CN1187193A - 维甲类化合物及其使用方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供新的维甲素化合物,如香豆素维甲类化合物和/或嘌呤维甲类化合物及它们的组合物,对于癌或癌前细胞呈现出治疗学和/或生物学活性,同时也提供这些化合物的使用方法。

Description

维甲类化合物及其使用方法

发明领域

本发明涉及新的维甲类化合物，如香豆素维甲类化合物和/或嘌呤维甲类化合物及其组合物。这些化合物对癌及癌前病变具有治疗效果或生物活性，与合成这些化合物有关的方法也属于本发明范畴之内。

相关的背景技术说明

维甲类化合物不仅在上皮细胞的发育与分化过程，而且在逆转癌前病变过程中起着重要作用。临床资料显示N-(4-羧苯基)维甲酰胺可用于治疗一些癌前病变，如口腔白斑、外阴白斑、宫颈及胃粘膜不典型增生及相似的疾病(Han等In Vivo，4：153-160(1990))。其它维甲类化合物如isoretinoin及etretinate，作为处方药用于痤疮及牛皮癣的治疗(Gander等，美国专利4,126,693)。

然而，维甲类化合物有一定的毒性，用已知的维甲类化合物进行治疗，在用药的同时会发生一定的毒副作用，因此有必要提供一些新的化合物，这些化合物具有维甲类活性，但只具有较低的毒副作用。

Smith等(J.Clin.Oncol.10(5)：839～864(1992))回顾了维甲类化合物在癌症治疗中的应用，强调主要应用于急性早幼粒细胞白血病(APL)的抗癌作用。Smith等报道了自然界存在的维甲类全反式维甲酸能诱导急性粒细胞白血病(AML)、神经母细胞瘤、畸胎瘤、黑色素瘤及鼠横纹肌肉瘤的分化作用。维甲酸同时也在上皮细胞的正常分化过程中起着必不可少的作用。Smith等在表6中列出了在皮肤病学研究中，应用全反式维甲酸所致的临床毒性，从参考文献的文中披露维甲类化合物被认为是很强的致畸剂。

Kizaki等在Seminars in Oncology，19(1)：95-105(1992)上报道，维甲类化合物在多种实验模型中均具有很强的抗致癌作用，能抑制转化肿瘤细胞生长并诱导其分化。很多文献都专门报道了维甲酸衍生物作为抗癌剂。Just等(美国专利4,385,175)发现维甲酸的酯类与azetidinones的化合物可用作抗癌剂。Philippe等(美国专利5,096,713)公开了L-克拉定糖的维甲酸酯具有抗肿瘤活性。Paust(加拿大专利1,127,170)针对N-羧基-苯酰胺维甲酸和7，8-脱氢-维甲酸N-羧基苯酰胺进行了研究，发现维甲类化合物主要用于癌的预防，同时也可用于膀胱癌、乳腺癌、皮肤癌及粘膜癌的治疗。

很多文献报道维甲类化合物可用于癌的预防或作细胞分化的诱导剂。例如，Newton等(Cancer Res.40：3413-3425(1980))报道了一系列维甲酸脂类、胺类和酰胺类具有癌的预防作用，但未报道类黄酮和查尔酮类。Du等(Inst.Mater.Med.Chinese Acad.Med.Sci.Beijing 17：331-337(1982))报道了维甲酸胺类R_II(N-4(羟基羧酸基苯)维甲酰胺和R_I(4-(乙酸苯基)-维甲酰胺)和它们作为防癌剂的应用。Song et al.，(Inst.Mater.Med.Chinese Acad.Med.Sci.Beijing19：576-581(1984))报道R_I和R_II具有细胞分化诱导剂的一些特性。Shealy的专利(美国专利5,124,083)披露了维甲酸衍生物可作为细胞分化诱导剂用于癌的预防及治疗。Shealy等报道(J.Med.Chem.31：1124-1130(1988))双功能维甲酸酯具有化学预防作用。Dawson(J.Med.Chem.27：1516-1531(1984))，Dawson等(J.Med.Chem.24：583-592(1981))，Kagechika等(J.Med.Chem.24：583-592(1981))，Kagechika等(J.Med.Chem.32：1098-1108(1989))，Skrede等(Eur.J.Clin.Investig.21：574-579(1991))及Loev等(美国专利4,523,042)都公开了各种具有诱导细胞分化的化合物。Gander(美国专利4,323,581)公开了N-(4-羟基苯)-全反式维甲酰胺可以用于治疗乳腺癌，同样在美国专利4,310,546中，Gander公开了N-(4-酰氧基苯)-全反式维甲酰胺可以用于上皮癌的预防。Gander等人的美国专利(专利号：4,126,693和4,190,594)涉及维甲酸酯和维甲酸酰胺类的其它特性。

此外，Blazeek等(Biomed.Pharmacother.45：169-177(1991))，Degos(Biomed.Pharmacother.46：201-209(1992))，Castaigne等(Blood76(9)：1704-1709(1990))，Chomienne等(Blood 76(9)：1710-1717(1990))及Lo Coco等(Blood 77(8)：1657-1659(1991))都披露维甲酸可以用于急性早幼粒白血病(APL)的分化治疗。

一些黄酮类及查尔酮类被发现具有抗癌特性。Middleton等(Biochem.Pharmacol.43：1167-1179(1992))报道有关黄酮类的抗肿瘤作用。Harrey等(J.Org.Chem.53：3936-3943(1988))及J.Org.Chem.55：6161-6166(1990))和Nair等(Carcinogenesis 12(1)：65-69(1991))报道具有抗致癌作用的香豆素及黄酮类化合物。Jing等(中国药理毒理杂志6(4)：278-280(1992))发现异黄酮、diadzein能抑制黑色素瘤细胞的生长。Ishizuka等(美国专利5,096,924)报道一种取代2-benzopyrinone具有抗癌活性。Ito等(美国专利4,960,908)，Briet等人(美国专利4,602,034、4,783,533及5,116,954)Kramer等(美国专利4,713,465)均发现benzopyrirone化合物可作为抗癌剂。

Preuss-Ueberscher等(Drug Res.34：1305-1313(1984))发现benzopyrones包括香豆素没有致畸作用。Egan等人对香豆素相关的化合物的药理活性进行了详细论述，他指出香豆素相关的化合物能抑制致癌物的致癌作用，可以用于黑色瘤的治疗。

Edwands等(J.Med.Chem.33：1948-1954(1990))报道了查尔酮类的抗有丝分裂作用。Cassady等、Ito等(中国北京国际化学生物学癌症研究进展论文集，1991年5-6页和68-69页)报道了关于各种黄酮类，其中包括biochanin A的抗有丝分裂作用。

Han等(中国癌证研究，2(3)：51-53(1990))报道了一种在中国应用的中药葛根的活生成份S86019的药理活性。S86019的结构尚未见报道。在另一发表的文献in vivo，4：153-160(1990)中，Han等评价了维甲胺酸R_II作为癌的预防及癌的化学治疗剂的可能性，并讨论了维甲胺酸与S86019联合用药诱导HC-60细胞的分化作用。维甲胺酸及S86019在诱导的细胞分化方面具有协同作用。据报道这种联合用药能减低患者的毒性，具有临床应用价值。

