CN1306535A

CN1306535A - 噻吩并吡啶化合物,它们的制备方法和用途

Info

Publication number: CN1306535A
Application number: CN99807793A
Authority: CN
Inventors: 古矢修一; 长展生; 铃木伸宏; 今田岐
Original assignee: Takeda Chemical Industries Ltd
Current assignee: Takeda Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 1998-06-26
Filing date: 1999-06-24
Publication date: 2001-08-01
Also published as: US6329388B2; TR200003784T2; AR018935A1; ID26780A; KR20010020155A; TW430665B; US20010001104A1; PL345074A1; JP2000219691A; KR20000012154A; OA11568A

Abstract

本发明的化合物具有杰出的促性腺素释放激素拮抗活性,用于预防或治疗与性激素有关疾病,例如与性激素有关的癌症(例如前列腺癌、子宫癌、乳腺癌、脑垂体肿瘤等)、前列腺肥大、子宫肌瘤、子宫内膜异位、性早熟、经闭综合症、多腔卵巢综合症、丘疹等,或作为妊娠调节剂(例如避孕药)、不育症治疗剂或月经调节剂。

Description

噻吩并吡啶化合物，它们的制备方法和用途

技术领域

本发明涉及显示促性腺素释放素(GnRH)拮抗活性的噻吩并[2,3-b]吡啶衍生物，它们的制备方法和用途。

背景技术

垂体前叶激素的分泌由每个目标器官分泌的外周激素和丘脑下部分泌的分泌促进或分泌抑制激素调节，丘脑下部位于垂体前叶上部的中心，在本说明书中这组激素通常称为下丘脑激素。至今已识别了九种下丘脑激素，例如促甲状腺激素释放激素(TRH)，和促性腺素释放激素[GnRH，也称为促黄体激素释放激素(LH-RH)]等。人们推测这些下丘脑激素经假定存在于垂体前叶的受体显示其激素作用等，对这些激素，包括人体的受体基因特异性的分析正在进行。因此，特殊地和选择性地作用于这些受体的拮抗剂或激动剂将调节下丘脑激素的作用，因而调节垂体前叶激素的分泌。结果，该拮抗剂或激动剂被预期用于预防或治疗与这些垂体前叶激素有关的疾病。

具有GnRH拮抗活性的已知化合物包括GnRH衍生的线性肽(USP5140009和USP5171835)、环状六肽衍生物(JP-A-61-191698)、双环肽衍生物[Journal of Medicinal Chenisty,36卷，3265-3273页(1993)]等。具有GnRH拮抗活性的非肽化合物包括在WO95/28405、WO97/14697、WO97/14682、WO97/41126等中描述。

肽化合物在口服吸收能力、剂量形式、剂量体积、药物稳定性、延迟作用、代谢稳定性等方面存在许多需要解决的问题。现对于口服GnRH拮抗剂，尤其是基于非肽化合物的拮抗剂存在强烈需求，所述化合物应对与激素有关的癌症，例如前列腺癌、子宫内膜异位、性早熟等显示优良的治疗效果，不显示短暂垂体促性腺素作用(急性作用)。

附图的简要说明

附图1用图表示阉割的猴子在口服给药如下实施例1-2的化合物后抑制血浆LH浓度的改善效果，其中…■…表示对照组(1)(赋形剂)，…◆…表示对照组(2)(赋形剂)，…□…表示对照组(3)(赋形剂)，-△-表示化合物(1)[试验动物给药实施例1-2的化合物]和-▲-表示化合物(2)[试验动物给药实施例1-2的化合物]。

发明说明

本发明人制备了许多噻吩并吡啶衍生物，研究它们的作用，发现某些化合物具有优良的GnRH拮抗活性。基于该发现本发明人进行进一步研究，完成了本发明。

因此，本发明涉及：

[1]下式(Ⅰ)的化合物或其盐：其中

R¹表示可以被取代的C_1-7烷基、可以被取代的C_3-7环烷基、可以被取代的C_1-6烷氧基氨基或可以被取代的羟基氨基；和

R²表示可以被取代的C_1-7烷基或可以被取代的苯基；

当R¹是未取代的C_1-7烷基时，则R²是取代的C_1-7烷基或取代的苯基[下文有时简称为化合物(Ⅰ)]；

[2]上述(1)的化合物或其盐，其中

R¹是(1)可以被1-5个取代基取代的C_1-7烷基，所述取代基选自(ⅰ)羟基、(ⅱ)C_1-7酰氧基、(ⅲ)可以被1或2个取代基取代的氨基，所述取代基选自C_1-6烷氧羰基、苄氧羰基、C_1-3酰基、C_1-3烷基磺酰基和C_1-3烷基、(ⅳ)可以被1-3个取代基取代的C_1-10烷氧基，所述取代基选自C_3-7环烷氧羰基和C_1-3烷氧基，和(ⅴ)C_1-6烷氧羰基，

(2)可以被1-3个取代基取代的C_3-7环烷基，所述取代基选自(ⅰ)羟基、(ⅱ)C_1-7酰氧基、(ⅲ)可以被1或2个取代基取代的氨基，所述取代基选自C_1-6烷氧羰基、苄氧羰基、C_1-3酰基、C_1-3烷基磺酰基和C_1-3烷基、(ⅳ)可以被1-3个取代基取代的C_1-10烷氧基，所述取代基选自C_3-7环烷氧羰基和C_1-3烷氧基，和(ⅴ)C_1-6烷氧羰基，

(3)可以被1-5个取代基取代的C_1-6烷氧基氨基，所述取代基选自(ⅰ)羟基、(ⅱ)C_1-7酰氧基、(ⅲ)可以被1或2个取代基取代的氨基，所述取代基选自C_1-6烷氧羰基、苄氧羰基、C_1-3酰基、C_1-3烷基磺酰基和C_1-2烷基、(ⅳ)可以被1-3个取代基取代的C_1-10烷氧基，所述取代基选自C_3-7环烷氧羰基和C_1-3烷氧基，和(ⅴ)C_1-6烷氧羰基，或

(4)可以被1或2个取代基取代的羟基氨基，所述取代基选自(ⅰ)C_1-7酰氧基、(ⅱ)可以被1或2个取代基取代的氨基，所述取代基选自C_1-6烷氧羰基、苄氧羰基、C_1-3酰基、C_1-3烷基磺酰基和C_1-3烷基、(ⅲ)可以被1-3个取代基取代的C_1-10烷氧基，所述取代基选自C_3-7环烷氧羰基和C_1-3烷氧基，和(ⅳ)C_1-6烷基，和

R²是(1)可以被1-5个取代基取代的C_1-7烷基，所述取代基选自(ⅰ)羟基、(ⅱ)C_1-7酰氧基、(ⅲ)可以被1或2个取代基取代的氨基，所述取代基选自C_1-6烷氧羰基、苄氧羰基、C_1-3酰基、C_1-3烷基磺酰基和C_1-3烷基、(ⅳ)可以被1-3个取代基取代的C_1-10烷氧基，所述取代基选自C_3-7环烷氧羰基和C_1-3烷氧基，和(ⅴ)C_1-6烷氧羰基，或

(2)可以被1-5个取代基取代的苯基，所述取代基选自卤素、C_1-3烷基和C_1-3烷氧基；

[3]上述(1)的化合物或其盐，其中R¹是可以被取代的C_1-7烷基或可以被取代的C_3-7环烷基；

[4]上述(1)的化合物或其盐，其中R¹是取代的支链C_3-7烷基或取代的C_3-7环烷基；

[5]上述(1)的化合物或其盐，其中R¹是羟基取代的C_1-7烷基或羟基取代的C_3-7环烷基；

[6]上述(1)的化合物或其盐，其中R¹是取代的C_3-7环烷基；

[7]上述(1)的化合物或其盐，其中R¹是可被羟基取代的环丙基；

[8]上述(1)的化合物或其盐，其中R²是可以被取代的支链C_3-7烷基；

[9]上述(1)的化合物或其盐，其中R²是可以被取代的苯基；

[10]上述(1)的化合物或其盐，其中R²是苯基；

[11]上述(1)的化合物或其盐，其中R¹是C_3-7环烷基和R²是C_1-6烷基；

[12]上述(1)的化合物或其盐，其中R¹是(1)1或2个羟基取代的C_1-4烷基，(2)羟基取代的C_3-7环烷基，或(3)C_1-3烷氧基氨基；和R²是异丙基或苯基；

[13]上述(1)的化合物或其盐，其中R¹是(1)可以被1或2个取代基取代的C_1-7烷基，所述取代基选自羟基、C_1-3烷基羰氧基、氨基、苄氧基羰基氨基、C_1-3烷氧基、C_1-3烷氧基-C_1-3烷氧基或C_1-3烷氧羰基，(2)可以被羟基或C_1-3烷基羰氧基取代的C_3-7环烷基，或(3)C_1-3烷氧基氨基；和R²是(1)可以被羟基取代的异丙基或(2)苯基；

[14]3-(N-苄基-N-甲基氨基甲基)-4,7-二氢-5-异丁酰基-7-(2,6-二氟苄基)-2-(4-环丙烷羰基氨基苯基)-4-氧代噻吩并[2,3-b]吡啶或其盐；

[15]3-(N-苄基-N-甲基氨基甲基)-4,7-二氢-5-异丁酰基-7-(2,6-二氟苄基)-2-[4-(3-羟基-2-甲基丙酰基氨基)苯基]-4-氧代噻吩并[2,3-b]吡啶或其盐；

[16]3-(N-苄基-N-甲基氨基甲基)-4,7-二氢-5-异丁酰基-7-(2,6-二氟苄基)-2-[4-[(1-羟基环丙基)羰基氨基]苯基]-4-氧代噻吩并[2,3-b]吡啶或其盐；

[17]3-(N-苄基-N-甲基氨基甲基)-5-苯甲酰基-7-(2,6-二氟苄基)-4,7-二氢-2-[4-[(1-羟基环丙基)羰基氨基]苯基]-4-氧代噻吩并[2,3-b]吡啶或其盐；

[18]制备上述[1]化合物或其盐的方法，其包括使下式(Ⅱ)化合物或其盐：

其中R²表示可以被取代的C_1-7烷基或可以被取代的苯基[下文有时简称为化合物(Ⅱ)]，ⅰ)与下式的化合物或其盐或活性衍生物反应：

R^1aCOOH其中R^1a表示可以被取代的C_1-7烷基或可以被取代的C_3-7环烷基，或ⅱ)与羰基二咪唑、光气或氯甲酸酯反应，随后与下式化合物或其盐反应：

R^1bH其中R^1b表示可以被取代的C_1-6烷氧基氨基或可以被取代的羟基氨基；

[19]制备上述(3)化合物或其盐的方法，其包括使化合物(Ⅱ)与下式的化合物或其盐或活性衍生物反应：

R^1aCOOH其中R^1a表示可以被取代的C_1-7烷基或可以被取代的C_3-7环烷基；

[20]药物组合物，其含有上述(1)化合物或其盐；

[21]上述(20)的药物组合物，它用于拮抗促性腺素释放激素；

[22]上述(21)的药物组合物，它用于预防或治疗与性激素有关的疾病；

[23]在需要的哺乳动物中拮抗促性腺素释放激素的方法，其包括向所述哺乳动物给药有效量的上述(1)的化合物或其盐与可药用的赋形剂、载体或稀释剂；

[24]上述(1)的化合物或其盐在制备用于拮抗促性腺素释放素的药物组合物中的用途，等。

以下详细描述在上述式中的每个符号。

R¹中“可以被取代的C_1-7烷基”中的“C_1-7烷基”包括，例如甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、己基、庚基等；支链C_3-7烷基，例如异丙基、异丁基、仲丁基、叔丁基、异戊基、新戊基等。其中优选支链C_3-7烷基，更优选异丙基。

R¹中“可以被取代的C_1-7烷基”中的“取代基”包括，例如(ⅰ)羟基，(ⅱ)C_1-7酰氧基(例如C_1-6烷基羰氧基，例如乙酰氧基、丙酰氧基等；苯甲酰氧基等)，(ⅲ)可以被1或2个取代基取代的氨基，所述取代基选自C_1-6烷氧羰基(例如甲氧基羰基、乙氧基羰基、叔丁氧基羰基等)、苄氧羰基、C_1-3酰基(例如C_1-2烷基羰基，例如乙酰基、丙酰基等)、C_1-3烷基磺酰基(例如甲磺酰基等)或C_1-3烷基(例如甲基、乙基等)等[例如氨基、甲氧基羰基氨基、乙氧基羰基氨基、叔丁氧基羰基苄氧基羰基氨基、乙酰基氨基、甲磺酰氨基、甲基氨基、二甲基氨基等]，(ⅳ)可以被1-3个取代基取代的C_1-10(优选C_1-4)烷氧基，所述取代基选自C_3-7环烷氧羰基(例如环己氧基羰基氧基等)或C_1-3烷氧基(例如甲氧基、乙氧基等)[例如甲氧基、乙氧基、丙氧基、叔丁氧基、环己基氧基羰基氧基-1-乙氧基、甲氧基甲氧基、乙氧基甲氧基等]，(ⅴ)C_1-6烷氧羰基(例如甲氧基羰基、乙氧基羰基、丙氧基羰基等)，等等。其中优选羟基。

“C_1-7烷基”可在可能的位置带有1-5个，优选1-3个上述取代基，当取代基的数目是两个或更多时，这些取代基可以彼此相同或不同。

R¹中的“可以被取代的C_3-7环烷基”中的“C_3-7环烷基”包括，例如环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基等。其中优选环丙基。

R¹中的“可以被取代的C_3-7环烷基”中的“取代基”与上述R¹中的“可以被取代的C_1-7烷基”中的“取代基”相同。取代基的数目为1-3个，当取代基的数目是两个或更多时，这些取代基可以彼此相同或不同。

R¹中的“可以被取代的C_1-6烷氧基氨基”中的“C_1-6烷氧基氨基”包括，例如单或二-C_1-6烷氧基氨基(例如甲氧基氨基、乙氧基氨基、二甲氧基氨基、二乙氧基氨基、乙氧基甲氧基氨基等)，等等。其中优选单-C_1-3烷氧基氨基(例如甲氧基氨基等)。

R¹中的“可以被取代的C_1-6烷氧基氨基”中的“取代基”与上述R¹中的“可以被取代的C_1-7烷基”中的“取代基”相同。当取代基的数目是两个或更多时，这些取代基可以彼此相同或不同。C_1-6烷氧基氨基的“C_1-6烷氧基”或“氨基的氮原子”可被上述“取代基”取代。

该“可以被取代的C_1-6烷氧基氨基”的实例为甲氧基氨基、N-甲基-N-甲氧基氨基、N-乙基-N-甲氧基氨基、乙氧基氨基、二甲氧基氨基、二乙氧基氨基、乙氧基甲氧基氨基等。优选C_1-3烷氧基氨基、N-C_1-3烷基-N-C_1-3烷氧基氨基等。

