CN102300472A - 共生组合物及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及组合物,其包含:粉末形式的干糖蜜,以及脱水并经包封的活微生物。本发明还涉及包含所述组合物的食品或膳食产品或药物,以及制备所述组合物的方法,其包括混合所述糖蜜和所述脱水并经包封的活微生物,以及干燥步骤。
Description
技术领域
本发明涉及共生组合物(益生素(prebiotic)和益生菌(probiotic)的结合)及其制备方法。
背景技术
某些活微生物的摄入对人或动物健康的有益作用已经久为人知。根据联合国粮食和农业组织,这些活微生物(被命名为“益生菌”)在以合适的量施用时向宿主提供健康益处。
这些益生菌(如双歧杆菌等)用于制造健康食品或药物组合物。某些组合物包含经包封益生菌和食物补充剂(维生素C和E、蛋白锌(zincproteinate)、蛋白锰(manganese proteinate)、硫酸亚铁、蛋白铜(copperproteinate)、碘化钙和亚硒酸钠)(文件WO 2007/126990)。在某些组合物中,食物补充剂延长了益生菌的寿命。
通常认为,通过摄入益生菌,可以实现以下效果:保持或恢复人和动物中肠道菌群的平衡,这是通过刺激有益共生菌繁殖和抑制病原菌繁殖以改变肠道菌群的组成和/或活性来实现的;对肠上皮细胞发挥营养作用;通过释放β-半乳糖苷酶来提高乳酸耐受性;刺激肠相关淋巴组织(GALT)中的局部免疫活性和全身性免疫活性(刺激巨噬细胞的活性、呈递抗原、产生免疫球蛋白和细胞因子);发挥抗肿瘤活性,同时降低肠道菌群中负责将前致癌物质转化成致癌物特别是用于原位合成维生素和氨基酸并提高其吸收及某些矿物质的吸收的酶(β-葡糖醛酸酶、β-葡糖苷酶、偶氮还原酶和硝基还原酶、氧化还原酶)的活性。
益生菌预防疾病病症(包括胃肠道感染)、营养缺乏并向宿主提供健康和舒适益处,例如改善胃肠道输送(提高运动性、降低输送时间、减少粪便中致癌物与肠上皮之间的相互作用)和改善免疫系统。作为例子,大多数双歧杆菌少量产生对宿主的健康和舒适而言必不可少的维生素(B1、B3、B6、B9、B12)和消化酶;并且具有预防疾病和治疗的有益作用。
摄入益生素、食物或膳食物质对宿主有益的作用也是已知的,所述益生素、食物或膳食物质一般由基本上非淀粉和不可消化多糖和寡糖组成,或由在上消化道部分不吸收的非降解糖醇组成,并选择性刺激肠中一种或有限数目的活微生物的生长和活性(Gibson等,J.Nutr,1995,125(6):1401-12,Dietary modulation of the human colonic microbiota:introducing the concept of prebiotics)。益生素的特征在于具有1.5kcal/g左右的低热值。
益生素促进结肠中有益共生菌(主要是乳杆菌(lactobacilli)和双歧杆菌)的生长和代谢并损害致病菌,导致肠道菌群组成的再平衡。益生素在肠粘膜处具有局部免疫调节特性:它们增加免疫球蛋白、细胞因子和T-淋巴细胞的产生。它们通过增加履状上皮细胞(calceiform epithelialcell)的数目和促进更多酸性粘蛋白的产生(肠粘膜稳定化的特征)来改变结肠上皮粘膜的厚度和组成。因此,稳定化的肠道菌群有助于预防感染、氧化过程,尤其是改善肠的吸收功能。此外,益生素经过共生菌群间接参与矿物质如铁、钙、镁和锌的吸收,其对健康的益处是公认的。研究表明,益生素(如低聚果糖)的存在显著提高了股骨中镁的吸收和磷的累积;此外,低聚果糖和钙的大量组合摄入据认为是最有利的膳食,尤其是对骨的固化和降低骨折风险而言。最近已经知道,益生素具有比胃肠系统更宽的作用部位,即皮肤、泌尿系统、呼吸系统和女性生殖系统。
益生素(尤其是食物果糖-寡糖)本身对肠上皮没有内在作用,而是通过肠道菌群(共生菌)和益生菌发挥作用;益生素提高益生菌的生存力并促进其在体内的繁殖和代谢。
益生菌和益生素的结合通常被称为共生物(symbiotic),用于人或动物的食物或治疗中。
