CN118317960A - 吡唑并环化合物及其应用 - Google Patents

吡唑并环化合物及其应用 Download PDF

Info

Publication number
CN118317960A
CN118317960A CN202280075557.4A CN202280075557A CN118317960A CN 118317960 A CN118317960 A CN 118317960A CN 202280075557 A CN202280075557 A CN 202280075557A CN 118317960 A CN118317960 A CN 118317960A
Authority
CN
China
Prior art keywords
compound
mmol
added
pharmaceutically acceptable
ethyl acetate
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN202280075557.4A
Other languages
English (en)
Inventor
韦昌青
郭强
王聪
乐豹
钱文远
黎健
陈曙辉
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Hainan Kangzhe Meili Technology Co ltd
Original Assignee
Hainan Kangzhe Meili Technology Co ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Hainan Kangzhe Meili Technology Co ltd filed Critical Hainan Kangzhe Meili Technology Co ltd
Publication of CN118317960A publication Critical patent/CN118317960A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/4985—Pyrazines or piperazines ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/04—Ortho-condensed systems

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Oxygen Or Sulfur (AREA)

Abstract

一类吡唑并环化合物及其应用，具体公开了式(IV)所示化合物及其药学上可接受的盐。

Description

吡唑并环化合物及其应用
相关申请的引用
本申请要求于2021年11月12日向中国国家知识产权局提交的第202111342790.8号中国发明专利申请、以及于2022年11月01日向中国国家知识产权局提交的第202211358879.8号中国发明专利申请的优先权和权益，所述申请公开的全部内容通过引用整体并入本文中。
技术领域
本发明涉及一类吡唑并环化合物及其应用，具体涉及式(ⅠV)所示化合物及其药学上可接受的盐。
背景技术
Janus激酶(JAKs)是一种胞质酪氨酸激酶，可传递细胞因子信号。从膜受体到STAT转录因子。JAK家庭包含四个成员，JAK1、JAK2、JAK3和TYK2。JAK-STAT通路将来自多种细胞因子，生长因子和激素的细胞外信号传导到细胞核，并且负责数千个蛋白质编码基因的表达。JAK-STAT途径将胞外信号转化为转录应答涉及几个步骤:1)当细胞表面的细胞因子受体与其各自的细胞因子配体结合后构型发生变化从而引起受体分子的二聚化，这使得与受体偶联的JAK激酶相互靠近并通过交互的酪氨酸磷酸化作用而活化。2)JAK激活后催化受体上的酪氨酸残基发生磷酸化修饰，继而这些磷酸化的酪氨酸位点与周围的氨基酸序列形成“停泊位点”(docking site)，同时含有SH2结构域的STAT蛋白被招募到这个“停泊位点”。3)最后，激酶JAK催化结合在受体上的STAT蛋白发生磷酸化修饰，被激活的STAT蛋白离开受体并组成二聚体后,再转移到细胞核内对特定的基因进行转录调节。JAK-STAT细胞内信号转导服务于干扰素，大多数白介素，以及多种细胞因子和内分泌因子，如EPO，TPO、GH、OSM、LIF、CNTF、GM-CSF和PRL(Vainchenker W.E T al.(2008)。不同的JAK家族成员选择性地结合在不同的细胞因子受体上，赋予信号传导特异性，从而发挥不同的生理学作用，这种选择性的作用方式使得JAK抑制剂可以相对特异性地应用于疾病治疗。TYK2是JAK激酶家族成员，是IL-12、IL-23和I型干扰素等炎性细胞因子信号传导的关键介质。这些细胞因子与银屑病、炎症性肠病(IBD)和系统性红斑狼疮(SLE)等多种炎症和自身免疫性疾病的发病机制有关。因此开发对TYK2高抑制活性，对JAK2及JAK1有一定的抑制活性的抑制剂，就可对TYK2与JAK2及JAK1胞内形成杂二聚体进行最大程度抑制，阻断信号传导通路，从而阻断炎性细胞因子IL-12，IL-23及I型干扰素的信号转导，治疗特定疾病。
发明内容
本发明提供了式(IV)所示化合物或其药学上可接受的盐，
其中，
R A选自H，且R B选自
或者，R A和R B以及它们共同相连的碳原子形成
环A选自C 5-8环烷基；
环B选自C 5-12环烷基或5-12元杂环烷基；
R 1选自H、C 1-3烷基-SO 2-、CN和-CH 2CN，所述C 1-3烷基任选被1、2或3个卤素取代；
R 2选自H和C 1-3烷基，所述C 1-3烷基任选被1、2或3个卤素取代；
R 3选自H、NH 2、卤素、OH、CN和C 1-3烷基，所述C 1-3烷基任选被1、2或3个卤素取代；
T 2选自CH和N。
本发明的一些方案中，环A选自
本发明的一些方案中，环B选自
其中，L 1选自-(CH 2) m-，所述-(CH 2) m-任选被1、2或3个卤素取代；
L 2选自-(CH 2) n-，所述-(CH 2) n-任选被1、2或3个卤素取代；
m和n分别独立地选自1、2和3；
T 1选自CH和N；
R 1如式(IV)所定义。
本发明的一些方案中，式(IV)所示化合物或其药学上可接受的盐，其选自式(IV-1)和(IV-2)所示的结构，
其中，R 1、R 2、R 3、T 2、环A和环B如式(IV)所定义。
本发明还提供式(I)所示化合物或其药学上可接受的盐，
其中，
R 1选自H、C 1-3烷基-SO 2-、CN和-CH 2CN，所述C 1-3烷基任选被1、2或3个卤素取代；
R 2选自H和C 1-3烷基，所述C 1-3烷基任选被1、2或3个卤素取代；
R 3选自H、NH 2、卤素、OH、CN和C 1-3烷基，所述C 1-3烷基任选被1、2或3个卤素取代；
L 1选自-(CH 2) m-，所述-(CH 2) m-任选被1、2或3个卤素取代；
L 2选自-(CH 2) n-，所述-(CH 2) n-任选被1、2或3个卤素取代；
m和n分别独立地选自1、2和3；
T 1选自CH和N；
T 2选自CH和N。
在本发明的一些方案中，上述R 1选自H、C 1-3烷基-SO 2-、CN和-CH 2CN，所述C 1-3烷基任选被1、2或3个F取代，其他变量如本发明所定义。
在本发明的一些方案中，上述R 1选自H、CF 3SO 2-、CN和-CH 2CN，其他变量如本发明所定义。
在本发明的一些方案中，上述R 2选自H和CH 3，其他变量如本发明所定义。
在本发明的一些方案中，上述R 3选自H和NH 2，其他变量如本发明所定义。
在本发明的一些方案中，上述L 1选自-CH 2-和-CH 2CH 2-，所述-CH 2-和-CH 2CH 2-任选被1、2或3个F取代，其他变量如本发明所定义。
在本发明的一些方案中，上述L 1选自-CH 2-和-CH 2CH 2-，其他变量如本发明所定义。
在本发明的一些方案中，上述L 2选自-CH 2-和-CH 2CH 2-，所述-CH 2-和-CH 2CH 2-任选被1、2或3个F取代，其他变量如本发明所定义。
在本发明的一些方案中，上述L 2选自-CH 2-和-CH 2CH 2-，其他变量如本发明所定义。
在本发明的一些方案中，上述结构片段 选自吖啶基、环丁基、四氢吡咯基、哌啶基和环己基，其他变量如本发明所定义。
在本发明的一些方案中，上述结构片段 选自 其他变量如本发明所定义。
在本发明的一些方案中，上述化合物或其药学上可接受的盐，其选自：
其中，R 1、R 2、R 3、T 1、T 2、m和n如本发明所定义。
本发明还提供式(I)所示化合物或其药学上可接受的盐，
其中，
R 1选自H、C 1-3烷基-SO 2-、CN和-CH 2CN，所述C 1-3烷基任选被1、2或3个卤素取代；
R 2选自H和CH 3；
R 3选自H和NH 2；
L 1选自-(CH 2) m-，所述-(CH 2) m-任选被1、2或3个卤素取代；
L 2选自-(CH 2) n-，所述-(CH 2) n-任选被1、2或3个卤素取代；
m和n分别独立地选自1、2和3；
T 1选自CH和N；
T 2选自CH和N。
本发明还有一些方案是由上述各变量任意组合而来。
本发明还提供下述化合物或其药学上可接受的盐，其选自：
本发明还提供下述化合物或其药学上可接受的盐，其化合物选自：
本发明还提供了上述化合物或其药学上可接受的盐在制备治疗银屑病和/或炎性肠病的药物中的应用。
本发明还提供如下的测试方法：
测试方法1：对II型胶原蛋白致小鼠足趾肿胀模型的抗炎作用测试
实验目的：DBA/1小鼠尾根部皮下注射II型胶原蛋白，建立小鼠关节炎模型；使用该模型考察受试样品对II型胶原蛋白致小鼠足趾肿胀模型的抗炎作用。
实验方法
1.1试剂配制
取1.43mL醋酸，加500mL的超纯水配制成0.05mol·L-1醋酸溶液。
称取适量II型胶原蛋白，加入适量体积0.05mol·L-1醋酸溶液至盛有胶原蛋白的玻璃瓶中，上下颠倒使胶原蛋白完全溶解，得浓度2.0mg·mL-1胶原蛋白溶液；取等体积弗氏完全佐剂或弗氏不完全佐剂(第一次免疫使用弗氏完全佐剂，第二次加强免疫时使用弗氏不完全佐剂)于冰上，逐滴加入胶原蛋白溶液且同时用磁力搅拌器缓慢搅拌，得均匀乳液，以乳液滴至水面不扩散为判断标准。
1.2动物模型制备
实验D1，用1mL注射器吸取胶原蛋白乳液，注射到小鼠尾根部皮下，每只动物注射100μL(1mg·mL-1)，共免疫170只(剩余10只动物不免疫，作为正常对照组)。免疫三周后(D21)进行加强免疫一次，注射100μL/只(1mg·mL-1)。定期观察动物状态及足趾肿胀诱导情况，当左右后爪的脚掌厚度增加率大于20％时表示免疫成功。同时对四只足爪肿胀程度进行评分。
足部肿胀情况评分规则如下：
1分：跗骨或踝关节单个区域轻度红肿；
2分：跗骨延伸至踝关节区域轻度红肿；
3分：从踝关节到跖骨区域中度红肿；
4分：关节，脚掌及脚趾区域重度红肿或肢体僵硬。
单个肢体最高分4分，每只小鼠最高积分16分。
脚掌厚度测量：使用游标卡尺测量小鼠脚掌或踝关节的厚度，将测定数据导入excel。
1.3动物分组及给药
根据动物体重、踝关节厚度、足爪肿胀程度评分等指标和动物整体状况等对模型动物进行筛选，淘汰动物体重、踝关节厚度、足爪肿胀程度评分等指标不合格的动物，挑选状态良好，踝关节厚度增加明显且相近的动物，随机分组，并开始给药，共给予14天。设置一组正常组(不进行免疫)，不做处理。
1.4临床观察及指标测定
第2次免疫后，每天对动物状态及足趾肿胀情况进行观察(1次/天)，待大部分免疫动物出现明显足趾肿胀后开对动物肢体评分进行监测。给药开始后，每天对动物状态进行观察(1次/天)，每周记录2次动物体重，同时对动物肢体进行评分(2次/周)，并测量踝关节厚度(2次/周)。
技术效果
本发明的化合物在激酶4个亚型JAK1、JAK2、JAK3和TYK2的体外活性测试中展现了对TYK2和/或JAK1和/或JAK2的良好的选择性抑制。在小鼠中都有良好的口服生物利用度，较高的暴露量，有利于产生良好的体内药效。本发明化合物对IL-23诱导C57BL/6小鼠耳廓表皮异常增生模型的动物体重无明显影响，能不同程度的抑制小鼠造模侧耳厚度增加，且对降低动物造模侧耳朵重量作用均呈现出良好的量-效关系。口服本发明化合物能显著改善小鼠足掌肿胀程度，改善评分及相对评分，同时对动物体重无明显影响。
附图说明：
图1化合物1的立体结构椭球图；
图2化合物1沿b轴方向的晶胞堆积图；
图3化合物1绝对构型图。
定义和说明
除非另有说明，本文所用的下列术语和短语旨在具有下列含义。一个特定的术语或短语在没有特别定义的情况下不应该被认为是不确定的或不清楚的，而应该按照普通的含义去理解。当本文中出现商品名时，意在指代其对应的商品或其活性成分。
这里所采用的术语“药学上可接受的”，是针对那些化合物、材料、组合物和/或剂型而言，它们在可靠的医学判断的范围之内，适用于与人类和动物的组织接触使用，而没有过多的毒性、刺激性、过敏性反应或其他问题或并发症，与合理的利益/风险比相称。
术语“药学上可接受的盐”是指本发明化合物的盐，由本发明发现的具有特定取代基的化合物与相对无毒的酸或碱制备。当本发明的化合物中含有相对酸性的功能团时，可以通过在纯的溶液或合适的惰性溶剂中用足够量的碱与这类化合物的中性形式接触的方式获得碱加成盐。药学上可接受的碱加成盐包括钠、钾、钙、铵、有机胺或镁盐或类似的盐。当本发明的化合物中含有相对碱性的官能团时，可以通过在纯的溶液或合适的惰性溶剂中用足够量的酸与这类化合物的中性形式接触的方式获得酸加成盐。本发明的某些特定的化合物含有碱性和酸性的官能团，从而可以被转换成任一碱或酸加成盐。
本发明的药学上可接受的盐可由含有酸根或碱基的母体化合物通过常规化学方法合成。一般情况下，这样的盐的制备方法是：在水或有机溶剂或两者的混合物中，经由游离酸或碱形式的这些化合物与化学计量的适当的碱或酸反应来制备。
除非另有说明，术语“异构体”意在包括几何异构体、顺反异构体、立体异构体、对映异构体、旋光异构体、非对映异构体和互变异构体。
本发明的化合物可以存在特定的几何或立体异构体形式。本发明设想所有的这类化合物，包括顺式和反式异构体、(-)-和(+)-对映体、(R)-和(S)-对映体、非对映异构体、(D)-异构体、(L)-异构体，及其外消旋混合物和其他混合物，例如对映异构体或非对映体富集的混合物，所有这些混合物都属于本发明的范围之内。烷基等取代基中可存在另外的不对称碳原子。所有这些异构体以及它们的混合物，均包括在本发明的范围之内。
除非另有说明，术语“对映异构体”或者“旋光异构体”是指互为镜像关系的立体异构体。
除非另有说明，术语“顺反异构体”或者“几何异构体”系由因双键或者成环碳原子单键不能自由旋转而引起。
除非另有说明，术语“非对映异构体”是指分子具有两个或多个手性中心，并且分子间为非镜像的关系的立体异构体。
除非另有说明，“(+)”表示右旋，“(-)”表示左旋，“(±)”表示外消旋。
除非另有说明，用楔形实线键 和楔形虚线键 表示一个立体中心的绝对构型，用直形实线键 和直形虚线键 表示立体中心的相对构型，用波浪线 表示楔形实线键 或楔形虚线键 或用波浪线 表示直形实线键 或直形虚线键
本发明的化合物可以存在特定的几何或立体异构体形式。本发明设想所有的这类化合物，包括顺式和反式异构体、(-)-和(+)-对映体、(R)-和(S)-对映体、非对映异构体、(D)-异构体、(L)-异构体，及其外消旋混合物和其他混合物，例如对映异构体或非对映体富集的混合物，所有这些混合物都属于本发明的范围之内。烷基等取代基中可存在另外的不对称碳原子。所有这些异构体以及它们的混合物，均包括在本发明 的范围之内。
除非另有说明，术语“互变异构体”或“互变异构体形式”是指在室温下，不同官能团异构体处于动态平衡，并能很快的相互转化。若互变异构体是可能的(如在溶液中)，则可以达到互变异构体的化学平衡。例如，质子互变异构体(proton tautomer)(也称质子转移互变异构体(prototropic tautomer))包括通过质子迁移来进行的互相转化，如酮-烯醇异构化和亚胺-烯胺异构化。价键异构体(valence tautomer)包括一些成键电子的重组来进行的相互转化。其中酮-烯醇互变异构化的具体实例是戊烷-2,4-二酮与4-羟基戊-3-烯-2-酮两个互变异构体之间的互变。
除非另有说明，术语“富含一种异构体”、“异构体富集”、“富含一种对映体”或者“对映体富集”指其中一种异构体或对映体的含量小于100％，并且，该异构体或对映体的含量大于等于60％，或者大于等于70％，或者大于等于80％，或者大于等于90％，或者大于等于95％，或者大于等于96％，或者大于等于97％，或者大于等于98％，或者大于等于99％，或者大于等于99.5％，或者大于等于99.6％，或者大于等于99.7％，或者大于等于99.8％，或者大于等于99.9％。
除非另有说明，术语“异构体过量”或“对映体过量”指两种异构体或两种对映体相对百分数之间的差值。例如，其中一种异构体或对映体的含量为90％，另一种异构体或对映体的含量为10％，则异构体或对映体过量(ee值)为80％。
可以通过的手性合成或手性试剂或者其他常规技术制备光学活性的(R)-和(S)-异构体以及D和L异构体。如果想得到本发明某化合物的一种对映体，可以通过不对称合成或者具有手性助剂的衍生作用来制备，其中将所得非对映体混合物分离，并且辅助基团裂开以提供纯的所需对映异构体。或者，当分子中含有碱性官能团(如氨基)或酸性官能团(如羧基)时，与适当的光学活性的酸或碱形成非对映异构体的盐，然后通过本领域所公知的常规方法进行非对映异构体拆分，然后回收得到纯的对映体。此外，对映异构体和非对映异构体的分离通常是通过使用色谱法完成的，所述色谱法采用手性固定相，并任选地与化学衍生法相结合(例如由胺生成氨基甲酸盐)。
本发明的化合物可以在一个或多个构成该化合物的原子上包含非天然比例的原子同位素。例如，可用放射性同位素标记化合物，比如氚( 3H)，碘-125( 125I)或C-14( 14C)。又例如，可用重氢取代氢形成氘代药物，氘与碳构成的键比普通氢与碳构成的键更坚固，相比于未氘化药物，氘代药物有降低毒副作用、增加药物稳定性、增强疗效、延长药物生物半衰期等优势。本发明的化合物的所有同位素组成的变换，无论放射性与否，都包括在本发明的范围之内。
