CN1274301C - α－(3R3－4R4－5R5)－苯甲基－β－(3R3 －4R4－5R5)－苯甲基－γ－丁内酯在制备降血糖药物中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及α-(3R₃-4R₄-5R₅)-苯甲基-β-(3R₃’-4R₄’-5R₅’)-苯甲基-γ-丁内酯在制备降血糖药物中的应用。其中R₃、R₄、R_5、R₃’、R₄’、R₅’是氢或羟基或烷氧基或可取代的苯丙基以及上述化合物的衍生物，具体的说可以是牛蒡苷、牛蒡苷元、拉帕酚C、拉帕酚H等。本发明还涉及由该化合物组成的混合物，以及它们的制备方法，及该类化合物或混合物在治疗哺乳类动物高血糖中的应用。

Description

α-(3R3-4R4-5R5)-苯甲基-β-(3R3’-4R4’-5R5’)-苯甲基-γ-丁内酯 在制备降血糖药物中的应用

                     技术领域

本发明涉及下式(I)的化合物的一种新的用途以及一种新的由下式(I)的化合物组成的混合物及其制备方法和用途。

更具体地说，本发明涉及式(I)的化合物的一种新的具有抗哺乳类动物高血糖活性的用途；一种新的由两种或两种以上式(I)的化合物组成的混合物及其制备方法和具有抗哺乳类动物高血糖活性的用途；一种由式(I)的化合物通过结构修饰得到新的衍生物；这类化合物、混合物或衍生物可作为治疗哺乳类动物高血糖疾病的治疗剂。

                     背景技术

引起糖尿病的机理尚不完全清楚，但可以肯定糖尿病与糖的代谢有关。已经报道菊科植物牛蒡(Arctium Lappa L.)的干燥成熟果实牛蒡子，民间用于治疗风热感冒、流行性腮腺炎、风疹、坏血病等。在本领域最早的研究中，陈智慧，福建中医药，1999，30(5)；吴涛，医杂志，1997，38(10)；中国专利申请公开号97120295.8/1998.04.22；00123304.1/2001.05.30分别报道和公开了含牛蒡子的中药方剂和中药复方制剂治疗糖尿病的作用。CA Vol.66：1451 e，1967报道了牛蒡子对大鼠具有显著的降血糖作用。

阎凌霄，西北药学杂志，1993(2)：75报道了牛蒡子乙醇提物制备方法：取牛蒡子粉碎，用乙醚浸渍后，加乙醇回流2小时，滤除不溶物，滤液浓缩即得；同时还报道了口服牛蒡子乙醇提物对四氧嘧啶小鼠的降血糖作用。王海颖等，中国中医基础医学杂志，2002，8(5)(2)报道了牛蒡子乙醇提物制备方法：取牛蒡子粉碎，用95％的乙醇提取即得牛蒡子乙醇提液。王海燕、杨俊山，药学学报，1993，28(12)报道了牛蒡子中含有木脂素类化合物并报道了几种化合物的结构，其提取分离方法为：将牛蒡子粉碎，经丙酮或乙醚提取后，再经硅胶层析柱层析，低压柱层析和制备性薄层层析分离制备而得。

虽然，已有文献报道的研究中表明牛蒡子和牛蒡子乙醇提物具有降血糖作用，同时另外有文献报道牛蒡子中含有木脂素类化合物和几种化合物的结构，但是牛蒡子和牛蒡子乙醇提物中所含化合物类别甚多，上述文献并未确定降血糖活性成分的化学类型和结构。

因此，急切需要搞清楚牛蒡子和牛蒡子乙醇提物中具有的降血糖作用的化学成分类型和结构并开发出一类降血糖用药。

文献报道的牛蒡子乙醇提物虽然具有的降血糖作用，但是首先，未确定降血糖活性成分的化学类型和结构，其次，未确定降血糖活性成分的含量，再次，缺乏质量控制指标和方法，且不具有工业和临床价值以及商业价值。

本发明首次提供了牛蒡子和牛蒡子乙醇提物中的降血糖活性成分，确定了该活性成分的化学类型，同时确定了化学成分的结构；其次提供了该类化学成分通过衍生化得到的新的衍生物；还提供了由两种或两种以上上述化学成分组成的具有降血糖作用的混合物。上述类型的化学成分及其衍生物和混合物，在临床上用作治疗剂具有实用价值。

本发明人根据这方面的研究结果，针对现有技术中存在的问题，成功地发现了式(I)的化合物是牛蒡子和牛蒡子乙醇提物中治疗哺乳类动物高血糖的活性成分并成功地制备了由式(I)的化合物通过衍生化得到的新的衍生物以及一种新的由两种或两种以上的由权利要求4所述的化合物组成的混合物，在临床上用作治疗剂具有实用价值，从而完成本发明。

                     发明内容

本发明涉及式(I)化合物的一种新的治疗哺乳类动物高血糖的用途：

式(I)的化合物是α-(3R₃-4R₄-5R₅)苯甲基-β-(3R₃’-4R₄’-5R₅’)苯甲基-γ-丁内酯，具有(I)式的通式。

其中R₃、R₄、R₅、R₃’、R₄’、R₅’是氢或羟基或烷氧基或可取代的苯丙基以及上述化合物的衍生物。

优选R₃、R₃’是烷氧基，R₄，R₄’是羟基或烷氧基，R₅、R₅’是氢或可取代的苯丙基以及上述化合物的衍生物。

更优选：R₃，R₃’是甲氧基，R₄是葡萄糖氧苷基、R₄’是甲氧基，R₅、R₅’是氢(牛蒡苷，arctiin)；或R₃、R₃’是甲氧基，R₄是羟基、R₄’是甲氧基，R₅、R₅’是氢(牛蒡苷元，arctigenin)；或R₃、R₃’是甲氧基，R₄是羟基、R₄’是甲氧基，R₅是氢、R₅’是[1-(3’-甲氧基-4’-羟基)苯基]-1，3-丙二醇-2-基(拉帕酚C，lappaol C)；或R₃、R₃’是甲氧基，R₄是羟基、R₄’是甲氧基，R₅、R₅’是[1-(3’-甲氧基-4’-羟基)苯基]-1，3-丙二醇-2-基(拉帕酚H，lappaol H)以及上述化合物的衍生物。

本发明还涉及具有(I)式化合物的R₃、R₄、R₅、R₃’、R₄’、R₅’中存在羟基时，通过羟基衍生出的衍生物及其制备方法和在制备治疗哺乳类动物高血糖的药物中的用途。

本发明同时还涉及由权利要求4所述的化合物组成的混合物及其制备方法和在制备治疗哺乳类动物高血糖的药物中的用途。该混合物由权利要求4所述任意两种或两种以上化合物组成，且任意两种或两种以上化合物的含量之和大于或等于总固体量的50％。

