CN1332969C - 黄酮苷类化合物及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及从植物中获得的新黄酮苷类化合物及分离制备该化合物的方法。本发明的黄酮苷类化合物分别为高圣草素-7，4’-双-O-β-D-葡萄糖苷(homoeriodictyol 7，4′-di-O-β-D-glucopyranoside)及圣草素-7，4’-双-O-β-D-葡萄糖苷(eriodictyol 7，4′-di-O-β-D-glucopyranoside)。该类化合物主要从高等植物中分离获得，其中主要是种子植物、尤其是桑寄生科槲寄生属植物。通过水、乙醇、甲醇或丙酮的提取，然后浓缩、萃取、树脂吸附、柱层析等步骤，即可从高等植物中分离获得本发明的二个新黄酮苷类化合物。该类化合物组成药物，是一种具有抗炎、抗氧化、激素样作用等多种生理活性的有效药物。

Description

黄酮苷类化合物及其制备方法
技术领域
本发明属医药及天然产物化学领域，具体涉及黄酮苷类化合物及其制备方法。
背景技术
黄酮及黄酮苷类是一大类天然化学产物，在植物界分布广泛，从植物中提取的该类化学产物具有保护心脑血管、抗炎、抗氧化、雄性或雌性激素样作用等多种生理活性，它是许多中草药的主要活性成分，其中有许多被开发成新型植物药，如银杏总黄酮、大豆异黄酮等，获得良好效果，但是研究人员仍在不断探索，以求获得更多的该类化合物的活性成份，满足人们对中草药日益增多的需求。
发明内容
本发明的目的在于提供黄酮苷类化合物。
本发明的另一个目的在于提供从天然植物材料中分离制备上述黄酮苷类化合物的方法。
本发明的再一个目的在于提供上述黄酮苷类化合物的应用领域。
本发明所提供的黄酮苷类化合物的化学名称分别为高圣草素-7，4’-双-O-β-D-葡萄糖苷(homoeriodictyol 7，4′-di-O-β-D-glucopyranoside，化合物1)或圣草素-7，4’-双-O-β-D-葡萄糖苷(eriodictyol 7，4′-di-O-β-D-glucopyranoside，化合物2)，其化学结构式如下所示：
1 R＝OCH3    高圣草素
2 R＝OH      圣草素
上述黄酮苷类化合物具有下述化学及光谱学特征：
化合物1：高圣草素，淡黄色无定型粉术，盐酸-镁粉及Molish反应均呈阳性，AlCl3反应呈黄绿色荧光。UV(MeOH)λmax(nm)：286，326sh；IRυmax(KBr，cm-1)：3423，2924，1641，1579，1524，1500，1448，1352，1296，1273，1198，1173，1115，1074，1022，864，816；高分辨质谱给出分子离子峰ESI-MS(m/z)：649.1740([M+Na]+，计算值：649.1735)，分子式C28H34O16；1HNMR(DMSO-d6，500MHz)δ12.05(1H，d，J＝2.2Hz，OH)，9.08(1H，br s，OH)，9.03(1H，br s，OH)，6.88(1H，br s，H-2′)，6.76(2H，br s，H-5′and H-6′)，6.14(1H，d，J＝2.5Hz，H-8)，6.13(1H，d，J＝2.5Hz，H-6)，5.34(1H，dd，J＝12.5，3.0Hz，H-2)(1H，br d，J＝12.5Hz，H-2)，4.97(1H，dd，J＝12.0，7.8 Hz，H-1″)，3.68(1H，br d，J＝3.6 Hz，H-6″eq)，3.65(1H，br d，J＝4.7Hz，H-6″ax)，3.20-3.46(4H，m，H-2″，H-3″，H-4″，H-5″)，3.14(1H，dd，J＝17.1，12.5Hz，Htrans-3)，2.73(1H，dd，J＝17.1，3.0Hz，HCIS-3)；13CNMR(DMSO-d6，125 MHz)数据见表1；基于以上数据确定化合物1的化学结构及其名称为高圣草素-7，4’-双-O-β-D-葡萄糖苷(homoeriodictyol 7，4′-di-O-β-D-glucopyranoside)。
化合物2：圣草素，淡黄色无定型粉末，盐酸-镁粉及Molish反应均呈阳性，AlCl3反应呈黄绿色荧光。UV(MeOH)λmax(nm)：283，326sh；IRυmax(KBr，cm-1)：3396，2926，1647，1578，1520，1446，1390，1367，1340，1300，1271，1234，1176，1090，1078，1047，1032，893，854，827；高分辨质谱给出分子离子峰ESI-MS(m/z)：635.1583 99([M+Na]+，计算值：635.1578)，分子式：C27H32O16；1HNMR(DMSO-d6，500MHz)δ12.05(1H，d，J＝5.0Hz，OH)，9.16(1H，brs，OH)，7.11(1H，brs，H-2′)，6.92(1H ，d，J＝8.3 Hz，H-5′)，6.79(1H，d，J＝8.3 