以上引用的任一文件并非想要承认这些文件是适当的已有技术，或者看做是对本专利申请任一权利要求具有专利性的技术资料。关于这些文件的内容和日期的任何说法都要根据申请人在提请注册的时间得到的信息来定，而不构成对这种说法正确性的承认。

本发明简述

本发明的目的是要克服维甲类化合物相关技术一个或一个以上的缺点，特别是要克服与维甲类化合物相关的致畸作用。

本发明的另一目的是要提供具有体外抗肿瘤活性的新维甲类化合物，如香豆素维甲类化合物和嘌呤维甲类化合物。

本发明再一个目的是要提供具有体内抗肿瘤活性的新维甲类化合物，如香豆素维甲类化合物或嘌呤维甲类化合物。

本发明还有一个目的是用本发明的方法提供新的维甲类化合物和组合物，该化合物和/或组合物对于哺乳类动物，特别是人在研究和药物应用上都是有用的。

现在要求权利保护的维甲类化合物和组合物是将维甲类化合物和组合物细胞分化诱导作用与香豆素类化合物的抗致癌特性协同结合在一起。

本发明的一个用途是用维甲类化合物作为一种对照物或组分比较其它化合物体外抗肿瘤活性试验。这种维甲类化合物也用作体外、原位和/或体内的化学治疗剂。

然而，本发明另一目的是提供一种合成方法，根据这种方法(结构I、结构II)可以获得在此所述的维甲类化合物。

再有，本发明也针对一种方法，对患者病理学上癌前期或癌症病人，通过给至少一种维甲类化合物和/或组合物其含有或基本含有香豆素维甲类和/或嘌呤维甲类化合物，进而还任选含有或基本含有至少一种抗癌药物和/或免疫调节剂进行治疗。

本发明的其他特征、优点、实施方式、状况和目的对于那些熟悉有关技术领域的人员，根据在此提出的说明，讲授和引导，都会是明了的。

附图的简短说明

图1表示维甲类化合物对巴豆油诱导鼠表皮ODC(鸟氨酸脱羧酶)的抑制作用(x±SD，n＝3)。

较佳实施方式的详细说明

本发明提供一类新的具有生物活性的维甲类化合物，这类化合物显示癌化学预防活性。这些衍生物包括但不限于式I的化合物，如香豆素维甲类化合物，或式II的化合物，如嘌呤维甲类化合物。其中R¹＝H，C₁-C₁₈烷基或COR⁷，其中R⁷＝H，OH，C₁-C₁₈烷氧基(优选C₁-C₂烷氧基)或NHR⁸，其中R⁸＝H，C₁-C₁₈烷基(优选C₁-C₂烷基)，或未取代或取代的苯基(苯环上的取代基优选为OH，COOH，OCH₃，和NO₂)；R²上H，OH，C₁-C₁₈烷基(优选为甲基)或OR，其中R＝维甲酰基；R³是H，CH₃，COR⁷，OR或CH₂OOR，这里R和R⁷如上述规定；R⁴是H，卤素(优选为C1)，C₁-C₁₈烷基，OH，OR或COR⁷，其中R和R⁷如上述规定；R⁵是H，或OR，其中R如上述规定；以及R⁶是H，CH₃，OR，或COR⁷，其中R和R⁷如上述规定；在上述式I化合物的基团R²-R⁶中至少有一个含有维甲酰基。

根据本发明通式I的化合物(I-1)-(I-38)列于表1，但不限于这些例示，其中的R＝维甲酰基

表1

化合物	R1	R2	R3	R4	R5	R6
							I-1 SLM9133	COCH3	H	H	H	OR	H
I-2 XSP4-26	COCH3	H	CH3	H	OR	H
							I-3 XSP4-15A	COCH3	H	H	H	OR	CH3
I-4 XSP4-12B	COCH3	H	CO2H	H	OR	H
							I-5 XSP5-5B	COCH3	H	H	H	OR	CO2H
I-6 XSP4-13A	COCH3	H	H	Cl	OR	H
							I-7 XSP4-21	COCH3	H	CH2OR	H	OR	H
I-8 XSP5-4A	COCH3	H	OR	CO2H	H	H
							I-9 XSP5-4B	COCH3	H	H	H	OR	OR
I-10 SLM9123	COCH3	H	OR	H	OR	H
							I-11 XSP4-22	COCH3	H	CO2C2H5	H	OR	H
I-12 SLM9134	CO2C2H5	H	CO2C12H25	H	OR	OR
							I-13 XSP5-14B	COCH3	H	H	C2H5	OR	H
I-14 XSP5-15A	COCH3	H	H	C6H13	OR	CH3
							I-15 SLM92-2	CO2C2H5	H	H	H	OR	CH3

I-16 SLMIII	COCH3	H	H	COCH3	OR	H
							I-17 XSP4-14A	CO2C2H5	H	H	H	OR	H
I-18 XSP4-30	CO2C2H5	H	H	Cl	OR	H
							I-19 XSP4-25	CO2C2H5	H	CO2H	H	OR	H
I-20 SLM9126	CO2C2H5	H	H	H	OR	OR
							I-21 SLM9147	CO2C2H5	H	OR	H	OR	H
I-22 SLMIII-13	CO2C2H5	H	H	C2H5	OR	H
							I-23 XSP5-12B	CO2C2H5	H	H	H	OR	COCH3
I-24 SLMII-20	CO2C2H5	H	OR	COC6H5	H	H
							I-25 SLMIII-12	CO2H	H	H	C6H13	OR	H
I-26 XSP5-5A	CONH2	H	CO2H	H	OR	H
							I-27 XSP5-3B	CONH2	H	H	Cl	OR	H
I-28 XSP5-29B	H	OR	H	t-Bu	H	H
							I-29 XSP-30A	H	OR	H	H	H	CH3
I-30 XSP-30B	H	CH3	H	H	OR	CH3
							I-31 S2-01B	H	CH3	H	C2H5	OR	H
I-32  S41	H	CH3	H	H	OR	H
							I-33 S42	H	CH3	OR	H	OR	H
I-34  S44	H	CH3	H	C6H13	OR	H
							I-35 S46A	H	OR	H	CH3	H	H
I-36 S46B	H	CH3	H	H	OR	OR
							I-37	H	OR	H	H	CH3	H
I-38	H	OR	H	H	H	H

根据本发明嘌呤维甲类化合物有以下通式(II)：

其特征是R＝

上面这些化合物(II-A)-(II-L)只是提供了按照通式(II)的例示，但不局限于这些实例。这些化合物，或其异构体可以任何组合方式作为本发明的化合物或组合物。

本发明的这些维甲类化合物是意外发现有抗癌活性的，这样，对治疗与癌相关联的疾病提供的适宜化合物和组合物可任意添加药物活性成分，如抗病毒剂，化疗药物和/或免疫刺激物，抗病毒抗体和/或其片断，可在体外和/或体内使用。

本发明所说的与癌有关的疾病包括，但不局限于，肿瘤和病理上与肿瘤形成有关的疾病、白血病、淋巴瘤、黑色素瘤、肉瘤、与病毒有关的癌以及任何其他已知的癌。

术语“抗癌活性”是指对下面三种至少一种的能力，这三种是(1)对转化、突变、癌前或癌细胞的生长或有丝分裂的抑制作用；(2)促进细胞程序性死亡；(3)对血管生成的抑制作用。