R¹中的“可以被取代的羟基氨基”的“取代基”可位于羟基氨基的“羟基”上或羟基氨基的“氨基的氮原子”上。该在“羟基”上的“取代基”包括，例如(ⅰ)C_1-7酰氧基(例如C_1-6烷基羰氧基，例如乙酰氧基、丙酰氧基等；苯甲酰氧基等)、(ⅱ)可以被1或2个取代基取代的氨基，所述取代基选自C_1-6烷氧羰基(例如甲氧基羰基、乙氧基羰基、叔丁氧基羰基等)、苄氧羰基、C_1-3酰基(例如C_1-2烷基羰基，例如乙酰基、丙酰基等)、C_1-3烷基磺酰基(例如甲磺酰基等)和C_1-3烷基(例如甲基、乙基等)等[例如氨基、甲氧基羰基氨基、乙氧基羰基氨基、叔丁氧基羰基苄氧基羰基氨基、乙酰基氨基、甲磺酰氨基、甲基氨基、二甲基氨基等]，(ⅲ)可以被1-3个取代基取代的C_1-10(优选C_1-4)烷氧基，所述取代基选自C_3-7环烷氧羰基(例如环己氧基羰基氧基等)和C_1-3烷氧基(例如甲氧基、乙氧基等)[例如甲氧基、乙氧基、丙氧基、叔丁氧基、环己基氧基羰基氧基-1-乙氧基、甲氧基甲氧基、乙氧基甲氧基等]，等等。取代基的数目是1-5个，优选1-3个。当取代基的数目是两个或更多时，这些取代基可以彼此相同或不同。该“氨基的氮原子”上的“取代基”包括，例如(1)上述(ⅰ)-(ⅲ)中所述的每个基团和(2)C_1-6烷基(例如甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、异戊基、新戊基、己基等)。取代基的数目是1-5个，优选1-3个，当取代基的数目是两个或更多时，这些取代基可以彼此相同或不同。

“可以被取代的羟基氨基”的优选实例包括N-C_1-6烷基-N-羟基氨基(例如N-甲基-N-羟基氨基、N-乙基-N-羟基氨基等)，等等。更优选N-C_1-3烷基-N-羟基氨基等。

R²中的“可以被取代的C_1-7烷基”中的“C_1-7烷基”包括，例如直链或支链C_1-7烷基，例如甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、异戊基、新戊基、己基、庚基等。其中优选C_1-3烷基(例如甲基、乙基、丙基、异丙基等)，等等。更优选异丙基。

R²中“可以被取代的C_1-7烷基”中的“取代基”和它们的数目与上述R¹中“可以被取代的C_1-7烷基”中的“取代基”相同。当取代基的数目是两个或更多时，这些取代基可以彼此相同或不同。

R²中的“可以被取代的苯基”中的“取代基”包括，例如卤素(例如氟、氯、溴、碘等)、C_1-3烷基(例如甲基、乙基、丙基、异丙基等)、C_1-3烷氧基(例如甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基等)，等等。其中优选卤素，更优选氟。

“苯基”可以在可能的位置上带有1-5个，优选1-3个上述的取代基，当取代基的数目是两个或更多时，这些取代基可以彼此相同或不同。

R¹优选是取代的支链C_3-7烷基或取代的C_3-7环烷基，更优选羟基取代的C_1-7烷基或羟基取代的C_3-7环烷基。其中优选取代的C_3-7环烷基。同样，优选可以被羟基取代的C_1-3烷基、可以被羟基取代的C_3-7环烷基、单-C_1-3烷氧基氨基、N-C_1-3烷基-N-羟基氨基、羟基氨基。尤其优选的R¹是(ⅰ)可以被羟基取代的环丙基或(ⅱ)甲氧基氨基等。最优选可以被羟基取代的环丙基。

R²优选是可以被取代的C_1-7烷基，更优选可以被羟基取代的C_1-3烷基，尤其优选异丙基，同样优选苯基。

化合物(Ⅰ)的优选实例包括如下定义的化合物或其盐，其中R¹是可以被羟基取代的C_1-3烷基、可以被羟基取代的C_3-7环烷基或单-C_1-3烷氧基氨基；和R²是C_1-3烷基。

更优选如下定义的化合物或其盐，其中R¹是(1)1或2个羟基取代的C_1-4烷基，(2)羟基取代的C_3-7环烷基，或(3)C_1-3烷氧基氨基；和R²是异丙基或苯基。

同样优选如下定义的化合物或其盐，其中R¹是(1)可以被1或2个取代基取代的C_1-7烷基，所述取代基选自羟基、C_1-3烷基-羰氧基、氨基、苄氧基羰基氨基、C_1-3烷氧基、C_1-3烷氧基-C_1-3烷氧基和C_1-3烷氧基羰基，(2)可以被羟基取代的C_3-7环烷基或C_1-3烷基羰氧基，或(3)C_1-3烷氧基氨基；和R²是(1)可以被羟基取代的异丙基或(2)苯基。

作为化合物(Ⅰ)，具体提到的是

3-(N-苄基-N-甲基氨基甲基)-4,7-二氢-5-异丁酰基-7-(2,6-二氟苄基)-2-(4-环丙烷羰基氨基苯基)-4-氧代噻吩并[2,3-b]吡啶或其盐，

5-苯甲酰基-3-(N-苄基-N-甲基氨基甲基)-7-(2,6-二氟苄基)-4,7-二氢-4-氧代-2-[4-(3-羟基-2-甲基丙酰基氨基)苯基]噻吩并[2,3-b]吡啶；

5-(4-氟苯甲酰基)-3-(N-苄基-N-甲基氨基甲基)-7-(2,6-二氟苄基)-4,7-二氢-4-氧代-2-(4-环丙烷羰基氨基苯基)噻吩并[2,3-b]吡啶；

3-(N-苄基-N-甲基氨基甲基)-4,7-二氢-5-异丁酰基-7-(2,6-二氟苄基)-2-[4-(3-羟基-2-甲基丙酰基氨基)苯基]-4-氧代噻吩并[2,3-b]吡啶；

3-(N-苄基-N-甲基氨基甲基)-4,7-二氢-5-异丁酰基-7-(2,6-二氟苄基)-2-(4-N’-甲氧基脲基苯基)-4-氧代噻吩并[2,3-b]吡啶；

3-(N-苄基-N-甲基氨基甲基)-4,7-二氢-5-异丁酰基-7-(2,6-二氟苄基)-2-[4-[(1-羟基环丙基)羰基氨基]苯基]-4-氧代噻吩并[2,3-b]吡啶；

(R)-4,7-二氢-2-[4-(3-羟基-2-甲基丙酰基氨基)苯基]-7-(2,6-二氟苄基)-3-(N-苄基-N-甲基氨基甲基)-5-异丁酰基-4-氧代噻吩并[2,3-b]吡啶；

4,7-二氢-2-[4-(2-羟基-2-甲基丙酰基氨基)苯基]-7-(2,6-二氟苄基)-3-(N-苄基-N-甲基氨基甲基)-5-异丁酰基-4-氧代噻吩并[2,3-b]吡啶；

4,7-二氢-2-[4-(3-羟基-3-甲基丁酰基氨基)苯基]-7-(2,6-二氟苄基)-3-(N-苄基-N-甲基氨基甲基)-5-异丁酰基-4-氧代噻吩并[2,3-b]吡啶；

(R)-4,7-二氢-2-[4-(2,3-二羟基丙酰基氨基)苯基]-7-(2,6-二氟苄基)-3-(N-苄基-N-甲基氨基甲基)-5-异丁酰基-4-氧代噻吩并[2,3-b]吡啶；

3-(N-苄基-N-甲基氨基甲基)-5-苯甲酰基-7-(2,6-二氟苄基)-4,7-二氢-2-[4-[(1-羟基环丙基)羰基氨基]苯基]-4-氧代噻吩并[2,3-b]吡啶，和其盐。

化合物(Ⅰ)可以用任何本身已知的方法，例如根据在WO95/28405中公开的方法或其类似的方法制备，具体记述如下制备方法1和制备方法2。制备方法1：

化合物(Ⅰ)通过使化合物(Ⅱ)与下式的化合物或其盐或其活性衍生物反应制备：R^1aCOOH，其中R^1a表示可以被取代的C_1-7烷基或可以被取代的C_3-7环烷基[下文有时简称为化合物(Ⅲ)]。

R^1a中“可以被取代的C_1-7烷基”和“可以被取代的C_3-7环烷基”分别与上述R¹中的“可以被取代的C_1-7烷基”和“可以被取代的C_3-7环烷基”相同。

“下式的化合物或其盐或其活性衍生物：R^1aCOOH”的“氯甲酸酯”包括例如下式的化合物：R^1aCOY，其中Y表示卤素，和R^1a同上述定义。

相对于1摩尔的化合物(Ⅱ)，与之反应的化合物(Ⅲ)的量为约1-3摩尔。

该反应还在碱存在下进行，“碱”的实例是无机碱，例如碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸钾、碳酸氢钾、氢氧化钠、氢氧化钾和氢氧化铊，和有机碱，例如三乙胺和吡啶等。

相对于1摩尔化合物(Ⅱ)，“碱”的用量为约1-10摩尔，优选约2-5摩尔。

在其中使用式R^1aCOOH化合物或其盐的情况下，通常用作肽化学中的缩合剂，例如苯并三唑-1-基氧基三吡咯烷磷翁六氟磷酸盐(PyBop)可用于形成酰胺键。

该反应有利地在对反应惰性的溶剂中进行，溶剂的实例包括醚(例如乙醚、二噁烷、二甲氧基乙烷、四氢呋喃等)、芳烃(例如苯、甲苯等)、酰胺(例如二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺等)、卤代烃(例如氯仿、二氯甲烷等)，等等。

反应温度通常为约0-150℃，优选室温(约15-25℃)，反应时间通常为约1-12小时。

化合物(Ⅱ)可以用任何本身已知的方法，例如根据在WO95/28405中公开的方法或其类似的方法制备。

其中R¹是可以被取代的C_1-6烷氧基氨基或可以被取代的羟基氨基的化合物(Ⅰ)还可根据如下制备方法2的方法制备。制备方法2

化合物(Ⅰ)通过使化合物(Ⅱ)与羰基二咪唑(N,N’-羰基二咪唑；CDI)、光气(单体、二聚体或三聚体)或氯甲酸酯反应，随后与下式化合物或其盐反应制备：R^1bH,其中R^1b表示可以被取代的C_1-6烷氧基氨基或可以被取代的羟基氨基[下文有时简称为化合物(Ⅳ)]。

“氯甲酸酯”包括，例如下式化合物：C1-COOY’，其中Y’表示C_1-6烷基，例如氯甲酸乙酯等。

R^1b中“可以被取代的C_1-6烷氧基氨基”和“可以被取代的羟基氨基”分别与R¹中的“可以被取代的C_1-6烷氧基氨基”和“可以被取代的羟基氨基”相同。

在化合物(Ⅱ)与羰基二咪唑、光气或氯甲酸酯的反应中，相对于1摩尔化合物(Ⅱ)，羰基二咪唑、光气或氯甲酸酯以约1-3摩尔的数量使用。

该反应有利地在对反应惰性的溶剂中进行，溶剂的实例包括醚(例如乙醚、二恶烷、二甲氧基乙烷、四氢呋喃等)、芳烃(例如苯、甲苯等)、酰胺(例如二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺等)、卤代烃(例如氯仿、二氯甲烷等)，等等。

反应温度通常为约0-150℃，优选室温(约15-25℃)。反应时间通常为约1-36小时。

反应还在碱存在下进行。“碱”的实例是无机碱，例如碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸钾、碳酸氢钾、氢氧化钠、氢氧化钾和氢氧化铊，和有机碱，例如三乙胺和吡啶等。

相对于1摩尔化合物(Ⅱ)，“碱”的用量为约2-20摩尔，优选约5-12摩尔。

随后的与化合物(Ⅳ)的反应可以在化合物(Ⅱ)与羰基二咪唑、光气或氯甲酸酯反应的相同条件下进行。相对于1摩尔化合物(Ⅱ)，化合物(Ⅳ)的用量为约2-20摩尔，优选约5-10摩尔。

反应温度通常为约0-150℃，优选室温(约15-25℃)。反应时间通常为约1-6小时。

本发明的化合物(Ⅰ)可通过常规分离方法，例如重结晶、蒸馏和色谱法等分离和纯化。当式(Ⅰ)化合物以游离形式得到时，它可通过本身已知的方法或其类似方法转化为盐。当化合物(Ⅰ)以盐形式得到时，它可通过本身已知的方法或其类似方法转化为游离形式或其它盐。

化合物(Ⅰ)的盐优选是生理学上可接受的酸加成盐。该盐包括，例如与无机酸(例如盐酸、氢溴酸、硝酸、硫酸、磷酸)形成的盐和与有机酸(例如甲酸、乙酸、三氟乙酸、富马酸、草酸、酒石酸、马来酸、柠檬酸、琥珀酸、苹果酸、甲磺酸、苯磺酸、对甲苯磺酸)形成的生理学上可接受的酸加成盐。当化合物(Ⅰ)带有酸性基团时，它可与无机碱(例如碱金属，例如钠、钾、钙和镁、碱土金属、氨)或有机碱(例如三甲胺、三乙胺、吡啶、甲基吡啶、乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、二环己基胺、N,N’-二苄基乙二胺)形成生理学可接受的盐。

化合物(Ⅰ)可以是水合物或非水合物。水合物的实例为单水合物、倍半水合物和二水合物。

当化合物(Ⅰ)以旋光活性构型的混合物(外消旋体)得到时，它可通过常规旋光拆分技术拆分为(R)-和(S)-形式。

本发明的化合物(Ⅰ)(下文也称为“本发明的化合物”)具有优良的GnRH拮抗活性和低毒性。此外，它在口服吸收性、作用持续性、稳定性和药动学方面是优良的。此外，其可容易地制备。因此，通过其GnRH受体拮抗作用抑制促性腺素分泌而控制血液性激素浓度，本发明的化合物能够安全地用于哺乳动物(例如人、猴子、牛、马、狗、猫、兔子、大鼠、小鼠等)以预防和/或治疗与雄性或雌性激素有关的疾病、由于这些激素过量引起的疾病等。

例如，本发明的化合物用于预防和/或治疗与性激素有关的癌症(例如前列腺癌、子宫癌、乳腺癌、脑垂体肿瘤等)、前列腺肥大、子宫肌瘤、子宫内膜异位、性早熟、经闭、经前期综合症、多腔卵巢综合症、丘疹等。本发明的化合物还用于调节男性或女性的生殖作用(例如妊娠调节剂、月经周期调节剂等)。本发明的化合物还可用作男性或女性避孕药或作为女性排卵诱导剂。基于在停药后的恢复效果，本发明的化合物可用于治疗不育症。

此外，本发明的化合物用于调节动物发情期、在畜牧业中改善肉类质量和促进动物生长。本发明的化合物还用作鱼产卵促进剂。

虽然本发明的化合物可单独使用，但它可有效地与甾族或非甾族抗雄激素剂或抗雌激素剂结合使用。本发明的化合物还可用于抑制在给药高度激动剂，例如亮丙瑞林乙酸盐时观察到的血液睾丸素浓度的瞬时上升(闪耀现象)。本发明的化合物可与高度激动剂，例如亮丙瑞林乙酸盐、gonadrelin、布舍瑞林、曲善瑞林、戈舍瑞林、那法瑞林、组氨瑞林、deslorelin、meterelin、lecirelin等结合使用，其中优选亮丙瑞林乙酸盐。本发明的化合物还可与癌症的化学治疗剂一起使用，该结合的优选实例是本发明的化合物与前列腺癌的化学治疗剂，例如异环磷酰胺、UTF、阿霉素、培洛霉素和顺二氯二氨合铂的结合。对于乳腺癌，本发明的化合物可与化学治疗剂，例如环磷酰胺、5-FU、UFT、甲氨喋呤、阿霉素、丝裂霉素C和米托蒽醌一起使用。