本发明的另一方面涉及含有的(I)式化合物及其衍生物或混合物与药用载体的药物组合物，这类组合物能有效地治疗哺乳类动物高血糖疾病；还涉及制备这类组合物的方法。

本发明再一方面涉及治疗哺乳类动物高血糖疾病的方法，该方法包括给所述动物一种有效量的(I)式化合物、或衍生物、或混合物、或组合物。

                         附图说明

图1是牛蒡苷(arctiin)及牛蒡苷元(arctigenin)、拉帕酚C(lappaolC)、拉帕酚H(lappaol H)、混合物的HPLC图。

图2是方法1的工艺流程图。

图3是方法2的工艺流程图。

                         具体实施方式

本发明提供了式(I)化合物的一种新的治疗哺乳类动物高血糖的用途；本发明提供了具有(I)式化合物的R₃、R₄、R₅、R₃’、R₄’、R₅’中存在羟基时，通过羟基衍生出的衍生物及其制备方法和在制备治疗哺乳类动物高血糖的药物中的用途；本发明提供了由权利要求4所述的化合物组成的混合物及其制备方法和在制备治疗哺乳类动物高血糖的药物中的用途，该混合物由权利要求4所述任意两种或两种以上化合物组成，且任意两种或两种以上化合物的含量之和大于或等于总固体量的50％；本发明提供了含有(I)式化合物及其衍生物或混合物与药用载体的药物组合物，这类组合物能有效地治疗哺乳类动物高血糖疾病；还提供了制备这类组合物的方法。

另外本发明提供了一种治疗哺乳类动物高血糖疾病的方法，该方法包括给所述动物一种有效量的(I)式化合物、或衍生物、或混合物、或组合物。

1、(I)化合物的一种新的治疗哺乳类动物高血糖的用途

本发明中所述一类重要的化合物结构式是式(I)，是α-(3R₃-4R₄-5R₅)苯甲基-β-(3R₃’-4R₄’-5R₅’)苯甲基-γ-丁内酯。

其中R₃、R₄、R₅、R₃’、R₄’、R₅’是氢或羟基或烷氧基或可取代的苯丙基以及上述化合物的衍生物。

优选R₃、R₃’是烷氧基，R₄，R₄’是羟基或烷氧基，R₅、R₅’是氢或可取代的苯丙基以及上述化合物的衍生物。

更优选：R₃，R₃’是甲氧基，R₄是葡萄糖氧苷基、R₄’是甲氧基，R₅、R₅’是氢(牛蒡苷，arctiin)；或R₃、R₃’是甲氧基，R₄是羟基、R₄’是甲氧基，R₅、R₅’是氢(牛蒡苷元，arctigenin)；或R₃、R₃’是甲氧基，R₄是羟基、R₄’是甲氧基，R₅是氢、R₅’是[1-(3’-甲氧基-4’-羟基)苯基]-1，3-丙二醇-2-基(拉帕酚C，lappaol C)；或R₃、R₃’是甲氧基，R₄是羟基、R₄’是甲氧基，R₅、R₅’是[1-(3’-甲氧基-4’-羟基)苯基]-1，3-丙二醇-2-基(拉帕酚H，lappaol H)以及上述化合物的衍生物。

式(I)的化合物可以通过人工合成制得，也可以从植物中制得，如以菊科植物牛蒡(Arctium Lappa L.)的干燥成熟果实牛蒡子为原料，很容易按常规方法如经有机溶剂浸渍、萃取、蒸馏、柱色谱、重结晶等法分离或提纯。从牛蒡子中得到的化合物包含：牛蒡苷(arctiin)、牛蒡苷元(arctigenin)、拉帕酚C(lappaol C)、拉帕酚H(lappaol H)等。上述化合物均属于α-(3R₃-4R₄-5R₅)苯甲基-β-(3R₃’-4R₄’-5R₅’)苯甲基-γ-丁内酯化合物。

A、牛蒡苷(arctiin)-----HPLC图谱主峰3

[式(I)中R₃、R₃’＝甲氧基，R₄＝葡萄糖氧苷基、R₄’＝甲氧基，R₅、R₅’＝

                              氢]

1、性状：白色粉末，分子式C₂₇H₃₄O₁₁，分子量534，紫外光谱：UVλ_max(MeOH)＝278，229，210。EI-MS：m/z：372(100)，151，137，60

2、核磁共振氢谱数据：测定条件：Varian Unit INOVA 400/54溶剂：CDCL₃，CDCL₃+D₂O

δppm：2.47(1H，dd)；2.55(2H)；2.65(1H，dd)；2.87(2H)；3.23(br.s，加重水后消失)；3.64-3.88(6H，m，糖上质子)；3.72，3.79，3.82(各3H，s，3xOCH₃)；3.90(1H，dd)；4.13(1H，dd)；4.78(1H，d，J＝6.4Hz，Glul-H)；6.49(1H，s)；6.55(1H，d，J＝8.4Hz)；6.59(1H，d，J＝8.4Hz)；6.65(1H，s)；6.75(1H，d，J＝8.0Hz)；6.93(1H，d，J＝8.0Hz).

3、核磁共振碳谱数据：测定条件：Varian Unit INOVA 400/54，溶剂：CDCL₃，δppm：34.2，37.8，41.0，46.3，55.7，55.7，55.8(3xOCH₃)，71.1，111.2，111.7，113.0，116.3，120.5，121.7，130.2，132.6，144.9，147.6，148.8，148.9，178.7，糖上碳信号：61.1，69.0，73.0，75.8，77.2，101.4.

B、牛蒡苷元(arctigenin)----HPLC图谱主峰4：

[式(I)中R₃、R₃’＝甲氧基，R₄＝羟基、R₄’＝甲氧基，R₅、R₅’＝氢]

1、性状：无色棱柱状结晶，熔点：98-99.5℃，分子式C₂₁H₂₄O₆，分子量372，UVλ_max(EtOH)＝280，230，211.

2、核磁共振氢谱数据：测定条件：Vanian Unit INOVA 400/54，溶剂：CDCl₃

δppm：2.46(1H，m)；2.55(2H，m)；2.62(1H，m)；2.89(2H)；3.80，3.80，3.83(各3H，s，3×OCH₃)；3.90(1H，m)；4.13(1H，m)；6.45(1H，s)；6.53(1H，d，J＝8.0Hz)；6.60(1H，d，J＝8.0Hz)；6.63(1H，s)；6.74(1H，dd，J＝8.0Hz)；6.82(1H，dd，J＝8.0Hz)。

3、核磁共振碳谱数据：

测定条件：Vanian Unit INOVA 400/54，溶剂：CDCl₃δppm：34.0，37.4，40.5，46.0，55.3、55.3、55.4(3xOCH₃)，70.8，111.1，111.4，111.6，113.9，120.1，121.5，129.0，130.4，144.1，146.4，147.3，148.6，178.3。

C、拉帕酚C(lappaol C)------HPLC图谱主峰2

[式(I)中R₃、R₃’＝甲氧基，R₄、R₄’＝羟基，R₅＝氢、R₅’＝[1-(3’-甲氧基-4’-

               羟基)苯基]-1，3-丙二醇-2-基]

