CN1208620A - 一种含双歧杆菌和乳杆菌的组合物 - Google Patents
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Abstract
本发明提供一种含双歧杆菌和乳杆菌的组合物,该组合物由10—90%的低聚糖、5—85%的麦绿素、0—80%的螺旋藻、5—70%菌粉和0—30%的添加剂组成,本发明既能提供肠道有益菌促生物,又能提供有活力的双歧杆菌和乳杆菌或死菌全细胞和菌细胞部分组份提取物,使肠道微生态菌丛得到有效的调整与改善,达到调节免疫、抑制肿瘤、调节血脂、改善胃肠功能、延缓衰老等一系列治疗与保健作用。
Description
本发明涉及一种含双歧杆菌和乳杆菌的组合物。
从廿世纪以来，人类开始重视对人体微生态的研究，并应用于疾病的预防、治疗及保健。大量的研究表明，人体微生态环境的优劣与机体的健康状况密切相关，而在人体微生态的不同生态系统中，有关肠道微生态菌丛的基础性和开发性研究一直很活跃，因为无论是数量组成、还是生理功能，肠道菌丛都是最重要的机体微生态区域，它在机体营养、老化、癌变、免疫、感染等各个方面都扮演着重要的角色。在人体肠道数以百兆计的各类细菌中，双歧杆菌乳杆菌是广泛公认的有益菌，真杆菌则表现为有益性为主、兼有一定的致病性。因此对于双歧杆菌和乳杆菌的研究已成为微生态热的核心。
已知双歧杆菌是人体肠道菌群中最优势菌之一，也是新生儿肠道最早定植的菌群，它的主要功能可归纳为(1)抗腹泻与防便秘：其重要的生理作用之一是通过阻止外袭菌或病原菌的定植而维持良好的肠道菌丛状态，从而呈现出既治疗腹泻又防止便秘的双向调节功能；(2)抗感染作用；(3)免疫调节与抗肿瘤，主要表现为增加肠道IgA的水平，尤其是sIgA的浓度，另外，许多文献报告它的全细胞或细胞壁成份具有强化或促进对恶性肿瘤细胞的免疫性攻击作用；(4)合成维生素与解腐败物，对于腐败物的分解代谢既能体现出营养的作用，又能间接地参与抑癌和免疫调节作用，同时对调节脂类代谢亦有不可低估的作用；(5)调节血脂。
乳杆菌是人类最早认识的具有保健功能的原箱菌群，最典型的例子如发酵乳和酸奶，但真正认识其保健与治疗的作用是本世纪廿年代用人源性嗜酸乳杆菌治疗便秘和其它肠道疾病。已和乳杆菌能抑制病原菌和保护肠菌丛，除抑制代谢产物中的乙酸和乳酸外，还有类似于抗菌样物质的产物。在大剂量抗菌素治疗时(后)，肠道正常菌群被大量杀灭，而艰难芽胞梭菌过度繁殖后极易引起伪膜性肠炎，嗜酸乳杆菌既能控制该菌的过度繁殖，又能抑制其毒素的产生，从而起到保护肠道微生态的作用，另外乳杆菌还具有抗癌与免疫调节，调节血脂、促进乳糖代谢的作用。由于上述两种肠道菌对人体的健康起着非常重要的作用，所以，目前利用肠道微生态原理进行保健、治疗主要是以这两个菌为核心，综合国内外在该领域的研究现状，微生态制剂主要有：①以补充人体肠道内有益菌为目的的活菌制剂，②以给有益菌提供饲料使其自身增殖的有益菌促生物制剂，③上述两者相配伍的复合制剂三大类。
目前，国外的活菌制剂主要有双歧杆菌、乳杆菌、链球菌等制剂，其中除发酵乳为液态制剂外，绝大多数为粉状或固体制剂。国内的活菌制剂已达十余种，在实际应用中已发现这些活菌制剂用于调整或改善机体肠道微生态还存在着现有科学技术难以克服的局限性，如生产与保存中的存活率问题；选育菌种的传代、驯化特性，尤其是解决兼性厌氧特性问题，通过胃酸等屏障后的存活率和到达肠道的定植力问题；耐药性转移问题。有益促生物是另一种调整肠道微生态的途径，目前对这方面的研究与开发集中在对被称为是“双歧杆菌增殖因子”的低聚糖的利用上，但低聚糖对乳杆菌无显著的增殖效果。复合制剂是前述两种制剂的综合，效果优于二者。目前国际上已有低聚果糖辅以双歧杆菌或乳杆菌的制剂，但效果不显著，且局限在食品上。
