CN1291654A - 用活化生物酶解法提取肝素钠的生产工艺 - Google Patents
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Abstract
一种用活化生物酶解法提取肝素钠的生产工艺,其特点是在其裂解工艺中采用了经过活化处理的生物酶——胰酶,作为裂解的催化剂,同时该工艺中必须保持两个重要的工艺条件,即pH值为8.5—9.0和热状态,最高温度要达85—95℃,这样就保证了裂解速度,使回收率达95%以上,有利于充分利用资源,提高经济效益。
Description
本发明的技术领域属有机高分子化合物的制备，是一种用活化生物酶解法提取肝素钠的生产工艺。
肝素钠是一种贵重的制造生化药品的主原料，它主要从肠粘膜中提取，现有传统的生产工艺是盐解法，即用食盐-Nacl溶液与肠粘膜混合，在一定的温度下打断蛋白与肝素的复结合-裂解，同时食盐中的钠离子与肝素反应结合成肝素钠。该工艺简单，易操作，原料易得，成本低。其主要缺点是在食盐和高温的双重作用下，肠粘膜中的蛋白极易凝固，未裂解的肝素极易被凝固在蛋白内，导致肝素的回收率低于50％，大量的肝素被浪费了。也曾经有人用过酶解法，然而由于他们用的酶一般是水解蛋白酶或木瓜酶，这些酶缺乏活性，导致裂解时间过长-9小时之多，同时它的回收率也很难超过60％，所以这种工艺一直未能进入实际工业性生产。
本发明之目的就在于克服以上技术之不足而提供一种裂解速度快、回收率高的用活化生物酶解法提取肝素钠的生产工艺。
本发明的目的是这样实现的：一种用活化生物酶解法提取肝素钠的生产工艺，包括：肠粘膜收集-裂解-树脂吸附-洗脱-沉淀提纯，其特征在于裂解工艺中采用了活化生物酶作为裂解的催化剂。本工艺中所说的活化生物酶是经过活化处理了的胰酶，它是一种生物酶，极具活性，同时该工艺中不加食盐--Nacl。而加入少量的烧碱-NaOH溶液，从而避免了因食盐加入而导致的蛋白凝固。为保证酶的活性使裂解工艺正常而迅速地进行，必须使肠粘膜与酶的混合物的PH值保持在8．5-9．0的范围内，并保持热状态，最高温度达85-95℃。
采用本工艺的最大优点是肝素的回收率大大提高，最高可达95％以上，这实际上就节约了资源，降低了成本，提高了生产者的经济效益。同时在正确掌握工艺参数的前提下，由于活化生物酶活性强，裂解的速度不低于盐解法，而远高于采用非活化酶的酶解法。
下面将详细叙述本工艺的具体操作过程：
一、肠粘膜收集：将牲畜的小肠清洗，然后进行刮肠，作用是将肠衣与肠粘膜分离。其产物中，肠衣储存待售，肠粘膜收集后待用。
二、活化生物酶制取：取牲畜的胰脏，越新鲜越好，并将胰脏用木棒捣碎，加入石灰水，即Ca(OH)2溶液，调PH值至8，静置2小时，胰脏中的胰酶将逐渐被活化。
三、裂解：将活化了的生物酶与收集的肠粘膜一齐倒入加热锅中，再逐渐加入浓度为30-40％的烧碱-NaOH溶液，调整混合液的PH值，使PH值保持在8．5-9．0的范围内，然后进行分段、逐步加温。为使温度均匀，应不停地搅拌，最后使温度达到85-95℃，此时，保持温度一段时间，停止搅拌和加温。
本工艺的作用有二，一是在活化生物酶的催化作用下并在热状态下打断肠粘膜中蛋白与肝素的复结合；二是充分混合在肠粘膜中的钠离子(来自烧碱-NaOH溶液)，迅速与肝素反应生成肝素钠。
由于肝素属多糖类物质，易溶于水，所形成的肝素钠在80℃以上时也溶于水，所以此后必须立即在热状态下进行过滤，即用滤布滤出含有肝素钠的滤液。
四、树脂吸附：其作用在于使前一工艺中获得的滤液中的肝素钠与其它物质分离。方法是：冷却滤液，加入D204树脂-肝素钠吸附专用树脂，并搅拌，直至树脂充分吸附，同时除去液体上层的油脂，再进行过滤。吸附了肝素钠的树脂留在滤布上，待用。
五、洗脱：其作用是使树脂与肝素钠分离。在洗脱之前应先将树脂用清水冲洗至PH值为7．0。然后再进入洗脱工艺。其方法是：将树脂与浓度为20-24％的食盐溶液混合，并加入低浓度的盐酸溶液，调PH值为6-6．5，在酸性环境下，树脂上吸附的肝素钠将与树脂分离并进入洗脱液，此时，进行过滤，过滤后的树脂可以重复使用，而滤液就是我们需要的肝素钠溶液。为提高回收率，洗脱工作可进行1-3次。
六、沉淀提纯：其作用是将前一工艺中所获得的滤液中的肝素钠呈固体状态析出，从而获取固体的肝素钠。方法是：将低浓度的烧碱溶液加入滤液中，使PH值达11-13，然后加入乙醇充分混合，使混合液的乙醇浓度达35％左右，再调PH值达7．0，密封静止沉淀24-40小时。此时沉淀后的混合液上部为液体，下部则为析出的固体状肝素钠，从而得到了固体的肝素钠。
如需进一步提纯，可重复上述的沉淀工艺。
按本工艺方法提取肝素钠，其回收率可达95％以上，肝素钠干品每千克价格可达万元，所以提高回收率对充分利用资源，提高经济效益有极大的意义。
Claims (4)
1、一种用活化生物酶解法提取肝素钠的生产工艺，包括：肠粘膜收集-裂解-树脂吸附-洗脱-沉淀提纯，其特征在于裂解工艺中采用了活化生物酶作为裂解的催化剂。
2、根据权利要求1所述的生产工艺，其特征在于所说的活化生物酶是经过活化处理了的胰酶。
3、根据权利要求1所述的生产工艺，其特征在于所说的采用了活化生物酶的裂解工艺中，其工艺条件之一是使活化生物酶与肠粘膜的混合液的PH值保持在8．5-9．0的范围内。
4、根据权利要求1所述的生产工艺，其特征在于所说的采用了活化生物酶的裂解工艺中，其工艺条件之一是使活化生物酶与肠粘膜的混合液加温进入热状态，最后达到85-95℃。
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1999
- 1999-10-11 CN CN 99121337 patent/CN1291654A/zh active Pending
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