除非另有规定，术语“C 1-3烷基”用于表示直链或支链的由1至3个碳原子组成的饱和碳氢基团。所述C 1-3烷基包括C 1-2和C 2-3烷基等；其可以是一价(如甲基)、二价(如亚甲基)或者多价(如次甲基)。C 1-3烷基的实例包括但不限于甲基(Me)、乙基(Et)、丙基(包括n-丙基和异丙基)等。
除非另有规定，术语“卤代素”或“卤素”本身或作为另一取代基的一部分表示氟、氯、溴或碘原子。
除非另有规定，“C 5-8环烷基”表示由5至8个碳原子组成的饱和环状碳氢基团，其包括单环和双环体系，其中双环体系包括螺环、并环和桥环。所述C 5-8环烷基包括C 3-6、C 3-5、C 5-8、C 5-7、C 5-6、C 5、C 6或C 7环烷基等；其可以是一价、二价或者多价。C 5-8环烷基的实例包括，但不限于，双环[1.1.1]戊基、降冰片烷基等。
除非另有规定，“C 5-12环烷基”表示由5至12个碳原子组成的饱和环状碳氢基团，其包括单环、双环和三环体系，其中双环和三环体系包括螺环、并环和桥环。所述C 5-12环烷基包括C 5-10、C 5-8、C 5-6环烷基等；其可以是一价、二价或者多价。C 5-12环烷基的实例包括，但不限于，双环[1.1.1]戊基、降冰片烷基、[2.2.2]二环辛烷、[4.4.0]二环癸烷等。
除非另有规定，术语“5-12元杂环烷基”本身或者与其他术语联合分别表示由5至12个环原子组成的饱和环状基团，其1、2、3或4个环原子为独立选自O、S和N的杂原子，其余为碳原子，其中碳原子任选被氧代，氮原子任选地被季铵化，氮和硫杂原子可任选被氧化(即NO和S(O) p，p是1或2)。所述5-12元杂环烷基包括单环、双环和三环体系，其中双环和三环体系包括螺环、并环和桥环。此外，就该“5-12元杂环烷基”而言，杂原子可以占据杂环烷基与分子其余部分的连接位置。所述5-12元杂环烷基包括5-10元、 5-8元、5-6元、5元和6元杂环烷基等。5-12元杂环烷基的实例包括但不限于吡咯烷基、吡唑烷基、咪唑烷基、四氢噻吩基(包括四氢噻吩-2-基和四氢噻吩-3-基等)、四氢呋喃基(包括四氢呋喃-2-基等)、四氢吡喃基、哌啶基(包括1-哌啶基、2-哌啶基和3-哌啶基等)、哌嗪基(包括1-哌嗪基和2-哌嗪基等)、吗啉基(包括3-吗啉基和4-吗啉基等)、二噁烷基、二噻烷基、异噁唑烷基、异噻唑烷基、1,2-噁嗪基、1,2-噻嗪基、六氢哒嗪基、高哌嗪基、高哌啶基或二氧杂环庚烷基等。
术语“任选”或“任选地”指的是随后描述的事件或状况可能但不是必需出现的，并且该描述包括其中所述事件或状况发生的情况以及所述事件或状况不发生的情况。
术语“被取代的”是指特定原子上的任意一个或多个氢原子被取代基取代，取代基可以包括重氢和氢的变体，只要特定原子的价态是正常的并且取代后的化合物是稳定的。当取代基为氧(即＝O)时，意味着两个氢原子被取代。氧取代不会发生在芳香基上。术语“任选被取代的”是指可以被取代，也可以不被取代，除非另有规定，取代基的种类和数目在化学上可以实现的基础上可以是任意的。
当任何变量(例如R)在化合物的组成或结构中出现一次以上时，其在每一种情况下的定义都是独立的。因此，例如，如果一个基团被0-2个R所取代，则所述基团可以任选地至多被两个R所取代，并且每种情况下的R都有独立的选项。此外，取代基和/或其变体的组合只有在这样的组合会产生稳定的化合物的情况下才是被允许的。
当一个连接基团的数量为0时，比如-(CRR) 0-，表示该连接基团为单键。
当其中一个变量选自单键时，表示其连接的两个基团直接相连，比如A-L-Z中L代表单键时表示该结构实际上是A-Z。
当一个取代基为空缺时，表示该取代基是不存在的，比如A-X中X为空缺时表示该结构实际上是A。当所列举的连接基团没有指明其连接方向，其连接方向是任意的，例如， 中连接基团L为-M-W-，此时-M-W-既可以按与从左往右的读取顺序相同的方向连接环A和环B构成 也可以按照与从左往右的读取顺序相反的方向连接环A和环B构成 所述连接基团、取代基和/或其变体的组合只有在这样的组合会产生稳定的化合物的情况下才是被允许的。
本发明的化合物可以通过本领域技术人员所熟知的多种合成方法来制备，包括下面列举的具体实施方式、其与其他化学合成方法的结合所形成的实施方式以及本领域技术上人员所熟知的等同替换方式，优选的实施方式包括但不限于本发明的实施例。
本发明的化合物可以通过本领域技术人员所熟知的常规方法来确认结构，如果本发明涉及化合物的绝对构型，则该绝对构型可以通过本领域常规技术手段予以确证。例如单晶X射线衍射法(SXRD)，把培养出的单晶用Bruker D8 venture衍射仪收集衍射强度数据，光源为CuKα辐射，扫描方式： 扫描，收集相关数据后，进一步采用直接法(Shelxs97)解析晶体结构，便可以确证绝对构型。
本发明所使用的溶剂可经市售获得。本发明采用下述缩略词：aq代表水；eq代表当量、等量；M代表mol/L；DCM代表二氯甲烷；PE代表石油醚；DMF代表N，N-二甲基甲酰胺；DMSO代表二甲亚砜；EtOAc代表乙酸乙酯；EtOH代表乙醇；MeOH代表甲醇；CBz代表苄氧羰基，是一种胺保护基团；Boc代表叔丁氧羰基，是一种胺保护基团；r.t.代表室温；O/N代表过夜；THF代表四氢呋喃；Boc 2O代表二叔丁基二碳酸酯；三氟乙酸代表三氟乙酸；DIPEA代表二异丙基乙基胺；SOCl 2代表氯化亚砜；Xphos-Pd-G2代表氯 (2-二环己基膦基-2',4',6'-三异丙基-1,1'-联苯基)[2-(2'-氨基-1,1'-联苯)]钯(II)；mp代表熔点；DBU代表1.8-二氮杂二环[5.4.0]十一十一烷-7-烯；BrettPhos Pd G3代表甲烷磺酸(2-二环己基膦)-3,6-二甲氧基-2',4',6'-三异丙基-1,1'-联苯)(2'-氨基-1,1'-联苯-2-基)钯(II)。
化合物依据本领域常规命名原则或者使用 软件命名，市售化合物采用供应商目录名称。
具体实施方式
下面通过实施例对本发明进行详细描述，但并不意味着对本发明任何不利限制。本文已经详细地描述了本发明，其中也公开了其具体实施例方式，对本领域的技术人员而言，在不脱离本发明精神和范围的情况下针对本发明具体实施方式进行各种变化和改进将是显而易见的。
实施例1和2
合成路线：
步骤1:化合物1-2的合成
将化合物1-1(10g,64.87mmol)加入到无水DCM(100.00mL)中，0-5℃下滴加(COCl) 2(12.35g,97.30mmol,8.52mL)及DMF(474.13mg,6.49mmol,499.09μL)，氮气保护下于0-5℃搅拌1小时。反应完毕后，反应液减压浓缩干，并再次加入无水DCM(120.00mL)，将所得溶液冷却至0℃，反应体系持续鼓入氨气10分钟，然后升温至25℃搅拌30分钟。反应液减压浓缩干，将残余物经硅胶柱层析纯化(二氯甲烷:甲醇＝10:1)得到化合物1-2。 1HNMR(400MHz,CD 3OD)δ3.15-3.25(m,3H),2.90-3.05(m,2H),2.45-2.55(m,2H),2.25-2.40(m,2H).
步骤2:化合物1-3的合成
在0-5℃氮气保护下，向化合物1-2(6.88g,44.92mmol)的二氯甲烷(140mL)溶液中依次加入三氟乙酸酐(18.87g,89.83mmol，12.49mL)和三乙胺(22.72g,224.58mmol,31.26mL)，然后反应液在0-5℃继续搅拌1小时。反应完毕后加入水(300mL)，用二氯甲烷(150mL×2)萃取，合并的萃取液经饱和食盐水(200mL)荡洗，经无水硫酸钠干燥，过滤，滤液浓缩后将残余物用硅胶柱层析纯化(石油醚:乙酸乙酯＝3:1)得化合物1-3。 1HNMR(400MHz,CD 3OD)δ3.05-3.35(m,5H),2.56-2.75(m,4H).
步骤3:化合物1-4的合成
25℃氮气保护下，向化合物1-3(2.12g,15.68mmol)的四氢呋喃(10.00mL)溶液加入氰甲基膦酸二乙酯(3.33g,18.82mmol,3.03mL)，LiBr(2.04g,23.53mmol,590.56μL)和三乙胺(3.17g,31.37mmol,4.37mL)的四氢呋喃(20.00mL)溶液。所得反应液在25℃下搅拌16小时。反应完毕后，将反应物中加入水(100.00mL)，并用乙酸乙酯(60mL×2)萃取，合并的萃取液经饱和食盐水(80mL)荡洗，经无水硫酸钠干燥，过滤，滤液浓缩后将残余物硅胶柱层析纯化(石油醚:乙酸乙酯＝10:1到3:1)得化合物1-4。 1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ5.13-5.75(m,1H),2.98-3.10(m,3H),2.88-2.96(m,2H),2.40-2.65(m,4H).
步骤4:化合物1-6的合成
25℃氮气保护下，向化合物1-5(2.34g,12.04mmol)的乙腈(40.00mL)溶液依次加入DBU(4.58g,30.10mmol,4.54mL)和化合物1-4(2g,12.64mmol)，25℃搅拌16小时。反应完毕后用1M KH 2PO 4水溶液(100mL)淬灭，并用乙酸乙酯(60mL×2)萃取，合并的萃取液经饱和食盐水(80mL)荡洗，经无水硫酸钠干燥，过滤，滤液浓缩后将残余物硅胶柱层析纯化(石油醚:乙酸乙酯＝10:1到1:1)得化合物1-6。 1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ7.84(s,1H),7.83(s,1H),3.00-3.10(m,1H),2.80-2.95(m,4H),2.55-2.75(m,4H),2.30-2.40(m,2H),1.32(s,12H).
步骤5:化合物1-8的合成
25℃氮气保护下，将化合物1-7(200g,1.43mol)，2-氯乙腈(118.52g,1.57mol)和碳酸铯(557.99g,1.71mol)依次加入到DMF(1L)中，所得反应液25℃搅拌16小时。反应完毕后，反应液经硅藻土过滤，滤液减压浓缩干，所得粗品硅胶柱层析纯化(石油醚:乙酸乙酯＝3:1)得化合物1-8。 1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ7.60(d,J＝2.0Hz,1H),6.92(d,J＝2.0Hz,1H),5.54(s,2H),4.40(q,J＝7.2Hz,2H),1.41(t,J＝7.2Hz,3H).
步骤6:化合物1-9的合成
20℃氮气保护下，将化合物1-8(65g,362.77mmol)，浓硫酸(177.90g,1.81mol)和三氟乙酸(206.82g,1.81mol,134.30mL)的混合物搅拌16小时。反应完毕后，减压浓缩除去过量三氟乙酸，剩余物倾倒入冰，所得水溶液用乙酸乙酯(150mL×6)萃取，合并的萃取液经饱和碳酸氢钠水溶液中和至无气泡冒出，分液，有机相用饱和食盐水(200mL)荡洗，经无水硫酸钠干燥，过滤，滤液浓缩后即得化合物1-9。 1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ7.57(d,J＝2.0Hz,1H),6.90(d,J＝2.0Hz,1H),6.25(brs,1H),5.87(brs,1H),5.25(s,2H),4.33(q,J＝7.2Hz,2H),1.36(t,J＝7.2Hz,3H).
步骤7:化合物1-10的合成
氮气保护下，向化合物1-9(36.49g,185.05mmol)的乙醇溶液(600mL)中加入t-BuOK(1M,370.10mL)溶液，所得混合物加热至70℃搅拌16小时。反应完毕后，冷却至20℃，用浓盐酸调pH至6，所得悬浊液减压浓缩干即得粗品化合物1-10。 1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ11.82(brs,1H),7.75(s,1H),6.95(s,1H),5.16(s,2H).
步骤8:化合物1-11的合成
氮气保护下，将化合物1-10(28g,185.28mmol)，POCl 3(298.30g,1.95mol,180.79mL)和吡啶盐酸盐(21.41g,185.28mmol)的混合物加热至120℃搅拌16小时。反应完毕后，减压浓缩除去多余POCl 3，所得固体用乙酸乙酯(500mL)溶解，然后该溶液缓慢倒入1M NaH 2PO 4水溶液(500mL)中，分离有机相，水相用乙酸乙酯(200mL×2)萃取，合并的有机相用饱和食盐水(350mL)荡洗，经无水硫酸钠干燥，过滤，滤液浓缩，粗品经硅胶柱层析纯化(石油醚:乙酸乙酯：二氯甲烷＝5:1:1)即得化合物1-11。 1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ8.45(s,1H),8.06(s,1H),6.94(s,1H).
步骤9:化合物1-12的合成
氮气保护下，向化合物1-11(1g,5.32mmol)，化合物1-6(2.06g,5.85mmol)，双(三特丁基膦)钯(271.82mg,531.88μmol)和K 3PO 4(3.39g,15.96mmol)的混合物中加入二氧六环(20mL)和水(4mL)，所得混合物减压抽真空充氮气三次后，在25℃搅拌16小时。反应完毕后，反应液用水(200mL)稀释后，水相用乙酸乙酯(80mL×2)萃取，合并的有机相用饱和食盐水(60mL)荡洗，经无水硫酸钠干燥，过滤，滤液浓缩，所得粗品经硅胶柱层析纯化(石油醚:乙酸乙酯＝5:1到1:2)得化合物1-12。MS ESI计算值C 19H 16ClN 7[M+H] +378,实测值378.
步骤10:化合物1和2的合成
氮气保护下，向化合物1-12(0.3g,794.01μmol)，化合物1-13(247.81mg,1.19mmol)，Xphos-Pd-G2(62.47mg,79.40μmol)和Na 2CO 3(252.47mg,2.38mmol)的混合物中加入二氧六环(8mL)和水(2mL)，所得混合物减压抽真空充氮气三次后，加热至100℃搅拌16小时。反应完毕后，反应液用水(60mL)稀释后，水相用乙酸乙酯(30mL×2)萃取，合并的有机相用饱和食盐水(30mL)荡洗，经无水硫酸钠干燥，过滤，滤液浓缩，所得粗品经硅胶柱层析纯化(石油醚:乙酸乙酯＝5:1到1:5)得化合物1-14。化合物1-14采用手性拆分(手性柱型号:DAICEL CHIRALPAK IG(250mm*30mm*10μm)；流动相:A:CO 2，B:0.05％二乙胺/异丙醇，异丙醇(0.05％二乙胺)与超临界流体CO 2从55％到55％,流速3mL/min)，拆分后得到化合物1和化合物2，保留时间分别为1.086min和1.241min(分析方法：柱型Chiralpak AD-3 50×4.6mm I.D.,3μm；流动相：A:CO 2，B:0.05％二乙胺/异丙醇；梯度：B％＝40％；流速3mL/min；柱温35℃)。化合物1的 1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ8.48(s,1H),8.30(d,J＝4.0Hz,2H),8.05(d,J＝2.4Hz,1H),7.95(s,2H),6.93(d,J＝1.6Hz,1H),4.01(s,3H),2.95-3.19(m,5H),2.85-2.95(m,2H),2.62-2.72(m,2H),2.44-2.54(m,2H).MS ESI计算值C 23H 21N 9[M+H] +424,实测值424。化合物2的 1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ8.48(s,1H),8.30(d,J＝4.0Hz,2H),8.05(d,J＝2.4Hz,1H),7.95(s,2H),6.93(d,J＝1.6Hz,1H),4.01(s,3H),2.95-3.18(m,5H),2.74-2.87(m,2H),2.60-2.73(m,2H),2.40-2.56(m,2H).MS ESI计算值C 23H 21N 9[M+H] +424,实测值424.
化合物1的绝对构型经单晶X射线衍射法分析测定：
化合物1的晶体由上述实施例所得化合物1在甲醇条件下，使用溶剂挥发法，室温经过5天培养获得。晶体属于单斜晶系，空间群为P2 1，晶胞参数： α＝γ＝90°，β＝102.6250(10)°，体积
化合物1的立体结构椭球图、沿b轴方向的晶胞堆积图以及化合物的绝对构型图见附图1、2和3。化合物1的晶体结构数据和参数见表1、2、3、4、5和6。
表1晶体结构精修信息表
表2：晶体的原子坐标(×10 4)和等价各向同性移位参数
表3:成键原子的键长 和键角(°)
表4：原子间扭角值(°)
表5:氢键列表
表6:扭角列表
实施例3
合成路线：
步骤1:化合物3-2的合成
化合物3-1(1.03g，6.81mmol)溶于THF(25mL)中，0℃滴加硼氢化锂四氢呋喃溶液(2M，3.41mL)，然后15℃下搅拌16小时。反应混合物通过加入1M盐酸10mL淬灭，然后在减压下除去四氢呋喃，残余物用30mL H 2O稀释，并用乙酸乙酯40mL(20mL×2)萃取，合并的有机层用20mL盐水(20mL)洗涤，干燥，过滤并减压浓缩，通过柱色谱法纯化(石油醚:乙酸乙酯＝2:1)，得到化合物3-2。 1HNMR(400MHz,CDCl 3)δ3.60(s,2H),2.20(s,6H).
步骤2:化合物3-3的合成
50mL的圆底烧瓶中加入在10mL DCM和草酰氯(896.66mg，7.06mmol，618.39μL)，冷却至-65℃。-65℃的情况下，在10分钟内滴加二甲基亚砜(1.10g，14.13mmol，1.10mL)，搅拌10分钟，化合物3-2(580mg，4.71mmol)溶于5ml二氯甲烷中，-65℃滴加到反应体系。反应将混合物在相同温度下搅拌1小时，在-65℃下于10分钟内加入TEA(2.38g，23.55mmol，3.28mL)。反应混合物用水稀释，并用二氯甲烷萃取，合并的有机层用1M盐酸水溶液和盐水荡洗，干燥浓缩，得到化合物3-3。 1HNMR(400MHz,CDCl 3)δ9.52(s,1H),2.52(s,6H).
