lys Thr Met Arg Glu Val Arg Arg 51719 GCT CTG CGT GCG CAC CGC GCC TAC ACG CCC AAC GAC GAG TGC TTC TTC 76652 Ala Leu Arg Ala His Arg Ala Tyr Thr Pro Asn Asp Glu Cys Phe Phe 67767 ATC TTC CTG GAC GTC AGC AGG GAC TTC GTG GCC AGC GGG GCG GAG GAC 81468 Ile Phe Leu Asp Val Ser Arg Asp Phe Val Ala Ser Gly Ala Glu Asp 83815 CGG CAC GGC TAC ATC TGG GAC CGC CAC TAC AAC ATC TGT CTG GCC AGG 86284 Arg His Gly Tyr Ile Trp Asp Arg His Tyr Asn Ile Cys Leu Ala Arg 99863 CTG CGG CAC GAG GAT GTG GTC AAC TCA GTG GTC TTC AGT CCC CAG GAG 910100 Leu Arg His Glu Asp Val Val Asn Ser Val Val Phe Ser Pro Gln Glu 115911 CAG GAG CTG CTG CTC ACG GCC AGC GAC GAC GCC ACC ATC AAA GCC TGG 958116 Gln Glu Leu Leu Leu Thr Ala Ser Asp Asp Ala Thr Ile Lys Ala Trp 131959 CGC TCC CCA CGC ACC ATG CGC GTC CTC CAG GCA CCT CGC CCA CGG CCT 1006132 Arg Ser Pro Arg Thr Met Arg Val Leu Gln Ala Pro Arg Pro Arg Pro 1471007 CGC ACC TTC TTC TCC TGG CTT GCC AGC CAG ACG CGC TGA GGT GTG CTG 1054148 Arg Thr Phe Phe Ser Trp Leu Ala Ser Gln Arg Arg *** 1601055 GGT GCA CTG GAC CAC CGG GAC CCC TTG AGG ACA TCG CCA GGC TCT GTG 11021103 GCT TTT TCC CGA GCG GGA GAG GTG GAG ATG CTT ATA GCA GTT ACG CCT 11501151 TAG GAA GGG GAC AAC CAG GCC CCG CCA CAC GCT CAC ACA CAA ACC TGC 11981199 TCA CGC AGC TGT GAT GCT TGG CAC GGG GTG GCC AGT GCA GAT GGA GCC 12461247 CAA GGC CCC CTC GGC CTC CTG GGC AAC TTG GGG TAC ACA GGA TAC TGG 12941295 GGG TGC CGC TCC TCA CTC AAC CCC AGG CTA GGG GTA CAC CTG ACC CAG 13421343 CTG GCC TCG GCC CGG GGC ACC TTC GGC TGG TCC TGT GGG GCC CTG GAC 13901391 GGT GGC CCA GTG GTG GCA GGG GCT GCT CCT GGC TGT GGT TGT GCG CCC 14381439 GGG GCT TGG GAG CGG CCG GTC ACG CTG CTG TGG GCC CGA GTG TGT TGC 14861487 ATG TCC ACG CAC CAC CCG TTC AGG GCC CTG AAT AAA CAG TTG GCA ACA 15341535 GCC CAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA 15821583 AAA AA 1587

D:Blastp结果Query=PP208蛋白[基因=PP208](159个氨基酸)>SP_IN:096698 096698 drosophila melanogaster(果蝇).

lissencephaly-1(lisl homolog).8/1999长度=411分值=46.5bits(108)，预计值=le-04相同性=28/70(40％)，相似性=41/70(58％)，缺口=4/70(5％)Query:76 FVASGAEDRHGYIWDRHYNICLARLR-HEDVVNSVVFSPQEQELLLTASDDATIKAW-R 132

F+ASG+ D+ IWD +CL L H++ V + F P + L++ASDD TI+ W RSbjct:311 FLASGSRDKTIRIWDVSVGLCLLTLSGHDNWVRGLAFHP-GGKYLVSASDDKTIRVWDLR 369Query:133 SPRTMRVLQA 142

+R M+ L ASbjct:370 NKRCMKTLYA 379>SW:TUP1_CANAL P56093 candida albicans (yeast).transcriptional

repressor tup1.7/1998长度=514分值=43.8bits(101)，预计值=9e-04相同性=37/125(29％)，相似性=60/125(47％)，缺口=14/125(11％)Query:10 LYVNSRAW-PNGAVVADPMQPPPIAEEIDLLVFDLKTMREVRRALRAHRAYTPNDECFFI 68

LY+ S + P+G ++A AE+ + ++DL T R ++ LR H + + +Sbjct:258 LYIRSVCFSPDGKLLATG------AEDKLIRIWDLSTKRIIK-ILRGHE-----QDIYSL 305Query:69 FLDVSRDFVASGAEDRHGYIWDRHYNICLARLRHEDVVNSVVFSPQEQELLLTASDDATI 128

D + SG+ DR IWD + C L ED V +V SP + +L+ S D T+Sbjct:306 DFFPDGDRLVSGSGDRSVRIWDLRTSQCSLTLSIEDGVTTVAVSP-DGKLIAAGSLDRTV 364Query:129 KAWRS 133

+ W SSbjct:365 RVWDS 369>SW:YA3A_SCHPO Q09715 schizosaccharomyces pombe(fission yeast).

hypothetical 67.3 kd trp-asp repeats containing protein

c18b11.10 in chromosome i.7/1998长度=614分值=43.4bits(100)，预计值=0.001相同性=36/136(26％)，相似性=62/136(45％)，缺口=15/136(11％)Query:4 SPD-NRYLYVNSRAW-PNGAVVADPMQPPPIAEEIDLLVFDLKTMREVRRALRAHRAYTP 61

SPD +R LYV + A+ P+G + E+ + ++DL T + VR HSbjct:354 SPDPSRDLYVRTIAFSPDGKYLVTG------TEDRQIKLWDLSTQK-VRYVFSGHE---- 402Query:62 NDECFFIFLDVSRDFVASGAEDRHGYIWDRHYNICLARLRHEDVVNSVVFSPQEQELLLT 121

+ + + + F+ SG+ DR +WD C+ +L E+ V ++ SP +Q +Sbjct:403 -QDIYSLDFSHNGRFIVSGSGDRTARLWDVETGQCILKLEIENGVTAIAISPNDQ-FIAV 460Query:122 ASDDATIKAWRSPRTM 137

S D I+ W T+Sbjct:461 GSLDQIIRVWSVSGTL 476分值=37.1bits(84)，预计值=0.086相同性=28/89(31％)，相似性=42/89(46％)，缺口=13/89(14％)Query:58 AYTPNDECFFIFLDVSRDFVASGAEDRHGYIWDRHYNICLARLRHEDVVNSVVFSPQEQE 117

A +PND+ F+A G+ D+ +W + H++ V S+ FSP +Sbjct:450 AISPNDQ-----------FIAVGSLDQIIRVWSVSGTLVERLEGHKESVYSIAFSP-DSS 497Query:118 LLLTASDDATIKAWRSPRTMRV-LQAPRP 145

+LL+ S D TIK W T V L A +PSbjct:498 ILLSGSLDKTIKVWELQATRSVGLSAIKP 526>SP_IN:096995 096995 drosophila melanogaster (fruit fly).notchless

protein.5/1999长度=480分值=43.0bits(99)，预计值=0.002相同性=26/92(28％)，相似性=50/92(54％)，缺口=12/92(13％)Query:43 LKTMREVRRALRAHRAYTPNDECFFIFLDVSRDFVASGAEDRHGYIWDRHYNICLARLR- 101

L T AL+ ++A P++ + + S ++D Y+W + N C+ R+Sbjct:316 LSTEELQESALKRYQAVCPDEV----------ESLVSCSDDNTLYLWRNNQNKCVERMTG 365Query:102 HEDVVNSVVFSPQEQELLLTASDDATIKAWRS 133

H++VVN V +SP + +L+ +AS D +++ WR+Sbjct:366 HQNVVNDVKYSP-DVKLIASASFDKSVRLWRA 396分值=30.9 bits(68)，预计值=6.5相同性=25/97(25％)，相似性=44/97(44％)，缺口=3/97(3％)Query:38 LLVFDLKTMREVRRALRAHRAYTPNDECFFIFLDVSRDFVASGAEDRHGYIWDRHYNICL 97