1、性状：

白色粉末，分子式C₃₀H₃₄O₁₀，分子量554，高分辨质谱HR-FAB+给出精确分子量555.2238(计算值：C₃₀H₃₄O₁₀+H＝555.2230)。EI-MS m/z(70eV)：536(M⁺-H₂O)，518(82，M⁺-2H₂O)，506，298，137。UVλ_max(MeOH)＝280，228，214。IR^KBr：3407，1758，1605，1517，1460，1274，1028cm^-1。

2、核磁共振氢谱数据：测定条件：Varian Unit INOVA 400/54溶剂：CD₃COCD₃，CD₃COCD₃+D₂O

拉帕酚C的氢谱及¹HCOSY

质子	拉帕酚C(C3D6O+D2O)	1HCOSY
			2’	6.43(1H，d，J＝2.0Hz)
5’
			6’	6.60(1H，dd，J＝8.0，2.0Hz)
7’	2.38(1H，dd)，2.48(1H，dd)	8’-H

8’	2.34(1H，m)	7’-H，9’-H
			9’	3.70-4.00(2H，m)	8’-H
2	6.62(1H，d，J＝2.0Hz)
			5	6.70(1H)
6	6.65(1H)
			7	2.75(1H，dd，J＝14.0，5.6Hz)，2.92(1H，dd，J＝14.0，7.2Hz)
8	2.58(1H，m)
			9
2”	6.77(1H，d)
			5”	6.77(1H，)
6”	6.65(1H，dd，J＝8.0，2.0Hz)
			7”	5.16(1H，d，J＝4.8Hz)	8”-H
8”	3.45(1H，m)	7”-H，9”-H
			9”	3.40-3.80(2H，m)	8”-H
OCH3	3.70(3H，s)
				3.75(3H，s)
	3.78(3H，s)

3、拉帕酚C的碳谱及HMQC、HMBC谱

质子	拉帕酚H(C3D6O)	HMQC	HMBC
				1’	129.5		7’-H
2’	110.9	6.43(1H，d，J＝2.0Hz)	7’-H
				3’	144.0
4’	145.9
				5’	126.7		8”-H
6’	123.9	6.60(1H，dd，J＝8.0，2.0Hz)	7’-H
				7’	38.1	2.38(1H，dd)，2.48(1H，dd)	8’-H，2’，6’-H2
8’	42.2	2.34(1H，m)	9’-H，7’-H
				9’	71.7	3.70-4.00(2H，m)	8’-H
1	130.7		7”-H
				2	113.7	6.62(1H，d，J＝2.0Hz)	7-H，5，6-H
3	148.3		OCH3，2-H
				4	145.7		5-H
5	115.6	6.70(1H)
				6	122.6	6.65(1H)	7-H
7	34.9	2.75(1H，dd，J＝14.0，5.6Hz)2.92(1H，dd，J＝14.0，7.2Hz)	8-H，2，6-H
				8	46.7	2.58(1H，m)	7-H
9	179.7		8-H
				1”	135.9		7”-H
2”	110.9	6.77(1H，d)	7”-H

3”	148.2		OCH3，2”-H
				4”	147.6
5”	114.8	6.77(1H，d，)	6”-H
				6”	119.6	6.65(1H，dd)	7”-H，5”-H
7”	73.7	5.16(1H，d，J＝4.8Hz)	8”-H，2”，6”-H
				8”	51.0	3.45(1H，m)	7”-H，9”-H
9”	63.7	3.40-3.80(2H，m)	7”-H
				OCH3	56.0	3.70(3H，s)
	56.1	3.75(3H，s)
					56.1	3.78(3H，s)

D、帕酚H(lappaol H)-----HPLC图谱主峰1

[式(I)中R₃、R₃’＝甲氧基，R₄、R₄’＝羟基，R₅、R₅’＝[1-(3’-甲氧基-4’-羟基)苯基]-1，3-丙二醇-2-基]

1、性状：

白色粉末，分子式C₄₀H₄₆O₁₄，分子量750，高分辨质谱HR-FAB+给出精确分子量751.2968(计算值：C₄₀H₄₆O₁₄+H＝751.2966)。UVλ_max(MeOH)＝281，229，214。IR^KBr：3411，1754，1603，1517，1461，1276，1029cm^-1。

2、核磁共振氢谱数据：

测定条件：Varian Unit INOVA 400/54

溶剂：CD₃COCD₃，CD₃COCD₃+D₂O

拉帕酚H的氢谱及¹HCOsy谱

质子	拉帕酚H(C3D6O)	1HCOSY
			2’	6.47(1H，d，J＝2.0Hz)	OCH3

5’
			6’	6.55(1H，d，J＝2.0Hz)
7’	2.37(1H，dd)，2.49(1H，dd)
			8’	2.35(1H，m)	9’-H2
9’	3.60-4.20(2H，dd)	8’-H
			2	6.61(1H，d，J＝1.6Hz)	OCH3
5
			6	6.55(1H，d，J＝1.6Hz)
7	2.70(1H，dd，J＝14.0，6.0Hz)2.79(1H，dd，J＝14.0，5.2Hz)	8-H
			8	2.45(1H，m)	7-H
9
			2”	6.81(1H，d，J＝2.0Hz)	OCH3
5”	6.64(1H，d，J＝8.0Hz)
			6”	6.72(1H，d，J＝8.0，2.0Hz)
7”	5.20(1H，d，J＝6.0Hz)	8”-H
			8”	3.47(1H，m)	7”-H
9”	3.60-4.20(2H，dd)
			2	6.82(1H，d，J＝1.6Hz)	OCH3
5	6.69(1H，d，J＝8.0Hz)
			6	6.74(1H，dd，J＝8.0，1.6Hz)
7	5.25(1H，d，J＝5.6Hz)	8-H
			8	3.47(1H，m)	7-H
9	3.60-4.20(2H，dd)
			OCH3	3.66(3H，s)
	3.70(3H，s)
				3.72(3H，s)
	3.73(3H，s)

1、拉帕酚H的碳谱及HMQC、HMBC谱

质了	拉帕酚H(C3D6O)	HMQC	HMBC
				1’	129.2		7’-H
2’	111.2	6.47(1H，d，J＝2.0Hz)
				3’	144.2
4’	146.0
				5’	126.7		8”-H
6’	124.2	6.55(1H，dd，J＝2.0Hz)