当本发明的化合物用于预防和/或治疗(作为预防和/或治疗药物)上述疾病或用于畜牧业或渔业领域时，它可与可药用的载体一起配制，通常以用于口服给药的固体制剂，例如片剂、胶囊、颗粒和粉剂形式，或以用于非口服给药的静脉内、皮下、肌内或其它的注射液、栓剂或舌下片剂形式口服或非口服给药。它还可以舌下片剂、微胶囊等缓释制剂形式经舌下、皮下、肌内或其它途径给药。根据症状严重程度、受治疗者年龄、性别、体重和敏感性，给药的持续时间和间隔；药物制剂的性质、配药和种类等，日剂量不受限制。为用于治疗上述与性激素有关的癌症(例如前列腺癌、子宫癌、乳腺癌、脑垂体肿瘤)、前列腺肥大、子宫肌瘤、子宫内膜异位、性早熟等，日剂量通常是每kg哺乳动物体重约0.01-30mg，优选约0.02-10mg，更优选0.1-10mg，通常以1-4个均分剂量。

上述剂量适用于本发明的化合物在畜牧业或渔业中的应用。日剂量通常是每kg受治疗的生物体体重约0.01-30mg，优选约0.1-10mg，通常以1-3个均分剂量。

在本发明的药物组合物中，化合物(Ⅰ)的数量按重量计为组合物的总重量的0.01-100％。

可药用的载体是通常用于药物载体的各种有机或无机载体，包括用于固体制剂的赋形剂、润滑剂、粘合剂和崩解剂和用于液体制剂的溶剂、溶解助剂、悬浮剂、等渗剂、缓冲剂和安抚剂。根据需要，可以使用其它药物添加剂，例如防腐剂、抗氧化剂、着色剂和增甜剂。

优选的赋形剂包括，例如乳糖、蔗糖、D-甘露糖醇、淀粉、结晶纤维素和轻质硅酐。优选的润滑剂包括，例如硬脂酸镁、硬脂酸钙、滑石和胶体氧化硅。优选的粘合剂包括，例如结晶纤维素、蔗糖、D-甘露糖醇、糊精、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素和聚乙烯基吡咯烷酮。优选的崩解剂包括，例如淀粉、羧甲基纤维素、羧甲基纤维素钙、交联羧甲醚纤维素钠和羧甲基淀粉钠。优选的溶剂包括，例如用于注射的水、醇、丙二醇、聚乙二醇、芝麻油和玉米油。优选的溶解助剂包括，例如聚乙二醇、聚丙二醇、D-甘露糖醇、苯甲酸苄基酯、乙醇、三羟甲基氨基甲烷、胆固醇、三乙醇胺、碳酸钠和柠檬酸钠。优选的悬浮剂包括，例如表面活性剂，例如硬脂基三乙醇胺、月桂基硫酸钠、月桂基氨基丙酸、卵磷脂、苯扎氯铵、苯索氯铵和甘油单硬脂酸酯；和亲水聚合物，例如聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮、羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、羟甲基纤维素、羟乙基纤维素和羟丙基纤维素。优选的等渗剂包括，例如氯化钠、甘油和D-甘露糖醇。优选的缓冲剂包括，例如磷酸盐、乙酸盐、碳酸盐、柠檬酸盐等的缓冲溶液。优选的安抚剂包括，例如苄醇。优选的防腐剂包括，例如对羟基苯甲酸酯、氯丁醇、苄醇、苯乙醇、脱氢乙酸和山梨酸。优选的抗氧化剂包括，例如亚硫酸盐和抗坏血酸。

通过加入悬浮剂、溶解助剂、稳定剂、等渗剂、防腐剂等，用常规已知方法本发明的化合物可配制成静脉内、皮下或肌内注射液。在该情况下，本发明的化合物可根据需要采用通常已知的方法冻干。在向人体给药过程中，例如本发明的化合物可安全地直接或以通过与合适选择的可药用的载体、赋形剂和稀释剂混合制备的药物组合物口服或非口服给药。

该药物组合物包括口服制剂(例如粉末、颗粒、胶囊、片剂)、注射液、滴浸剂、外用制剂(例如鼻制剂、皮埋制剂)和栓剂(例如直肠栓剂、阴道栓)。

这些制剂可通过通常用于制药过程的已知方法制备。

注射液可通过例如将本发明化合物与分散剂(例如Tween 80，由AtlasPowder Company,USA生产，HCO 60，由Nikko Chemicals Co.,Ltd生产，聚乙二醇、羧甲基纤维素、藻酸钠)、防腐剂(例如对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯、苄醇)、等渗剂(例如氯化钠、甘露糖醇、山梨糖醇、葡萄糖)和其它添加剂一起配制成注射液形式制备，或配制成含油注射液、在植物油，例如橄栏油、芝麻油、棉籽油或玉米油、丙二醇等中的悬浮液或乳化液形式制备。

口服制剂可通过常用已知方法在将本发明化合物与赋形剂(例如乳糖、蔗糖、淀粉)、崩解剂(例如淀粉、碳酸钙)、粘合剂(例如淀粉、阿拉伯胶、羧甲基纤维素、聚乙烯基吡咯烷酮、羟基丙基纤维素)、润滑剂(例如滑石、硬脂酸镁、聚乙二醇6000)和其它添加剂混合后通过成形制备，和根据需要采用已知方法涂覆成形的产品以用于味道掩蔽、肠溶解或延缓释放。用于此目的的涂覆剂包括，例如羟丙基甲基纤维素、乙基纤维素、羟甲基纤维素。羟丙基纤维素、聚氧乙二醇、Tween 80、Prulonic F68、乙酸邻苯二甲酸纤维素、邻苯二甲酸羟丙基甲基纤维素、乙酸琥珀酸羟基甲基纤维素、Eudragit(由德国Rohm Company生产；甲基丙烯酸/丙烯酸共聚物)和染料(例如氧化铁、二氧化钛)。对于肠制剂，通过常用已知方法在肠溶相和含药相之间提供中间相以分离两相。

外用制剂可通过常用已知方法以固体、半固体或液体组合物形式配合本发明的化合物制备。所述固体组合物通过例如粉末化本发明的化合物或与赋形剂(例如乙二醇、甘露糖醇、淀粉、微晶纤维素)、增稠剂(例如天然橡胶、纤维素衍生物、丙烯酸聚合物)和其它添加剂混合制备。所述液体组合物通过以与注射液几乎相同的方法制备本发明的化合物的含油或含水悬浮液制备。半固体组合物优选是含水或含油凝胶或软膏。所有这些组合物可含有pH调节剂(例如碳酸、磷酸、柠檬酸、盐酸、氢氧化钠)、防腐剂(例如对羟基苯甲酸酯、氯丁醇、苯扎氯铵)和其它添加剂。

栓剂通过常用已知方法将本发明的化合物配制成含油或含水固体、半固体或液体组合物制备。用于该组合物的有用的油状基质包括高级脂肪酸(例如可可脂、uitenpsols，由德国Dynamite Nobel Company制备)、中级脂肪酸(例如MIGLYOL，由德国Dynamite Nobel Company制备)的甘油酯和植物油(例如芝麻油、大豆油、棉籽油)。含水基质包括，例如聚乙二醇和丙二醇。用于含水凝胶的基质包括，例如天然橡胶、纤维素衍生物、乙烯基聚合物和丙烯酸聚合物。

实施本发明的最佳方式

下文本发明通过如下非限制性的参考实施例、实施例、制剂实施例和实验实施例更详细地说明。

1H-NHR波谱用四甲基甲硅烷作为内标，使用GEMINI 200(200MHz)光谱仪(由Varian,Ltd.生产)、LAMBDA 300(300MHz)波谱仪(由JEOL,Ltd.生产)或Bruker AM500(500MHz)波谱仪(由Breker产生)测定；所有δ值以ppm表示。除非另有特别说明，“％”是按重量计，收率表示为mol/mol％。

用于本文的符号具有如下含义：s：单峰，d：双重峰，t：三重峰，dt：双重三重峰，m：多重峰，br：宽峰

术语“室温”表示约15-25℃的范围，但不构成严格限制。

实施例参考实施例1

2-氨基-5-苯基噻吩-3-羧酸乙酯的制备

在45℃于20分钟内，在搅拌下向氰基乙酸乙酯(6.1g,50mmol)、硫(1.61g,50mmol)、三乙胺(3.5ml,25mmol)和二甲基甲酰胺(10ml)的混合物中滴加苯乙醛(在邻苯二甲酸二乙酯中的50％溶液；12.05g,50mmol)。在45℃搅拌9小时后，浓缩反应混合物，得到的残余物用乙酸乙酯提取，用盐水洗涤和干燥(硫酸镁)，减压蒸馏出溶剂。残余物在硅胶上色谱纯化，由乙醚-己烷中重结晶得到浅黄色平片状结晶(5.55g,45％)。mp124.5-125.5℃(文献；123-124℃)。元素分析(C₁₃H₁₃NO₂S)

C(％) H(％) N(％)计算值：63.13；5.30；5.66实验值：62.99；5.05；5.63¹H-NMR(300MHz,CDCl₃)δ:1.37(3H,t,J=7.1Hz),4.30(2H,d,J=7.1Hz),5.97(2H,br),7.17-7.46(6H,m).IR(KBr):3448,3320,1667,1590,1549cm^-1.参考实施例2

2-氨基-4-甲基-5-(4-甲氧基苯基)噻吩-3-羧酸乙酯的制备

将4-甲氧基苯基丙酮(16.5g,0.10mol)、氰基乙酸乙酯(12.2g,0.10mol)、乙酸铵(1.55g,20mmol)、乙酸(4.6ml,80mmol)和苯(20ml)的混合物加热并回流24小时，同时用Dean-Stark装置除去生成的水。在冷却后，减压浓缩反应混合物，残余物在二氯甲烷和碳酸氢钠水溶液之间分配。在用盐水洗涤和干燥(MgSO₄)后，减压蒸馏出溶剂。向得到的残余物在乙醇(30ml)中的溶液加入硫(3.21g,0.10mol)和二乙基胺(10.4ml,0.10mol)，接着在50-60℃下搅拌2小时，随后浓缩反应混合物。得到的残余物用乙酸乙酯提取，用盐水洗涤和干燥(硫酸镁)，减压蒸馏出溶剂。残余物在硅胶上色谱纯化，由乙醚-己烷重结晶得到浅黄色平片状结晶(11.5g,40％)。mp79-80℃元素分析(C₁₅H₁₇NO₃S)

C(％) H(％) N(％) S(％)计算值：61.83；5.88；4.81；11.01实验值：61.81；5.75；4.74；10.82¹H-NMR(200MHz,CDCl₃)δ:1.37(3H,t,J=7.1Hz),2.28(3H,s),3.83(3H,s),4.31(2H,q,J=7.1Hz),6.05(2H,brs),6.91(2H,d,J=8.8Hz),7.27(2H,d,J=8.8Hz).IR (KBr):3426,3328,1651,1586,1550,1505,1485cm^-1.FAB-MS m/z:291(M⁺).参考实施例3

用某些丙酮衍生物代替4-甲氧基苯基丙酮，用与参考实施例2中的相同方法得到如下化合物。收率：40％mp 64-65℃。参考实施例4

[3-乙氧基羰基-5-(4-甲氧基苯基)-4-甲基噻吩-2-基]氨基亚甲基丙二酸二乙酯的制备

向参考实施例2得到的化合物(10g,34.3mmol)中加入乙氧基亚甲基丙二酸二乙酯(7.45g,34.5mmol)，随后在120℃搅拌2小时。在冷却反应混合物后，加入乙醚，通过过滤收集沉淀的结晶，再次用乙醚洗涤，在五氧化磷上减压干燥得到黄色结晶(14.2g,90％)。mp 122-123℃.¹H-NMR(200MHz,CDCl₃)δ:1.32(3H,t,J=7.1Hz),1.38(3H,t,J=7.2Hz),1.41(3H,t,J=7.2Hz),2.34(3H,s),3.85(3H,s),4.25(2H,q,J=7.1Hz),4.38(2H,q,J=7.2Hz),4.45(2H,q,J=7.2Hz),6.95(2H,d,J=8.8Hz),7.31(2H,d,J=8.8Hz),8.22(1H,d,J=13.4Hz),12.74(1H,d,J=13.1Hz).IR(KBr):2984,1720,1707,1688,1653,1599,1518,1499cm^-1.参考实施例5

用参考实施例3中得到的化合物作为起始物料，以与参考实施例4中的相同的方法得到如下化合物。

收率：92％mp 108-109℃。参考实施例6

3-羧基-5-[(4-甲氧基苯基)-4-甲基噻吩-2-基]氨基亚甲基丙二酸二乙酯的制备

在60-70℃在搅拌下向参考实施例4得到的化合物(7.0g,15.2mmol)在二噁烷(20ml)中的溶液中加入氢氧化钾(5.0g,75.7mmol)在乙醇(30ml)中的溶液。在该温度下搅拌1小时后，反应混合物在室温下静置1小时。在冰冷却下向混合物中加入2N盐酸(40ml,80mmol)，减压浓缩反应混合物。经过滤收集黄色沉淀，用冷水-乙醇洗涤，在五氧化磷上减压干燥得到黄色粉末(6.1g,93％)。mp 184-187℃.¹H-NMR(200MHz,DMSO-d₆)δ:1.24(3H,t,J=7.1Hz),1.28(3H,t,J=7.2Hz),2.30(3H,s),3.80(3H,s),4.15(2H,q,J=7.1Hz),4.24(2H,q,J=7.2Hz),7.03(2H,d,J=8.7Hz),7.37(2H,d,J=8.7Hz),8.08(1H,d,J=13.6Hz),12.41(1H,d,J=13.6Hz).IR(KBr):3422,2980,1719,1653,1607,1551,1512cm^-1参考实施例7

用参考实施例5得到的化合物作为起始物料，以与参考实施例6的相同方法得到如下化合物。

收率：98％mp 187-190℃。参考实施例8

4-羟基-2-(4-甲氧基苯基)-3-甲基噻吩并[2,3-b]吡啶-5-羧酸乙酯的制备

在120℃搅拌下，将参考实施例6得到的化合物(6.0g,13.8mmol)分成小份加入多磷酸酯(PPE)(90ml)中。在相同的温度下搅拌30分钟后，将反应混合物倾入冰水中，用乙酸乙酯提取。合并的提取液用盐水洗涤并干燥(硫酸镁)，减压蒸馏出溶剂。得到的残余物在硅胶上色谱纯化得到黄色粉末(3.65g,77％)。对于用于元素分析的样品，将得到的粉末由乙醇中重结晶得到黄色结晶。mp 162-163℃元素分析(C₁₈H₁₇NO₄S)

C(％) H(％) N(％) S(％)计算值：62.96；4.99；4.08；9.34实验值：62.89；5.04；4.01；9.34¹H-NMR(200MHz,CDCl₃)δ:1.47(3H,t,J=7.1Hz),2.63(3H,s),4.87(3H,s),4.49(2H,q,J=7.1Hz),6.99(2H,d,J=8.8Hz),7.44(2H,d,J=8.8Hz),8.84(1H,s),12.11(1H,s).IR(KBr):3434,2992,1692,1601,1582,1535,1504cm^-1.FAB-MS m/z:344(MH⁺).参考实施例9