在这些共生组合物中,益生素代表益生菌的选择性能量源。共生物同时发挥益生素和益生菌活性。共生物刺激肠上皮相关的局部免疫系统以及全身免疫系统(特别是通过降低炎性细胞因子(IL-1、TNF-α)的产生),这降低了感染的风险。共生物增加人的粪便细菌(尤其是乳杆菌和双歧杆菌)的数目和多样性,增加肠易激综合症和便秘患者的排便次数,并且减轻腹痛和肠胃气胀。共生物通过改变肠细菌的代谢而具有针对肿瘤形成的保护作用,它们诱导肠内容物中β-葡糖醛酸酶和氨的浓度降低,降低形成异常隐窝病灶(被视为肿瘤的先兆)的发生率。
然而,共生物的作用比单独的益生菌或益生素的作用更明显。它们的组合作用可以是加合的或协同的,并且提高肠功能活性的效率,例如改善营养物、维生素、矿物质、氨基酸、微量元素的吸收过程。例如,文献WO 2007/125558描述了这种共生组合物。
然而,现有技术中提出的共生组合物不完全令人满意:
(i)在营养水平上,已知的共生物仅包括不可消化的益生素(因为其基本仅由纤维素组成)。共生物主要对肠道菌群的组成和代谢具有直接的营养活性;他们对宿主具有有限的营养活性。已经描述了将某些共生组合物作为或不作为生物活性物质的营养载体并添加到组合物中,以保证益生菌在储存和摄入之后的增殖(文献US 2007/0166433和EP 938850)。
(ii)由于其获得方法,已知的共生组合物不是均质的制剂,因此益生素与益生菌通常通过即时混合而同时施用,或者(通过相似或不同的途径)同时施用,或(通过相似或不同的途径:文献WO 2007/126990和WO 2007/785970)依次施用。
因此,需要提供对益生菌和宿主具有更佳营养特性的均质共生组合物,并且需要提高共生组合物对肠道菌群和对宿主整体健康的有益作用。还需要改进共生物的制剂以用于多种用途和延伸用途,同时保证在微生物在到达肠作用部位之前为其提供针对外部介质的保护。
发明内容
本发明首先涉及一种组合物,其包含:
-干糖蜜(dried molasses);和
-脱水且经包封的活微生物。
根据一个实施方案,所述组合物还包含多糖纤维。
根据一个实施方案,所述多糖纤维是糊精或麦芽糊精纤维。
根据一个实施方案,所述组合物包含小于或等于6%、优选小于或等于5%、更优选小于4%的总质量比的水。
根据一个实施方案,所述组合物包含(以质量比计)(优选由其组成):
·10至50%、优选15至45%、最优选20至40%的干糖蜜;
·15至70%、优选25至65%、最优选35至60%的多糖纤维;和
·4至50%、优选10至40%、最优选20至30%的脱水且经包封的活微生物。
根据一个实施方案,所述糖蜜选自甜菜、甘蔗、水果、谷类的糖蜜及其混合物,优选选自甜菜、甘蔗的糖蜜及其混合物,更优选选自甘蔗糖蜜。
根据一个实施方案,所述微生物是益生性微生物,其选自以下细菌或酵母:双歧杆菌属(Bifidobacterium)、乳杆菌属(Lactobacillus)、乳球菌属(Lactococcus)、链球菌属(Streptococcus)、片球菌属(Pediococcus)、肠球菌属(Enterococcus)、丙酸菌属(Propionibacterium)、酵母属(Saccharomyces)、克鲁维酵母菌属(Kluyceromyces)及其混合物,优选选自如下种:长双歧杆菌(Bifidobacterium longum)、干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)、鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)、瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus)和圆酵母(Saccharomyces torula)。
根据一个实施方案,所述组合物包含至少105、优选至少107、理想地至少5×107cfu/g的活微生物量。
本发明还涉及包含上述组合物的食品或健康食品。
本发明还涉及包含上述组合物的药物,其为片剂、胶囊剂、粉剂或颗粒剂的形式。
本发明还涉及制备组合物的方法,包括将糖蜜与脱水且经包封的活微生物相混合以及干燥步骤。
根据一个实施方案,前述方法依次包括:
-混合所述糖蜜、多糖纤维和任选的水,以获得预混物;