7’	38.5	2.37(1H，dd)2.49(1H，dd)	2’，6’-H2
				8’	41.8	2.35(1H，m)	9’-H2
9’	71.6	3.60-4.20(2H，dd)	7’-H
				1	129.8		7-H
2	111.9	6.61(1H，d，J＝1.6Hz)
				3	144.3
4	146.1
				5	126.9		8-H
6	125.2	6.56(1H，d，J＝1.6Hz)
				7	35.2	2.70(1H，dd，J＝14.0，6.0Hz)2.79(1H，dd，J＝14.0，5.2Hz)	2，6-H2
8	46.9	2.45(1H，m)
				9	179.2
1”	136.3		7”-H
				2”	110.9	6.81(1H，d，J＝2.0Hz)	7”-H
3”	148.2
				4”	147.7
5”	114.9	6.64(1H，d，J＝8.0Hz)
				6”	119.8	6.72(1H，d，J＝8.0，2.0Hz)	7”-H
7”	74.1	5.20(1H，d，J＝6.0Hz)	8”-H，2”，6”-H
				8”	51.2	3.47(1H，m)	7”-H
9”	63.1	3.60-4.20(2H，dd)	8”-H
				1	136.3		7-H
2	111.0	6.82(1H，d，J＝1.6Hz)	7-H
				3	148.5
4	147.7
				5	114.9	6.69(1H，d，J＝8.0Hz)
6	119.9	6.74(1H，dd，J＝8.0，1.6Hz)	7-H
				7	74.1	5.25(1H，d，J＝5.6Hz)	8-H，2，6-H
8	52.1	3.47(1H，m)	7-H
				9	63.1	3.60-4.20(2H，dd)	8-H
OCH3	56.1	3.66(3H，s)
					56.1	3.70(3H，s)
	56.3	3.72(3H，s)
					56.3	3.73(3H，s)

附图说明：图1是牛蒡苷(arctiin)及牛蒡苷元(arctigenin)、拉帕酚C(lappaol C)、拉帕酚H(lappaol H)、混合物的HPLC图。

哺乳类高血糖动物实验证明，式(I)的化合物化合物均具有显著降低血糖作用。数据见表2。

2、(I)式化合物的R₃、R₄、R₅、R₃’、R₄’、R₅’中存在羟基时，通过羟基衍生出的衍生物及其制备方法和在制备治疗哺乳类动物高血糖的药物中的用途。

R₃、R₄、R₅、R₃’、R₄’、R₅’为羟基的(I)式化合物，可呈药理或生理允许碱的溶剂化物或盐(包括加成盐)的形式。这些盐包括、但不仅限于以下盐物质：碱金属或碱土金属，如钠、钾、钙或镁盐或有机碱(如三烷基胺、二苄基胺，乙醇胺)的盐。

按照常规方法，可将R₃、R₄、R₅、R₃’、R₄’、R₅’为羟基的(I)式化合物与无毒、药理或生理允许的碱制成盐，与碱金属成盐如钠盐或钾盐，或与碱土金属成盐，如钙盐。

R₃、R₄、R₅、R₃’、R₄’、R₅’为羟基的(I)式化合物，可呈与有机酸形成酯的前药形式。

R_x为具有1至4个碳原子的烷基，如甲基、乙基、丙基、丁基、异丙基、异丁基等或芳基、芳烷基等，如苯基、苯甲基、或取代芳基或芳烷基。

R₃、R₄、R₅、R₃’、R₄’、R₅’为羟基的(I)式化合物可与相应的羧酸(或有反应能力的衍生物)酯化制得。特别适合作上述羧反应的有反应能力的衍生物是一些酸卤化物，首先是氯化物和溴化物，其次为酸酐例如混合酸酐等。酯化在一种惰性溶剂中进行，特别适合的溶剂是醚，如乙醚、正丁醚、四氯呋喃(THF)、二恶烷或苯甲醚酮、如丙酮、丁酮或环已酮；酰胺，如二甲基甲酰胺或磷酸-六甲基三酰胺；碳氢化合物，如苯、甲苯或二甲苯，囟代烃，例如四氯化碳或四氯乙烯，亚砜例如二甲亚砜或环丁砜。为了同有利地共沸蒸馏除去酯化时生成的水份，可使用与水不可混合的溶剂。有时也可用过量的有机碱例如吡啶、喹啉或三乙胺作为酯化溶剂。反应温度通常在-50℃和250℃之间，最好在-20℃和80℃之间。在此温度下，酯化反应通常在15分钟至48小时后结束。

各酯化作用的反应条件完全取决于所用原料的性质。因此游离的羧酸和游离的酚通常在强酸、例如无机酸如盐酸或硫酸存在下进行反应。优先选用的反应方式是一种酸酐或特别是一种酰基氯和酚进行反应，最好在碱性介质下进行。在这里作为碱，特别重要的有：碱金属氢氧化物，例如氢氧化钠或氢氧化钾，碱金属碳酸盐或碳酸氢盐，例如碳酸钠，碳酸氢钠，碳酸钾或碳酸氢钾，碱金属醋酸盐，如醋酸钠或醋酸钾，碱土金属氢氧化物，如氢氧化钙或有机碱，例如三乙胺，吡啶，二甲基吡啶，甲基乙基氮杂苯或喹啉。

哺乳类高血糖动物实验证明，R₃、R₄、R₅、R₃’、R₄’、R₅’为羟基的(I)式化合物的衍生物均具有显著降低血糖作用。数据见表2。

3、混合物及制备和用途

本发明提供的由(I)式化合物组成的混合物，其特征为该混合物由权利要求4所述任意两种或两种以上化合物组成，且任意两种或两种以上化合物的含量之和大于或等于总固体量的50％。

上述由(I)式化合物组成的混合物可以通过人工合成制备，也可以从植物(如菊科植物牛蒡Arctium lappa L.的干燥成熟果实)中制备。从植物中制备可以采用流程图1或流程图2得到。

方法1：

a、称取菊科植物牛蒡Arctium lappa L.的干燥成熟果实，乙醇浸渍24小时，回流提取；

b、过滤，合并滤液，回收乙醇浓缩；

c、静置，冷却至室温后，抽滤，得析出物；

d、析出物以乙醇20倍量热溶，200目滤布过滤，滤液减压浓缩至干，真空干燥，得混合物。

方法2：

a、称取菊科植物牛蒡Arctium lappa L.的干燥成熟果实，乙醇浸渍24小时，回流提取；

b、过滤，合并滤液，回收乙醇浓缩至相对密度1.04(75℃)；

c、静置，冷却至室温后，抽滤，得析出物；

d、析出物通过D101大孔吸附树脂，10倍量水洗脱，再以10-20倍量的乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液。

e、将乙醇洗脱液浓缩至浸膏，真空干燥，得到混合物。

附图说明：图2是方法1的工艺流程图。图3是方法2的工艺流程图。

所得到的混合物可以下述方法进行质量控制。

取混合物约50mg，加乙醇5ml及氢氧化钠试液3滴，在水浴上加热2∽3分钟，放冷，过滤，滤液滴加氯化铁试液1∽2滴，溶液应呈绿蓝色或蓝绿色；取混合物约50mg，加间苯三酚乙醇溶液(1→200)1ml，振摇使溶解，挥去乙醇，残留物加盐酸2∽3滴，显紫棕色或紫红色。