使用参考实施例7得到的化合物作为起始物料，用与参考实施例8的相同方法得到如下化合物。

与收率：60％mp 155-157℃参考实施例10

4-羟基-2-(4-硝基苯基)-3-甲基噻吩并[2,3-b]吡啶-5-羧酸乙酯的制备

在冰冷却下向参考实施例9得到的化合物(3.76g,12.0mmol)在浓硫酸(10ml)中的溶液滴加硝酸钠(1.27g,15.0mmol)在浓硫酸(5ml)中的溶液。在该温度下搅拌30分钟后，将反应混合物倾入冰水，用氯仿提取。合并的提取液用盐水洗涤，并干燥(硫酸镁)，减压蒸馏出溶剂。得到的残余物在硅胶上色谱纯化得到黄色粉末，它由乙醇中重结晶得到黄色结晶(1.75g,41％)。mp 260-261℃元素分析(C₁₇H₁₄N₂O₅S)

C(％) H(％) N(％)计算值：56.98；3.94；7.82实验值：56.66；3.91；7.86¹H-NMR(200MHz,CDCl₃)δ:1.49(3H,t,J=7.1Hz),2.70(3H,s),4.51(2H,q,J=7.1Hz),7.70(2H,d,J=8.8Hz),8.34(2H,d,J=8.8Hz),8.89(1H,s),12.27(1H,s).IR(KBr):3002,1692,1605,1514,1350,1290cm^-1.FAB-MS m/z:358(MH⁺).参考实施例11

4,7-二氢-7-(2-甲氧基苄基)-2-(4-甲氧基苯基)-3-甲基-4-氧代噻吩并[2,3-b]吡啶-5-羧酸乙酯的制备

在氮气气流和冰冷却下向氢化钠(60％油分散液；123mg,3.08mmol)在二甲基甲酰胺(3ml)中的悬浮液中加入参考实施例8得到的化合物(1.0g,2.91mmol)在二甲基甲酰胺(20ml)中的溶液。在该温度下搅拌30分钟后，向混合物中滴加2-甲氧基苄基氯(0.92g,5.87mmol)在二甲基甲酰胺(3ml)中的溶液。在室温下搅拌23小时和在70℃搅拌2小时后，浓缩反应混合物，得到的残余物在乙酸乙酯和氯化铵水溶液间分配。水层用乙酸乙酯提取，合并的提取液用盐水洗涤并干燥(硫酸镁)，减压蒸馏出溶剂。得到的残余物在硅胶上色谱纯化得到浅黄色无定形粉末(0.95g,70％)。对于用于元素分析的样品，将得到的粉末由二氯甲烷-乙醚中重结晶，得到黄色棱形结晶。mp 165-167℃元素分析(C₂₆H₂₅NO₅S0.5H₂O)

C(％) H(％) N(％)计算值：66.08；5.55；2.96实验值：66.33；5.44；2.74¹H-NMR(200MHz,CDCl₃)δ:1.41(3H,t,J=7.1Hz),2.65(3H,s),3.85(3H,s),3.86(3H,s),4.39(2H,q,J=7.1Hz),5.16(2H,s),6.92-7.00(4H,m),7.21-7.41(4H,m),8.41(1H,s).IR(KBr):2980,1727,1684,1609,1590,1497,1464cm^-1.参考实施例12

用2,6-二氟苄基氯代替2-甲氧基苄基氯，用参考实施例10得到的化合物作为起始物料，用与参考实施例11中描述的相同方法制备如下化合物。

收率：81％mp 215-217℃。参考实施例13

3-溴甲基-4,7-二氢-7-(2-甲氧基苄基)-2-(4-甲氧基苯基)-4-氧代噻吩并[2,3-b]吡啶-5-羧酸乙酯的制备

将参考实施例11得到的化合物(0.35g,0.755mmol)、N-溴琥珀酰亚胺(0.135g,0.758mmol)、α,α’-偶氮二异丁基腈(13mg,0.079mmol)和四氯化碳(5ml)的混合物加热并回流2小时。在冷却后，过滤出不溶解的物质，随后滤液用氯仿稀释。在有机层用盐水洗涤和干燥(硫酸镁)后，减压蒸馏出溶剂。得到的残余物由乙酸乙酯中重结晶得到无色针状物(0.272g,66％)。mp 200-201℃元素分析(C₂₆H₂₄NO₅SBr)

C(％) H(％) N(％)计算值：57.57；4.46；2.58实验值：57.75；4.31；2.31¹H-NMR(200MHz,CDCl₃)δ:1.40(3H,t,J=7.1Hz),3.86(6H,s),4.40(2H,q,J=7.1Hz),5.05(2H,s),5.16(2H,s),6.92-7.04(4H,m),7.23-7.28(1H,m),7.34-7.43(1H,m),7.57(2H,d,J=8.9Hz),8.46(1H,s).IR(KBr):2980,1725,1607,1588,1497cm^-1.参考实施例14

分别用参考实施例12、22和27中得到的化合物作为起始物料，用与参考实施例13中的相同方法得到如下化合物(参考实施例14-1至14-3)。参考实施例14-1：收率：81％mp 200-202℃。参考实施例14-2：

收率：80％无定形。参考实施例14-3：收率：79％mp 189-192℃。参考实施例15

3-苄基氨基甲基-4,7-二氢-7-(2-甲氧基苄基)-2-(4-甲氧基苯基)-4-氧代噻吩并[2,3-b]吡啶-5-羧酸乙酯盐酸盐的制备

在冰冷却下向参考实施例13中得到的化合物(0.245g,0.452mmol)在二甲基甲酰胺(5ml)中的溶液中加入三乙胺(0.10ml,0.717mmol)和苄胺(80μl,0.732mmol)。在室温下搅拌1.5小时后，浓缩反应混合物，随后得到的残余物在乙酸乙酯和饱和碳酸氢钠水溶液间分配。水层用乙酸乙酯提取，干燥(硫酸镁)合并的提取液，减压蒸馏出溶剂。得到的残余物在硅胶上色谱纯化得到无色油状物(0.135g,53％)。在冰冷却下向该油状物在乙醇(4ml)中的溶液中加入10N乙醇盐酸(0.2ml)，随后在该温度下搅拌10分钟。浓缩反应混合物，随后得到的残余物由乙酸乙酯-乙醚中重结晶得到盐酸盐(0.113g)白色结晶。mp[盐酸盐]118-119℃。元素分析(C₃₃H₃₂N₂O₅SHCl0.9H₂O)

C(％) H(％) N(％)计量值：63.79；5.64；4.51实验值：64.03；5.44；4.51¹H-NMR(300MHz,CDCl₃)[游离胺]δ:1.40(3H,t,J=7.1Hz),2.05(1H,br),3.81(3H,s),3.86(3H,s),3.87(2H,s),3.94(2H,s),4.40(2H,q,J=7.1Hz),5.18(2H,s),6.80(2H,d,J=8.8Hz),6.91-6.99(2H,m),7.20-7.42(9H,m),8.45(1H,s).IR(KBr)[盐酸盐]:3422,2938,1719,1605,1560,1545,1502,1460cm^-1.参考实施例16

4-甲基-2-[(4-甲基-3-氧代-1-戊烯-1-基)氨基]-5-苯基噻吩-3-羧酸乙酯的制备

将参考实施例3得到的化合物(10g)、含量85％的1-甲氧基-4-甲基-1-戊烯-3-酮(6.9g)、对甲苯磺酸单水合物(0.219g)和甲苯(100ml)混合，在室温下搅拌2.5小时。在反应混合物用乙酸乙酯稀释和用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤后，水层用乙酸乙酯提取。合并的提取液用饱和盐水洗涤，有机层在无水硫酸镁上干燥。残余物经加入晶种后结晶，在用己烷研制后，通过过滤收集并洗涤，得到标题化合物(12.64g,92％)。mp 104-108℃。参考实施例17

4,7-二氢-7-(2-甲氧基苄基)-2-(4-甲氧基苯基)-3-甲基-4-氧代噻吩并[2,3-b]吡啶-N-苄基哌嗪-5-羧酰胺的制备

在冰冷却下向1-苄基哌嗪(0.77g,4.37mmol)中滴加二异丁基氢化铝(DIBAL)在甲苯中的溶液(1.5N,2.9ml,4.37mmol)。在加完后，使溶液加热到室温，再搅拌0.5小时。在室温下向该溶液中加入参考实施例11中得到的化合物(0.50g,1.08mmol)在甲苯(5ml)中的溶液，在混合物在室温下再搅拌15小时后，加入二氯甲烷(30ml)。在水洗后，在硫酸钠上干燥溶液，随后减压蒸馏出溶剂得到固体(1.03g)，它由二氯甲烷-正己烷中重结晶得到标题化合物(0.48g,78％)。mp 233-235℃。元素分析(C₃₅H₃₅N₃O₄S 1/2H₂O)

C(％) H(％) N(％) S(％)计量值：69.75；6.02；6.97；5.32。实验值：69.88；6.06；6.98；5.39。¹H-NMR(300MHz,CDCl₃)δ:2.45-2.55(4H,m),2.63(3H,s),3.43-3.49(2H,m),3.55(2H,s),3.73-3.82(2H,m),3.84(6H,s),5.11(2H,s),6.89-6.98(4H,m),7.21-7.40(9H,m),7.79(1H,s).参考实施例18

用参考实施例12得到的化合物作为起始物料，和用N,O-二甲基羟基化合物代替1-苄基哌嗪，用与参考实施例17中的相同方法得到如下化合物。收率：80％mp 223-224℃。参考实施例19

4-羟基-5-异丁酰基-3-甲基-2-苯基噻吩并[2,3-b]吡啶的制备

混合参考实施例16中得到的化合物(50g)和二苯醚(500ml)，随后将该混合物加热并回流4小时，同时蒸馏出在反应过程中产生的乙醇。在冷却后，减压蒸馏出二苯醚，沉淀的粗结晶用正己烷洗涤得到标题化合物(35.1g,81％)。mp 114-117℃。参考实施例20

用参考实施例14-1中得到的化合物作为起始物料，和用N-甲基苄胺代替苄胺，用与参考实施例15中的相同方法得到如下化合物(参考实施例20-1至20-3)。参考实施例20-1：收率：83％mp 140-144℃。参考实施例20-2：收率：91％mp 145-147℃。参考实施例20-3：收率：78％mp 175-177℃。参考实施例21

用参考实施例20中得到的化合物作为起始物料，用与参考实施例28中的相同方法得到如下化合物(参考实施例21-1至21-3)。参考实施例21-1：

收率：79％mp 158-160℃。参考实施例21-2：收率：96％mp 195-196℃。参考实施例21-3：

收率：71％mp 144-146℃。参考实施例22

7-(2,6-二氟苄基)-4,7-二氢-5-异丁酰基-3-甲基-4-氧代-2-苯基噻吩并[2,3-b]吡啶的制备

将参考实施例19中得到的化合物(35g)、碳酸钾(18.6g)和N,N-二甲基甲酰胺(280ml)混合，随后加入2,6-二氟苄基溴(27.9g)，然后在室温下搅拌4小时。向反应混合物中滴加水(560ml)，随后搅拌30分钟，随后在冰冷却下搅拌混合物1小时。用过滤收集粗结晶，用水洗涤，干燥，悬浮在乙酸乙酯和二异丙基醚的1∶1混合溶剂(250ml)中，在25-40℃下搅拌1小时，随后在冰冷却下搅拌1小时，残余结晶经过滤收集，用上述混合溶剂(125ml)洗涤得到标题化合物(44.6g,92％)。mp 205-207℃。参考实施例23

使用参考实施例14-2和参考实施例24中得到的化合物作为起始物料和用N-甲基苄胺代替苄胺，用与参考实施例15中的相同方法得到如下化合物(参考实施例23-1至23-2)。参考实施例23-1：

收率：83％mp 197-199℃。参考实施例23-2：收率：66％mp 151-152℃。参考实施例24

3-溴甲基-7-(2,6-二氟苄基)-4,7-二氢-5-异丁酰基-2-(4-硝基苯基)-4-氧代噻吩并[2,3-b]吡啶的制备

在10-12℃冷却下将参考实施例14-3中得到的化合物(1g)溶解在甲磺酸(5ml)中后，向该混合物中加入硝酸钠(0.165g)在甲磺酸(2.5ml)中的溶液。在搅拌2小时后，混合物倾入冷水中，通过过滤收集沉淀的结晶，用水和二异丙醚洗涤，干燥得到粗产物(1.04g)，随后将其用乙酸乙酯(15ml)研制，用冰冷却，过滤和用冷乙酸乙酯洗涤得到标题化合物(0.647g,59.5％)。mp 202-204℃(由甲醇中重结晶)。参考实施例25

4,7-二氢-7-(2,6-二氟苄基)-2-(4-硝基苯基)-3-(N-苄基-N-甲基氨基甲基)-4-氧代噻吩并[2,3-b]吡啶-5-(N-异丙基)羧酰胺的制备

在0℃向异丙基胺(0.296g,5mmol)在无水二氯甲烷(5ml)中的溶液中滴加三甲基铝在己烷中的溶液(15％,2.41ml,5.0mmol)。在加完后，使溶液加热到室温，再搅拌1小时，在冰冷却下在30分钟内向该溶液中加入参考实施例20-2得到的化合物(0.12g,0.25mmol)在无水二氯甲烷(3ml)中的溶液。在混合物在室温下再搅拌1小时后，加入氯仿(50ml)，随后用水洗涤。合并的有机层用硫酸钠干燥，减压蒸馏出溶剂得到固体，它由氯仿-乙酸乙酯-乙醚中重结晶得到无色结晶(0.096g,70％)。mp 200-202℃。¹H-NMR(500MHz,CDCl₃)[游离胺]δ:1.30(6H,d,J=6.7Hz),2.15(3H,s),3.66(2H,s),4.18(2H,s),4.18-4.31(1H,m),5.32(2H,s),7.00(2H,t,J=7.26Hz),7.13-7.25(5H,m),7.42(1H,t,J=7.3Hz),8.02(2H,d,J=8.9Hz),8.26(2H,d,J=8.9Hz),8.73(1H,s),10.02(1H,d,J=9.1Hz).IR(KBr):2974,1661,1597,1547,1497,1346,1212,1035cm^-1FAB-Mass m/z 617(MH)⁺参考实施例26

使用参考实施例20-2中得到的化合物作为起始物料和N,O-二甲基羟基胺，用与参考实施例25中的相同方法得到如下化合物。收率：96％mp 100-102℃。参考实施例27

4,7-二氢-7-(2,6-二氟苄基)-2-(4-硝基苯基)-5-苯甲酰基-3-甲基-4-氧代噻吩并[2,3-b]吡啶的制备

在稍微加热的条件下将参考实施例18中得到的化合物(3.93g,7.87mmol)溶解在无水四氢呋喃(THF)(300ml)中，当该溶液保持在0℃时，在10分钟内向混合物中滴加苯基溴化镁在THF中的溶液(1M,15.7ml,15.7mmol)。在加完后，将溶液再搅拌1小时，反应混合物在乙酸乙酯(300ml)和水(50ml)间分配，水层再次用乙酸乙酯提取。合并的有机层用硫酸镁干燥，减压蒸馏出溶剂得到残余物，它在硅胶上色谱纯化得到黄色结晶(3.00g,74％)，它随后由乙酸乙酯-己烷中重结晶得到黄色结晶。mp 114-116℃元素分析(C₂₈H₁₈N₂O₄SF₂0.7H₂O)