步骤3:化合物3-4的合成
氰甲基磷酸二乙酯(754.56mg，4.26mmol，685.96μL)，溴化锂(462.44mg，5.32mmol，133.65μL)和三乙胺(718.39mg，7.10mmol，988.16μL)加入到THF(6mL)中，化合物3-3(430mg，3.55mmol)溶于THF(4mL)中，将后者加入到前者体系中，15℃搅拌16小时。混合物用水稀释并用乙酸乙酯(20mL×1)萃取，合并的有机层用20mL盐水(20mL×1)洗涤，干燥浓缩，通过柱色谱法纯化(石油醚：乙酸乙酯＝3:1)，得到化合物3-4。 1HNMR(400MHz,CDCl 3)δ6.64(d,J＝16.4Hz,1H),5.32(d,J＝16.4Hz,1H),2.40(s,6H).
步骤4:化合物3-5的合成
化合物1-11(5.5g，29.25mmol)，4-吡唑硼酸嚬哪醇酯(6.81g，35.10mmol)，Pd(PPh 3) 4(3.38g，2.93mmol)，碳酸钠(6.20g，58.51mmol)加入到二氧六环(60mL)和水(15mL)，在氮气氛围下50℃下搅拌16小时。用水稀释，用EA 120mL(60mL×2)萃取母液，合并的有机层用60mL盐水(60mL×1)洗涤，干燥浓缩，通过柱色谱法纯化(石油醚：乙酸乙酯＝0:1)，得到化合物3-5。 1HNMR(400MHz,DMSO-d 6)δ13.55(brs,1H),8.96(s,1H),8.73(s,1H),8.33(s,1H),8.25(s,1H),7.50(dd,J＝1.2,2.4Hz,1H).
步骤5:化合物3-6的合成
将3-5(150mg，682.97μmol)溶于乙腈(4mL)中，加入DBU(103.97mg，682.97μmol)和3-4(108.31mg，751.27μmol)，15℃搅拌1小时。减压浓缩，通过柱色谱法纯化(石油醚：乙酸乙酯＝1:1)，得到化合物3-6。 1HNMR(400MHz,CDCl 3)δ8.39(d,J＝0.8Hz,1H),8.27(s,1H),8.22(s,1H),8.09(d,J＝2.4Hz,1H),6.98(dd,J＝0.8,2.4Hz,1H),4.63(dd,J＝6.4,8.0Hz,1H),3.08-3.20(m,1H),2.93-3.03(m,1H),2.38-2.24(m,6H).
步骤6:化合物3的三氟乙酸盐的合成
化合物3-6(180mg，494.77μmol)，1-甲基吡唑-3-嚬哪醇硼酸酯(113.24mg，544.25μmol)，Xphos-Pd-G2(77.86mg，98.95μmol)和碳酸钠(157.32mg，1.48mmol)，加入到将水(1mL)和二氧六环(4mL)中，在氮气下在100℃下搅拌16小时。反应混合物在减压下浓缩干，用20mL水稀释，并用乙酸乙酯(15mL×2)萃取，合并的有机层盐水(20mL)洗涤，干燥浓缩，通过柱色谱法(石油醚：乙酸乙酯＝0:1)和高效液相色谱法纯化(柱型：Phenomenex Synergi C18 150mm*25mm*10μm；流动相:[水(0.1％三氟乙酸)-乙腈]；B(乙腈)％:38％-58％,10分钟)，得到化合物3。 1HNMR(400MHz,DMSO-d 6)δ8.86(s,1H),8.84(s,1H),8.47(s,1H),8.24(d,J＝2.4Hz,1H),7.82(d,J＝2.4Hz,1H),7.38(d,J＝1.6Hz,1H),6.94(d,J＝2.0Hz,1H),4.99(dd,J＝5.6,9.2Hz,1H),3.94(s,3H),3.39-3.20(m,2H),2.28-2.12(m,6H).MS ESI计算值C 22H 19N 9[M+H] +410,实测值410.
实施例4和5
合成路线：
步骤1:化合物4-2的合成
25℃氮气保护下，将化合物1-12(0.36g,952.81μmol)，化合物4-1(218.07mg,1.05mmol)，BrettPhos Pd G3(149.93mg,190.56μmol)和Na 2CO 3(302.96mg,2.86mmol)的混合物中加入二氧六环(8mL)和水(2mL)，所得混合物减压抽真空充氮气三次后，加热至100℃搅拌16小时。反应完毕后，反应液用水(5mL)稀释后，水相用乙酸乙酯(20mL×3)萃取，合并的有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，滤液浓缩，所得粗品硅胶柱层析纯化(石油醚:乙酸乙酯＝3:1到2:1)得化合物4-2。MS ESI计算值C 23H 21N 9[M+H] +424,实测值424.步骤2:化合物化合物4和5的合成
化合物4-2采用手性拆分(手性柱型号:DAICEL CHIRALPAK AD(250mm*30mm*10μm)；流动相:A:二氧化碳，B:0.1％氨水/甲醇，0.1％氨水/甲醇与超临界流体二氧化碳从60％到60％,流速70mL/min)，拆分后得到化合物4和化合物5，(分析方法：柱型Amycoat 50×4.6mm I.D.,3μm；流动相：A:CO 2，B:甲醇+乙腈(0.05％二乙胺)；梯度：60％甲醇+乙腈(0.05％二乙胺)；流速3mL/min；柱温35℃)。保留时间分别为1.045min，1.375min。
化合物4： 1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ8.89(s,1H),8.36(s,1H),8.31(s,1H),8.09(d,J＝2.4Hz,1H),7.46(d,J＝2.2Hz,1H),6.96(d,J＝1.8Hz,1H),6.88(d,J＝2.2Hz,1H),4.01(s,3H),3.07-3.15(m,1H),2.98-3.07(m,4H),2.79(dt,J＝2.3,13.8Hz,2H),2.61-2.72(m,2H),2.43-2.55(m,2H).MS ESI计算值C 23H 21N 9[M+H] +424,实测值424.
化合物5： 1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ8.90(s,1H),8.36(s,1H),8.31(s,1H),8.09(d,J＝2.3Hz,1H),7.46(d,J＝2.2Hz,1H),6.96(d,J＝1.6Hz,1H),6.89(d,J＝2.2Hz,1H),4.02(s,3H),3.08-3.17(m,1H),2.99-3.07(m,4H),2.79(dt,J＝2.2,13.7Hz,2H),2.60-2.72(m,2H),2.44-2.56(m,2H).MS ESI计算值C 23H 21N 9[M+H] +424,实测值424.
实施例6
合成路线：
步骤1:化合物6-1的合成
化合物3-5(1.19g，5.42mmol)溶于无水THF(18mL)中，0℃分批加入氢化钠(325.06mg，8.13mmol，60％纯度)，0℃下搅拌0.5小时。0℃下逐滴加入2-(三甲基硅)乙氧基甲基氯(993.66mg，5.96mmol)，升温至20℃并搅拌0.5小时。将反应混合物用60mL水稀释，并用乙酸乙酯(30mL×2)萃取，合并的有机层用盐水(30mL×1)洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩，通过柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝5:1)纯化，得化合物6-1。 1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ8.38(d,J＝0.8Hz,1H),8.36(s,1H),8.27(s,1H),8.05-8.11(d,J＝2.4Hz,1H),7.01(dd,J＝0.8,2.4Hz,1H),5.54(s,2H),3.64(d,J＝6.8Hz,2H),0.96(s,2H),0.03(s,9H).
步骤2:化合物6-2的合成
化合物6-1(1.65g，4.72mmol)，1-甲基吡唑-3-嚬哪醇硼酸酯(1.08g，5.19mmol)，X-Phos Pd G2(742.08mg，943.15μmol)和碳酸钠(1.50g，14.15mmol)加入到H 2O(6mL)和将二氧六环(25mL)中，氮气氛围下100℃下反应16小时。反应液用水80mL稀释并过滤，母液用乙酸乙酯(50mL×2)萃取，合并有机层用盐水(60mL×1)洗涤，硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩，通过柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝1:2)纯化，得到化合物6-2。 1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ8.91(d,J＝0.8Hz,1H),8.38(s,1H),8.32(s,1H),8.04-8.13(m,1H),7.45(d,J＝2.4Hz,1H),6.96(dd,J＝0.8,2.4Hz,1H),6.91(d,J＝2.4Hz,1H),5.55(s,2H),4.01(s,3H),3.63-3.70(m,2H),0.93-1.00(m,2H),0.00(s,9H).
步骤3:化合物6-3的合成
化合物6-2(1.76g，4.45mmol)溶于盐酸甲醇(4M，25mL)中，50℃反应16小时，减压浓缩，用甲基叔丁基醚(20mL)稀释，在15℃下搅拌30min，过滤，真空干燥，得到化合物6-3。MS ESI计算值C 13H 11N 7[M+H] +266,实测值266.
步骤4:化合物6-5的合成
化合物6-4(0.5g，2.37mmol)溶于四氢呋喃(5mL)中，加入氰甲基膦酸二乙酯(503.09mg，2.84mmol)，溴化锂(308.31mg，3.55mmol)和三乙胺(478.99mg，4.73mmol，658.86μL)的四氢呋喃(10mL)溶液，15℃反应2小时。反应液用50mL水稀释，并用乙酸乙酯萃取(30mL×2)，合并的有机层用盐水(30mL×1)洗涤， 硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩，通过柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝3:1)纯化，得到化合物6-5。 1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ5.13-5.27(m,1H),3.92-4.03(m,4H),3.10-3.18(m,2H),3.02-3.07(m,2H),1.43(s,9H).
步骤5:化合物6-6的合成
化合物6-3(0.3g，994.25μmol)溶于乙腈(6mL)中，加入1,8-二氮杂二环[5.4.0]十一烷-7-烯(454.10mg，2.98mmol，449.60μL)和化合物6-5(256.24mg，1.09mmol)，在15℃下反应16小时。减压浓缩干，通过柱色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝1/3)纯化，得到化合物6-6。 1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ8.88(d,J＝0.8Hz,1H),8.36(s,1H),8.30(s,1H),8.08(d,J＝2.4Hz,1H),7.45(d,J＝2.4Hz,1H),6.95(dd,J＝0.8,2.4Hz,1H),6.88(d,J＝2.4Hz,1H),4.13(s,2H),4.00(s,3H),3.94(s,2H),3.11(s,1H),3.08(s,1H),3.02(s,2H),2.86(s,1H),2.83(s,1H),1.44(s,9H).
步骤6:化合物6-7的合成
化合物6-6溶于二氯甲烷(1mL)中，加入三氟乙酸(308.00mg，2.70mmol，0.2mL)，15℃反应0.5小时。用25％氨水将反应液的pH调节至7，并减压浓缩干，通过高效液相色谱法(柱：Waters Xbridge150×25mm×5μm；流动相：[水(10mM碳酸氢钠)-乙腈]；B(乙腈)％：8％-38％，10分钟)纯化，得到化合物6-7。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ8.82(s,1H),8.72(s,1H),8.41(s,1H),8.10(d,J＝1.6Hz,1H),7.64(d,J＝1.6Hz,1H),7.23(d,J＝2.4Hz,1H),6.90(d,J＝2.4Hz,1H),4.02(s,2H),3.97(s,3H),3.86(s,2H),3.24(s,2H),3.06-3.20(m,2H),2.73-2.96(m,2H).MS ESI计算值C 21H 21N 9[M+H] +400,实测值400.
步骤7:化合物6的合成
化合物6-7(70mg，140.12μmol)溶于二氯甲烷(1mL)中，加入三氟乙酸(299.44mg，2.63mmol，194.44μL)，15℃下搅拌0.5小时。然后加入三乙胺(318.06mg，3.14mmol，437.50μL)和溴乙腈(25.21mg，210.18μmol)，反应液在15℃下搅拌16小时。减压浓缩干，通过高效液相色谱法纯化两次，第一次(柱型：Xtimate C18 150*40mm*10μm；流动相：[水(0.05％氨水v/v)-ACN]；B(ACN)％：20％-50％，10分钟)，第二次(柱型：WatersXbridge 150*25mm*5μm；流动相：[水(10mM碳酸氢钠)-ACN]；B(ACN)％:14％-44％,10分钟)，得到化合物6。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ8.85(s,1H),8.75(s,1H),8.43(s,1H),8.07-8.18(m,1H),7.67(d,J＝2.4Hz,1H),7.21-7.33(m,1H),6.99-6.86(m,1H),3.99(s,3H),3.58(s,2H),3.56(s,2H),3.41(s,2H),3.23(s,2H),3.13(s,1H),3.10(s,1H),2.83(s,1H),2.80(s,1H).MS ESI计算值C 23H 22N 10[M+H] +439,实测值439.
实施例7
合成路线：
化合物7的合成
化合物6-6(100mg，200.17μmol)溶于二氯甲烷(1mL)中，加入三氟乙酸(308.00mg，2.70mmol，0.2mL)，15℃下搅拌0.5小时。然后加入三乙胺(324.09mg，3.20mmol，445.79μL)，冷却至0℃，加入溴化腈(0.32g，3.02mmol)，在0℃下搅拌0.5小时。反应液用30mL水稀释，并用二氯甲烷40mL(20mL×2)萃取，合并的有机层用20mL盐水洗涤，硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩，通过高效液相色谱法纯化(柱：Waters Xbridge 150×25mm×5μm；流动相：[水(10mM碳酸氢钠)-乙腈]；B(ACN)％：14％-44％，10分钟)，得到化合物7。 1HNMR(400MHz,CD 3OD)δ8.88(d,J＝1.2Hz,1H),8.76(s,1H),8.45(s,1H),8.14(d,J＝2.4Hz,1H),7.68(d,J＝2.4Hz,1H),7.28(dd,J＝1.0,2.4Hz,1H),6.94(d,J＝2.4Hz,1H),4.37(s,2H),4.20(s,2H),4.00(s,3H),3.23(s,2H),3.15-3.22(m,2H),2.85-2.95(m,2H).MS ESI计算值C 22H 20N 10[M+H] +425,实测值425.
实施例8
合成路线：
步骤1:化合物8-2的合成
将化合物8-1(20g,237.77mmol)和咪唑(32.37g,475.53mmol)加入到无水二氯甲烷(300mL)中，0℃下滴加叔丁基二苯基氯硅烷(68.62g,249.65mmol,64.13mL)，氮气保护下于20℃搅拌16小时。反应完毕后，向反应液中加入水(200mL)，用二氯甲烷(100mL×3)萃取，合并的萃取液，用水(200mL×2)，盐水(200mL×1)荡洗，经无水硫酸钠干燥，过滤，滤液浓缩，所得粗品硅胶柱层析纯化(石油醚:乙酸乙酯＝1:0)得到化合物8-2。 1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ7.65-7.72(m,4H),7.37-7.46(m,6H),5.63(s,2H),4.52-4.62(m,1H),2.36-2.50(m,4H),1.07(s,9H).
步骤2:化合物8-4的合成
将化合物8-2(66g,204.64mmol)和醋酸铑(904.48mg,4.09mmol)加入到无水二氯甲烷(600mL)中，再滴加化合物8-3(28.02g,245.57mmol,25.71mL)的二氯甲烷(200mL)溶液，约滴加5小时。氮气保护下于20℃搅拌15小时。反应完毕后，反应液通过硅藻土过滤，滤液浓缩，所得粗品硅胶柱层析纯化(石油醚:乙酸乙酯＝1:0到20:1)得到化合物8-4。 1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ7.60-7.71(m,4H),7.34-7.47(m,6H),4.19-4.59(m,1H),3.84-4.18(m,2H),2.12-2.49(m,1H),2.00-2.07(m,1H),1.77-1.98(m,4H),1.17-1.55(m,3H),1.09-1.15(m,1H),1.02-1.08(m,9H).