含量测定色谱条件与系统适用性试验：用十八烷基硅胶键合硅胶为填充剂；甲醇-水(1∶1.1)为流动相；检测波长为280nm.理论板数按牛蒡苷计应不小于1500。牛蒡子苷对照品溶液：精密称取经在五氧化二磷干燥器中减压干燥至24小时牛蒡子苷对照品适量，用甲醇制成每1ml含500μg的溶液，作为牛蒡子苷对照品溶液；牛蒡苷元对照品溶液：精密称取牛蒡苷元对照品适量，用甲醇制成每1ml含400μg的溶液，作为牛蒡苷元对照品溶液；拉帕酚C对照品溶液：精密称取拉帕酚C对照品适量，用甲醇制成每1ml含200μg的溶液，作为拉帕酚C对照品溶液；拉帕酚H对照品溶液：精密称取拉帕酚H对照品适量，用甲醇制成每1ml含200μg的溶液，作为拉帕酚H对照品溶液。精密称取混合物适量(约50mg)，置于50ml量瓶中，加甲醇使溶解并稀释至刻度，作为供试品溶液。分别精密吸取上述对照品溶液和供试品溶各10μl，注入液相色谱仪，记录色谱图.在供试品色谱图中，分别量取与牛蒡苷对照品溶液、牛蒡苷元对照品溶液、拉帕酚C对照品溶液、拉帕酚H对照品溶液主峰保留时间一致色谱峰峰面积，按外标法，分别计算牛蒡甙(arctiin)及牛蒡甙元(arctigenin)、拉帕酚C(lappaol C)、拉帕酚H(lappaol H)的含量.在混合物中上述四种物质的含量之和以牛蒡苷(C₂₇H₃₄O₁₁)计，应大于混合物总量的50％。

与业已报导的牛蒡子和牛蒡子乙醇提物比较，上述混合物的新颖性，首先体现为组成上述混合物的化学成分类型和化学结构清楚，具体地说为具有(I)式的化合物，更具体地说为牛蒡甙(arctiin)及牛蒡甙元(arctigenin)、拉帕酚C(lappaol C)、拉帕酚H(lappaol H)；其次，体现为制定了混合物的质量控制指标和方法，因此可使工业化生产具备可控性。

哺乳类高血糖动物实验证明，(I)式单一化合物以及由(I)式单一化合物组成的混合物均有显著降糖效果，但单一化合物之间、单一化合物与混合物之间的降糖效果无显著差异，说明(I)式的单一化合物之间没有相互抑制或协同增效作用，因此，它们可以任意比例混合体作为降糖药物的活性成分，达到治疗有效量即可。数据见表2∽8。

单次灌胃给予上述混合物对四氧嘧啶所致高血糖小鼠具有显著的降血糖作用，并呈剂量依赖性，数据见表3；多次灌胃给予上述混合物对四氧嘧啶所致高血糖大鼠、小鼠具有显著的降血糖作用，并呈剂量依赖性，数据见表4∽5；单次灌胃给予上述混合物可对抗外源葡萄糖引起小鼠血糖升高，作用非常显著，数据见表6；单次灌胃给予上述混合物对四氧嘧啶和蔗糖所致高血糖小鼠具有显著的降血糖作用，并呈剂量依赖性，数据见表7；单次灌胃给予上述组合物对肾上腺素所致小鼠升血糖具有显著的对抗作用，数据见表8。

组成上述混合物的化合物可以人工合成得到，也可以直接来源于植物，但从商业价值上比较，混合物直接来源于植物，制备方法简便，易于工业化生产制备，产品收率高，成本低。因此，从降低成本的角度考虑，混合物可从中药牛蒡子及其它含有上述化合物的植物中提取制备。

4、(I)式化合物及其衍生物或混合物与药用载体组成的药物组合物以及制备这类组合物的方法。这类组合物能有效地治疗哺乳类动物高血糖疾病。

药用时，含有(I)式的化合物及其衍生物或混合物化合物用药方式可有口服，肠胃外用药，喷吸，直肠用药或局部用药，且采用药物组合物或配方形式给药(如粉剂，粒剂，片剂，丸，胶囊，注射液，糖浆，乳剂，酏剂，悬浮液，溶液等)，其中可单独用至少一种含有(I)式的化合物及其衍生物或混合物，或与药用载体、佐药、媒介物、赋形剂和/或稀释剂混用。药物组合物可按常规方法配制。所谓肠胃外给药，包括皮下注射，静脉注射，肌肉注射，腹膜内注射或输液。可注射制剂，如无菌注射水或油悬浮液可按已知方法用适宜分散剂或润湿剂和悬浮剂配制。无菌注射制剂也可为无菌注射液或悬浮液，其中用肠胃外无毒稀释剂或溶剂，如水溶液。可用的合适载体或溶剂有水，林格氏溶液和等渗氯化钠液。另外，无菌不易挥发也可作为溶剂或悬浮介质。为此可用任何牌号的不易挥发油或脂肪酸，包括天然的，合成的或半合成脂肪油或酸，以及天然的，合成的或半合成的单、双或三甘油酯。

直肠用药的栓剂可通过将药与合适非刺激性赋形剂(如用可可油和聚乙二醇)混合而制成，所述赋形剂在常温下呈固体，但在直肠温度下呈液体，因此可在肠中溶化而释放出药物。口服固体剂型包括上述粉、粒、片、丸和胶囊。在这些固体剂型中，活性化合物可混用至少一种添加剂，如蔗糖、乳糖、纤维素、甘露糖醇、麦芽糖、糊精、淀粉、琼脂、藻酸盐、几丁质、脱乙酰壳多糖、果胶、黄蓍胶、阿胶、明胶、胶原、酪蛋白、清蛋白以及合成或半合成聚合物或甘油酯。如常见的那样，这些剂型可包括惰性载体以外的其它物质，如润滑剂，如硬脂酸镁，防腐剂，如山梨酸，抗氧化剂，如抗坏血酸，α-生育酚和半胱氨酸，崩解剂，粘合剂，增稠剂，缓冲剂，增甜剂，香料和增香剂。片和丸可另外涂层而制得。

口服液体剂型包括药用乳剂，糖浆，酏剂，悬浮剂，溶液，含现有技术中常用的稀释剂，如水。

任何特定病人的具体剂量取决于各种因素，包括年龄，体重，一般健康状况，性别，饮食，服药时间，服药方式，分泌速度，药物组合和具体病情。剂量随接受治疗的疾病，症状，对象和用药途径而变化，用作成人治疗制剂时，口服日剂量100-1500mg或静脉注射50-600mg，分2-3次用药。例如，用治疗成人的大部分糖尿病时，优选以适当量，如约200-600mg/天口服活性成分或静脉注射约100-300mg活性成分。优选每天分2或3次等剂量服用活性成分。