Hz，H-6′)，6.17(1H，d，J＝2.0Hz，H-8)，6.13(1H，d，J＝2.0Hz，H-6)，5.49(1H，dd，J＝13.0，2.6 Hz，H-2)，4.96(1H，dd，J＝13.0，7.80Hz，H-1″)，3.79(3H，s，OCH3)，3.66(1H，d，J＝11.4 Hz，H-6″ax)，3.20-3.46(4H，m，H-2″，H-3″，H-4″，H-5″)，3.14(1H，m，Htrans-3)，2.76(1H，dd，J17.1，2.6 Hz，HCIS-3)；13CNMR (DMSO-d6，125MHz)数据见表1；基于以上数据确定化合物2的化学结构及其名称为圣草素-7，4’-双-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(eriodictyol 7，4′-di-O-β-D-glucopyranoside)。
上述化合物1和化合物2的高分辨质谱(ESI-MS)、氢谱(1HNMR)及碳谱(1.1CNMR)特征分别如附图1～附图6所示。
表1.化合物1和化合物2的氢谱和碳谱特征
    C           化合物1           化合物2
    δC     SH     δC   δH
    2     78.6     5.55 d(11)     78.2   5.48 d(12.3)
    3     42.1     2.78 dd(6.7)3.43     42.2   2.76 d(16.9)
    4     196.9     197.0
    5     165.2     165.1
    6     96.6     6.13s     96.6   6.10s
    7     165.3     165.2
    8     95.5     6.18s     95.3   6.13s
    9     162.6     162.6
    10     103.2     103.4
    1′     132.0     133.0
    2′     111.4     7.16d(1.2)     114.5     6.95s
    3′     148.9     147.0
    4′     146.7     145.5
    5′     115.2     7.11d(8.5)     116.7     7.12d(8.5)
    6′     119.3     7.00d(8.5)     117.6     6.85 d(8.5)
    1″     99.5     4.97d(8.5)     99.5d     4.97t(7.1)
    2″     73.0     3.26     73.0     3.28
    3″     77.0     3.27     77.0     overlapped
    4″     69.5     3.15     69.5     3.14
    5″     76.3     3.27     75.9     overlapped
    6″     60.5     3.45     60.8     3.47
    1     99.6     4.93d(7.0)     102.2d     4.68d(4.5)
    2     73.2     3.26     73.3     3.20
    3     77.0     3.27     77.2     overlapped
    4     69.6     3.15     69.8     3.14
    5     76.8     3.27     76.3     overlapped
    6     60.6     3.66     60.5     3.68
    OCH3     55.8     3.79s
上述两个新黄酮苷类化合物主要从高等植物中分离制备，其中优选的是种子植物，或者是桑寄生科(Loranthaceae)槲寄生属(Viscum L.)植物。有关桑寄生科及槲寄生属的科学定义和范畴，参见《中国高等植物科属词典》(修订版)(候宽昭编，北京：科学出版社，1984.12)及中国植物志第24卷(北京：科学出版社，1986)。用于制备这两个新黄酮苷类化合物的植物材料一般为这些植物的茎枝和叶。
本发明提出的黄酮苷类化合物的制备方法，具体步骤为：
(1)高等植物原料以4-15倍质量的水或10-100wt％的含水乙醇、甲醇或丙酮溶剂提取；
(2)提取液回收溶剂后浓缩至稠浸膏；
(3)上述获得的稠浸膏依次用醚类、酯类、氯仿、正丁醇有机溶剂萃取，合并正丁醇萃取部分；或者将所获得的稠浸膏用水充分搅拌稀释后，采用非极性或弱极性大孔吸附树脂，进行吸附，然后依次用水、20-50wt％的含水乙醇洗脱，收集含水乙醇洗脱液浓缩至干；
(4)将上述正丁醇萃取部分或收集大孔吸附树脂20-50wt％含水乙醇洗脱液浓缩至干的产物经柱层析分离即可。