步骤3:化合物8-5的合成
将化合物8-4(55g,134.60mmol)加入到无水乙醇(200mL)中，再滴加氢氧化钠(16.15g,403.81mmol)的水(50mL)溶液，于20℃搅拌16小时。反应完毕后，反应液浓缩除去乙醇，用1M的盐酸调节pH到3～4，乙酸乙酯(100mL×2)萃取，合并萃取液，浓缩，所得粗品加入到石油醚(450mL)中，于20℃搅拌1小时。过滤得到滤饼，干燥后得到化合物8-5。 1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ11.22-12.70(brs,1H),7.52-7.60(m,4H),7.39-7.49(m,6H),3.87-4.33(m,1H),1.92-2.00(m,2H),1.62-1.83(m,4H),1.04(t,J＝2.9Hz,1H),0.85-0.98(m,9H).
步骤4:化合物8-6的合成
将化合物8-5(30g,78.83mmol)加入到N,N-二甲基甲酰胺(100mL)中，于15℃依次加入加2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N,N-四甲基脲六氟磷酸酯(44.96g,118.25mmol)，N,N-二异丙基乙胺(30.57g,236.50mmol)，25℃搅拌0.5小时。然后于15℃分批加入氯化铵(12.65g,236.50mmol)，25℃搅拌1小时。反应完毕后，反应液加入水(200mL)稀释，乙酸乙酯(300mL×3)萃取，萃取液合并用盐水(500mL×3)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤，滤液浓缩。到化合物8-6。 1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ7.55-7.62(m,4H),7.41-7.51(m,6H),7.21(brs,1H),6.55-6.70(m,1H),3.75-4.20(m,1H),1.92-2.05(m,2H),1.65-1.85(m,2H),1.45-1.60(m,1H),1.05-1.10(m,1H),0.85-1.04(m,9H).
步骤5:化合物8-7的合成
将化合物8-6(25.00g,65.86mmol)和三乙胺(33.32g,329.32mmol,45.84mL)加入到无水二氯甲烷(200mL)中，于0℃滴加三氟乙酸酐(44.96g,118.25mmol)，0℃搅拌1小时。反应完毕后，反应液加入饱和碳酸氢钠水溶液(100mL)淬灭，二氯甲烷(50mL×3)萃取，萃取液合并用饱和碳酸氢钠水溶液(100mL×3)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤，滤液浓缩。所得粗品硅胶柱层析纯化(石油醚:乙酸乙酯＝20:1到10:1)得到化合物8-7。 1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ7.54-7.60(m,4H),7.39-7.49(m,6H),3.92-4.06(m,1H),1.95-2.10(m,2H),1.80-1.85(m,2H),1.70-1.82(m,2H),1.39(t,J＝3.4Hz,1H),0.96(s,9H).
步骤6:化合物8-8的合成
将化合物8-7(22.00g,60.85mmol)加入到四氢呋喃(200mL)中，于15℃滴加入四丁基氟化铵(1M THF溶液，91.27mL)，25℃搅拌16小时。反应完毕后，反应液加入饱和氯化铵水溶液(200mL)淬灭，乙酸乙酯(200mL×3)萃取，萃取液合并用盐水(200mL×3)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤，滤液浓缩。所得粗品硅胶柱层析纯化(石油醚:乙酸乙酯＝10:1到1:2)得到化合物8-8。
步骤7:化合物8-9的合成
将化合物8-8(5.5g,44.66mmol)加入到二氯甲烷(200mL)中，于0℃滴加入戴斯-马丁氧化剂(28.41g，66.99mmol)，25℃搅拌16小时。反应完毕后，反应液加入饱和硫代硫酸钠水溶液(200mL)和饱和碳酸氢钠水溶液(200mL)淬灭，20℃搅拌10分钟，二氯甲烷(200mL×3)萃取，萃取液合并用饱和碳酸氢钠水溶液(100mL×3)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤，滤液浓缩。所得粗品硅胶柱层析纯化(石油醚:乙酸乙酯＝10:1到2:1)得到化合物8-9。 1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ2.63-2.73(m,2H),2.23-2.35(m,4H),0.95-1.05(m,1H).步骤8:化合物8-10的合成
将化合物8-9(7.72g,43.59mmol)，LiBr(5.16g,59.44mmol)和TEA(8.02g,79.25mmol,11.03mL)加入到无水四氢呋喃(50mL)中，于25℃滴加氰甲基磷酸二乙酯(4.80g，39.62mmol)的无水四氢呋喃(50mL)溶液中，25℃搅拌16小时。反应完毕后，反应液加入水(100mL)，乙酸乙酯(100mL×3)萃取，萃取液合并，经无水硫酸钠干燥，过滤，滤液浓缩。所得粗品硅胶柱层析纯化(石油醚:乙酸乙酯＝10:1到3:1)得到化合物 8-10。 1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ5.33(s,1H),2.94-3.03(m,1H),2.84-2.93(m,2H),2.60-2.75(m,1H),2.10-2.24(m,2H),0.82-0.93(m,1H).
步骤9:化合物8的合成
将化合物8-10(0.60g,1.99mmol)和碳酸钾(824.47mg,5.95mmol)加入到水(12mL)中，于20℃滴加入化合物6-3(430.03mg，2.98mmol)的二氧六环(8mL)溶液，80℃搅拌4小时。反应完毕后，反应液加入水(50mL)，乙酸乙酯(50mL×3)萃取，萃取液合并，经无水硫酸钠干燥，过滤，滤液浓缩。所得粗品经制备薄层色谱(石油醚:乙酸乙酯＝0:1)和制备高效液相色谱纯化(柱型号:Phenomenex Gemini-NX C1875*30mm*3μm；流动相:[水(0.1％TFA)-ACN]；B(ACN)％:25％-55％,7min)得到化合物8。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ7.28-7.33(m,1H),7.04-7.18(m,1H),6.80-6.89(m,1H),6.53-6.60(m,1H),6.09-6.15(m,1H),5.64-5.72(m,1H),5.35-5.40(m,1H),4.01-4.08(m,1H),3.18-3.26(m,2H),2.43(s,3H),1.75-1.80(m,1H),1.35-1.65(m,3H),0.66-1.17(m,2H).MS ESI计算值C 22H 19N 9[M+H] +410,实测值410.
实施例9
合成路线：
步骤1:化合物9-2的合成
氮气氛围下，叔丁醇钾(1M，4.60mL)加入到四氢呋喃(5mL)中，0℃向上述溶液中加入氰甲基膦酸二乙酯(814.22mg，4.60mmol，740.20μL)，并在0℃下搅拌20分钟。9-1(1g，4.18mmol)溶于四氢呋喃(5mL)中，加入到上述溶液中，在20℃下搅拌2小时。反应混合物倒入水(100mL)中，用乙酸乙酯(60mL×3)萃取，盐水(80mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩至干，通过硅胶柱纯化(石油醚：乙酸乙酯＝5:1)，得到化合物9-2。 1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ5.20-5.30(m,1H),3.20-3.45(m,4H),2.72(d,J＝1.6Hz,2H),2.62(d,J＝1.6Hz,2H),1.50-1.65(m,4H),1.46(s,9H).
步骤2:化合物9-3的合成
将6-3(0.3g，994.25μmol)溶于乙腈(4mL)中，加入1，8-二氮杂二环[5.4.0]十一烷-7-烯(454.10mg，2.98mmol，449.60μL)和化合物9-2(286.92mg，1.09mmol)，在15℃下搅拌16小时。减压浓缩混合物，通过硅胶柱纯化(石油醚:乙酸乙酯＝10:1至1:3)，得到化合物9-3。MS ESI计算值C 28H 33N 9O 2[M+H] +528,实测值528.
步骤3:化合物9的合成
化合物9-3(70mg，125.51μmol)溶于二氯甲烷(1mL)中，加入三氟乙酸(291.37mg，2.56mmol，189.20μL)，在15℃下搅拌持续0.5小时。然后加入三乙胺(317.50mg，3.14mmol，436.73μL)，将混合物冷却至 0℃，并加入溴化腈(15.95mg，150.61μmol)，0℃下搅拌0.5小时。加入30mL水，并用二氯甲烷40mL(20mL×2)萃取，合并的有机层用20mL盐水洗涤，硫酸钠干燥，浓缩干，通过高效液相色谱法纯化(柱型号：WatersXbridge 150*25mm*5μm；流动相：[水(0.1％碳酸氢铵)-乙腈]；B(乙腈)％：16％-46％，10分钟)，得到化合物9。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ8.88(d,J＝1.2Hz,1H),8.84(s,1H),8.46(s,1H),8.14(d,J＝2.4Hz,1H),7.68(d,J＝2.4Hz,1H),7.28(dd,J＝0.8,2.4Hz,1H),6.95(d,J＝2.4Hz,1H),3.92(s,3H),3.27(s,2H),3.22-3.26(m,2H),3.16-3.21(m,2H),2.92(d,J＝14.4Hz,2H),2.53(d,J＝14.4Hz,2H),1.82-1.92(m,2H),1.56–1.72(m,2H).MS ESI计算值C 24H 24N 10[M+H] +453,实测值453.
实施例10和11
合成路线：
步骤1:化合物10-1的合成
向6-3(0.2g，662.84μmol)的乙腈(3mL)中，加入1,8-二氮杂二环[5.4.0]十一烷-7-烯(302.72mg，1.99mmol，299.73μL)和10-4(181.05mg，729.12μmol),在25℃下反应16小时。减压浓缩，通过硅胶层析柱(石油醚:乙酸乙酯＝2:1)纯化，得到化合物10-1。MS ESI计算值C 27H 31N 9O 2[M+H] +514,实测值514。
步骤2:化合物10-2的合成
化合物10-1(330mg，642.53μmol)溶于二氯甲烷(6mL)中，加入三氟乙酸(1.85g，16.21mmol，1.2mL)，25℃反应1小时。减压浓缩干，得到化合物10-2。MS ESI计算值C 22H 23N 9[M+H] +414,实测值414。
步骤3:化合物10-4的合成
向化合物10-3(1g，4.44mmol)的四氢呋喃(5mL)溶液，加入氰甲基膦酸二乙酯(943.56mg，5.33mmol，857.78μL)，无水溴化锂(578.27mg，6.66mmol)和三乙胺(898.33mg，8.88mmol)的四氢呋喃(5mL)溶液，25℃反应16小时。反应液用100mL水稀释，用120mL乙酸乙酯萃取(60mL×2)，合并有机层用80mL盐水洗涤，用硫酸钠干燥，减压浓缩，通过硅胶层析柱(石油醚:乙酸乙酯＝3:1)纯化，得到化合物10-4。 1HNMR(400MHz,CDCl 3)δ5.17-5.31(m,1H),3.32-3.49(m,4H),2.73-3.02(m,4H),1.86-1.99(m,2H),1.46(s,9H).
步骤4:化合物10和11的合成
化合物10-2(0.34g，644.55μmol)溶于二氯甲烷8mL中，加入溴化腈(136.54mg，1.29mmol，94.82μL)和三乙胺(326.11mg，3.22mmol，448.57μL)，25℃下反应2小时。用100mL水稀释，并用二氯甲烷(50mL×2)萃取，合并的有机层用盐水50mL洗涤，硫酸钠干燥，通过硅胶层析柱(石油醚/乙酸乙酯＝1/2)纯化，然后手性拆分(手性柱型号：DAICEL CHIRALPAK AD(250mm*30mm*10μm)；流动相：[0.1％氨水/乙醇]；B(乙醇)％：60％-60％，4.1分钟)，拆分后得到化合物10和化合物11，(分析方法：柱型Chiralpak AD-350×4.6mm I.D.,3μm；流动相：A:CO 2，B:乙醇(0.05％二乙胺)；梯度：B相40％；流速3mL/min；柱温35℃)。保留时间分别为1.288min和2.367min。化合物10的 1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ8.87(d,J＝2.0Hz,2H),8.49(s,1H),8.25(d,J＝2.4Hz,1H),7.83(d,J＝2.0Hz,1H),7.48(d,J＝1.6Hz,1H),6.98(d,J＝2.0Hz,1H),3.94(s,3H),3.53(s,2H),3.46(s,2H),3.35-3.38(m,2H),2.97(d,J＝14Hz,2H),2.63(d,J＝14Hz,2H),1.83(t,J＝7.2Hz,2H).MS ESI计算值C 23H 22N 10[M+H] +439,实测值439。化合物11的 1HNMR(400MHz，DMSO-d 6)δ8.86(d,J＝3.6Hz,2H),8.49(s,1H),8.25(d,J＝2.4Hz,1H),7.83(d,J＝2.0Hz,1H),7.49(d,J＝1.6Hz,1H),6.99(d,J＝2.4Hz,1H),3.94(s,3H),3.48(s,2H),3.42(t,J＝6.8Hz,2H),3.31(s,2H),3.01(d,J＝13.6Hz,2H),2.57(d,J＝13.6Hz,2H),2.09(t,J＝6.8Hz,2H).MS ESI计算值C 23H 22N 10[M+H] +439,实测值439.
实施例12和13
合成路线：
步骤1:化合物12-2的合成
在-10℃氮气保护下，向甲基三苯基溴化膦(17.15g,48.02mmol)的四氢呋喃(50mL)混浊液中缓慢滴加正丁基锂(2.5M,17.93mL)，滴加完成后在该温度下继续搅拌1小时。将化合物12-1(5g,32.01mmol)加入到上述悬浊液中，将反应体系升温至20℃搅拌3小时。反应完毕后加入丙酮(100mL)淬灭反应并减压浓缩。将残余物用硅胶柱层析纯化(石油醚:乙酸乙酯＝5:1)得化合物12-2。 1HNMR(400MHz,CDCl 3)δ4.65(s,2H),3.67(s,3H),2.40-2.55(m,1H),2.25-2.39(m,2H),1.90-2.10(m,4H),1.45-1,65(m,4H).
步骤2:化合物12-3的合成
在0℃氮气保护下，向化合物12-2(2g,12.97mmol)和锌铜试剂(5.02g,38.91mmol)的乙醚(30mL)混浊液中缓慢滴加2,2,2-三氯乙酰氯(2.83g,15.56mmol,1.74mL)，在滴加过程中反应放热非常剧烈，温度迅速升高后应严格控制内温在0℃左右开始再次滴加。滴加完成后，将反应缓慢升温至20℃，然后在此温度下搅拌1小时。然后将反应降温至-5℃，加入甲醇(10mL)，然后分批次在1小时内加入锌粉(2.54g,38.91mmol)。加完后，缓慢升温至20℃，然后加入硅藻土，所得混合物经硅藻土过滤，滤饼用乙酸乙酯润洗(50mL×3)，所得滤液饱和食盐水(80mL)荡洗，经无水硫酸钠干燥，过滤，滤液浓缩后将残余物用硅胶柱层析纯化(石油醚:乙酸乙酯＝0:1到3:1)得化合物12-3。 1HNMR(400MHz,CDCl 3)δ3.61(s,3H),2.69(s,4H),2.20-2.30(m,1H),1.80-1.95(m,2H),1.65-1.75(m,2H),1.40-1.60(m,4H).
步骤3:化合物12-4的合成
将化合物12-3(0.4g,2.04mmol)和氢氧化钠(163.05mg,4.08mmol)的水(10mL)及甲醇(50mL)溶液加热至65℃下搅拌1小时。反应完毕后，将反应物冷却至0℃，并用2M盐酸调pH至6，并用乙酸乙酯(10mL×3)萃取，合并的萃取液经饱和食盐水(15mL)荡洗，经无水硫酸钠干燥，过滤，滤液浓缩后得化合物12-4。 1H NMR(400MHz,DMSO-D 6)δ2.72(s,4H),2.05-2.15(m,1H),1.15-1.90(m,8H).
步骤4:化合物12-5的合成
0℃氮气保护下，向化合物12-4(0.3g,1.65mmol)的四氢呋喃(40.00mL)和DMF(0.05mL)溶液中滴加草酰氯(313.46mg,2.47mmol,216.18μL)，滴加完成后继续在0℃搅拌1小时。减压浓缩，残物重新溶解于二氯甲烷(10mL)溶液中，向该溶液中加入过量液氨，并在20℃搅拌1小时。反应完毕后，减压浓缩，将残余物用水(2mL×2)润洗，固体真空减压干燥即得化合物12-5。MS ESI计算值C 10H 15NO 2[M+H] +182,实测值182.
步骤5:化合物12-6的合成
0℃氮气保护下，将化合物12-5(0.18g,993.21μmol)和三乙胺(502.51mg,4.97mmol,691.21μL)的二氯甲烷(5mL)溶液中滴加三氟乙酸酐(417.21mg,1.99mmol,276.30μL)，滴加完成后在0℃搅拌半小时。反应完毕后，向反应液中加入饱和碳酸氢钠(30mL)，用二氯甲烷(15mL×3)萃取，合并的有机相经饱和食盐水 (20mL)荡洗，经无水硫酸钠干燥，过滤，滤液浓缩后得化合物12-6。MS ESI计算值C 10H 13NO[M+H] +164,实测值164.