-向所述预混物添加脱水且经包封的活微生物,以获得中间组合物;和
-干燥所述中间组合物。
根据一个实施方案,所述中间混合物的干燥通过雾化来实施。
根据一个实施方案,所述预混物的干物质水平为30至60wt%,优选40至50wt%。
根据一个实施方案,所述组合物是上述组合物。
利用本发明,还可以克服现有技术的缺点。更具体而言,其提供了具有更佳的营养和医学特性的均质共生组合物。
这通过使用糖蜜作为益生素来实现。
糖蜜是这样的成分,其中具有营养学意义的要素(如糖、不可消化的纤维、矿物质、微量元素、维生素和氨基酸)的含量极高。由于糖蜜为液体形式并且具有高密度,所以其不可能制备直接包含混有糖蜜的益生菌的组合物,因为稳定化的微生物将因为渗透压而不能存活。
这是本发明仅使用脱水和经包封形式的益生菌(以保护它们)以及干燥形式的糖蜜(以避免破坏胶囊)的原因。
根据某些具体实施方案,本发明还具有以下一项(或优选地多项)有利特征:
-糖蜜通过在组合物被摄入之后用作益生菌的生长支持物和刺激其活性而发挥益生素功能,并直接发挥用于人或动物的膳食补充功能或用于人或动物(兽医应用)的药物功能。
-糖蜜直接提供多种具有营养学意义的药物,例如糖、纤维、矿物质、维生素、微量元素和氨基酸,而不必向组合物中逐一添加这些要素。因此本发明具有经济性。
-利用根据本发明方法转化的糖蜜,共生混合物的多种应用变得可能,开辟了用于人和动物的多种用途和施用方法。
如此转化的糖蜜保护经包封益生菌免受在其配制中可能的多种支持物(例如乳粉)的可能变化。
-活性物质优选通过并行的干燥和混合来充分均质化。
本发明的共生物解决了前述问题。实际上,本发明的共生物包含已知其对宿主健康之作用的经包封益生菌和新的益生素,该益生素既是相关益生菌的能量源,也是宿主的直接能量源,因为其同时包含天然存在于益生素中的维生素、矿物质、微量元素以及必需和非必需氨基酸,并且益生菌-益生素的组合有利于其吸收。维生素、矿物质、微量元素以及必需和非必需氨基酸是健康或病理生物体的生理功能必不可少的生物活性物质,并且其促进人和动物的一般健康状况或整体健康。本发明的共生组合物因其维生素、矿物质、微量元素以及必需和非必需氨基酸组成以及其低血糖指数而代表了非常有利于宿主健康的食物饮食。
本发明的共生物具有双重功能:直接作用于肠道菌群和直接作用于宿主。此外,本发明的共生物满足AFSSAPS(法国健康产品安全局)在条款6:选择营养物载体食物配对的说明中所规定的要求,其陈述了优先考量天然包含营养物的食物。
本发明的共生物因其制造方法而具有良好均质性,并且允许即时和同时施用共生物的两种组分。
本发明共生物的制备包括利用混合器使成分均质混合,然后通过雾化进行脱水。
本发明的共生物是具有多样性和多种医学可能性的粉末。
本发明的组合物可用于以下非治疗和治疗性的适应症,而无论其是预防性、治疗性、姑息性的:
-关于消化领域:改善便秘、减轻肠道下部的炎性过程、有益平衡脆弱人群(儿童、老人、康复期的人、病人)以及患有缺乏的任何人的肠道菌群。
-关于运动表现:稳定血糖和增加糖原分解、提高肌肉的糖储存能力;改善营养物的同化;降低(由于镁浓度而)痉挛的频率;改善恢复。
-关于脂质的产生:降低总胆固醇和LDL浓度、增加HDL和改善LDL/HDL比、帮助控制肥胖和动脉粥样硬化风险、改善与代谢综合症相关的临床体征。
-关于免疫力:对免疫力的刺激作用,降低传染性阶段的频率和严重性。
-关于脑功能:改善心理功能(判断、记忆、心理组织(mentalorganization)、空间和时间定向)以及感受功能(身体表征、空间表征)。
-关于保健:降低疲惫感、改善情绪、降低因压力产生的肾上腺素的作用。
-关于骨和软组织:改善骨折后的巩固、关节的刚性、改善关节病和骨质疏松。
-关于衰老:通过保持酸碱平衡(因为钾的浓度)而起抗衰老作用;抗自由基作用(因为锰的浓度)。
具体实施方式
在以下的说明中,将以非限制性方式更详细地描述本发明。
成分
本发明的组合物包含干糖蜜、优选的多糖纤维,以及脱水且经包封的活微生物。
“糖蜜”是指在制造来自植物的甜品(优选单糖)时收集的不能结晶的糖桨残渣所形成的副产物。
相关的植物优选可以是甜菜或甘蔗(在生产蔗糖的范围内),也可以是谷物(在生产葡萄糖的范围内)或水果,特别是柑橘类水果(在生产浓缩浆的范围内)。
