CN1322130C - 编码具有糖转移活性的蛋白质的基因 - Google Patents

编码具有糖转移活性的蛋白质的基因 Download PDF

Info

Publication number
CN1322130C
CN1322130C CNB988012146A CN98801214A CN1322130C CN 1322130 C CN1322130 C CN 1322130C CN B988012146 A CNB988012146 A CN B988012146A CN 98801214 A CN98801214 A CN 98801214A CN 1322130 C CN1322130 C CN 1322130C
Authority
CN
China
Prior art keywords
leu
glu
ser
val
gly
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Fee Related
Application number
CNB988012146A
Other languages
English (en)
Other versions
CN1237206A (zh
Inventor
水谷正子
田中良和
久住高章
齐藤和季
山崎真巳
巩志忠
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Suntory Holdings Ltd
Original Assignee
International Flower Developments Pty Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by International Flower Developments Pty Ltd filed Critical International Flower Developments Pty Ltd
Publication of CN1237206A publication Critical patent/CN1237206A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN1322130C publication Critical patent/CN1322130C/zh
Anticipated expiration legal-status Critical
Expired - Fee Related legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
    • C12N15/52—Genes encoding for enzymes or proenzymes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/10—Transferases (2.)
    • C12N9/1048—Glycosyltransferases (2.4)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
    • C12N15/82—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for plant cells, e.g. plant artificial chromosomes (PACs)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
    • C12N15/82—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for plant cells, e.g. plant artificial chromosomes (PACs)
    • C12N15/8241—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology
    • C12N15/8242—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with non-agronomic quality (output) traits, e.g. for industrial processing; Value added, non-agronomic traits
    • C12N15/8243—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with non-agronomic quality (output) traits, e.g. for industrial processing; Value added, non-agronomic traits involving biosynthetic or metabolic pathways, i.e. metabolic engineering, e.g. nicotine, caffeine
    • C12N15/825—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with non-agronomic quality (output) traits, e.g. for industrial processing; Value added, non-agronomic traits involving biosynthetic or metabolic pathways, i.e. metabolic engineering, e.g. nicotine, caffeine involving pigment biosynthesis

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
  • Enzymes And Modification Thereof (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

提供编码具有对序列号：7～10或12中任一个序列记载的氨基酸序列的具有类黄酮5位糖转移活性的蛋白质的基因、和具有对这些氨基酸序列进行修饰的氨基酸序列、而且维持类黄酮5位糖转移活性的蛋白质的基因、以及使用该基因的上述蛋白质的制造方法。该基因可以用于植物的颜色的人工改良等方面。