本发明的目的在于既能提供人体自身肠道双歧杆菌和乳杆菌等有益菌特异性促生物，又提供有定植力的外源性双歧杆菌和乳杆菌以及它们的死菌全细胞、菌体组份提取物，达到迅速调整与改善肠菌丛、调整机体免疫力、延缓衰老、抑制肿瘤、调节血脂、改善胃肠功能的含双歧杆菌和乳杆菌的组合物。
为达到上述目的，本发明的含双歧杆菌和乳杆菌的组合物配方(按各成分占重量比)为：
低聚糖 10-90％
麦绿素 5-85％
螺旋藻 0-80％
菌 粉 5-70％
添加剂 0-30％
本发明所述的低聚糖系指新型的低聚糖，如低聚果糖、低聚木糖、异麦低聚糖、异构化乳糖、大豆低聚糖等，它们的重要特点是能被双歧杆菌等有益菌选择性利用，而不被其它绝大部分的肠道菌利用，人的消化道因无此类糖的消化酶也不能利用。组合物中低聚糖可以是上述各种新型低聚糖中的一种或数种混合。
经进行体外增殖效果实验，我们发现低聚果糖与低聚木糖对双歧杆菌的增殖作用很显著，因此低聚糖优选低聚果糖和低聚木糖，两者的混合比例(按重量％计)：低聚果糖为10-99％，低聚木糖为0-90％。
本发明所述的麦绿素和螺旋藻组分是国际上公认的新资源食品和功能性食品，它们除富含植物性蛋白外，还具有某些小分子的易吸收肽、氨基酸、β-胡萝卜素、维生素、酶类和矿物质等，同时还含有特定的低聚糖组分，其中螺旋藻提取物中还含有乳杆菌的特异性增殖因子，其增殖率达327％，实验表明，麦绿素和螺旋藻对双歧杆菌的体外增殖作用不大，但它们对嗜酸乳杆菌的增殖率却非常显著，0.2％(W/V)对嗜酸乳杆菌的增殖率以(D.C.W计)可达40％，0.4％和0.8％(W/V)的增殖率高达90％以上；0.2％(W/V)螺旋藻对嗜酸乳杆菌的增殖率(以D.C.W计)近70％，0.4％和0.8(W/V)组的增殖率高达120％。
本发明所述的菌粉可以是活双歧杆菌、活乳杆菌、死双歧杆菌全细胞、死乳杆菌全细胞、双歧杆菌提取物、乳杆菌提取物。活双歧杆菌和乳杆菌干粉系经工业发酵制备，死菌全细胞或菌细胞部分组份系生化分离技术提取；菌种包括人源型、野生型及其传代、驯化的变异株或亚型，可以是专性厌氧或兼性厌氧；双歧杆菌包括婴儿双歧杆菌(B.infantis)、长双歧杆菌(B.longum)、两歧双歧杆菌(B.bifidum)、青春双歧杆菌(B.adolessentis )、短双歧杆菌(B.breve)等；乳杆菌包括嗜酸乳杆菌(L.acidopbilus)、发酵乳杆菌(L.fermenti)、植物乳杆菌(L.plant)等；菌粉可以是活菌粉，也可以是死菌粉或相应提取物。
本发明所述的添加剂可以是酵母浸粉、各种粘合剂和各种崩解剂、固体果精、植物蛋白、动物奶粉、茶精、食用香精、食糖中的一种或数种组合。本发明可以是片剂、冲剂、胶囊剂、散剂、口服液或其它口服剂型。
本发明的特点是在促生物的基础配方上加经发酵纯化或生化分离技术制取的干菌粉，菌粉除活菌外，还富含这些有益菌的活性代谢产物，全细胞或菌细胞部份组份以及相应提取物，这些组份是公认的机体免疫调节剂，对增强机体的特异性和非特异性免疫功能有显著作用。尽管以低聚糖、麦绿素、螺旋藻为基础配方的促生组合物在改善肠菌丛状态以及各种治疗或保健方面已呈现出显著的作用，但含活菌或菌成份的促生物在上述功能或作用的表达时间、改善程度等方面有独到的特征，如我们以两组便秘老龄人(各15例)作服食观察，结果：本发明制品的受试组便秘解除时间平均为1.9天，而促生组合物组为2.9天；服食10天后停食，再次出便秘的时间，前者平均为5.8天，后者为3.7天；以含死菌全细胞或细胞提取物的促生组合物作大鼠免疫功能试验，结果受试大鼠的细胞免疫功能和巨噬细胞吞噬能力发生显著性改善的时间和程度均优于单纯促生物组。利用本发明既能提供肠道有益菌促生物、又提供活双歧杆菌和乳杆菌或其死的全细胞和菌细胞部分组份提取物，使肠道微生态菌丛得到有效的调整与改善，达到调节免疫、抑制肿瘤、调节血脂、改善胃肠功能，延缓衰老等一系列治疗与保健作用。