通常,在制糖过程中,提取汁并用石灰纯化。经纯化的汁在压力下浓缩,随后真空处理并结晶。随着糖晶体逐渐形成,残渣浓缩在液体级分中。例如,结晶可以分三个阶段完成,在每次对汁进行再次浓缩之前移出糖晶体。在最后一次结晶之后,残汁即使再次浓缩也不再结晶。这种汁在本领域被称为糖蜜(或粗糖蜜)。
这些糖蜜通常包含65%至80%、优选70至76%的干物质;其通常包含10至20%(以干物质计)、优选12至15%的矿物质;其通常包含2至20%、优选5至16%(以干物质计)的含氮物质;并且其通常包含50至75%、优选60至70%(以干物质计)的糖。
更具体而言,糖蜜通常包含以下化合物(浓度范围彼此独立提供):
·30至66%、优选35至40%(以干物质计)的蔗糖;
·1至10%、优选2.5至5%(以干物质计)的葡萄糖;
·1至5%、优选2.5至5%(以干物质计)的果糖;
·0.2至2%、优选0.5至1%(以干物质计)的鼠李糖;
·0.2至1%、优选0.4至0.7%(以干物质计)的铜;
·0.2至1%、优选0.3至0.9%(以干物质计)的钙;
·1至2%、优选1.4至1.7%(以干物质计)的铁;
·0.2至0.7%、优选0.3至0.6%(以干物质计)的锰;
·3.5至8.5%、优选4至5%(以干物质计)的钾;
·0.2至1%、优选0.2至0.5%(以干物质计)的镁;
·0.2to 1%、优选0.2至0.5%(以干物质计)的硫;
·0.1至0.5%、优选0.1至0.2%(以干物质计)的吡哆醇(维生素B6);
·7至8%、优选7至7.5%(以干物质计)的胆碱;
·0.1至1%、优选0.5至0.7%(以干物质计)的烟酸(维生素B3);
·0.1至0.3%、优选0.1至0.2%(以干物质计)的核黄素(维生素B2);
·0至1%、优选0.7至0.9%(以干物质计)的硫胺(维生素B1);
·1至5%、优选1.3至4%(以干物质计)的天冬氨酸;
·0.1至1%、优选0.3至0.5%(以干物质计)的精氨酸;
·2至5%、优选2.2至4.5%(以干物质计)的谷氨酸;
·0.1至0.5%、优选0.11至0.21%(以干物质计)的组氨酸。
然而,糖蜜的确切组成取决于生产方法以及植物原材料。
甜菜和甘蔗的糖蜜已知作为适口剂(palatable agent)和粘合剂用作动物食品组分;或者作为用于微生物(主要是面包酵母)的培养基;或者作为人类食品(特别是糕点)中的甜味剂。
在本发明的范围内,糖蜜用作益生素。
在本发明的范围中,术语“干糖蜜”是指与上述常规糖蜜具有相同组成(除水含量外,其小于上述常规糖蜜的水含量)的产品。因此,干糖蜜优选具有大于或等于80%、更有选大于或等于85%、大于或等于90%、或甚至理想地大于或等于94%、95%或96%的干物质含量。
换言之,在本发明范围内使用的干糖蜜可以被描述为“粗条件下的干糖蜜”,本发明的干糖蜜与常规糖蜜之间的唯一组成差别在于水含量;与常规糖蜜相比,所述干糖蜜未发生任何化学转化或任何组分的添加或去除。
本发明中使用的干糖蜜优选为粉末形式。
在本发明中使用的干糖蜜优选符合法国食品规范和/或欧洲食品规范。这通过在糖蜜来源处的进行植物培养时以及在其运输和工业加工期间采取所需步骤来实现。特别地,干糖蜜基本上不含公共规范(CommunityRegulation)No.178/2006以及公共规范No.396/2005意义上的杀虫剂和其它残余物。
本发明范围内使用的多糖纤维是水溶性食品级纤维。这些纤维在本发明组合物中发挥填充剂功能。
它们是由通过O-糖苷键彼此键合的几种糖组成的多聚体。这些糖可以是丙糖、丁糖、戊糖、己糖或庚糖,优选己糖。在己糖中,优选葡萄糖。
也可以使用上述纤维的混合物。
本发明范围内使用的微生物可以是任何微生物,特别是已知其对人或动物健康的有益作用的所有微生物(益生微生物)。它们可以是细菌或酵母。
在优选的微生物属中,特别值得一提的是以下属:双歧杆菌属、乳杆菌属、乳球菌属、链球菌属、片球菌属、肠球菌属、丙酸杆菌属、酵母属和克鲁维酵母菌属。