步骤6:化合物12-7的合成
0℃氮气保护下，向1M叔丁醇钾(1M,673.95μL)四氢呋喃溶液中滴加氰甲基膦酸二乙酯(119.38mg,673.95μmol,108.53μL)的四氢呋喃(6mL)溶液，滴加完成后升温至20℃搅拌20分钟，再次降温至0℃，向该溶液中滴加化合物12-6(0.1g,612.69μmol)的四氢呋喃(2mL)溶液，滴加完成后升温至20℃搅拌1小时。反应完毕后，反应物倾倒入水(50mL)，所得水溶液用乙酸乙酯(10mL×3)萃取，合并的萃取液用饱和食盐水(10mL)荡洗，经无水硫酸钠干燥，过滤，滤液浓缩，残余物用硅胶柱层析纯化(二氯甲烷:甲醇＝50:1)得即得化合物12-7。 1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ5.15-5.20(m,1H),2.90(s,1H),2.85(s,1H),2.50-2.75(m,4H),1.75-1.90(m,4H).
步骤7:化合物12和13的合成
氮气保护下，将化合物12-7(80mg,429.52μmol)，化合物6-3(113.94mg,429.52μmol)和DBU(98.08mg,644.29μmol,97.11μL)的乙腈(3mL)溶液加热至66℃搅拌6小时。反应完毕后，浓缩反应物，残余物经制备HPLC分离(分离柱型号:Welch×timate C18 150*30mm*5μm；流动相:[水(0.225％甲酸)-乙腈]；B(乙腈)％:40％-50％,8min)得消旋体。该消旋体采用手性拆分(手性柱型号:DAICEL CHIRALPAK AD(250mm*30mm,10μm)；流动相：A:CO 2，B:0.1％氨水乙醇，乙醇(0.1％氨水)与超临界流体CO 2从50％到50％,流速4mL/min)，拆分后得到化合物12和化合物13，(分析方法：柱型Chiralpak AD-350×4.6mm I.D.,3μm；流动相：A:CO 2，B:乙醇(0.05％二乙胺)；梯度：在2分钟内B相从5％到40％，然后保持40％持续1.2分钟，最后5％持续0.8分钟；流速4mL/min；柱温35℃)。保留时间分别为2.282min，2.566min。化合物12的 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ8.88(s,1H),8.84(s,1H),8.46(s,1H),8.13(d,J＝2.4Hz,1H),7.68(d,J＝2.0Hz,1H),7.28(d,J＝2.0Hz,1H),6.94(d,J＝2.0Hz,1H),4.00(s,3H),3.24(s,2H),2,70-2.90(m,3H),2.40-2.50(m,2H),1.40-2.00(m,8H).MS ESI计算值C 25H 25N 9[M+H] +452,实测值452。化合物13的 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ8.88(s,1H),8.84(s,1H),8.46(s,1H),8.13(d,J＝2.4Hz,1H),7.68(d,J＝2.4Hz,1H),7.28(d,J＝2.4Hz,1H),6.94(d,J＝2.4Hz,1H),4.00(s,3H),3.24(s,2H),2,70-2.90(m,3H),2.40-2.50(m,2H),1.40-2.00(m,8H).MS ESI计算值C 25H 25N 9[M+H] +452,实测值452.
实施例14和15
合成路线：
步骤1:化合物14-2的合成
化合物14-1(5g，22.14mmol)溶于四氢呋喃(80mL)中，0℃分批添加氢化钠(1.33g，33.21mmol，60％纯度)，在该温度下搅拌30min，然后0℃下逐滴加入碘甲烷(4.08g，28.78mmol，1.79mL)，20℃下反应2小时。加入饱和氯化铵水溶液(100mL)淬灭反应，100mL水稀释，用乙酸乙酯萃取(100mL×2)，合并的有机层用盐水100mL洗涤，硫酸钠干燥，过滤减压浓缩，通过硅胶柱纯化(石油醚:乙酸乙酯＝10:1)，得到化合物14-2。 1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ6.29(s,1H),3.85(s,3H).
步骤2:化合物14-3的合成
-65℃下，向14-2(4.34g，18.09mmol)的四氢呋喃(80mL)溶液中滴加正丁基锂(2.5M，8.68mL)，加完后，在该温度下反应0.5小时，然后在-65℃下添加干冰(20g)，在-65℃下反应30分钟。加入1M盐酸水溶液淬灭反应混合物至pH＝4，然后用200mL水稀释，并用乙酸乙酯萃取(100mL×2)，合并的有机层用盐水100mL洗涤，硫酸钠干燥，通过硅胶柱纯化(石油醚:乙酸乙酯＝10:1至1:1)，得到化合物14-3。 1HNMR(400MHz,CDCl 3)δ10.61(brs,1H),6.96(s,1H),4.19(s,3H).
步骤3:化合物14-4的合成
化合物14-3(2.47g，12.05mmol)溶于叔丁醇(40mL)中，添加叠氮膦酸二苯酯(3.98g，14.46mmol，3.13mL)和二异丙基乙基胺(3.11g，24.10mmol，4.20mL)，在45℃搅拌0.5小时，然后加热100℃反应16小时。反应混合物用200mL水稀释，并用200mL乙酸乙酯萃取，合并的有机层用饱和碳酸氢钠水溶液(100mL×2)和盐水100mL洗涤，硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩，通过硅胶柱纯化(石油醚:乙酸乙酯＝30:1至10:1)，得到化合物14-4。 1HNMR(400MHz,CDCl 3)δ6.55(brs,1H),6.18(s,1H),3.71(s,3H),1.50(s,9H).步骤4:化合物14-5的合成
14-4(2.5g，9.05mmol)溶于二氯甲烷(40mL)中，加4-二甲氨基吡啶(221.22mg，1.81mmol)，二碳酸二叔丁酯(3.95g，18.11mmol，4.16mL)和三乙胺(2.75g，27.16mmol，3.78mL)，20℃反应16小时。反应混合物用200mL水稀释，用二氯甲烷(100mL×2)萃取，合并的有机层用盐水100mL洗涤，硫酸钠干燥，过滤减压浓缩，通过硅胶柱(石油醚/乙酸乙酯＝1/0至10/1)纯化，得到化合物14-5。 1HNMR(400MHz,CDCl 3)δ6.14(s,1H),3.65(s,3H),1.45(s,18H).
步骤5:化合物14-6的合成
14-5(597.48mg，1.59mmol)，双联嚬哪醇硼酸酯(604.89mg，2.38mmol)，Xphos-Pd-G2(124.95mg，158.80μmol)和醋酸钾(389.62mg，3.97mmol)加入到二氧六环(15mL)中，氮气吹扫3次，氮气气氛下65℃搅拌4小时。然后冷却至20℃并加入Xphos-Pd-G2(124.95mg，158.80μmol)，磷酸钾(842.72mg，3.97mmol)，1-12(0.3g，794.01μmol)，水(2mL)，氮气氛围下90℃下反应3小时。反应混合物用80mL水稀释，并用乙酸乙酯(60mL×2)萃取，合并的有机层用60mL盐水洗涤，硫酸钠干燥，通过硅胶柱纯化(石油醚:乙酸乙酯＝10:1至1:1)，得到化合物14-6。MS ESI计算值C 33H 38N 10O 4[M+H] +639,实测值639.
步骤6:化合物14和15的合成
14-6(0.22g，308.96μmol)溶于二氯甲烷(5mL)中，加入三氟乙酸(13.51mmol，1mL)，20℃下搅拌3小时。减压浓缩反应物，通过高效液相色谱法纯化(柱型号：Shim-pack C18 150×25×10μm；流动相：[水(0.225％甲酸)-乙腈]；B(乙腈)％：23％-43％，9分钟)及手性拆分(手性柱型号：DAICELCHIRALPAK IG(250mm*30mm*10μm)；流动相：[0.1％氨水/甲醇]；B(甲醇)％：50％-50％，9.7；110分钟)，拆分后分别得到化合物14和15，(分析方法：柱型Chiralpak IG-3 50×4.6mm I.D.,3μm；流动相：A:CO 2，B:甲醇+乙腈(0.05％二乙胺)；梯度：B相60％甲醇+乙腈(0.05％二乙胺)；流速3mL/min；柱温35℃)。保留时间分别是2.453min和3.274min。化合物14： 1HNMR(400MHz,DMSO-d 6)δ8.73(s,2H),8.38(s,1H),8.21(d,J＝2.4Hz,1H),7.43(d,J＝1.6Hz,1H),6.01(s,1H),5.36(s,2H),3.61(s,3H),3.21-3.29(m,3H),2.90-3.05(m,2H),2.58-2.66(m,3H),2.51-2.55(m,1H),2.31-2.42(m,2H).MS ESI计算值C 23H 22N 10[M+H]+439,实测值439.化合物15： 1HNMR(400MHz,DMSO-d 6)δ8.73(s,2H),8.38(s,1H),8.21(d,J＝2.4Hz,1H),7.43(d,J＝1.6Hz,1H),6.01(s,1H),5.35(s,2H),3.61(s,3H),3.21-3.29(m,3H),2.90-3.04(m,2H),2.57-2.66(m,3H),2.53(s,1H),2.30-2.42(m,2H).MS ESI计算值C 23H 22N 10[M+H]+439,实测值439.
实施例16和17
合成路线：
步骤1:化合物16-2的合成
在0℃下，向三氟乙酸(61.60g，540.24mmol，40.00mL)中加入16-1(20g，63.41mmol)，0℃下反应2小时。将反应液倒入冰水(200mL)中，滤出所得白色沉淀物，然后用水(100mL)洗涤，得到化合物16-2。
步骤2:化合物16-3的合成
在0℃下，16-2(13.09g，60.81mmol)溶于二氯甲烷(80mL)中，添加3,5-二氯吡啶(6g，40.54mmol)，在15℃下搅拌16小时。析出白色固体并过滤，滤饼经真空干燥，得到化合物16-3。 1HNMR(400MHz,CD 3OD)δ8.93(d,J＝1.6Hz,2H),8.56(t,J＝1.6Hz,1H),6.87(s,2H),2.61(s,6H),2.24(s,3H).
步骤3:化合物16-4的合成
化合物16-3(10.56g，29.07mmol)溶于二甲基甲酰胺(120mL)中，添加碳酸银(8.02g，29.07mmol)和丙炔酸乙酯(2.85g，29.07mmol，2.85mL)，在30-40℃搅拌16小时。减压浓缩反应混合物，通过硅胶柱纯化(石油醚:乙酸乙酯＝50:1至0:1)，得到化合物16-4。 1HNMR(400MHz,CDCl 3)δ8.50(s,1H),7.23-7.27(m,2H),4.49(q,J＝7.2Hz,2H),1.46(t,J＝7.2Hz,3H).
步骤4:化合物16-5的合成
化合物16-4(2.05g，7.91mmol)加入到氢溴酸水溶液(45.82g，226.51mmol，30.75mL，40％纯度)，100℃下反应16小时。冷却至室温后，加入60mL水，沉淀析出并过滤，滤饼干燥后通过硅胶柱纯化(石油醚:乙酸乙酯＝20:1至0:1)，得到化合物16-5。 1HNMR(400MHz,CDCl 3)δ8.47(s,1H),7.98(d,J＝2.0Hz,1H),7.18(d,J＝1.6Hz,1H),6.69(d,J＝1.6Hz,1H).
步骤5:化合物16-6的合成
化合物16-5(0.1g，534.69μmol)，化合物1-6(207.17mg，588.15μmol)，磷酸钾(340.49mg，1.60mmol)，三叔丁基膦钯(27.33mg，53.47μmol)，加入到二氧六环(3mL)和水(0.8mL)中，用氮气置换3次，氮气氛围下30-40℃反应16小时。加入饱和氯化铵水溶液(3mL)淬灭反应，然后用水20mL稀释，乙酸乙酯(20mL×2)萃取，合并的有机层用20mL盐水洗涤，硫酸钠干燥，通过硅胶柱纯化(石油醚:乙酸乙酯＝10:1至2:1)，得到化合物16-6。 1HNMR(400MHz,CDCl 3)δ8.48(s,1H),7.99(d,J＝2.4Hz,1H),7.96(s,2H),7.17(d,J＝2.0Hz,1H),6.72(dd,J＝0.8,2.4Hz,1H),3.06-3.15(m,1H),3.02(s,3H),2.94(d,J＝14.0Hz,1H),2.71-2.81(m,2H),2.66(m,2H),2.44-2.52(m,2H).
步骤6:化合物16和17的合成
化合物16-6(0.15g，398.05μmol)，1-甲基-4-吡唑硼酸嚬哪醇酯(99.38mg，477.65μmol)，Xphos-Pd-G2(36.08mg，39.80μmol)，磷酸钾(253.47mg，1.19mmol)加入到二氧六环(4mL)和水(0.8mL)中，用氮气置换3次，氮气氛围下在100℃下搅拌16小时。反应混合物用60mL水稀释，乙酸乙酯(30mL×2)萃取，合并的有机层用30mL盐水洗涤，硫酸钠干燥，通过硅胶柱纯化(石油醚:乙酸乙酯＝5:1至0:1)，然后通过手性拆分(柱型号：DAICEL CHIRALPAK AD(250mm*30mm*10μm)；流动相：[0.1％氨水/乙醇]；B(乙醇)％：40％-40％，3.8分钟；60分钟)，拆分后得到化合物16和化合物17，(分析方法：柱型Chiralpak AD-350×4.6mm I.D.,3μm；流动相：A:CO 2，B:乙醇(0.05％二乙胺)；梯度：B相40％乙醇(0.05％二乙胺)；流速3mL/min；柱温35℃)。保留时间分别为2.270min，2.754min。化合物16的 1HNMR(400MHz,DMSO-d 6)δ8.91(s,1H),8.58(s,1H),8.31(s,1H),8.26(s,1H),8.07(s,1H),8.05(d,J＝2.4Hz,1H),7.75(d,J＝1.6Hz,1H),7.00(dd,J＝0.8,2.4Hz,1H),3.89(s,3H),3.26-3.31(m,3H),2.89-2.98(m,2H),2.51-2.67(m,4H),2.31-2.42(m,2H).MS ESI计算值C 24H 22N 8[M+H] +423,实测值423.化合物17的 1HNMR(400MHz,DMSO-d 6)δ8.91(s,1H),8.59(s,1H),8.31(s,1H),8.26(s,1H),8.07(s,1H),8.05(d,J＝2.0Hz,1H),7.75(s,1H),7.00(d,J＝1.6Hz,1H),3.89(s,3H),3.24-3.31(m,3H),2.84-3.01(m,2H),2.51-2.69(m,4H),2.29-2.43(m,2H).MS ESI计算值C 24H 22N 8[M+H] +423,实测值423.
实施例18和19
合成路线：
步骤1:化合物18-2的合成
将化合物18-1(2.0g,14.27mmol)加入到乙腈(20mL)中，加入N-碘琥珀酰亚胺(3.53g,15.70mmol)和三氟乙酸(488.18mg,4.28mmol,317.00μL)，80℃搅拌2小时。反应完毕后，反应液浓缩得到残渣，加入乙酸乙酯(100mL)稀释，盐水(100mL×3)荡洗，经无水硫酸钠干燥，过滤，滤液浓缩。所得粗品硅胶柱层析纯化(石油醚:乙酸乙酯＝1:0到50:1)得到化合物18-2。 1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ7.56(s,1H),4.19(s,3H),3.94(s,3H).
步骤2:化合物18-3的合成
将化合物18-2(2.0g,7.52mmol)，化合物双联嚬哪醇硼酸酯(3.82g,15.04mmol)，1,1-双(二苯基磷)二茂铁氯化钯(550.08mg,751.78μmol,)and乙酸钾(2.21g,22.55mmol)加入到二甲基亚砜(30mL)中，氮气保护下100℃搅拌1小时。反应完毕后，反应液加入乙酸乙酯(100mL)稀释，盐水(50mL×3)荡洗，经无水硫酸钠干燥，过滤，滤液浓缩。所得粗品硅胶柱层析纯化(石油醚:乙酸乙酯＝100:1到5:1)得到化合物18-3，MS ESI计算值C 12H 19BN 2O 4[M+H] +267,实测值267.
步骤3:化合物18-4的合成
将化合物18-3(704.29g,2.65mmol)，化合物1-12(0.50g,1.32mmol)，Xphos-Pd-G2(104.12mg,132.33μmol)和磷酸钾(842.71mg,3.97mmol)的混合物中加入二氧六环(8mL)和水(2mL)，氮气保护下100℃搅拌16小时。反应完毕后，反应液加入乙酸乙酯(50mL)稀释，盐水(50mL×3)荡洗，经无水硫酸钠干燥，过滤，滤液浓缩。所得粗品硅胶柱层析纯化(石油醚:乙酸乙酯＝4:1到1:3)得到化合物18-4，MS ESI计算值C 25H 23N 9O 2[M+H] +482,实测值482.
步骤4:化合物18-5的合成
将化合物18-4(0.4g,797.49mmol)的甲醇(10mL)溶液中滴加氢氧化锂(38.20g,1.59mmol)的水(0.5mL)溶液，20℃搅拌16小时。反应完毕后，反应液用0.5M的盐酸调节pH为3～4，浓缩得到残渣，加入二氯甲烷(10mL)和甲醇(1mL)稀释，过滤，滤液浓缩得到化合物18-5，MS ESI计算值C 24H 21N 9O 2[M+H] +468,实测值468.
步骤5:化合物18-6的合成
将化合物18-5(0.4g,658.85mmol)，叠氮磷酸二苯酯(271.97mg,998.27μmol，214.15μL)和N,N-二异丙基乙胺(127.73mg,998.27μmol，172.14μL)的叔丁醇(10mL)溶液，氮气保护下60℃搅拌0.5小时然后 100℃搅拌1.5小时。反应完毕后，反应液加入乙酸乙酯(10mL)稀释，饱和碳酸氢钠水溶液(10mL×3)荡洗，经无水硫酸钠干燥，过滤，滤液浓缩。所得粗品硅胶柱层析纯化(石油醚:乙酸乙酯＝3:1到1:3)得到化合物18-6，MS ESI计算值C 28H 30N 10O 2[M+H] +539，实测值539.