Description

编码具有糖转移活性的蛋白质的基因
本发明涉及编码具有类黄酮5位糖转移活性的蛋白质的基因以及该基因的利用方法。
花卉产业正努力开发新的且品种多样的花卉。作为培育新品种的有效方法之一往往是改变花色，利用经典的育种方法，就几乎所有商业品种花卉生成范围广泛的花色都可成功。然而，因为使用这种方法每种花的基因库受到限制，所以单一的一种品种而具有范围广泛的各种着色品种还是很稀少的。
花色主要来自两种类型的色素，即类黄酮和类胡萝卜素。类黄酮的贡献是在从黄色至红色乃至绿色范围，而类胡萝卜素的贡献是在橙色或黄色的色调。对花色起主要贡献的类黄酮分子是以花青素、花翠素、3-甲花翠素、甲基花青素、二甲花翠素以及花葵素等糖苷的花色素，不同的花色素会带来花色的显著变化。另外，花色也受到无色的类黄酮的辅助发色、金属配合物的形成、葡萄糖基化、酰化、甲基化以及液胞的pH的影响(Forkmann，植物育种(Plant Breeding)，106，1，1991)。
从苯丙氨酸开始的花色苷的生物合成途径人们已经了解的很清楚(例如，植物细胞(Plant Cell)，7、1071-1083，1995)、与生物合成有关的基因几乎都已经被克隆了。例如、认为与作为紫苏的花色苷的丙二酰紫苏色素(3-O-(6-O-(p-香豆酰基)-β-D-葡萄糖基)-5-O-(丙二酰-β-D-葡萄糖基)-花青素)的生物合成有关的基因中、到现在为止还没有报道的该同源基因只是类黄酮-3′-羟基化酶基因、UDP-葡萄糖：花色苷(类黄酮)5-O-葡萄糖基转移酶(以下称5GT)基因、丙二酰基转移酶基因。
据推测，其中类黄酮-3′-羟基化酶与已经知道是属于细胞色素P450基因家族(植物细胞(Plant Cell)，7、1071-1083，1995)的细胞色素P450基因之间表现出结构的同源性。
一般来说，类黄酮的3位羟基是通过葡萄糖修饰的，但人们认为通过以葡萄糖基化为代表的糖的修饰会使花色苷的稳定性和溶解度增大(《黄酮》The Flavonoids，Chapman & Hall，1994)。
编码催化该反应的UDP-葡萄糖：花色素或类黄酮3-葡萄糖基转移酶(以下称3GT)的基因可以从玉米、大麦、金鱼草、龙胆等多种植物得到，相互间的氨基酸序列表现出显著的同源性。例如、单子叶植物玉米与双子叶植物龙胆的3GT的氨基酸序列的同源性为32％，单子叶植物玉米与大麦的3GT的氨基酸序列的同源性为73％，双子叶植物龙胆与茄子的3GT的氨基酸序列的同源性为46％。
另外，编码矮牵牛花的UDP-鼠李糖：花色素3-葡萄糖苷鼠李糖基转移酶(3RT)的基因也已经克隆了。
可是、尽管很多植物的类黄酮的5位的羟基可被葡萄糖基化、但催化该反应的基因(5GT)还未得到。
另外，虽有测定将糖转移到矮牵牛花和紫罗兰的花色素5位上反应的例子(植物(Planta)160，341-347，1984、植物(Planta)168，586-591，1986)，但这些报道只是停留在用花卉的粗提取液或部分纯化的酶研究其酶学性质方面，而将该酶纯化到纯品的例子还没有。另外，一般来说，糖转移酶从生物化学角度讲是不稳定的、酶的纯化是困难的。
通过在类黄酮分子上附加糖使其色调变化的例子几乎还没有，因为对色调有很大影响的芳香族酰基可转移到花色素内的葡萄糖分子或鼠李糖分子上，那么控制糖转移反应在控制花色素的生物合成，进而控制花色上是重要的。而作为调控糖转移酶基因的表达改变花色的例子，如在转化矮牵牛花中，就是控制矮牵牛花3RT引起的反应来修饰花色的。
作为可能转化的植物，例如已知有蔷薇、菊花、石竹、大丁草花、矮牵牛花、蓝竹耳、草原龙胆、カランコエ、郁金香、唐菖蒲等。
这里，本发明人等以获得编码具有类黄酮5位糖转移活性的蛋白质的基因作为课题、完成了本发明。
例如菊花的花色素以及蔷薇和石竹花的花色苷中的一部分结构中，5位的羟基还没有被葡萄糖基化。通过将本发明得到的5GT基因导入这些植物、可以改变花色苷的结构。
通过利用国际公开公报：WO96/25500记载的酰基转移酶基因使类黄酮酰基化是有可能使花色改变、或是使类黄酮稳定、但酰基并不是直接与类黄酮结合、而是通过糖结合的、所以只是导入酰基转移酶基因的话、有时花色的变化并不充分、有时也不稳定。
然而、通过将5GT基因与酰基转移酶基因同时导入、可以使糖转移到类黄酮的5位上、进而可使其酰化、预料花色素的结构也会改变、花色也会变绿。
另外，如果利用反意义法或コサプレツショゥ法等抑制花色素的5位葡萄糖基化的植物的5GT基因的表达，可以抑制花色素的生物合成，其结果可以使花色改变。例如，如果在龙胆或草原龙胆中抑制5GT活性的话，可预料花色会变红。
本发明人利用基因重组技术，从紫苏、蓝竹耳、马鞭草以及矮牵牛花中分离出5GT的cDNA、确定了结构基因的碱基序列。就是说，提供编码存在于这些植物花色苷出现的组织中的5GT的DNA序列。而且由于该酶使得花色素系色素的5位上转移了糖、所以可用于花色的变化、也可增加花色素的稳定性。
为了得到编码本发明的酶的DNA，例如可以利用差别显示(Differential display)法。例如在紫苏(Perilla frutescens)中有蓄积花色苷的品种(例如紫薰)和没有蓄积花色苷的品种(青薰)、如果克隆存在于蓄积花色素的品种的而在不蓄积花色素品种中不存在的DNA的话，可以得到编码本发明的酶的DNA。
具体来说，从紫薰和青薰的叶提取RNA、按照常规方法合成cDNA、经电泳分离，可分离出存在于来自紫薰cDNA文库的而不存在于来自青薰cDNA文库的cDNA。然后以得到的cDNA作为探针，筛选来自紫薰的cDNA文库，得到编码本发明酶的基因。
在本发明中，作为上述的筛选的例子，利用差别显示法筛选来自紫苏的编码本发明酶的DNA(实施例1)，然后以得到的DNA作为探针，通过筛选来自马鞭草的cDNA，得到来自马鞭草的编码本发明酶的DNA(实施例2)，通过同样的操作可以得到来自蓝竹耳的编码本发明酶的基因(实施例3)。
然后确认了这些DNA能够表达具有本发明酶活性的蛋白质。
另外，得到了编码来自矮牵牛花的本发明酶的DNA(实施例4)。
作为本发明的DNA，例如有编码序列7～10或12中任一个序列记载的氨基酸序列的DNA。然而已知，具有通过添加、缺失数个氨基酸和/或通过其它氨基酸取代修饰的氨基酸序列的蛋白质也可维持与原来蛋白质同样的酶活性。因此，编码具有对序列号：7～10或12中任一个序列记载的氨基酸序列添加、缺失一个或数个氨基酸的和/或通过其它氨基酸取代修饰的氨基酸序列，而且维持类黄酮5位糖转移活性的蛋白质的基因也属于本发明。
本发明还涉及序列1～4或6中任一个序列记载的碱基序列或编码记载的氨基酸序列的碱基序列或对那些部分、例如对编码共有区的6个氨基酸以上的氨基酸部分、例如在2至5×SSC、例如5×SSC、50℃的条件下杂交、而且编码具有类黄酮5位糖转移活性的蛋白质的基因。另外，最适的杂交温度因碱基序列或其长度的不同而不同、优选的是随着碱基序列变短、杂交温度也降低，例如编码6个氨基酸的碱基序列(18个碱基)其杂交温度优选是在50℃以下。
通过这样杂交选择的基因有来自天然的、例如来自植物的、如来自马鞭草或来自蓝竹耳的基因，也可以是来自其它植物的、例如来自矮牵牛花、蔷薇、石竹、风信子等植物的基因。另外，通过杂交选择的基因既可以是cDNA、也可以是基因组DNA。
另外本发明还涉及编码对7～10或12中任一个序列记载的氨基酸序列具有30％以上、优选是在50％以上、例如60％或70％以上的同源性，有时达90％的同源性的氨基酸序列，而且具有类黄酮5位糖转移活性的蛋白质的基因。就是说、就象实施例所给出的那样、编码本发明的酶的DNA与其它糖转移酶基因比较表现出20～30％的同源性。因此，本发明也包含编码表现出与7～10或12中记载的氨基酸序列30％以上的同源性、而且具有类黄酮5位糖转移活性的蛋白质的基因。
就象由实施例1～4的结果的比较所表明的那样，本发明酶的氨基酸序列因品种而异、种间的同源性在50％以上(参照实施例3和4)、例如60～70％(参照实施例2)、而来自同一品种的酶的氨基酸序列的同源性在90％以上(参照实施例1)。因此，编码对序列7～10或12中记载的氨基酸序列具有50％以上、例如60～70％以上、例如60％或70％以上的同源性、有时达90％的同源性的氨基酸序列、而且维持本发明的糖转移酶活性的蛋白质的基因也包括在本发明的范围。
具有天然的碱基序列的DNA，就象实施例具体记载的那样，例如可以通过cDNA文库筛选得到。
而编码具有修饰的氨基酸序列的酶的DNA是可以以具有天然的碱基序列的DNA为基础，利用常用的特定部位的诱导变异和PCR法合成。例如，将含有希望导入修饰的部位的DNA片段，是从上述得到的cDNA或基因组DNA经限制性内切酶消化得到的，作为模板，利用导入了所希望的变异的引物实施特定部位的诱导变异或PCR法、得到了导入了所希望的修饰的DNA片段，如果将该片段与编码目的酶的其它部分DNA连接就可以合成出编码具有修饰的氨基酸序列的酶的DNA了。
或者、为了得到编码具有缩短了的氨基酸序列的酶的DNA，例如可以通过所希望的限制性内切酶消化编码比目的氨基酸序列长的氨基酸序列的DNA、例如编码全长氨基酸序列的DNA，得到的DNA片段不能编码整个目的氨基酸序列时、不足部分可以通过连接合成DNA予以补足。
使用大肠杆菌以及酵母中的基因表达体系使该克隆表达，通过测定酶活，确认得到的基因是编码糖转移酶的基因，通过弄清楚于类黄酮的5位转移糖的糖转移酶基因的翻译区，就得到编码与本发明有关的糖转移酶的基因，另外，通过使该基因表达可以得到作为基因产物的于类黄酮5位转移糖的糖转移酶目的蛋白质。
或者是利用相应于序列7～10或12中任一个序列记载的氨基酸序列的抗体也可得到上述蛋白质。
因此本发明还涉及含有上述DNA的重组载体，特别是表达载体、以及通过该载体转化的宿主。作为宿主可以用原核生物或真核生物。作为原核生物可以利用细菌，例如属于Escherichia菌属的细菌、例如大肠杆菌(Escherichia coli)，属于Bacillus属的微生物、例如枯草杆菌(Bacillussubtilis)等常用的宿主。
作为真核的宿主可以使用低等真核生物，例如真核微生物、例如作为真菌的酵母或霉菌。作为酵母菌有属于Saccharomyces属的微生物、例如酿酒酵母(Saccharomyces cerevesiae)等，而作为霉菌有属于Aspergillus属的微生物、例如米曲霉(Aspergillus oryzae)、黑曲霉(Aspergillus niger)，以及属于Penicillium属的微生物等。也可以使用动物细胞或植物细胞、作为动物细胞可以使用小鼠、大鼠、猴、人等的细胞系。而也可以使用昆虫细胞、例如蚕细胞、或蚕的成虫本身作为宿主。
本发明的表达载体依赖于应导入该载体的宿主的种类，含有表达调控区、例如启动子以及终止子、复制起点等。作为细菌用的表达载体的启动子使用常用的启动子、例如trc启动子、tac启动子、lac启动子等，作为酵母用的启动子、例如可使用甘油醛-3-磷酸脱氢酶启动子、PH05启动子等、作为霉菌用启动子、例如可使用淀粉酶、trp C等。而作为动物细胞宿主用启动子可以使用病毒性启动子、例如SV40早期启动子、SV40晚期启动子等。
表达载体的制备可以使用限制性内切酶、连接酶等按照常规方法进行。另外，表达栽体对宿主的转化也是按照常规方法进行。
上述蛋白质的制造方法中，通过对上述表达载体转化的宿主进行培育、栽培或饲养、按照常规方法、例如过滤、离心分离、细胞破碎、凝胶过滤层析、离子交换层析等从培养物中回收目的蛋白质、进行纯化。
另外在本说明书中虽然叙述了来自紫苏、马鞭草、蓝竹耳以及矮牵牛花的类黄酮5位糖转移的糖转移酶(本发明中有时也简单称之“糖转移酶”)。可以通过直接使用或经部分改造的该酶的纯化方法纯化其它植物的糖转移酶、通过确定与该酶系有关的氨基酸序列、克隆编码该酶的基因。另外，通过使用来自与本发明有关的紫苏的糖转移酶的cDNA作为探针、可以从紫苏中得到其它的糖转移酶的cDNA、以及从其它植物得到别的糖转移酶的cDNA。因此，如果使用糖转移酶基因的一部分或全部，可以得到其它的糖转移酶基因。
另外，就象本说明书所说明的那样，纯化来自紫苏、马鞭草、蓝竹耳以及矮牵牛花的糖转移酶、通过按照常规方法得到对应于该酶的抗体，可以克隆制造与该抗体反应的蛋白质的cDNA或染色体DNA。因此，本发明并不只限制于来自紫苏、马鞭草、蓝竹耳以及矮牵牛花的糖转移酶基因，也涉及更广泛的糖转移酶。
另外本发明也涉及通过导入糖转移酶基因，颜色受到调节的植物或其后代或它们的组织，其形态即使是切花也可以。
另外，本发明中、含有花色素的类黄酮的糖转移反应中作为糖的供体有UDP-葡萄糖。
以下根据实施例详细说明本发明。实验过程只要没有特别叙述的都是按照《分子克隆》(Molecular Cloning)(冷泉港、1989)《新生物化学实验手册》第3卷(化学同人1996)、国际公开公报：WO96/25500记载的方法进行的。
实施例1、在红紫苏中特异表达的基因的克隆
(1)差别显示
紫苏(Perilla futescens)中，有叶子中蓄积花色苷的品种(例如、紫薰(サカタのタネ)和叶子中不蓄积花色素的品种(例如、青薰(サカタのタネ))，据报道，主要的花色素的结构是丙二酰紫苏色苷(3-O-(p-香豆基)-β-D-葡萄糖基)-5-O-(6-O-丙二酰-β-D-葡萄糖基)-花青素(农业生物化学(Agri.Biol.Chem.)53：197-198，1989)。
差别显示是《科学》(Scienc)257，967-971(1992)报道的方法，被用于获得组织特异表达的基因等研究中。
按照热酚法(《植物分子生物学手册》(Plant Molecular BiologyManual.)Kluwer Academic Publishers 1994 pp.D5/1-13)从两种紫苏的叶子中提取总RNA。使用mRNA分离试剂盒(Clonetech公司)从得到的总RNA中纯化聚A+RNA。使用附加了锚的oligo dT引物(GenHunter公司的H-T11G、H-T11A、H-T11C)于33μl反应液中对0.9μg的聚A+RNA进行逆转录，得到单链cDNA。以该cDNA作为模板、以同样附加了锚的oligo dT引物和合成引物(GenHunter公司的H-AP1至8)作为引物进行PCR。
PCR反应液的体积为20μl，含有2μl的cDNA溶液，0.2μM的H-T11G、H-T11A、H-T11C中的任一种引物、0.2μM的H-AP1至8中的任一种引物、0.12μM dNTP、5或10μCi[32P]dCTP、10mMTris-HCl(pH9.0)、50mM KCl、0.01％Triton X-100、1.25mM MgCl2、1u的Taq聚合酶。反应条件如下。首先于72℃下保持20秒后、进行40个循环反应，每一循环反应都是94℃30秒、40℃2分钟、72℃30秒，然后于72℃保持5分钟。
利用确定DNA碱基序列时用的聚丙烯酰胺凝胶分离上述扩增得到的DNA。凝胶干燥后、对X胶片曝光。在得到的大约2600条带中、比较两个品种的紫苏、只在紫薰中看到的带有36条。将这些带从干燥的凝胶中切下来、溶解于100μl的水中。溶出的DNA用乙醇沉淀，溶解于20μl的水中。其中一半量的DNA作为模板、分别进行上述的PCR反应，可以扩增有关33条带的DNA片段。用这些DNA片段进行文库的筛选和Northern解析。
(2)Northern解析
用以上33种DNA探针按照以下方法进行Northern解析。来自紫薰和青薰的聚A+RNA经含有1.2％琼脂糖的甲醛凝胶分离后、转移到尼龙膜上。该膜在5×SSPE、5×Denhalt液、0.5％SDS、20μg/ml的变性鲑DNA存在下，于65℃下与32P标记的上述DNA探针杂交过夜。将杂交的膜用1×SSPE、0.1％SDS于65℃下洗净，得到放射自显影的胶片。结果、只有5种探针特异地出现在紫薰中。预计这些克隆是与花色素的生物合成有关的基因。
(3)cDNA文库的筛选
利用从紫薰的叶子得到的聚A+RNA，使用完全快速克隆系统(CompleteRapid Cloning System)λgt10(Amersham)，制备以λgt10为载体的cDNA文库。该cDNA文库首先使用先前讲到的5种DNA片段进行筛选，得到各个相应的cDNA。其中取名为3R5的克隆由于是用来自H-T11A和H-AP3的引物的DNA片段得到的产物，所以表现出在已报道的玉米的类黄酮-3-O-糖转移酶的氨基酸水平上大约26％的同源性。
另外通过使用了同样探针的文库的筛选可以得到称之3R4以及3R6的克隆，这些克隆都表现出与3R5有极高的同源性。推断为3R4以及3R6的总碱基序列的氨基酸序列分别表示在序列表中的序列1和序列2中。而推断的3R4和3R6编码的蛋白质的氨基酸序列表现出92％的同源性。
取名为8R6的克隆由于是用来自H-T11G和H-AP8的引物的DNA片段得到的产物，所以没有表现出与到现在为止报道的DNA碱基序列的有意义的同源性。该序列表示在序列5中。虽然，8R6极有可能是与花色苷生物合成有关的基因，但其结构由于与至今报道的基因没有同源性，所以推测该基因是与花色苷生物合成有关的新的基因。
如果考虑到紫苏的花色苷(上述的丙二酰紫苏色素)的结构的话，预料该基因是丙二酰基转移酶的基因。为了证明这一点，只要使该基因在酵母或大肠杆菌中表达，使表达的产物与作为底物的花色苷和丙二酰CoA进行反应就可证明。这样的实验可以利用诸如国际公开公报：WO96/25500记载的方法进行。丙二酰基转移酶基因在人为地改变花色素的结构上也是有用的。
(4)3R4的cDNA在酵母中的表达
利用T4DNA聚合酶(宝酒造公司制造)补平p3R4的BstXI的酶切部位，再于连接体内的BamHI酶切部位酶切得到大约1.5kb的DNA片段，该DNA片段与pYE22m的EcoRI酶切末端补平，再经BamHI消化得到的大约8kb的DNA片段连接得到的质粒作为pY3R4。
而带有pYE22m的大肠杆菌JM109菌株命名为Escherichia coliSBM335，以FERM BP-5435保藏于工业技术院生命工程工业技术研究所。在pY3R4中，编码糖转移酶的cDNA连接于作为酵母的启动子组成之一的甘油醛-3磷酸脱氢酶的启动子的下游，通过同一个启动子控制转录。
利用伊藤等人的方法(Ito等，细菌学杂志，(J.Bacteriol.)，153，163-166，1983)用pY3R4转化酵母Saccharomycescerevesiae G1315(Ashikari等应用微生物学与生物技术(Appl.Microbiol.Biotechnol.)30，515-520，1989)。转化的酵母通过色氨酸合成能力恢复进行选择。得到的转化菌株于10ml的含有1％酪蛋白水解物(Difco公司)的Burkholder培养基(Burkholder，Amer.J.Bot.30，206-210)在30℃条件下振荡培育24小时。
同时，作为对照实验，也同样培养能自然恢复色氨酸合成能力的酵母。收集这些酵母菌，将它们悬浮于悬浊缓冲液(100mM磷酸缓冲液(pH8.5)、0.1％(v/v)2-巯基乙醇、10μM APMSF、100μM UDP-葡萄糖)，通过加入玻璃珠(Glass Beads 425-600microns Acid-Wash、Sigma公司)激烈振荡磨碎菌体。经15000rpm 20分钟离心，将离心上清作为粗酶液，用于以下酶活测定。
(5)酶活测定
使含有20μl粗酶液的50μl反应液(100mM磷酸缓冲液(pH8.5)、670μM花青素-3-葡萄糖苷、1mM UDP-葡萄糖)于30℃下反应10分钟后、加入含有0.1％TFA的50％乙腈溶液50μl，终止反应。将经15000rpm 5分钟离心得到的上清通过Samprep LCR4(T)-LC(Millipore公司)除去不溶物。得到的样品利用高效液相色谱分析。分析是用反相柱(AsahipakODP-50，4.6mmφ*250mm昭和电工株式会社制造)，流动相为A溶液0.5％TFA/H2O、B溶液为0.5％TFA 50％CH3CN、流速为0.6ml/min.在进行B20％→B100％(20min)梯度洗脱后，再维持5min B100％的洗脱。
用于分析的反应液为20μl。检测是通过A520nm，AUFS 0.5(岛津SPD-10A)和光敏二极管阵列检测器(岛津SPD-M16A)的600-250的吸收进行的。如果使pY3R4表达的酵母的粗酶液反应，就将它加到底物花青素-3-葡萄糖苷中(展开时间17分钟)，于14.5分钟展开时生成新出现的物质。由于该物质在对照实验的酵母粗酶液反应中没有看到，所以认为该物质是通过来自pY3R4的蛋白质活性产生的物质。与花青素-3，5-二葡萄糖苷的混合色谱分析的结果表明，该反应生成物的展开时间与花青素-3，5-二葡萄糖苷的展开时间一致，两者的吸收光谱也一致。由以上事实可知，紫苏的3R4的cDNA编码5GT。
实施例2.马鞭草(Verbena hybrida)的5GT基因的克隆
(1)cDNA文库的制备
从马鞭草品种花球紫(三得利)收集花瓣、于液氮中用乳钵磨碎。通过利用胍硫氰酸盐/氯化铯的方法从该磨碎物中提取RNA，再使用Oligotex(宝酒造制造)，用制造者推荐的方法得到聚A+RNA。使用了胍硫氰酸盐/氯化铯的方法是依据R.McGookin，Robert J.Slater等人、分子生物学方法(Methods in Molecular Biology)vol 2，(Humana PressInc.1984)详细给出的方法。
以得到的聚A+RNA为模板，利用Stratagene公司的2AP-cDNA合成试剂盒合成双链cDNA，然后利用Uni-ZAP XR克隆试剂盒(Stratagene公司)用制造者推荐的方法制备cDNA文库。
(2)5GT cDNA的克隆
以紫苏的p3R4的cDNA作为探针，按以下操作筛选上述得到的λ嗜菌体文库。将膜于42℃放置于杂交缓冲液(5×SSC，30％甲酰胺、50mM磷酸钠缓冲液(pH7.0)、1％SDS、2％Blocking reagent(Boehringer公司)、0.1％月桂酰肌氨酸、80g/ml鲑鱼精子DNA)中1小时。然后将DIG标记的紫苏的5GT基因、p3R4的DNA片段加入杂交溶液中，再温育16小时。
用洗净液(5×SSC 50℃、1％SDS)将滤膜洗净、然后通过依据碱性磷酸酶标记的DIG特异的抗体的免疫测定法(Boehringer公司)在5-溴-4-氯-3-吲哚磷酸和硝基蓝四唑盐的发色反应中检测出探针杂交的克隆。检测方法按使用说明书进行。
检测结果得到7个阳性克隆。用Stratagene公司推荐的方法将这些cDNA回收到质粒pBluescript SK中。通过琼脂糖凝胶电泳研究cDNA的长度时，确认了插入最长2.0kb。
(3)碱基序列的确定
从得到的克隆中提取质粒、使用测序仪ABI373A(Perkin Elmer公司)、利用该公司推荐的依据荧光试剂的双脱氧测序方法确定cDNA的3′和5′末端附近的碱基序列。结果发现7个克隆中的5个克隆之间具有同样的破基序列，认为是cDNA长度不同的克隆。其中还确定了pSHGT8的整个碱基序列。碱基序列的确定是使用了Kilo-Sequence用deletion试剂盒(宝酒造制)得到一系列的缺失克隆、或利用对pSHGT8内部序列特异的寡核苷酸引物、按上述那样进行。
(4)碱基序列和氨基酸序列的比较
插入pSHGT8的cDNA是2062bp，其中存在由1386bp(含终止码)构成的开放读框(ORF)。序列3给出了该序列。该ORF的氨基酸序列表现出与紫苏p3R4编码的5GT的氨基酸序列有68％、与p3R6编码的有64％的同源性。而与单子叶植物以及双子叶植物的3GT有22～25％、与矮牵牛花的3RT有21％的同源性。
(5)在酵母中的表达和酶活的测定
将BamHI/XhoI消化pSHGT8后得到的大约2.0kb的DNA片段与BamHI/SalI消化pYE22m得到的大约8kb的DNA片段连接得到的质粒作为pYHGT8。与实施例1一样、在酵母菌体内表达pYHGT8、测定有关pYHGT8编码的蛋白质的酶活。结果、如果使导入pYHGT8的酵母粗酶液反应的话，可生成与花青素-3，5-二葡萄糖苷的展开时间、吸收光谱都一致的产物。由这一事实可知，马鞭草的pSHGT8的cDNA编码5GT。
实施例3.蓝竹耳的5GT基因的克隆
(1)cDNA文库的制备
从蓝竹耳品种Summer Wave Blue(三得利(株))收集花瓣、于液氮中用乳钵磨碎。通过利用胍硫氰酸盐/氯化铯的方法从该磨碎物中提取RNA，再使用oligotex(宝酒制造)，用制造者推荐的方法得到聚A+RNA。使用的胍硫氰酸盐/氯化铯方法是依据R.McGookin，Robert J.Slater等人于分子生物学方法(Methods in Molecular Biology)vol 2，(HumanaPress Inc.1984)中详细给出的方法。
以得到的聚A+RNA为模板，利用Stratagene公司的ZAP-cDNA合成试剂盒合成双链cDNA，然后利用Uni-ZAP XR克隆试剂盒(Stratagene公司)用制造者推荐的方法制备cDNA文库。
(2)5GT cDNA的克隆
以紫苏的p3R4的cDNA作为探针，与实施例2一样筛选上述得到的λ嗜菌体文库。结果得到8个阳性克隆。将cDNA回收到质粒pBluescript SK中，通过琼脂糖凝胶电泳研究该cDNA的长度，确认插入了最长1.6kb。
(3)碱基序列的确定
从得到的克隆中提取质粒、与实施例2一样确定两末端附近的碱基序列。结果发现其中的6个克隆之间具有同样的碱基序列，认为是cDNA长度不同的克隆。其中还确定了该6个克隆中pSTGT5的整个碱基序列。
(4)碱基序列和氨基酸序列的比较
插入pSTGT5的cDNA是1671bp，其中存在由1437bp(含终止码)构成的开放读框(ORF)。序列4给出了该序列。该ORF的氨基酸序列表现出与紫苏p3R4编码的5GT的氨基酸序列有58％、与p3R6编码的有57％的同源性。而与马鞭草pSHGT8编码的有57％的同源性。而与单子叶植物以及双子叶植物的3GT有19～23％、与矮牵牛花的3RT有20％的同源性。
(5)5GT基因在酵母中的表达
将SamI/KpnI消化pSTGT5后得到的大约1.6kb的DNA片段与pYE22m的EcoRI酶切部位补平后被KpnI消化得到的大约8kb的DNA片段连接得到的质粒作为pYTGT5。与实施例1一样、在酵母菌体内表达pYTGT5、测定有关pSTGT5编码的蛋白质的酶活。结果、如果使导入pYTGT5的酵母粗酶液反应的话，可得到与花青素-3，5-二葡萄糖苷的展开时间、吸收光谱都一致的产物。由这一事实可知，蓝竹耳的pSTGT5的cDNA编码5GT。
实施例4.矮牵牛花的5GT基因的克隆
(1)cDNA文库的制备
在从矮牵牛花品种Old Glory Blue的花瓣中提取RNA的基础上，按照T.Holton等人的报道(植物学报Plant Journal，1993 4：1003-1010)详细记载的那样制备cDNA文库。
(2)5GT cDNA的克隆
以上述那样操作得到的紫苏、蓝竹耳、马鞭草的cDNA作为探针，与实施例2一样进行筛选。将结果得到的阳性克隆中的4个克隆回收到质粒pBluescript SK-中，通过琼脂糖凝胶电泳研究该cDNA的长度，确认插入了最长2.0kb的cDNA。
(3)碱基序列的确定
确定5’末端附近的碱基序列。结果表明这些克隆中的2个克隆的pSPGT1编码表现出与到目前为止得到的紫苏、蓝竹耳、马鞭草的5GT有很高同源性的氨基酸序列。于是确定了pSPGT1的整个碱基序列。
(4)碱基序列和氨基酸序列的比较
插入pSPGT1的cDNA是2105bp，其中存在由1407bp(含终止码)构成的ORF。序列6给出了该序列。该ORF的氨基酸序列表现出与紫苏p3R4编码的5GT的氨基酸序列有57％、与p3R6编码的有54％、与马鞭草pSHGT8编码的有55％、与蓝竹耳的pTGT5编码的有51％的同源性。而与单子叶植物以及双子叶植物的3GT有20～29％、与矮牵牛花的3RT有20％的同源性。由这一事实可以认为从矮牵牛花得到的pSPGT1的cDNA编码5GT。
如上所述，进行了编码来自紫苏、马鞭草、蓝竹耳以及矮牵牛花的向类黄酮5位上转移糖的酶的cDNA的克隆并确定了其碱基序列。通过酵母中活性的表达阐明了分离到的cDNA是编码5GT的基因。通过将该cDNA与适当的植物表达载体连接，导入植物中，使其有时具有5GT的活性、有时使其活性增加、有时又使其活性降低，用来调节植物的花色成为可能。而通过利用该酶的活性，在植物体中或在试管中改变花色素的结构可以合成更稳定的花色素。
                            序列
序列：1
序列长度：1507
序列类型：核酸
链数：双链
拓扑类型：直链形
起源
  生物名称：紫苏(Perilla frutescens)
  组织种类：叶
直接起源
  文库名：cDNA library
  克隆名：p3R4
序列
GAAAATTTCC ACAAAA ATG GTC CGC CGC CGC GTG CTG CTA GCA ACG TTT       49
                  Met Val Arg Arg Arg Val Leu Leu Ala Thr Phe
                    1               5                  10
CCT GCG CAA GGC CAC ATA AAT CCC GCC CTC CAA TTC GCC AAG AGA CTC     97
Pro Ala Gln Gly His Ile Asn Pro Ala Leu Gln Phe Ala Lys Arg Leu
             15                  20                  25
CTA AAA GCC GGC ACT GAC GTC ACA TTT TTC ACG AGC GTT TAT GCA TGG    145
Leu Lys Ala Gly Thr Asp Val Thr Phe Phe Thr Ser Val Tyr Ala Trp
         30                  35                  40
CGC CGC ATG GCC AAC ACA GCC TCC GCC GCT GCC GGA AAC CCA CCG GGC    193
Arg Arg Met Ala Asn Thr Ala Ser Ala Ala Ala Gly Asn Pro Pro Gly
     45                  50                  55
CTC GAC TTG GTG GCG TTC TCC GAC GGC TAC GAC GAC GGG CTG AAG CCC    241
Leu Asp Phe Val Ala Phe Ser Asp Gly Tyr Asp Asp Gly Leu Lys Pro
 60                  65                  70                  75
TGC GGC GAC GGG AAG CGC TAC ATG TCC GAG ATG AAA GCC CGC GGC TCC    289
Cys Gly ASp Gly Lys Arg Tyr Met Ser Glu Met Lys Ala Arg Gly Ser
                 80                  85                  90
GAG GCC TTA AGA AAC CTC CTT CTC AAC AAC CAC GAG GTe ACG TTC GTC    337
Glu Ala Leu Arg Asn Leu Leu Leu Asn Asn His Asp Val Thr Phe Val
             95                 100                 105
GTC TAC TCC CAC CTC TTT GCA TGG GCG GCG GAG GTG GCG CGT GAG TCC    385
Val Tyr Ser His Leu Phe Ala Trp Ala Ala Glu Val Ala Arg Glu Ser
        110                 115                 120
CAG GTC CCG AGC GCC CTT CTC TGG GTC GAG CCC GCC ACC GTG CTG TGC    433
Gln Val Pro Ser Ala Leu Leu Trp Val Glu Pro Ala Thr Val Leu Cys
    125                 130                 135
ATA TAT TAC TTC TAC TTC AAC GGC TAC GCA GAC GAG ATC GAC GCC GGT    481
Ile Tyr Tyr Phe Tyr Phe Asn Gly Tyr Ala Asp Glu Ile Asp Ala Gly
140                 145                 150                 155
TCC GAC GAA ATT CAG CTC CCT CGG CTT CCA CCC CTG GAG CAG CGC AGT    529
Ser Asp Glu Ile Gln Leu Pro Arg Leu Pro Pro Leu Glu Gln Arg Ser
                160                 165                 170
CTT CCG ACC TTT CTG CTG CCG GAG ACA CCG GAG AGA TTC CGG TTG ATG    577
Leu Pro Thr Phe Leu Leu Pro Glu Thr Pro Glu Arg Phe Arg Leu Met
            175                 180                 185
ATG AAG GAG AAG CTG GAA ACT TTA GAC GGT GAA GAG AAG GCG AAA GTG    625
Met Lys Glu Lys Leu Glu Thr Leu Asp Gly Glu Glu Lys Ala Lys Val
        190                 195                 200
TTG GTG AAC ACG TTT GAT GCG TTG GAG CCC GAT GCA CTC ACG GCT ATT    6T3
Leu Val Asn Thr Phe Asp Ala Leu Glu Pro Asp Ala Leu Thr Ala Ile
    205                 210                 215
GAT AGG TAT GAG TTG ATC GGG ATC GGG CCG TTG ATT CCC TCC GCC TTC    721
Asp Arg Tyr Glu Leu Ile Gly Ile Gly Pro Leu Ile Pro Ser Ala Phe
220                 225                 230                 235
TTG GAC GGC GGA GAT CCC TCC GAA ACG TCT TAC GGC GGC GAT CTT TTC    769
Leu Asp Gly Gly Asp Pro Ser Glu Thr Ser Tyr Gly Gly Asp Leu Phe
                240                 245                 250
GAA AAA TCG GAG GAG AAT AAC TGC GTG GAG TGG TTG GAC ACG AAG CCG    817
Glu Lys Ser Glu Glu Asn Asn Cys Val Glu Trp Leu Asp Thr Lys Pro
            255                 260                 265
AAA TCT TCG GTG GTG TAT GTG TCG TTT GGG AGC GTT TTG AGG TTT CCA    865
Lys Ser Ser Val Val Tyr Val Ser Phe Gly Ser Val Leu Arg Phe Pro
        270                 275                 280
AAG GCA CAA ATG GAA GAG ATT GGG AAA GGG CTA TTA GCC TGC GGA AGG    913
Lys Ala Gln Met Glu Glu Ile Gly Lys Gly Leu Leu Ala Cys Gly Arg
    285                 290                 295
CCG TTT TTA TGG ATG ATA CGA GAA CAG AAG AAT GAC GAC GGC GAA GAA    961
Pro Phe Leu Trp Met Ile Arg Glu Gln Lys Asn Asp Asp Cly Glu Glu
300                 305                 310                 315
GAA GAA GAA GAG TTG AGT TGC ATT GGG GAA TTG AAA AAA ATG GGG AAA   1009
Glu Glu Glu Glu Leu Ser Cys Ile Gly Glu Leu Lys Lys Met Gly Lys
                320                 325                 330
ATA GTT TCG TGG TGC TCG CAG TTG GAG GTT CTG GCG CAC CCT GCG TTC   1057
Ile Val Ser Trp Cys Ser Gln Leu Glu Val Leu Ala His Pro Ala Leu
            335                 340                 345
GGA TGT TTC GTG ACG CAT TGT GGG TGG AAC TCG GCT GTG GAG AGC TTG    1105
Gly Cys Phe Val Thr His Cys Gly Trp Asn Ser Ala Val Glu Ser Leu
        350                 355                 360
AGT TGC GGG GTT CCG GTG GTG GCG GTG CCG CAG TGG TTT GAT CAG ACG    1153
Ser Cys Gly Val Pro Val Val Ala Val Pro Gln Trp Phe Asp Gln Thr
    365                 370                 375
ACG AAT GCG AAG CTG ATT GAG GAT GCG TGG GGG ACA GGG GTG AGA GTG    1201
Thr Asn Ala Lys Leu Ile Glu Asp Ala Trp Gly Thr Gly Val Arg Val
380                 385                 390                 395
AGA ATG AAT GAA GGG GGT GGG GTT GAT GGA TCT GAG ATA GAG AGG TGT    1249
Arg Met Asn Glu Gly Gly Gly Val Asp Gly Ser Glu Ile Glu Arg Cys
                400                 405                 410
GTG GAG ATG GTG ATG GAT GGG GGT GAG AAG AGC AAA CTA GTG AGA GAA    1297
Val Glu Met Val Met Asp Gly Gly Glu Lys Ser Lys Leu Val Arg Glu
            415                 420                 425
AAT GCC ATA AAA TGG AAG ACT TTG GCC AGA GAA GCC ATG GGA GAG GAT    1345
Asn Ala Ile Lys Trp Lys Thr Leu Ala Arg Glu Ala Met Gly Glu Asp
        430                 435                 440
GGA TCT TCA CTC AAG AAT CTC AAC GCC TTT CTT CAT CAA GTT GCA CGT    1393
Gly Ser Ser Leu Lys Asn Leu Asn Ala Phe Leu His Gln Val Ala Arg
    445                 450                 455
GCT TAATACACAA AATGGCTTTC CACTTTTAAT CTACTCAAAC ACCGGTTCAA         1446
Ala
460
ATAAATATCC CCTTCCACTT CTTTCTATTT CACTATCACA TTTATAATTT TAGTAACAAA  1506
A                                                                  1507
序列：2
序列长度：1470
序列类型：核酸
链数：双链
拓扑类型：直链形
起源
  生物名称：紫苏(Perilla frutescens)
  组织种类：叶
直接起源
  文库名：cDNA library
  克隆名：p3R6
序列
ACCAAACCAA AACAAAATTT CCACAAAA ATG GTC CGC CGC CGC GTG CTG CTA      48
                               Met Val Arg Arg Arg Val Leu Leu
                                 1               5
GCA ACG TTT CCG GCG CAA GGC CAC ATA AAT CCC GCC CTC CAA TTC GCC     96
Ala Thr Phe Pro Ala Gln Gly His Ile Ash Pro Ala Leu Gln Phe Ala
     10                  15                  20
AAG AGA CTC CTA AAA GCC GGC ACT GAC GTC ACG TTT TTC ACG AGC GTT    144
Lys Arg Leu Leu Lys Ala Gly Thr Asp Val Thr Phe Phe Thr Ser Val
 25                  30                  35                  40
TAT GCA TGG CGC CGC ATG GCC AAC ACA GCC TCC GCC GCT GCC GGA AAC    192
Tyr Ala Trp Arg Arg Met Ala Asn Thr Ala Ser Ala Ala Ala Gly Asn
                 45                  50                  55
CCA CCG GGC CTC GAC TTC GTG GCG TTC TCC GAC GGC TAC GAC GAC GGG    240
Pro Pro Gly Leu Asp Phe Val Ala Phe Sar Asp Gly Tyr Asp Asp Gly
             60                  65                  70
CTG AAG CCC GGC GGC GAC GGG AAG CGC TAC ATG TCC GAG ATG AAA GCC    288
Leu Lys Pro Gly Gly Asp Gly Lys Arg Tyr Met Ser Glu Met Lys Ala
         75                  80                  85
CGC GGC TCC GAG GCC TTA AGA AAC CTC CTT CTC AAC AAC GAC GAC GTC    336
Arg Gly Ser Glu Ala Leu Arg Asn Leu Leu Leu Asn Asn Asp Asp Val
     90                  95                 100
ACT TTC GTC GTC TAC TCC CAC CTC TTT GCA TGG GCG GCG GAG GTG GCG    384
Thr Phe Val Val Tyr Ser His Leu Phe Ala Trp Ala Ala Glu Val Ala
105                 110                 115                 120
CGT TTG TCC CAC GTC CCG ACC GCC CTT CTC TGG GTC GAG CCC GCC ACC    432
Arg Leu Ser His Val Pro Thr Ala Leu Leu Trp Val Glu Pro Ala Thr
                125                 130                 135
GTG CTG TGC ATA TAC CAC TTC TAC TTC AAC GGC TAC GCA GAC GAG ATC    480
Val Leu Cys Ile Tyr His Phe Tyr Phe Asn Gly Tyr Ala Asp Glu Ile
            140                 145                 150
GAC GCC GGT TCC AAT GAA ATT CAG CTC CCT CGG CTT CCA TCC CTG GAG    528
Asp Ala Gly Ser Asn Glu Ile Gln Leu Pro Arg Leu Pro Ser Leu Glu
        155                 160                 165
CAG CGC AGT CTT CCG ACG TTT CTG CTG CCT GCG ACG CCG GAG AGA TTC    576
Gln Arg Ser Leu Pro Thr Phe Leu Leu Pro Ala Thr Pro Glu Arg Phe
    170                 175                 180
CGG TTG ATG ATG AAG GAG AAC CTG GAA ACT TTA GAC GGT GAA GAG AAG    624
Arg Leu Met Met Lys Glu Lys Leu Glu Thr Leu Asp Gly Glu Glu Lys
185                 190                 195                 200
GCG AAA GTA TTG GTG AAC ACG TTT GAT GCG TTG GAG CCC GAT GCA CTC    672
Ala Lys Val Leu Val Asn Thr Phe Asp Ala Leu Glu Pro Asp Ala Leu