下述实例详述本发明，并不能理解为是对本发明的限制。

实例

以下配方例、制备例和实验例旨在详述本发明，但决不应理解为是对本发明的任何限制。

配方例

本发明中所述的(I)式化合物及其衍生物或混合物用作糖尿病治疗用药时，可采用以下配方：

1、牛蒡苷胶囊

(1)牛蒡苷                                50mg

(2)玉米淀粉                              100mg

(3)羧甲基淀粉钠                          20mg

(4)硬脂酸镁                              10mg

                     1个胶囊             180mg

(1)、(2)、(3)和一半的(4)混合制粒。向粒中加入(4)的剩余部分，再将全部制剂填入明胶胶囊中。

2、牛蒡苷片

(1)牛蒡苷                                50mg

(2)玉米淀粉                              140mg

(3)乳糖                                  15mg

(4)羧甲基淀粉钠                          10mg

(5)微晶纤维素                            10mg

(6)硬脂酸镁                              5mg

                     1片                 230mg

(1)、(2)、(3)(4)、三分之二的(5)和(6)混合制粒。向粒中加入(5)和(6)的剩余部分，再压制成片。

3、牛蒡苷元胶囊

(1)牛蒡苷                                50mg

(2)玉米淀粉                              100mg

(3)羧甲基淀粉钠                          20mg

(4)硬脂酸镁                              10mg

                     1个胶囊             180mg

(1)、(2)、(3)和一半的(4)混合制粒。向粒中加入(4)的剩余部分，再将全部制剂填入明胶胶囊中。

4、牛蒡苷元片

(1)牛蒡苷元                              50mg

(2)玉米淀粉                              140mg

(3)乳糖                                  15mg

(4)羧甲基淀粉钠                          10mg

(5)微晶纤维素                            10mg

(6)硬脂酸镁                              5mg

                     1片                 230mg

(1)、(2)、(3)(4)、三分之二的(5)和(6)混合制粒。向粒中加入(5)和(6)的剩余部分，再压制成片。

5、牛蒡苷元钠注射液

(1)牛蒡苷元钠                            50mg

(2)肌醇                                  60mg

(3)苄醇                                  20mg

                     1安瓿               130mg

将(1)、(2)和(3)溶于蒸馏水中制成2ml体积的注射液，再注入安瓿中。整个工艺在无菌条件下进行。

6、混合物胶囊

(1)混合物                                83mg(含活性成分50mg)

(2)玉米淀粉                              77mg

(3)羧甲基淀粉钠                          10mg

(4)硬脂酸镁                              10mg

                     1个胶囊             180mg

(1)、(2)、(3)和一半的(4)混合制粒。向粒中加入(4)的剩余部分，再将全部制剂填入明胶胶囊中。

7、混合物片

(1)混合物                                83mg(含活性成分50mg)

(2)玉米淀粉                              107mg

(3)乳糖                                  15mg

(4)羧甲基淀粉钠                          10mg

(5)微晶纤维素                            10mg

(6)硬脂酸镁                              5mg

                     1片                 230mg

(1)、(2)、(3)(4)、三分之二的(5)和(6)混合制粒。向粒中加入(5)和(6)的剩余部分，再压制成片。

制备例1：称取菊科植物牛蒡Arctium Lappa L.的干燥成熟果实即牛蒡子药材2.0kg，40％乙醇浸渍24小时后，分别以6000ml 40％乙醇回流提取3次，首次回流1.5小时，其余回流1小时。过滤，合并滤液，回收乙醇浓缩至约2000ml，相对密度1.04(75℃C)，静置，析出，冷却至室温后，抽滤，析出物以30％乙醇20倍量于40-50℃热溶，200目滤布过滤，滤液减压浓缩至干，真空干燥，得黄褐色粉末状产物132.8g(混合物)。

制备例2：称取菊科植物牛蒡Arctium Lappa L.的干燥成熟果实即牛蒡子药材2.0kg，40％乙醇浸渍24小时后，分别以6000ml 40％乙醇回流提取3次，首次回流1.5小时，其余回流1小时，过滤，合并滤液，回收乙醇浓缩至相对密称约1.04(75℃)，静置，析出，析出物用水混悬后，通过D101大孔吸附树脂，以十倍量的2000ml去离子水洗脱，继而以40％乙醇洗脱3000ml，收集乙醇洗脱液，浓缩，浸膏真空干燥，得黄褐色粉末状产物124g(混合物)。

制备例3

取牛蒡甙(arctiin)5.7克，牛蒡甙元(arctigenin)2.4克、拉帕酚C(lappaol C)2克、拉帕酚H(lappaol H)1.8克，混合均匀，得类白色结晶性粉末11.9g(混合物)。

制备例4  2-甲氧基-4-[β-(3′，4′-二甲氧基苯甲基)-γ-丁内酯-α-基]甲基苯酚钠(牛蒡苷元钠)

在10℃以下将30％NaOH溶液1ml加入由乙酸乙酯(30ml)和α-(3-甲氧基-4-羟基)苯甲基-β-(3′，4′-二甲氧基)苯甲基-γ-丁内酯(1.0g)组成的溶液中，搅拌30分钟，将反应混合物，过滤，过滤物乙酸乙酯洗涤，乙醚洗涤，溶于18ml丙酮中，蒸发大部分溶剂，加入乙醚10ml搅拌，过滤，干燥，得白色固体0.54g。mp：54-60℃。

制备例5  2-甲氧基-4-[β-(3′，4′-二甲氧基苯甲基)-γ-丁内酯-α-基]甲基苯酚钾(牛蒡苷元钾)

在10℃以下将30％KOH溶液0.5ml加入由乙酸乙酯(15ml)和α-(3-甲氧基-4-羟基)苯甲基-β-(3′，4′-二甲氧基)苯甲基-γ-丁内酯(1.0g)组成的溶液中，搅拌30分钟，将反应混合物，过滤，过滤物乙酸乙酯洗涤，乙醚洗涤，溶于18ml丙酮中，蒸发大部分溶剂，加入乙醚10ml搅拌，过滤，干燥，得白色固体0.4g。mp：56-58℃。

制备例6  α-(3-甲氧基-4-乙酰氧基)苯甲基-β-(3′，4′-二甲氧基)苯甲基-γ-丁内酯(牛蒡苷元乙酯)

在10℃以下将乙酰氯0.4ml加入由四氢呋喃(10ml)、吡啶(0.5ml)和α-(3-甲氧基-4-羟基)苯甲基-β-(3′，4′-二甲氧基)苯甲基-γ-丁内酯(1.0g)组成的无水溶液中，室温搅拌5小时停止反应，加入水10ml，减压蒸干溶剂，加入乙酸乙酯提取2次，合并乙酸乙酯层，水洗至中性，无水Na₂SO₄干燥，过滤，减压蒸干溶剂，加入乙酸乙酯1ml，乙醚20ml，搅拌，过滤，乙醚洗涤，干燥，残余物用硅胶柱色谱纯化得白色固体0.8g。mp：60-62℃。

制备例7  α-(3-甲氧基-4-苯甲酰氧基)苯甲基-β-(3′，4′-二甲氧基)苯甲基-γ-丁内酯(牛蒡苷元苯甲酯)

在10℃以下将本甲酰氯0.4ml加入由四氢呋喃(10ml)、吡啶(0.5ml)和α-(3-甲氧基-4-羟基)苯甲基-β(3′，4′-二甲氧基)苯甲基-γ-丁内酯(1.0g)组成的无水溶液中，室温搅拌5小时停止反应，加入水10ml，减压蒸干溶剂，加入乙酸乙酯提取2次，合并乙酸乙酯层，水洗至中性，无水Na₂SO₄干燥，过滤，减压蒸干溶剂，加入乙酸乙酯1ml，乙醚20ml，搅拌，过滤，乙醚洗涤，干燥，残余物用硅胶柱色谱纯化得白色固体0.83g。mp：70-76℃。

(I)式化合物及其衍生物或混合物列于表1.