步骤6:化合物18-7的合成
将化合物18-6(0.3g,537.50mmol)加入到无水二氯甲烷(10mL)中，再加入三氟乙酸(4.62g,40.52mmol,3mL),30℃搅拌1小时。反应完毕后，反应液浓缩反应液加入乙酸乙酯(10mL)稀释，加入氨水(30％纯度,1mL)，浓缩得到残渣，prep-HPLC(柱型号:Waters Xbridge 150*25mm*5μm；流动相:[H 2O(10mM NH 4HCO 3)-ACN]；ACN％:18％-48％,9min)得到化合物18-7。MS ESI计算值C 23H 22N 10[M+H] +439，实测值439.
步骤7:化合物化合物18和19的合成
化合物18-7采用手性拆分(手性柱型号:DAICEL CHIRALPAK AD(250mm*30mm*10μm)；流动相:[0.1％NH 3H 2O IPA]；B(IPA)％:40％-40％,4.5min；70min，拆分后得到化合物18和化合物19，(分析方法：柱型Chiralpak AD-3 50×4.6mm I.D.,3μm；流动相：A:CO 2，B:异丙醇(0.05％二乙胺)；梯度：B相40％异丙醇(0.05％二乙胺)；流速3mL/min；柱温35℃)。保留时间分别为1.099min，1.422min。化合物18， 1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ8.87(s,1H),8.73(s,1H),8.34(s,1H),8.14(d,J＝2.4Hz,1H),7.85(s,1H),7.37(d,J＝1.8Hz,1H),6.04(s,2H),3.61(s,3H),3.32-3.35(m,2H),3.23-3.31(m,1H),2.93-3.03(m,2H),2.52-2.68(m,4H),2.30-2.41(m,2H).MS ESI计算值C 23H 22N 10[M+H] +439，实测值439。化合物19， 1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ8.87(s,1H),8.74(s,1H),8.34(s,1H),8.15(d,J＝2.4Hz,1H),7.85(s,1H),7.38(d,J＝1.8Hz,1H),6.05(s,2H),3.62(s,3H),3.36-3.34(m,2H),3.23-3.30(m,1H),2.93-3.04(m,2H),2.53-2.68(m,4H),2.30-2.43(m,2H).MS ESI计算值C 23H 22N 10[M+H] +439，实测值439.
实施例20和21
合成路线：
步骤1:化合物20-2的合成
化合物20-1(10g，44.27mmol)和3,4-二氢-2H-吡喃(14.90g，177.09mmol，16.19mL)中加入三氟乙酸(50.48mg，442.73μmol，32.78μL)，混合物在100℃搅拌16小时。用正庚烷60mL稀释反应，20℃下搅拌0.5小时，过滤，真空干燥，得到化合物20-2。 1HNMR(CDCl 3)δ6.36(s,1H),5.43(dd,J＝9.6,2.8Hz,1H),3.96-4.13(m,1H),3.67(td,J＝11.2,2.8Hz,1H),2.35-2.47(m,1H),2.07-2.18(m,1H),1.85-1.97(m,1H),1.56-1.75(m,3H).
步骤2:化合物20-3的合成
化合物20-2(5.68g，18.32mmol)溶于四氢呋喃(100mL)中，-65℃滴加正丁基锂(2.5M，8.80mL)，加完后，该温度下搅拌0.5小时，然后在-65℃下添加干冰(20g)，搅拌30分钟。加入1M盐酸水溶液淬灭反应，调至pH＝4，然后用200mL水稀释，用乙酸乙酯(100mL×2)萃取，合并的有机层用盐水100mL(100mL×1)洗涤，硫酸钠干燥，通过硅胶柱(石油醚:乙酸乙酯＝10:1至1:1)纯化，得到化合物20-3。 1HNMR(DMSO-d 6)δ13.84(brs,1H),6.99(s,1H),6.16(dd,J＝10.0,2.4Hz,1H),3.84-3.97(m,1H),3.50-3.57(m,1H),2.10-2.27(m,1H),1.95(m,1H),1.80-1.91(m,1H),1.56-1.72(m,1H),1.46-1.56(m,2H).
步骤3:化合物20-4的合成
化合物20-3(3.4g，12.36mmol)溶于叔丁醇(40mL)中，加入叠氮膦酸二苯酯(6.80g，24.72mmol，5.36mL)和三乙胺(3.19g，24.72mmol，4.31mL)，在45℃搅拌0.5hr，然后加热至100℃反应16小时。将反应混合物用200mL水稀释，并用乙酸乙酯(100mL×2)萃取，合并的有机层用饱和碳酸氢钠水溶液(100mL×2)和盐水100mL洗涤，硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩，通过硅胶柱(石油醚:乙酸乙酯＝30:1至10:1)纯化，得到化合物20-4。 1HNMR(CDCl 3)δ7.41(brs,1H),6.39(s,1H),5.37(dd,J＝8.0,2.8Hz,1H),3.92(dt,J＝11.2,3.6Hz,1H),3.69(dt,J＝12.0,6.0Hz,1H),2.15-2.35(m,1H),2.04-2.09(m,1H),1.59-1.67(m,4H),1.52(s,9H).
步骤4:化合物20-5的合成
化合物20-4(5.78g，9.18mmol)溶于二氯甲烷(40mL)中，加入4-二甲氨基吡啶(224.35mg，1.84mmol)，二碳酸二叔丁酯(4.01g，18.36mmol，4.22mL)和三乙胺(2.79g，27.55mmol，3.83mL)。将混合物在20℃搅拌16小时。将反应混合物用200mL水稀释，并用二氯甲烷(100mL×2)萃取，合并的有机层用盐水100mL洗涤，硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩，通过硅胶柱(石油醚:乙酸乙酯＝1:0至10:1)纯化，得到化合物20-5。 1HNMR(CDCl 3)δ6.16(s,1H),5.12(dd,J＝9.6,2.8Hz,1H),3.93-4.01(m,1H),3.55(td,J＝11.2,2.4Hz,1H),2.29-2.43(m,1H),2.05-2.15(m,1H),1.76-1.91(m,1H),1.53-1.70(m,3H),1.41(s,18H).
步骤5:化合物20-6和21-6的合成
化合物20-5(472.53mg，1.06mmol)，双联嚬哪醇硼酸酯(403.26mg，1.59mmol)，Xphos-Pd-G2(83.30mg，105.87μmol)和醋酸钾(259.75mg，2.65mmol)加入到二氧六环(10mL)中，氮气氛围下于65℃搅拌3小时，然后冷却至20℃。加入Xphos-Pd-G2(83.30mg，105.87μmol)，磷酸钾(561.81mg，2.65mmol)，1-12(0.2g，529.34μmol)和水(2mL)，氮气氛围下90℃搅拌16小时。反应液加入80mL水，用乙酸乙酯(60mL×2)萃取，合并的有机层用盐水(60mL×1)洗涤，硫酸钠干燥，通过硅胶柱(石油醚:乙酸乙酯＝5:1至1:1)和高效液相色谱法纯化(柱型号：Phenomenex Luna C18 150×25mm×10μm；流动相：[水(0.225％甲酸)-乙腈]；乙腈％：56％-86％，11分钟)纯化，然后通过SFC(柱型号：DAICEL CHIRALPAKIE(250mm×30mm，10μm)；流动相：[0.1％氨水/乙醇]；[0.1％氨水/乙醇]％：50％-50％，11.0分钟；77分钟)，得到化合物20-6和21-6，(分析方法：柱型Chiralpak ID-3 100×4.6mm I.D.,3μm；流动相：A:正庚烷(0.05％二乙胺)，B:乙醇(0.05％二乙胺)；梯度：B相40％；流速1mL/min；柱温35℃)。保留时间分别为4.703min和6.547min。化合物20-6的MS ESI计算值C 37H 44N 10O 5[M+H] +709,实测值709.化合物21-6的MS ESI计算值C 37H 44N 10O 5[M+H] +709,实测值709.
步骤6:化合物20的合成
化合物20-6(60mg，84.65μmol)溶于二氯甲烷(1mL)中，加入三氟乙酸(1.54g，13.51mmol，1mL)，在25℃搅拌0.5小时。减压浓缩反应混合物，通过高效液相色谱法纯化(柱型号：Waters Xbridge150×25mm×5μm；流动相：[0.01％碳酸氢铵水溶液-乙腈]；乙腈％：11％-41％，10分钟)，得到化合物20。 1HNMR(DMSO-d 6)δ12.15(s,1H),9.08(s,1H),8.99(s,1H),8.62(s,1H),8.24(d,J＝2.4Hz,1.2H),7.50(s,1H),6.14(s,1H),4.69(s,2H),3.23-3.33(m,3H),2.88-3.04(m,2H),2.58-2.70(m,3H),2.52-2.56(m,1H),2.29-2.43(m,2H).MS ESI计算值C 22H 20N 10[M+H] +425,实测值425.
步骤7:化合物21合成
化合物21-6(70mg，98.76μmol)溶于二氯甲烷(1mL)中，加入三氟乙酸(1.54g，13.51mmol，1mL)，在25℃下搅拌0.5小时。减压浓缩反应混合物，通过高效液相色谱法纯化(柱：Waters Xbridge 150×25mm×5μm；流动相：[0.01％碳酸氢铵水溶液-乙腈]；乙腈％：11％-41％，10分钟)，得到化合物21。 1HNMR(DMSO-d 6)δ:12.10(brs,1H),8.86-9.17(m,2H),8.59(s,1H),8.24(d,J＝2.4Hz,2H),7.50(d,J＝1.6Hz,1H),6.12(s,1H),4.58-4.99(m,2H),3.25-3.34(m,3H),2.97(td,J＝14.6,1.6Hz,2H),2.58-2.69(m,3H),2.52-2.56(m,1H),2.30-2.43(m,2H).MS ESI计算值C 22H 20N 10[M+H] +425,实测值425.
生物活性测试
实验例1：Jak1,Jak2,Jak3,Tyk2激酶体外活性测试
实验材料
重组人源JAK1、JAK2、JAK3、Tyk2蛋白酶、主要仪器及试剂均由英国的Eurofins公司提供
实验方法
JAK2,JAK3和TYK2稀释：20mM 3-(N-吗啉)丙磺酸(MOPS),1mM EDTA,0.01％Brij-35.5％甘油,0.1％β-巯基乙醇,1mg/mL BSA；JAK1稀释：20mM TRIS,0.2mM EDTA,0.1％β-巯基乙醇,0.01％Brij-35.5％甘油。将所有化合物制备成100％的DMSO溶液并达到最终测定浓度50倍。测试化合物进行3倍浓度梯度稀释，终浓度为10μM到0.001μM共9个浓度，DMSO在检测反应中的含量为2％。将该化合物的工作储备液作为反应的第一组分添加到测定孔中，然后按照下面测定详述的方案加入其余组分。
JAK1(h)酶反应
JAK1(h)与20mM Tris/HCl pH7.5,0.2mM EDTA，500μM MGEEPLYWSFPAKKK，10mM乙酸镁和[γ- 33P]-ATP(根据需要制定活性和浓度)一起孵育。添加Mg/ATP混合物开始反应，在室温下孵育40分钟后，加入0.5％浓度的磷酸终止反应。然后将10μL反应物点在P30滤垫上并于4分钟内用0.425％磷酸洗涤三次和甲醇洗涤一次，干燥、闪烁计数。
JAK2(h)酶反应
JAK2(h)与8mM MOPS pH 7.0，0.2mM EDTA,100μM KTFCGTPEYLAPEVRREPRILSEEEQEMFRDFDYIADWC,10mM乙酸镁和[γ- 33P]-ATP(根据需要制定活性和浓度)一起孵育。添加Mg/ATP混合物开始反应，在室温下孵育40分钟后，加入0.5％浓度的磷酸终止反应。然后将10μL反应物点在P30滤垫上并于4分钟内用0.425％磷酸洗涤三次和甲醇洗涤一次，干燥、闪烁计数。
JAK3(h)酶反应
JAK3(h)与8mM MOPS pH 7.0,0.2mM EDTA,500μM GGEEEEYFELVKKKK,10mM乙酸镁和[γ- 33P]-ATP(根据需要制定活性和浓度)一起孵育。添加Mg/ATP混合物开始反应，在室温下孵育40分钟后，加入0.5％浓度的磷酸终止反应。然后将10μL反应物点在P30滤垫上并于4分钟内用0.425％磷酸洗涤三次和甲醇洗涤一次，干燥、闪烁计数。
TYK2(h)酶反应
TYK2(h)与8mM MOPS pH 7.0,0.2mM EDTA,250μM GGMEDIYFEFMGGKKK,10mM乙酸镁和[γ- 33P]-ATP(根据需要制定活性和浓度)一起孵育。添加Mg/ATP混合物开始反应，在室温下孵育40分钟后，加入0.5％浓度的磷酸终止反应。然后将10μL反应物点在P30滤垫上并于4分钟内用0.425％磷酸洗涤三次和甲醇洗涤一次，干燥、闪烁计数。
数据分析
IC 50结果由IDBS公司的XLFIT5(205公式)进行分析得到，具体见表7。
表7.本发明化合物体外筛选试验结果
结论：本发明的化合物在激酶4个亚型JAK1、JAK2、JAK3和TYK2的体外活性测试中展现了对TYK2和/或JAK1和/或JAK2的良好的选择性抑制。
实验例2：药代动力学(PK)试验
将试验化合物溶解后得到的澄清溶液分别经尾静脉注射和灌胃给予雄性小鼠(balb/c)。给予受试化合物后，静脉注射组(1mg/kg)在0.083,0.25,0.5,1,2,4,8和24小时，灌胃组(3mg/kg)在0.25,0.5,1,2,4,6,8 和24小时，分别从下颌静脉采血并离心后获得血浆。采用LC-MS/MS法测定血药浓度，使用WinNonlin TMVersion 6.3药动学软件，以非房室模型线性对数梯形法计算相关药代动力学参数。测试结果如表8：
表8化合物1在小鼠中的PK测试结果
PK参数 结果
Cl(mL/Kg/min) 15.6
Vd(L/kg) 1.59
T 1/2(hr) 2.39
C max(nM) 3040
AUC 0-inf(nM.hr) 7673
Bioavailability(％) a 88.7
注：T 1/2：半衰期；C max：达峰浓度；Cl：清除率；Vd：分布容积；AUC 0-inf：从0时间到外推至无穷大时的血浆浓度-时间曲线下面积；Bioavailability：生物利用度。
结论：本发明的化合物在小鼠中都有良好的口服生物利用度，较高的暴露量，有利于产生良好的体内药效。
实验例3：小鼠体内银屑病模型药效试验
目的：本实验目的是通过小鼠耳廓皮内注射IL-23诱发银屑病样皮损模型，评价受试物对IL-23诱导的小鼠银屑病样皮损的防治作用。
方法：实验动物适应期过后，将50只小鼠根据Excel完全随机分组法分成5组，每组10只，分别为：溶媒(0.5％MC&0.5％Tween 80)对照组、造模组、化合物1(10、20、50mg/kg)组。除溶媒对照组外，其余各组动物右耳连续8天(D1～D8)皮内注射IL-23(3μg/10μL/mouse/day,QD)，Control组动物右耳连续8天(D1～D8)皮内注射等体积的生理盐水溶液(10μL/mouse/day,QD)。造模同时口服给予溶媒、受试药物，一天两次(Bid)，间隔时间为6h，连续8天(D1～D8)。给药期间，每两天监测一次动物体重。在D1、D3、D5、D7(均为IL-23注射前)、D9对小鼠右耳进行厚度测量和耳廓外观观察评分。实验结束时(Day10)，摘取其造模侧耳朵，用8mm打孔器沿耳廓边缘打一耳片并称其重量，打下的右耳片用福尔马林固定后，进行组织病理学检查(H&E)染色。
实验结果见表9-12。
表9.每天2次连续8天经口灌胃给予受试物对IL-23诱导小鼠耳廓表皮异常增生模型小鼠体重的影响
表10.每天2次连续8天经口灌胃给予受试物对IL-23诱导小鼠耳廓表皮异常增生模型小鼠耳厚度的影响
##P<0.01vs.Control
*P<0.05,**P<0.01vs.Model
表11.受试物对IL-23诱导小鼠耳廓表皮异常增生模型小鼠耳朵重量的影响
##P<0.01vs.Control
**P<0.01vs.Model
表12.每天2次连续8天经口灌胃给予受试物对IL-23诱导小鼠耳廓表皮异常增生总评分的影响
##P<0.01vs.Control
**P<0.01vs.Model
注：IL-23：白细胞介素-23。
结论：
①.在IL-23诱导C57BL/6小鼠耳廓表皮异常增生模型中，每天2次连续8天经口灌胃给予本发明化合物(10、20、50mg/kg)对IL-23诱导C57BL/6小鼠耳廓表皮异常增生模型的动物体重无明显影响。
②.对动物造模侧耳厚度的影响：10、20mg/kg的化合物1可使小鼠造模侧耳厚度从第5天开始显著降低，本发明化合物在50mg/kg剂量下动物造模侧耳厚度从D3开始即可显著降低，且3个剂量组呈现出良好的量-效关系。表明本发明化合物(10、20、50mg/kg)各组别均能不同程度的抑制小鼠造模侧耳厚度增加。
③.对动物造模侧耳朵重量的影响：本发明化合物(10、20、50mg/kg)每天2次连续8天经口灌胃给药均可显著降低动物造模侧耳朵重量，且3个剂量组对降低动物造模侧耳朵重量作用均呈现出良好的量-效关系。
④.对动物造模侧耳朵总评分的影响：本发明化合物(10、20、50mg/kg)每天2次连续8天经口灌胃给药均可使小鼠患耳的总评分在D5～D9显著降低，表现出良好的药效，且呈现出良好的量-效关系。