C(％) H(％) N(％)计算值：63.56；3.70；5.29实验值：63.83；3.95；5.08¹H-NMR(500MHz,CDCl₃)δ:2.68(3H,s),5.30(2H,s),7.02(2H,t,J=8.1Hz),7.43(3H,t,J=7.2Hz),7.52-7.63(3H,m),7.86(2H,d,J=7.5Hz),7.99(1H,s),8.30(2H,d,J=8.7Hz).IR(KBr):3422,3068,1665,1615,1491,1473,1346,853cm^-1.FAB-Mass m/z 517(MH)⁺参考实施例28

3-(N-苄基-N-甲基氨基甲基)-4,7-二氢-7-(2,6-二氟苄基)-2-(4-氨基苯基)-5-苯甲酰基-4-氧代噻吩并[2,3-b]吡啶的制备

向参考实施例23-1中得到的化合物(0.30g,0.47mmol)在乙醇(6ml)中的混合物中加入水(2ml)，随后加入1滴浓盐酸以得到均匀溶液。向该溶液中仔细加入铁粉(0.105g,2.0mmol)和浓盐酸(0.39ml,4.7mmol)。在加完后，混合物在室温下搅拌5小时，通过塞力特硅藻土过滤。加入少量氨水，随后减压浓缩反应滤液，得到的残余物倾入冰水中，用碳酸氢钠中和，用乙酸乙酯提取。在合并的有机层用盐水洗涤和干燥(硫酸镁)后，减压蒸馏出溶剂。得到的残余物在硅胶上色谱纯化，由异丙基醚中重结晶得到黄色针状物(0.24g,84％)。mp 126-128℃。元素分析(C₃₆H₂₉N₃O₂SF₂₁/2H₂O)

C(％) H(％) N(％)计算值：68.93；5.04；6.70实验值：68.71；5.18；6.62¹H-NMR(300MHz,CDCl₃)δ:2.13(3H,s),3.65(2H,s),3.87(2H,br s),4.14(2H,s),5.28(2H,s),6.74(2H,d,J=8.7Hz),7.00(2H,t,J=7.8Hz),7.16-7.24(5H,m),7.36-7.46(3H,m),7.53(1H,t,J=7.2Hz),7.62(2H,d,J=8.4Hz),7.89(2H,d,J=7.2Hz),7.94(1H,s).IR(KBr):3358,1607,1495,1473,1035cm^-1.FAB-Mass m/z 606(MH)⁺参考实施例29

2-(4-氨基苯基)-7-(2,6-二氟苄基)-4,7-二氢-5-异丁酰基-3-(N-苄基-N-甲基氨基甲基)-4-氧代噻吩并[2,3-b]吡啶的制备

在冰冷却下向在参考实施例23-2得到的化合物(0.25g,0.415mmol)在甲醇(5ml)中的溶液中一点一点地加铁粉(0.093g,1.66mmol)和滴加浓盐酸(0.8ml),在加完后，混合物在室温下搅拌1小时，，通过塞力特硅藻土过滤。加入少量饱和碳酸氢钠水溶液(10ml)，随后用二氯甲烷(30ml×3)提取。合并的提取液用盐水洗涤，干燥(硫酸镁)，减压蒸馏出溶剂，得到的残余物在硅胶上色谱纯化得到浅黄色无定形粉末(0.203g,86％)。¹H-NMR(300MHz,CDCl₃)δ:1.18(6H,d),2.11(3H,s),3.65(2H,s),3.85(2H,brs),4.17(2H,s),4.18(1H,m),5.25(2H,s),6.73(2H,d),6.95(2H,t),7.10-7.26(5H,m),7.42(1H,m),7.58(2H,d),8.27(1H,s).参考实施例30

5-苯甲酰基-7-(2,6-二氟苄基)-4,7-二氢-3-(N-苄基-N-甲基氨基甲基)-2-(4-丙酰基氨基苯基)-4-氧代噻吩并[2,3-b]吡啶的制备

将参考实施例28中得到的化合物(0.14g,0.23mmol)溶解在无水二氯甲烷(2ml)中，随后在冰冷却(0℃)下向混合物中加入无水二氯甲烷(0.038ml)。在溶液搅拌一会儿后，向混合物加入丙酰氯(0.021ml,0.243mmol)，在加完后，溶液在冰冷却(0℃)下再搅拌40分钟。反应混合物在二氯甲烷(25ml)和非常薄的水(10ml)间分配。水层再次用二氯甲烷(25ml)提取，合并的有机层用盐水洗涤，干燥(硫酸镁)，减压蒸馏出溶剂。得到的固体由乙酸乙酯-异丙基醚重结晶得到黄色针状物(0.10g,65％)。mp 226-228℃。元素分析(C₃₉H₃₃N₃O₃SF₂0.7H₂O)

C(％) H(％) N(％)计算值：69.46；5.14；6.23实验值：69.60；5.18；6.04

将如此得到的化合物溶解在乙酸乙酯中，随后稍稍过量地加入盐酸(HCl)在乙醚中的饱和溶液，随后由异丙基醚中重结晶沉淀的结晶得到浅黄色针状物(0.095g,61％)。mp 218-220℃元素分析(C₃₉H₃₃N₃O₃SF₂HCl3.5H₂O)

C(％) H(％) N(％)计算值：61.53；5.43；5.52元素值：61.83；5.33；5.30¹H-NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ:1.11(3H,t,J=7.2Hz),1.93(3H,s),2.35(2H,q,J=7.5Hz),3.44(2H,s),4.00(2H,s),5.62(2H,s),7.11-7.25(6H,m),7.43-7.72(10H,m),7.79(2H,d,J=7.5Hz),8.40(1H,s),10.03(1H,s).IR(KBr):3422,3068,1603,1502,1473,1035 cm^-1.FAB-Mass m/z 662(MH)⁺参考实施例31

采用参考实施例30中描述的相同方法，使用各种酰氯、异氰酸酯，和氯碳酸酯代替丙酰氯，还使用在实施例16中所示的胺和羰基二咪唑，用参考实施例28和29中得到的化合物作为起始物料制备如下化合物(参考实施例31-1至31-10)。以相同的方法也可制备如下化合物(参考实施例31-11至31-16)。参考实施例31-1-1：收率：68％mp 238-240℃。参考实施例31-1-2：mp 238-240℃。参考实施例31-2-1：

收率：64％mp 201-204℃。参考实施例31-2-2：

mp 207-214℃。参考实施例31-3-1：收率：55％mp 207-210℃。参考实施例31-3-2：

mp 222-226℃。参考实施例31-4：

收率：49％mp 185-187℃。参考实施例31-5：收率：79％mp 216-218℃。参考实施例31-6：

收率：73％mp 180-183℃。参考实施例31-7：

收率：65％mp 245-247℃。参考实施例31-8：收率：65％参考实施例31-9：收率：70％mp 232-234℃。参考实施例31-10：收率：73％mp 192-197℃。参考实施例31-11：

参考实施例31-12：参考实施例31-13：

参考实施例31-14：

参考实施例31-1 5：参考实施例31-16：

参考实施例32

3-(N-苄基-N-甲基氨基甲基)-4,7-二氢-7-(2,6-二氟苄基)-2-(4-硝基苯基)-5-苯甲酰基-4-氧代噻吩并[2,3-b]吡啶的制备

在加热的条件下将参考实施例26中得到的化合物(1.91g,3.09mmol)溶解在无水四氢呋喃(THF)(30ml)中，在冰冷却(0℃)下在10分钟内向混合物中滴加苯基溴化镁在THF中的溶液(1M,6.18ml,6.2mmol)。在冰冷却条件下搅拌1小时后，反应混合物在乙酸乙酯(100ml)和含水盐酸(0.5N,100ml)间分配，有机层再次用饱和盐水洗涤。在有机层用硫酸镁干燥后，减压蒸馏出溶剂，得到的残余物在硅胶上色谱纯化得到黄色结晶(1.00g,51％)，它随后由异丙基醚中重结晶得到黄色针状物。mp 197-199℃。元素分析(C₃₆H₂₇N₃O₄SF₂0.7H₂O)

C(％) H(％) N(％)计算值：66.70；4.42；6.48实验值：66.59；4.48；6.42¹H-NMR(300MHz,CDCl₃)δ:2.17(3H,s),3.61(2H,s),4.16(2H,s),5.30(2H,s),7.03(2H,t,J=8.1Hz),7.19-7.25(5H,m),7.40-7.47(3H,m),7.56(1H,t,J=7.5Hz),7.88(2H,d,J=6.9Hz),7.96(1H,s),8.10(2H,d,J=8.7Hz),8.28(2H,d,J=8.7Hz).IR(KBr):3430,1663,1611,1518,1473,1348,853cm^-1.FAB-Mass m/z 636(MH)⁺参考实施例33

3-(N-苄基-N-甲基氨基甲基)-4,7-二氢-7-(2,6-二氟苄基)-2-(4-异丁酰基氨基苯基)-5-(2-溴异丁酰基)-4-氧代噻吩并[2,3-b]吡啶的制备

将在参考实施例31-10中得到的化合物(0.48g,0.75mmol)溶解在二氯甲烷(15ml)中，在室温和1分钟内向该溶液中滴加47％氢溴酸(0.35ml,3.0mmol)，随后再搅拌10分钟。向该反应混合物中滴加溴(39μl,0.75mmol)，随后在室温下搅拌24小时。反应混合物在二氯甲烷(30ml)和碳酸氢钠水溶液(饱和，60ml)间分配，有机层再次用饱和盐水(100ml)洗涤。在有机层干燥(硫酸镁)后，减压蒸馏出溶剂得到棕色无定形结晶(0.53g)。参考实施例34

3-(N-苄基-N-甲基氨基甲基)-4,7-二氢-7-(2,6-二氟苄基)-2-(4-异丁酰基氨基苯基)-5-甲基丙烯酰基4-氧代噻吩并[2,3-b]吡啶的制备

将在参考实施例33中得到的化合物(0.52g,0.72mmol)溶解在二甲基甲酰胺(DMF)(30ml)中，随后在室温下向该溶液中加入乙酸钾(2.0g,20mmol)，随后在100℃下搅拌20小时。反应混合物在乙酸乙酯(30ml)和水(30ml)间分配，随后水层再次用乙酸乙酯(10ml)洗涤，合并的有机层用饱和盐水(30ml)洗涤。在有机层干燥(硫酸镁)后，减压蒸馏出溶剂得到棕色油状物(0.56g)。

实施例1

实施例1-1：

3-(N-苄基-N-甲基氨基甲基)-4,7-二氢-5-异丁酰基-7-(2,6-二氟苄基)-2-(4-环丙烷羰基氨基苯基)-4-氧代噻吩并[2,3-b]吡啶的制备

向在参考实施例29中得到的化合物(2.57g,4.5mmol)在二氯甲烷(50ml)中的溶液中加入环丙烷羧酸(861mg,10mmol)和二并丙基乙胺(2.59g,20mmol)，随后在冰冷却下小批量地加入苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷磷翁六氟磷酸(PyBop)(5.40g,10mmol)。在室温下搅拌1天后，将反应混合物倾入0.1N氢氧化钾水溶液中，用氯仿提取。合并的提取液用盐水洗涤，干燥(硫酸钠)并减压蒸馏出溶剂。得到的残余物在硅胶上色谱纯化，由乙酸乙酯中重结晶得到白色粉末结晶(2.15g,79％)。¹H-NMR(300MHz,CDCl₃)δ:0.85-0.90(2H,m),1.10-1.15(2H,m),1.18(6H,d),1.53-1.59(1H,m),2.09(3H,s),4.12-4.20(1H,m),4.16(2H,s),5.25(2H,s),6.99(2H,t),7.10-7.25(6H,m),7.35-7.45(1H,m),7.61(2H,d),7.67(1H,brs),7.76(2H,d),8.27(1H,s).FAB-Mass m/z 608(MH)⁺

实施例1-2：

3-(N-苄基-N-甲基氨基甲基)-4,7-二氢-5-异丁酰基-7-(2,6-二氟苄基)-2-(4-环丙烷羰基氨基苯基)-4-氧代噻吩并[2,3-b]吡啶盐酸盐的制备

将实施例1-1中得到的白色粉末结晶溶解在乙醇中，随后加入少量过量盐酸在乙醚中的溶液，随后由乙醇-乙醚中重结晶得到白色粉末结晶(2.20g,72％)。mp 254-256℃。元素分析(C₃₇H₃₅N₃O₃SF₂HCl)

C(％) H(％) N(％)计算值：65.72；5.37；6.21实验值：65.61；5.38；6.25IR(KBr):2950,1673,1595,1502,1473,1408,1313,1183cm^-1.

实施例2

4,7-二氢-2-[4-(3-乙酰氧基-2-甲基丙酰氨基)苯基]-7-(2,6-二氟苄基)-3-(N-苄基-N-甲基氨基甲基)-5-异丁酰基-4-氧代噻吩并[2,3-b]吡啶的制备

在冰冷却下于1分钟内向在参考实施例29中得到的化合物(1.14g,2.0mmol)在二氯甲烷(30ml)中的溶液中滴加三乙胺(500mg,3mmol)和3-乙酰氧基异丁酰氯(0.5g,3mmol)，随后在室温下再搅拌1小时。反应混合物在碳酸氢钠饱和水溶液(30ml)和二氯甲烷(30ml)间分配，随后水层再次用二氯甲烷(10ml)提取。合并的提取液用盐水洗涤，并干燥(硫酸镁)，减压蒸馏出溶剂。得到的残余物在硅胶上色谱纯化得到棕色结晶(1.4g)。¹H-NMR(300MHz,CDCl₃)δ:1.18(6H,d),1.30(3H,d),2.08(3H,s),2.12(3H,s),2.73-2.84(1H,m),3.65(2H,s),4.11-4.36(3H,m),4.17(2H,s),5.27(2H,s),7.00(2H,t),7.13-7.22(5H,m),7.36-7.46(1H,m),7.52(1H,brs),7.62-7.82(4H,q),8.29(1H,s).