                205                 210                 215
ACG GCT ATT GAT AGG TAT GAG TTG ATC GGG ATC GGG CCG TTG ATT CCC    720
Thr Ala Ile Asp Arg Tyr Glu Leu Ile Gly Ile Gly Pro Leu Ile Pro
            220                 225                 230
TCC GCC TTC TTG GAC GGC GAA GAT CCC TCC GAA ACG TCT TAC GGC GGC    768
Ser Ala Phe Leu Asp Gly Glu Asp Pro Ser Glu Thr Ser Tyr Gly Gly
        235                 240                 245
GAT CTT TTC GAA AAA TCG GAG GAG AAT AAC TGC GTG GAG TGG TTG AAC    816
Asp Leu Phe Glu Lys Ser Glu Glu Asn Asn Cys Val Glu Trp Leu Asn
    250                 255                 260
TCG AAG CCG AAA TCT TCG GTG GTG TAT GTG TCG TTT GGG AGC GTT TTG    864
Ser Lys Pro Lys Ser Ser Val Val Tyr Val Ser Phe Gly Ser Val Leu
265                 270                 275                 280
AGG TTT CCA AAG GCA CAA ATG GAA GAG ATT GGG AAA GGG CTA TTA GCC    912
Arg Phe Pro Lys Ala Gln Met Glu Glu Ile Gly Lys Gly Leu Leu Ala
                285                 290                 295
TGC GGA AGG CCC TTT TTA TGG ATG ATA CGA GAA CAG AAG AAT GAC GAC    960
Cys Gly Arg Pro Phe Leu Trp Met Ile Arg Glu Gln Lys Asn Asp Asp
            300                 305                 310
GGC GAA GAA GAA GAA GAA GAA GAA GAG TTG AGT TGC ATT GGG GAA TTG   1008
Gly Glu Glu Glu Glu Glu Glu Glu Glu Leu Ser Cys Ile Gly Glu Leu
        315                 320                 325
AAA AAA ATG GGG AAA ATA GTG TCG TGG TGC TCG CAG TTG GAG GTT CTG   1056
Lys Lys Met Gly Lys Ile Val Ser Trp Cys Ser Gln Leu Glu Val Leu
    330                 335                 340
GCG CAC CCT GCG TTG GGA TGT TTC GTG ACG CAT TGT GGG TGG AAC TCG   1104
Ala His Pro Ala Leu Gly Cys Phe Val Thr His Cys Gly Trp Asn Ser
345                 350                 355                 360
GCT GTG GAG AGC TTG AGT TGC GGG ATT CCG GTG GTG GCG GTG CCG CAG   1152
Ala Val Glu Ser Leu Ser Cys Gly Ile Pro Val Val Ala Val Pro Gln
                365                 370                 375
TGG TTT GAT CAG ACG ACG AAT GCG AAG CTG ATT GAG GAT GCG TGG GGG   1200
Trp Phe ASp Gln Thr Thr Asn Ala Lys Leu Ile Glu Asp Ala Trp Gly
            380                 385                 390
ACA GGG GTG AGA GTG AGA ATG AAT GAA GGG GGT GGG GTT GAT GGA TGT   1248
Thr Gly Val Arg Val Arg Met Asn Glu Gly Gly Gly Val Asp Gly Cys
        395                 400                 405
GAG ATA GAA AGG TGT GTG GAG ATG GTG ATG GAT GGG GGT GAC AAG ACC   1296
Glu Ile Glu Arg Cys Val Glu Met Val Met Asp Gly Gly Asp Lys Thr
    410                 415                 420
AAA CTA GTG AGA GAA AAT GCC ATC AAA TGG AAG ACT TTG GCC AGA CAA   1344
Lys Leu Val Arg Glu Asn Ala Ile Lys Trp Lys Thr Leu Ala Arg Gln
425                 430                 435                 440
GCC ATG GGA TAGGATGGAT CTTCACTCAA CAATCTCAAC GCCTTTCTTC           1393
Ala Met Gly
        443
GTCAAGTTGC  ACACTTTTAA TCTGCTCAAA CAGCGGTTCA AATAAATATC CCCTTCCACT1453
TAAAAAAAAA AAAAAAA                                                1470
序列：3
序列长度：2062
序列类型：核酸
链数：双链
拓扑类型：直链形
起源
  生物名称：马鞭草(Verbena hybrida)
  组织种类：花瓣
直接起源
  文库名：cDNA library
  克隆名：pSHGT8
序列
ATTTTACCAA AAAAATAAAA AAAAA ATG AGC AGA GCT CAC GTC CTC TTG GCC     52
                            Met Ser Arg Ala His Val Leu Leu Ala
                              1               5
ACA TTC CCA GCA CAG GGA CAC ATA AAT CCC GCC CTT CAA TTC GCC AAG    100
Thr Phe Pro Ala Gln Gly His Ile Asn Pro Ala Leu Gln Phe Ala Lys
 10                  15                  20                  25
CGT CTC GCA AAT GCC GAC ATT CAA GTC ACA TTC TTC ACC AGC GTC TAC    148
Arg Leu Ala Asn Ala Asp Ile Gln Val Thr Phe Phe Thr Ser Val Tyr
                 30                  35                  40
GCA TGG CGC CGC ATG TCC AGA ACC GCC GCT GGC TCA AAC GGG CTC ATC    196
Ala Trp Arg Arg Met Ser Arg Thr Ala Ala Gly Ser Asn Gly Leu Ile
             45                  50                  55
AAT TTT GTG TCG TTT TCC GAC GGG TAT GAC GAC GGG TTA CAG CCC GGA    244
Asn Phe Val Ser Phe Ser Asp Gly Tyr Asp Asp Gly Leu Gln Pro Gly
         60                  65                  70
GAC GAT GGG AAG AAC TAC ATG TCG GAG ATG AAA AGC AGA GGT ATA AAA    292
Asp Asp Gly Lys Asn Tyr Met Ser Glu Met Lys Ser Arg Gly Ile Lys
     75                  80                  85
GCC TTG AGC GAT ACT CTT GCA GCC AAT AAT GTC GAT CAA AAA AGC AGC    340
Ala Leu Ser Asp Thr Leu Ala Ala Asn Asn Val Asp Gln Lys Ser Ser
90                   95                 100                 105
AAA ATC ACG TTC GTG GTG TAC TCC CAC CTC TTT GCA TGG GCG GCC AAG    388
Lys Ile Thr Phe Val Val Tyr Ser His Leu Phe Ala Trp Ala Ala Lys
                110                 115                 120
GTG GCG CGT GAG TTC CAT CTC CGG AGC GCG CTA CTC TGG ATT GAG CCA    436
Val Ala Arg Glu Phe His Leu Arg Ser Ala Leu Leu Trp Ile Glu Pro
            125                 130                 135
GCT ACG GTG TTG GAT ATA TTT TAC TTT TAT TTC AAC GGC TAT AGC GAC    484
Ala Thr Val Leu Asp Ile Phe Tyr Phe Tyr Phe Asn Gly Tyr Ser Asp
        140                 145                 150
GAA ATC GAT GCG GGT TCG GAT GCT ATT CAC TTG CCC GGA GGA CTC CCA    532
Glu Ile Asp Ala Gly Ser Asp Ala Ile His Leu Pro Gly Gly Leu Pro
    155                 160                 165
GTG CTG GCC CAG CGT GAT TTA CCG TCT TTC CTT CTT CCT TCC ACG CAT    580
Val Leu Ala Gln Arg Asp Leu Pro Ser Phe Leu Leu Pro Ser Thr His
170                 175                 180                 185
GAG AGA TTC CGT TCA CTG ATG AAG GAG AAA TTG GAA ACT TTA GAA GGT    628
Glu Arg Phe Arg Ser Leu Met Lys Glu Lys Leu Glu Thr Leu Glu Gly
                190                 195                 200
GAA GAA AAA CCT AAG GTC TTG GTG AAC AGC TTT GAT GCG TTG GAG CCT    676
Glu Glu Lys Pro Lys Val Leu Val Asn Ser Phe Asp Ala Leu Glu Pro
            205                 210                 215
GAT GCG CTC AAG GCC ATT GAT AAG TAC GAG ATG ATT GCA ATC GGG CCG    724
Asp Ala Leu Lys Ala Ile Asp Lys Tyr Glu Met Ile Ala Ile Gly Pro
        220                 225                 230
TTG ATT CCT TCC GCA TTC TTG GAC GGT AAA GAT CCT TCG GAC AGG TCT    772
Leu Ile Pro Ser Ala Phe Leu Asp Gly Lys Asp Pro Ser Asp Arg Ser
    235                 240                 245
TTC GGC GGA GAT TTG TTC GAG AAA GGG TCG AAT GAC GAC GAT TGC CTC    820
Phe Gly Gly Asp Leu Phe Glu Lys Gly Ser Asn Asp Asp Asp Cys Leu
250                 255                 260                 265
GAA TGG TTG AGC ACG AAT CCT CGA TCT TCG GTG GTT TAC GTT TCG TTC    868
Glu Trp Leu Ser Thr Asn Pro Arg Ser Ser Val Val Tyr Val Ser Phe
                270                 275                 280
GGA AGC TTC GTT AAT ACG ACG AAG TCG CAA ATG GAA GAG ATA GCA AGA    916
Gly Ser Phe Val Asn Thr Thr Lys Ser Gln Met Glu Glu Ile Ala Arg
            285                 290                 295
GGG CTG TTA GAT TGT GGG AGG CCG TTT TTG TGG GTG GTA AGA GTA AAC    964
Gly Leu Leu Asp Cys Gly Arg Pro Phe Leu Trp Val Val Arg Val Asn
        300                 305                 310
GAA GGA GAA GAG GTA TTG ATA AGT TGC ATG GAG GAG TTG AAA CGA GTG   1012
Glu Gly Glu Glu Val Leu Ile Ser Cys Met Glu Glu Leu Lys Arg Val
    315                 320                 325
GGG AAA ATT GTA TCT TGG TGT TCT CAA TTG GAA GTC CTG ACG CAT CCC   1060
Gly Lys lle Val Ser Trp Cys Ser Gln Leu Glu Val Leu Thr His Pro
330                 335                 340                 345
TCG TTG GGA TGT TTC GTG ACA CAC TGC GGG TGG AAT TCG ACT CTA GAG   1108
Ser Leu Gly Cys Phe Val Thr His Cys Gly Trp Asn Ser Thr Leu Glu
                350                 355                 360
AGT ATA TCT TTC GGG GTT CCG ATG GTG GCT TTT CCG CAG TGG TTC GAT   1156
Ser Ile Ser Phe Gly Val Pro Met Val Ala Phe Pro Gln Trp Phe Asp
            365                 370                 375
CAA GGG ACG AAT GCG AAG CTG ATG GAG GAT GTG TGG AGG ACG GCT GTG   1204
Gln Gly Thr Asn Ala Lys Leu Met Glu Asp Val Trp Arg Thr Gly Val
        380                 385                 390
AGA GTG AGA GCT AAT GAG GAG GGT AGC GTC GTT GAT GGT GAT GAA ATT   1252
Arg Val Arg Ala Asn Glu Glu Gly Ser Val Val Asp Gly Asp Glu Ile
    395                 400                 405
AGG AGA TGT ATT GAG GAG GTT ATG GAT GGG GGA GAA AAG AGT AGG AAA   1300
Arg Arg Cys Ile Glu Glu Val Met Asp Gly Gly Glu Lys Ser Arg Lys
410                 415                 420                 425
CTT AGA GAG AGT GCT GGC AAG TGG AAG GAT TTG GCA AGA AAA GCT ATG   1348
Leu Arg Glu Ser Ala Gly Lys Trp Lys Asp Leu Ala Arg Lys Ala Met
                430                 435                 440
GAG GAA GAT GGA TCT TCA GTT AAC AAC CTC AAG GTC TTT CTT GAT CAG   1396
Glu Glu Asp Gly Ser Ser Val Asn Asn Leu Lys Val Phe Leu Asp Glu
            445                 450                 455
GTT GTA GGT ATC TAAAGACGTA AATGAGGTCC CCATAGGCAA AATTGCAAAT       1448
Val Val Gly Ile
        460 461
TTCATCTCGT AAGTTGAATA CTTTTTGGCT TTAATTTTGT TCGAGTTTGT TTTTCAAAAT 1508
TTATCTTGTA ATTTTACATT GAGTGTAAAT TTAGTCTGAT TTTAACTGGA AAAATATAAA 1568
ATTCATTGTT GAGACTCTTC ATCAAAATCA TCTGATTTCC TTTATTGTCT TGGTCAAAAT 1628
TCTCATATCA ATTGGAAAAA ATAAATTTCA AAATCGTCCA ATTTTGAACC AAGAAAGAAG 1688
TATAATTTGA CCAAAATAAT AAAAGGATTC AAGTGATCTT GATGAAGTGT CTGAGCGACG 1748
AGTTCTATAT TTTTCCACCG AATTTCTAAC GAGTTTTTGA ATTTTTTTTA GCCAAAATCG 1808
GACTAACTTT GTACAAAATG AAAAGTTATA TGATGAAATT TTAAAAAACA AACTCAGACA 1868
ATAATAAAGC CCGAAAGTAG TAAAATTACC TGACGAAATT TGCAATTTCG CCTCCTATTT 1928
TAATTTTTTT GGTGTGTTTA ATAAATCGGT TATTTTACTT TTAATTAAAA TAAAAGTGAG 1988
ATGCATGATA GCTTGGTGAG TATATATGAG TTGATGGTAA TGTACGATAT TTTCTAAAAA 2048
AAAAAAAAAA AAAA                                                   2062
序列：4
序列长度：1671
序列类型：核酸
链数：双链
拓扑类型：直链形
起源
  生物名称：蓝竹耳
  组织种类：花瓣
直接起源
  文库名：cDNA library
  克隆名：pSTGT5
序列
AACACATAAA AAAAAAATAA AAGAAGAAAT AATTAAAAAA AAAA ATG GTT AAC        53
                                                 Met Val Asn
                                                   1
AAA CGC CAT ATT CTA CTA GCA ACA TTC CCA GCA CAA GGC CAC ATA AAC    101
Lys Arg His Ile Leu Leu Ala Thr Phe Pro Ala Gln Gly His Ile Ash
      5                  10                  15
CCT TCT CTC GAG TTC GCC AAA AGG CTC CTC AAC ACC GGA TAC GTC GAC    149
Pro Ser Leu Glu Phe Ala Lys Arg Leu Leu Asn Thr Cly Tyr Val Asp
 20                  25                  30                  35
CAA GTC ACA TTC TTC ACG AGT GTA TAC GCA TTG AGA CGC ATG CGC TTC    197
Gln Val Thr Phe Phe Thr Ser Val Tyr Ala Leu Arg Arg Met Arg Phe
                 40                  45                  50
GAA ACC GAT CCG AGC AGC AGA ATC GAT TTC GTG GCA TKT YCA GAT TCT    245
Glu Thr Asp Pro Ser Ser Arg Ile Asp Phe Val Ala  X   X   Asp Ser
             55                  60                  65
TAC GAT GAT GGC TTA AAG AAA GGC GAC GAT GGC AAA AAC TAC ATG TCG    293
Tyr Asp Asp Gly Leu Lys Lys Gly Asp Asp Gly Lys Asn Tyr Met Ser
         70                  75                  80
GAG ATG AGA AAG CGC GGA ACG AAG GCC TTA AAG GAC ACT CTT ATT AAG    341
Glu Met Arg Lys Arg Gly Thr Lys Ala Leu Lys Asp Thr Leu Ile Lys
     85                  90                  95
CTC AAC GAT GCT GCG ATG GGA AGT GAA TGT TAC AAT CGC GTG AGC TTT    389
Leu Asn Asp Ala Ala Met Gly Ser Glu Cys Tyr Asn Arg Val Ser Phe
100                 105                 110                 115
GTG GTG TAC TCT CAT CTA TTT TCG TGG GCA GCT GAA GTG GCG CGT GAA    437
Val Val Tyr Ser His Leu Phe Ser Trp Ala Ala Glu Val Ala Arg Glu
                120                 125                 130
GTC GAC GTG CCG AGT GCC CTT CTT TGG ATT GAA CCG GCT ACG GTT TTC    485
Val Asp Val Pro Ser Ala Leu Leu Trp Ile Glu Pro Ala Thr Val Phe
            135                 140                 145
CAT GTG TAC TAT TTT TAC TTC AAT GGG TAT GCC GAT GAT ATC GAT GCG    533
Asp Val Tyr Tyr Phe Tyr Phe Asn Gly Tyr Ala Asp Asp Ile Asp Ala
        150                 155                 160
GGC TCA GAT CAA ATC CAA CTG CCC AAT CTT CCG CAG CTC TCC AAG CAA    581
Gly Ser Asp Gln Ile Gln Leu Pro Asn Leu Pro Gln Leu Ser Lys Gln
    165                 170                 175
GAT CTC CCC TCT TTC CTA CTC CCT TCG AGC CCC GCG AGA TTC CGA ACC    629
Asp Leu Pro Ser Phe Leu Leu Pro Ser Ser Pro Ala Arg Phe Arg Thr
180                 185                 190                 195
CTA ATG AAA GAA AAG TTC GAC ACG CTC GAC AAA GAA CCG AAA GCG AAG    677
Leu Met Lys Glu Lys Phe Asp Thr Leu Asp Lys Glu Pro Lys Ala Lys
                200                 205                 210
GTC TTG ATA AAC ACG TTC GAC GCA TTA GAA ACC GAA CAA CTC AAA GCC    725
Val Leu Ile Asn Thr Phe Asp Ala Leu Glu Thr Glu Gln Leu Lys Ala
            215                 220                 225
ATC GAC AGG TAT GAA CTA ATA TCC ATC GGC CCA TTA ATC CCA TCA TCG    773
Ile Asp Arg Tyr Glu Leu Ile Ser Ile Gly Pro Leu Ile Pro Ser Ser
        230                 235                 240
ATA TTC TCA GAT GGC AAC GAC CCC TCA TCA AGC AAC AAA TCC TAC GGT    821
Ile Phe Ser Asp Gly Asn Asp Pro Ser Ser Ser Asn Lys Ser Tyr Gly
    245                 250                 255
GGA GAC CTC TTC AGA AAA GCC GAT GAA ACT TAC ATG GAC TGG CTA AAC    869
Gly Asp Leu Phe Arg Lys Ala Asp Glu Thr Tyr Met Asp Trp Leu Asn
260                 265                 270                 275
TCA AAA CCC GAA TCA TCG GTC GTT TAC GTT TCG TTC GGG AGC CTC CTG    917
Ser Lys Pro Glu Ser Ser Val Val Tyr Val Ser Phe Gly Ser Leu Leu
                280                 285                 290
AGG CTC CCG AAA CCC CAA ATG GAA GAA ATA GCA ATA GGG CTT TCA GAC    965
Arg Leu Pro Lys Pro Gln Met Glu Glu Ile Ala Ile Gly Leu Ser Asp
            295                 300                 305
ACC AAA TCG CCA GTT CTC TGG GTG ATA AGA AGA AAC GAA GAG GGC GAC   1013
Thr Lys Ser Pro Val Leu Trp Val Ile Arg Arg Asn Glu Glu Gly Asp
        310                 315                 320
GAA CAA GAG CAA GCA GAA GAA GAA GAG AAG CTG CTG AGC TTC TTT GAT   1061
Glu Gln Glu Gln Ala Glu Glu Glu Glu Lys Leu Leu Ser Phe Phe Asp
    325                 330                 335
CGT CAC GGA ACT GAA CGA CTC GGG AAA ATC GTG ACA TGG TGC TCA CAA   1109
Arg His Gly Thr Glu Arg Leu Gly Lys Ile Val Thr Trp Cys Ser Gln
340                 345                 350                 355
TTG GAT GTT CTG ACG CAT AAG TCG GTG GGA TGC TTC GTG ACG CAT TGC   1157
Leu Asp Val Leu Thr His Lys Ser Val Gly Cys Phe Val Thr His Cys
                360                 365                 370
GGT TGG AAT TCT GCT ATC GAG AGC CTG GCT TGT GGT G7G CCC GTG GTG   1205
Gly Trp Asn Ser Ala Ile Glu Ser Leu Ala Cys Gly Val Pro Val Val
            375                 380                 385
TGC TTT CCT CAA TGG TTC GAT CAA GGG ACT AAT GCG AAG ATG ATC GAA   1253
Cys Phe Pro Gln Trp Phe Asp Gln Gly Thr Asn Ala Lys Met Ile Glu
        390                 395                 400
GAT GTG TGG AGG AGT GGT GTG AGA GTC AGA GTG AAT GAG GAA GGC GGC   1301
Asp Val Trp Arg Ser Gly Val Arg Val Arg Val Asn Glu Glu Gly Gly
    405                 410                 415
GTT GTT GAT AGG CGT GAG ATT AAG AGG TGC GTC TCG GAG GTT ATA AAG   1349
Val Val Asp Arg Arg Glu Ile Lys Arg Cys Val Ser Glu Val Ile Lys
420                 425                 430                 435
AGT CGA GAG TTG AGA GAA AGC GCA ATG ATG TGG AAG GGT TTG GCT AAA   1397
Ser Arg Glu Leu Arg Glu Ser Ala Met Met Trp Lys Gly Leu Ala Lys
                440                 445                 450
GAA GCT ATG GAT GAA GAA CGT GGA TCA TCA ATG AAC AAT CTG AAG AAT   1445
Glu Ala Met Asp Glu Glu Arg Gly Ser Ser Met Asn Asn Leu Lys Asn
            455                 460                 465
TTT ATT ACT AGG ATT ATT AAT GAA AAT GCC TCA TAAGTTGTAC            1488
Phe Ile Thr Arg Ile Ile Asn Glu Asn Ala Ser
        470                 475         478
TATATATGTT ATTATTGTTG TTATGGACGT CGAATTAAGT ATTAGTTAAA TGATATGTAT  1548
TTAGAGGAAG GCCAAAACGG GCTACACCCG GCAGGCCACG GGTTGGAAAA GCCCGCCATG  1608
ATTTAAAATA TATATTTTAA AATAAATATT TTCTACTATT AAACTAAAAA AAAAAAAAAA  1668
AAA                                                                1671
序列：5
序列长度：1437
序列类型：核酸
链数：双链
拓扑类型：直链形
起源
  生物名称：紫苏(Perilla frutescens)
  组织种类：叶
直接起源
  文库名：cDNA library
  克隆名：p8R6
序列
TTCAAAACTC ATAACGTGAT TGAGCTAATG TGCACATCTT CCTCTTCAAA GTCTACAGTG   60
TCATCCTACC AGCATCATCA TGATCAATCT CTTTATAATG AGGAGAATGG AGTAACAAGG  120
AGTGGGTTTT GTTACTCAGC TTCAACCTAC GTACGTACTA CTACTGACTC AACTCTCAAG  180
AGAATGAATA TAATATATAA TGGGCGATAG ATCTTTGTAG ATATGTAGGT GTAGCCTGCA  240
GGTGGTTAAT TAATTTCCGG TGTGGGAAAA TAAATAAATA AATAAATATA GCG ATG AGC 299
                                                           Met Ser
                                                             1
AGC AGC AGC AGC AGA AGG TGG AGA GAG AAT GAG GGG ATG CGA AGG ACA    347
Ser Ser Ser Ser Arg Arg Trp Arg Glu Asn Glu Gly Met Arg Arg Thr
          5                  10                  15
TTG CTG GGG TTG GGT TTG GGG CAG TTG GTT TCT TTC GAT TTG GCT ATC    395
Leu Leu Gly Leu Gly Leu Gly Gln Leu Val Ser Phe Asp Leu Ala Ile
     20                  25                  30
ATG ACC TTT TCT GCT TCT TTG GTT TCA ACC ACA GTG GAT GCA CCA CTT    443
Met Thr Phe Ser Ala Ser Leu Val Ser Thr Thr Val Asp Ala Pro Leu
35                   40                  45                  50
ACT ATG TCG TTC ACT ACA TAC ACT GTT GTG GCC CTG CTC TAT GGA ACC    491
Thr Met Ser Phe Thr Thr Tyr Thr Val Val Ala Leu Leu Tyr Gly Thr
                 55                  60                  65
ATC TTG CTT TAC CGC CGC CAC AAA TTC TTG GTT CCA TGG TAC TGG TAT    539
Ile Leu Leu Tyr Arg Arg His Lys Phe Leu Val Pro Trp Tyr Trp Tyr
             70                  75                  80
GCT CTC CTG GGG TTC GTG GAC GTC CAC GGC AAT TAT CTT GTT AAT AAA    587
Ala Leu Leu Gly Phe Val Asp Val His Gly Asn Tyr Leu Val Asn Lys
         85                  90                  95
GCA TTC GAG TTG ACA TCG ATT ACG AGT GTG AGC ATA CTG GAT TGT TGG    635
Ala Phe Glu Leu Thr Ser Ile Thr Ser Val Ser Ile Leu Asp Cys Trp
    100                 105                 110
ACA ATC GTG TGG TCC ATC ATC TTT ACA TGG ATG TTC CTA GGC ACA AAA    683
Thr Ile Val Trp Ser Ile Ile Phe Thr Trp Met Phe Leu Gly Thr Lys
115                 120                 125                 130
TAC TCT GTA TAC CAG TTT GTC GGT GCT GCT ATT TGT GTA GGA GGC CTC    731
Tyr Ser Val Tyr Gln Phe Val Gly Ala Ala Ile Cys Val Gly Gly Leu
                135                 140                 145
CTC CTC GTG CTT CTT TCC GAC TCA GGG GTC ACT GCT GCT GCT TCG AAT    779
Leu Leu Val Leu Leu Ser Asp Ser Gly Val Thr Ala Ala Gly Ser Asn
            150                 155                 160
CCT CTT TTG GGT GAT TTT CTT GTC ATA ACA GGC TCT ATT TTG TTC ACA    827
Pro Leu Leu Gly Asp Phe Leu Val Ile Thr Gly Ser Ile Leu Phe Thr
        165                 170                 175
CTC AGC ACT GTT GGT CAG GAA TAC TGC GTG AAG AGG AAA GAT CGT ATT     875
Leu Ser Thr Val Gly Gln Glu Tyr Cys Val Lys Arg Lys Asp Arg Ile
    180                 185                 190
GAA GTA GTA GCA ATG ATC GGT GTA TTT GGT ATG CTC ATC AGT GCA ACC     923
Glu Val Val Ala Met Ile Gly Val Phe Gly Met Leu Ile Ser Ala Thr
195                 200                 205                 210
GAG ATT ACT GTG CTG GAG AGG AAT GCC CTC TCA TCA ATG CAG TGG TCT     971
Glu Ile Thr Val Leu Glu Arg Asn Ala Leu Ser Ser Met Gln Trp Ser
                215                 220                 225
ACT GGA CTT TTG GCA GCC TAT GTT GTT TAT GCA CTG TCC AGC TTC CTC    1019
Thr Gly Leu Leu Ala Ala Tyr Val Val Tyr Ala Leu Ser Ser Phe Leu
            230                 235                 240
TTC TGC ACA CTC ACC CCT TTT CTT CTC AAG ATG AGT GGC GCT GCA TTT    1067
Phe Cys Thr Leu Thr Pro Phe Leu Leu Lys Met Ser Gly Ala Ala Phe
        245                 250                 255
TTC AAT CTT TCC ATG CTT ACA TCT GAT ATG TGG GCT GTT GCA ATT AGG    1115
Phe Asn Leu Ser Met Leu Thr Ser Asp Met Trp Ala Val Ala Ile Arg
    260                 265                 270
ACA TTC ATA TAC AAC CAG GAG GTT GAT TGG TTA TAC TAT TTG GCC TTT    1163
Thr Phe Ile Tyr Asn Gln Glu Val Asp Trp Leu Tyr Tyr Leu Ala Phe
275                 280                 285                 290
TGT CTC GTT GTT GTT GGA ATA TTC ATA TAT ACA AAA ACA GAG AAG GAT    1211
Cys Leu Val Val Val Gly Ile Phe Ile Tyr Thr Lys Thr Glu Lys Asp
                295                 300                 305
CCT AAC AAT ACG AGA GCC CTT GAG AAT GGA AAC TTG GAT CAT GAA TAT    1259
Pro Asn Asn Thr Arg Ala Leu Glu Asn Gly Asn Leu Asp His Glu Tyr
            310                 315                 320
AGT CTC CTT GAG GAT CAA GAT GAC ACA CCA AGA AAA CCA TAGCTAGCTT      1308
Ser Leu Leu Glu Asp Gln Asp Asp Thr Pro Arg Lys Pro
    325                 330                 335
TGCCCACAAT CTTTTCATCA ACAGTTTTAA ATAATTCGTG AGGGGGAGAG AGATCGAGAT   1368
ACTAATTAAT GGACGTCTAT TATATAGTTG GAGGTTTTTG TTTTATTTAT TTATTTGAGT   1428
AAAAAAAAA                                                           1437
序列：6
序列长度：2105
序列类型：核酸
链数：双链
拓扑类型：直链形
起源
  生物名称：矮牵牛花
  组织种类：花瓣
直接起源
  文库名：cDNA library
  克隆名：pSPGT1
序列
AGTGAGCGCA ACGCAATTAA TGTGAGTTAG CTCACTCATT AGGCACCCCA GGCTTTACAC    60