                                   表1

物质编号	R3	R4	R5	R3’	R4’	R5’
							1	-O-CH3	葡萄糖氧苷基	-H	-O-CH3	-O-CH3	-H
2	-O-CH3	-OH	-H	-O-CH3	-O-CH3	-H
							3	-O-CH3	-OH	-H	-O-CH3	-O-CH3	1-(3’-甲氧基-4’-羟基)苯基]-1，3-丙二醇-2-基
4	-O-CH3	-OH	1-(3’-甲氧基-4’-羟基)苯基]-1，3-丙二醇-2-基	-O-CH3	-O-CH3	1-(3’-甲氧基-4’-羟基)苯基]-1，3-丙二醇-2-基
							5	-O-CH3	-ONa	-H	-O-CH3	-O-CH3	-H
6	-O-CH3	-OK	-H	-O-CH3	-O-CH3	-H
							7	-O-CH3	-O-乙酰基	-H	-O-CH3	-O-CH3	-H
8	-O-CH3	-O-苯甲酰基	-H	-O-CH3	-O-CH3	-H
							9	按制备例1得到的混合物
10	按制备例3得到的混合物

实验例1

本发明所述的(I)式化合物及其衍生物或混合物对哺乳类动物高血糖的降低作用。

〖方法〗

使用昆明种小鼠(雌雄兼用)。在实验前禁食4小时，尾静脉给予四氧嘧啶65mg/kg，进食48后，禁食4小时，测定血糖。选取高血糖动物，按血糖高低，随机均分组，分组后分别口服给药，以口服50％聚乙二醇200液(简称“药配液”)组为模型组，以口服格列比嗪(1.95mg/kg)组为阳性对照组，以正常动物(未给予四氧嘧啶)口服药配液为正常组，在测量的每个点测定前4小时禁食，然后，分别取血测定血糖值。通过比较给药组与模型组的血糖降低值来评价药物对高血糖的降低作用。

〖结果〗(I)式化合物及其衍生物或混合物进行实验所得到的结果列于表2。

                            表2

组别	剂量mg/(kg·d)	血糖mmol/L	降糖效果
				模型组格列吡嗪正常组物质1物质1物质1物质2物质2物质2物质3物质3物质3物质4物质4物质4物质9物质9物质9物质10物质10物质10	等量药配液1.9等量药配液100200400100200400100200400100200400105210420105210420	23.78±5.2013.61±3.94***7.25±1.21***15.98±4.77**14.38±3.58***12.76±4.10***16.12±3.95**15.25±6.62**13.57±4.93**16.60±3.20**15.12±4.32***13.11±4.62***16.94±4.98**14.97±5.26***13.90±3.90***15.32±4.87**14.59±5.13***12.55±2.88***15.17±3.9**14.21±5.62***12.38±3.99***	+++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++
与模型组比*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001

                                续表2

组别	剂量mg/(kg·d)	血糖mmol/L	降糖效果
				模型组格列吡嗪正常组物质5物质5物质5物质6物质6物质6	等量药配液1.9等量药配液100200400100200400	25.66±6.5615.78±4.52***6.54±1.34***17.54±4.72*15.98±3.08***13.21±4.50***16.93±3.25**14.88±5.66***13.13±4.93***	++++++++++++++++++++++

物质7物质7物质7物质8物质8物质8

100200400100200400

17.20±4.64**15.78±4.06***13.94±4.77***17.44±4.02**15.36±4.86***14.58±3.50***

++++++++++++++++

实验例2  由制备例1得到混合物对哺乳类动物高血糖的降低作用。

〖方法〗

使用昆明种小鼠(雌雄兼用)或SD大鼠(雌雄兼用)。在实验前禁食4小时，尾静脉给予四氧嘧啶65mg/kg，进食48后，禁食4小时，测定血糖。选取高血糖动物，按血糖高低，随机均分组，分组后分别口服给药，以口服50％聚乙二醇200液(简称“药配液”)组为模型组，以口服格列比嗪(1.95mg/kg)组为阳性对照组，以正常动物(未给予四氧嘧啶)口服药配液为正常组，在测量的每个点测定前4小时禁食，然后，分别取血测定血糖值。通过比较给药组与模型组的血糖降低值来评价药物对高血糖的降低作用。

〖结果〗由制备例1得到混合物进行实验所得到的结果列于表3∽5。

表3  单次口服不同剂量的混合物对小鼠高血糖的降低作用

组别	剂量(活性成分)mg/kg	血糖mmol/L	降糖效果
				模型组格列吡嗪正常组混合物小混合物中混合物大	等量药配液1.9等量药配液105210420	11.85±2.063.04±1.31***5.66±1.73***6.90±1.80**5.90±2.18**4.05±0.96***	+++++++++++++
与模型组比**P＜0.01，***P＜0.001

表4  连续口服不同剂量的混合物7天对大鼠高血糖的降低作用

组别	剂量(活性成分)mg/(kg·d)	血糖mmol/L	降糖效果
				模型组格列吡嗪	等量药配液1.9	8.24±0.945.60±1.10***	+++

正常组混合物小混合物中混合物大	等量药配液53105210	4.50±0.84***7.3±1.93*6.7±0.60**6.12±0.96***	+++++++++
				与模型组比*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001

表5  连续口服不同剂量的混合物7天对小鼠高血糖的降低作用

组别	剂量(活性成分)mg/(kg·d)	血糖mmol/L	降糖效果
				模型组格列吡嗪正常组混合物小混合物中混合物大	等量药配液1.9等量药配液105210420	28.57±9.516.38±8.3***6.02±0.9***21.08±11.2*18.40±8.5**15.49±8.7***	++++++++++++
与模型组比*P＜0.05，*P＜0.01，***P＜0.001

实验例3  由制备例1得到混合物对小鼠腹腔注射葡萄糖后血糖及耐量曲线下面积的影响。

〖方法〗

使用昆明种小鼠(雌雄兼用)。在实验前禁食4小时，测定血糖值，以其血糖值作为零时(正常组)血糖值。随机均分组后分别口服给药，以口服50％聚乙二醇200液(简称“药配液”)组为模型组，以口服格列比嗪(1.95mg/kg)组为阳性对照组，口服给药后0.5小时再腹腔注射葡萄糖2g/kg，在腹腔注射葡萄糖后0.5、1.0、2.0小时，分别取血测定血糖值，并求出各组耐糖曲线下面积。通过比较给药组与模型组的血糖和耐糖曲线下面积来评价药物对高血糖的降低作用。