实施例3

3-(N-苄基-N-甲基氨基甲基)-4,7-二氢-5-异丁酰基-7-(2,6-二氟苄基)-2-[4-(3-羟基-2-甲基丙酰氨基)苯基]-4-氧代噻吩并[2,3-b]吡啶的制备

将实施例2得到的化合物(1.40g)溶解在甲醇(100ml)中，随后向溶液中加入碳酸钾(2.0g,15mmol)，在室温下搅拌15分钟。反应混合物在乙酸乙酯(200ml)和蒸馏水(300ml)之间分配，水层用乙酸乙酯(100ml)提取。合并的提取液用盐水洗涤，干燥(硫酸镁)，减压蒸馏出溶剂。得到的残余物在硅胶上色谱纯化，并由乙醚中重结晶得到白色结晶(0.95g,72％)。mp 161-162℃。元素分析(C₃₇H₃₇N₃O₄SF₂0.5H₂O)

C(％) H(％) N(％)计算值：66.65；5.74；6.30实验值：66.70；5.52；6.40¹H-NMR(300MHz,CDCl₃)δ:1.17(6H,d),1.18(3H,d),2.06(3H,s),2.67-2.78(1H,m),3.61(2H,s),3.57-3.84(2H,m),3.99-4.08(1H,m),4.15(2H,s),5.52(2H,s),7.08(2H,t),7.15(5H,s),7.44-7.54(1H,m),7.58(2H,d),7.69(2H,d),8.46(1H,s).FAB-Mass m/z 658(MH)⁺

实施例4

用参考实施例29中得到的化合物，以与实施例1中的相同方法得到如下化合物(实施例4-1至4-3)。

实施例4-1：

收率：67％mp 201-203℃。

实施例4-2：

收率：58％mp 135-137℃。

实施例4-3：

收率：75％mp 205-207℃。

实施例5

实施例5-1：

3-(N-苄基-N-甲基氨基甲基)-4,7-二氢-7-(2,6-二氟苄基)-2-[4-(2-羟基乙酰氨基)苯基]-5-异丁酰基-4-氧代噻吩并[2,3-b]吡啶的制备

将实施例4-1得到的化合物(0.37g)溶解在二氯甲烷(1.0ml)中，在冰冷却下向该溶液中滴加三氟乙酸(1.0ml)。在冰冷却条件下搅拌1小时后，减压浓缩反应混合物至干，随后得到的残余物在氯仿(50ml)和碳酸氢钠饱和水溶液(50ml)之间分配，水层再次用氯仿(10ml)提取。合并的有机层用饱和盐水(30ml)洗涤。在有机层干燥(硫酸镁)后，减压蒸馏出溶剂，随后得到的残余物在硅胶上色谱纯化，由乙醇-乙酸乙酯-乙醚中重结晶得到白色结晶粉末(0.12g,95％)。实施例5-2：

3-(N-苄基-N-甲基氨基甲基)-4,7-二氢-7-(2,6-二氟苄基)-2-[4-(2-羟基乙酰氨基)苯基]-5-异丁酰基-4-氧代噻吩并[2,3-b]吡啶盐酸盐的制备

将实施例5-1得到的白色结晶粉末溶解在二氯甲烷(1.0ml)中，随后在冰冷却下向该溶液中加入含有10N盐酸的乙醇溶液(1.0ml)。减压蒸馏出溶剂，随后残余物由乙醇-乙酸乙酯中重结晶得到白色结晶粉末(0.12g,84％)。mp 197-199℃。元素分析C₃₅H₃₃N₃O₄SF₂HCl2.5H₂O

C(％) H(％) N(％)计算值：59.11；5.53；5.91实验值：59.06；5.25；5.93¹H-NMR(300MHz,CDCl₃)δ:1.18(6H,d),2.10(3H,s),3.63(2H,s),3.72(1H,br),4.09-4.17(1H,m),4.16(2H,s),4.24(2H,s),5.24(2H,s),6.99(2H,t),7.18-7.23(5H,m),7.35-7.45(1H,m),7.63(2H,d),7.73(2H,d),8.25(1H,s),8.59(1H,s).

实施例6

使用实施例4-2和实施例4-3中得到的化合物，以与实施例5中的相同方法得到如下化合物(实施例6-1和6-2)。

实施例6-1：

收率：76％mp 192-194℃。

实施例6-2：

收率：81％mp 193-195℃。

实施例7

3-(N-苄基-N-甲基氨基甲基)-4,7-二氢-7-(2,6-二氟苄基)-2-(4-异丁酰基氨基苯基)-5-(2-羟基-2-甲基丙酰基)-4-氧代噻吩并[2,3-b]吡啶的制备

用与参考实施例34中所述的相同方法用乙酸钾水解使用参考实施例31-10中得到的化合物重复参考实施例33中所述方法得到的棕色无定形结晶(0.13g)。得到的固体在硅胶上色谱纯化以除去在参考实施例34中得到的化合物，随后副产物由甲醇中重结晶得到无色结晶粉末(0.03g)。mp 170-172℃。元素分析(C₃₇H₃₇N₃O₄SF₂1/6H₂O)

C(％) H(％) N(％)计算值：67.27；5.69；6.36实验值：67.18；5.74；6.46¹H-NMR(300MHz,CDCl₃)δ:1.28(6H,d),1.49(6H,s),2.06(3H,s),2.51-2.60(1H,m),3.61(2H,s),4.13(2H,s),5.31(2H,s),7.01(2H,t),7.12-7.21(5H,m),7.37-7.47(2H,m),7.64(2H,d),7.74(2H,d),8.04(1H,s),8.35(1H,s).IR(KBr):3466,1669,1499,1313,1075cm^-1.

实施例8

3-(N-苄基-N-甲基氨基甲基)-4,7-二氢-7-(2,6-二氟苄基)-2-(4-异丁酰基氨基苯基)-5-(3-羟基-2-甲基丙酰基)-4-氧代噻吩并[2,3-b]吡啶的制备

将参考实施例34中得到的化合物(0.56g)溶解在三氟乙酸(10ml)中，在室温下搅拌1小时。减压浓缩反应混合物至干，得到的残余物在二氯甲烷(30ml)和碳酸氢钠饱和水溶液(60ml)间分配，随后水层再次用二氯甲烷(10ml)提取。合并的有机层用饱和盐水(30ml)洗涤。在有机层干燥(硫酸镁)后，减压蒸馏出溶剂得到棕色无定形结晶(0.42g)，它在硅胶上色谱纯化得到黄色结晶(0.07g，由参考实施例31-10中得到的化合物计算的总收率为12％)。¹H-NMR(300MHz,CDCl₃)δ:1.15(3H,d),1.26(6H,d),2.07(3H,s),2.53-2.62(1H,m),3.58(2H,d),3.66(2H,d),3.82(1H,dd),3.93(1H,dd),4.03(1H,d),4.22(1H,d),4.27-4.37(1H,m),5.26(2H,s),6.99(2H,t),7.13-7.21(5H,m),7.36-7.46(1H,m),7.63(2H,d),7.67(2H,d),7.79(1H,s),8.30(1H,s).

实施例9

(R)-4,7-二氢-2-[4-(3-叔丁氧基-2-甲基丙酰氨基)苯基]-7-(2,6-二氟苄基)-3-(N-苄基-N-甲基氨基甲基)-5-异丁酰基-4-氧代噻吩并[2,3-b]吡啶的制备

向在参考实施例29中得到的化合物(1.14g,2.0mmol)在二氯甲烷(20ml)中的溶液中加入二异丙基乙胺(520mg,4mmol)和(2R)-3-叔丁氧基-2-甲基丙酸(0.43g,3mmol)，随后在冰冷却下搅拌。向该溶液中加入苯并三唑-1-基氧基三二甲基氨基磷翁六氟磷酸盐(BOP试剂)(1.33g,3mmol)，在冰冷却下搅拌1小时后，溶液再在室温下搅拌4小时。减压浓缩反应混合物至干，得到的残余物在水(50ml)和氯仿(50ml)间分配，水层再次用氯仿(10ml)提取。合并的提取液用盐水洗涤，干燥(硫酸镁)，减压蒸馏出溶剂。得到的残余物在硅胶上色谱纯化得到黄色粉末(1.11g,78％)。¹H-NMR(300MHz,CDCl₃)δ:1.18(6H,d),1.25(3H,d),1.30(9H,s),2.62(3H,s),2.63-2.71(1H,m),3.51(1H,t，类似),3.61(1H,dd),3.64(2H,s),4.18(2H,s),4.18(1H,quint)5.27(2H,s),7.00(2H,t),7.14-7.22(5H,m),7.36-7.46(1H,m),7.60(2H,d),7.76(2H,d),8.28(1H,s),9.00(1H,s).

实施例10

实施例10-1：

(R)-4,7-二氢-2-[4-(3-羟基-2-甲基丙酰氨基)苯基]-7-(2,6-二氟苄基)-3-(N-苄基-N-甲基氨基甲基)-5-异丁酰基-4-氧代噻吩并[2,3-b]吡啶的制备

将实施例9得到的化合物(1.11g)在冰冷却条件下溶解在三氟乙酸(5ml)中，搅拌1小时后，使溶液加热至室温，再搅拌12小时。反应混合物减压浓缩至干，残余物溶解在甲醇(20ml)中，再次用冰冷却，随后加入5N氢氧化钠溶液达到pH9.0。将反应混合物搅拌30分钟，再在室温下搅拌30分钟。将反应混合物在减压低温下浓缩至干，得到的残余物在硅胶上色谱纯化。得到的浅黄色无定形结晶(0.83g,82％)由乙醚中重结晶得到浅黄色粉末结晶(0.69g)。mp 161-162℃。元素分析(C₃₇H₃₇N₃O₄SF₂0.5H₂O)

C(％) H(％) N(％)计算值：66.65；5.74；6.30实验值：66.47；5.73；6.10¹H-NMR(300MHz,CDCl₃)δ:1.18(6H,d),1.28(3H,d),2.11(3H,s),2.71(1H,m),3.65(2H,s),3.83-3.85(2H,m),4.16(1H,quint),4.18(2H,s),5.27(2H,s),7.00(2H,t),7.14-7.23(5H,m),7.36-7.44(1H,m),7.64(2H,d),7.77(2H,d),8.09(1H,s),8.28(1H,s).FAB-Mass m/z 658(MH)⁺

实施例10-2：

(R)-4,7-二氢-2-[4-(3-羟基-2-甲基丙酰氨基)苯基]-7-(2,6-二氟苄基)-3-(N-苄基-N-甲基氨基甲基)-5-异丁酰基-4-氧代噻吩并[2,3-b]吡啶盐酸盐的制备

用与实施例1中的相同方法得到标题化合物。mp 214-216℃。

实施例11

实施例11-1：

4,7-二氢-2-[4-(2-羟基-2-甲基丙酰氨基)苯基]-7-(2,6-二氟苄基)-3-(N-苄基-N-甲基氨基甲基)-5-异丁酰基-4-氧代噻吩并[2,3-b]吡啶的制备

向在参考实施例29中得到的化合物(1.14g,2.0mmol)在二氯甲烷(30ml)中的溶液中加入二异丙基乙胺(1.04g,8mmol)和2-羟基并丁酸(0.416g,4mmol)，随后在冰冷却下搅拌。向该溶液中加入苯并三唑-1-基氧基三二甲基氨基磷翁六氟磷酸盐(BOP试剂)(1.76g,4mmol)，在冰冷却下搅拌1小时后，溶液再在室温下搅拌4天。减压浓缩反应混合物至干，得到的残余物在水(50ml)和氯仿(50ml)间分配，水层再次用氯仿(10ml)提取。合并的提取液用盐水洗涤，干燥(硫酸镁)，减压蒸馏出溶剂。得到的残余物在硅胶上色谱纯化，从乙醚中重结晶得到黄色粉末结晶(0.56g,43％)。mp 178-180℃。元素分析(C₃₇H₃₇N₃O₄SF₂0.5H₂O)

C(％) H(％) N(％)计算值：66.65；5.74；6.30实验值：66.54；5.49；6.36¹H-NMR(300MHz,CDCl₃)δ:1.18(6H,d),1.58(6H,s),2.10(3H,s),3.05(1H,brs),3.64(2H,s),4.16(2H,s),4.12-4.22(1H,m),5.23(2H,s),6.99(2H,t),7.05-7.25(5H,m),7.34-7.44(1H,m),7.64(2H,d),7.75(2H,d),8.25(1H,s),8.86(1H,s).

实施例11-2：

4,7-二氢-2-[4-(2-羟基-2-甲基丙酰氨基)苯基]-7-(2,6-二氟苄基)-3-(N-苄基-N-甲基氨基甲基)-5-异丁酰基-4-氧代噻吩并[2,3-b]吡啶盐酸盐的制备

用与实施例1中的相同方法得到标题化合物。mp 213-215℃。

实施例12实施例12-1：

3-(N-苄基-N-甲基氨基甲基)-4,7-二氢-5-异丁酰基-7-(2,6-二氟苄基)-2-[4-[(1-羟基环丙基)羰基氨基]苯基]-4-氧代噻吩并[2,3-b]吡啶的制备

向在参考实施例29中得到的化合物(0.57g,2.0mmol)在二氯甲烷(10ml)中的溶液中加入二异丙基乙胺(0.52g,4mmol)和2-羟基环丙烷羧酸(0.204g,2mmol)，随后在冰冷却下搅拌。向该溶液中加入苯并三唑-1-基氧基三二甲基氨基磷翁六氟磷酸盐(BOP试剂)(1.76g,4mmol)。在冰冷却下搅拌1小时后，溶液再在室温下搅拌4天。减压浓缩反应混合物至干，得到的残余物在水(50ml)和氯仿(50ml)间分配，水层再次用氯仿(10ml)提取。合并的提取液用盐水洗涤，干燥(硫酸镁)，减压蒸馏出溶剂。得到的残余物在硅胶上色谱纯化和从乙醚中重结晶得到黄色粉末结晶(0.27g,41％)。¹H-NMR(300MHz,CDCl₃)δ:1.16-1.20(2H,m),1.18(6H,d),1.48-1.51(2H,m),2.09(3H,s),3.64(2H,s),3.95(1H,brs),4.14(2H,s),4.12-4.19(1H,m),5.20(2H,s),6.99(2H,t),7.10-7.25(5H,m),7.34-7.46(1H,m),7.57(2H,d),7.70(2H,d),8.21(1H,s),8.82(1H,s).

实施例12-2：

3-(N-苄基-N-甲基氨基甲基)-4,7-二氢-5-异丁酰基-7-(2,6-二氟苄基)-2-[4-[(1-羟基环丙基)羰基氨基]苯基]-4-氧代噻吩并[2,3-b]吡啶盐酸盐的制备

用与实施例1中的相同方法得到标题化合物，白色粉末结晶(0.12g)，用于重结晶的溶剂：乙醇-乙醚。mp 220-222℃。元素分析(C₃₇H₃₅N₃O₄SF₂HCl0.5H₂O)

C(％) H(％) N(％)计算值：63.37；5.32；5.99实验值：63.35；5.24；5.82

实施例13

实施例13-1：

4,7-二氢-2-[4-(3-羟基-3-甲基丁酰氨基)苯基]-7-(2,6-二氟苄基)-3-(N-苄基-N-甲基氨基甲基)-5-异丁酰基-4-氧代噻吩并[2,3-b]吡啶的制备

向在参考实施例29中得到的化合物(1.14g,2.0mmol)在二氯甲烷(10ml)中的溶液中加入二异丙基乙胺(1.04g,8mmol)和3-羟基-3-甲基丁酸(0.47g,4mmol)，随后在冰冷却下搅拌。向该溶液中加入苯并三唑-1-基氧基三二甲基氨基磷翁六氟磷酸盐(BOP试剂)(1.76g,4mmol)。在冰冷却下搅拌1小时后，溶液再在室温下搅拌4天。减压浓缩反应混合物至干，得到的残余物在水(50ml)和氯仿(50ml)间分配，水层再次用氯仿(10ml)提取。合并的提取液用盐水洗涤，干燥(硫酸镁)，减压蒸馏出溶剂。得到的残余物在硅胶上色谱纯化和从乙醚中重结晶得到黄色粉末结晶(0.50g,37％)。¹H-NMR(300MHz,CDCl₃)δ:1.17(6H,d),1.39(6H,s),2.11(3H,s),2.58(2H,s),3.12(1H,brs),3.65(2H,s),4.12-4.19(1H,m),4.18(2H,s),5.27(2H,s),7.00(2H,t),7.10-7.23(5H,m),7.32-7.44(1H,m),7.61(2H,d),7.79(2H,d),8.24(1H,s),8.28(1H,s).