具体实施时，上述稠浸膏萃取时可以3-10倍体积的水将稠浸膏充分搅拌稀释，然后用有机溶剂萃取。根据实践结果，每次萃取有机溶剂的用量可为水体积的百分之一至二分之一，萃取2-5次即可获得良好效果。
大孔吸附树脂法同样先以上述量的水将稠浸膏充分搅拌稀释，然后过滤得澄清液，将澄清液通过适当体积的非极性或弱极性大孔吸附树脂，如D101等，待全部澄清液通过柱床之后，依次用3-5倍柱床体积的水、20wt％-50wt％的含水乙醇洗脱。
本发明的两个化合物主要存在于20-50wt％的洗脱流份中。可采用硅胶柱层析、SephadexLH20柱层析或ODS柱层析方法进一步分离化合物1、化合物2。依据两个化合物分子极性大小，该领域技术人员即可从柱层析产物中分别获得化合物1、化合物2。
实验结果表明：当采用硅胶柱层析时，洗脱剂可采用氯仿-甲醇-水系统进行梯度洗脱；当采用Sephadex LH 20柱层析时，洗脱剂可采用甲醇-水或乙醇-水系统洗脱；当采用ODS柱层析时，洗脱剂可采用甲醇-水或乙睛-水系统洗脱。
本发明中，植物原料的高等植物是种子植物。
本发明中，植物原料的高等植物是桑寄生科种子植物。
本发明中，桑寄生科植物是槲寄生属植物。
本发明中，提取时加热30-95℃回流1-3小时，提取1-3次，合并提取液。
本发明中，提取液是含水乙醇。
本发明中，提取液浓缩成稠浸膏的比重为1.02-1.10。
本发明中，稠浸膏依次用石油醚、乙酸乙酯、氯仿、正丁醇溶剂萃取。
本发明中，采用大孔吸附树脂吸附后，依次用水、20wt％、30wt％、40wt％、50wt％的含水乙醇洗脱，收集30-50wt％洗脱液即为产物。
本发明中，层析分离采用硅胶柱层析、SephadexLH20柱层析或ODS柱层析。
本发明所述的新的黄酮苷类化合物的用途可作为药物组合物的应用，效果令人满意。
本发明的化合物具有良好的抗炎、抗氧化、激素样作用。从高等植物中分离提取方法简便，原料来源广泛，成本不高。本发明产物与中药、西药等药物制成组合药物，具有诱人的应用前景。
附图说明
图1为化合物1的高分辨质谱图。
图2为化合物1的氢谱(1HNMR)图。
图3为化合物1的碳谱(13CNMR)图。
图4为化合物2的高分辨质谱图。
图5为化合物2的氢谱(1HNMR)图。
图6为化合物2的碳谱(13CNMR)图。
图7为本发明实施例1的提取分离流程图。
具体实施方式
以下以具体实施例更具体地说明本发明
实施例1.化合物1和化合物2的分离制备
植物材料：桑寄生科槲寄生属植物槲寄生(Viscus coloratum(Kom.)Nakai)干燥带叶茎枝。
分离制备方法：槲寄生带叶茎枝2.0kg，用95％乙醇20L回流提取两次，每次2小时，合并提取液，回收乙醇并浓缩至无醇味，加入水调节至4.0L，抽滤，澄清液通过D101大孔吸附树脂柱(1.0Kg)，依次用4-5L的水、20％、40％的含水乙醇洗脱，收集40％洗脱部分，浓缩至干。将40％乙醇洗脱部位分次用Sephadex LH 20反复分离，即得化合物1，2。提取分离流程图如附图7。
实施例2.化合物1及化合物2对羟基自由基及超氧阴离子自由基的清除作用
1.仪器与材料
1.1仪器：
UV-260型分光光度计(Shimadzu)，电子天平(Sartorius)，PHB-3型酸度计(Sanxin)，ER200D-SRC型电子顺磁共振仪，ER4111-VT变温装置(Bruker)。
1.2试剂：
黄嘌呤(X)、黄嘌呤氧化酶(XO)、5，5-二甲基-1-吡咯啉-N-氮化物(DMPO)和茶多酚(EGCG)购自美国Sigma公司，氯化硝基四氮唑蓝(NBT)等试剂均为国产分析纯。
实验所用的化合物1和化合物2均为发明人自制，其化学结构经氢谱、碳谱、紫外光谱和红外光谱确定无误，HPLC法测定纯度在95％以上。
2.实验方法
2.1比色法(Fenton反应)检测仙茅苷对·OH清除作用
Fenton反应是产生羟基自由基最常用的反应，是利用Fe2+被H2O2氧化生成Fe3+、OH-和·OH。反应所产生的·OH可以与水杨酸反应生成2，3-二羟基苯甲酸，在510nm处有最大吸收。测定方法根据贾之慎等人的方法进行。
2.2比色法(X/XO反应)检测仙茅苷对O2 -的清除作用：
利用黄嘌呤(X)与黄嘌呤氧化酶(XO)反应产生超氧阴离子自由基，该自由基可与NBT反应形成蓝色，于560nm处测定吸收度。
2.3自由基清除率的计算
自由基的抑制率％＝[(A空白-A样品)/A空白]×100％。
IC50值通过线性回归得到。
3.实验结果：见表1。说明化合物1及化合物2对羟基自由基及超氧阴离子自由基均有显著的清除作用，其作用效果(IC50)均优于阳性对照药茶多酚(EGCG)。
表1.化合物1和化合物2对羟基自由基及超氧阴离子自由基的清除作用
  化合物          IC50(mmol/L)
  羟基自由基     超氧阴离子自由基
  1   0.214     0.388
  2   0.177     0.249
  EGCG   0.580     0.531