++++D +T ++ R L H+ + D +AS + D IWD CLSbjct:177 IIIWDPETGQQKGRPLSGHKKHINCLAWEPYHRDPECRKLASASGDGDCRIWDVKLGQCL 236Query:98 ARLR-HEDVVNSVVFSPQEQELLLTASDDATIKAWRS 133

+ H + V +V + L+ T+S D T+K WR+Sbjct: 237 MNIAGHTNAVTAVRWGGAG--LIYTSSKDRTVKMWRA 271

3．PP451A：核苷酸序列：(SEQ ID NO:7)长度：1456bp1 GTCAACTTCA TCCACCTGAT CTTAGAAGCA CTAGTGGACG GCCCCCGCAT51 GCAGGCCTCA GCTCATGTGA CTCGGCCCTC TAAGAGGCCC AGCAAGATAG101 GGTTTGACGA GGTCTTTGTC ATCAGCCTGG CTCGCAGGCC TGACCGTCGG151 GAACGCATGC TCGCCTCGCT CTGGGAGATG GAGATCTCTG GGAGGGTGGT201 GGACGCTGTG GATGGCTGGA TGCTCAACAG CAGTGCCATC AGGAACCTCG251 GCGTAGACCT GCTCCCGGGC TACCAGGACC CTTACTCGGG CCGCACTCTG301 ACCAAGGGCG AGGTGGGCTG CTTCCTCAGC CATTACTCCA TCTGGGAAGA351 GGTGGTTGCC AGGGGCCTGG CCCGGGTCCT GGTGTTTGAG GATGACGTGC401 GCTTTGAGAG CAACTTCAGG GGGCGGCTGG AACGGCTGAT GGAGGATGTG451 GAAGCAGAGA AACTGTCTTG GGACCTGATC TACCTCGGAC GGAAGCAGGT501 GAACCCCTGA GAAGGAGACG GCCGTGGAGG GGCTGCCGGG CCTGGTGGTG551 GCTGGGTACT CCTACTGGAC GCTGGCCTAT GCCCTGCGTC TGGCGGGTGC601 CCGCAAGCTG CTGGCCTCAC AGCCTCTGCG CCGCATGCTG CCCGTGGACG651 AGTTCCTGCC CATCATGTTC GACCAGCACC CCAACGAGCA GTACAAGGCA701 CACTTCTGGC CACGGGACCT GGTGGCCTTC TCCGCCCAGC CCCTGCTCGC751 TGCCCCTACC CACTATGCCG GGGACGCCGA GTGGCTCAGT GACACGGAGA801 CATCCTCTCC ATGGGATGAT GACAGCGGCC GCCTCATCAG CTGGAGCGGC851 TCCCAAAAGA CCCTGCGCAG CCCCCGCCTG GACCTGACTG GCAGCAGCGG901 GCACAGCCTC CAACCCCAGC CCCGAGATGA GCTCTAGGTC CAGGTGATGA951 CTGCAAAGCA GTGTCCAGGA GCAGGCCACT ACTGCCCAGA GAGCAGAGGA1001 GGAGGTTGTT GCCAGGGACT GCAGATCCTG TCAGACCTGG CCACCACCTT1051 GGGCATGGCC ACTCTGCCCT CTGGACCTGT CTTTCATCGG GAGAAACCAC1101 TCAGAGATGG ATCCCATTCC CTAAAGGTCT CACAGCAAAG GAGCAGGACT1151 CCCAGGCCCC TGTACCCTGC CTGGCCTGAT TCAGGGCCTT GTGGCCCCCA1201 GCTTCTTGTT TCAAGCTGGG CAGACCCCAG GATCCCTTCC CTCCCTAAGG1251 ACTCAGCTGA GGGGCCCCTC TTGCCCCCTT CTTACCTCCA CCTCAGCACC1301 CTCCCCCAGC TTGATGTTTG GGTCTCCCCA GCACCCTCCT CCTTGGCCGG1351 TGCAAAGTAC AGGGAGGTAA AGCAGGACCC TTGCAGACAT GTTGCCCAGC1401 ACACAGTAGG CCCTCAATAA AAGCCATTTG CACTTTAAAA AAAAAAAAAA1451 AAAAAAB：氨基酸序列：(SEQ ID NO:8)长度：157个氨基酸1 MTAKQCPGAG HYCPESRGGG CCQGLQILSD LATTLGMATL PSGPVFHREK51 PLRDGSHSLK VSQQRSRTPR PLYPAWPDSG PCGPQLLVSS WADPRIPSLP101 KDSAEGPLLP PSYLHLSTLP QLDVWVSPAP SSLAGAKYRE VKQDPCRHVA151 QHTVGPQC：核苷酸及氨基酸组合序列(SEQ ID NO:9)克隆号和蛋白质名称：PP451起始编码子：947 ATG 终止编码子：1420 TAA蛋白质分子量：16819.291 G TCA ACT TCA TCC ACC TGA TCT TAG AAG CAC TAG TGG ACG GCC CCC 4647 GCA TGC AGG CCT CAG CTC ATG TGA CTC GGC CCT CTA AGA GGC CCA GCA 9495 AGA TAG GGT TTG ACG AGG TCT TTG TCA TCA GCC TGG CTC GCA GGC CTG 142 143 ACC GTC GGG AAC GCA TGC TCG CCT CGC TCT GGG AGA TGG AGA TCT CTG 190191 GGA GGG TGG TGG ACG CTG TGG ATG GCT GGA TGC TCA ACA GCA GTG CCA 238239 TCA GGA ACC TCG GCG TAG ACC TGC TCC CGG GCT ACC AGG ACC CTT ACT 286287 CGG GCC GCA CTC TGA CCA AGG GCG AGG TGG GCT GCT TCC TCA GCC ATT 334335 ACT CCA TCT GGG AAG AGG TGG TTG CCA GGG GCC TGG CCC GGG TCC TGG 382383 TGT TTG AGG ATG ACG TGC GCT TTG AGA GCA ACT TCA GGG GGC GGC TGG 430431 AAC GGC TGA TGG AGG ATG TGG AAG CAG AGA AAC TGT CTT GGG ACC TGA 478479 TCT ACC TCG GAC GGA AGC AGG TGA ACC CCT GAG AAG GAG ACG GCC GTG 526527 GAG GGG CTG CCG GGC CTG GTG GTG GCT GGG TAC TCC TAC TGG ACG CTG 574575 GCC TAT GCC CTG CGT CTG GCG GGT GCC CGC AAG CTG CTG GCC TCA CAG 622623 CCT CTG CGC CGC ATG CTG CCC GTG GAC GAG TTC CTG CCC ATC ATG TTC 670671 GAC CAG CAC CCC AAC GAG CAG TAC AAG GCA CAC TTC TGG CCA CGG GAC 718719 CTG GTG GCC TTC TCC GCC CAG CCC CTG CTC GCT GCC CCT ACC CAC TAT 766767 GCC GGG GAC GCC GAG TGG CTC AGT GAC ACG GAG ACA TCC TCT CCA TGG 814815 GAT GAT GAC AGC GGC CGC CTC ATC AGC TGG AGC GGC TCC CAA AAG ACC 862863 CTG CGC AGC CCC CGC CTG GAC CTG ACT GGC AGC AGC GGG CAC AGC CTC 910911 CAA CCC CAG CCC CGA GAT GAG CTC TAG GTC CAG GTG ATG ACT GCA AAG 9581 Met Thr Ala Lys 4959 CAG TGT CCA GGA GCA GGC CAC TAC TGC CCA GAG AGC AGA GGA GGA GGT 10065 Gln Cys Pro Gly Ala Gly His Tyr Cys Pro Glu Ser Arg Gly Gly Gly 201007 TGT TGC CAG GGA CTG CAG ATC CTG TCA GAC CTG GCC ACC ACC TTG GGC 105421 Cys Cys Gln Gly Leu Gln Ile Leu Ser Asp Leu Ala Thr Thr Leu Gly 361055 ATG GCC ACT CTG CCC TCT GGA CCT GTC TTT CAT CGG GAG AAA CCA CTC 110237 Met Ala Thr Leu Pro Ser Gly Pro Val Phe His Arg Glu Lys Pro Leu 521103 AGA GAT GGA TCC CAT TCC CTA AAG GTC TCA CAG CAA AGG AGC AGG ACT 115053 Arg Asp Gly Ser His Ser Leu Lys Val Ser Gln Gln Arg Ser Arg Thr 681151 CCC AGG CCC CTG TAC CCT GCC TGG CCT GAT TCA GGG CCT TGT GGC CCC 119869 Pro Arg Pro Leu Tyr Pro Ala Trp Pro Asp Ser Gly Pro Cys Gly Pro 841199 CAG CTT CTT GTT TCA AGC TGG GCA GAC CCC AGG ATC CCT TCC CTC CCT 124685 Gln Leu Leu Val Ser Ser Trp Ala Asp Pro Arg Ile Pro Ser Leu Pro 1001247 AAG GAC TCA GCT GAG GGG CCC CTC TTG CCC CCT TCT TAC CTC CAC CTC 1294101 Lys Asp Ser Ala Glu Gly Pro Leu Leu Pro Pro Ser Tyr Leu His Leu 1161295 AGC ACC CTC CCC CAG CTT GAT GTT TGG GTC TCC CCA GCA CCC TCC TCC 1342117 Ser Thr Leu Pro Gln Leu Asp Val Trp Val Ser Pro Ala Pro Ser Ser 1321343 TTG GCC GGT GCA AAG TAC AGG GAG GTA AAG CAG GAC CCT TGC AGA CAT 1390133 Leu Ala Gly Ala Lys Tyr Arg Glu Val Lys Gln Asp Pro Cys Arg His 1481391 GTT GCC CAG CAC ACA GTA GGC CCT CAA TAA AAG CCA TTT GCA CTT TAA 1438149 Val Ala Gln His Thr Val Gly Pro Gln *** 1581439 AAA AAA AAA AAA AAA AAA 14564．