为了评价含活菌或死菌全细胞或菌细胞部份组份提取物制剂的安全性，进行了小鼠LD50、骨髓微核、精子畸变及Ames试验，证明本发明属无毒级物质，对体细胞无诱变作用，对生殖细胞无诱变致畸作用，无直接或间接的致突变作用，参见表3-表6。
表3 急性毒性试验结果
注：Horn′s法；LD50＞21.50g/kg B.W。
| 剂 量(g/kg) | 动物数(只) | 动物死亡数 | ||
| 雌 | 雄 | 雌 | 雄 | |
| 2.154.6410.0021.50 | 5555 | 5555 | 0000 | 0000 |
表4 小鼠骨髓微核试验
| 剂量(g/kg) | 动物数(只) | 受检嗜多染红细胞数(个) | 微核数(个) | 微核率(‰) | |
| 雌 | 雄 | ||||
| 00.681.352.705.4010.75环磷酰胺(0.06) | 5555555 | 5555555 | 10000100001000010000100001000010000 | 141516191415249 | 1.41.51.61.91.41.924.9** |
注：**空白对照组及各剂量组与环磷酰胺阳性组比较，P＜0.01
结果：对体细胞无诱变作用。
表5 小鼠精子畸形率的影响
| 剂量(g/kg) | 动物数(只) | 受检精子数(条) | 畸形精子数(条) | 畸形率(‰) |
| 02.705.4010.75环磷酰胺(0.04) | 55555 | 50005000500050005000 | 761409898364 | 15.2028.0019.6019.6072.30** |
注：**按Wicoxon序列检验结果，空白对照及各剂量组与环磷酰胺组比较，P＜0.01。
结果：配方组份高达10.75g/kg体重时，仍未发现诱变精子畸形作用。
表6 平皿掺入法检测结果(Ames试验)
注：1、TA97、TA102不加S9和TA102加S9的
| 受试物μg/皿 | TA97 | TA98 | TA100 | TA102 | ||||
| -S9 | +S9 | -S9 | +S9 | -S9 | +S9 | -S9 | +S9 | |
| 自然回变0.55505005000阳性对照Dexon叠氮钠MMC2-AF | 177152144147162168＞1000 | 167171162157172＞1000 | 363028322723＞1000 | 3129333229＞2000 | 193156170160162159＞1500 | 173182163167167＞1500 | 302293272289316270＞1500 | 312329314317306580±10 |
阳性物用敌克松50μg/皿。
2、TA97、TA98、TA100加S9的阳性物用2
-氨基芴5μg/皿。
3、TA100不加S9的阳性物用叠氮钠1.5μg/皿。
结果：本配方无论加或不加S9混合物，均未发现直接或间
接的致突变作用。
综上所述，含活或死的双歧杆菌、乳杆菌及其相应提取物的本发明有其独到的特征，经国内与国际相关文献库的联机检索，未见相同的实验报告、研究报道以及本配方所进行的相同功能评价与配方介绍，说明本配方具有治疗与保健防病作用的先进性和实用性。