根据本发明所说的术语抑制或刺激，作为一个量值，抑制是在10和100％之间，刺激是在10和1000％之间，这些都是与相应对照相比，这些对照但不局限于，除了现有或一种或多种本发明的维甲类化合物外，要在相同条件下使用相同的细胞和动物。

为获得依据式(I)或式(II)的维甲类化合物，本发明也提供其合成方法，该方法对于本专业普通技术人员按照在此提供的讲解和指导，结合相关专业领域已知技术都会是很清楚的。一般说来，合成香豆素或嘌呤化合物和/或维甲酰化合物可作为原料，加上适当的基团，改变或用适当已知的化学反应步骤，就可提供出式(I)或式(II)的维甲类化合物。抗癌活性试验

有许多已知的体外试验用来测定给出的化合物和/或组合物是否有抗癌活性。这些方法在技术上是人们熟知的，并且在技术测定方面是普通技术人员熟悉的一种方法，应用常规实验测定本发明给出的化合物是否有对给出的与癌有关的病理模型有活性。

为测定至少一种药效，现将用于筛选式(I)或式(II)香豆素维甲类化合物和嘌呤维甲类化合物方法的实施例列于下述，基于这里所讲的和所指导的没有不适当的试验。

体外试验抗癌活性不受限制的实施例包括，但不局限于：(1)对TPA(Tetradecanoylphorbol-13-acetate)促进的磷脂磷酸化的拮抗作用作为抗促癌效果的筛选试验(参阅Shibata，Stem Cells 12：44-52(1994))；(2)软琼脂克隆试验(如Rangel et al.，Canc Chemother，Pharmacol.33：460-464(1994))；(3)对癌细胞的细胞毒活性(参看Rajala et al.，Ann，Chir.Gynacol.Supp1.206：50-53(1993))；对人胃癌细胞繁殖的抑制作用(Shibata，见上引)；(3)对癌细胞系统的细胞毒活性(参看Ngassapaet al.，J.Nat.Prod.15 56：1676-1681(1993)；Sanyal et al.，Neoplasma40：219-222(1993)；Perez et al.，Cancer Chemother.Pharmacol.33：245-250(1993)；Hahn et al.，Canncer 72：2705-2711(1993))；(4)对肿瘤克隆形成单位的抑制作用(参看ECKardt et al.，J.Nat′l Cancer Inst.86：30-33(1994)；Chen et al.，Anticancer Drugs 4：447-457(1993)；(5)对人髓性白血病细胞的分化作用；和(6)抑制细胞的MTT试验，参看这里引证的全部参考文献。

体内抗癌活性不受限制的实施例包括，但不局限于：(1)抑制小鼠皮肤瘤形成的活性；(参看Shibata，Stem Cells 12：44-52(1994))；(2)抑制动物致癌模型系统的活性(参看Kennedy，Prov.Med.22：769-811(1993))；Johnson et al.，Cancer Chemother.Pharmacol.32：339-346(1993))；如对裸鼠或嵌合体裸鼠致癌模型系统的活性(参看Topp et al.，Blood 82：2837-2844(1993)；Sailkawa et al.，Jpn.J.Cancer Res.84：787-793(1993))；(3)对单核细胞活化试验的活性(Shi et al.，CancerRes.53：3986-3991(1993)；(4)血清瘤坏死活性试验(Shi et al.，CancerRes.53：3986-3991(1993))；(5)对巴豆油诱发鼠耳肿胀的抑制活性和(6)对巴豆油诱发的小鼠表皮鸟胺酸脱羧酶活性升高的抑制活性。这里列入的全部参考文献都可供参考。

另外，预测统计学和人工智能可用于提供计算机程序，这种程序可计算活性模式，整合整体数据，结构阀和分子靶点的细胞表达，结合筛选数据和构效关系的药物设计和试验以预期所给出化合物的作用机理(Weinsteinet al.，Stem Cells 12：22-(1994)，参考这里收入的全部文献。

药物组合物药物组合物由本发明香豆素维甲类化合物和/或嘌呤维甲类化合物组成，包括全部组合物，其中至少含有一种能达到预期目的的有效量药物或组合物。另外，由至少一种本发明的药物或组合物构成的药物组合物可以含有适当的由赋形剂和辅助剂组成的药用载体，这些载体有助于使活性的药物制成药用制剂。本发明的药物组合物也包含有抗癌药和/或免疫调节剂。

本发明的药物或药物组合物可进一步主要包括或由单链核糖体(能阻断与癌有关的受体细胞或组织中的与癌相关蛋白的表达)，细胞激动素或生长因子当中的至少一种组成。

由淋巴细胞产生的细胞激动素称为淋巴激活素，而由单核细胞或巨噬细胞产生的肽类取名单核细胞激动素。因此，术语细胞激动素、淋巴激活素和白细胞素可交互使用称谓这些肽分子，这些激动素可调节宿主对外来抗原的反应，或者宿主受伤时，用于调节白细胞或其他细胞的生长、迁移和分化。根据本发明所使用的激动素适用于增加本发明组合物中的活性成分的那些激动素。

根据本发明的另一个方面，细胞毒剂或化疗药物可进一步包括在本发明的药物组合物中，进而任意包括一个传媒体，该传媒优先结合于，或有助于使药物/诊断药或组合物结合于癌靶细胞。这种类型的治疗靶点也可以是生长因子受体、分化抗原、或其他与癌或癌前细胞有关的非典型性细胞表面抗原。

药物组合物也可包括用于注射或口服给药的溶液，并且含有由大约0.001到99％的活性成分，含20到75％活性成分更好。口服的药物组合物包括片剂和胶囊。直肠给药的组合物包括栓剂。

活性成分的药物载体，可以是喷雾型的或非喷雾型的。非喷雾型可以是半固体或固体型，由有助于局部应用，由动力学粘度最好大于水的载体组成。另外，适于全身或局部，特别是粘膜和肺部应用的是喷雾型雾剂，其中活性成分最好是与固体或液体型惰性载体物质成结合状态。气雾剂除含有本发明的维甲类化合物或组合物外，还可含有溶剂、缓冲液、表面活性剂、香料和/或抗氧化剂。

药物用法为达到用药目的，如治疗或预防癌或癌前病变，本发明的药物或组合物的药物用法，可用任何方法给药。

术语 “保护(Protection)”(如防止癌或癌前病变)在这里使用包含着“预防(Prevention)”，“抑制(Suppression)”或“治疗(Treatment)”，“预防”是在疾疾诱发之前给药物组合物，“抑制”包括在临床出现病以前给药物组合物，“治疗”包括在病出现以后给保护组合物。应当理解，由于最终对病人诱发的进程无法知道，潜伏期如何，直到病人发生的进程在很久以后才确定，所以总是无法辨别人和兽药的“预防(Prevention)”和“抑制(Suppression)”之间的区别。因此，为与“治疗″(Treatment)相区别，共同用术语“预防(Prophylaxis)来包括这里定义的预防(Preventing)和抑制(Suppressing)。这里使用的术语“保护(Protection)”其意思包括“预防(Prophylaxis)”。参阅Berkow et al.，eds.，The Merck Manual，16thedition Merck and Co.，Rahway，N.J.1992；Goodman et al.，eds.，Goodmanand Gilman’s The Pharmacological Basis of Therapeutics，8th edition，Pergamon Press，Inc.，Elmeford，N.Y.，(1990)；Katzung，Basic andClinical Pharmacology，Appleton and Lange，Norwalk，Conn.(1992).参看这里收集的所有文献也包括其他地方引证的参考文献。所说的“保护”不需要是绝对的，亦即疾病不必是全部预防或根除，只要与对照人群相比在统计学上有改善(P＝0.05)就是有保护作用。保护可限制在减轻病症发作的严重性或急剧性。