优选微生物种类的实例为嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)、植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)、干酪乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、玉米乳杆菌(Lactobacillus zeae)、唾液乳杆菌(Lactobacillus salivarius)、乳酸乳杆菌(Lactobacillus lactis)、瑞士乳杆菌、罗伊氏乳杆菌(Lactobacillusreuteri)、噬淀粉乳杆菌(Lactobacillus amylovorus)、卷曲乳杆菌(Lactobacillus crispatus)、弯曲乳杆菌(Lactobacillus curvatus)、德氏乳杆菌(Lactobacillus delbrueckii)(特别是德氏乳杆菌德式亚种(Lactobacillus delbrueckii ssp.delbrueckii)和德氏乳杆菌德氏保加利亚亚种(Lactobacillus delbrueckii ssp.bulgaricus))、戈氏乳杆菌(Lactobacillusgasseri)、约氏乳杆菌(Lactobacillus johnsonii)、发酵乳杆菌(Lactobacillusfermentum)、短乳杆菌(Lactobacillus brevis)、嗜热链球菌(Streptococcusthermophilus)、唾液链球菌(Streptococcus salivarius)、乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)(特别是乳酸乳球菌乳酸亚种(Lactococcus lactis ssp.lactis)和乳酸乳球菌乳脂亚种(Lactococcus lactis ssp.cremoris))、明串珠菌(Leuconostoc sp.)、屎肠球菌(Enterococcus faecium)、戊糖片球菌(Pediococcus pentosaceus)、乳酸片球菌(Pediococcus acidilactici)、长双歧杆菌(Bifidobacterium longum)、短双歧杆菌(Bifidobacterium breve)、两歧双歧杆菌(Bifidobacterium bifidum)、婴儿双歧杆菌(Bifidobacteriuminfantis)、乳双歧杆菌(Bifidobacterium lactis)、瑞士双歧杆菌(Bifidobacterium helveticus)、酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)、布拉酵母(Saccharomyces boulardii)以及它们的混合物。
特别优选长双歧杆菌。
本发明组合物中存在的微生物是活的、脱水且经包封的微生物。术语“活的”是指至少一部分微生物是活的(即能够在合适的培养基中生长),应理解,一定分数的微生物必然以非活性形式存在。
优选地,所述组合物包含至少105、更具体而言至少107、理想地至少5×107CFU/克组合物的量的微生物。
经包封的形式保证更好地保存微生物,这通过保护微生物免受环境影响以及具有良好的化学稳定性和良好的机械应力抗性来实现。
优选地,这些活微生物为涂有疏水层的脱水团聚物的形式。疏水层可以优选为脂肪酸层、蜡层或其混合物。涂覆的颗粒优选具有100μm至5mm、最优选300μm至2mm的平均直径。
再次参考文献WO 01/68808,其详细描述了获得这种脱水且经包封的活微生物的方法。这些产品也可以商品获得,特别是Lallemand(Rosell研究所)的商品名ProbiocapTM。
优选地,本发明的组合物为粉末形式,其水(质量)含量优选小于或等于6%、更具体而言小于或等于5%、最优选小于或等于4%。
除维生素、矿物质、微量元素和氨基酸之外,本发明的组合物还可以包含多种添加剂如一种或多种芳香物质、赋形剂、着色剂和配方剂(formulation agent)以及任何天然来源的有机物、矿物质和植物物质,其质量浓度优选为0.01%至50%、更具体而言为0.1至10%。
方法
