CN1182740A - 从西藏红豆杉提取紫杉醇的方法 - Google Patents
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Abstract
一种从西藏红豆杉提取紫杉醇的方法,特别是提取紫杉醇粗产品的方法,它包括:原料粉碎、渗浸、减压浓缩、提取,其中,经减压浓缩得到的深绿色浸膏经水稀释后,以石灰水调pH值7.5—8.0,沉淀过滤,滤液以溶剂提取,减压浓缩干燥得到含紫杉醇干膏(粗品)。本方法以简单沉淀去除杂质80%,而紫杉醇及相关成分不受影响,提高过柱前被分离成分的含量和过柱质量,减少过柱次数,粗产品中紫杉醇含量高。
Description
本发明涉及一种从西藏红豆杉叶或枝叶中提取紫杉醇的方法,特别是一种从西藏红豆杉叶或枝叶中提取紫杉醇粗产品的方法。
紫杉醇是目前世界上发现的最有效的抗癌物质之一。国外人工合成紫杉醇的价格是从天然提取的数百倍,目前国内外主要是从红豆杉属植物中提取及组织培养来获得紫杉醇。在天然提取的方法中,关键是提取分离方法,但由于紫杉醇在植物中化学性质不稳定,在植物中含量低,因此较中草药成分的提取分离难度大。
据报道,我国主要有红豆杉属红豆杉4个种一个变种,它们是西藏红豆杉(Tasus wallichiann Zucc),云南红豆杉(T、yumaneusis cheng et L.k.Fu)红豆杉(T.chinensis(Pilger)(ehd),东北红豆杉(T.cuspidataSieh et zucc)和南方红豆杉(美丽红豆杉)(T.cbinensis var mairer(Lemee et levl)cheng et L.K.Fu)。
上述种属珍贵植物,为了不破坏成树,保护资源,一般都是从叶或枝叶中提取,但枝叶中紫杉醇含量比树皮低。
已有的从红豆杉茎叶中提取紫杉醇的方法是:粉碎,溶剂浸提,浸出液浓缩得深绿色膏状物,溶剂提取,硅胶柱层析后得粗产品。再经重结晶纯化和柱层析分离获紫杉醇。
上述方法中,在柱层分离时,至少要1-2个柱分离用梯度洗脱,梯度洗脱所用溶剂量较大,而样品被分离成分含量越低,分离也麻烦,在柱分离的每个流分均要用薄层层析监测成分后,待合并再分离。因此,有必要提高过柱前被分离成分含量,减少过柱次数,提高过柱质量。另外,用已有的提取方法所获得的紫杉醇总量较低。
本发明目的是提供一种从西藏红豆杉提取紫杉醇粗产品的方法,该方法工艺简单,操作方便,粗产品的得率高。
为达到上述目的,本发明采用以下技术方案,提取紫杉醇粗产品的方法包括:原料粉粹,渗浸,减压浓缩,提取,所述的减压浓缩得到的深绿色浸膏经水稀释后以石灰水调PH值到7.5-8.0,沉淀过滤后,滤液以溶剂提取,减压浓缩干燥得到含紫杉醇干膏。
上述稀释用水的量与浸膏量比为0.5-1.5∶1,最好控制在1∶1(体积比),所述的提取用溶剂可以是混合多氯代烷、氯仿。
以下结合流程框图和实施例对本发明作详细说明:
图1:本发明流程框图
图1中,以红豆杉的茎皮或叶为原料,原料经粉碎1得粗粉,粗粉经渗浸2,渗浸采用混合溶剂,可采用95%乙醇与氯仿的混合液,渗浸液经减压浓缩3得到深绿色浸膏,加水稀释后加石灰水调PH值到7.5-8.0,经沉淀过滤4,并洗涤沉淀至无色,以氯仿提取5,经减压浓缩、干燥6,得到含紫杉醇干膏。
实施例1:
取西藏红豆杉干叶5kg,粉碎,用95%乙醇与氯仿(85∶15)渗浸,渗浸液重量为样品重量的5倍,减压浓缩得深绿色浓渗液,加水约1倍量(体积/体积),加石灰水调PH值到7.5-8.0,待沉淀后,过滤,洗涤沉淀至无色,氯仿提取,减压浓缩、干燥,得100g浅黄绿色干膏,HPLC(高效液相色谱仪)测定含紫杉醇1.6%。含10-去乙酰巴卡丁III28%。
实施例2
取西藏红豆杉茎皮,采用实施例1的方法,制得紫杉醇干膏。HPLC测定紫杉醇含量3.3%。
实施例1与实施例2提取紫杉醇结果比较见表1
表1
叶 | 皮 | |
样 品 重 | 5000g | 5000g |
干 膏 重 | 100g | 80g |
干膏含紫杉醇 | 1.6% | 3.3% |
紫杉醇应得率 | 3.2/万 | 5.3/万 |
本发明优点:用简单的沉淀除杂质方法事先除去大部分杂质,提高过柱前被分离成分的含量,减少过柱次数,也不受过柱分离量的限制。经试验此步沉淀可除去约80%的杂质,而紫杉醇及相关成分如巴卡丁III(baccatin III)、10-去乙酰巴卡丁III(10-deacetly baccatin III)等不受影响,本工艺简单方便,而且紫杉醇粗品中的紫杉醇含量较其他方法高,例如:可达1.6%(以干叶原料),茎皮原料其紫杉醇含量3.3%。
Claims (4)
1、一种从西藏红豆杉提取紫杉醇的方法,它包括:原料粉碎、渗浸、减压浓缩提取,其特征在于由减压浓缩得到的深绿色浸膏经水稀释后以石灰水调PH值至7.5-8.0,沉淀、过滤,滤液以溶剂提取,减压浓缩干燥得到含紫杉醇干膏。
2、根据权利要求1所述的从西藏红豆杉提取紫杉醇的方法,其特征在于:所述深绿色浸膏以水稀释时,加水量∶浸膏量=0.5-1.5∶1(体积比)。
3、根据权利要求1所述的从西藏红豆杉提取紫杉醇的方法,其特征在于:以水稀释时,加水量∶浸膏量=1∶1。
4、根据权利要求1所述的从西藏红豆杉提取紫杉醇的方法,其特征在于:所述滤液的提取溶剂为氯仿。
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1996
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