实施例13-2：

4,7-二氢-2-[4-(3-羟基-3-甲基丁酰氨基)苯基]-7-(2,6-二氟苄基)-3-(N-苄基-N-甲基氨基甲基)-5-异丁酰基-4-氧代噻吩并[2,3-b]吡啶盐酸盐的制备

用与实施例1中的相同方法得到标题化合物，白色粉末结晶(0.42g)，用于重结晶的溶剂：乙醇。mp 216-218℃。元素分析(C₃₈H₃₉N₃O₄SF₂HClH₂O)

C(％) H(％) N(％)计算值：62.84；5.83；5.79实验值：62.70；5.75；5.82

实施例14

采用与实施例9、11、12和13中所述的相同方法，用参考实施例29中得到的化合物，并且用各种羧酸化合物代替例如实施例9中所使用的(2R)-3-叔丁氧基-2-甲基丙酸，制备如下化合物(实施例14-1至14-10)。

实施例14-1：收率：46％无定形。¹H-NMR(300MHz,CDCl₃)δ:1.18(6H,d),1.25(3H,d),1.30(9H,s),2.11(3H,s),2.60(1H,br),3.51(1H,t，类似),3.59-3.65(1H,m),3.65(2H,s),4.17(1H,q),4.18(2H,s),5.27(2H,s),7.00(2H,t),7.12-7.22(5H,m),7.38-7.44(1H,m),7.60(2H,d),7.75(2H,d),8.28(1H,s),9.00(1H,s).

实施例14-2：

收率：47％mp 145-150℃。

实施例14-3：

收率：99％mp 96-98℃。

实施例14-4：收率：57％mp 92-94℃。

实施例14-5：收率：71％mp 57-62℃。

实施例14-6：

收率：92％mp 79-81℃。

实施例14-7：收率：97％mp 91-96℃。

实施例14-8：收率：91％mp 75-80℃。

实施例14-9：

收率：87％mp 83-88℃。

实施例14-10：

收率：50％mp 130-135℃。

实施例15

用实施例14中得到的化合物，用与实施例10中相同的方法得到如下化合物(实施例15-1至15-6)

实施例15-1：收率：69％mp 161-162℃。

实施例15-2：收率：94％mp 153-155℃。

实施例15-3：收率：62％mp 224-226℃。

实施例15-4：收率：56％mp 230-232℃。

实施例15-5：

收率：90％mp 92-94℃。

实施例15-6：收率：34％mp 107-112℃。

实施例16

实施例16-1：

3-(N-苄基-N-甲基氨基甲基)-4,7-二氢-5-异丁酰基-7-(2,6-二氟苄基)-2-(4-N’-甲氧基脲基苯基)-4-氧代噻吩并[2,3-b]吡啶的制备

向参考实施例29中得到的化合物(0.40g,0.7mmol)在二氯甲烷(15ml)中的溶液中加入三乙胺(0.20ml,1.43mmol)和N,N’-羰基二咪唑(0.228mg,1.41mmol)，随后在冰冷却条件下搅拌。在使溶液加热到室温和再搅拌2.5天后，在冰冷却下向混合物中加入O-甲基羟基胺盐酸盐(0.59g,7.06mmol)和三乙胺(0.98ml,7.03mmol)，在使溶液恢复到室温时，搅拌1.5小时。在用水(50ml)稀释后，反应混合物用氯仿(50ml)提取，水层再次用氯仿(10ml)提取。合并的提取液用盐水洗涤，干燥(硫酸镁)，并减压蒸馏出溶剂。得到的残余物在硅胶上色谱纯化得到黄色无定形粉末(0.349g,77％)。¹H-NMR(300MHz,CDCl₃)δ:1.19(6H,d),2.17(3H,s),3.72(2H,brs),3.83(3H,s),4.10-4.20(1H,m),4.22(2H,brs),5.28(2H,s),7.00(2H,t),7.15-7.24(5H,m),7.37-7.46(2H,m),7.59(2H,d),7.75(2H,d),7.83(1H,br),8.31(1H,s).

实施例16-2：

4,7-二氢-2-(4-N’-甲氧基脲基苯基)-7-(2,6-二氟苄基)-3-(N-苄基-N-甲基氨基甲基)-5-异丁酰基-4-氧代噻吩并[2,3-b]吡啶盐酸盐的制备

用与实施例1中的相同方法得到标题化合物，白色无定形粉末(0.355g)，用于重结晶的溶剂：乙酸乙酯-乙醚。mp 225-230℃。元素分析(C₃₅H₃₄N₄O₄SF₂HCl0.5H₂O)

C(％) H(％) N(％)计算值：60.91；5.26；8.12实验值：60.80；5.07；8.17

实施例17

实施例17-1：

(R)-4,7-二氢-2-[4-(2,3-二羟基丙酰氨基)苯基]-7-(2,6-二氟苄基)-3-(N-苄基-N-甲基氨基甲基)-5-异丁酰基-4-氧代噻吩并[2,3-b]吡啶的制备

向2N氢氧化钾的水溶液中加入(R)-(+)-2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-羧酸甲酯(1.00g,6.24mmol)，随后在冰冷却条件下搅拌3小时。在用盐酸中和后，将溶液盐析，用乙酸乙酯(50ml)提取得到(R)-(+)-2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-羧酸无色无定形粉末(0.72g)。向在参考实施例29中得到的化合物(0.572g,1.0mmol)在二氯甲烷(5ml)中的溶液中加入二异丙基乙胺(1.04g,8mmol)和得到的(R)-(+)-2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-羧酸(0.292g,2mmol)，随后在冰冷却下搅拌。向该溶液中加入苯并三唑-1-基氧基三二甲基氨基磷翁六氟磷酸盐(BOP试剂)(0.885g,2mmol)，在冰冷却下搅拌1小时后，溶液再在室温下搅拌4天。减压浓缩反应混合物至干，得到的残余物在水(50ml)和氯仿(50ml)间分配，水层再次用氯仿(10ml)提取。合并的提取液用盐水洗涤，干燥(硫酸镁)，减压蒸馏出溶剂。得到的残余物在硅胶上色谱纯化得到无色无定形粉末(0.50g)，将其溶解在三氟乙酸(10ml)中，在室温下搅拌16小时。减压浓缩反应混合物至干，用碱处理，随后在氯仿(50ml)和水(50ml)间分配，水层再次用氯仿(10ml)提取。合并的提取液用盐水洗涤，干燥(硫酸镁)，减压蒸馏出溶剂，得到的残余物在硅胶上色谱纯化得到0.5g无色无定形粉末(76％)¹H-NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ:1.09(6H,d),1.95(3H,s),3.51(2H,br),3.55-3.72(2H,m),4.01-4.08(4H,m),4.84(1H,t),5.63(2H,brs),5.80(1H,d),7.15-7.24(7H,m),7.49-7.57(1H,m),7.66(2H,d),7.84(2H,d),8.53(1H,s),9.82(1H,s).实施例17-2：

(R)-4,7-二氢-2-[4-(2,3-二羟基丙酰氨基)苯基]-7-(2,6-二氟苄基)-3-(N-苄基-N-甲基氨基甲基)-5-异丁酰基-4-氧代噻吩并[2,3-b]吡啶盐酸盐的制备

用与实施例1中的相同方法得到标题化合物，白色粉末结晶(0.43g)，用于重结晶的溶剂：乙醚-乙醇。mp 146-148℃。

实施例18

4,7-二氢-2-(4-N’-羟基-N’-甲基脲基苯基)-7-(2,6-二氟苄基)-3-(N-苄基-N-甲基氨基甲基)-5-异丁酰基-4-氧代噻吩并[2,3-b]吡啶的制备

向参考实施例29中得到的化合物(1.0g,1.75mmol)在二氯甲烷(40ml)中的溶液中加入三乙胺(0.49ml,3.50mmol)和N,N’-羰基二咪唑(0.567mg,3.50mmol)，随后在冰冷却条件下搅拌。在使溶液加热到室温后，再搅拌l7小时，在冰冷却下向混合物中加入N-甲基羟基氯化铵(730mg,8.75mmol)和三乙胺(1.23ml,8.75mmol)。在使溶液加热到室温时，搅拌5小时。反应混合物用氯仿(300ml)和碳酸氢钠水溶液(饱和，200ml)间分配，有机层再次用盐水(200ml)洗涤。在有机层干燥(硫酸镁)后，减压蒸馏出溶剂。得到的残余物在硅胶上色谱纯化得到浅黄色无定形粉末(0.38g,34％)。¹H-NMR(300MHz,CDCl₃)δ:1.18(6H,d),2.15(3H,s),3.26(3H,s),3.71(2H,s),4.19(2H,s),5.25(2H,s),7.00(2H,t),7.22-7.26(5H,m),7.41(1H,m),7.49(2H,d),7.60(2H,d),8.06(1H,s),8.26(1H,s).元素分析(C₃₅H₃₄N₄O₄SF₂0.8H₂O)

C(％) H(％) N(％)计算值：63.78；5.44；8.50实验值：63.73；5.24；8.41

实施例19

2-[4-[(1-乙酰氧基环丙基)羰基氨基]苯基]-3-(N-苄基-N-甲基氨基甲基)-5-苯甲酰基-7-(2,6-二氟苄基)-4,7-二氢-4-氧代噻吩并[2,3-b]吡啶的制备

在冰冷却下向参考实施例28中得到的化合物(0.42g,0.7mmol)和三乙胺(0.08g,0.8mmol)在二氯甲烷(10ml)中的溶液中滴加1-乙酰氧基环丙烷碳酰氯(0.13g,0.8mmol)。混合物在0℃搅拌30分钟，在室温搅拌30分钟。反应混合物用氯仿(20ml)稀释，溶液用碳酸氢钠水溶液(饱和，20ml)和盐水(20ml)洗涤。在有机层干燥(硫酸钠)后，减压蒸馏出溶剂。得到的残余物在硅胶上色谱纯化得到浅黄色无定形粉末(0.34g,66％)。¹H-NMR(300MHz,CDCl₃)δ:1.22(2H,dd),1.68(2H,dd),2.12(3H,s),2.2l(3H,s),3.64(2H,s),4.13(2H,s),5.28(2H,s),7.01(2H,t),7.17-7.23(5H,m),7.37-7.44(3H,m),7.51-7.56(1H,m),7.60(2H,d),7.81(2H,d),7.87-7.90(3H,m),7.94(1H,s).FAB-Mass m/z 732(MH)⁺

实施例20

使用参考实施例28中得到的化合物，以与实施例19中的相同方法得到如下化合物实施例20-1。

实施例20-1：

收率：80％¹H-NMR(300MHz,CDCl₃)δ:1.77(6H,s),2.12(3H,s),2.17(3H,s),3.63(2H,s),4.13(2H,s),5.29(2H,s),7.01(2H,t),7.15-7.23(5H,m),7.38-7.45(3H,m),7.51-7.56(1H,m),7.64(2H,d),7.85(2H,d),7.88-7.90(3H,m),7.94(1H,s).FAB-Mass m/z 734(MH)⁺

使用参考实施例28中得到的化合物，用与实施例19中的相同方法得到如下化合物实施例20-2。

实施例20-2：

收率：84％¹H-NMR(300MHz,CDCl₃)δ:1.25(3H,d),1.30(9H,s),2.10(3H,s),2.65-2.67(1H,brm),3.51(2H,t),3.60(2H,s),4.12(2H,s), 5.28(2H,s),7.00(2H,t),7.16-7.23(5H,m),7.37-7.42(3H,m),7.50-7.53(1H,m),7.61(2H,d),7.80(2H,d),7.89(2H,d),7.94(1H,s),9.01(1H,s).FAB-Mass m/z 748(MH)⁺

实施例21：

3-(N-苄基-N-甲基氨基甲基)-5-苯甲酰基-7-(2,6-二氟苄基)-4,7-氢-2-[4-[(1-羟基环丙基)羰基氨基]苯基]-4-氧代噻吩并[2,3-b]吡啶的制备

在室温下搅拌在实施例19中得到的化合物(0.24g,0.33mmol)和5N氢氧化钠(0.07ml)在乙醇(8ml)中的混合物1小时，在减压蒸馏出溶剂后，得到的残余物溶解在氯仿(30ml)中，溶液用碳酸氢钠水溶液(饱和，20ml)和盐水(20ml)洗涤，在有机层干燥(硫酸钠)后，减压蒸馏出溶剂，得到的残余物由氯仿-乙醚中重结晶得到浅黄色粉末(0.17g,50％)。mp 186-188℃.¹H-NMR(300MHz,CDCl₃)δ:1.15(2H,dd),1.44(2H,dd),2.05(3H,s),3.56(2H,s),4.01(2H,s),4.56(1H,brs),5.24(2H,s),7.00(2H,t),7.14-7.22(5H,m),7.41(3H,t),7.55(2H,d),7.55(1H,s),7.70(2H,d),7.88(2H,d),7.90(1H,s),8.88(1H,s).元素分析(C₄₀H₃₃N₃O₄SF₂1.0H₂O)

C(％) H(％) N(％)计算值：67.88；4.98；5.94实验值：67.75；4.70；5.90FAB-Mass m/z 690(MH)⁺

实施例22

3-(N-苄基-N-甲基氨基甲基)-5-苯甲酰基-7-(2,6-二氟苄基)-4,7-二氢-2-[4-(2-羟基-2-甲基丙酰基氨基)苯基]-4-氧代噻吩并[2,3-b]吡啶的制备

使用实施例20-1中得到的化合物，用与实施例21中的相同方法得到标题化合物，用于重结晶的溶剂：氯仿-乙醚。mp 222-223℃。¹H-NMR(300MHz,CDCl₃)δ:1.57(6H,s),2.09(3H,s),2.50(1H,s),3.59(2H,s),4.10(2H,s),5.28(2H,s),7.01(2H,t),7.16-7.25(5H,m),7.38-7.44(3H,m),7.51-7.56(1H,m),7.67(2H,d),7.82(2H,d),7.89(2H,d),7.93(1H,s),8.82(1H,s).FAB-Mass m/z 692(MH)⁺

实施例23

(R)-3-(N-苄基-N-甲基氨基甲基)-5-苯甲酰基-7-(2,6-二氟苄基)-4,7-二氢-2-[4-(3-羟基-2-甲基丁酰基氨基)苯基]-4-氧代噻吩并[2,3-b]吡啶的制备

使用实施例20-2中得到的化合物，用与实施例10中的相同方法得到标题化合物，用于重结晶的溶剂：氯仿-乙醚。mp 145-146℃.¹H-NMR(300MHz,CDCl₃)δ:1.25(3H,d),2.07(3H,s),2.63-2.70(1H,m),2.84(1H,brs),3.57(2H,s),3.78-3.81(2H,m),4.08(2H,s),5.27(2H,s),7.00(2H,t),7.17-7.20(5H,m),7.37-7.43(3H,m),7.51-7.56(1H,m),7.61(2H,d),7.77(2H,d),7.89(2H,d),7.94(1H,s),8.31(1H,brs).FAB-Mass m/z 692(MH)⁺制剂实施例1

使用100mg实施例1-2中制备的化合物、165mg乳糖、25mg玉米淀粉、4mg聚乙烯基醇和1mg硬脂酸镁，用常规方法制备片剂。制剂实施例2

将在实施例1-2中制备的化合物(5g)溶解在用于注射的蒸馏水中以得到100ml的总体积。该溶液通过0.22μm膜过滤器(由Sumitomo Electric Industries,Ltd.或Sartorius制造)无菌过滤，分装在2ml洗涤过的无菌小瓶中，随后用常规方法冻干，得到100mg/小瓶冻干的注射制剂。制剂实施例3