Claims (12)

1、黄酮苷类化合物，其特征在于，分别为二氢黄酮类苷元高圣草素英文名为homoeriodictyol或圣草素英文名为eriodictyol的7，4’-双葡萄糖苷，其化学结构式如下：
Figure C2005100266250002C1
1R＝OCH3  高圣草素
2R＝OH    圣草素，
上述结构特征分别命名为高圣草素-7，4’-双-O-β-D-葡萄糖苷即homoeriodictyol 7，4′-di-O-β-D-glucopyranoside，1或圣草素-7，4’-双-O-β-D-葡萄糖苷即eriodictyol 7，4′-di-O-β-D-glucopyranoside，2。
2、一种如权利要求1所述黄酮苷类化合物的制备方法，其特征在于
(1)高等植物原料以4-15倍质量的水或10-100wt％的含水乙醇、甲醇或丙酮溶剂提取；
(2)提取液回收溶剂后浓缩至稠浸膏；
(3)所获得的稠浸膏依次用醚类、酯类、氯仿、正丁醇有机溶剂萃取，合并正丁醇萃取部分，或者将所获得的稠浸膏用水充分搅拌稀释后，采用非极性或弱极性大孔吸附树脂，进行吸附，然后依次用水、20-50wt％的含水乙醇洗脱，收集含水乙醇洗脱液浓缩至干；
(4)将上述正丁醇萃取部分或收集大孔吸附树脂20-50wt％含水乙醇洗脱液浓缩至干的产物经柱层析分离即可。
3、如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，植物原料的高等植物是种子植物。
4、如权利要求3所述的制备方法，其特征在于，植物原料的高等植物是桑寄生科种子植物。
5、如权利要求4所述的制备方法，其特征在于，桑寄生科植物是槲寄生属植物。
6、如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，提取时加热30-95℃回流1-3小时，提取1-3次，合并提取液。
7、如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，提取液是含水乙醇。
8、如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，提取液浓缩成稠浸膏的比重为1.02-1.10。
9、如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，稠浸膏依次用石油醚、乙酸乙酯、氯仿、正丁醇溶剂萃取。
10、如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，采用大孔吸附树脂吸附后，依次用水、20wt％、30wt％、40wt％、50wt％的含水乙醇洗脱，收集30-50wt％洗脱液即为产物。
11、如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，柱层析分离采用硅胶柱层析、SephadexLH20柱层析或ODS柱层析。
12、一种药物组合物，其特征在于含有权利要求1所述的黄酮苷类化合物作为活性成分。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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CN102731595A (zh) * 2011-04-13 2012-10-17 东北林业大学 从鹿蹄草中分离纯化高熊果酚苷、金丝桃苷的方法
CN102911148A (zh) * 2011-08-02 2013-02-06 苏州宝泽堂医药科技有限公司 一种从槲寄生中制备高圣草素的方法
CN103304611B (zh) * 2013-06-18 2016-06-15 山东中医药大学 一种从瓜蒌皮中分离纯化3种黄酮苷的方法
CN108395461B (zh) * 2017-02-07 2022-01-07 浙江康恩贝制药股份有限公司 7,4′-O-β-D-葡萄糖桑色素苷及其制备和其在制备抗炎药物中的应用
CN112062798B (zh) * 2020-10-16 2022-07-15 中国科学院昆明植物研究所 黄酮苷类化合物、紫枝玫瑰活性提取物及制备方法和应用

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1203918A (zh) * 1997-06-02 1999-01-06 山东医科大学附属医院 檞寄生提取物及其用途

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1203918A (zh) * 1997-06-02 1999-01-06 山东医科大学附属医院 檞寄生提取物及其用途

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
homoerydictyl-7-O-b-D-glycoside－a receptor antagonist ofplate-let-activating factor Guan zengwei et al,J. Chinese Pharm. Sci.,Vol.10 No.1 2001 *
homoerydictyl-7-O-b-D-glycoside－a receptor antagonist ofplate-let-activating factor Guan zengwei et al,J. Chinese Pharm. Sci.,Vol.10 No.1 2001;火棘果化学成分研究 王军宪等，西北药学杂志，第9卷第6期 1994;岩青兰化学成分的研究 任冬梅等，中草药，第28卷第2期 1997 *
岩青兰化学成分的研究 任冬梅等，中草药，第28卷第2期 1997 *
火棘果化学成分研究 王军宪等，西北药学杂志，第9卷第6期 1994 *

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