TTTATGCTTC CGGCTCGTAT GTTGTGTGGA ATTGTGAGCG GATAACAATT TCACACAGGA   120
AACAGCTATG ACCATGATTA CGCCAAGCTC GAAATTAACC CTCACTAAAG GGAACAAAAG   180
CTGGAGCTCC ACGCGGTGGC GGCCGCTCTA GAACTAGTGG ATCCCCCGGG CTGCAGGAAT   240
TCCGTTGCTG TCGCCACAAT TTACAAACCA AGAAATTAAG CATCCCTTTC CCCCCCTTAA   300
AAAACATACA AGTTTTTAAT TTTTCACTAA GCAAGAAAAT ATG GTG CAG CCT CAT GTC 358
                                            Met Val Gln Pro His Val
                                              1               5
ATC TTA ACA ACA TTT CCA GCA CAA GGC CAT ATT AAT CCA GCA CTT CAA    406
Ile Leu Thr Thr Phe Pro Ala Gln Gly His Ile Asn Pro Ala Leu Gln
             10                  15                  20
TTT GCC AAG AAT CTT GTC AAG ATG GGC ATA GAA GTG ACA TTT TCT ACA    454
Phe Ala Lys Asn Leu Val Lys Met Gly Ile Glu Val Thr Phe Ser Thr
         25                  30                  35
AGC ATT TAT GCC CAA AGC CGT ATG GAT GAA AAA TCC ATT CTT AAT GCA    502
Ser Ile Tyr Ala Gln Ser Arg Met Asp Glu Lys Ser Ile Leu Asn Ala
     40                  45                  50
CCA AAA GGA TTG AAT TTC ATT CCA TTT TCC GAT GGC TTT GAT GAA GGT    550
Pro Lys Gly Leu Asn Phe Ile Pro Phe Ser Asp Gly Phe Asp Glu Gly
55                   60                  65                  70
TTT GAT CAT TCA AAA GAC CCT GTA TTT TAC ATG TCA CAA CTT CGT AAA    598
Phe Asp His Ser Lys Asp Pro Val Phe Tyr Met Ser Gln Leu Arg Lys
                 75                  80                  85
TGT GGA AGT GAA ACT GTC AAA AAA ATA ATT CTC ACT TGC TCT GAA AAT    646
Cys Gly Ser Glu Thr Val Lys Lys Ile Ile Leu Thr Cys Ser Glu Asn
             90                 95                  100
GGA CAG CCT ATA ACT TGC CTA CTT TAC TCC ATT TTC CTT CCT TGG GCA    694
Gly Gln Pro Ile Thr Cys Leu Leu Tyr Ser Ile Phe Leu Pro Trp Ala
        105                 110                 115
GCA GAG GTA GCA CGT GAA GTT CAC ATC CCT TCT GCT CTT CTT TGG AGT    742
Ala Glu Val Ala Arg Glu Val His Ile Pro Ser Ala Leu Leu Trp Ser
    120                 125                 130
CAA CCA GCA ACA ATA TTG GAC ATA TAT TAC TTC AAC TTT CAT GGA TAT    790
Gln Pro Ala Thr Ile Leu Asp Ile Tyr Tyr Phe Asn Phe His Gly Tyr
135                 140                 145                 150
GAA AAA GCT ATG GCT AAT GAA TCC AAT GAT CCA AAT TGG TCC ATT CAA    838
Glu Lys Ala Met Ala Asn Glu Ser Asn Asp Pro Asn Trp Ser Ile Gln
                155                 160                 165
CTT CCC GGG CTT CCA CTA CTG GAA ACT CGA GAT CTT CCT TCA TTT TTA    886
Leu Pro Gly Leu Pro Leu Leu Glu Thr Arg Asp Leu Pro Ser Phe Leu
            170                 175                 180
CTT CCT TAT GGT GCA AAA GGG AGT CTT CGA GTT GCA CTT CCA CCA TTC    934
Leu Pro Tyr Gly Ala Lys Gly Ser Leu Arg Val Ala Leu Pro Pro Phe
        185                 190                 195
AAA GAA TTG ATA GAC ACA TTA GAT GCT GAA ACC ACT CCT AAG ATT CTT    982
Lys Glu Leu Ile Asp Thr Leu Asp Ala Glu Thr Thr Pro Lys Ile Leu
    200                 205                 210
GTG AAT ACA TTT GAT GAA TTA GAG CCT GAG GCA CTC AAT GCA ATT GAA   1030
Val Asn Thr Phe Asp Glu Leu Glu Pro Glu Ala Leu Asn Ala Ile Glu
215                 220                 225                 230
GGT TAT AAG TTT TAT GGA ATT GGA CCG TTG ATT CCT TCT GCT TTC TTG   1078
Gly Tyr Lys Phe Tyr Gly Ile Gly Pro Leu Ile Pro Ser Ala Phe Leu
                235                 240                 245
GGT GGA AAT GAC CCT TTA GAT GCT TCA TTT GGT GGT GAT CTT TTT CAA   112S
Gly Gly Asn Asp Pro Leu Asp Ala Ser Phe Gly Gly Asp Leu Phe Gln
            250                 255                 260
AAT TCA AAT GAC TAT ATG GAA TGG TTA AAC TCA AAG CCA AAT TCA TCA   1174
Asn Ser Asn Asp Tyr Met Glu Trp Leu Asn Ser Lys Pro Asn Ser Ser
        265                 270                 275
GTT GTT TAT ATA TCT TTT GGG AGT CTA ATG AAT CCA TCT ATT AGC CAA   1222
Val Val Tyr Ile Ser Phe Gly Ser Leu Met Asn Pro Ser Ile Ser Gln
    280                 285                 290
ATG GAG GAG ATA TCA AAA GGG TTG ATA GAC ATA GGA AGG CCG TTT TTA    1270
Met Glu Glu Ile Ser Lys Gly Leu Ile Asp Ile Gly Arg Pro Phe Leu
295                 300                 305                 310
TGG GTG ATA AAA GAA AAT GAA AAA GGC AAA GAA GAA GAG AAT AAA AAG    1318
Trp Val Ile Lys Glu Asn Glu Lys Gly Lys Glu Glu Glu Asn Lys Lys
                315                 320                 325
CTT GGT TGT ATT GAA GAA TTG GAA AAA ATA GGA AAA ATA GTT CCA TGG    1366
Leu Gly Cys Ile Glu Glu Leu Glu Lys Ile Gly Lys Ile Val Pro Trp
            330                 335                 340
TGT TCA CAA CTT GAA GTT CTA AAA CAT CCA TCT TTA GGA TGT TTT GTT    1414
Cys Ser Gln Leu Glu Val Leu Lys His Pro Ser Leu Gly Cys Phe Val
        345                 350                 355
TCT CAT TGT GGA TGG AAT TCA GCC TTA GAG AGT TTA GCT TGT GGA GTG    1462
Ser His Cys Gly Trp Asn Ser Ala Leu Glu Ser Leu Ala Cys Gly Val
    360                 365                 370
CCA GTT GTG GCA TTT CCT CAA TGG ACA GAT CAA ATG ACA AAT GCC AAA    1510
Pro Val Val Ala Phe Pro Gln Trp Thr Asp Gln Met Thr Asn Ala Lys
375                 380                 385                 390
CAA GTT GAA GAT GTG TGG AAA AGT GGA GTA AGA GTG AGA ATA AAT GAA    1558
Gln Val Glu Asp Val Trp Lys Ser Gly Val Arg Val Arg Ile Asn Glu
                395                 400                 405
GAT GGT GTT GTT GAA AGT GAG GAA ATC AAA AGG TGT ATT GAA TTG GTA    1606
Asp Gly Val Val Glu Ser Glu Glu Ile Lys Arg Cys Ile Glu Leu Val
            410                 415                 420
ATG GAT GGA GGA GAG AAA GGG GAA GAA TTG AGA AAG AAT GCT AAG AAA    1654
Met Asp Gly Gly Glu Lys Gly Glu Glu Leu Arg Lys Asn Ala Lys Lys
        425                 430                 435
TGG AAA GAA TTG GCT AGA GAA GCT GTG AAG GAA GGT GGA TCT TCA CAC    1702
Trp Lys Glu Leu Ala Arg Glu Ala Val Lys Glu Gly Gly Ser Ser His
    440                 445                 450
AAG AAT TTA AAG GCT TTT ATT GAT GAT GTT GCC AAA GGG TTT TAATATTTAC 1754
Lys Asn Leu Lys Ala Phe Ile Asp Asp Val Ala Lys Gly Phe
455                 460                 465         468
AGGCTTTTGC CGTGATATTA CTTCCCCTAG TTGGCGATTC ACTCTTTGTG GACTTGCTTG  1814
ACAAAAAACT GAGGGAATGT GCTAAGACAC GCTAATGCTT TAAGAAGTCA TTTCCAAGGC  1874
TTGAAGCCTG CTTTTAAAAC TTATTAGCCA GTAATCTATA GGGTTCTCTT CTATTTTTCT  1934
CTGTCTCTCT TTTTAGCCTT TTTCTTTCCA AGGTTTAAGA ATAGCGTGAA CATAGCTTAG  1994
TACGTAGTCT TGGTATCTCT ATCTTACCAA GTGCAAGATT ATGCTTATGC TGTCCTCCTA  2054
AATTTCTTAA TAAAATGCAA GATGAAAAAG TACAAAAAAA AAAAAAAAAA A           2105
                                          序列表
<110>Suntory Limited
<120>编码具有糖转移活性的蛋白质的基因
<130>STY-F846-PCT
<150>JPPH9-200571
<151>1997-07-25
<160>11
<210>1
<211>1507
<212>DNA
<213>Perilla frutescens
<400>1
gaaaatttcc acaaaa atg gtc cgc cac cgc gtg ctg cta gca acg ttt       49
                  Met Val Arg Arg Arg Val Leu Leu Ala Thr Phe
                    1               5                  10
cct gcg caa ggc cac ata aat ccc gcc ctc caa ttc gcc aag aaa ctc     97
Pro Ala Gln Gly His Ile Asn Pro Ala Leu Gln Phe Ala Lys Arg Leu
             15                  20                  25
cta aaa gcc ggc act gac gtc acs ttt ttc acg aac gtt tat gca tgg    145
Leu Lys Ala Gly Thr Asp Val Thr Phe Phe Thr Ser Val Tyr Ala Trp
         30                  35                  40
cgc cgc atg gcc aac aca gcc tcc gcc gct gcc gga aac cca ccg ggc    193
Arg Arg Met Ala Asn Thr Ala Ser Ala Ala Ala Gly Asn Pro Pro Gly
     45                  50                  55
ctc gac ttc gtg gcg ttc tcc gac ggc tac gac gac ggg ctg aag ccc    241
Leu Asp Phe Val Ala Phe Ser Asp Gly Tyr Asp Asp Gly Leu Lys Pro
 60                  65                  70                  75
tgc ggc gac ggg aag cgc tac atg tcc gag atg aaa gcc cgc ggc tcc    289
Cys Gly Asp Gly Lys Arg Tyr Met Ser Glu Met Lys Ala Arg Gly Ser
                 80                  85                  90
gag gcc tta aga aac ctc ctt ctc aac aac cac gac gtc acg ttc gtc    337
Glu Ala Leu Arg Asn Leu Leu Leu Asn Asn His Asp Val Thr Phe Val
             95                 100                 105
gtc tac tcc cac ctc ttt gca tgg gcg gcg gag gtg gcg cgt gag tcc    385
Val Tyr Ser His Leu Phe Ala Trp Ala Ala Glu Val Ala Arg Glu Ser
        110                 115                 120
cag gtc ccg agc gcc ctt ctc tgg gtc gag ccc gcc acc gtg ctg tgc    433
Gln Val Pro Ser Ala Leu Leu Trp Val Glu Pro Ala Thr Val Leu Cys
    125                 130                 135
ata tat tac ttc tac ttc aac ggc tac gca gac gag atc gac gcc ggt    481
Ile Tyr Tyr Phe Tyr Phe Asn Gly Tyr Ala Asp Glu Ile Asp Ala Gly
140                 145                 150                 155
tcc gac gaa att cag ctc cct cgg ctt cca ccc ctg gag cag cgc agt    529
Ser Asp Glu Ile Gln Leu Pro Arg Leu Pro Pro Leu Glu Gln Arg Ser
                160                 165                 170
ctt ccg acc ttt ctg ctg ccg gag aca ccg gag aga ttc cgg ttg atg    577
Leu Pro Thr Phe Leu Leu Pro Glu Thr Pro Glu Arg Phe Arg Leu Met
            175                 180                 185
atg aag gag aag ctg gaa act tta gac ggt gaa gag aag gcg aaa gtg    625
Met Lys Glu Lys Leu Glu Thr Leu Asp Gly Glu Glu Lys Ala Lys Val
        190                 195                 200
ttg gtg aac acg ttt gat gcg ttg gag ccc gat gca ctc acg gct att    673
Leu Val Asn Thr Phe Asp Ala Leu Glu Pro Asp Ala Leu Thr Ala Ile
    205                 210                 215
gat agg tat gag ttg atc ggg atc ggg ccg ttg att ccc tcc gcc ttc    721
Asp Arg Tyr Glu Leu Ile Gly Ile Gly Pro Leu Ile Pro Ser Ala Phe
220                 225                 230                 235
ttg gac ggc gga gat ccc tcc gaa acg tct tac ggc ggc gat ctt ttc    769
Leu Asp Gly Gly Asp Pro Ser Glu Thr Ser Tyr Gly Gly Asp Leu Phe
                240                 245                 250
gaa aaa tcg gag gag aat aac tgc gtg gag tgg ttg gac acg aag ccg    817
Glu Lys Ser Glu Glu Asn Asn Cys Val Glu Trp Leu Asp Thr Lys Pro
            255                 260                 265
aaa tct tcg gtg gtg tat gtg tcg ttt ggg agc gtt ttg agg ttt cca    865
Lys Ser Ser Val Val Tyr Val Ser Phe Gly Ser Val Leu Arg Phe Pro
        270                 275                 280
aag gca caa atg gaa gag att ggg aaa ggg cta tta gcc tgc gga agg    913
Lys Ala Gln Met Glu Glu Ile Gly Lys Gly Leu Leu Ala Cys Gly Arg
    285                 290                 295
ccg ttt tta tgg atg ata cga gaa cag aag aat gac gac ggc gaa gaa    961
Pro Phe Leu Trp Met Ile Arg Glu Gln Lys Asn Asp Asp Gly Glu Glu
300                 305                 310                 315
gaa gaa gaa gag ttg agt tgc att ggg gaa ttg aaa aaa atg ggg aaa   1009
Glu Glu Glu Glu Leu Ser Cys Ile Gly Glu Leu Lys Lys Met Gly Lys
                320                 325                 330
ata gtt tcg tgg tgc tcg cag ttg gag gtt ctg gcg cac cct gcg ttg   1057
Ile Val Ser Trp Cys Ser Gln Leu Glu Val Leu Ala His Pro Ala Leu
            335                 340                 345
gga tgt ttc gtg acg cat tgt ggg tgg aac tcg gct gtg gag agc ttg    1105
Gly Cys Phe Val Thr His Cys Gly Trp Asn Ser Ala Val Glu Ser Leu
        350                 355                 360
agt tgc ggg gtt ccg gtg gtg gcg gtg ccg cag tgg ttt gat cag acg    1153
Ser Cys Gly Val Pro Val Val Ala Val Pro Gln Trp Phe Asp Gln Thr
    365                 370                 375
acg aat gcg aag ctg att gag gat gcg tgg ggg aca ggg gtg aga gtg    1201
Thr Asn Ala Lys Leu Ile Glu Asp Ala Trp Gly Thr Gly Val Arg Val
380                 385                 390                 395
aga atg aat gaa ggg ggt ggg gtt gat gga tct gag ata gag agg tgt    1249
Arg Met Asn Glu Gly Gly Gly Val Asp Gly Ser Glu Ile Glu Arg Cys
                400                 405                 410
gtg gag atg gtg atg gat ggg ggt gag aag agc aaa cta gtg aga gaa    1297
Val Glu Met Val Met Asp Gly Gly Glu Lys Ser Lys Leu Val Arg Glu
            415                 420                 425
aat gcc ata aaa tgg aag act ttg gcc aga gaa gcc atg gga gag gat    1345
Asn Ala Ile Lys Trp Lys Thr Leu Ala Arg Glu Ala Met Gly Glu Asp
        430                 435                 440
gga tct tca ctc aag aat ctc aac gcc ttt ctt cat caa gtt gca cgt    1393
Gly Ser Ser Leu Lys Asn Leu Asn Ala Phe Leu His Gln Val Ala Arg
    445                 450                 455
gct taatacacaa aatggctttc cacttttaat ctactcaaac accggttcaa         1446
Ala
460
ataaatatcc ccttccactt ctttctattt cactatcaca tttataattt tagtaacaaa  1506
a                                                                  1507
<210>2
<211>1470
<212>DNA
<213>Perilla frutescens
<400>2
accaaaccaa aacaaaattt ccacaaaa atg gtc cgc cgc cgc gtg ctg cta      48
                               Met Val Arg Arg Arg Val Leu Leu
                                 1               5
gca acg ttt ccg gcg caa ggc cac ata aat ccc gcc ctc caa ttc gcc     96
Ala Thr Phe Pro Ala Gln Gly His Ile Asn Pro Ala Leu Gln Phe Ala
     10                  15                  20
aag aga ctc cta aaa gcc ggc act gac gtc acg ttt ttc acg agc gtt    144
Lys Arg Leu Leu Lys Ala Gly Thr Asp Val Thr Phe Phe Thr Ser Val
 25                  30                  35                  40
tat gca tgg cgc cgc atg gcc aac aca gcc tcc gcc gct gcc gga aac    192
Tyr Ala Trp Arg Arg Met Ala Asn Thr Ala Ser Ala Ala Ala Gly Asn
                 45                   50                  55
cca ccg ggc ctc gac ttc gtg gcg ttc tcc gac ggc tac gac gac ggg    240
Pro Pro Gly Leu Asp Phe Val Ala Phe Ser Asp Gly Tyr Asp Asp Gly
             60                  65                  70
ctg aag ccc ggc ggc gac ggg aag cgc tac atg tcc gag atg aaa gcc    288
Leu Lys Pro Gly Gly Asp Gly Lys Arg Tyr Met Ser Glu Met Lys Ala
         75                  80                  85
cgc ggc tcc gag gcc tta aga aac ctc ctt ctc aac aac gac gac gtc    336
Arg Gly Ser Glu Ala Leu Arg Ash Leu Leu Leu Asn Asn Asp Asp Val
     90                  95                 100
act ttc gtc gtc tac tcc cac ctc ttt gca tgg gcg gcg gag gtg gcg    384
Thr Phe Val Val Tyr Ser His Leu Phe Ala Trp Ala Ala Glu Val Ala
105                 110                 115                 120
cgt ttg tcc cac gtc ccg acc gcc ctt ctc tgg gtc gag ccc gcc acc    432
Arg Leu Ser His Val Pro Thr Ala Leu Leu Trp Val Glu Pro Ala Thr
                125                 130                 135
gtg ctg tgc ata tac cac ttc tac ttc aac ggc tac gca gac gag atc    480
Val Leu Cys Ile Tyr His Phe Tyr Phe Asn Gly Tyr Ala Asp Glu Ile
            140                 145                 150
gac gcc ggt tcc aat gaa att cag ctc cct cgg ctt cca tcc ctg gag    528
Asp Ala Gly Ser Asn Glu Ile Gln Leu Pro Arg Leu Pro Ser Leu Glu
        155                 160                 165
cag cgc agt ctt ccg acg ttt ctg ctg cct gcg acg ccg gag aga ttc    576
Gln Arg Ser Leu Pro Thr Phe Leu Leu Pro Ala Thr Pro Glu Arg Phe
    170                 175                 180
cgg ttg atg atg aag gag aag ctg gaa act tta gac ggt gaa gag aag    624
Arg Leu Met Met Lys Glu Lys Leu Glu Thr Leu Asp Gly Glu Glu Lys
185                 190                 195                 200
gcg aaa gta ttg gtg aac acg ttt gat gcg ttg gag ccc gat gca ctc    672
Ala Lys Val Leu Val Asn Thr Phe Asp Ala Leu Glu Pro Asp Ala Leu
                205                 210                 215
acg gct att gat agg tat gag ttg atc ggg atc ggg ccg ttg att ccc    720
Thr Ala Ile Asp Arg Tyr Glu Leu Ile Gly Ile Gly Pro Leu Ile Pro
            220                 225                 230
tcc gcc ttc ttg gac ggc gaa gat ccc tcc gaa acg tct tac ggc ggc    768
Ser Ala Phe Leu Asp Gly Glu Asp Pro Ser Glu Thr Ser Tyr Gly Gly
        235                 240                 245
gat ctt ttc gaa aaa tcg gag gag aat aac tgc gtg gag tgg ttg aac    816
Asp Leu Phe Glu Lys Ser Glu Glu Asn Asn Cys Val Glu Trp Leu Asn
    250                 255                 260
tcg aag ccg aaa tct tcg gtg gtg tat gtg tcg ttt ggg agc gtt ttg    864
Ser Lys Pro Lys Ser Ser Val Val Tyr Val Ser Phe Gly Ser Val Leu
265                 270                 275                 280
agg ttt cca aag gca caa atg gaa gag att ggg aaa ggg cta tta gcc    912
Arg Phe Pro Lys Ala Gln Met Glu Glu Ile Gly Lys Gly Leu Leu Ala
                285                 290                 295
tgc gga agg ccc ttt tta tgg atg ata cga gaa cag aag aat gac gac    960
Cys Gly Arg Pro Phe Leu Trp Met Ile Arg Glu Gln Lys Asn Asp Asp
            300                 305                 310
ggc gaa gaa gaa gaa gaa gaa gaa gag ttg agt tgc att ggg gaa ttg   1008
Gly Glu Glu Glu Glu Glu Glu Glu Glu Leu Ser Cys Ile Gly Glu Leu
        315                 320                 325
aaa aaa atg ggg aaa ata gtg tcg tgg tgc tcg cag ttg gag gtt ctg   1056
Lys Lys Met Gly Lys Ile Val Ser Trp Cys Ser Gln Leu Glu Val Leu
    330                 335                 340
gcg cac cct gcg ttg gga tgt ttc gtg acg cat tgt ggg tgg aac tcg   1104
Ala His Pro Ala Leu Gly Cys Phe Val Thr His Cys Gly Trp Asn Ser
345                 350                 355                 360
gct gtg gag agc ttg agt tgc ggg att ccg gtg gtg gcg gtg ccg cag   1152
Ala Val Glu Ser Leu Ser Cys Gly Ile Pro Val Val Ala Val Pro Gln
                365                 370                 375
tgg ttt gat cag acg acg aat gcg aag ctg att gag gat gcg tgg ggg   1200
Trp Phe Asp Gln Thr Thr Asn Ala Lys Leu Ile Glu Asp Ala Trp Gly
            380                 385                 390
aca ggg gtg aga gtg aga atg aat gaa ggg ggt ggg gtt gat gga tgt    1248
Thr Gly Val Arg Val Arg Met Asn Glu Gly Gly Gly Val Asp Gly Cys
        395                 400                 405
gag ata gaa agg tgt gtg gag atg gtg atg gat ggg ggt gac aag acc    1296
Glu Ile Glu Arg Cys Val Glu Met Val Met Asp Gly Gly Asp Lys Thr
    410                 415                 420
aaa cta gtg aga gaa aat gcc atc aaa tgg aag act ttg gcc aga caa    1344
Lys Leu Val Arg Glu Asn Ala Ile Lys Trp Lys Thr Leu Ala Arg Gln
425                 430                 435                 440
gcc atg gga taggatggat cttcactcaa caatctcaac gcctttcttc            1393
Ala Met Gly
        443
gtcaagttgc acacttttaa tctgctcaaa cagcggttca aataaatatc cccttccact  1453
taaaggagaa aaaaaaa                                                 1470
<210>3
<211>2062
<212>DNA
<213>Verbena hybrida
<400>3
attttaccaa aaaaataaaa aaaaa atg agc aga gct cac gtc ctc ttg gcc     52
                            Met Ser Arg Ala His Val Leu Leu Ala
                              1               5
aca ttc cca gca cag gga cac ata gat ccc gcc ctt caa ttc gcc aag    100
Thr Phe Pro Ala Gln Gly His Ile Asn Pro Ala Leu Gln Phe Ala Lys
 10                  15                  20                  25
cgt ctc gca aat gcc gac att caa gtc aca ttc ttc acc agc gtc tac    148
Arg Leu Ala Asn Ala Asp Ile Gln Val Thr Phe Phe Thr Ser Val Tyr
                 30                  35                  40
gca tgg cgc cgc atg tcc aga acc gcc gct ggc tca aac ggg ctc atc    196
Ala Trp Arg Arg Met Ser Arg Thr Ala Ala Gly Ser Asn Gly Leu Ile
             45                  50                  55
aat ttt gtg tcg ttt tcc gac ggg tat gac gac ggg tta cag ccc gga    244
Asn Phe Val Ser Phe Ser Asp Gly Tyr Asp Asp Gly Leu Gln Pro Gly
         60                  65                  70
gac gat ggg aag aac tac atg tcg gag atg aaa agc aga ggt ata aaa    292
Asp Asp Gly Lys Asn Tyr Met Ser Glu Met Lys Ser Arg Gly Ile Lys
     75                  80                  85
gcc ttg agc gat act ctt gca gcc aat aat gtc gat caa aaa agc agc    340
Ala Leu Ser Asp Thr Leu Ala Ala Asn Asn Val Asp Gln Lys Ser Ser
90                   95                 100                 105
aaa atc acg ttc gtg gtg tac tcc cac ctc ttt gca tgg gcg gcc aag    388
Lys Ile Thr Phe Val Val Tyr Ser His Leu Phe Ala Trp Ala Ala Lys
                110                 115                 120
gtg gcg cgt gag ttc cat ctc cgg agc gcg cta ctc tgg att gag cca    436
Val Ala Arg Glu Phe His Leu Arg Ser Ala Leu Leu Trp Ile Glu Pro
            125                 130                 135
gct acg gtg ttg gat ata ttt tac ttt tat ttc aac ggc tat agc gac    484
Ala Thr Val Leu Asp Ile Phe Tyr Phe Tyr Phe Asn Gly Tyr Ser Asp
        140                 145                 150
gaa atc gat gcg ggt tcg gat gct att cac ttg ccc gga gga ctc cca    532
Glu Ile Asp Ala Gly Ser Asp Ala Ile His Leu Pro Gly Gly Leu Pro
    155                 160                 165
gtg ctg gcc cag cgt gat tta ccg tct ttc ctt ctt cct tcc acg cat    580
Val Leu Ala Gln Arg Asp Leu Pro Ser Phe Leu Leu Pro Ser Thr His
170                 175                 180                 185
gag aga ttc cgt tca ctg atg aag gag aaa ttg gaa act tta gaa ggt    628
Glu Arg Phe Arg Ser Leu Met Lys Glu Lys Leu Glu Thr Leu Glu Gly
                190                 195                 200
gaa gaa aaa cct aag gtc ttg gtg aac agc ttt gat gcg ttg gag cct    676
Glu Glu Lys Pro Lys Val Leu Val Asn Ser Phe Asp Ala Leu Glu Pro
            205                 210                 215