本发明的组合物可以通过包括混合上述糖蜜、上述脱水且经包封的活微生物(优选地和多糖纤维)的制造方法来获得。
优选地,将糖蜜和多糖纤维先混合在一起以获得预混物。可以使用任何类型的常规混合器。在制备该预混物期间,用糖蜜浸渍多糖纤维。在该阶段,在糖蜜不包含足量水的情况下,可以添加水以促进浸渍。为了最佳的浸渍,可以选择将预混物的干物质水平调节为30至60%、优选40至50%(以质量计)。
在第二阶段,向预混物中添加脱水且经包封的活微生物,并且将其全部混合以获得中间组合物。这可在制备预混物的同一混合器中进行。所添加微生物的量优选为10至100mg、更优选20至60mg、理想地30至50mg(干物质)/克预混物。
两个混合步骤均可以在室温下实施。
在第三阶段中,干燥中间组合物。理想的是,在添加微生物之后尽可能快地进行干燥步骤,以避免其后与包含水和糖的介质接触时对微生物的任何损害或活性触发。优选地,添加微生物和干燥之间的间隔小于1小时/千克干物质、更特别是小于30分钟/千克干物质、理想地小于15分钟/千克干物质。
优选地,添加微生物和干燥之间的间隔小于1小时、更具体而言小于30分钟、理想地小于15分钟或甚至小于10分钟或5分钟。
干燥优选通过雾化来进行,即将中间组合物以细雾形式与热空气流同时注入塔顶。在热的作用下,水蒸发并使空气中带有水。经干燥的组合物在雾化塔底部收集。
在第四阶段中,可将经干燥的组合物过筛,以提供最终组合物。
所获得的组合物优选为粉末的形式,并且可以包装在袋、瓶成其它容器中。该组合物可以作为添加剂用于任何食品、营养品、食物或膳食补充剂(特别是能量棒形式、待稀释的袋形式的膳食产品);粉剂、胶囊、片剂;脱水产品如菊苣、巧克力、咖啡;脱水植物如茶、药茶;乳制品、脱水乳制品如酸奶、粉末和豆制品;脱水蛋白质;饼干;乳制品和新鲜豆制品;炖水果;乳蛋糕(custard);冰淇淋;所有形式(块状、颗粒、片、粉末)的动物饲料产品。
本发明的组合物可以直接销售并由消费者直接添加到食品中。或者,可以在食品生产阶段作为添加剂将组合物引入食品中。
本发明的组合物还可以用于制造药物:直接作为待分散到水中的粉末(随后将组合物与一种或多种可药用添加剂和/或赋形剂组合或不与其组合),或为本领域技术人员已知的任何剂型:例如,用于局部施用途径的制剂如软膏、霜剂、阴道胶囊或明胶胶囊、贴剂、植入物、栓剂;优选用于口服途径的剂型,特别是明胶胶囊、胶囊、片剂或颗粒,与一种或更多种可药用载体、添加剂和/或赋形剂组合。
本发明的组合物具有令人满意的稳定性,或甚至与单独施用的脱水且经包封的微生物相比稳定性更高,并且这持续至少一个月,优选至少6个月,最优选约1年,理想地约2年或甚至至少3年。稳定性通过在制造之后以不同的连续日期测量组合物中活微生物的数目来评价。
用途
所述组合物本身以及由其获得的食品/膳食产品或药物适用于动物或人。
所述组合物的两种活性化合物(即糖蜜和微生物)具有加合作用或甚至协同作用,从而:
-预防疾病病症;和/或
-参与减肥和/或促进减肥和/或治疗或预防肥胖和/或治疗或减轻与肥胖或超重相关或由其引起的紊乱或疾病;和/或
-为面临压力、疲劳、不足状况、情绪紊乱的机体提供补充;和/或
-有助于保持内稳态,如帮助机体控制血压;和/或
-促进病后康复;和/或
-刺激免疫防御;和/或
-刺激消化功能并提高消化舒适性;和/或
-确保营养物的更高生物利用度,并提高必要营养物的同化作用;和/或
-向吸收慢的机体提供能量;和/或
预防ENT领域和妇科领域的感染(阴道霉菌病......)。
年轻对象、老年对象、患病对象、恢复期对象、缺乏对象、运动员对象是本发明组合物尤其有用的对象。
推而广之,想要照顾其健康和预防疾病病症的任何对象都将发现本发明适于改善和保持其生理和心理的良好状况。
此外,组合物的铜含量(优选大于0.4wt%)提供了赋予组合物以抗贫血、抗氧化、抗炎和抗感染作用的可能性。
组合物的铁含量(优选大于1.4wt%)提供了赋予组合物以抗贫血作用的可能性。
组合物的钙含量(优选大于0.3wt%)提供了赋予组合物以保持骨强度和密度、神经传导、肌肉收缩以及对酶活性和细胞膜的调节作用的可能性。