像以前叙述的那样使用药物组合物，为达到预期目的，可用任何方法服用本发明的至少一种维甲类化合物或组合物。

例如，可经各种非肠道给药，像皮下、静脉注射、皮内注射、肌肉注射、腹膜注射、鼻内给药、颅内给药、透皮给药、颊内给药。非肠道给药也可用团块注射或慢慢灌注。可交替或同时口服给药。

使用本发明的药物或组合物的另一种方式是局部用药。本发明的药物或组合物可混入局部用赋形剂像软膏或油膏内使用。

典型的治疗或预防方案包括服用有效量的药物，疗程是一天或几天，直至一周到6个月之间。

当然，服用本发明的药物或组合物的剂量将取决于服药者的年龄、性别、健康状况和体重，同时治疗的种类(如果有的话)，治疗次数，所希望药效的性质。这里所提出的有效剂量的范围是不受限制的，代表优选剂量范围。然而，对个别的受试者将制定最佳剂量，如所了解的，这种最佳剂量是用熟练的相应技术测定的。参看Kerkow et al.，Supra，Goodman etal.，Supra and Katzung，Supra；Avery′s Drug Treatment：Principlesand Practice of Clinical Pharmacology and Therapeutics，3rd edition，ADIS Press，LTD.，Williams and Wilkins，Baltimore，MD，(1987)，Ebadi，Pharacology，Little，Brown and Co.，Boston(1985)，参考这里引证的全部文献。

每一种治疗所需总剂量可以分成多次或按一次剂量给药，药物或组合物可单独服用或与其他治疗药物或对症药物合并使用。

本发明的药物或组合物的有效量是从大约0.001μg至大约100mg/kg体重，优选是从大约5mg/kg至100mg/kg体重，最好是大约20mg/kg至50mg/kg体重，给药间隔4-72小时，疗程2天至5年。

本发明的药物或组合物优选给受试者哺乳动物服用，最好是给受试人服用。

现在对本发明已作了一般的叙述，通过下面作为说明的实施例将更容易理解，但本发明不受这些实施例的限制。实施例1  根据式I的香豆素维甲类化合物

3-乙酰基-5-羧基-7-维甲酰氧基香豆素(I-4)的制备。

将100ml圆底瓶装以电磁搅拌器，带有氯化钙干燥管的冷凝管，其中放入0.6g(0.002M)维甲酸，20ml苯和0.12ml(0.002M)PCl₃，在室温N₂保护下搅拌1小时，然后在旋转蒸发器上浓缩，剩余物溶于20ml绝对无水乙醚备用。

在100ml三颈瓶中加入0.5g(0.002M)3-乙酰基-5-羧基-7-羟基香豆素，0.5ml吡啶和20ml绝对无水乙醚。在室温搅拌下滴加上述维甲酰氯的绝对无水乙醚溶液，加完后再搅拌2小时，滤集固体，干燥，以乙醇重结晶，得0.7克纯产物，并有以下特性：熔点：145-147℃，’HNMR CDCL₃δ1.03(s，6H，1′-双-CH₃)；1.38-2.14(m，6H，脂环-CH₂)；1.71(s，3H，5′-CH₃δ)；2.02(s，3H，9′-CH₃)；2.42(s，3H，13′-CH₃)；2.70(s，3H，3-COCH₃)；4.76(b，1H，5-CO₂H)；5.93-6.41和6.97-7.26(m，6H，维甲酰基的双键氢)；7.40(d，1H，8-H)；7.85(d，1H，6-H)，9，51(s，1H，4-h)；MS C₃₂H₃₄O₇＝530(M⁺)，282(维甲酰基)，248(香豆素)，233(100，248-CH₃)。实施例2  根据式I的香豆素维甲类化合物

3-乙酰基-5-乙氧羰基-7-维甲酰氧基香豆素(I-11)的制备是在与实施例1相同的条件下，由0.56g(0.002M)3-乙酰基-5-乙氧羰基-7-羟基香豆素和0.6g(0.002M)维甲酸(乙醇精制)得到0.5g产物。熔点：162-64℃；’HNMR CDCL₃δ1.04(s，6H-1′-双-CH₃)；1.44(t，3H，5-酯CH₃)；1.14-2.12(m，6H，脂环-CH₂-)；1.72(s，3H，5′-CH₃)；2.03(s，3H，9′-CH₃)；2.42(s，3H，13′-CH₃)；2.70(s，3H，3-COCH₃)；4.24(q，2H，5-酯-CH₂)；5.88-6.48和6.98-7.25(m，6H，维甲酰基的双键氢)；7.36(d，1H，8-H)；7.73(d，1H，6-H)；9.47(s，1H，4-H)；Ms C₃₄H₃₈O₇＝558(M⁺，近基峰)，283，276，261，233，231，175(100，231-28-28)。实施例3  根据式I的香豆素维甲类化合物

4-维甲酰氧基-6-叔丁基-香豆素(I-28)的制备是在与实施例1相同的条件下，由0.6g 4-羟基-6-叔丁基-香豆素和1g维甲酸得0.6g产物(产率43％)，熔点：1.42-44℃，′HNMRδ(CDCL₃)1.05(s，6H，1′-2CH₃)，1.37(s，9H，叔丁基-3CH₃)，1.48，1.62和2.04(m，6H，环-CH)，1.73(s，3H，5′-CH₃)，2.05(s，3H，9′-CH₃)，2.46(s，3H，13′-CH₃)，6.06(s，1H，3-H)，6.16-6.52和7.16-7.26(m，6H，双键-H)，7.30(d，1H，Ar-H)，7.61(m，2H，Ar-H)，MS：500(M₊)，282，218，203，175，161。实施例4  根据式I的香豆素维甲类化合物

4-维甲酰氧基-7-甲基香豆素(I-37)的制备是与实施例1相同的条件下，由0.4g 4-羟基-7-甲基香豆素和1.0g维甲酸得到0.5g产物(产物50％)。熔点：115-117℃，′HNMRδ(CDCL₃)1.03(s，6H，1′-2CH₃)，1.32-2.14(m，6H，环-CH₂)，1.71(s，3H，5′-CH₃)，2.03(s，3H，9′-CH₃)，2.42(s，6H，7，13′-2CH₃)，5.92(s，1H，3-H)，5.96-6.50和6.92-7.26(m，6H，烯烃-H)，7.10(m，2H，Ar-H)7.48(d，1H，Ar-H)，MS：458(M⁺)，430，355，321，307，282，267，175，159，147。实施例5根据式I的香豆素维甲类化合物

4，8-二甲基-7-维甲酰氧基-香豆素(I-32)的制备是在与实施例1相同的条件下，由0.57g 4-甲基-7-羟基-香豆素和1.0g维甲酸得到0.54g产物(产率39％)，溶点178-80℃，’HNMRδ(CDCl₃)，1.04(s，6H，1′-2CH₃)，1.16-2.28(m，6H，环CH₂，H₃)，1.73(s，3H，5′-CH₃)，2.01(s，3H，9′-CH₃)，2.28(s，3H，8-CH₃)，2.41(s，6H，4，13′-2CH₃)，5.99(s，1H，3H)，6.01-6.56和6.86-7.28(m，6H，烯烃-H)，7.06(d，1H，Ar-H)，7.40(d，1H，Ar-H)，MS：472(M⁺)，283，190，175，161。实施例6根据式I的香豆素维甲类化合物

4-甲基-6-乙基-7-维甲酰氧基香豆素(I-31)的制备是在与实施例1相同的条件下，由0.61g 4-甲基-6-乙基-7-羟基香豆素和1.0g维甲酸得到0.43g产物(产率43％)，溶点：120-2℃，′HNMR δ(CDCl₃)，1.05(s，6H，1′-2CH₃)，1.22(t，3H，6-Et-CH₃)，1.16-2.24(m，6H，环-CH₂)，1.72(s，3H，5′-CH₃)，2.02(s，3H，9′-CH₃)，2.41(s，3H，13′-CH₃)，2.66(q，2H，6-Et-CH₂)，6.00(s，1H，3-H)，6.06-6.50和6.88-7.26(m，6H，烯烃-H)，7.07(s，1H，Ar-H)，7.41(s，1H，Ar-H)，MS：486(M⁺)，470，363，283，204，189，175，161。实施例7根据式I的香豆素维甲类化合物

4-甲基-7-维甲酰氧基香豆素的制备是在与实施例1相同的条件下，由0.4g 4-甲基-7-羟基香豆素和0.9g维甲酸得0.64克产物(产率61.5％)，容点：154-6℃，′HNMR，δ(CDCl₃)：1.04(s，6H，1′-2CH₃)，1.47，1.62和1.94(m，6H，环-CH₂)，1.72(s，3H，5′-CH₃)，2.03(s，3H，9′-CH₃)，2.42-2.44(d，6H，4，13′-2CH₂)，5.98(s，1H，3-H)，6.15-6.39和7.09-7.12(m，6H，烯烃-H)，7.15(m，2H，Ar-H)，7.60(d，1H，Ar-H)，MS：458(M⁺)，283，175，161，148。实施例8根据式I的香豆素维甲类化合物

4-甲基-5，7-二维甲酰氧基-香豆素(I-33)的制备是在与实施例1相同的条件下，由0.52g 4-甲基-5，7-二羟基-香豆素和2g维甲酸得0.75g产物(产率36％)，熔点：134-136℃，’HNMRl，δ(CDCl₃)：1.04 (s，12H，1’，1”-4CH₃)，1.48，1.62和2.00((m，12H，双-(环-CH₂))，1.73(s，6H，5’，5”-2CH₃)，2.04(s，6H，9’，9”-2CH₃)，2.48(d，6H，13’，13”-2CH₃)，5.97(s，1H，3-H)，6.15-6.40和6.93-7.17(m，12H，烯烃-H)，7.13(d，1H，Ar-H)，7.16(d，1H，Ar-H)，MS：474(M⁺-282)，283，192，175，161。实施例9根据式I的香豆素维甲类化合物

4-甲基-6-己基-7-维甲酰氧基香豆素(I-34)的制备在与实施例1相同的条件下，由0.7g4-甲基-6-己基-7-羟基香豆素和1.0g维甲酸得到1.0g产物(产率41％)，熔点：114-5℃，’HNMR，δ(CDCL₃)：0.87(t，3H，6-己基-CH₃)，1.04(s，6H，1’-2CH₃)，1.02-2.63)(m，14H，6己基和环-CH₂)，1.73(s，3H，5’-CH₃)，2.03(s，3H，9’-CH₃)，2.42(s，6H，4，13’，2CH₃)，2.58(m，2H，6-己基-CH₂)，6.02(s，1H，3-H)，6.16-6.41和7.06-7.40(m.6H，烯烃-H)，7.10(s，1H，Ar-H)，7.42(s，1H，Ar-H)，MS：542(M⁺)，527，283，260，189，175，161，135。实施例10根据式I的香豆素维甲类化合物

4-维甲酰氧基-6-甲基-香豆素I-35的制备是在与实施例1相同的条件下，由0.5g 4-羟基-6-甲基香豆素和1.0g维甲酸得产物0.73g(产率56.3％)，熔点：104-6℃’HNMR，δ(CDCl₃)：1.04(s，6H，1′-CH₃)，1.42，1.62，和2.03(m，6H，环-CH₂)，1.73(s，3h，5′-CH₃)，2.04(s，3H，9′-CH₃)，2.43(d，6H，6，13′-2CH₃)，6.05(s，1H，3-H)，6.17-6.50和7.16(m，6H，烯烃-H)，7.25(m，2H，Ar-H)，7.37(d，1H，Ar-H)，MS：458(M⁺)，444，430，282，176，161。实施例11根据式I的香豆素维甲类化合物

4-甲基7，8-二维甲酰氧基-香豆素(I-36)的制备是在与实施例1相同的条件下，由0.57g 4-甲基-7，8-二羟基-香豆素和2g维甲酸得1.65g产物(产率73.5％)熔点：106-8℃，’HNMR，δ(CDCl₃)，1.03(s，12H，1′1″-4CH₃)，1.10-2.61(m，12H，环-CH₂)，1.66(s，6H，5′5″-2CH₃)，2.00(s，6H，9′，9″-2CH₃)，2.17(s，6H，13′，13″-2CH₃)，2.24(s，3H，4-CH₃)，5.92(s，1H，3-H)，6.04-6.91和6.84-7.14(m，12H，烯烃-H)，7.18(d，1H，Ar-H)，7.44(d，1H，Ar-H)，MS：474(M-282)，283，192，175，161。实施例12根据式I的香豆素维甲类化合物

4-维甲酰氧基-香豆素(I-38)的制备是在与实施例1相同的条件下，0.8g 4-羟基香豆素和2.0g维甲酸得产物0.65g(产物30％)，溶点：88-91℃，′HNMR δ(CDCL₃)，1.04(s，6H，1′-CH₃)，1.48-2.62(m，6H′环-CH₂)，1.64(s，3H，5′CH₃)，2.04(s，3H，9′-CH₃)，2.36(s，3H，13′-CH₃)，6.03(s，1H，3-H)，6.13-6.5和7.01-7.21(m，6H，烯轻-H)，7.27-7.69(m，4H，Ar-H)，MS：444(M⁺)，429，416，282，255，175，161，159，135。实施例13根据式II嘌呤维甲类化合物的制备

为制备所要的化合物，将全反式维甲酸(0.01M)和三氯化磷(0.003M)合并于圆底烧瓶中，并且加入60ml石油醚搅拌，反应混合物在瓶中以旋转蒸发仪加热，在这一步产生的氯化氢随着反应溶液挥发而逸出，得浅黄褐色透明液体。把反应液倒出蒸馏除去溶剂，剩余物溶于乙酸乙酯。

把带有氨基或羟基的嘌呤化合物(0.01M)溶于适当溶剂中，在室温下搅拌将制备的维甲酰氯滴入，立即产生沉淀，反应液变深，反应继续2小时，室温放置过夜。滤集产物，以水洗或重结晶，滤液浓缩后通过重结晶或层析来纯化。产物通过薄板层析和化合物的溶点检查，化合物的溶点也被研究了。嘌呤维甲类化合物II-A的结构鉴定参数如下：紫外光谱(UV)：λ_max-EtOH 340nm  E＝5180红外光谱(IR)：KBr Cm

-1690-CONHR，1670-CON＜质谱(MS)：m/2 700 M⁺，699(M-1)核磁共振氢谱(′HNMR)：CDCl₃δppm1.05(12H，s，CH₃)     1.5-1.7(8H，m，CH₂)    1.75(6H，s，CH₃)2.05(6H，s，CH₃)      2.55(6H，s，CH₃)       2.05(4H，t，CH₂)元素分析：计算值：C75.28，H8.28，N9.75

      测定值：C75.27，H8.55，N9.33实施例14香豆素维甲类对细胞分化活性

将人的早幼粒白血病细胞(HL-60)培养在RPMI-1640培养基加10％热灭活小牛血清及100U/ml青霉素、100μg/ml链霉素中。细胞培养在5％CO₂、37℃温箱中，取对数生长期细胞接种于小瓶中，每瓶接种5ml培养液及1.2×10⁵到1.2×10⁵个细胞/ml，每组三瓶，分别加入不同浓度的香豆素维甲类，不同时期取少量培养液，用台盼兰排斥法在光镜下计数活细胞。根据形态及NBT还原能力判断细胞分化程度。

NBT还原活性测定：取少量香豆素维甲类处理不同时期的细胞。离心，每管加0.5ml 0.1％NBT(含100ng TPA)。将小管置温箱中37℃，温孵1小时，然后，每管取细胞涂片，并用Wright-Giemsa染色，油镜下计数200个细胞。含有兰黑色颗粒为NBT阳性细胞，50％的分化或有效浓度(ED₅₀或EC₅₀)以香豆素维甲类克分子浓度表示。

细胞形态的测定：将香豆素维甲类不同浓度、不同时间处理的细胞涂片，以Wright-Giema染色，将染色的细胞在油镜下分类计数。香豆素维甲类处理后的HL-60其形态向成熟粒细胞方向分化，表现为细胞体积缩小，核浆比例缩小，核仁变小或消失，染色质集中，一定比例的中、晚幼粒，杆状或分叶核细胞。表2化合物    浓度(M)    NBT(+)％    EC₅₀(M)I-11       10^-4        77        3×10^-6

       10^-5        72

       10^-6        49

       10^-7         8I-19       10^-4        92        9×10^-6

       10^-5        84

       10^-6         5I-2        10^-5        84        2×10^-5

       10^-6        38

       10^-7         2I-12       10^-5        82        1×10^-8

       10^-6        47

       10^-7        30

       10^-8         0

       10^-9         0I-10    6.4×10^-6      99        1.3×10^-8

    6.4×10^-7      96

    6.4×10^-8      82

    6.4×10^-9      33

    6.4×10^-10     10表2(续)化合物    浓度(M)    NBT(+)％    EC₅₀(M)I-6        10^-4        96       6×10^-7

       10^-5        81

       10^-6        78

       10^-7        31

       10^-8         2I-7        10^-5        85      7.5×10^-7

       10^-6        65

       10^-7        12I-27       10^-5        88      5.5×10^-7

       10^-6        80

       10^-7        17I-8        10^-5        98      5.9×10^-8

       10^-6        69

       10^-7        55

       10^-8        34I-9        10^-5        96      6.5×10^-8

       10^-6        88

       10^-7        55

       10^-8        31I-15       10^-5        93      2.6×10^-7

       10^-6        84

       10^-7        46

       10^-8        12表2(续)化合物    浓度(M)    NBT(+)％ EC₅₀(M)I-21      10^-5         94    2.5×10^-7

      10^-6         80

      10^-7         41

      10^-8         17I-26      10^-5         97    8.0×10^-8

      10^-6         91

      10^-7         53

      10^-8         34I-5       10^-5         89    2.8×10^-7

      10^-4         69

      10^-7         41I-4       10^-5         92    7×10^-8

      10^-6         84

      10^-7         73

      10^-8         15I-18      10^-5         44    1×10^-5

      10^-6          8I-17      10^-5         84    1×10^-6

      10^-6         54

      10^-7          2I-3       10^-5         88    8×10^-7

      10^-6         77

      10^-7         12实施例15维甲类对小鼠胚胎吸收的抗致畸作用

在雌雄鼠合笼的第二天早晨，用含涂抹法检查雌鼠阴道，若有精液或阴栓，雌鼠就被认为是孕鼠。在受孕第七天开始给药，每天一次，至第20天。此时，当雌鼠被鉴定为孕鼠时，脱椎处死小鼠，检查两侧子宫，计数死胎、活胎及吸收胎，活胎进一步检查其骨骼异常情况。表3  I-10对小鼠胚胎吸收的影响

分组	剂量(毫克/公斤)	吸收胎(％)吸收数目/植入数目
			对照		0/135
吐温80	0.3％	0/104
			I-10	40	0/107
	20	0/104
			全反式维甲酸	10	73/99(73.7％)

表4 I-9对小鼠胚胎吸收的影响

分组	剂量(毫克/公斤)	吸收胎(％)吸收数目/植入数目
			对照		0/135
吐温80	0.3％	0/104
			I-9	40	0/119
	20	0/113
			全反式维甲酸	10	73/99(73.7％)

表5  II对小鼠胚胎吸收的影响

分组	剂量(毫克/公斤)	孕鼠	植入数目	吸收数目
					对照		14	153	0
II-A	20	12	141	10
						40	15	181	17
吐温80	0.3％	15	184	4
					全反式维甲酸	15	15	186	111

实施例16  香豆素维甲类化合物对巴豆油诱发的小鼠表皮鸟氨酸脱羧酶活性的影响。

6-8周龄ICR小鼠，预先给予香豆素维甲类化合物。第3天取0.2ml含1％的巴豆油的丙酮涂于小鼠皮肤上。涂敷后5小时处死动物，用52℃简单热处理30秒钟，把表皮分离下来，再用一搅拌器将其绞碎。细胞悬浮液和肉液以30000xg30秒离心分离，取得上清液。通过测量从L-(¹⁴C)-鸟氨酸释放出的CO₂来测定鸟氨酸脱羧酶(ODC)酶活性并以CO₂/30min/mg蛋白来表示，其结果香豆素维甲类化合物I-10和I-6示于附图1。从附图可以看出，香豆素维甲类化合物能显著抑制由巴豆油引起的ODC活性。ODC活性是检验癌化学预防或助长的一个关键参数。实施例17  香豆素维甲类化合物的抗氧化作用

将1mM FeSO₄和10mM半胱氨酸加入鼠肝微粒体来诱发脂质过氧化，反应是在一含有10mM磷酸缓冲液(pH7.4)的反应混合物在温度37℃下进行30分钟。通过加入0.3ml的20％三氯乙酸溶液来终止反应。然后加硫代巴比土酸，将此混合物煮沸10分钟，在水龙头下冷却试管后，在532nm处测量光密度。处理组和对照组的脂质过氧化两者都以nmol MDA/mg蛋白表示。抑制百分率便表明受试的香豆素维甲类化合物的抗氧化特性。实施例18  香豆素维甲类化合物抗致突变作用

抗致突变试验是根据Ames等用鼠沙门氏菌TA102及TA100和哺乳动物微粒体酶方法改进而成。β-萘黄酮和苯巴比妥诱导的鼠肝上清液(900xg离心，S-9部分)用作代谢激活的酶源。将签定的菌液(由Ames教授赠送)接种于平皿上，并在37℃温箱中温孵15小时。从每一平皿取0.1ml菌液加入无菌试管中，每管加0.1ml不同浓度的香豆素维甲类化合物和0.5ml、S-9混合液或磷酸缓冲液，在37℃水浴30分钟，然后加2ml琼脂液。完全混合后将溶液转移到平皿上，再次在37℃温孵48小时。温孵后计数每平皿的菌落数。比较对照组及处理组细菌回复突变数，并计算出抑制率。

表6  I-6和I-5对Fe²⁺/Cys引起的鼠肝微粒体过氧化反应

(n＝3)

分组	浓度(μm)	脂质过氧化(μm MDA/mg蛋白)	抑制率(％)
				对照		2.38±0.12
I-6	2	2.16±0.18	8.6
					20	2.13±0.19	9.6
	200	2.03±0.16*	13.5
				I-5	1	2.19±0.13	7.3
	10	1.95±0.18*	16.6
					100	1.43±0.16**	36.6

^*P＜0.05^**P＜0.01表7 I-6对MMS致突物(0.5μl/平皿)诱发的鼠沙门氏菌TA100和TA102(n＝3)组氨酸/回复突变的影响

分组	浓度(mg/平皿)	组氨酸回复突变/每皿
								TA100	抑制率(％)	TA102	抑制率(％)
MMS		1083.7±99.3		1760±288.4
						I-6	0.1	971.3±102.7	12.8	1560±40.0	13.8
	0.5	947.3±60.3	15.5	1375±241.5	26.6

实施例19 香豆素维甲类化合物对巴豆油引起的鼠耳肿胀的影响

取体重18-20克的ICR小鼠，每组10只。对处理组每日给予表8所示的香豆素维甲类化合物剂量共10天。经三次剂量处理后，处理组和对照组小鼠左耳都涂上0.05ml乙醚中的20％巴豆油。6小时后处死全部小鼠，其双耳用角膜刀穿孔，然后称重，计算每只小鼠两耳重量之差。用t测验进行统计学上计算。巴豆油诱发鼠耳肿胀是评估促癌的一种经典方法。

表8  I-10和I-6对巴豆油引起鼠耳肿胀的抑制作用

分组	剂量(毫克/公斤)	耳肿胀(X±SD)毫克	抑制率(％)	P
					对照		16.5±1.4
I-10	50	14.2±2.3	14	＜0.05
						100	11.3±3.0	32	＜0.01
I-6	50	13.4±3.1	19	＜0.01
						100	15.1±2.7	9

实施例20  维甲类化合物对胎鼠骨骼异常的抗致畸效应

如实施例15所述从雌鼠体内取出活胚胎置于95％的乙醇中直至固定，然后放入茜素染料中染红。在鼠胎成为透明时，剖开鼠胎，在显微镜下观察检查其骨骼。表9 I-10对鼠胎骨质异常的作用

分组	剂量(毫克/公斤)	钙化延迟(％)
				枕骨钙化延迟/胎鼠	胸骨钙化延迟/胎鼠
		对照				0/79	0/79
吐温80	0.3％			0/69	0/69
		I-10	40			15/81	21/81
	20			22/66	14/66
		全反式维甲酸	101			6/16	16/16

表10-9对胎鼠骨骼异常的影响

分组	剂量(毫克/公斤)	钙化延迟(％)
				枕骨钙化延迟/胎鼠	胸骨钙化延迟/胎鼠
		对照				0/79	0/79
吐温80	0.3％			0/69	0/69
		I-9	40			3/77	2/77
	20			0/75	0/75
		全反式维甲酸	10			16/16	16/16

表11 II-A对胎鼠骨骼异常的影响

分组	剂量(毫克/公斤)	钙化延迟(％)枕骨      胸骨	腭裂(％
				对照	-	0         0	0
溶剂	-	5.4       5.4	0
				II-A	20	7.6       9.0	0
	40	7.2       7.2	0
				全反式维甲酸	15	96.0      71.0	48

实施例21  香豆素维甲类化合物对癌细胞的抑制作用

用人癌细胞系(KB，A2780，MCF-7，HL-60，A549)做此试验。为单层培养，将0.5ml胰蛋白酶溶液(0.3gm/ml)加入多个烧瓶中进行消化。微量滴定板(96孔)用于细胞培养，把200μl细胞悬浮物(1200肿瘤细胞)置于每一孔中并在37℃下孵育24小时。接着添加试验化合物，将对照烧瓶和处理烧瓶都置于一个CO₂温箱内培训5天。为进行MTT试验，将200μl MTT溶液(5mg在10ml磷酸缓冲剂中)加上培养基都加进再温孵另外4小时。随着温孵，去掉上清液，把200μlDMSO(二甲基亚砜)加到每一孔中。稍加搅拌用MR700 Elisa在570nm处(参考波长为450nm)测OD(光密度)值。该化合物的ED₅₀(半数有效剂量)和肿瘤细胞存活率计算出抑制的百分比。表12 HL-60细胞MTT试验结果

化合物	浓度(M)	抑制％	ED50(M)
				I-5	10-5	51.6±0.0	8.5×10-6
	10-6	34.0±7.1
					10-7	11.5±4.2
I-8	10-5	63.9±2.9	1×10-7
					10-6	54±1.9
	10-7	50.5±0.9
					10-8	29.7±1.4
I-9	10-5	61.5±1.9	9.5×10-7
					10-6	50.6±0.5
	10-7	48.8±0.5
					10-8	28.0±5.2
I-13	10-5	5.5±3.9	＞10-5
					10-6	4.3±6.1
	10-7	3.5±3.9
				I-14	10-5	52.6±1.3	9.0×10-6
	10-6	30.0±1.4
					10-7	10.4±2.4
I-15	10-5	54.5±2.8	9×10-7
					10-6	48.8±1.3
	10-7	34.6±0.0
					10-8	16.2±2.4
I-21	10-5	61.2±2.4	1×10-6
					10-6	49.9±2.5
	10-7	32.5±1.1
				I-26	10-5	68.7±0.2	9×10-7
	10-6	52.6±0.5
					10-7	43.8±1.3
	10-8	9.4±3.7

实施例22维甲类化合物对大鼠软骨肉瘤生长的影响

移植的软骨肉瘤获自霍夫曼-拉罗奇分子生物学研究所Dr.Trown，而Wistar大鼠则由中国医学科学院实验动物饲养中心提供。依据文献Cancer Treatment Reports 60(11)：1647-1653(1976)所说明的常规移植方法，用套管针把软骨肉瘤的许多小碎片皮下移植入大鼠右侧腹股沟。带瘤的大鼠随机分到对照组和处理组，每组10只大鼠，按指定剂量只饲该化合物12天。植入后60天处死大鼠，测定肿瘤重量，抑制率按下式计算：表13 I-10对大鼠软骨肉瘤生长的影响

分组	动物数开始  结束	体重开始    结束	瘤重(g)	抑制率(％)
					对照组	10     10	95.4    251.0	14.2
处理组*5mg/kg	10     10	97.8    258.4	12.1	14.8
					10mg/kg	10     9	98.2    248.0	12.8	9.8
20mg/kg	10     9	97.4    253.1	8.2	42.2**

^*给药^**P＜0.05表14 II-A对大鼠软骨肉瘤生长的影响

分组	动物数开始      结束	体重开始        结束	瘤重(g)	抑制率(％)
					对照组	10         10	76.2        218.8	10.7
2mg/kg×10	10         9	74.1        130.6	5.4	49.5
					5mg/kg×10	10         9	71.7        129.2	4.0	62.6

实施例23维甲类化合物对癌细胞分化和癌细胞存活的影响

用实施例14和21的记录资料分别做NBT和MTT试验。表15香豆素维甲类化合物对HL-60细胞的影响

化合物	NBT ED50	MTT(mol/L)
			I-28	＞10-5	＞10-5
I-29	＞10-5	1.9×＞10-6
			I-30	＞10-5	＞10-5
I-31	＞10-5	＞10-5
			I-32	1.3×10-5	1.1×10-5
I-33	＞10-5	3.2×10-6
			I-34	＞10-5	＞10-5
I-35	6.7×10-6	2.6×＞10-6
			I-36	＞10-5	3.2×＞10-6

表16嘌呤维甲类化合物对HL-60、HCT-8、A2780、KB和BEL7402细胞系的影响

化合物	NBT(mol/L)	MTT ED50(mol/L)
							HL-60	HCT-8	A2780	KB	BEL7402
II-D	＞10-5	4×10-6	＞10-5	＞10-5	5×10-6
						II-F	＞10-5	＞10-5	＞10-5	＞10-5	＞10-5

由于本发明已作了充分描述，本专业人员会懂得只要不脱离本发明的精神和范围，不采用不适当的实验方法，在相同参数、浓度和条件的一整套范围内都能做出相同的结果。

虽然本发明结合其具体的实施例已经作了说明，但应该理解它可以作进一步改进。本申请要涵盖本发明的一切变动、用途和修改，总之，按照本发明的原理包括离开现在披露的本应属于本发明已知的或通常操作的范围之内，以及可以适用于下文基本特征的下列所附的权利要求之内。

在此所引用的文献，包括期刊上的文章和摘要，已经发表的或相应在美国或其他国家的专利申请，或任何其他参考文献，都完全结合在此文献之内，包括已提供的引用文献的所有数据、表格、附图和正文，也一并包括文献之内。

关于已知的方法步骤、常规方法步骤、已知的方法和常规方法一概不能容纳在本发明所公开的、所讲授或提示的相关技术的见解、说明或实施方式范围内。

上述具体实施方式的说明把本发明总的性质提示得如此充分使得他人通过应用其所擅长的技术知识，包括引用在此的文献内容，可以很容易地变换这些具体的实施方式并/或把这些具体实施方式改编成各种各样的应用，而并没有超越的一套实验工作，也没有脱离出本发明总的基本原理。所以，这样的改编和变换都要被看做根据在此提供的讲授和指导，是在已公开实施方式的等同意义和范围之内。不言而喻，此处表达方式和名词术语是为了说明书的目的而不受其所限，因此本说明书的名词术语和表达方式是想要熟练的工作者按照这里提供的讲授和指导，结合本专业的普通知识加以理解。

Claims (18)

1.根据式(I)的化合物其特征是：R¹＝H，C₁-C₁₈烷基，或COR⁷，其中R⁷＝H，OH，C₁-C₁₈烷氧基，或NHR⁸，其中R⁸＝H，C₁-C₁₈烷基，未取代苯基，或由OH，CO₂H，OCH₃或NO₂取代的苯基；R²＝H，OH，C₁-C₁₈烷基，或OR，其中R＝维甲酰基；R³＝H，CH₃，COR⁷，OR，或CH₂OR，其中R和R⁷如上所规定；R⁴＝H，卤素，OH，C₁-C₁₈烷基，COR⁷，或OR，其中R和R⁷如上所规定；R⁵＝H或OR，其中R如上所规定；和R⁶＝H，CH₃，COR⁷或OR，其中R和R⁷如上所规定；在以上情况下，R²-R⁶中至少有一个含有维甲酰基。

2.根据权利要求1所述的化合物，其特征是R¹＝H或COR⁷，其中R⁷是CH₃，C₂H₅，NH₂或OH。

3.根据权利要求1所述的化合物，其特征是R²＝H，OR或CH₃，其中R＝维甲酰基。

4.根据权利要求1所述的化合物，其特征是R³＝H，CH₃，OR，CH₂OR或COR⁷，其中R＝维甲酰基和R⁷＝OH，C₂H₅或OC₁₂H₂₅。

5.根据权利要求1所述的化合物，其特征是R⁴＝H，Cl，COOH，C₂H₅，C₆H₁₃，COCH₃或COC₆H₅。

6.根据权利要求1所述的化合物，其特征是R⁵＝H或OR，其中R＝维甲酰基。

7.根据权利要求1所述的化合物，其特征是R⁶＝H，COOH，COCH₃，CH₃或OR，其中R＝维甲酰基。

8.根据权利要求1所述的化合物，其特征在于该化合物是选自由(I-1)，(I-2)，(I-3)，(I-4)，(I-5)，(I-6)，(I-7)，(I-8)，(I-9)，(I-10)，(I-11)，(I-12)，(I-13)，(I-14)，(I-15)，(I-16)，(I-17)，(I-18)，(I-19)，(I-20)，(I-21)，(I-22)，(I-23)，(I-24)，(I-25)，(I-26)，(I-27)，(I-28)，(I-29)，(I-30)，(I-31)，(I-32)，(I-33)，(I-34)，(I-35)，(I-36)，(I-37)，(I-38)及其异构体组成的一族化合物。

9.根据权利要求1所述的化合物，其特征是R¹＝COCH₃，R²＝R³＝R⁴＝H和R⁵＝R⁶＝OR，其中R＝维甲酰基。

10.一药物组合物包含的根据权利要求1所述的一化合物，和一药物可接受的载体。

11.根据权利要求10所述的药物组合物，还包含有一选自抗癌化合物或组合物或免疫调节剂的药物。

12.一种抑制哺乳动物细胞或组织中癌前或与癌相关病变的方法，包含服用根据权利要求1所述化合物对癌前或癌有效抑制量的方法。

13.根据式(II)的化合物：

其特征在于R是嘌呤衍生物。

14.根据权利要求13所述的化合物，其特征在于该化合物是选自由(II-A)，(II-B)，(II-C)，(II-D)，(II-E)，(II-F)，(II-G)，(II-H)，(II-I)，(II-J)，(II-K)，(II-L)及其异构体组成的一族化合物。

15.根据权利要求13所述的化合物，其特征是

16.一种药物组合物包含有一根据权利要求13所述的一化合物和一药物可接受的载体。

17.根据权利要求16所述的一药物组合物，还包含有一选自抗癌化合物或组合物或一免疫调节制剂的药物。

18.一种抑制哺乳动物细胞或组织中的癌前或与癌相关病变的方法，包含服用根据权利要求16所述的药物组合物对癌前或癌的有效抑制量的方法。

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