本发明的含双歧杆菌和乳杆菌的组合的具体实例：
表1 含双歧杆菌、乳杆菌的组合物——药品或保健品
| 品 名 | 重量％含量(W/W) | |
| 配方1 配方2 配方3 配方4 | ||
| 菌粉 | 活双歧杆菌(10’cfu/g)活乳杆菌(10’cfu/g)死双歧杆菌全细胞死乳杆菌全细胞双歧杆菌提取物乳杆菌提取物 | 20 -- -- 1015 -- -- 10-- 15 -- ---- 15 -- ---- -- 20 5-- -- 15 5 |
| 低聚糖 | 低聚果糖低聚木糖低聚乳果糖 | 20 30 40 1530 20 -- 30-- 5 10 -- |
| 麦绿素螺旋藻 | 5 5 10 155 5 -- 5 | |
| 添加剂 | 羧甲基纤维素食用香精食用果精变性淀粉 | 2 2 2 22 2 2 2-- -- -- --1 1 1 1 |
表2 含双歧杆菌、乳杆菌的组合物(食品或食品添加剂)
| 品 名 | 重量％含量(W/W) | |
| 配方1 配方2 配方3 配方4 配方5 | ||
| 菌粉 | 活双歧杆菌(10’cfu/g)活乳杆菌(10’cfu/g)死双歧杆菌全细胞死乳杆菌全细胞双歧杆菌提取物乳杆菌提取物 | 20 -- -- -- 1520 -- -- -- 15-- 10 -- -- ---- 15 -- -- ---- 2 20 10 ---- 3 10 10 -- |
| 低聚糖 | 低聚果糖低聚木糖异麦芽低糖大豆低聚糖 | 10 10 20 20 1030 25 20 30 20-- 10 -- -- ---- -- 5 -- -- |
| 麦绿素螺旋藻 | 10 5 5 10 5-- 5 -- -- 5 | |
| 添加剂 | 奶粉食用果精食用香精羧甲基纤维素变性淀粉柠檬酸苹果酸食糖 | -- -- -- 15 205 15 10 -- --2 2 3 -- 51 2 -- -- 2-- -- 2 -- --1 -- 3 -- ---- -- 2 -- 11 1 -- 5 2 |
Claims (8)
1、一种含双歧杆菌、乳杆菌的组合物，其特征在于(按重量％计)：
低聚糖 10-90％
麦绿素 5-85％
螺旋藻 0-80％
菌 粉 5-70％
添加剂 0-30％
2、根据权利要求1所述的含双歧杆菌、乳杆菌的组合物，其特征在于优选配方(按重量％计)为：
低聚糖 20-70％
麦绿素 5-30％
螺旋藻 3-20％
菌 粉 20-50％
添加剂 5-30％
3、根据权利要求1或2所述的一种含双歧杆菌、乳杆菌的组合物，其特征在于：低聚糖系指新型的低聚糖。
4、根据权利要求3所述的一种含双歧杆菌、乳杆菌的组合物，其特征在于：新型的低聚糖系指低聚果糖和低聚木糖，它们之间混合比例(按重量％)为低聚果糖为10-90％；低聚木糖为0-90％。
5、根据权利要求1或2或4所述的一种含活双歧杆菌、乳杆菌组合物，其特征在于：菌粉可以是活双歧杆菌、活乳杆菌。
6、根据权利要求1或2或4所述的一种含双歧杆菌、乳杆菌的组合物，其特征在于：菌粉可以是死双歧杆菌全细胞、死乳杆菌全细胞。
7、根据权利要求1或2或4所述的一种含双歧杆菌、乳杆菌的组合物，其特征在于：菌粉可以是双歧杆菌提取物、乳杆菌提取物。
8、根据权利要求1或2所述的一种含双歧杆菌、乳杆菌的组合物，其特征在于：添加剂包括酵母浸粉、各种粘合剂和各种崩解剂、固体果精、植物蛋白、动物奶粉、茶精、食用香精、食糖中的1-10种。
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