gat gcg ctc aag gcc att gat aag tac gag atg att gca atc ggg ccg    724
Asp Ala Leu Lys Ala Ile Asp Lys Tyr Glu Met Ile Ala Ile Gly Pro
        220                 225                 230
ttg att cct tcc gca ttc ttg gac ggt aaa gat cct tcg gac agg tct    772
Leu Ile Pro Ser Ala Phe Leu Asp Gly Lys Asp Pro Ser Asp Arg Ser
    235                 240                 245
ttc ggc gga gat ttg ttc gag aaa ggg tcg aat gac gac gat tgc ctc    820
Phe Gly Gly Asp Leu Phe Glu Lys Gly Ser Asn Asp Asp Asp Cys Leu
250                 255                 260                 265
gaa tgg ttg agc acg aat cct cga tct tcg gtg gtt tac gtt tcg ttc    868
Glu Trp Leu Ser Thr Asn Pro Arg Ser Ser Val Val Tyr Val Ser Phe
                270                 275                 280
gga agc ttc gtt aat acg acg aag tcg caa atg gaa gag ata gca aga    916
Gly Ser Phe Val Asn Thr Thr Lys Ser Gln Met Glu Glu Ile Ala Arg
            285                 290                 295
ggg ctg tta gat tgt ggg agg ccg ttt ttg tgg gtg gta aga gta aac    964
Gly Leu Leu Asp Cys Gly Arg Pro Phe Leu Trp Val Val Arg Val Asn
        300                 305                 310
gaa gga gaa gag gta ttg ata agt tgc atg gag gag ttg aaa cga gtg    1012
Glu Gly Glu Glu Val Leu Ile Ser Cys Met Glu Glu Leu Lys Arg Val
    315                 320                 325
ggg aaa att gta tct tgg tgt tct caa ttg gaa gtc ctg acg cat ccc    1060
Gly Lys Ile Val Ser Trp Cys Ser Gln Leu Glu Val Leu Thr His Pro
330                 335                 340                 345
tcg ttg gga tgt ttc gtg aca cac tgc ggg tgg aat tcg act cta gag    1108
Ser Leu Gly Cys Phe Val Thr His Cys Gly Trp Asn Ser Thr Leu Glu
                350                 355                 360
agt ata tct ttc ggg gtt ccg atg gtg gct ttt ccg cag tgg ttc gat    1156
Ser Ile Ser Phe Gly Val Pro Met Val Ala Phe Pro Gln Trp Phe Asp
            365                 370                 375
caa ggg acg aat gcg aag ctg atg gag gat gtg tgg agg acg ggt gtg    1204
Gln Gly Thr Asn Ala Lys Leu Met Glu Asp Val Trp Arg Thr Gly Val
        380                 385                 390
aga gtg aga gct aat gag gag ggt agc gtc gtt gat ggt gat gaa att    1252
Arg Val Arg Ala Asn Glu Glu Gly Ser Val Val Asp Gly Asp Glu Ile
    395                 400                 405
agg aga tgt att gag gag gtt atg gat ggg gga gaa aag agt agg aaa    1300
Arg Arg Cys Ile Glu Glu Val Met Asp Gly Gly Glu Lys Ser Arg Lys
410                 415                 420                 425
ctt aga gag agt gct ggc aag tgg aag gat ttg gca aga aaa gct atg    1348
Leu Arg Glu Ser Ala Gly Lys Trp Lys Asp Leu Ala Arg Lys Ala Met
                430                 435                 440
gag gaa gat gga tct tca gtt aac aac ctc aag gtc ttt ctt gat gag    1396
Glu Glu Asp Gly Ser Ser Val Asn Asn Leu Lys Val Phe Leu Asp Glu
            445                 450                 455
gtt gta ggt atc taaagacgta aatgaggtcc ccataggcaa aattgcaaat        1448
Val Val Gly Ile
        460 461
ttcatctcgt aagttgaata ctttttggct ttaattttgt tcgagtttgt ttttcaaaat  1508
ttatcttgta attttacatt gagtgtaaat ttagtctgat tttaactgga aaaatataaa  1568
attcattgtt gagactcttc atcaaaatca tctgatttcc tttattgtct tggtcaaaat  1628
tctcatatca attggaaaaa ataaatttca aaatcgtcca attttgaacc aagaaagaag  1688
tataatttga ccaaaataat aaaaggattc aagtgatctt gatgaagtgt ctgagcgacg  1748
agttctatat ttttccaccg aatttctaac gagtttttga atttttttta gccaaaatcg  1808
gactaacttt gtacaaaatg aaaagttata tgatgaaatt ttaaaaaaca aactcagaca  1868
ataataaagc ccgaaagtag taaaattacc tgacgaaatt tgcaatttcg cctcctattt  1928
taattttttt ggtgtgttta ataaatcggt tattttactt ttaattaaaa taaaagtgag  1988
atgcatgata gcttggtgag tatatatgag ttgatggtaa tgtacgatat tttctaaaaa  2048
aaaaaaaaaa aaaa                                                    2062
<210>4
<211>1671
<212>DNA
<213>Torania hybrira
<220>
<221>
<222>
<223>Xaa(64)is Cys or Phe，Xaa(65)is Ser or Pro
<400>4
aacacataaa aaaaaaataa aagaagaaat aattaaaaaa aaaa atg gtt aac       53
                                                 Met Val Asn
                                                   1
aaa cgc cat att cta cta gca aca ttc cca gca caa ggc cac ata aac    101
Lys Arg His Ile Leu Leu Ala Thr Phe Pro Ala Gln Gly His Ile Asn
      5                  10                  15
cct tct ctc gag ttc gcc aaa agg ctc ctc aac acc gga tac gtc gac    149
Pro Ser Leu Glu Phe Ala Lys Arg Leu Leu Asn Thr Gly Tyr Val Asp
 20                  25                  30                  35
caa gtc aca ttc ttc acg agt gta tac gca ttg aga cgc atg cgc ttc    197
Gln Val Thr Phe Phe Thr Ser Val Tyr Ala Leu Arg Arg Met Arg Phe
                 40                  45                  50
gaa acc gat ccg agc agc aga atc gat ttc gtg gca tkt yca gat tct    245
Glu Thr Asp Pro Ser Ser Arg Ile Asp Phe Val Ala Xaa Xaa Asp Ser
             55                  60                  65
tac gat gat ggc tta aag aaa ggc gac gat ggc aaa aac tac atg tcg    293
Tyr Asp Asp Gly Leu Lys Lys Gly Asp Asp Gly Lys Asn Tyr Met Ser
         70                  75                  80
gag atg aga aag cgc gga acg aag gcc tta aag gac act ctt att aag    341
Glu Met Arg Lys Arg Gly Thr Lys Ala Leu Lys Asp Thr Leu Ile Lys
     85                  90                  95
ctc aac gat gct gcg atg gga agt gaa tgt tac aat cgc gtg agc ttt    389
Leu Asn Asp Ala Ala Met Gly Ser Glu Cys Tyr Asn Arg Val Ser Phe
100                 105                 110                 115
gtg gtg tac tct cat cta ttt tcg tgg gca gct gaa gtg gcg cgt gaa    437
Val Val Tyr Ser His Leu Phe Ser Trp Ala Ala Glu Val Ala Arg Glu
                120                 125                 130
gtc gac gtg ccg agt gcc ctt ctt tgg att gaa ccg gct acg gtt ttc    485
Val Asp Val Pro Ser Ala Leu Leu Trp Ile Glu Pro Ala Thr Val Phe
            135                 140                 145
gat gtg tac tat ttt tac ttc aat ggg tat gcc gat gat atc gat gcg    533
Asp Val Tyr Tyr Phe Tyr Phe Asn Gly Tyr Ala Asp Asp Ile Asp Ala
        150                 155                 160
ggc tca gat caa atc caa ctg ccc aat ctt ccg cag ctc tcc aag caa    581
Gly Ser Asp Gln Ile Gln Leu Pro Asn Leu Pro Gln Leu Ser Lys Gln
    165                 170                 175
gat ctc ccc tct ttc cta ctc cct tcg agc ccc gcg aga ttc cga acc    629
Asp Leu Pro Ser Phe Leu Leu Pro Ser Ser Pro Ala Arg Phe Arg Thr
180                 185                 190                 195
cta atg aaa gaa aag ttc gac acg ctc gac aaa gaa ccg aaa gcg aag    677
Leu Met Lys Glu Lys Phe Asp Thr Leu Asp Lys Glu Pro Lys Ala Lys
                200                 205                 210
gtc ttg ata aac acg ttc gac gca tta gaa acc gaa caa ctc aaa gcc    725
Val Leu Ile Asn Thr Phe Asp Ala Leu Glu Thr Glu Gln Leu Lys Ala
            215                 220                 225
atc gac agg tat gaa cta ata tcc atc ggc cca tta atc cca tca tcg    773
Ile Asp Arg Tyr Glu Leu Ile Ser Ile Gly Pro Leu Ile Pro Ser Ser
        230                 235                 240
ata ttc tca gat ggc aac gac ccc tca tca agc aac aaa tcc tac ggt    821
Ile Phe Ser Asp Gly Asn Asp Pro Ser Ser Ser Asn Lys Ser Tyr Gly
    245                 250                 255
gga gac ctc  ttc aga aaa gcc gat gaa act tac atg gac tgg cta aac   869
Gly Asp Leu Phe Arg Lys Ala Asp Glu Thr Tyr Met Asp Trp Leu Asn
260                 265                 270                 275
tca aaa ccc gaa tca tcg gtc gtt tac gtt tcg ttc ggg agc ctc ctg    917
Ser Lys Pro Glu Ser Ser Val Val Tyr Val Ser Phe Gly Ser Leu Leu
                280                 285                 290
agg ctc ccg aaa ccc caa atg gaa gaa ata gca ata ggg ctt tca gac     965
Arg Leu Pro Lys Pro Gln Met Glu Glu Ile Ala Ile Gly Leu Ser Asp
            295                 300                 305
acc aaa tcg cca gtt ctc tgg gtg ata aga aga aac gaa gag ggc gac    1013
Thr Lys Ser Pro Val Leu Trp Val Ile Arg Arg Asn Glu Glu Gly Asp
        310                 315                 320
gaa caa gag caa gca gaa gaa gaa gag aag ctg ctg agc ttc ttt gat    1061
Glu Gln Glu Gln Ala Glu Glu Glu Glu Lys Leu Leu Ser Phe Phe Asp
    325                 330                 335
cgt cac gga act gaa cga ctc ggg aaa atc gtg aca tgg tgc tca caa    1109
Arg His Gly Thr Glu Arg Leu Gly Lys Ile Val Thr Trp Cys Ser Gln
340                 345                 350                 355
ttg gat gtt ctg acg cat aag tcg gtg gga tgc ttc gtg acg cat tgc    1157
Leu Asp Val Leu Thr His Lys Ser Val Gly Cys Phe Val Thr His Cys
                360                 365                 370
ggt tgg aat tct gct atc gag agc ctg gct tgt ggt gtg ccc gtg gtg    1205
Gly Trp Asn Ser Ala Ile Glu Ser Leu Ala Cys Gly Val Pro Val Val
            375                 380                 385
tgc ttt cct caa tgg ttc gat caa ggg act aat gcg aag atg atc gaa    1253
Cys Phe Pro Gln Trp Phe Asp Gln Gly Thr Asn Ala Lys Met Ile Glu
        390                 395                 400
gat gtg tgg agg agt ggt gtg aga gtc aga gtg aat gag gaa ggc ggc    1301
Asp Val Trp Arg Ser Gly Val Arg Val Arg Val Asn Glu Glu Gly Gly
    405                 410                 415
gtt gtt gat agg cgt gag att aag agg tgc gtc tcg gag gtt ata aag    1349
Val Val Asp Arg Arg Glu Ile Lys Arg Cys Val Ser Glu Val Ile Lys
420                 425                 430                 435
agt cga gag ttg aga gaa agc gca atg atg tgg aag ggt ttg gct aaa    1397
Ser Arg Glu Leu Arg Glu Ser Ala Met Met Trp Lys Gly Leu Ala Lys
                440                 445                 450
gaa gct atg gat gaa gaa cgt gga tca tca atg aac aat ctg aag aat    1445
Glu Ala Met Asp Glu Glu Arg Gly Ser Ser Met Asn Asn Leu Lys Asn
            455                 460                 465
ttt att act agg att att aat gaa aat gcc tca taagttgtac             1488
Phe Ile Thr Arg Ile Ile Asn Glu Asn Ala Ser
        470                 475         478
tatatatgtt attattgttg ttatggacgt cgaattaagt attagttaaa tgatatgtat  1548
ttagaggaag gccaaaacgg gctacacccg gcaggccacg ggttggaaaa gcccgccatg  1608
atttaaaata tatattttaa aataaatatt ttctactatt aaactaaaaa aaaaaaaaaa  1668
aaa                                                                1671
<210>5
<211>1437
<212>DNA
<213>Perilla frutescens
<400>5
ttcaaaactc ataacgtgat tgagctaatg tgcacatctt cctcttcaaa gtctacagtg   60
tcatcctacc agcatcatcg tgatcaatct ctttataatg aggagaatgg agtaacaagg  120
agtgggtttt gttactcagc ttcaacctac gtacgtacta ctgctgactc aactctcaag  180
agaatgaata taatatataa tgggcgatag atctttgtag atatgtaggt gtagcctgca  240
ggtggttaat taatttccgg tgtgggaaaa taaataaata aataaatata gcg atg agc 299
                                                           Met Ser
                                                             1
agc agc agc agc aga agg tgg aga gag aat gag ggg atg cga agg aca    347
Ser Ser Ser Ser Arg Arg Trp Arg Glu Asn Glu Gly Met Arg Arg Thr
          5                  10                  15
ttg ctg ggg ttg ggt ttg ggg cag ttg gtt tct ttc gat ttg gct atc    395
Leu Leu Gly Leu Gly Leu Gly Gln Leu Val Ser Phe Asp Leu Ala Ile
     20                  25                  30
atg acc ttt tct gct tct ttg gtt tca acc aca gtg gat gca cca ctt    443
Met Thr Phe Ser Ala Ser Leu Val Ser Thr Thr Val Asp Ala Pro Leu
35                   40                  45                  50
act atg tcg ttc act aca tac act gtt gtg gcc ctg ctc tat gga acc    491
Thr Met Ser Phe Thr Thr Tyr Thr Val Val Ala Leu Leu Tyr Gly Thr
                 55                      60              65
atc ttg ctt tac cgc cgc cac aaa ttc ttg gtt cca tgg tac tgg tat    539
Ile Leu Leu Tyr Arg Arg His Lys Phe Leu Val Pro Trp Tyr Trp Tyr
             70                  75                  80
gct ctc ctg ggg ttc gtg gac gtc cac ggc aat tat ctt gtt aat aaa    587
Ala Leu Leu Gly Phe Val Asp Val His Gly Asn Tyr Leu Val Asn Lys
     85                      90                  95
gca ttc gag ttg aca tcg att acg agt gtg agc ata ctg gat tgt tgg    635
Ala Phe Glu Leu Thr Ser Ile Thr Ser Val Ser Ile Leu Asp Cys Trp
    100                 105                 110
aca atc gtg tgg tcc atc atc ttt aca tgg atg ttc cta ggc aca aaa    683
Thr Ile Val Trp Ser Ile Ile Phe Thr Trp Met Phe Leu Gly Thr Lys
115                 120                 125                 130
tac tct gta tac cag ttt gtc ggt gct gct att tgt gta gga ggc ctc    731
Tyr Ser Val Tyr Gln Phe Val Gly Ala Ala Ile Cys Val Gly Gly Leu
                135                 140                 145
ctc ctc gtg ctt ctt tcc gac tca ggg gtc act gct gct ggt tcg aat    779
Leu Leu Val Leu Leu Ser Asp Ser Gly Val Thr Ala Ala Gly Ser Asn
            150                 155                 160
cct ctt ttg ggt gat ttt ctt gtc ata aca ggc tct att ttg ttc aca    827
Pro Leu Leu Gly Asp Phe Leu Val Ile Thr Gly Ser Ile Leu Phe Thr
        165                 170                 175
ctc agc act gtt ggt cag gaa tac tgc gtg aag agg aaa gat cgt att    875
Leu Ser Thr Val Gly Gln Glu Tyr Cys Val Lys Arg Lys Asp Arg Ile
    180                 185                 190
gaa gta gta gca atg atc ggt gta ttt ggt atg ctc atc agt gca acc    923
Glu Val Val Ala Met Ile Gly Val Phe Gly Met Leu Ile Ser Ala Thr
195                 200                 205                 210
gag att act gtg ctg gag agg aat gcc ctc tca tca atg cag tgg tct    971
Glu Ile Thr Val Leu Glu Arg Asn Ala Leu Ser Ser Met Gln Trp Ser
                215                 220                 225
act gga ctt ttg gca gcc tat gtt gtt tat gca ctg tcc agc ttc ctc   1019
Thr Gly Leu Leu Ala Ala Tyr Val Val Tyr Ala Leu Ser Ser Phe Leu
            230                 235                 240
ttc tgc aca ctc acc cct ttt ctt ctc aag atg agt ggc gct gca ttt   1067
Phe Cys Thr Leu Thr Pro Phe Leu Leu Lys Met Ser Gly Ala Ala Phe
        245                 250                 255
ttc aat ctt tcc atg ctt aca tct gat atg tgg gct gtt gca att agg   1115
Phe Asn Leu Ser Met Leu Thr Ser Asp Met Trp Ala Val Ala Ile Arg
    260                 265                 270
aca ttc ata tac aac cag gag gtt gat tgg tta tac tat ttg gcc ttt   1163
Thr Phe Ile Tyr Asn Gln Glu Val Asp Trp Leu Tyr Tyr Leu Ala Phe
275                 280                 285                 290
tgt ctc gtt gtt gtt gga ata ttc ata tat aca aaa aca gag aag gat    1211
Cys Leu Val Val Val Gly Ile Phe Ile Tyr Thr Lys Thr Glu Lys Asp
                295                 300                 305
cct aac aat acg aga gcc ctt gag aat gga agc ttg gat cat gaa tat    1259
Pro Asn Asn Thr Arg Ala Leu Glu Asn Gly Asn Leu Asp His Glu Tyr
            310                 315                 320
agt ctc ctt gag gat caa gat gac aca cca aga aaa cca tagctagctt     1308
Ser Leu Leu Glu Asp Gln Asp Asp Thr Pro Arg Lys Pro
        325                 330                 335
tgcccacaat cttttcatca acagttttaa ataattcgtg agggggagag agatcgagat  1368
actaattaat ggacgtctat tatatagttg gaggtttttg ttttatttat ttatttgagt  1428
aaaaaaaaa                                                          1437
<210>6
<211>2105
<212>DNA
<213>Petunia hybrida
<400>6
agtgagcgca acgcaattaa tgtgagttag ctcactcatt aggcacccca ggctttacac    60
tttatgcttc cggctcgtat gttgtgtgga attgtgagcg gataacaatt tcacacagga   120
aacagctatg accatgatta cgccaagctc gaaattaacc ctcactaaag ggaacaaaag   180
ctggagctcc acgcggtggc ggccgctcta gaactagtgg atcccccggg ctgcaggaat   240
tccgttgctg tcgccacaat ttacaaacca agaaattaag catccctttc cccgccttaa   300
aaaacataca agtttttaat ttttcactaa gcaagaaaat atg gtg cag cct cat gtc 358
                                            Met Val Gln Pro His Val
                                              1               5
atc tta aca aca ttt cca gca caa ggc cat att aat cca gca ctt caa    406
Ile Leu Thr Thr Phe Pro Ala Gln Gly His Ile Asn Pro Ala Leu Gln
             10                  15                  20
ttt gcc aag aat ctt gtc aag atg ggc ata gaa gtg aca ttt tct aca    454
Phe Ala Lys Asn Leu Val Lys Met Gly Ile Glu Val Thr Phe Ser Thr
         25                  30                  35
agc att tat gcc caa agc cgt atg gat gaa aaa tcc att ctt aat gca    502
Ser Ile Tyr Ala Gln Ser Arg Met Asp Glu Lys Ser Ile Leu Asn Ala
     40                  45                  50
cca aaa gga ttg aat ttc att cca ttt tcc gat ggc ttt gat gaa ggt    550
Pro Lys Gly Leu Asn Phe Ile Pro Phe Ser Asp Gly Phe Asp Glu Gly
55                   60                  65                  70
ttt gat cat tca aaa gac cct gta ttt tac atg tca caa ctt cgt aaa    598
Phe Asp His Ser Lys Asp Pro Val Phe Tyr Met Ser Gln Leu Arg Lys
                 75                  80                  85
tgt gga agt gaa act gtc aaa aaa ata att ctc act tgc tct gaa aat    646
Cys Gly Ser Glu Thr Val Lys Lys Ile Ile Leu Thr Cys Ser Glu Asn
             90                  95                 100
gga cag cct ata act tgc cta ctt tac tcc att ttc ctt cct tgg gca    694
Gly Gln Pro Ile Thr Cys Leu Leu Tyr Ser Ile Phe Leu Pro Trp Ala
        105                 110                 115
gca gag gta gca cgt gaa gtt cac atc cct tct gct ctt ctt tgg agt    742
Ala Glu Val Ala Arg Glu Val His Ile Pro Ser Ala Leu Leu Trp Ser
    120                 125                 130
caa cca gca aca ata ttg gac ata tat tac ttc aac ttt cat gga tat    790
Gln Pro Ala Thr Ile Leu Asp Ile Tyr Tyr Phe Asn Phe His Gly Tyr
135                 140                 145                 150
gaa aaa gct atg gct aat gaa tcc aat gat cca aat tgg tcc att caa    838
Glu Lys Ala Met Ala Asn Glu Ser Asn Asp Pro Asn Trp Ser Ile Gln
                155                 160                 165
ctt ccc ggg ctt cca cta ctg gaa act cga gat ctt cct tca ttt tta    886
Leu Pro Gly Leu Pro Leu Leu Glu Thr Arg Asp Leu Pro Ser Phe Leu
            170                 175                 180
ctt cct tat ggt gca aaa ggg agt ctt cga gtt gca ctt cca cca ttc    934
Leu Pro Tyr Gly Ala Lys Gly Ser Leu Arg Val Ala Leu Pro Pro Phe
        185                 190                 195
aaa gaa ttg ata gac aca tta gat gct gaa acc act cct aag att ctt    982
Lys Glu Leu Ile Asp Thr Leu Asp Ala Glu Thr Thr Pro Lys Ile Leu
    200                 205                 210
gtg aat aca ttt gat gaa tta gag cct gag gca ctc aat gca att  gaa  1030
Val Asn Thr Phe Asp Glu Leu Glu Pro Glu Ala Leu Asn Ala Ile Glu
215                 220                 225                 230
ggt tat aag ttt tat gga att gga ccg ttg att cct tct gct ttc ttg   1078
Gly Tyr Lys Phe Tyr Gly Ile Gly Pro Leu Ile Pro Ser Ala Phe Leu
                235                 240                 245
ggt gga aat gac cct tta gat gct tca ttt ggt ggt gat ctt ttt caa   1126
Gly Gly Asn Asp Pro Leu Asp Ala Ser Phe Gly Gly Asp Leu Phe Gln
            250                 255                 260
aat tca aat gac tat atg gaa tgg tta aac tca aag cca aat tca tca   1174
Asn Ser Asn Asp Tyr Met Glu Trp Leu Asn Ser Lys Pro Asn Ser Ser
        265                 270                 275
gtt gtt tat ata tct ttt ggg agt cta atg aat cca tct att agc caa   1222
Val Val Tyr Ile Ser Phe Gly Ser Leu Met Asn Pro Ser Ile Ser Gln
    280                 285                 290
atg gag gag ata tca aaa ggg ttg ata gac ata gga agg ccg ttt tta    1270
Met Glu Glu Ile Ser Lys Gly Leu Ile Asp Ile Gly Arg Pro Phe Leu
295                 300                 305                 310
tgg gtg ata aaa gaa aat gaa aaa ggc aaa gaa gaa gag aat aaa aag    1318
Trp Val Ile Lys Glu Asn Glu Lys Gly Lys Glu Glu Glu Asn Lys Lys
                315                 320                 325
ctt ggt tgt att gaa gaa ttg gaa aaa ata gga aaa ata gtt cca tgg    1366
Leu Gly Cys Ile Glu Glu Leu Glu Lys Ile Gly Lys Ile Val Pro Trp
            330                 335                 340
tgt tca caa ctt gaa gtt cta aaa cat cca tct tta gga tgt ttt gtt    1414
Cys Ser Gln Leu Glu Val Leu Lys His Pro Ser Leu Gly Cys Phe Val
        345                 350                 355
tct cat tgt gga tgg aat tca gcc tta gag agt tta gct tgt gga gtg    1462
Ser His Cys Gly Trp Asn Ser Ala Leu Glu Ser Leu Ala Cys Gly Val
    360                 365                 370
cca gtt gtg gca ttt cct caa tgg aca gat caa atg aca aat gcc aaa    1510
Pro Val Val Ala Phe Pro Gln Trp Thr Asp Gln Met Thr Asn Ala Lys
375                 380                 385                 390
caa gtt gaa gat gtg tgg aaa agt gga gta aga gtg aga ata aat gaa    1558
Gln Val Glu Asp Val Trp Lys Ser Gly Val Arg Val Arg Ile Asn Glu
                395                 400                 405
gat ggt gtt gtt gaa agt gag gaa atc aaa agg tgt att gaa ttg gta    1606
Asp Gly Val Val Glu Ser Glu Glu Ile Lys Arg cys Ile Glu Leu Val
            410                 415                 420
atg gat gga gga gag aaa ggg gaa gaa ttg aga aag aat gct aag aaa    1654
Met Asp Gly Gly Glu Lys Gly Glu Glu Leu Arg Lys Asn Ala Lys Lys
        425                 430                 435
tgg aaa gaa ttg gct aga gaa gct gtg aag gaa ggt gga tct tca cac    1702
Trp Lys Glu Leu Ala Arg Glu Ala Val Lys Glu Gly Gly Ser Ser His
    440                 445                 450
aag aat tta aag gct ttt att gat gat gtt gcc aaa ggg ttt taatatttac 1754