组合物的钾含量(优选大于4wt%)提供了赋予组合物以调节神经传导、肌肉活性和酸碱平衡以及预防或治疗动脉粥样硬化、高血压、肠慢性炎性疾病的可能性。
组合物的锰含量(优选大于0.3wt%)提供了赋予组合物以保护细胞免受自由基影响的酶活化作用的可能性。
组合物的镁含量(优选大于0.2wt%)提供了调节神经元和肌肉活性的可能性。
组合物的果糖含量(优选大于2.5wt%)提供了赋予组合物以低血糖和血糖稳定作用、提高精力作用的可能性。
组合物中胆碱的存在提供了改善机体恢复能力、预防肌肉疲劳、提高运动员的表现、延缓与年龄相关的身体和认知行为降低的可能性。
实施例
以下实施例举例说明本发明但不限制本发明。
实施例1-制备组合物
由以下化合物制备本发明的组合物:
-来自Gardel Sugar Factory(Guadeloupe)的特别用于所述制备的食物类型的粗制条件的甘蔗糖蜜;
-脱水且经包封的活微生物:长双歧杆菌型细菌,由Lallemand(法国)销售,品名Probiocap Rosell-175ME;Lallemand提供的这种化合物的微生物学特性如下:长双歧杆菌>5×1010cfu/g;葡萄球菌(Staphylococci)<10cfu/g;酵母和真菌<103cfu/g;腐生植物<104cfu/g;假单胞菌(Pseudomonas)<25cfu/g;芽孢杆菌(Bacilli)<104cfu/g;沙门氏菌(Salmonellae)<1cfu/25g;大肠杆菌<1cfu/g。
糖蜜的微生物学表征在其使用之前实施。为此,在LT100肉汤中将糖蜜稀释到1/10,然后接种:
-为计总需氧菌,接种在胰酶解酪蛋白大豆琼脂(蛋白胨:17.0g/L-豆粉蛋白胨:3.0g/L:D(+)-葡萄糖:2.5g/L-氯化钠:5.0g/L-磷酸氢二钾:2.5g/L-水-1000mL,pH:7.3±0.2)中的培养皿上;
-为酵母和真菌,接种在葡萄糖氯胺苯醇沙保罗氏培养基-琼脂培养基(SAB,Biomerieux,法国)上。
在两种情况下,将琼脂培养基在37℃的烘箱中放置5天。然后计数菌落,并且以cfu/mL表示结果。
总细菌浓度小于1000cfu/g,并且酵母和真菌的浓度小于100cfu/g。
制备预混物:将40%糖蜜与60%多糖纤维在预先消毒的不锈钢三混合器(F2116MD-MBV-F,Tri-clover,美国)中混合。用水稀释到10%。匀浆后,测量预混物的干物质含量。为此,将预混物的一部分在105℃烘箱(Memmert GmbH,德国)中干燥2小时。利用Sartorius Scales测得干渣重182g,精度为10-4g。经计算,预混物的干物质(质量)含量为40%至50%。
中间组合物的制备:向预混物中添加40mg/g(以干物质计)益生菌,并且利用三混合器以100rpm的速度混合整个组合物,温度不超过25℃。
获得最终组合物:通过使中间组合物雾化来获得最终组合物。雾化干燥塔包括用电阻器加热和利用双流体叶轮或喷嘴喷雾。在室中的滞留时间为15至24秒,空气流速为约500kg/h。入口温度为155℃,出口温度为85℃。旋风分离器的压力差为200mm Hg。
最终处理:将最终组合物在250μm不锈钢振动筛(Vibrowest,意大利)上以1000-1450rpm、0.5-1.85kW、30s/kg过筛。然后,将组合物立即包装到小袋中,以避免吸收任何湿度和任何污染物。
最终获得的组合物的表观是具有糖蜜特征气味的棕色细粉形式。干燥损失小于6%。所得粉末的溶解度为10%。
在制备组合物的后15天,通过Lallemand测量组合物中长双歧杆菌活益生菌的量。在三个不同的样品上,估算出长双歧杆菌的种群分别为4.2×107cfu/g、5.3×107cfu/g和2.35×107cfu/g。
实施例2-组合物对细胞生存力的作用
通过还原MTT法(溴化噻唑蓝四氮唑),从以单层培养的、来自人结肠直肠癌细胞(Caco-2系,克隆TC-7)生存力的观点评价实施例1中获得的组合物。在添加有青霉素(Sigma,50IU/mL)、链霉素(Sigma,50mg/mL)、庆大霉素(Sigma,10mg/mL)和胎牛血清(Sigma,10%,v/v)的DMEM/Acane MEM培养基中将细胞单层培养至汇合。
将最终组合物稀释到1μg/mL、10μg/mL、100μg/mL、1mg/mL、10mg/mL和100mg/mL,并且将细胞置于其中,在37℃、包含5%CO2的潮湿气氛中放置48天。使用EGF(表皮生长因子)作为TC-7细胞增殖测试的参照物。
根据MTT还原法测量细胞生存力。通过测量吸光度来评价MTT还原成甲臜蓝(Formazan Blue),所述吸光度与代谢活性细胞的数目成正比,通过分光光度法在540nm处测得。
结果以任意吸光度单位(O.D.)/样品和相对于对照组的百分比变化来表示。对O.D.值进行统计检测。不同对照组与“处理组”的平均值之差通过单因素多分析(Anova 1,σ<0.05)确定,并且相对于对照组平均值的处理组平均值通过Dunnett(σ<0.1)测试来确定。
结果在下表1中示出。
表1:在48小时孵育之后实施例2的组合物对TC-7细胞生存力的影响
***=与对照组存在统计学差异的平均值(p<0.01)。
可以看出,浓度小于或等于10mg/mL的最终组合物在孵育48小时后不改变TC-7细胞的生存力,因此未表现出任何细胞毒性作用。
Claims (15)
1.一种组合物,其包含:
-干糖蜜;和
-脱水且经包封的活微生物。
2.根据权利要求1的组合物,其还包含多糖纤维。
3.根据权利要求2的组合物,其中所述多糖纤维是糊精或麦芽糊精纤维。
4.根据权利要求1至3中任一项的组合物,其包含的水的总质量比小于或等于6%、优选小于或等于5%、更优选小于4%。
5.根据权利要求1至4中任一项的组合物,其按以下质量比包含:
·10至50%、优选15至45%、最优选20至40%的干糖蜜;
·15至70%、优选20至65%、最优选35至60%的多糖纤维;和
·4至50%、优选10至40%、最优选20至30%的脱水且经包封的活微生物。
6.根据权利要求1至5中任一项的组合物,其中所述糖蜜选自甜菜、甘蔗、水果、谷类的糖蜜及其混合物,优选选自甜菜、甘蔗的糖蜜及其混合物,最优选选自甘蔗糖蜜。
7.根据权利要求1至6中任一项的组合物,其中所述微生物是益生性微生物,其选自以下属的细菌或酵母:双歧杆菌属(Bifidobacterium)、乳杆菌属(Lactobacillus)、乳球菌属(Lactococcus)、链球菌属(Streptococcus)、片球菌属(Pediococcus)、肠球菌属(Enterococcus)、丙酸菌属(Propionibacterium)、酵母属(Saccharomyces)、克鲁维酵母菌属(Kluyceromyces)及其混合物,优选选自以下种:长双歧杆菌(Bifidobacterium longum)、干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)、鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)、瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus)和圆酵母(Saccharomyces torula)。
8.根据权利要求1至7中任一项的组合物,其包含的活微生物的量为至少105、优选至少107、理想地至少5×107cfu/g。
9.食品或膳食产品,其包含根据权利要求1至8中任一项的组合物。
10.药物,其包含根据权利要求1至8中任一项的组合物,所述药物为片剂、明胶胶囊剂、粉剂或颗粒剂的形式。
11.制备组合物的方法,包括将糖蜜与脱水且经包封的活微生物混合,还包括干燥步骤。
12.根据权利要求11的方法,其依次包括:
-混合所述糖蜜、多糖纤维和任选的水,以获得预混物;
-向所述预混物中添加脱水且经包封的活微生物,以获得中间组合物;和
-干燥所述中间混合物。
13.根据权利要求12的方法,其中所述中间混合物的干燥通过雾化来实施。
14.根据权利要求12或13的方法,其中所述预混物的干物质水平为以质量计30至60wt%,优选40至50wt%。
15.根据权利要求11至14任一项的方法,其中所述组合物是根据权利要求1至8任一项的组合物。
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