Claims (19)

  1. 式(IV)所示化合物或其药学上可接受的盐，
    其中，
    R A选自H，且R B选自
    或者，R A和R B以及它们共同相连的碳原子形成
    环A选自C 5-8环烷基；
    环B选自C 5-10环烷基或5-10元杂环烷基；
    R 1选自H、C 1-3烷基-SO 2-、CN和-CH 2CN，所述C 1-3烷基任选被1、2或3个卤素取代；
    R 2选自H和C 1-3烷基，所述C 1-3烷基任选被1、2或3个卤素取代；
    R 3选自H、NH 2、卤素、OH、CN和C 1-3烷基，所述C 1-3烷基任选被1、2或3个卤素取代；
    T 2选自CH和N。
  2. 根据权利要求1所述式(IV)所示化合物或其药学上可接受的盐，其中，环A选自
  3. 根据权利要求1所述式(IV)所示化合物或其药学上可接受的盐，其中，环B选自
    L 1选自-(CH 2) m-，所述-(CH 2) m-任选被1、2或3个卤素取代；
    L 2选自-(CH 2) n-，所述-(CH 2) n-任选被1、2或3个卤素取代；
    m和n分别独立地选自1、2和3；
    T 1选自CH和N。
  4. 根据权利要求1-3任意一项所述式(IV)所示化合物或其药学上可接受的盐，其化合物选自式(IV-1)和(IV-2)所示的结构，
    其中，R 1、R 2、R 3、T 2、环A和环B如权利要求1-3任意一项所定义。
  5. 根据权利要求1所述式(IV)所示化合物或其药学上可接受的盐，其化合物选自式(I)所示的结构，
    其中，
    R 1选自H、C 1-3烷基-SO 2-、CN和-CH 2CN，所述C 1-3烷基任选被1、2或3个卤素取代；
    R 2选自H和C 1-3烷基，所述C 1-3烷基任选被1、2或3个卤素取代；
    R 3选自H、NH 2、卤素、OH、CN和C 1-3烷基，所述C 1-3烷基任选被1、2或3个卤素取代；
    L 1选自-(CH 2) m-，所述-(CH 2) m-任选被1、2或3个卤素取代；
    L 2选自-(CH 2) n-，所述-(CH 2) n-任选被1、2或3个卤素取代；
    m和n分别独立地选自1、2和3；
    T 1选自CH和N；
    T 2选自CH和N。
  6. 根据权利要求5所述化合物或其药学上可接受的盐，其中，R 1选自H、C 1-3烷基-SO 2-、CN和-CH 2CN，所述C 1-3烷基任选被1、2或3个F取代。
  7. 根据权利要求6所述化合物或其药学上可接受的盐，其中，R 1选自H、CF 3SO 2-、CN和-CH 2CN。
  8. 根据权利要求5所述化合物或其药学上可接受的盐，其中，R 2选自H和CH 3。
  9. 根据权利要求5所述化合物或其药学上可接受的盐，其中，R 3选自H和NH 2。
  10. 根据权利要求5所述化合物或其药学上可接受的盐，其中，L 1选自-CH 2-和-CH 2CH 2-，所述-CH 2-和-CH 2CH 2-任选被1、2或3个F取代。
  11. 根据权利要求10所述化合物或其药学上可接受的盐，其中，L 1选自-CH 2-和-CH 2CH 2-。
  12. 根据权利要求5所述化合物或其药学上可接受的盐，其中，L 2选自-CH 2-和-CH 2CH 2-，所述-CH 2-和-CH 2CH 2-任选被1、2或3个F取代。
  13. 根据权利要求12所述化合物或其药学上可接受的盐，其中，L 2选自-CH 2-和-CH 2CH 2-。
  14. 根据权利要求5所述化合物或其药学上可接受的盐，其中，结构片段 选自吖啶基、环丁基、四氢吡咯基、哌啶基和环己基。
  15. 根据权利要求14所述化合物或其药学上可接受的盐，其中，结构片段 选自
  16. 根据权利要求5-15任意一项所述化合物或其药学上可接受的盐，其化合物选自式(I-1)和(I-2)所述的结构，
    其中，R 1、R 2、R 3、T 1、T 2、m和n如权利要求5-15任意一项所定义。
  17. 下式化合物或其药学上可接受的盐：
  18. 根据权利要求17所述化合物或其药学上可接受的盐，其化合物选自：
  19. 权利要求1-18任意一项所述的化合物或其药学上可接受的盐在制备治疗银屑病和/或炎性肠病的药物中的应用。
CN202280075557.4A 2021-11-12 2022-11-09 吡唑并环化合物及其应用 Pending CN118317960A (zh)