Lys Asn Leu Lys Ala Phe Ile Asp Asp Val Ala Lys Gly Phe
455                 460                 465         468
aggcttttgc cgtgatatta cttcccctag ttggcgattc actctttgtg gacttgcttg  1814
acaaaaaact gagggaatgt gctaagacac gctaatgctt taagaagtca tttccaaggc  1874
ttgaagcctg cttttaaaac ttattagcca gtaatctata gggttctctt ctatttttct  1934
ctgtctctct ttttagcctt tttctttcca aggtttaaga atagcgtgaa catagcttag  1994
tacgtagtct tggtatctct atcttaccaa gtgcaagatt atgcttatgc tgtcctccta  2054
aatttcttaa taaaatgcaa gatgaaaaag tacaaaaaaa aaaaaaaaaa a           2105
<210>7
<211>460
<212>PRT
<213>Perilla frutescens
<400>7
Met Val Arg Arg Arg Val Leu Leu Ala Thr Phe Pro Ala Gln Gly His
  1               5                  10                  15
Ile Asn Pro Ala Leu Gln Phe Ala Lys Arg Leu Leu Lys Ala Gly Thr
             20                  25                  30
Asp Val Thr Phe Phe Thr Ser Val Tyr Ala Trp Arg Arg Met Ala Asn
         35                  40                  45
Thr Ala Ser Ala Ala Ala Gly Asn Pro Pro Gly Leu Asp Phe Val Ala
     50                  55                  60
Phe Ser Asp Gly Tyr Asp Asp Gly Leu Lys Pro Cys Gly Asp Gly Lys
 65                  70                  75                  80
Arg Tyr Met Ser Glu Met Lys Ala Arg Gly Ser Glu Ala Leu Arg Asn
                 85                  90                  95
Leu Leu Leu Asn Asn His Asp Val Thr Phe VaI VaI Tyr Ser His Leu
            100                 105                 110
Phe Ala Trp Ala Ala Glu Val Ala Arg Glu Ser Gln Val Pro Ser Ala
        115                 120                 125
Leu Leu Trp Val Glu Pro Ala Thr Val Leu Cys Ile Tyr Tyr Phe Tyr
    130                 135                 140
Phe Asn Gly Tyr Ala Asp Glu Ile Asp Ala Gly Ser Asp Glu Ile Gln
145                 150                 155                 160
Leu Pro Arg Leu Pro Pro Leu Glu Gln Arg Ser Leu Pro Thr Phe Leu
                165                 170                 175
Leu Pro Glu Thr Pro Glu Arg Phe Arg Leu Met Met Lys Glu Lys Leu
            180                 185                 190
Glu Thr Leu Asp Gly Glu Glu Lys Ala Lys Val Leu Val Asn Thr Phe
        195                 200                 205
Asp Ala Leu Glu Pro Asp Ala Leu Thr Ala Ile Asp Arg Tyr Glu Leu
    210                 215                 220
Ile Gly Ile Gly Pro Leu Ile Pro Ser Ala Phe Leu Asp Gly Gly Asp
225                 230                 235                 240
Pro Ser Glu Thr Ser Tyr Gly Gly Asp Leu Phe Glu Lys Ser Glu Glu
                245                 250                 255
Asn Asn Cys Val Glu Trp Leu Asp Thr Lys Pro Lys Ser Ser Val Val
            260                 265                 270
Tyr Val Ser Phe Gly Ser Val Leu Arg Phe Pro Lys Ala Gln Met Glu
        275                 280                 285
Glu lle Gly Lys Gly Leu Leu Ala Cys Gly Arg Pro Phe Leu Trp Met
    290                 295                 300
Ile Arg Glu Gln Lys Asn Asp Asp Gly Glu Glu Glu Glu Glu Glu Leu
305                 310                 315                 320
Ser Cys Ile Gly Glu Leu Lys Lys Met Gly Lys Ile Val Ser Trp Cys
                325                 330                 335
Ser Gln Leu Glu Val Leu Ala His Pro Ala Leu Gly Cys Phe Val Thr
            340                 345                 350
His Cys Gly Trp Asn Ser Ala Val Glu Ser Leu Ser Cys Gly Val Pro
        355                 360                 365
Val Val Ala Val Pro Gln Trp Phe Asp Gln Thr Thr Asn Ala Lys Leu
    370                 375                 380
Ile Glu Asp Ala Trp Gly Thr Gly Val Arg Val Arg Met Asn Glu Gly
385                 390                 395                 400
Gly Gly Val Asp Gly Ser Glu Ile Glu Arg Cys Val Glu Met Val Met
                405                 410                 415
Asp Gly Gly Glu Lys Ser Lys Leu Val Arg Glu Asn Ala Ile Lys Trp
            420                 425                 430
Lys Thr Leu Ala Arg Glu Ala Met Gly Glu Asp Gly Ser Ser Leu Lys
        435                 440                 445
Asn Leu Asn Ala Phe Leu His Gln Val Ala Arg Ala
    450                 455                 460
<210>8
<211>443
<212>PRT
<213>Perilla frutescens
<400>8
Met Val Arg Arg Arg Val Leu Leu Ala Thr Phe Pro Ala Gln Gly His
  1               5                  10                  15
Ile Asn Pro Ala Leu Gln Phe Ala Lys Arg Leu Leu Lys Ala Gly Thr
             20                  25                  30
Asp Val Thr Phe Phe Thr Ser Val Tyr Ala Trp Arg Arg Met Ala Asn
         35                  40                  45
Thr Ala Ser Ala Ala Ala Gly Asn Pro Pro Gly Leu Asp Phe Val Ala
     50                  55                  60
Phe Ser Asp Gly Tyr Asp Asp Gly Leu Lys Pro Gly Gly Asp Gly Lys
 65                  70                  75                  80
Arg Tyr Met Ser Glu Met Lys Ala Arg Gly Ser Glu Ala Leu Arg Asn
                 85                  90                  95
Leu Leu Leu Asn Asn Asp Asp Val Thr Phe Val Val Tyr Ser His Leu
            100                 105                 110
Phe Ala Trp Ala Ala Glu Val Ala Arg Leu Ser His Val Pro Thr Ala
        115                 120                 125
Leu Leu Trp Val Glu Pro Ala Thr Val Leu Cys Ile Tyr His Phe Tyr
    130                 135                 140
Phe Asn Gly Tyr Ala Asp Glu Ile Asp Ala Gly Ser Asn Glu Ile Gln
145                 150                 155                 160
Leu Pro Arg Leu Pro Ser Leu Glu Gln Arg Ser Leu Pro Thr Phe Leu
                165                 170                 175
Leu Pro Ala Thr Pro Glu Arg Phe Arg Leu Met Met Lys Glu Lys Leu
            180                 185                 190
Glu Thr Leu Asp Gly Glu Glu Lys Ala Lys Val Leu Val Asn Thr Phe
        195                 200                 205
Asp Ala Leu Glu Pro Asp Ala Leu Thr Ala Ile Asp Arg Tyr Glu Leu
    210                 215                 220
Ile Gly Ile Gly Pro Leu Ile Pro Ser Ala Phe Leu Asp Gly Glu Asp
225                 230                 235                 240
Pro Ser Glu Thr Ser Tyr Gly Gly Asp Leu Phe Glu Lys Ser Glu Glu
                245                 250                 255
Asn Asn Cys Val Glu Trp Leu Asn Ser Lys Pro Lys Ser Ser Val Val
            260                 265                 270
Tyr Val Ser Phe Gly Ser Val Leu Arg Phe Pro Lys Ala Gln Met Glu
        275                 280                 285
Glu Ile Gly Lys Gly Leu Leu Ala Cys Gly Arg Pro Phe Leu Trp Met
    290                 295                 300
Ile Arg Glu Gln Lys Asn Asp Asp Gly Glu Glu Glu Glu Glu Glu Glu
305                 310                 315                 320
Glu Leu Ser Cys Ile Gly Glu Leu Lys Lys Met Gly Lys Ile Val Ser
                325                 330                 335
Trp Cys Ser Gln Leu Glu Val Leu Ala His Pro Ala Leu Gly Cys Phe
            340                 345                 350
Val Thr His Cys Gly Trp Asn Ser Ala Val Glu Ser Leu Ser Cys Gly
        355                 360                 365
Ile Pro Val Val Ala Val Pro Gln Trp Phe Asp Gln Thr Thr Asn Ala
    370                 375                 380
Lys Leu Ile Glu Asp Ala Trp Gly Thr Gly Val Arg Val Arg Met Asn
385                 390                 395                 400
Glu Gly Gly Gly Val Asp Gly Cys Glu Ile Glu Arg Cys Val Glu Met
                405                 410                 415
Val Met Asp Gly Gly Asp Lys Thr Lys Leu Val Arg Glu Asn Ala Ile
            420                 425                 430
Lys Trp Lys Thr Leu Ala Arg Gln Ala Met Gly
        435                 440         443
<210>9
<211>461
<212>PRT
<213>Verbena hybrida
<400>9
Met Ser Arg Ala His Val Leu Leu Ala Thr Phe Pro Ala Gln Gly His
  1               5                  10                  15
Ile Asn Pro Ala Leu Gln Phe Ala Lys Arg Leu Ala Asn Ala Asp Ile
             20                  25                  30
Gln Val Thr Phe Phe Thr Ser Val Tyr Ala Trp Arg Arg Met Ser Arg
         35                  40                  45
Thr Ala Ala Gly Ser Asn Gly Leu Ile Asn Phe Val Ser Phe Ser Asp
     50                  55                  60
Gly Tyr Asp Asp Gly Leu Gln Pro Gly Asp Asp Gly Lys Asn Tyr Met
 65                  70                  75                  80
Ser Glu Met Lys Ser Arg Gly Ile Lys Ala Leu Ser Asp Thr Leu Ala
                 85                  90                  95
Ala Asn Asn Val Asp Gln Lys Ser Ser Lys Ile Thr Phe Val Val Tyr
            100                 105                 110Ser His Leu Phe Ala Trp Ala Ala Lys Val Ala Arg Glu Phe His Leu
       115                 120                 125
Arg Ser Ala Leu Leu Trp Ile Glu Pro Ala Thr Val Leu Asp Ile Phe
    130                 135                 140
Tyr Phe Tyr Phe Asn Gly Tyr Ser Asp Glu Ile Asp Ala Gly Ser Asp
145                 150                 155                 160
Ala Ile His Leu Pro Gly Gly Leu Pro Val Leu Ala Gln Arg Asp Leu
                165                 170                 175
Pro Ser Phe Leu Leu Pro Ser Thr His Glu Arg Phe Arg Ser Leu Met
            180                 185                 190
Lys Glu Lys Leu Glu Thr Leu Glu Gly Glu Glu Lys Pro Lys Val Leu
        195                 200                 205
Val Asn Ser Phe Asp Ala Leu Glu Pro Asp Ala Leu Lys Ala Ile Asp
    210                 215                 220
Lys Tyr Glu Met Ile Ala Ile Gly Pro Leu Ile Pro Ser Ala Phe Leu
225                 230                 235                 240
Asp Gly Lys Asp Pro Ser Asp Arg Ser Phe Gly Gly Asp Leu Phe Glu
                245                 250                 255
Lys Gly Ser Asn Asp Asp Asp Cys Leu Glu Trp Leu Ser Thr Asn Pro
            260                 265                 270
Arg Ser Ser Val Val Tyr Val Ser Phe Gly Ser Phe Val Asn Thr Thr
        275                 280                 285
Lys Ser Gln Met Glu Glu Ile Ala Arg Gly Leu Leu Asp Cys Gly Arg
     290                 295                 300
Pro Phe Leu Trp Val Val Arg Val Asn Glu Gly Glu Glu Val Leu Ile
305                 310                 315                 320
Ser Cys Met Glu Glu Leu Lys Arg Val Gly Lys Ile Val Ser Trp Cys
                325                 330                 335
Ser Gln Leu Glu Val Leu Thr His Pro Ser Leu Gly Cys Phe Val Thr
            340                 345                 350
His Cys Gly Trp Asn Ser Thr Leu Glu Ser Ile Ser Phe Gly Val Pro
        355                 360                 365
Met Val Ala Phe Pro Gln Trp Phe Asp Gln Gly Thr Asn Ala Lys Leu
    370                 375                 380
Met Glu Asp Val Trp Arg Thr Gly Val Arg Val Arg Ala Asn Glu Glu
385                 390                 395                 400
Gly Ser Val Val Asp Gly Asp Glu Ile Arg Arg Cys Ile Glu Glu Val
                405                 410                 415
Met Asp Gly Gly Glu Lys Ser Arg Lys Leu Arg Glu Ser Ala Gly Lys
            420                 425                 430
Trp Lys Asp Leu Ala Arg Lys Ala Met Glu Glu Asp Gly Ser Ser Val
        435                 440                 445
Asn Asn Leu Lys Val Phe Leu Asp Glu Val Val Gly Ile
    450                 455                 460 461
<210>10
<211>478
<212>PRT
<213>Torenia hybrida
<220>
<221>
<222>
<223>Xaa(64)is Cys or Phe，Xaa(65)is Ser or Pro
<400>10
Met Val Asn Lys Arg His Ile Leu Leu Ala Thr Phe Pro Ala Gln Gly
  1               5                  10                  15
His Ile Asn Pro Ser Leu Glu Phe Ala Lys Arg Leu Leu Asn Thr Gly
             20                  25                  30
Tyr Val Asp Gln Val Thr Phe Phe Thr Ser Val Tyr Ala Leu Arg Arg
         35                  40                  45
Met Arg Phe Glu Thr Asp Pro Ser Ser Arg Ile Asp Phe Val Ala Xaa
     50                  55                  60
Xaa Asp Ser Tyr Asp Asp Gly Leu Lys Lys Gly Asp Asp Gly Lys Asn
 65                  70                  75                  80
Tyr Met Ser Glu Met Arg Lys Arg Gly Thr Lys Ala Leu Lys Asp Thr
                 85                  90                  95
Leu Ile Lys Leu Asn Asp Ala Ala Met Gly Ser Glu Cys Tyr Asn Arg
            100                 105                 110
Val Ser Phe Val Val Tyr Ser His Leu Phe Ser Trp Ala Ala Glu Val
        115                 120                 125
Ala Arg Glu Val Asp Val Pro Ser Ala Leu Leu Trp Ile Glu Pro Ala
    130                 135                 140
Thr Val Phe Asp Val Tyr Tyr Phe Tyr Phe Asn Gly Tyr Ala Asp Asp
145                 150                 155                 160
Ile Asp Ala Gly Ser Asp Gln Ile Gln Leu Pro Asn Leu Pro Gln Leu
                165                 170                 175
Ser Lys Gln Asp Leu Pro Ser Phe Leu Leu Pro Ser Ser Pro Ala Arg
            180                 185                 190
Phe Arg Thr Leu Met Lys Glu Lys Phe Asp Thr Leu Asp Lys Glu Pro
        195                 200                 205
Lys Ala Lys Val Leu Ile Asn Thr Phe Asp Ala Leu Glu Thr Glu Gln
    210                 215                 220
Leu Lys Ala Ile Asp Arg Tyr Glu Leu Ile Ser Ile Gly Pro Leu Ile
225                 230                 235                 240
Pro Ser Ser Ile Phe Ser Asp Gly Asn Asp Pro Ser Ser Ser Asn Lys
                245                 250                 255
Ser Tyr Gly Gly Asp Leu Phe Arg Lys Ala Asp Glu Thr Tyr Met Asp
            260                 265                 270
Trp Leu Asn Ser Lys Pro Glu Ser Ser Val Val Tyr Val Ser Phe Gly
        275                 280                 285
Ser Leu Leu Arg Leu Pro Lys Pro Gln Met Glu Glu Ile Ala Ile Gly
    290                 295                 300
Leu Ser Asp Thr Lys Ser Pro Val Leu Trp Val Ile Arg Arg Asn Glu
305                 310                 315                 320
Glu Gly Asp Glu Gln Glu Gln Ala Glu Glu Glu Glu Lys Leu Leu Ser
                325                 330                 335
Phe Phe Asp Arg His Gly Thr Glu Arg Leu Gly Lys Ile Val Thr Trp
            340                 345                 350
Cys Ser Gln Leu Asp Val Leu Thr His Lys Ser Val Gly Cys Phe Val
        355                 360                 365
Thr His Cys Gly Trp Asn Ser Ala Ile Glu Ser Leu Ala Cys Gly Val
    370                 375                 380
Pro Val Val Cys Phe Pro Gln Trp Phe Asp Gln Gly Thr Asn Ala Lys
385                 390                 395                 400
Met Ile Glu Asp Val Trp Arg Ser Gly Val Arg Val Arg Val Asn Glu
                405                 410                 415
Glu Gly Gly Val Val Asp Arg Arg Glu Ile Lys Arg Cys Val Ser Glu
            420                 425                 430
Val Ile Lys Ser Arg Glu Leu Arg Glu Ser Ala Met Met Trp Lys Gly
        435                 440                 445
Leu Ala Lys Glu Ala Met Asp Glu Glu Arg Gly Ser Ser Met Asn Asn
    450                 455                 460
Leu Lys Asn Phe Ile Thr Arg Ile Ile Asn Glu Asn Ala Ser
465                 470                 475         478
<210>11
<211>335
<212>PRT
<213>Perilla frutescens
<400>11
Met Ser Ser Ser Ser Ser Arg Arg Trp Arg Glu Asn Glu Gly Met Arg
  1               5                  10                  15
Arg Thr Leu Leu Gly Leu Gly Leu Gly Gln Leu Val Ser Phe Asp Leu
             20                  25                  30
Ala Ile Met Thr Phe Ser Ala Ser Leu Val Ser Thr Thr Val Asp Ala
         35                  40                  45
Pro Leu Thr Met Ser Phe Thr Thr Tyr Thr Val Val Ala Leu Leu Tyr
     50                  55                  60
Gly Thr Ile Leu Leu Tyr Arg Arg His Lys Phe Leu Val Pro Trp Tyr
 65                  70                  75                  80
Trp Tyr Ala Leu Leu Gly Phe Val Asp Val His Gly Asn Tyr Leu Val
                 85                  90                  95
Asn Lys Ala Phe Glu Leu Thr Ser Ile Thr Ser Val Ser Ile Leu Asp
            100                 105                 110
Cys Trp Thr Ile Val Trp Ser Ile Ile Phe Thr Trp Met Phe Leu Gly
        115                 120                 125
Thr Lys Tyr Ser Val Tyr Gln Phe Val Gly Ala Ala Ile Cys Val Gly
    130                 135                 140
Gly Leu Leu Leu Val Leu Leu Ser Asp Ser Gly Val Thr Ala Ala Gly
145                 150                 155                 160
Ser Asn Pro Leu Leu Gly Asp Phe Leu Val Ile Thr Gly Ser Ile Leu
                165                 170                 175
Phe Thr Leu Ser Thr Val Gly Gln Glu Tyr Cys Val Lys Arg Lys Asp
            180                 185                 190
Arg Ile Glu Val Val Ala Met Ile Gly Val Phe Gly Met Leu Ile Ser
        195                 200                 205
Ala Thr Glu Ile Thr Val Leu Glu Arg Asn Ala Leu Ser Ser Met Gln
    210                 215                 220
Trp Ser Thr Gly Leu Leu Ala Ala Tyr Val Val Tyr Ala Leu Ser Ser
225                 230                 235                 240
Phe Leu Phe Cys Thr Leu Thr Pro Phe Leu Leu Lys Met Ser Gly Ala
                245                 250                 255
Ala Phe Phe Asn Leu Ser Met Leu Thr Ser Asp Met Trp Ala Val Ala
            260                 265                 270
Ile Arg Thr Phe Ile Tyr Asn Gln Glu Val Asp Trp Leu Tyr Tyr Leu
        275                 280                 285
Ala Phe Cys Leu Val Val Val Gly Ile Phe Ile Tyr Thr Lys Thr Glu
    290                 295                 300
Lys Asp Pro Asn Asn Thr Arg Ala Leu Glu Asn Gly Asn Leu Asp His
305                 310                 315                 320
Glu Tyr Ser Leu Leu Glu Asp Gln Asp Asp Thr Pro Arg Lys Pro
            325                 330                 335
<210>12
<211>468
<212>PRT
<213>Petunia hybrida
<400>12
Met Val Gln Pro His Val Ile Leu Thr Thr Phe Pro Ala Gln Gly His
  1               5                  10                  15
Ile Asn Pro Ala Leu Gln Phe Ala Lys Asn Leu Val Lys Met Gly Ile
             20                  25                  30
Glu Val Thr Phe Ser Thr Ser Ile Tyr Ala Gln Ser Arg Met Asp Glu
         35                  40                  45
Lys Ser Ile Leu Asn Ala Pro Lys Gly Leu Asn Phe Ile Pro Phe Ser
     50                  55                  60
Asp Gly Phe Asp Glu Gly Phe Asp His Ser Lys Asp Pro Val Phe Tyr
 65                  70                  75                  80
Met Ser Gln Leu Arg Lys Cys Gly Ser Glu Thr Val Lys Lys Ile Ile
                 85                  90                  95
Leu Thr Cys Ser Glu Asn Gly Gln Pro Ile Thr Cys Leu Leu Tyr Ser
            100                 105                 110
Ile Phe Leu Pro Trp Ala Ala Glu Val Ala Arg Glu Val His Ile Pro
        115                 120                 125
Ser Ala Leu Leu Trp Ser Gln Pro Ala Thr Ile Leu Asp Ile Tyr Tyr
    130                 135                 140
Phe Asn Phe His Gly Tyr Glu Lys Ala Met Ala Asn Glu Ser Asn Asp
145                 150                 155                 160
Pro Asn Trp Ser Ile Gln Leu Pro Gly Leu Pro Leu Leu Glu Thr Arg
                165                 170                 175
Asp Leu Pro Ser Phe Leu Leu Pro Tyr Gly Ala Lys Gly Ser Leu Arg
            180                 185                 190
Val Ala Leu Pro Pro Phe Lys Glu Leu Ile Asp Thr Leu Asp Ala Glu
        195                 200                 205
Thr Thr Pro Lys Ile Leu Val Asn Thr Phe Asp Glu Leu Glu Pro Glu
    210                 215                 220
Ala Leu Asn Ala Ile Glu Gly Tyr Lys Phe Tyr Gly Ile Gly Pro Leu
225                 230                 235                 240
Ile Pro Ser Ala Phe Leu Gly Gly Asn Asp Pro Leu Asp Ala Ser Phe
                245                 250                 255
Gly Gly Asp Leu Phe Gln Asn Ser Asn Asp Tyr Met Glu Trp Leu Asn
            260                 265                 270
Ser Lys Pro Asn Ser Ser Val Val Tyr Ile Ser Phe Gly Ser Leu Met
        275                 280                 285
Asn Pro Ser Ile Ser Gln Met Glu Glu Ile Ser Lys Gly Leu Ile Asp
    290                 295                 300
Ile Gly Arg Pro Phe Leu Trp Val Ile Lys Glu Asn Glu Lys Gly Lys
305                 310                 315                 320
Glu Glu Glu Asn Lys Lys Leu Gly Cys Ile Glu Glu Leu Glu Lys Ile
                325                 330                 335
Gly Lys Ile Val Pro Trp Cys Ser Gln Leu Glu Val Leu Lys His Pro
            340                 345                 350
Ser Leu Gly Cys Phe Val Ser His Cys Gly Trp Asn Ser Ala Leu Glu
        355                 360                 365
Ser Leu Ala Cys Gly Val Pro Val Val Ala Phe Pro Gln Trp Thr Asp
    370                 375                 380
Gln Met Thr Asn Ala Lys Gln Val Glu Asp Val Trp Lys Ser Gly Val
385                 390                 395                 400
Arg Val Arg Ile Asn Glu Asp Gly Val Val Glu Ser Glu Glu Ile Lys
                405                 410                 415
Arg Cys Ile Glu Leu Val Met Asp Gly Gly Glu Lys Gly Glu Glu Leu
            420                 425                 430
Arg Lys Asn Ala Lys Lys Trp Lys Glu Leu Ala Arg Glu Ala Val Lys
        435                 440                 445
Glu Gly Gly Ser Ser His Lys Asn Leu Lys Ala Phe Ile Asp Asp Val
    450                 455                 460
Ala Lys Gly Phe
465         468

Claims (8)

1.编码具有类黄酮5位糖转移活性的蛋白质的基因，选自：
(1)编码如下蛋白质的基因，所述蛋白质是对序列7～10或12中任一个序列记载的氨基酸序列具有90％以上同源性的氨基酸序列、而且具有类黄酮5位糖转移活性；
(2)编码对序列7～10或12中任一个序列记载的氨基酸序列的碱基序列、在5×SSC、50℃的严谨条件下能杂交、而且具有类黄酮5位糖转移活性的蛋白质的基因。
2.含有权利要求1记载的基因的载体。
3.利用权利要求2记载的载体转化的宿主，为原核生物、真核微生物、植物细胞或动物细胞。
4.通过权利要求1记载的基因编码的蛋白质。
5.一种蛋白质的制造方法，其特征在于培养、或培育权利要求3记载的宿主，然后从该宿主提取具有类黄酮5位糖转移活性的蛋白质。
6.权利要求1记载的基因导入的植物细胞。
7.具有类黄酮5位糖转移活性的植物细胞的后代或它们的组织的制造方法，其特征在于，将权利要求1记载的基因导入到该植物细胞中。
8.一种切花的制造方法，其特征在于，由权利要求6记载的植物细胞或具有类黄酮5位糖转移活性的其后代获得。
CNB988012146A 1997-07-25 1998-07-16 编码具有糖转移活性的蛋白质的基因 Expired - Fee Related CN1322130C (zh)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP200571/97 1997-07-25
JP20057197 1997-07-25