〖结果〗由制备例1得到混合物进行实验所得到的结果列于表6。

表6  口服混合物对小鼠腹腔注射葡萄糖后血糖及耐量曲线下面积的影响

组别	正常组	模型组	混合物			格列吡嗪
							剂量(活性成分)mg/kg	0	等量药配液	105	210	420	1.9

血糖mmol/L	0小时0.5小时1.0小时2.0小时	5.98±1.23---	-11.4±2.837.33±2.704.67±1.77	-8.99±3.26.24±1.84.53±1.9	-8.60±3.1*4.92±1.9**4.10±2.1	-7.97±3.1**4.42±1.7**3.60±1.7	-7.25±3.4***3.51±1.9***2.92±0.7**
								曲线下面积(cm)2		0	53.63	44.94*	39.66**	34.37**	30.21***
与模型组同时相比*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001

实验例4  由制备例1得到混合物对蔗糖和四氧嘧啶所致小鼠高血糖的降低作用

〖方法〗

使用昆明种小鼠(雌雄兼用)。在实验前禁食4小时，尾静脉给予四氧嘧啶65mg/kg，进食48后，禁食4小时，测定血糖值，该血糖值作为零时血糖值。选取高血糖动物，按血糖高低，随机均分组，分组后分别口服给药，以口服30％蔗糖水组为模型组，以口服阿卡波糖(7.5mg/kg)组为阳性对照组，口服给药后0.5、1.0小时，分别取血测定血糖值。通过比较给药组与模型组的血糖降低值来评价药物对高血糖的降低作用。

〖结果〗由制备例1得到混合物进行实验所得到的结果列于表7。

表7  口服混合物对蔗糖和四氧嘧啶所致小鼠高血糖的降低作用

组别	剂量	血糖mmol/L
					蔗糖+药物(活性成分)mg/kg	0h	0.5小时	1.0小时
	模型组阿卡波糖混合物混合物	30％蔗糖水+-----3.0+7.53.0+1053.0+210	18.85±5.8818.90±4.3019.58±4.4019.42±4.45	20.21±5.116.80±7.420.60±6.722.40±4.5					28.39±6.79.68±5.0***18.5±7.4*14.60±10.9**
与蔗糖组同时相比*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001

实验例5  由制备例1得到混合物对肾上腺素所致小鼠高血糖小鼠高血糖的降低作用

〖方法〗

使用昆明种小鼠(雌雄兼用)。在实验前禁食2小时，测定血糖值，该血糖值作为零时(正常组)血糖值。随机均分组后分别口服给药，以口服药配液组为模型组以口服格列比嗪(1.9mg/kg)组为阳性对照组，口服给药后0.5小时，腹腔注射(ip)肾上腺素200μg/kg，后各组分别于0.5、1.0、2.0小时分别取血测定血糖值。通过比较给药组与模型组的血糖降低值来评价药物对高血糖的降低作用。

〖结果〗由制备例1得到混合物进行实验所得到的结果列于表8。

表8  口服混合物对肾上腺素所致小鼠高血糖的降低作用

组别	剂量(活性成分mg·kg-1	血糖mmol/L
						0小时	0.5小时	1.0小时	2.0小时
		正常组模型组格列吡嗪混合物混合物混合物	--等量药配液1.9105210420	4.63±1.02***	12.92±3402.87±1.37***4.95±1.91***4.16±1.64***3.97±1.32**					5.58±2.342.32±0.44***3.10±0.81**3.83±1.47*2.99±1.27**	4.02±1.010.26±0.08***2.45±0.95*2.33±0.65**2.13±0.92**
与模型组同时相比*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001

可以理解，一个本领域的技术人员可以在不超出本发明范围的前提下改变上述具有代表性的实施例，但其结果基本相同。

由于在不背离本发明实质内容的前提下有许多不同的实施方案，应该认识到，本发明的范围不受上述具体实施例的限制，而仅受权利要求书的限制。

Claims (8)

1、式(I)的化合物在制备治疗哺乳类动物高血糖的药物中的用途，

其中，R₃、R₄、R₅、R₃′、R₄′、R₅′是氢或羟基或烷氧基或可取代的苯丙基，所述烷氧基为1至4个碳原子的烷氧基。

2、根据权利要求1所述的式(I)的化合物在制备治疗哺乳类动物高血糖的药物中的用途，其特征在于所述式(I)的化合物是α-(3R₃-4R₄-5R₅-)-苯甲基-β(3R₃′-4R₄′-5R₅′)-苯甲基-γ-丁内酯及其衍生物，其中所述R₃、R₄、R₅、R₃′、R₄′、R₅′是氢或羟基或烷氧基或可取代的苯丙基，所述衍生物为羟基衍生出的盐或酯。

3、根据权利要求2所述的式(I)的化合物在制备治疗哺乳类动物高血糖的药物中的用途，其特征在于：R₃、R₃′是烷氧基，R₄、R₄′是羟基或烷氧基，R₅、R₅′是氢或可取代的苯丙基，所述烷氧基为1至4个碳原子的烷氧基。

4、根据权利要求3所述的式(I)的化合物在制备治疗哺乳类动物高血糖的药物中的用途，其特征在于：R₃、R₃′是甲氧基，R₄′是甲氧基，R₄是葡萄糖氧苷基，R₅、R₅′是氢；或R₃、R₃′是甲氧基，R₄是羟基、R₄′是甲氧基，R₅、R₅′是氢；或R₃、R₃′是甲氧基，R₄是羟基、R₄′是甲氧基，R₅是氢、R₅′是[1-(3′-甲氧基-4′-羟基)苯基]-1，3-丙二醇-2-基；或R₃、R₃′是甲氧基，R₄是羟基、R₄′是甲氧基，R₅、R₅′是[1-(3′-甲氧基-4′-羟基)苯基]-1，3-丙二醇-2-基。

5、根据权利要求1-4任一项所述的式(I)的化合物在制备治疗哺乳类动物高血糖的药物中的用途，其特征在于：所述化合物衍生物是指R₃、R₄、R₅、R₃′、R₄′、R₅′是羟基时，羟基衍生出的钠盐、钾盐，或乙酸酯、苯甲酸酯。

6、根据权利要求1-4任一项所述的式(I)的化合物在制备治疗哺乳类动物高血糖的药物中的用途，其特征在于：所述化合物为牛蒡子提取物，包含两种或两种以上的式(I)化合物，其中所述化合物的含量之和大于或等于总固体量的50％。

7、根据权利要求6所述的式(I)的化合物在制备治疗哺乳类动物高血糖的药物中的用途，其特征在于：所述化合物与药用载体、赋形剂或稀释剂组成混合物。

8、根据权利要求1-4任一项所述的式(I)的化合物在制备治疗哺乳类动物高血糖的药物中的用途，其特征在于：所述化合物通过人工合成或从菊科植物牛蒡的干果实中获得。

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