PP624A：核苷酸序列：(SEQ ID NO:10)长度：1754bp1 AGATGACCTG GAAATAGGCC CAGGTCAGTT GTCATCTTCT ACATTTGACT51 CGGAGAAAAA TGAGAGTAGA CGAAATCTGG AACTTCCACG CCTCTCAGAA101 ACCTCTATAA AGGATCGAAT GGCCAAGTAC CAGGCAGCTG TGTCCAAACA151 AAGCAGCTCA ACCAACTATA CAAATGAGCT GAAAGCCAGT GGTGGCGAAA201 TCAAAATTCA TAAAATGGAG CAAAAGGAGA ATGTGCCCCC AGGTCCTGAG251 GTCTGCATCA CCCATCAGGA AGGGGAAAAG ATTTCTGCAA ATGAGAATAG301 CCTGGCAGTC CGTTCCACCC CTGCCGAAGA TGACTCCCGT GACTCCCAGG351 TTAAGAGTGA GGTTCAACAG CCTGTCCATC CCAAGCCACT AAGTCCAGAT401 CTCCAGAGCC TCCAGTCTTT CTGAAAGTTC TCCTCCCAAA GCAATGAAGA451 AGTTTCAGGC ACCTGCAAGA GAGACCTGCG TGGAATGTCA GAAGACAGTC501 TATRCAATGG AGCGTCTCTT GGCCAACCAG CAGGTGTTTC ACATCAGCTG551 CTTRCGTTGC TRCTATTGCA KCAACAAACT CAGTCTAGGA ACATATGCAT601 CTTTACATGG AAGAATCTAT TGTAAGCCTC ACTTCAATCA ACTCTTTAAA651 TCTAAGGGCA ACTATGATGA AGGCTTTGGG CACAGACCAC ACAAGGATCT701 ATGGGCAAGC AAAAATGAAA ACGAAGAGAT TTTGGAGAGA CCAGCCCAGC751 TTGCAAATGC AAGGGAGACC CCTCACAGCC CAGGGGTAGA AGATGCCCCT801 ATTGCTAAGG TGGGTGTCCT GGCTGCAAGT ATGGAAGCCA AGGCCTCCTC851 TCAGCAGGAG AAGGAAGACA AGCCAGCTGA AACCAAGAAG CTGAGGATCG901 CCTGGCCACC CCCCACTGAA CTTGGAAGTT CAGGAAGTGC CTTGGAGGAA951 GGGATCAAAA TGTCAAAGCC CAAATGGCCT CCTGAAGACG AAATCAGCAA1001 GCCCGAAGTT CCTGAGGATG TCGATCTAGA TCTGAAGAAG CTAAGACGAT1051 CTTCTTCACT GAAGGAAAGA AGCCGCCCAT TCACTGTAGC AGCTTCATTT1101 CAAAGCACCT CTGTCAAGAG CCCAAAAACT GTGTCCCCAC CTATCAGGAA1151 AGGCTGGAGC ATGTCAGAGC AGAGTGAAGA GTCTGTGGGT GGAAGAGTTG1201 CAGAAAGGAA ACAAGTGGAA AATGCCAAGG CTTCTAAGAA GAATGGGAAT1251 GTGGGAAAAA CAACCTGGCA AAACAAAGAA TCTAAAGGAG AGCAGGGAAG1301 AGAAGTAAGG AAGGTCATAG TTTGGAGATG GAGAATGAGA ATCTTGTAGA1351 AAATGGTGCA GACTCCGATG AAGATGATAA CAGCTTCCTC AAACAACAAT1401 CTCCACAAGA ACCCAAGTCT CTGAATTGGT CGAGTTTTGT AGACAACACC1451 TTTGCTGAAG AATTCACTAC TCAGAATCAG AAATCCCAGG ATGTGGAACT1501 CTGGGAGGGA GAAGTGGTCA AAGAGCTCTC TGTGGAAGAA CAGATAAAGA1551 GAAATCGGTA TTATGATGAG GATGAGGATG AAGAGTGACA AATTGCAATG1601 ATGCTGGGCC TTAAATTCAT GTTAGTGTTA GCGAGCCACT GCCCTTTGTC1651 AAAATGTGAT GCACATAAGC AGGTATCCCA GCATGAAATG TAATTTACTT1701 GGAAGTAACT TTGGAAAAGA ATTCCTTCTT AAAATCAAAA AAAAAAAAAA1751 AAAAB：氨基酸序列：(SEQ ID NO:11)长度：301个氨基酸1 MKKFQAPARE TCVECQKTVY XMERLLANQQ VFHISCLRCX YCXNKLSLGT51 YASLHGRIYC KPHFNQLFKS KGNYDEGFGH RPHKDLWASK NENEEILERP101 AQLANARETP HSPGVEDAPI AKVGVLAASM EAKASSQQEK EDKPAETKKL151 RIAWPPPTEL GSSGSALEEG IKMSKPKWPP EDEISKPEVP EDVDLDLKKL201 RRSSSLKERS RPFTVAASFQ STSVKSPKTV SPPIRKGWSM SEQSEESVGG251 RVAERKQVEN AKASKKNGNV GKTTWQNKES KGEQGREVRK VIVWRWRMRI301 LC：核苷酸及氨基酸组合序列(SEQ ID NO:12)克隆号和蛋白质名称：PP624起始编码子：444 ATG 终止编码子：1349 TAG蛋白质分子量：33999.271 AG ATG ACC TGG AAA TAG GCC CAG GTC AGT TGT CAT CTT CTA CAT TTG 4748 ACT CGG AGA AAA ATG AGA GTA GAC GAA ATC TGG AAC TTC CAC GCC TCT 9596 CAG AAA CCT CTA TAA AGG ATC GAA TGG CCA AGT ACC AGG CAG CTG TGT 143144 CCA AAC AAA GCA GCT CAA CCA ACT ATA CAA ATG AGC TGA AAG CCA GTG 191192 GTG GCG AAA TCA AAA TTC ATA AAA TGG AGC AAA AGG AGA ATG TGC CCC 239240 CAG GTC CTG AGG TCT GCA TCA CCC ATC AGG AAG GGG AAA AGA TTT CTG 287288 CAA ATG AGA ATA GCC TGG CAG TCC GTT CCA CCC CTG CCG AAG ATG ACT 335336 CCC GTG ACT CCC AGG TTA AGA GTG AGG 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Asn Glu Glu Ile Leu Glu Arg Pro Ala Gln Leu Ala Asn Ala Arg Glu 108768 ACC CCT CAC AGC CCA GGG GTA GAA GAT GCC CCT ATT GCT AAG GTG GGT 815109 Thr Pro His Ser Pro Gly Val Glu Asp Ala Pro Ile Ala Lys Val Gly 124816 GTC CTG GCT GCA AGT ATG GAA GCC AAG GCC TCC TCT CAG CAG GAG AAG 863125 Val Leu Ala Ala Ser Met Glu Ala Lys Ala Ser Ser Gln Gln Glu Lys 140864 GAA GAC AAG CCA GCT GAA ACC AAG AAG CTG AGG ATC GCC TGG CCA CCC 911141 Glu Asp Lys Pro Ala Glu Thr Lys Lys Leu Arg Ile Ala Trp Pro Pro 156912 CCC ACT GAA CTT GGA AGT TCA GGA AGT GCC TTG GAG GAA GGG ATC AAA 959157 Pro Thr Glu Leu Gly Ser Ser Gly Ser Ala Leu Glu Glu Gly Ile Lys 172960 ATG TCA AAG CCC AAA TGG CCT CCT GAA GAC GAA ATC AGC AAG CCC GAA 1007173 Met Ser Lys Pro Lys Trp Pro Pro Glu Asp Glu Ile Ser Lys Pro Glu 1881008 GTT CCT GAG GAT GTC GAT CTA GAT CTG AAG AAG CTA AGA CGA TCT TCT 1055189 Val Pro Glu Asp Val Asp Leu Asp Leu Lys Lys Leu Arg Arg Ser Ser 2041056 TCA CTG AAG GAA AGA AGC CGC CCA TTC ACT GTA GCA GCT TCA TTT CAA 1103205 Ser Leu Lys Glu Arg Ser Arg Pro Phe Thr Val Ala Ala Ser Phe Gln 2201104 AGC ACC TCT GTC AAG AGC CCA AAA ACT GTG TCC CCA CCT ATC AGG AAA 1151221 Ser Thr Ser Val Lys Ser Pro Lys Thr Val Ser Pro Pro Ile Arg Lys 2361152 GGC TGG AGC ATG TCA GAG CAG AGT GAA GAG TCT GTG GGT GGA AGA GTT 1199237 Gly Trp Ser Met Ser Glu Gln Ser Glu Glu Ser Val Gly Gly Arg Val 2521200 GCA GAA AGG AAA CAA GTG GAA AAT GCC AAG GCT TCT AAG AAG AAT GGG 1247253 Ala Glu Arg Lys Gln Val Glu Asn Ala Lys Ala Ser Lys Lys Asn Gly 2681248 AAT GTG GGA AAA ACA ACC TGG CAA AAC AAA GAA TCT AAA GGA GAG CAG 1295269 Asn Val Gly Lys Thr Thr Trp Gln Asn Lys Glu Ser Lys Gly Glu Gln 2841296 GGA AGA GAA GTA AGG AAG GTC ATA GTT TGG AGA TGG AGA ATG AGA ATC 1343285 Gly Arg Glu Val Arg Lys Val Ile Val Trp Arg Trp Arg Met Arg Ile 3001344 TTG TAG AAA ATG GTG CAG ACT CCG ATG AAG ATG ATA ACA GCT TCC TCA 1391301 Leu *** 3021392 AAC AAC AAT CTC CAC AAG AAC CCA AGT CTC TGA ATT GGT CGA GTT TTG 14391440 TAG ACA ACA CCT TTG CTG AAG AAT TCA CTA CTC AGA ATC AGA AAT CCC 14871488 AGG ATG TGG AAC TCT GGG AGG GAG AAG TGG TCA AAG AGC TCT CTG TGG 15351536 AAG AAC AGA TAA AGA GAA ATC GGT ATT ATG ATG AGG ATG AGG ATG AAG 15831584 AGT GAC AAA TTG CAA TGA TGC TGG GCC TTA AAT TCA TGT TAG TGT TAG 16311632 CGA GCC ACT GCC CTT TGT CAA AAT GTG ATG CAC ATA AGC AGG TAT CCC 16791680 AGC ATG AAA TGT AAT TTA CTT GGA AGT AAC TTT GGA AAA GAA TTC CTT 17271728 CTT AAA ATC AAA AAA AAA AAA AAA AAA 1754

5．PP722A：核苷酸序列：(SEQ ID NO:13)长度：1690bp1 GTCTGACCCA GGCCTGCCTC CCTTCCCTAG GCCTGGCTCC TTCTGTTGAC51 ATGGGAGATT TTAGCTCATC TTGGGGGCCT CCTTAAACAC CCCCATTTCT101 TGCGGAAGAT GCTCCCCATC CCACTGACTG CTTGACCTTT ACCTCCAACC151 CTTCTGTTCA TCGGGAGGGC TCCACCAATT GAGTCTCTCC CACCATGCAT201 GCAGGTCACT GTGTGTGTGC ATGTGTGCCT GTGTGAGTGT TGACTGACTG251 TGTGTGTGTG GAGGGGTGAC TGTCCGTGGA GGGGTGACTG TGTCCGTGGT301 GTGTATTATG CTGTCATATC AGAGTCAAGT GAACTGTGGT GTATGTGCCA351 CGGGATTTGA GTGGTTGCCG TGGGCAACAC TGTCAGGGTT TGGCGTGTGT401 GTCATGTGGC TGTGTGTGAC CTCTGCCTGA AAAAGCAGGT ATTTTCTCAG451 ACCCCAGAGC AGTATTAATG ATGCAGAGGT TGGAGGAGAG AGGTGGAGAC501 TGTGGCTCAG ACCCAGGTGT GCGGGCATAG CTGGAGCTGG AATCTGCCTC551 CGGTGTGAGG GAACCTGTCT CCTACCACTT CGGAGCCATG GGGGCAAGTG601 TGAAGCAGCC AGTCCCTGGG TCAGCCAGAG GCTTGAACTG TTACAGAAGC651 CCTCTGCCCT CTGGTGGCCT CTGGGCCTGC TGCATGTACA TATTTTCTGT701 AAATATACAT GCGCCGGGAG CTTCTTGCAG GAATACTGCT CCGAATCACT751 TTTAATTTTT TTCTTTTTTT TTTCTTGCCC TTTCCATTAG TTGTATTTTT801 TATTTATTTT TATTTTTATT TTTTTTTAGA GATGGAGTCT CACTATGTTG851 CTCAGGCTGG CCTTGAACTC CTGGGCTCAA GCAATCCTCC TGCCTCAGCC901 TCCCTAGTAG CTGGGACTTT AAGTGTACAC CACTGTGCCT GCTTTGAATC 951 CTTTACGAAG AGAAAAAAAA AATTAAAGAA AGCCTTTAGA TTTATCCAAT1001 GTTTACTACT GGGATTGCTT AAAGTGAGGC CCCTCCAACA CCAGGGGGTT1051 AATTCCTGTG ATTGTGAAAG GGGCTACTTC CAAGGCATCT TCATGCAGGC1101 AGCCCCTTGG GAGGGCACCT GAGAGCTGGT AGAGTCTGAA ATTAGGGATG1151 TGAGCCTCGT GGTTACTGAG TAAGGTAAAA TTGCATCCAC CATTGTTTGT1201 GATACCTTAG GGAATTGCTT GGACCTGGTG ACAAGGGCTC CTGTTCAATA1251 GTGGTGTTGG GGAGAGAGAG AGCAGTGATT ATAGACCGAG AGAGTAGGAG1301 TTGAGGTGAG GTGAAGGAGG TGCTGGGGGT GAGAATGTCG CCTTTCCCCC1351 TGGGTTTTGG ATCACTAATT CAAGGCTCTT CTGGATGTTT CTCTGGGTTG1401 GGGCTGGAGT TCAATGAGGT TTATTTTTAG CTGGCCCACC CAGATACACT1451 CAGCCAGAAT ACCTAGATTT AGTACCCAAA CTCTTCTTAG TCTGAAATCT1501 GCTGGATTTC TGGCCTAAGG GAGAGGCTCC CATCCTTCGT TCCCCAGCCA1551 GCCTAGGACT TCGAATGTGG AGCCTGAAGA TCTAAGATCC TAACATGTAC1601 ATTTTATGTA AATATGTGCA TATTTGTACA TAAAATGATA TTCTGTTTTT1651 AAATAAACAG ACAAAACTTG AAAAAAAAAA AAAAAAAAAAB：氨基酸序列：PP722(SEQ ID NO:14)长度：137个氨基酸1 MRRELLAGIL LRITFNFFLF FFLPFPLVVF FIYFYFYFFL EMESHYVAQA51 GLELLGSSNP PASASLVAGT LSVHHCACFE SFTKRKKKLK KAFRFIQCLL101 LGLLKVRPLQ HQGVNSCDCE RGYFQGIFMQ AAPWEGTC：核苷酸及氨基酸组合序列(SEQ ID NO:14)克隆号和蛋白质名称：PP722起始编码子：709 ATG 终止编码子：1122 TGA蛋白质分子量：15824.941 GTC TGA CCC AGG CCT GCC TCC CTT CCC TAG GCC TGG CTC CTT CTG TTG 4849 ACA TGG GAG ATT TTA GCT CAT CTT GGG GGC CTC CTT AAA CAC CCC CAT 9697 TTC TTG CGG AAG ATG CTC CCC ATC CCA CTG ACT GCT TGA CCT TTA CCT 144145 CCA ACC CTT CTG TTC ATC GGG AGG GCT CCA CCA ATT GAG TCT CTC CCA 192193 CCA TGC ATG CAG GTC ACT GTG TGT GTG CAT GTG TGC CTG TGT GAG TGT 240241 TGA CTG ACT GTG TGT GTG TGG AGG GGT GAC TGT CCG TGG AGG GGT GAC 288289 TGT GTC CGT GGT GTG TAT TAT GCT GTC ATA TCA GAG TCA AGT GAA CTG 336337 TGG TGT ATG TGC CAC GGG ATT TGA GTG GTT GCC GTG GGC AAC ACT GTC 384385 AGG GTT TGG CGT GTG TGT CAT GTG GCT GTG TGT GAC CTC TGC CTG AAA 432433 AAG CAG GTA TTT TCT CAG ACC CCA GAG CAG TAT TAA TGA TGC AGA GGT 480481 TGG 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6．PP902A：核苷酸序列：(SEQ ID NO:16)长度：2136bp1 TGTCGCTGCC GGAGAGTCTC TGCTTCCCCC TTCCTACGCG CTCCGCGGCG51 GTAGCTCGGG CTCTCCGGAG GAGGGGGCGA CAGAGAAAAA GAGAGGCTGA101 CTTAATAAAG TTTCCTGAAA CAACAACTAC CACCGAAAAG GCCCAAGGTG151 GGGGGAGACC CCCATTTTCC TCCGCCCCTC TCCTAAAGCC TGAGGGACCG201 TTGCAGGTGG AGCGGCGCTG GTGGGACCCG GGTTGCGGCG GCAGCCGTTG251 CCCCGGCGAG GGAAGCCTCA GGTCCTGCCC GCTCCGGTTC CGGCTCCTTC301 GGTGGTGGCG GCGGCAGCTG CTGCCGGGCG GTTCCTCCTG TCAACTGCCT351 CCGCCCGCGC GCCTCCCGCC TAGCCACACA GCGCGGAGGA CGCCGTGAGC401 CGCCGCCGCA GTCGTCTCGG CCCGCGGAGG GACGTGGTGA GCTGTGGCGC451 TTCCGCGTCA GCGCCGGCGG GGACTCTTTG GGAGCGCGTC GGGCCCGAGT501 CCGGGTTCCC CCGCGTGGTC AGCGGAGGCT GCGCCAGGTG GGGCCCGCAG551 CCGCCTCCCA CGCCAGGCTG TCCCCGCGGC CGCCCGGCCT GCCTTCCTTC601 CTTCCGCCCG CCCGCCGGCC CGCCCTAAGA GTTGACCACG CCGCAATGAA651 GAGCTTCTTA CAGTGAAAGC AAAGTAGGTC GAGTCCACTG AAAATGCCTT701 TAAGGGACAA ATACTGTCAG ACTGACCACC ATCATCACGG ATGCTGTGAA751 CCAGTTTATA TCCTGGAACC TGGAGATCCT CCTTTGTTAC AGCAACCACT801 ACAGACATCC AAATCTGGTA TTCAACAAAT 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7．PP1628A：核苷酸序列：(SEQ ID NO:19)长度：1913bp1 GCTGGGAGCA CACACGCTGG GACCTATGTG TTTGTGTGGT CGTTCCAAAC51 TGCCCCAGGG CTTTGGGGGC GGCACTTGGG GTTTCTGGGA ATGACATCAT101 CTCTGTTCCC CATCCCCAGT AGTTTACATT CCTGACTTCT GAATACAGCA151 CAGCTGAGCC CCCTGCAGCT CCCATCTCCA GCTATTCCTA GGCAAAGAGC201 CTCATGGCTA AGGCAGCCTC AAAGCCAGCC CCTCCTCCCA CCTATTCTGA251 GTAGCTGCAG AGGCCTTGGG TCCAGGCTCT AGGTTCATCC CTCAGTTGGG301 GGGAACGTAG GACCCAGCTG GAGCCTCTTG AGGGAGATGA GAGGCCTCTT351 TGTGAGGAGG ACATTAGCTG TGTGGCCTCT CTCTCTTTGG CCCTGTTTCC401 TTTTTTGCAA AACAAGGACA TTTTCTGCAG CCCCTTCCTC TCAGTGAGCT451 ATGATTGGAG GGCTTAGGTC TGGAGGATTC AAGAGTGGGA AGAGGAATTT501 AAGGGGGTCC CCTAGTCTAG TCTCTGCCCC TGGATAGTGT CCAGCCTTTA551 TATTTCTGAA GAGGTGGATC CCAGAGTGGC TCTGATGTCC ACATTAGAAA601 AGCTTACTTG TAATGATCAT GTCAGCCTTC AGAAGAGAAT CCCCACCAAC651 TTCTGTGCCT CCTCAGATGG GGATTTATCT GGATCTCTGT GGTTCCTTCT701 CAGCCGAAAC AGGTCCAGTA TCCCAGTCAT TTCTTCAAAT GCTGATAGGG751 GTATGTTGGA ATCCGAAGCC ACTTCCCCGC CTTCAAGCCC CAGATGGGCT801 GCTCTCCTGT AACTTTCTAG GAGAAGAGAC 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D:Blastp结果Query=PP1628[基因=PP1628](136个氨基酸)>SP_IN:Q24146 Q24146 drosophila melanogaster(fruit fly).h1h106.

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A EVQSbjct:260 PSPAAMEVQ 268

8．PP1650A：核苷酸序列：(SEQ ID NO:22)长度：1494bp1 TCTTTGTTCT GTCCCCGGTG TGTGGGTCTG TGACAGGGTC CAACAGGGCC51 TGGTCCGTGT CCGGTCCCCC AAATCTGTCG TCCCTGCCCC CAGGCATTGG101 CATCAACAAA AGTCAGAATT CCCGGGAACT TGAACAGAGG CTGCTAAATT151 CCCAGTAATT GCTCCTTTGG CCTTCTAGGG ACTGACTTCA AAGAAGGAAG201 GAAAGAATCA GGCAGTGCTT CCTCATTCTC TTTTAAAACC CGCTTCCCGC251 TGAGTCTGCA CCCAGGAGAC CAGAGAGCAC CTTGCCCTTC CATGGAAACT301 CAGGCTGATC TCGTATCTCA GGAACCTCAG GCCCTGCTTG ACAGTGCTCT351 TCCTTCAAAA GTTCCTGCCT TTTCCGACAA GGACAGCCTG GGGGATGAGA401 TGTTGGCGGC TGCGCTCCTA AAGGCCAAGT CCCAGGAGCT GGTAACCTTT451 GAGGATGTAG CTGTGTACTT CATCCGGAAG GAGTGGAAGC GTTTGGAACC501 TGCTCAGAGG GACCTCTATA GAGATGTGAT GCTGGAGAAT TACGGGAATG551 TGTTCTCACT GGACTGGATA CACGTCTGTT TAACTACGCA AAAGGTAATG601 CTGGCATGGC TTACTGGGAC CCTAAGTGTG GCGAAGGGAC TCTGCTCCAG651 TGAACTGGCG AGTGTGGAAC CTCCTGACAC CTTCTGAGGA CCTCCTGCCT701 GCCATGTTGC TGTGGAGCTC GCACTCCTCA GGCATCCCCT GATGTTGAGT751 GATACAAACT CTATCACCGG AATCGATGCT GCTGCAATGA CAAGACTTCT801 TTCTGGTTTT CAGATTCTAA AGTTTAAAAC AACGACAACA ACAGGAGCGC851 TTGAAAGTTA CGGTGCTTCT CCCTCTCCAG TGTGGACTCG CTGATGTTTG901 GAAAGATTGG ACTTGCTACA GAAGGTCTTT CCACAGTGAT GACACCAGTA951 GGGCTTTTCC CCGGTGTGGA TTCTGTGGTG TTTATTGAAG TTGGAGCTGT1001 GGTTGAAGGC TTTCCCACAC TCCTTACACT TATATGGCTT CTCTCCGGTG1051 TGGAGTCTCT GGTGGGAGCT GAGGCCCGCA TGCTGACTGA AGCTCTTCCC1101 ACATTCGTTA CACTGATAAG GCTTCTCCCC AGTGTGGATC CGATAGTGAC1151 GAATGAGGCT GCCTTTCCCG CTGAAAGCCT TGCCACAATC TTTGCACTGA1201 TATGGCGCCT CTTCTGTGTG CATTCTCTGA TGTTTAAGAA GGTCTGAGCT1251 CTGCCCAAAA GCTTTTCCAC ACTTACAGTC ATAGGGCCGG TCCACCAAGT1301 GTGTTCTGTA GTGGAGGGTG AGGTTTGAGC TGTGGCTGAA AGCTTTCCCA1351 CACTTGGTGC ACACGTAAGG TTTCTCCCCA GTGTGTGTTC TCCTGTGTTT1401 GGTGAGATTT GAGCTATTAC TAAAGGCTTT GCCACATTCA GCCCAAAAAA1451 AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA AAAAB：氨基酸序列：(SEQ ID NO:23)长度：131个氨基酸1 METQADLVSQ EPQALLDSAL PSKVPAFSDK DSLGDEMLAA ALLKAKSQEL51 VTFEDVAVYF IRKEWKRLEP AQRDLYRDVM LENYGNVFSL DWIHVCLTTQ101 KVMLAWLTGT LSVAKGLCSS ELASVEPPDT FC：核苷酸及氨基酸组合序列(SEQ ID NO:24)克隆号和蛋白质名称：PP1650起始编码子：292 ATG 终止编码子：687 TGA蛋白质分子量：14625.94 1 TCT TTG TTC TGT CCC CGG TGT GTG GGT CTG TGA CAG GGT CCA ACA GGG 4849 CCT GGT CCG TGT CCG GTC CCC CAA ATC TGT CGT CCC TGC CCC CAG GCA 9697 TTG GCA TCA ACA AAA GTC AGA ATT CCC GGG AAC TTG AAC AGA GGC TGC 144145 TAA ATT CCC AGT AAT TGC TCC TTT GGC CTT CTA GGG ACT GAC TTC AAA 192193 GAA GGA AGG AAA GAA TCA GGC AGT GCT TCC TCA TTC TCT TTT AAA ACC 240241 CGC TTC CCG CTG AGT CTG CAC CCA GGA GAC CAG AGA GCA CCT TGC CCT 288289 TCC ATG GAA ACT CAG GCT GAT CTC GTA TCT CAG GAA CCT CAG GCC CTG 3361 Met Glu Thr Gln Ala Asp Leu Val Ser Gln Glu Pro Gln Ala Leu 15337 CTT GAC AGT GCT CTT CCT TCA AAA GTT CCT GCC TTT TCC GAC AAG GAC 38416 Leu Asp Ser Ala Leu Pro Ser Lys Val Pro Ala Phe Ser Asp Lys Asp 31385 AGC CTG GGG GAT GAG ATG TTG GCG GCT GCG CTC CTA AAG GCC AAG TCC 43232 Ser Leu Gly Asp Glu Met Leu Ala Ala Ala Leu Leu Lys Ala Lys Ser 47433 CAG GAG CTG GTA ACC TTT GAG GAT GTA GCT GTG TAC TTC ATC CGG AAG 48048 Gln Glu Leu Val Thr Phe Glu Asp Val Ala Val Tyr Phe Ile Arg Lys 63481 GAG TGG AAG CGT TTG GAA CCT GCT CAG AGG GAC CTC TAT AGA GAT GTG 52864 Glu Trp Lys Arg Leu Glu Pro Ala Gln Arg Asp Leu Tyr Arg Asp Val 79529 ATG CTG GAG AAT TAC GGG AAT GTG TTC TCA CTG GAC TGG ATA CAC GTC 57680 Met Leu Glu Asn Tyr Gly Asn Val Phe Ser Leu Asp Trp Ile His Val 95577 TGT TTA ACT ACG CAA AAG GTA ATG CTG GCA TGG CTT ACT GGG ACC CTA 62496 Cys Leu Thr Thr Gln Lys Val Met Leu Ala Trp Leu Thr Gly Thr Leu 111625 AGT GTG GCG AAG GGA CTC TGC TCC AGT GAA CTG GCG AGT GTG GAA CCT 672112 Ser Val Ala Lys Gly Leu Cys Ser Ser Glu Leu Ala Ser Val Glu Pro 127673 CCT GAC ACC TTC TGA GGA CCT CCT GCC TGC CAT GTT GCT GTG GAG CTC 720128 Pro Asp Thr Phe *** 132721 GCA CTC CTC AGG CAT CCC CTG ATG TTG AGT GAT ACA AAC TCT ATC ACC 768769 GGA ATC GAT GCT GCT GCA ATG ACA AGA CTT CTT TCT GGT TTT CAG ATT 816817 CTA AAG TTT AAA ACA ACG ACA ACA ACA GGA GCG CTT GAA AGT TAC GGT 864865 GCT TCT CCC TCT CCA GTG TGG ACT CGC TGA TGT TTG GAA AGA TTG GAC 912913 TTG CTA CAG AAG GTC TTT CCA CAG TGA TGA CAC CAG TAG GGC TTT TCC 960961 CCG GTG TGG ATT CTG TGG TGT TTA TTG AAG TTG GAG CTG TGG TTG AAG 10081009 GCT TTC CCA CAC TCC TTA CAC TTA TAT GGC TTC TCT CCG GTG TGG AGT 10561057 CTC TGG TGG GAG CTG AGG CCC GCA TGC TGA CTG AAG CTC TTC CCA CAT 11041105 TCG TTA CAC TGA TAA GGC TTC TCC CCA GTG TGG ATC CGA TAG TGA CGA 11521153 ATG AGG CTG CCT TTC CCG CTG AAA GCC TTG CCA CAA TCT TTG CAC TGA 12001201 TAT GGC GCC TCT TCT GTG TGC ATT CTC TGA TGT TTA AGA AGG TCT GAG 12481249 CTC TGC CCA AAA GCT TTT CCA CAC TTA CAG TCA TAG GGC CGG TCC ACC 12961297 AAG TGT GTT CTG TAG TGG AGG GTG AGG TTT GAG CTG TGG CTG AAA GCT 13441345 TTC CCA CAC TTG GTG CAC ACG TAA GGT TTC TCC CCA GTG TGT GTT CTC 13921393 CTG TGT TTG GTG AGA TTT GAG CTA TTA CTA AAG GCT TTG CCA CAT TCA 14401441 GCC CAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA 14881489 AAA AAA 1494

D:Blastp结果Query=PP1650[基因=PP1650](131个氨基酸)>SP_HUM:014709 014709 homo sapiens(human).zinc finger protein.

5/1999长度=1029分值=76.5bits(185)，预计值=8e-14相同性=45/90(50％)，相似性=60/90(66％)，缺口=6/90(6％)Query:6 DLVS---QEPQALLDSALPSKVPAFSDKDSLGDEMLAAALLKAKSQELVTFEDVAVYFIR 62

DLV+ Q+PQ DS P + A S +++ ++++A LL A+ QELV FE+V+V FSbjct:172 DLVAFNLQDPQH-DSPAP-EASALSQEENPRNQLMALMLLTAQPQELVMFEEVSVCFTS 228Query:63 KEWKRLEPAQRDLYRDVMLENYGNVFSLDW 92

+EW L P QR LY DVMLENYGNV SL+WSbjct:229 EEWACLGPIQRALYWDVMLENYGNVTSLEW 258

9．PP2672A：核苷酸序列：(SEQ ID NO:25)长度：2455bp1 GGCGTCTGGA CACCCTTCAT CTTTTAGCCG TTGCCCTGTT CTTGGTGAAC51 TGCTTGTTAG GACCAAAAGT GGCCCACCCC TTTCTCTGGG ACAGTGCAGA101 GCACCGGGGC CAGAGGCTCA AAGCACCTCC AAGCTGAGAT CAGAGACTTT151 GGATATCGTT GATCCAGAGG CTTCCAAACT TTTCCTGGTG ATTGAATTCT201 TACCATGAAA TCCAGTGAGG AGCTCCAATG CCFCAAGCAG ATGGAAGAGG251 AACTGCTCTT CTTGAAGGCA GGGCAGGGCT CTCAGAGGGC AAGACTCACC301 CCACCCCTGC CACGGGCTCT CCAGGGTAAC TTTGGAGCCC CAGCACTCTG351 TGGAATATGG TTCGCAGAAC ACTTGCATCC TGCTGTTGGG ATGCCCCCAA401 ACTATAATAG CAGCATGCTC AGTCTTTCAC CAGAAAGAAC CATCTTATCT451 GGAGGATGGT CAGGAAAACA AACTCAACAG CCAGTGCCTC CCCTCAGAAC501 TCTGCTCCTG AGGTCTCCTT TCAGTCTGCA TAAGTCCTCC CAACCTGGGA551 GCCCCAAAGC TTCTCAGCGG ATCCATCCCC TCTTCCATTC TATCCCAAGG601 TCTCAGCTGC ATTCTGTTCT GCTTGGTCTT CCTCTCCTCT TCATACAGAC651 TAGACCTTCA CCCCCTGCCC AGTATGGCGC GCAAATGCCA TTGAGATACA701 TTTGTTTTGG TCCCAATATC TTTTGGGGCT CCAAAAAGCC CCAGAAAGAG751 TAATGCCTTC AGCCATGGCC CATGTGATGA CTTTTCCCAG AGACAGCCCC801 ATGGGTCAGT GATCGCCGGT GGGAGGTCTC CCCAGCCTCC CTTCAAGCCT851 TCAAGTCTGT GTAGAGGCGC CTTCTCTTCT CTGGGCATTC CCCGCTTTGT901 TGCAGAGAAA TTATTTTCTA CTCAGCGGCT TTCAGGTAGA GAGAGAAAGT951 GCATGCGGTA TGAAGGATGT GAAGATGGAG GGCTTGACGT CGTGGGTCAT1001 GTTTTGTGGT TAATTCCCCC ACATAACAAA ACAGTGAGCA AATGTTTATA1051 AACAGGAACT CAGTGTTTCA GTGATGAAAG CCTCTGGCCT CGCCACACTG1101 ATTGCTGGTG TGCGCGCACA CACACACTCA CACACCCTGT TTTTCTTACA1151 CACACACAGC TTCATGGAGC AGAGAGCTGG AAAGGGTGTC CAGAATGGTG1201 GATCAGGCTT ATTATTATTA CTTTTTTTAT CTCCACCAAA CTCTCTCCTT1251 AAGCCCCAGC AGCCAACCCC CCCCCCCCCA CCAGACAGCA TGTCGAAGGA1301 GTAAGCTGCA GGTCAGCCTA TATTTTAGGC AGAAAATTAG GCAACCTTGG1351 GAGAGACCGG TTTCCAGCAG ACACGCACGG ACGCGATGGT GAGGTTGGGC1401 TGAGACGGTC CTTCCTGGAT GCAGTCACCC TCCCCATCCC GAGTTTTACT1451 CCCTGGGGGG ATTGTGGTGG GTGCCTGGCC TCCTCTCCCA CCAGCGCACT1501 GCCCCAAGCT TGCCTAGGTA GTATCAGCAC TGGGGTGAGG GATGCAATGC1551 GGGTTTATAG TTGGCTGTGG GGACTTCTGA TTTCTCCACC CCATAGATGA1601 TAAACGACCG CGGGGCTTCC TCTCCCAGGT CTTTCCTCAC TCTCCTTCGT1651 CTTTCCCTCT TTCTCCATGG GAAAGGTAGA ATGAGACTTG CCACCAGGGA1701 CATCCAGGCA CATTCCTCTT CCCAATCAGC CTCTACCCAT TCTCTTTCTG1751 TCTCGTGTGT ATCAGTGGCA TTTTCTTGTG TAGCTTCCCA GATTTGCAAA1801 CCCGCTCCAC ATCCTGGACG CAGACCCCCT TCGCTGGCTC TATGAAGGCT1851 TCACGTTCCT GGGGCATTCG AGACTTGACT TTCCAGAGCA ACTTTGGATC1901 CACCCTGTTA CCCTTTTTTT TGTTTTGTTT TGTTTTGAGA GGGAGTCTCG1951 CTGTGTTGTC CAGGCTGGAG TGCAGTGGTG TGATCTCGGC TTACTGCAAC2001 CTCCGCCTAC TGGGTTCAAG TGATTCTCTT GCCTCAATCT CCCCAGTACC2051 TGGGATTACA GGTAGACACC ATCACGCCTG GCTAATTTTT GTATTTTTAG2101 TAAAGACAGG GTTTCATCAT GTTGGCCTGG CTGGTCTCAA ACTCCTGACC2151 TCAGCCGATC CGCCCGCCTC AGCCTCCCAA AGTTCTGGGA TTACAAGTGT2201 GAACCACCGT GCCCAACCTC CCCTCGTTTT TGACCTTTGT CCCCAAATGT2251 CTTTCATCCA GTTACTAGGA CTTGTAGCCT TTTTGCAAAT AGGTATCTGT2301 AAGCATAGAA GAATAGGGTG ATTTGTGAAG TGACCCTTAG TGGCATCTGT2351 GGTGGTCCTA CTAATCAGAT TTGCAGAAGA AACATGGAAA CAAGGAAACT2401 CCTCTCTTAT ATTAAAATAA ATAAGGTTTT TAATTTCAAA AAAAAAAAAA2451 AAAAAB：氨基酸序列：(SEQ ID NO:26)长度：182个氨基酸1 MKSSEELQCL KQMEEELLFL KAGQGSQRAR LTPPLPRALQ GNFGAPALCG51 IWFAEHLHPA VGMPPNYNSS MLSLSPERTI LSGGWSGKQT QQPVPPLRTL101 LLRSPFSLHK SSQPGSPKAS QRIHPLFHSI PRSQLHSVLL GLPLLFIQTR151 PSPPAQYGAQ MPLRYICFGP NIFWGSKKPQ KEC：核苷酸及氨基酸组合序列(SEQ ID NO:27)克隆号和蛋白名称：PP2672起始编码子：205 ATG 终止编码子：753 TAA蛋白分子量：20179.431 GGC GTC TGG ACA CCC TTC ATC TTT TAG CCG TTG CCC TGT TCT TGG TGA 4849 ACT GCT TGT TAG GAC CAA AAG TGG CCC ACC CCT TTC TCT GGG ACA GTG 9697 CAG AGC ACC GGG GCC AGA GGC TCA AAG CAC CTC CAA GCT GAG ATC AGA 144145 GAC TTT GGA TAT CGT TGA TCC AGA GGC TTC CAA ACT TTT CCT GGT GAT 192193 TGA ATT CTT ACC ATG AAA TCC AGT GAG GAG CTC CAA TGC CTC AAG CAG 2401 Met Lys Ser Ser Glu Glu Leu Gln Cys Leu Lys Gln 12241 ATG GAA GAG GAA CTG CTC TTC TTG AAG GCA GGG CAG GGC TCT CAG AGG 28813 Met Glu Glu Glu Leu Leu Phe Leu Lys Ala Gly Gln Gly Ser Gln Arg 28289 GCA AGA CTC ACC CCA CCC CTG CCA CGG GCT CTC CAG GGT AAC TTT GGA 33629 Ala Arg Leu Thr Pro Pro Leu Pro Arg Ala Leu Gln Gly Asn Phe Gly 44337 GCC CCA GCA CTC TGT GGA ATA TGG TTC GCA GAA CAC TTG CAT CCT GCT 38445 Ala Pro Ala Leu Cys Gly Ile Trp Phe Ala Glu His Leu His Pro Ala 60385 GTT GGG ATG CCC CCA AAC TAT AAT AGC AGC ATG CTC AGT CTT TCA CCA 43261 Val Gly Met Pro Pro Asn Tyr Asn Ser Ser Met Leu Ser Leu Ser Pro 76433 GAA AGA ACC ATC TTA TCT GGA GGA TGG TCA GGA AAA CAA ACT CAA CAG 48077 Glu Arg Thr Ile Leu Ser Gly Gly Trp Ser Gly Lys Gln Thr Gln Gln 92 481 CCA GTG CCT CCC CTC AGA ACT CTG CTC CTG AGG TCT CCT TTC AGT CTG 52893 Pro Val Pro Pro Leu Arg Thr Leu Leu Leu Arg Ser Pro Phe Ser Leu 108529 CAT AAG TCC TCC CAA CCT GGG AGC CCC AAA GCT TCT CAG CGG ATC CAT 576109 His Lys Ser Ser Gln Pro Gly Ser Pro Lys Ala Ser Gln Arg Ile His 124577 CCC CTC TTC CAT TCT ATC CCA AGG TCT CAG CTG CAT TCT GTT CTG CTT 624125 Pro Leu Phe His Ser Ile Pro Arg Ser Gln Leu His Ser Val Leu Leu 140625 GGT CTT CCT CTC CTC TTC ATA CAG ACT AGA CCT TCA CCC CCT GCC CAG 672141 Gly Leu Pro Leu Leu Phe Ile Gln Thr Arg Pro Ser Pro Pro Ala Gln 156673 TAT GGC GCG CAA ATG CCA TTG AGA TAC ATT TGT TTT GGT CCC AAT ATC 720157 Tyr Gly Ala Gln Met Pro Leu Arg Tyr Ile Cys Phe Gly Pro Asn Ile 172721 TTT TGG GGC TCC AAA AAG CCC CAG AAA GAG TAA TGC CTT CAG CCA TGG 768173 Phe Trp Gly Ser Lys Lys Pro Gln Lys Glu *** 183769 CCC ATG TGA TGA CTT TTC CCA GAG ACA GCC CCA TGG GTC AGT GAT CGC 816817 CGG TGG GAG GTC TCC CCA GCC TCC CTT CAA GCC TTC AAG TCT GTG TAG 864865 AGG CGC CTT CTC TTC TCT GGG CAT TCC CCG CTT TGT TGC AGA GAA ATT 912913 ATT TTC TAC TCA GCG GCT TTC AGG TAG AGA GAG AAA GTG CAT GCG GTA 960961 TGA AGG ATG TGA AGA TGG AGG GCT TGA CGT CGT GGG TCA TGT TTT GTG 10081009 GTT AAT TCC CCC ACA TAA CAA AAC AGT GAG CAA ATG TTT ATA AAC AGG 10561057 AAC TCA GTG TTT CAG TGA TGA AAG CCT CTG GCC TCG CCA CAC TGA TTG 11041105 CTG GTG TGC GCG CAC ACA CAC ACT CAC ACA CCC TGT TTT TCT TAC ACA 11521153 CAC ACA GCT TCA TGG AGC AGA GAG CTG GAA AGG GTG TCC AGA ATG GTG 12001201 GAT CAG GCT TAT TAT TAT TAC TTT TTT TAT CTC CAC CAA ACT CTC TCC 12481249 TTA AGC CCC AGC AGC CAA CCC CCC CCC CCC CAC CAG ACA GCA TGT CGA 12961297 AGG AGT AAG CTG CAG GTC AGC CTA TAT TTT AGG CAG AAA ATT AGG CAA 13441345 CCT TGG GAG AGA CCG GTT TCC AGC AGA CAC GCA CGG ACG CGA TGG TGA 13921393 GGT TGG GCT GAG ACG GTC CTT CCT GGA TGC AGT CAC CCT CCC CAT CCC 14401441 GAG TTT TAC TCC CTG GGG GGA TTG TGG TGG GTG CCT GGC CTC CTC TCC 14881489 CAC CAG CGC ACT GCC CCA AGC TTG CCT AGG TAG TAT CAG CAC TGG GGT 15361537 GAG GGA TGC AAT GCG GGT TTA TAG TTG GCT GTG GGG ACT TCT GAT TTC 15841585 TCC ACC CCA TAG ATG ATA AAC GAC CGC GGG GCT TCC TCT CCC AGG TCT 16321633 TTC CTC ACT CTC CTT CGT CTT TCC CTC TTT CTC CAT GGG AAA GGT AGA 16801681 ATG AGA CTT GCC ACC AGG GAC ATC CAG GCA CAT TCC TCT TCC CAA TCA 17281729 GCC TCT ACC CAT TCT CTT TCT GTC TCG TGT GTA TCA GTG GCA TTT TCT 17761777 TGT GTA GCT TCC CAG ATT TGC AAA CCC GCT CCA CAT CCT GGA CGC AGA 18241825 CCC CCT TCG CTG GCT CTA TGA AGG CTT CAC GTT CCT GGG GCA TTC GAG 18721873 ACT TGA CTT TCC AGA GCA ACT TTG GAT CCA CCC TGT TAC CCT TTT TTT 19201921 TGT TTT GTT TTG TTT TGA GAG GGA GTC TCG CTG TGT TGT CCA GGC TGG 19681969 AGT GCA GTG GTG TGA TCT CGG CTT ACT GCA ACC TCC GCC TAC TGG GTT 20162017 CAA GTG ATT CTC TTG CCT CAA TCT CCC CAG TAC CTG GGA TTA CAG GTA 20642065 GAC ACC ATC ACG CCT GGC TAA TTT TTG TAT TTT TAG TAA AGA CAG GGT 21122113 TTC ATC ATG TTG GCC TGG CTG GTC TCA AAC TCC TGA CCT CAG CCG ATC 21602161 CGC CCG CCT CAG CCT CCC AAA GTT CTG GGA TTA CAA GTG TGA ACC ACC 22082209 GTG CCC AAC CTC CCC TCG TTT TTG ACC TTT GTC CCC AAA TGT CTT TCA 22562257 TCC AGT TAC TAG GAC TTG TAG CCT TTT TGC AAA TAG GTA TCT GTA AGC 23042305 ATA GAA GAA TAG GGT GAT TTG TGA AGT GAC CCT TAG TGG CAT CTG TGG 23522353 TGG TCC TAC TAA TCA GAT TTG CAG AAG AAA CAT GGA AAC AAG GAA ACT 24002401 CCT CTC TTA TAT TAA AAT AAA TAA GGT TTT TAA TTT CAA AAA AAA AAA 24482449 AAA AAA A 2455