使用100mg实施例3中制备的化合物、165mg乳糖、25mg玉米淀粉、4mg聚乙烯基醇和1mg硬脂酸镁，用常规方法制备片剂。制剂实施例4

将在实施例3中制备的化合物(5g)溶解在用于注射的蒸馏水中以得到100ml的总体积。该溶液通过0.22μm膜过滤器(由Sumitomo Electric Industries,Ltd.或Sartorius制造)无菌过滤，分装在2ml洗涤过的无菌小瓶中，随后用常规方法冻干，得到100mg/小瓶冻干的注射制剂。制剂实施例5(1)实施例1-1中制备的化合物 5g(2)乳糖/结晶纤维素(微粒) 330g(3)D-甘露糖醇 29g(4)低取代的羟基丙基纤维素 20g(5)滑石 25g(6)羟基丙基纤维素 50g(7)天冬甜素 3g(8)甘草酸二钾 3g(9)羟基丙基甲基纤维素2910 30g(10)氧化钛 3.5g(11)黄色三氧化二铁 0.5g(12)轻质硅酸酐 1g

将组分(1)、(3)、(4)、(5)、(6)、(7)和(8)悬浮或溶解在纯水中，涂覆在核心微粒(2)上得到基质细粒(subtilae)，随后涂上组分(9)-(11)得到涂覆的细粒，它随后与组分(12)混合得到500g 1％化合物的细粒，将这些细粒分成500mg叠合的细粒(folded subtilae)。实验实施例1

¹²⁵I-亮丙瑞林的制备

向含有10μl3×10^-4M亮丙瑞林水溶液和10μl 0.01mg/ml乳过氧化物酶的试管中加入10μl(37MBq)的Na¹²⁵I溶液。在搅拌后，加入10μl 0.001％ H₂O₂，在室温下进行反应20分钟。加入700μl 0.05％ TFA(三氟乙酸)溶液，停止反应，随后用逆相HPLC纯化，所使用的HPLC条件显示如下。¹²⁵I-亮丙瑞林用26-27分钟的保留时间洗脱。柱：TSKgel ODS-80^TM(TM表示注册商标；下文相同)CTR(4.6mm×10cm)洗脱液：溶剂A(0.05％TFA)溶剂B(40％ CH₃CN-0.05％ TFA)0分钟(100％溶剂A)-3分钟(100％溶剂A)-7分钟(50％溶剂A+50％溶剂B)-40分钟(100％溶剂B)洗脱温度：室温洗脱速率：1ml/分。实验实施例2

含有GnRH受体的大鼠脑垂体前叶膜部分的制备

脑垂体腺前叶由40只Wistar大鼠(8周龄，雄性)分离，用冰冷却的均浆缓冲液[25mMTris(三(羟基甲基)氨基甲烷)-HCl、0.3M蔗糖、1mMEGTA(乙二醇-醚二胺-N,N,N’,N’-四乙酸)、0.25mMPMSF(苯基甲基磺酰基氟)、10U/ml抑肽酶、1mg/ml胃蛋白酶抑制剂、20mg/ml亮肽酶素、100mg/ml磷酸阿米酮、0.03％叠氮化钠，pH7.5]洗涤。脑垂体组织漂浮在2ml均浆缓冲液中，用Polytron均化器均化。均浆以700xg离心15分钟，上清液放入超离心管中，以100000xg离心1小时得到膜部分颗粒。该颗粒悬浮在2ml试验缓冲液(25mM Tris-HCl、1mMEDTA(乙二胺四乙酸)、0.1％BSA(牛血清白蛋白)、0.25mMPMSF、1mg/ml胃蛋白酶抑制剂、20mg/ml亮肽酶素、100mg/ml磷酸阿米酮、0.03％叠氮化钠，pH7.5)中，悬浮液以100000xg离心1小时。以颗粒回收的膜部分重新悬浮在10ml试验缓冲液中，分成若干份，在-80℃贮存，需要时解冻。实验实施例3

含有人体GnRH受体的CHO(中国仓鼠卵巢)细胞膜部分的制备

将人体GnRH受体表达的CHO细胞(EP-A-678577)(10⁹细胞)悬浮在补充有5mMEDTA(乙二胺四乙酸)(PBS-EDTA)的磷酸盐缓冲盐水中并以100xg离心5分钟。向细胞颗粒中加入10ml细胞均浆缓冲液(10mMNaHCO₃、5mMEDTA、pH7.5)，随后用Polytron均化器均化，在以400xg离心15分钟后，上清液移入超离心管，以100000xg离心1小时得到膜部分颗粒。该颗粒悬浮在2ml试验缓冲液中，以100000xg离心1小时。以沉淀回收的膜部分重新悬浮在20ml试验缓冲液中，分成若干份，使用前在-80℃贮存，需要时解冻。实验实施例4

¹²⁵I-亮丙瑞林结合抑制速率的测定

在实验实施例2和3中制备的大鼠和人体膜部分用试验缓冲液稀释得到200mg/ml稀释度，它随后以每管188ml分散。当使用大鼠脑垂体前叶膜部分时，向每个管中同时加入2ml在60％DMSO(二甲基亚砜)中的0.1mM化合物的溶液和10μl 38nM¹²⁵I-亮丙瑞林。当使用有表达的人体GnRH受体的CHO细胞膜部分时，向每个管中同时加入2ml在60％DMSO中的2mM化合物的溶液和10μl 38nM¹²⁵I-亮丙瑞林。为测定最大结合量，制备2μl60％DMSO和10μl 38nM¹²⁵I-亮丙瑞林的反应混合物。为测定非特异结合量，制备2μl100μM亮丙瑞林在60％DMSO中的溶液和10μl 38nM¹²⁵I-亮丙瑞林的反应混合物。

当使用大鼠或牛脑垂体前叶膜部分时，反应在4℃进行90分钟。当使用有表达的人体GnRH受体的CHO膜部分时，反应在25℃进行60分钟。在每次反应后，反应混合物通过聚乙二胺处理的Whatman玻璃过滤器(GF-F)抽吸和过滤。在过滤后用γ-计数器测量残留在滤纸上的¹²⁵I-亮丙瑞林放射性。计算公式(TB-SB)/(TB-NSB)×100(其中SB=加入化合物的放射性，TB=最大结合放射性，NBS=非特异结合放射性)以测出每个测试化合物的结合抑制速率(％)。此外，抑制速率通过改变试验物质的浓度测定，所述化合物的50％抑制浓度(IC₅₀值)由Hill曲线计算，结果如下所示。

试验化合物	结合抑制速率(％)大鼠(1μM) 人体(20μM)	IC50值(μM)大鼠人体
试验化合物	结合抑制速率(％)大鼠(1μM) 人体(20μM)	IC50值(μM)大鼠人体	实施例1-2化合物实施例3化合物	96 10262 NT	0.06 0.00010.6 0.0002

NT：未测实验实施例5

在阉割的猴子中血液LH的抑制

向阉割的雄性弥猴(Macaca群)口服给药实施例1-2中制备的化合物，测量血液LH。在实验时年龄为3岁8个月至7岁7个月的雄性弥猴在试验前已阉割半年以上。试验动物[n=2；化合物(1)和化合物(2)]通过口服给药以1％的最终浓度悬浮在0.5％甲基纤维素中的30mg/kg(3ml/kg)化合物，对照动物[n=3；对照组(1)、对照组(2)和对照组(3)]通过口服给药3ml/kg的0.5％甲基纤维素分散剂。在给药前24小时和给药前，和在给药后2、4、6、8、24和48小时，经股静脉收集血以便得到肝素化血浆样品，立即在冷冻条件下贮存。

血浆LH浓度通过使用小鼠睾丸细胞的生物试验测定。睾丸细胞由雄性BALB/c小鼠(8-9周龄)收集，每个睾丸用含有20mM HEPES和0.2％ BSA的1ml Dulbecco改性的Eagle培养基(DMEM-H)洗涤三次。在37℃培养1小时后，细胞通过尼龙网过滤器(70μm)过滤，以8×10⁵细胞/管分散在试验管中。在细胞用0.4ml DMEM-H洗涤两次后，加入含有作为标准LH的马LH(Sigma Company)和作为试验样品的预先稀释至1000倍的猴血浆的0.4mDMEM-H溶液，随后在37℃反应2小时。在培养基上清液中的睾丸素浓度用放射免疫分析法(CIS Diagnostics Company)测定，在试验猴血浆中的LH浓度由标准马LH的标准曲线计算。

结果在附图1中一起给出。

所示的化合物是在实施例1-2中得到的化合物。

对于对照组(1)、对照组(2)和对照组(3)，在每个试验动物中LH浓度随时间的改变以相对于各自参考值的百分数比率表示，该参考值包括在每个对照动物(弥猴)中给药前的LH浓度。同样，对于化合物(1)和化合物(2)，在每个接受实施例1-2化合物的试验动物(弥猴)中LH浓度随时间的改变以相对于各自参考值的百分数比率表示，该参考值包括给药化合物前的LH浓度。给药时间定为零(0)，给药前和后的小时数分别用正数和负数表示。

工业适用性

本发明的化合物具有优良的促性腺素释放激素拮抗活性，它的口服吸收能力也是良好的，在稳定性和药动学方面是优良的。由于是低毒性，它在安全方面也是优良的。

因此，本发明的化合物可用作用于与激素有关疾病等的预防或治疗剂。更具体地说，它有效地用作与性激素有关的癌症(例如前列腺癌、子宫癌、乳腺癌、脑垂体肿瘤等)、前列腺肥大、子宫肌瘤、子宫内膜异位、性早熟、经闭综合症、多腔卵巢综合症、丘疹等的预防或治疗剂，或作为妊娠调节剂(例如避孕药)、不育症治疗或月经调节剂。它还有效地用作动物发情期调节剂、在畜牧业中食用肉类质量改进剂和动物生长调节剂和在渔业领域中作为鱼产卵促进剂。

Claims

1．下式的化合物或其盐：

其中

R²表示可以被取代的C_1-7烷基或可以被取代的苯基；

当R¹是未取代的C_1-7烷基时，则R²是取代的C_1-7烷基或取代的苯基。

2．权利要求1的化合物或其盐，其中

(3)可以被1-5个取代基取代的C_1-6烷氧基氨基，所述取代基选自(ⅰ)羟基、(ⅱ)C_1-7酰氧基、(ⅲ)可以被1或2个取代基取代的氨基，所述取代基选自C_1-6烷氧羰基、苄氧羰基、C_1-3酰基、C_1-3烷基磺酰基和C_1-3烷基、(ⅳ)可以被1-3个取代基取代的C_1-10烷氧基，所述取代基选自C_3-7环烷氧羰基和C_1-3烷氧基，和(ⅴ)C_1-6烷氧羰基，或

(4)可以被1或2个取代基取代的羟基氨基，所述取代基选自(ⅰ)C_1-7酰氧基、(ⅱ)可以被1或2个取代基取代的氨基，所述取代基选自C_1-6烷氧羰基、苄氧羰基、C_1-3酰基、C_1-3烷基磺酰基和C_1-3烷基、(ⅲ)可以被1-3个取代基取代的C_1-10烷氧基，所述取代基选自C_3-7环烷氧羰基和C_1-3烷氧基和(ⅳ)C_1-6烷基，和

(2)可以被1-5个取代基取代的苯基，所述取代基选自卤素、C_1-3烷基和C_1-3烷氧基。

3．权利要求1的化合物或其盐，其中R¹是可以被取代的C_1-7烷基或可以被取代的C_3-7环烷基。

4．权利要求1的化合物或其盐，其中R¹是取代的支链C_3-7烷基或取代的C_3-7环烷基。

5．权利要求1的化合物或其盐，其中R¹是羟基取代的C_1-7烷基或羟基取代的C_3-7环烷基。

6．权利要求1的化合物或其盐，其中R¹是取代的C_3-7环烷基。

7．权利要求1的化合物或其盐，其中R¹是可以被羟基取代的环丙基。

8．权利要求1的化合物或其盐，其中R²是可以被取代的支链C_3-7烷基。

9．权利要求1的化合物或其盐，其中R²是可以被取代的苯基。

10．权利要求1的化合物或其盐，其中R²是苯基。

11．权利要求1的化合物或其盐，其中R¹是C_3-7环烷基和R²是C_1-6烷基。

12．权利要求1的化合物或其盐，其中R¹是(1)1或2个羟基取代的C_1-4烷基，(2)羟基取代的C_3-7环烷基或(3)C_1-3烷氧基氨基；和R²是异丙基或苯基。

13．权利要求1的化合物或其盐，其中R¹是(1)可以被1或2个取代基取代的C_1-7烷基，所述取代基选自羟基、C_1-3烷基羰氧基、氨基、苄氧基羰基氨基、C_1-3烷氧基、C_1-3烷氧基-C_1-3烷氧基或C_1-3烷氧羰基，(2)可以被羟基或C_1-3烷基羰氧基取代的C_3-7环烷基，或(3)C_1-3烷氧基氨基；和R²是(1)可以被羟基取代的异丙基或(2)苯基。

14．3-(N-苄基-N-甲基氨基甲基)-4,7-二氢-5-异丁酰基-7-(2,6-二氟苄基)-2-(4-环丙烷羰基氨基苯基)-4-氧代噻吩并[2,3-b]吡啶或其盐。

15．3-(N-苄基-N-甲基氨基甲基)-4,7-二氢-5-异丁酰基-7-(2,6-二氟苄基)-2-[4-(3-羟基-2-甲基丙酰基氨基)苯基]-4-氧代噻吩并[2,3-b]吡啶或其盐。

16．3-(N-苄基-N-甲基氨基甲基)-4,7-二氢-5-异丁酰基-7-(2,6-二氟苄基)-2-[4-[(1-羟基环丙基)羰基氨基]苯基]-4-氧代噻吩并[2,3-b]吡啶或其盐。

17．3-(N-苄基-N-甲基氨基甲基)-5-苯甲酰基-7-(2,6-二氟苄基)-4,7-二氢-2-[4-[(1-羟基环丙基)羰基氨基]苯基]-4-氧代噻吩并[2,3-b]吡啶或其盐。

18．制备权利要求1化合物或其盐的方法，其包括使下式化合物或其盐：

其中R²表示可以被取代的C_1-7烷基或可以被取代的苯基，

ⅰ)与下式的化合物或其盐或活性衍生物反应：

R^1aCOOH

其中R^1a表示可以被取代的C_1-7烷基或可以被取代的C_3-7环烷基，或

ⅱ)与羰基二咪唑、光气或氯甲酸酯反应，随后与下式化合物或其盐反应：

R^1bH

其中R^1b表示可以被取代的C_1-6烷氧基氨基或可以被取代的羟基氨基。

19．制备权利要求3的化合物或其盐的方法，其包括使下式化合物或其盐：

其中R²表示可以被取代的C_1-7烷基或可以被取代的苯基，

与下式的化合物或其盐或活性衍生物反应：

R^1aCOOH

其中R^1a表示可以被取代的C_1-7烷基或可以被取代的C_3-7环烷基。

20．药物组合物，其含有权利要求1的化合物或其盐。

21．权利要求20的药物组合物，它用于拮抗促性腺素释放激素。

22．权利要求21的药物组合物，它用于预防或治疗与性激素有关的疾病。

23．在需要的哺乳动物中拮抗促性腺素释放激素的方法，其包括向所述哺乳动物给药有效量的权利要求1的化合物或其盐与可药用的赋形剂、载体或稀释剂。

24．权利要求1的化合物或其盐在制备用于拮抗促性腺素释放激素的药物组合物中的用途。