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN1237206A CN1237206A (zh) 1999-12-01
CN1322130C true CN1322130C (zh) 2007-06-20

Family

ID=16426554

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CNB988012146A Expired - Fee Related CN1322130C (zh) 1997-07-25 1998-07-16 编码具有糖转移活性的蛋白质的基因

Country Status (12)

Country Link
US (2) US6855862B1 (zh)
EP (1) EP0967283B1 (zh)
JP (1) JP4293641B2 (zh)
KR (1) KR100718475B1 (zh)
CN (1) CN1322130C (zh)
AT (1) ATE387493T1 (zh)
AU (1) AU754464B2 (zh)
CA (1) CA2266421C (zh)
DE (1) DE69839178T2 (zh)
ES (1) ES2299210T3 (zh)
NZ (1) NZ335001A (zh)
WO (1) WO1999005287A1 (zh)

Families Citing this family (15)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
NZ507563A (en) * 1999-02-16 2004-02-27 Suntory Ltd Gene encoding a protein having activity of transferring sugar onto aurone
GB0002814D0 (en) * 2000-02-09 2000-03-29 Univ York Nucleic acids and their uses
ES2274888T3 (es) 2000-06-02 2007-06-01 International Flower Developments Proprietary Limited Nuevos genes de acil alifatico transferasa.
AU782261C (en) * 2000-06-02 2006-02-23 Suntory Holdings Limited Novel glycosyltransferase genes
US8110722B2 (en) * 2005-10-20 2012-02-07 Local Independent Administrative Institution Aomori Prefectural Industrial Technology Research Center Aromatic acyltransferase genes
EP2178531A4 (en) * 2007-07-02 2012-01-11 Yu Ming METHODS AND COMPOSITIONS, TARGETS FOR COMBINED CANCER TREATMENTS
CA2759069C (en) * 2009-04-24 2015-10-06 Suntory Holdings Limited Perilla-derived promoter functioning in petals
US9365836B2 (en) 2011-01-14 2016-06-14 Suntory Holdings Limited Glycosyltransferase gene and use thereof
EP2818547B1 (en) 2012-01-17 2016-09-07 Suntory Holdings Limited Glycosyltransferase gene and use thereof
CN103348799A (zh) * 2013-07-19 2013-10-16 镇江瑞繁农艺有限公司 美女樱多次采种栽培方法
EP3114210A2 (en) * 2014-03-07 2017-01-11 Evolva SA Methods for recombinant production of saffron compounds
CN103952414A (zh) * 2014-05-22 2014-07-30 中南民族大学 一种烟草糖基转移酶诱导型启动子及其应用
KR101884382B1 (ko) * 2015-10-30 2018-08-02 고려대학교 산학협력단 단순 페놀릭 배당 유도체, 이의 제조방법 및 이를 함유하는 피부미백 또는 주름개선용 조성물
CN109868265B (zh) * 2017-12-01 2023-04-25 中国科学院分子植物科学卓越创新中心 新型糖基转移酶及其应用
CN117343919B (zh) * 2023-10-07 2024-04-19 广州佰数生物科技有限公司 一种类黄酮双羟基位点糖基转移酶及其应用

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1997016559A1 (en) * 1995-10-31 1997-05-09 Plant Genetic Systems, N.V. Plants with reduced glucosinolate content

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1994003591A1 (en) 1992-07-30 1994-02-17 International Flower Developments Pty. Ltd. Genetic sequences encoding glycosyltransferase enzymes and uses therefor
JP2987277B2 (ja) * 1993-08-31 1999-12-06 日新製鋼株式会社 金属溶解炉の水冷構造
US6489541B1 (en) * 1994-06-24 2002-12-03 Michigan State University Board Of Trustees Genetic control of plant hormone levels and plant growth
KR19990022925A (ko) 1995-06-14 1999-03-25 에인혼 해롤드 개선된 엘라스토머성 압출 프로파일

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1997016559A1 (en) * 1995-10-31 1997-05-09 Plant Genetic Systems, N.V. Plants with reduced glucosinolate content

Also Published As

Publication number Publication date
EP0967283A4 (en) 2004-06-09
ATE387493T1 (de) 2008-03-15
AU754464B2 (en) 2002-11-14
AU8243298A (en) 1999-02-16
EP0967283B1 (en) 2008-02-27
CA2266421A1 (en) 1999-02-04
US6855862B1 (en) 2005-02-15
KR20000068633A (ko) 2000-11-25
CA2266421C (en) 2011-02-15
EP0967283A1 (en) 1999-12-29
NZ335001A (en) 2001-03-30
US7501271B2 (en) 2009-03-10
ES2299210T3 (es) 2008-05-16
KR100718475B1 (ko) 2007-05-16
DE69839178T2 (de) 2009-02-19
CN1237206A (zh) 1999-12-01
WO1999005287A1 (fr) 1999-02-04
US20050257291A1 (en) 2005-11-17
DE69839178D1 (de) 2008-04-10
JP4293641B2 (ja) 2009-07-08

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN1322130C (zh) 编码具有糖转移活性的蛋白质的基因
Harker et al. Identification and genetic regulation of the chalcone synthase multigene family in pea.
US5859329A (en) Genetic sequences encoding flavonol synthase enzymes and uses therefor
EP1544300B1 (en) Novel glycosyltransferase genes
CN101693895A (zh) 编码类黄酮途径酶的基因序列及其用途
KR100559061B1 (ko) 아실기 전이활성을 갖는 단백질을 암호화하는 유전자
KR100753351B1 (ko) 플라본 신타제를 암호화하는 유전자 및 당해 유전자를 사용하여 꽃의 색상을 변화시키는 방법
Schwinn et al. Expression of an Antirrhinum majus UDP-glucose: flavonoid-3-O-glucosyltransferase transgene alters flavonoid glycosylation and acylation in lisianthus (Eustoma grandiflorum Grise.)
JPH07505772A (ja) フラボノイド経路の酵素をコードする遺伝子配列およびその用途
JPH07509139A (ja) グリコシルトランスフェラーゼ酵素をコードする遺伝子配列およびその用途
AU782261B2 (en) Novel glycosyltransferase genes
JP4259886B2 (ja) 新規糖転移活性を有する蛋白質をコードする遺伝子
US6770747B1 (en) Genes encoding protein having activity of transferring sugar onto aurone
AU749745B2 (en) Novel cytochrome P450 gene
AU667392B2 (en) Genetic sequences encoding flavonol synthase enzymes and uses therefor
Alokam Red/Far-Red light mediated stem elongation response and regulation of anthocyanin biosynthesis in alpine and prairie ecotypes of Stellaria longipes
AU2005200905A1 (en) Genes encoding proteins having activity of transferring sugar onto aurone

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
ASS Succession or assignment of patent right

Effective date: 20110824

C41 Transfer of patent application or patent right or utility model
TR01 Transfer of patent right

Effective date of registration: 20110824

Address after: Osaka

Patentee after: Suntory Holdings Limited

Address before: Vitoria Australia

Patentee before: International Flower Developments PTY. Ltd.

CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee

Granted publication date: 20070620

Termination date: 20140716

EXPY Termination of patent right or utility model