D:Blastp结果Query=PP2672[基因=PP2672]

(182个氨基酸)>SP_RO:070132 070132 rattus norvegicus(rat).ets domain

transcription factor pet-1.5/1999长度=340分值=37.1bits(84)，预计值=0.10相同性=25/78(32％)，相似性=37/78(47％)，缺口=8/78(10％)Query:84 GWSGKQTQQPVPPLRTLLLRSPFSLHKSSQPGSPKASQRIHPLFHSIPRSQLHSVLLGLP 143

GW+G Q Q P+PP TL RS + + P ++ HP PR+ + + LSbjct:35 GWAGMQLQDPLPPHHTLAARS-----RQALPDPAASTLPCHP---QSPRAGIGTPSAKLT 86Query:144 LLFIQTRPSPPAQYGAQM 161

+++ PSP AQ A MSbjct:87 CPPVRSPPSPTAQSPAAM 104

Claims

1．一种分离的具有抑癌功能的人蛋白，其特征在于，它包含具有选自下组的氨基酸序列的多肽：SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:11、SEQ ID NO:14、SEQID NO:17、SEQ ID NO:20、SEQ ID NO:23、SEQ ID NO:26；

或其保守性变异多肽、或其活性片段、或其活性衍生物。

2．如权利要求1所述的多肽，其特征在于，该多肽是具有选自下组的氨基酸序列的多肽:SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:11、SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:17、SEQ ID NO:20、SEQ ID NO:23、SEQ ID NO:26。

3．一种分离的多核苷酸，其特征在于，它包含一核苷酸序列，该核苷酸序列与选自下组的一种核苷酸序列有至少85％相同性：

(a)编码如权利要求1和2所述多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸。

4．如权利要求3所述的多核苷酸，其特征在于，该多核苷酸编码的多肽具有选自下组的氨基酸序列：SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:11、SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:17、SEQ ID NO:20、SEQ ID NO:23、SEQ ID NO:26。

5．如权利要求3所述的多核苷酸，其特征在于，该多核苷酸的序列选自下组：

SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:15、SEQ ID NO:18、SEQ ID NO:21、SEQ ID NO:24、SEQ ID NO:27的编码区序列或全长序列。

6．一种载体，其特征在于，它含有权利要求3所述的多核苷酸。

7．一种遗传工程化的宿主细胞，其特征在于，它是选自下组的一种宿主细胞：

(a)用权利要求6所述的载体转化或转导的宿主细胞；

(b)用权利要求3所述的多核苷酸转化或转导的宿主细胞。

8．一种具有具有抑癌功能的人蛋白活性的多肽的制备方法，其特征在于，该方法包含：

(a)在适合表达具有抑癌功能的人蛋白的条件下，培养权利要求7所述的宿主细胞；

(b)从培养物中分离出具有具有抑癌功能的人蛋白活性的多肽。

9．一种能与权利要求1所述的具有抑癌功能的人蛋白特异性结合的抗体。

10．一种核酸分子，它含有权利要求3所述的多核苷酸中连续的10-800个核苷酸。

11、一种药物组合物，其特征在于，它含有安全有效量的权利要求1所述的多肽以及药学上可接受的载体。