Applications Claiming Priority (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN2021113427908 2021-11-12
CN202111342790 2021-11-12
CN202211358879 2022-11-01
CN2022113588798 2022-11-01
PCT/CN2022/130770 WO2023083200A1 (zh) 2021-11-12 2022-11-09 吡唑并环化合物及其应用

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN118317960A true CN118317960A (zh) 2024-07-09

Family

ID=86335096

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202280075557.4A Pending CN118317960A (zh) 2021-11-12 2022-11-09 吡唑并环化合物及其应用

Country Status (7)

Country Link
KR (1) KR20240103022A (zh)
CN (1) CN118317960A (zh)
AU (1) AU2022387652A1 (zh)
CA (1) CA3237632A1 (zh)
IL (1) IL312782A (zh)
TW (1) TWI839945B (zh)
WO (1) WO2023083200A1 (zh)

Family Cites Families (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20130094710A (ko) * 2010-04-14 2013-08-26 어레이 바이오파마 인크. Ｊａｋ 키나아제의 억제제로서 5,7-치환된-이미다조［1,2-ｃ］피리미딘
JP6641373B2 (ja) * 2014-12-05 2020-02-05 アレイ バイオファーマ、インコーポレイテッド ヤヌスキナーゼ阻害薬としての４，６−置換−ピラゾロ［１，５−ａ］ピラジン
KR102128671B1 (ko) * 2016-02-24 2020-06-30 화이자 인코포레이티드 피라졸로[1,5-a]피라진-4-일 유도체
CN111320633B (zh) * 2018-12-14 2022-09-27 中国医药研究开发中心有限公司 吡咯/咪唑并六元杂芳环类化合物及其制备方法和医药用途
AU2020256720B2 (en) * 2019-04-12 2022-09-01 PrimeGene (Beijing) Co. Ltd. Pyrazolopyrazine derived compounds, pharmaceutical composition and use thereof
CN110028509B (zh) * 2019-05-27 2020-10-09 上海勋和医药科技有限公司 作为选择性jak2抑制剂的吡咯并嘧啶类化合物、其合成方法及用途

Also Published As

Publication number Publication date
IL312782A (en) 2024-07-01
KR20240103022A (ko) 2024-07-03
AU2022387652A1 (en) 2024-06-20
CA3237632A1 (en) 2023-05-19
TWI839945B (zh) 2024-04-21
WO2023083200A1 (zh) 2023-05-19
TW202330534A (zh) 2023-08-01

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US20110195951A1 (en) Diazaindole derivatives and their use in the inhibition of c-jun n-terminal kinase
ES2461967T3 (es) Compuestos de pirrolo[2,3-d]pirimidina
JP2024050527A (ja) Ｎｌｒｐ３を阻害するためのピリダジン化合物
JP2022518591A (ja) 複素環式化合物であるベンゾピリドンおよびその使用
KR102069730B1 (ko) 단백질 키나아제 저해제인 신규 2,3,5-치환된 싸이오펜 화합물
AU2020288567B2 (en) Pyrrolopyrimidine compound and use thereof
JP2022529209A (ja) Ｒｅｔ阻害剤としてのピラゾロピリジン系化合物及びその使用
IL281296B1 (en) A tricyclic compound that acts on the CRBN protein
WO2022135432A1 (zh) 作为egfr抑制剂的大环杂环类化合物及其应用
US20240217953A1 (en) Bicyclic substituted aromatic carboxylic acid compounds
JP7481336B2 (ja) Ｗｅｅ１阻害剤としてのピリミドピラゾロン類誘導体及びその使用
CA3114646C (en) Quinolino-pyrrolidin-2-one derivatives and application thereof
JP2023522725A (ja) ３－アザビシクロアルキル誘導体およびこれを含む薬剤学的組成物
JP2021534259A (ja) ＪＡＫ阻害剤としての［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ａ］ピリジン化合物およびその使用
AU2020390378A1 (en) Tri-heterocyclic compound as JAK inhibitor, and use thereof
JP2023522863A (ja) Ｅｇｆｒ阻害剤としての三環式化合物
JP2023505288A (ja) Ｅｒｋ阻害剤としてのチアゾロラクタム系化合物およびその使用
TW202317097A (zh) 戊二醯亞胺類化合物與其應用
CN118076586A (zh) Kif18a抑制剂
CN116425770A (zh) 作为Cdc7抑制剂的四并环类化合物
JP2023513599A (ja) Ｊａｋキナーゼ関連疾患の治療のための薬物の調製におけるｊａｋ阻害剤の使用
CN118317960A (zh) 吡唑并环化合物及其应用
JP7296017B2 (ja) ベンゾスルタムを含む化合物
CA3209693A1 (en) Substituted pyridine-2,4-dione derivatives
CN115724857A (zh) 一种芳杂环类化合物、含其的药物组合物及其应用

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination